BAB 8 :: KUKU
:: KRZYSZTOF KOBIELAK
AT A GLANCE (SEKILAS)
Kuku terdiri dari beberapa lapisan yang mengatur
organ kuku:
 Eponikium adalah perbatasan antara epidermis
kulit dan organ kuku pada batas punggung
lipatan proksimal kuku (NPF), dan membentuk
segel pelindung. _ NPF terbentuk setelah
epidermis kulit membengkok ke dalam secara
ventral di perbatasan eponikium dan menjadi
epidermis kuku, menciptakan NPF, yang
melokalisasi sel punca lipat proksimal kuku
lambat bifungsional (NPFSC). NPFSCs secara
aktif mengirimkan progeni ke epidermis sekitar
kuku dan matriks kuku bersamaan dengan
lempeng kuku yang dibedakan setelah regenerasi
kuku.
 Matriks, lanjutan ventral dari lipat proksimal
setelah terlipat di bagian dorsal dan distal, terdiri
dari sel yang aktif berproliferasi yang disebut
onychocytes. Dalam matriks kuku proksimal,
terdapat sel-sel punca kuku berproliferasi cepat.
Diferensiasi mereka digabungkan secara
langsung dengan kemampuan untuk mengatur
regenerasi jari-jari.
 Matriks kuku berdiferensiasi, membentuk zona
keratogen, yang akhirnya mendepositkan sel ke
dalam lempeng kuku di atasnya.
 Hyponychium adalah bagian paling distal dari
epitel kuku yang terletak secara perifer pada
dasar kuku, dan di bawah lempeng kuku di
persimpangan antara tepi bebas dan epidermis
kulit ujung jari, membentuk pelindung yang
berfungsi melindungi dasar kuku.
PENDAHULUAN
Organ kuku adalah salah satu pelengkap kulit yang
terletak di distal phalanx setiap jari dan kaki di
tubuh manusia. Menariknya, kuku menunjukkan
pertumbuhan terus-menerus dalam kondisi
fisiologis dan dapat sepenuhnya beregenerasi
setelah dikeluarkan. Bab ini mencakup penemuan
baru biologi kuku, regulasi pertumbuhannya, dan
mekanisme diferensiasi kuku. Para ilmuwan telah
secara intens mencari sel-sel punca di berbagai
organ dengan harapan dapat memahami dan
memanfaatkan kemampuan regeneratifnya.
Memang, kulit adalah organ kompleks yang
mengandung sejumlah "miniorgans," yang dikelola
oleh populasi sel punca independen.
Selama beberapa tahun terakhir, telah ada
penelitian aktif dan diskusi tentang apakah organ
kuku saja yang memiliki sel punca yang dapat
meregenerasi seluruh pelengkap kuku atau jika sel-
sel lain berkontribusi pada regenerasi kuku. Bab ini
menyajikan penemuan baru tentang koeksistensi
dua populasi sel punca kulit independen yang
terlokalisasi dalam organ kuku, dengan dinamika
siklus sel yang sangat berlawanan, yaitu populasi
sel punca lipat proksimal kuku bifungsional siklus
lambat (NPFSC) dan siklus cepat (NSC). Selain itu,
ketergantungan dan interaksi timbal balik mereka
selama regenerasi organ kuku telah dibahas.
Dengan demikian, kuku mengandung gradien sel-
sel yang lambat hingga siklus-cepat, dengan NPFC
siklus cepat dan kemudian lebih banyak sel aktif di
zona intermediet (IZ) yang memisahkan mereka
dari sel-sel punca (stem) yang berproliferasi cepat
dalam matriks proksimal kuku.
Kami juga menyajikan fungsi baru organ
kuku, khususnya NSC yang baru ditemukan dalam
matriks proksimal kuku dan progenitornya yang
berdekatan dalam matriks distal kuku yang
berkontribusi aktif terhadap diferensiasi kuku dan
peran penting yang mengejutkan dalam mengatur
regenerasi digiti pada mamalia. Selain itu, isolasi
sel punca dari organ kuku dan profil ekspresi gen
mereka mengungkapkan karakteristik molekuler
mereka, di mana protein morfogenetik tulang
(BMP) dan jalur pensinyalan keluarga situs
integrasi MMTV tipe-tanpa sayap (Wnt)
teridentifikasi menjadi penting dalam diferensiasi
kuku dalam regenerasi digit. Dengan demikian,
penelitian saat ini telah mulai mengungkap bahwa
pelengkap kulit lainnya, termasuk kuku, memiliki
sel punca sendiri dengan kapasitas regeneratif.
Namun, studi lanjutan diperlukan untuk
karakterisasi lebih lanjut dari sel - sel punca dalam
organ kuku yang mungkin memberi sedikit
pencerahan pada potensi regeneratif sel punca
diduga pada kuku manusia di masa depan. Oleh
karena itu, karena potensi regeneratifnya yang luar
tubuh manusia (Gbr. 8-1). Kuku dimulai sebagai
perpanjangan dari epidermis kulit phalanx distal di
perbatasan yang disebut eponikium (Gambar 8-2).
Pada saat itu, epidermis kulit membengkok ke
dalam dan menjadi epidermis kuku, membentuk
lipatan proksimal kuku (NPF) (lihat Gambar 8-2).
Menariknya, diferensiasi epidermal normal berhenti
tep.ikj-sscsscx
at setelah lipatan proksimal terlipat ke dalam di
perbatasan eponikium; dengan demikian, lapisan
kuku yang berlanjut melebihi titik ini tidak
membentuk lapisan granular yang biasanya diamati
pada epidermis kulit normal.
Gambar 8-1 Gambar ujung jari manusia dengan organ kuku.
Struktur yang terlihat meliputi kulit, kutikula, lempeng kuku

