Hubungan Ekspresi VDR dengan stroma reaktif dan

grading histopatologi adenokarsinoma prostat

Jaringan prostat dipengaruhi oleh dua hormon steroid yaitu testosteron

dan vitamin D. Kerja dari hormon ini dimediasi oleh masing-masing reseptor
yaitu receptor androgen (AR) dan vitamin D receptor (VDR). Bentuk aktif
hormonal vitamin D adalah 1,25-dihydroxyvitamin D yang bekerja
menghambat pertumbuhan angiogenesis dan metastasis pada sel kanker.17
Vitamin D telah dikenal sebagai salah satu hormon dan diketahui memiliki
risiko lebih rendah pada beberapa jenis kanker, termasuk kanker prostat.
Transkripsi nuklir dari VDR berfungsi untuk mengatur faktor transkripsi dan
memperantarai kerja vitamin D dalam penandaan sintesis protein serta
terlibat dalam homeostasis mineral tulang dan regulasi siklus sel.
Kekurangan vitamin D secara umum merupakan faktor risiko
terjadinya kanker.20,21 Studi terbaru menunjukkan bahwa terjadi peningkatan
morbiditas dan mortalitas di dunia akibat kekurangan vitamin D disebabkan
oleh kurang mendapatkan paparan sinar ultraviolet dan menurunnya
kemampuan tubuh untuk mensintesis vitamin D seiring bertambahnya
usia.22-24
Kunci utama keberhasilan penanganan kanker adalah ditemukannya
kanker pada stadium dini. Diagnosis pasti diperoleh dari hasil biopsi atau
spesimen operasi melalui pemeriksaan histopatologi. Pada adenokarsinoma
prostat, gleason score merupakan standar baku pengukuran untuk
menentukan staging dan prognosis.4,29
Suatu studi menunjukkan mekanisme korelasi negatif antara radiasi
ultraviolet dan kematian akibat kanker prostat menyangkut sifat anti tumor
vitamin D.30 Misalnya, vitamin D3 menghambat pertumbuhan sel kanker
secara in vitro dan in vivo,31,32 serta menghambat pertumbuhan kanker secara
xenografts pada manusia.33 Vitamin D3 menyebabkan sel kanker prostat pada
tikus secara in vitro berdiferensiasi sehingga phenotype dari sel ganas
menjadi sedikit, tetapi mungkin terkait dengan kemampuan vitamin D dalam
menghambat ekspresi onkogen myc.34 Ekspresi onkogen ini meningkat pada
tumor prostat manusia.
VDR merupakan mediator penting untuk efek seluler vitamin D. Peran
vitamin D pada berbagai penyakit dan jenis kanker telah banyak mendapat
perhatian, serta telah banyak diteliti dalam sejumlah penelitian. Studi
komparatif imunohistokimia pertama pada 27 sampel dari berbagai kategori
usia 10-19 tahun, 20-29 tahun, 30-39 tahun, 40-49 tahun, 50-59 tahun, 60-69
tahun, melihat pola ekspresi VDR pada prostat manusia, membandingkan
tingkat usia, zona prostat (zona perifer dan zona sentral), dan beberapa
potongan organ lain. Sampel berasal dari organ donor prostat manusia.
Hasilnya adalah: (1) ekspresi VDR paling rendah pada usia 10-19 tahun,
meningkat pada usia 20-59, dan menurun pada usia 60-69 tahun; (2)
distribusi VDR tidak merata pada prostat manusia dimana ekspresi lebih kuat
signifikan pada zona perifer yang kemungkinan bermanfaat untuk
terapeutik; (3) hubungan ekspresi VDR pada zona perifer dan zona sentral
dengan usia menunjukkan penurunan ekspresi VDR pada zona sentral pada
semua kelompok usia 0 ± 59 tahun. Pada usia 60 ± 69 tahun, ekspresi VDR
setara pada zona sentral dan zona perifer. Tes interaksi usia dan zona tidak
signifikan, oleh karena itu efek zona tidak dipengaruhi oleh usia; (4)
distribusi VDR sangat luas dan menunjukkan ekspresi yang beragam pada
berbagai organ. Pada kulit, kelenjar getah bening, testis, dan paratiroid
menunjukkan ekspresi positif kuat. Pada adrenal, ovarium dan lambung
menunjukkan ekspresi positif lemah.36
Studi terbaru mengenai ekspresi protein VDR pada 841 pasien kanker
prostat dimana sampel berasal dari reseksi transuretral pada jaringan
prostatektomi. Hasil pewarnaan imunohistokimia pada jaringan/tumor
prostat terekspresi pada sitoplasma/membran dan tidak terwarnai pada inti.
Pria yang menderita tumor ini dengan ekspresi VDR tinggi menunjukkan
penurunan pada nilai PSA, Gleason score, dan stadium tumor stagnant; maka
secara signifikan mengurangi risiko keganasan kanker prostat yang
mematikan.
Masih belum dilakukannya pemeriksaan serologi vitamin D sebagai
salah satu indikator prognostik pada adenokarsinoma prostat pada rumah
sakit rujukan sehingga sulit untuk mendapatkan sampel nilai vitamin D pada
darah, sedangkan diketahui bahwa vitamin D bermanfaat dalam
menghambat prognosis yang lebih buruk pada adenokarsinoma prostat.
Pada jaringan normal, terjadi peristiwa remodelling matriks
ekstraseluler untuk mempertahankan integritas jaringan dan fungsinya,
dimana kolagen baru disintesis untuk menggantikan protein yang mengalami
degradasi. Produksi kolagen dan perakitannya pada jaringan normal diatur
oleh metalloproteinase (MMPs) dan inhibitor MMP yang juga mengatur
aktifitas enzim lainnya seperti lysyl oxidase (LOX).
Pada hipotesis reactive stroma, sel-sel tumor menyebabkan proliferasi
fibroblast dan selanjutnya terjadi sekresi kolagen. Kolagen yang baru
disekresikan mirip dengan kolagen yang dijumpai pada pembentukan parut
(scar) yang bekerja sebagai penyangga infitrasi sel-sel pada lokasi cidera. Sel-
sel tumor mensekresikan enzim-enzim degradasi seperti MMP dalam jumlah
yang banyak untuk menghancurkan matriks ekstraseluler jaringan yang
normal sehingga meningkatkan pertumbuhan dan invasi tumor. Sel tumor
menginvasi melalui membran basal ke matriks interstisial dan komponen
fibrillar collagen (kolagen yang berasal dari fibroblast), yaitu kolagen tipe I,
II, III, V, XI, XXIV dan XXVII yang melekat pada matriks interstisial, sedangkan
kolagen tipe VI berada di antara membran basal dan matriks interstisial.
Kolagen yang berasal dari fibroblast inilah yang mengindikasikan peran
cancer associated fibroblast (CAF) dalam tumorigenesis. Respons reaktif dari
stroma ini diduga terjadi secara aktif oleh myofibroblast spesifik yang
membentuk populasi sel yang heterogen dengan fenotip yang berbeda dan
mengubah perilaku baik sel tumor maupun sel inang. Sel-sel tumor
menyebabkan proliferasi fibroblast dan sekresi kolagen. Selama progresi sel
tumor, CAF memainkan peran penting pada disregulasi turnover kolagen
yang dapat mengakibatkan terjadinya fibrosis tumor (desmoplasia) yang
ditandai dengan deposit kolagen yang banyak di sekitar tumor. Kolagen 5
berhubungan dengan peningkatan kekakuan jaringan. Stroma reaktif pada
kanker diperkirakan berperan dalam meningkatkan progresi tumor melalui
perangsangan angiogenesis, peningkatan invasi, proliferasi dan ketahanan sel
tumor. Kanker yang berhubungan dengan stroma reaktif biasanya memiliki
prognosis yang jelek.

