Triterpenoid
Latar Belakang
Sejak dahulu ekstrak serutan bamboo memang sudah dikenal sebagai resep obat – obatan
tradisional secara turun – temurun. Beberapa peneliti dari Departemen Ilmu Pangan dan Gizi dari
Fakultas Teknik Biosistem dan Ilmu Pangan, Universitas Zhejiang, Hangzhou, Propinsi
Zhejiang, China, melakukan penelitian mengenai zat aktif yang terkandung dalam ekstrak
serutan bamboo, shingga dia dapat mengobati beberapa penyakit seperti mengurangi atau
mengobati sakit perut, diare, vomitin, peradangan diafragma dada, kegelisahan dan haus yang
berlebihan.
Para peneliti berhipotesis bahwa ekstrak serutan bamboo mengandung senyawa biologi
aktif yang berlimpah, seperti triterpenoid, saponin dan sterol. Triterpenoid dan saponin adalah
komponen-komponen biologis aktif yang penting didalam bahan alam. Triterpenoid dari
ekstrak serutan bambu Cina, terutama terdiri dari triterpenoid pentasiklik seperti friedelin,
friedelinol, lupenone dan lupenol.
filtrasi metode
Uji SRB
Uji SRB dari efek penghambatan oleh ekstrak serutan bambu dilakukan sesuai dengan program
oleh Xiao et al. (2001). Secara singkat, sel-sel patuh dalam 0,1 mL media massa yang berlapis di
setiap sumur dengan baik 96-piring dan diizinkan untuk melampirkan selama 24 jam EKSTRAK
SERUTAN BAMBU ditambahkan ke sumur untuk menghasilkan konsentrasi akhir yang
diinginkan dan piring dikultur pada 37 ° C selama 72 jam Sel kemudian diperbaiki dengan
penambahan lembut 100 mL dingin (4 ° C) asam trikloroasetat 10% untuk setiap sumur. Pelat
dicuci dengan air deionisasi lima kali dan dibiarkan udara kering. Sel kemudian ternoda oleh
penambahan 100 mL larutan BPRS [0,4% BPRS (b / v) dalam asam asetat 1% (v / v)] untuk
sumur selama 15 menit. Setelah pewarnaan, piring dicuci lima kali dengan cepat dengan asam
asetat 1% untuk menghilangkan zat pewarna dan dibiarkan terikat udara kering. Dye terikat
dilarutkan dengan 10 mmol / L Tris basa (pH 10.5) sebelum membaca piring. Kepadatan optik
(OD) dibaca pada pembaca piring pada panjang gelombang 515 nm dengan Perangkat Molekuler
(model # VERSAmax). Efek penghambatan pada sel-sel berbudaya HCPT dinyatakan sebagai
IC50. Akhirnya, IC50 rata-rata dihitung menurut data dari tiga tes meniru.
MTT assay
Saham solusi dari kompleks itu baru disiapkan di DMSO 10%
dan diencerkan dengan konsentrasi yang diperlukan dengan budaya bila digunakan.
Tumor sel ditumbuhkan dalam media RPMI 1640 dilengkapi dengan
10% baru dilemahkan serum janin anak sapi (FCS) dan antibiotik. para
sel dipanen dari fase eksponensial (2 × 105 per mL) adalah
ekuivalen unggulan ke piring 96-baik. Kemudian senyawa
yang diteliti ditambahkan dalam gradien konsentrasi dan final
konsentrasi yang dipertahankan pada 1000,, 100 10, 1 dan 0,1 mM,
masing-masing. Pelat disimpan pada suhu 37 ° C dalam dilembabkan
Suasana dari 5% CO2 dan dibudidayakan selama 48 jam; solusi kemudian MTT dari
konsentrasi yang tepat (1 mg / mL) ditambahkan ke setiap sumur
dan piring dikultur pada 37 ° C selama 4 jam Pengukuran
absorbansi dari solusi yang berhubungan dengan jumlah sel yang hidup
dilakukan pada spektrofotometer ELISA pada 570 nm (Zhou et al.,2001).