biasa, studi lebih lanjut tentang mekanisme yang dengan lunula yang terletak di proksimal, dan pita
onikodermal yang terletak di distal. Selain itu, pelat kuku
mengatur populasi sel punca pada kuku dan
dipisahkan oleh alur kuku lateral dan lipatan kuku lateral.
interaksinya dengan sel mesenkim dapat mengarah
 
pada rute baru untuk mengobati berbagai gangguan
Sebagai kelanjutan ventral dari lipatan proksimal
kuku, termasuk amputasi pada manusia.
setelah berlekuk ke dorsal dan distal adalah matriks
 
yang terdiri dari sel-sel kuku yang berproliferasi
STRUKTUR ORGAN KUKU (ANATOMI)
aktif yang disebut onikosit (lihat Gambar 8-2 dan 8-
DAN FUNGSI
3). 1 Di atas matriks terdapat zona keratogenous
Kuku termasuk dalam salah satu pelengkap kulit
(KZ) tempat sel-sel matriks berdiferensiasi, mati,
dan terletak di bagian ujung jari tangan dan kaki di
mati, dan mendepositokan ke dalam lempeng kuku
di atasnya (lihat Gambar 8-2 dan 8-3). Lempeng
kuku adalah struktur keras yang berfungsi sebagai
penutup pelindung dengan mencegah trauma pada
ujung jari kaki dan jari; itu juga digunakan sebagai
alat untuk mengambil benda - benda kecil, yang
penting untuk manipulasi halus dan fungsi jari yang
halus. Melalui lempeng kuku, dasar berbentuk bulan
sabit keputih-putihan disebut lunula (" bulan kecil
"), bagian yang terlihat dari matriks (lihat Gambar
8-1). Lunula dapat paling terlihat pada ibu jari dan
kadang sulit terlihat di jari kelingking.
Di dalam organ kuku, lempeng kuku
mengandung struktur keratin yang keras yang terdiri
dari sel-sel yang gepeng dan berinti yang disebut
korneosit yang berada di atas phalang distal (lihat
Gambar 8-1 dan 8-2). Korneosit terbentuk selama
diferensiasi kuku dari sel-sel kuku, onikosit.
Lempeng kuku memberikan tekanan balik di ujung
jari untuk perlindungan dan meningkatkan
sensitivitas. Lebih distal dari matriks kuku adalah
dasar kuku, terdiri dari lapisan basal dan satu atau
dua lapisan keratinosit suprabasal pasca-mitosis,
berkontribusi beberapa sel tanduk ke permukaan
bawah lempeng kuku distal (lihat Gambar 8-2). 2
Gambar 8-2 Skema struktur kuku manusia (dipotong memanjang melalui bagian tengah kuku). Lapisan dan struktur kuku yang
berbeda dengan warna meliputi lipatan proksimal kuku ( merah muda ), matriks ( biru ), zona keratogenous ( oranye ), alas kuku (
Lempeng kuku terpasang pada jari dengan
melakukan interdigitasi dengan alas kuku yang
mendasarinya (lihat Gambar 8-2). Kutikula kuku
memanjang dari tepi lipatan proksimal ke lempeng
kuku, membatasi ujung proksimal kuku dan
melindunginya dari toksin dan zat asing (lihat
Gambar 8-1). Di samping itu, lempeng kuku
dikelilingi oleh alur kuku lateral dan lipatan kuku
lateral (lihat Gambar 8-1). Demikian pula, di distal
ujung unit kuku, hyponychium menyegel lempeng
kuku ke alas kuku di bawah pita onychodermal
untuk mencegah infeksi (lihat Gambar 8-1 dan 8-2).
Membandingkan kuku manusia dengan kuku
mamalia lain (misalnya, dalam hal ini kuku tikus),
jelas bahwa bentuknya sangat berbeda,
kemungkinan karena perbedaan dalam evolusi dan
fungsi. Kuku manusia lebih rata (lihat Gambar 8-1
dan 8-3); cakar mamalia adalah struktur kerucut
dekat dengan kelengkungan yang lebih besar.
Bentuk ini dipengaruhi oleh phalanx distal yang
mendasari dan juga distribusi matriks.1,3
PERTUMBUHAN KUKU DAN
DIFERENSIASINYA
Sejauh ini, diyakini bahwa sebagian besar matriks
bertanggung jawab atas produksi lempeng kuku.
 abu-abu muda ), lempeng kuku ( merah ), dan sayap dari kedua sisi oleh eponikium dan hiponykium ( hijau ), yang memisahkan
struktur kuku dari epidermis kulit ( abu-abu gelap ).
````````````````````````````````````````````````````````````````````````````````````````````````````````````````````````````````````````````````````````````````````````
````