Aktivasi dari lingkungan mikro stromal pada pejamu diperkirakan

merupakan tahapan kritis dalam pertumbuhan dan progresi dari
adenokarsinoma. Stroma reaktif ini sangat penting dalam merangsang invasi,
progresi dan metastasis tumor. Kanker prostat adalah kanker yang tersering
pada laki-laki.. Elemen pembeda pada prostat adalah fenotipe otot polos yang
ada pada jaringan prostat normal sulit dibedakan dengan stroma reaktif pada
pewarnaan rutin yaitu hematoksilin eosin. Dengan aplikasi pulasan Masson
trichrome maka stroma normal dan stroma reaktif dapat dibedakan secara
jelas.
A, kelenjar prostat manusia normal terdiri dari epitel sekresi yang dikelilingi oleh stroma
yang mengandung fibroblas, smooth muscle cells (SMC), komponen struktural dan
pengaturan matriks ekstra seluler (ECM), pembuluh darah, saraf dan sel-sel imunitas.
Interaksi stromal-epitel secara timbal balik mengatur struktur dan fungsi jaringan
normal. B, sel karsinoma prostat berkembang biak dan menyerang melalui besment
membran ke dalam stroma, yang merespons gangguan perbaikan pada homeostasis
jaringan, menciptakan mikroenvironment stromal baru yang disebut stroma reaktif.
Stroma reaktif menunjukkan fenotipik sel stromal beralih ke myofibroblasts, remodeling
matriks ekstraseluler, peningkatan angiogenesis dan masuknya tumor associated
makrofag (TAM).
Spesimen kanker prostat manusia. A, acini epitel prostat manusia normal dikelilingi oleh
stroma kolagen (area biru) yang mengandung sel-sel otot halus (area merah) dan
fibroblas. B, Gleason 3 kanker prostat manusia dalam stroma reaktif dengan beberapa
sel otot halus yang tersisa. C, Gleason 3 kanker prostat manusia dalam stroma reaktif
tidak memiliki sel otot halus. D, Gleason 4 kanker prostat manusia berkembang menjadi
stroma yang independen dengan terihat stroma yangsedikit kecuali di sekitar pembuluh
darah. Komposisi stroma reaktif pada kanker prostat berpotensi digunakan untuk
memprediksi tingkat perkembangan tumor. Pewarnaan trichrome Masson, 400x.