Efek pada tumor-bantalan tikus S180 model dengan EKSTRAK SERUTAN BAMBU
S180 sarkoma-load tikus dibunuh oleh dislokasi leher rahim
sebelum percobaan dan jenuh 8 - 10 menit pada
benzalkonium bromida solusi. Kemudian, blok beberapa tumor
terisolasi dalam kondisi asepsis operasional dan dibuat untuk menjadi
homogenat pencampuran dengan garam fisiologis menurut injeksi
dengan proporsi 1: 3 (3 ml air garam fisiologis untuk masing-masing tumor 1 g
blok). Setiap tikus percobaan disuntik dengan 0,2 ml
homogenat solusi dalam jaringan aksila endermic setelah sebagian desinfektan oleh yodium
etanol. Mereka dibagi menjadi beberapa
kelompok secara acak 24 jam kemudian dan diterima pemberian oral
terus menerus 10 hari (sekali untuk setiap hari) sebagai berikut: (i) kontrol,
pasokan air, 20 ml / kg (0,4 mL/20g), (ii) kontrol positif,
pasokan siklofosfamid, 30 mg / kg, ip, CTX, (iii) EKSTRAK SERUTAN BAMBU dosis tinggi,
1,6 g / kg, (iv) EKSTRAK SERUTAN BAMBU dosis menengah, 0,8 g / kg dan (v) EKSTRAK
SERUTAN BAMBU rendah
dosis, 0,4 g / kg. Tikus tewas hari berikutnya ketika menghentikan lisan
administrasi. Tubuh ditimbang dan tumor yang sesuai
blok diisolasi dan ditimbang untuk mouse masing-masing. Akhirnya, tumor
Tingkat penghambatan dihitung. Top of Form
A375, L929 dan HeLa sel dalam fase pertumbuhan logaritmik adalah
unggulan pada kepadatan sel sekitar 5 × 104 sel / mL pada 96-baik
pelat (100 ml / baik). Selain itu, THP-1 sel adalah unggulan pada sel
kepadatan sekitar 1 × 105 per mL karena itu lebih kecil
dari yang lain. Sampel ditambahkan dalam sel dihentikan setelah kultur
4 jam dan dalam sel patuh setelah 12 jam kultur Friedelin adalah
dilarutkan dalam DMSO di muka dan kemudian di medium kultur dengan
pengobatan ultrasonik, di mana konsentrasi akhir dari pelarut
dalam medium kultur adalah <0,1% (v / v). Sampel ditambahkan untuk 7,5,
15, 30, 60, 120, 240, 480 dan 960 mmol / L. Setiap tingkat memiliki empat
paralel pori-pori dan kontrol negatif. Sel-sel dikultur selama 24
dan 48 jam dan kemudian 15 ml / sumur MTT pelarut (5 mg / mL) ditambahkan.
Top of Form
HASIL
Identifikasi triterpenoid di EKSTRAK SERUTAN BAMBU
Beberapa pentasiklik triterpenoid, seperti friedelin, friedelinol,
lupenone dan lupenol, diidentifikasi dengan GC-MS
dan struktur kimia dari triterpenoid yang
ditunjukkan pada Gambar 1. Diantara senyawa-senyawa ini, friedelin
bisa dianggap sebagai perwakilan di EKSTRAK SERUTAN BAMBU triterpenoid
karena friedelin ditentukan sebagai yang dominan
senyawa dalam fraksi aktif. Gambar 2 menunjukkan GC
kuat efek EKSTRAK SERUTAN BAMBU (mg / mL) 1 0,25 0,063 0,016 0,004 90,7 98,2 90,4
57,7 0 Sebuah metode MTT sedikit efek mengurangi. Pengaruh waktu: 48 jam Tabel 2. Efek
penghambatan pada pertumbuhan sel adenokarsinoma paru-paru A549 manusia dengan
EKSTRAK SERUTAN BAMBU *. Inhibisi sampel rate (%) Efek Vincristin (mol / L) 10-4 10-5
10-6 10-7 10-8 71,3 71,6 66,5 44,3 9,6 Lemah efek EKSTRAK SERUTAN BAMBU (mg / mL)
1 0,25 0,063 0,016 0,004 70,2 90,6 24,8 0 0 Sebuah sedikit efek BPRS protein metode
pewarnaan. Pengaruh waktu: 72 h. MS kromatogram menggambarkan profil kimia EKSTRAK
SERUTAN BAMBU.