dalam gerak label dari matriks ke dalam lempeng

Gambar 8-3 Perangkat kuku. Penampilan histologis dari
elemen-elemen yang membentuk unit kuku (pewarnaan
hematoxylin dan eosin potongan memanjang melalui tengah
kuku; perbesaran asli × 20). Lapisan histologis kuku adalah
lipatan proksimal kuku, matriks, dan lempeng kuku.
(Digunakan dengan izin dari Dr. Sébastien de Feraudy, MD,
PhD, Profesor Rekanan & Direktur
Laboratorium Dermatopatologi UC Irvine , Irvine, CA.)
Namun, sebelumnya, tidak jelas apakah matriks
adalah satu-satunya sumber diferensiasi kuku atau
apakah bagian lain dari unit kuku, seperti alas kuku,
juga berkontribusi pada lempeng kuku. Di masa
lalu, Lewis mengamati bahwa lempeng kuku terdiri
dari tiga lapisan yang berbeda dan mengatakan
bahwa mereka berasal dari tiga bagian unit kuku
yang berbeda. Teori itu mengatakan bahwa lapisan
superfisial dorsal kuku berasal dari lipatan kuku
proksimal, daerah ditengah berasal dari matriks, dan
kuku ventral dalam dihasilkan oleh dasar kuku.4
Sekitar satu dekade kemudian, Zaias dan Alvarez
menggunakan radioaktif glisin tritiated untuk
menandai dan mengikuti sel-sel kuku pada monyet
tupai, menunjukkan bahwa ada penyerapan di
kuku dari waktu ke waktu.5 Hanya sejumlah kecil
glisin yang diinisiasi radioaktif yang tergabung
dalam alas kuku dan oleh karena itu diabaikan
sebagai sumber produksi kuku karena tidak aktif. Di
saat yang sama, matriks kuku diusulkan untuk
bertanggung jawab atas pembentukan lempeng
kuku.5 Penelitian serupa juga dilakukan pada
manusia dengan menggunakan timidin tritiated
thymidine (3 H-thymidine) dan glisin di mana sel -
sel matriks diusulkan bermigrasi ke dasar kuku di
samping lempeng kuku.6 Hipotesis bahwa kuku
yang hanya diproduksi oleh matriks selanjutnya
didukung oleh Berker dan Angus, yang
Dermatopatologi,
menunjukkan bahwa sel-sel matriks yang sangat
proliferatif dibandingkan dengan kuku yang relatif
tidak aktif.7 Dalam penelitian lain, telah diusulkan
bahwa meskipun matriks menghasilkan sebagian
besar lempeng kuku, alas kuku juga berkontribusi
terhadap lempeng kuku berdasarkan pada ketebalan
dan massa kuku.8,9 Pendapat ini mengatakan
bahwa kontribusi alas kuku dengan lempeng kuku
ventral memungkinkan gerakan distal dari lempeng
kuku seperti tumbuh. Jadi, sebagai kesimpulan,
tampaknya ada konsensus umum bahwa lempeng
kuku diproduksi oleh sel-sel matriks.
 