Aktivasi VDR memiliki respons transkripsi yang lebih luas dalam PSC
aktif. Penghambatan pada sinyal TGF-b/SMAD, Cal meningkatkan VDR
binding sekaligus mengurangi pengikatan SMAD3 di wilayah promotor gen
fibrogenik. Untuk menentukan apakah aktivasi VDR menurunkan aktivasi
PSC in vivo, maka dilakukan induksi terhadap pankreatitis kronis dengan
eksperimental pada tikus jenis liar menggunakan cerulein analog
kolecystokinin dan Coadministered Cal. Dibandingkan dengan tikus yang
menerima cerulein saja, hewan yang diterapi Kal menunjukkan penurunan
peradangan dan fibrosis, konsisten dengan penurunan aktivasi PSC (Angka
S3A dan S3B). Ekspresi aktivasi dan gen kanker secara signifikan menurun
pada PSC terisolasi dari tikus yang diobati dengan Cal dibandingkan dengan
control. Pengurangan diamati pada aktivasi gen fungsional secara signifikan
dalam mikroenvironment tumor, termasuk komponen ECM, sitokin inflamasi,
 dan faktor pertumbuhan. Selain itu, ekspresi Acta2, yang terkait dengan
motilitas sel, juga menurun. Selanjutnya, pengurangan induksi fosfo-Stat3
diamati pada tikus yang diterapi Cal, konsisten dengan penurunan sinyal
inflamasi dari stroma. Terutama, aktivasi Stat3 telah ditetapkan sebagai
hubungan mekanis antara kerusakan peradangan dan inisiasi PDA.
Pengobatan kal selama pankreatitis akut pada tikus jenis liar juga
menunjukkan perubahan terkait aktivasi dalam ekspresi gen PSC dan
mengurangi infiltrasi leukosit dan fibrosis. VDR bertindak sebagai regulator
genomik master dari program aktivasi PSC, dan induksi VDR oleh ligan
menunjukan keadaan yang diam terhadap PSC baik secara in vitro maupun in
vivo.
Sebagai catatan, aktivasi VDR stromal secara signifikan mengurangi
ekspresi CSF2, yang terlibat dalam perkembangan tumor pankreas dan
penghindaran kekebalan antitumor. Perubahan ekspresi gen disertai dengan
penurunan induksi fosfo-STAT3 dan penurunan resistensi terhadap
kemoterapi secara in vitro. Hasil ini menunjukkan bahwa VDR activation
dalam PSC menunjukkan regulasi negative pada tumor pendukung secretome
PSC.

Tujun Umum : Menganalisis ekspresi VDR dengan stroma reaktif dan grading
histopatologi adenokarsinoma prostat

Tujuan khusus :
- Menganalisis ekspresi VDR dengan grading histopatologi.
- Menganalisis ekspresi VDR dengan stroma reaktif menggunakan pewarnaan
trichrome masson

Perumusan masalah : bahwa peneliti tertarik untuk menilai dan menganalisis

bagaimanakah ekspresi VDR dengan stroma reaktif dan grading histopatologi
adenokarsinoma prostat
 Manfaat penelitian :
- Bertambahnya pemahaman yang lebih baik mengenai manfaat dan peran
VDR dalam menghambat pertumbuhan stroma reaktif dan perburukan
grading histopatologi yang dapat mengakibatkan prognosis menjadi lebih
baik pada adenokarsinoma prostat.

- Memberikan informasi bahwa VDR, stroma reaktif dapat mempengaruhi

imunopatogenesis, grading histopatologi dan prognosis pada
adenokarsinoma prostat

- Hasil penelitian ini dapat dijadikan sebagai terapi pilihan pada

adenokarsinoma prostat dan sebagai dasar pertimbangan untuk penelitian
selanjutnya