penghambatan tingkat P388 adalah 57,7% dengan tingkat EKSTRAK SERUTAN BAMBU dari
0,016 mg / mL sedangkan tingkat penghambatan A549 adalah 24,8%
dengan tingkat EKSTRAK SERUTAN BAMBU dari 0,063 mg / mL. bukti lebih lanjut
menyarankan bahwa EKSTRAK SERUTAN BAMBU telah menunjukkan efek penghambatan
pada P388
dan baris sel A549 dan memiliki aktivitas anti-tumor.
Halaman 6
waktu adalah 48 jam, yang menunjukkan bahwa friedelin ditampilkanagak kuat aktivitas anti-
tumor.
PEMBAHASAN
Beberapa studi sebelumnya menunjukkan anti-primertumor kegiatan daun bambu (Seki et al,
2008;. Kim etal, 2007). atau ekstrak rumput bambu (Tsunoda et al.,1998; Nagasawa-san et al,
2000), yang memiliki sedikit penting.arti penting bagi penelitian kami. Misalnya, ekstrakdaun
bambu secara signifikan dapat menghambat pertumbuhan tumor padaS-180 dan C38 model
tumor dan secara signifikan berkepanjangankeseluruhan kelangsungan hidup tikus (Seki et al.,
2008). Asetonsebagian kecil dari daun bambu bisa ditingkatkan sel leukemia
diferensiasi (Kim et al., 2007). Ekstrak dari bambudaun rumput bisa menjadi agen yang
menjanjikan untukperlindungan dan terapi payudara dan jenis lainnyatumor (Tsunoda et al.,
1998). Data penelitian diPenelitian ini terutama menunjukkan aktivitas anti-tumorEKSTRAK
SERUTAN BAMBU. Oleh karena itu, dapat diterima bahwa mungkin adabeberapa anti-tumor
komponen yang secara luas didistribusikandi berbagai belahan bambu. Namun,masih belum
pastiapakahsenyawa aktifmengerahkananti-tumor kegiatanyangmirip satu samalain dalamdaun
bambu, bamburumput atauserutanbambu.
PentasikliktriterpenesdarispesiesChrysobalanceaememiliki efekpenghambatanpenting
padaP388garisleukemia sel(Fernandes etal., 2003). Hasil kamidalam penelitian ininyarankan-
gestedbahwaEKSTRAK SERUTAN BAMBUdiekstrakdari bambutelahbaikanti-efektumor.Di
satu sisi, tingkat penghambatanP388adalah57,7% dengan tingkatEKSTRAK SERUTAN
BAMBUdari0,016mg/mL. Oleh karena itu,itu efekpenghambatanterkenal. Disisi
lain,friedelinditampilkanmembandingkanlebihkuat denganyangpositifkontrol,de-metil-
Cantharidin. dibandingkan denganobat-obatankimia lainnya, EKSTRAK SERUTAN
BAMBUdanfriedelintelah
lebih rendahaktivitas anti-tumor, tetapi keamananEKSTRAK SERUTAN
BAMBUtelahdievaluasi, itu menegaskan bahwaEKSTRAK SERUTAN BAMBUadalah
keselamatandan tidak memilikiefek samping(Zhang et al, 2004.). Oleh karena itu,ekstrak
serutanbambumemilikipotensi besaruntuk dikembangkansebagai anti-tumor makanan
kesehatandan pengobatan alami. ada-kedepan, dapat disimpulkanbahwafriedelindapat dianggap
sebagai
salah satu faktoraktif yang palingpenting dalamEKSTRAK SERUTAN BAMBUmeskipunadalah
jaranguntuk melaporkanfungsifisiologisfriedelin. Tapi itumasih belum
diketahuiapakahterpenoidlainnyadiEKSTRAK SERUTAN BAMBUmemilikiefek anti-tumordan
sesuaimerekamekanisme.Secara keseluruhan,dapat diramalkan bahwaEKSTRAK SERUTAN
BAMBUmemilikipotensi besaruntuk diterapkandi bidangyang sesuai untuknyaaktivitas anti-
tumor.
REFERENSI