DUA FUNGSI SEL PUNCA DI ORGAN KUKU
(HOMEOSTASIS DAN REGENERASI)
Apakah sel-sel matriks adalah satu-satunya sumber
sel progenitor yang diperlukan untuk produksi kuku
atau jika lapisan lain termasuk NPF juga penelitian pulse-chase awal, hewan disuntik dengan
berkontribusi pada bagian kuku selama masa hidup, 3 H-timidin, yang dimasukkan ke dalam DNA yang
memenuhi kriteria sel punca dievaluasi dalam baru disintesis dari sel pembagi. Setelah pelabelan
bagian ini. Sel-sel punca dewasa yang ditemukan di yang efisien, hewan mengalami periode chase
berbagai organ di seluruh tubuh bertanggung jawab ketika sel-sel pembagi yang terdilusi keluar label H-
untuk mempertahankan pergantian organ normal timidin dan sel siklus lambat menyimpan label
serta perbaikan jaringan jika terjadi cedera.10 Hal ini radioaktif ini. Metode ini memungkinkan
dimungkinkan oleh kemampuan untuk identifikasi sel penahan label siklus lambat (LRC).
memperbaharui diri dan berdiferensiasi menjadi Pada tahun 1990, Cotsarelis dan rekan kerja
jenis sel khusus berbeda di organ masing-masing. 10 mengidentifikasi populasi unik LRC siklus-lambat
Karena sel-sel punca diperlukan untuk homeostasis di daerah tonjolan folikel rambut menggunakan 3
dan regenerasi jaringan sepanjang hidup, mereka H-thymidine pulse chase experiment. Mereka
harus memiliki kapasitas pembaharuan diri jangka menunjukkan bahwa tonjolan LRC ini dapat
panjang. Selain itu, telah diusulkan bahwa sel-sel distimulasi untuk berproliferasi pada pengobatan
punca jarang membelah untuk menghindari dengan promotor tumor (12-O-
penggabungan mutasi yang terkait dengan tetradecanoylphorbol-13-acetate [TPA]) dan
pembelahan sel. Di setiap organ, sel punca berada di melanjutkan untuk berhipotesis bahwa LRC ini
lingkungan mikro khusus yang disebut adalah sel-sel punca dari folikel rambut.14 Sebelum
niches(ceruk), yang membantu menjaga atau mengidentifikasi LRC di tonjolan folikel rambut,
mengatur proliferasi dan diferensiasi, yang penting Cotsarelis dkk. melaporkan LRC di kornea limbus
untuk homeostasis dan perbaikan jaringan .10-13 menggunakan percobaan pulse chase yang serupa.15
Setelah aktivasi, sel-sel punca ini membelah LRC ini juga teraktivasi khusus pada respon
dan meninggalkan ceruk untuk membentuk sel-sel terhadap cedera dan juga dapat dirangsang oleh
progenitor transitamplifying (TA) yang lebih TPA. Data ini mendukung teori bahwa sel punca
terdiferensiasi. Berbeda dengan sel punca yang bertahan selama masa hidup hewan untuk
relatif stabil, sel TA berproliferasi dengan cepat dan berkontribusi pada jaringan selama regenerasi dan
berdiferensiasi menjadi sel yang diperlukan untuk perbaikan luka.
regenerasi atau perbaikan.10 Sel punca dewasa Namun, menggunakan pelabelan radioaktif,
secara teoritis ada di semua jaringan regeneratif, para peneliti tidak dapat menyelidiki kolokalisasi
tetapi lokalisasi dan karakterisasi mereka seringkali penanda potensial melalui histologi imunologi.
sulit karena sedikit yang diketahui tentang organ- Segera setelah itu, para ilmuwan mulai
organ ini. Oleh karena itu, para ilmuwan telah menggunakan analog timidin sintetik baru,
menggunakan perangkat siklus lambat untuk bromodeoxyuridine (BrdU).16 Berbeda dengan 3 H-
memberi label dan mengidentifikasi sel-sel punca timidin, BrdU tidak radioaktif. Selain itu, antibodi
yang diduga dalam berbagai organ. Dalam terhadap BrdU memungkinkan imunohistokimia
untuk menyelidiki penanda yang berkolokasi
dengan LRC bertanda BrdU.17 Penelitian pulse Selanjutnya, di samping folikel rambut di kulit,
chase dengan BrdU telah banyak digunakan untuk seperti kornea dan kelenjar keringat , karakteristik
mengidentifikasi LRC di banyak jaringan. sel punca yang lambat bersepeda diperlihatkan
14,15,19-21 ; Namun, sedikit yang diketahui
Baru-baru ini, metode baru untuk
tentang pelengkap kulit lainnya seperti kuku.
mengidentifikasi LRC menggunakan tikus
Oleh karena itu, penelitian terbaru mencoba
transgenik dengan histone 2B-green fluorescent
untuk mengatasi apakah populasi sel punca yang
protein (H2B-GFP) yang diinduksi tetrasiklin.18
diam seperti itu juga ada pada kuku yang terus
Dengan sistem ini, baik promotor spesifik atau
tumbuh. Hal pertama tentang keberadaan LRC di
umum dapat digunakan untuk mendorong ekspresi
kuku setelah eksperimen pulse-chase BrdU
H2B-GFP yang dapat diinduksi dalam jaringan
menyarankan keberadaan LRC di lapisan dasar
yang diinginkan. Satu keuntungan dari sistem ini
matriks kuku yang berdekatan dengan alas kuku di
adalah ia dapat lebih efisien memberi label sel
kuku tikus; Namun, karakterisasi lebih lanjut belum
sebelum periode chase, tetapi metode BrdU hanya
dilakukan.22 Berbeda dengan lokalisasi ini,
dapat memberi label sel yang secara aktif membelah
menggunakan pewarnaan imunohistokimia,
dalam fase sintesis. Selain itu, sistem penahan label
Sellheyer dkk. menunjukkan bahwa lipatan
transgenik H2B-GFP ini memungkinkan isolasi
proksimal ventral pada kuku manusia menunjukkan
LRCs hidup untuk karakterisasi dan analisis lebih
penanda sel batang folikel rambut (hfSC) (misalnya,
lanjut. Untuk pertama kalinya, metode ini
K15; keratin 19 [K19]; dan pleckstrin seperti
memungkinkan isolasi sel punca penahan label
domain homologi, keluarga A, protein anggota 1
folikel rambut hidup untuk profil ekspresi gen untuk
[PHLDA1]) selama embriogenesis dan mengandung
menentukan karakteristik molekul sel-sel punca ini
sangat sedikit sel Ki67 + (protein inti yang terkait
terlepas dari penanda lain seperti keratin 15 (K15)
dengan proliferasi sel), menjadikannya lebih stabil
atau CD34.18 Selama bertahun-tahun, metode ini
mirip dengan hfSCs, menunjukkan bahwa lipatan
memungkinkan pemahaman tentang bagaimana
proksimal dapat mewakili ceruk NSC manusia.23
folikel rambut dan sel puncanya diatur.
Perbedaan ini telah dibahas dalam penelitian terbaru
 
menggunakan sistem H2B-GFP LRCs pada tikus
transgenik untuk deteksi in vivo sel-sel kulit siklus
lambat.24 Metode ini memungkinkan
mengidentifikasi populasi LRC kuku yang
sebelumnya tidak dilaporkan dalam lapisan basal

SEL PUNCA LIPAT KUKU PROKSIMAL NPF (Gambar 8-4). 24 Yang menarik, pada tikus,

BIFUNGSIONAL SIKLUS LAMBAT DI kuku ada struktur tiga dimensi kerucut; oleh karena

ORGAN KUKU itu, LRC diatur dalam konfigurasi seperti cincin. 24

LRC kuku mengekspresikan penanda hfSC K15,
dan percobaan penelusuran garis keturunan in vivo
menunjukkan bahwa sel berlabel K15, yang berasal
dari NPF, berkontribusi pada struktur kuku (lihat
Gambar 8-4, panah hitam # 2, jangka panjang) dan
lebih dominan ke epidermis sekitar kuku (lihat
Gambar 8-4, panah hijau # 1 ), sehingga memiliki
karakteristik sel punca bifungsional. Setelah
regenerasi kuku, NPFSC yang diturunkan K15 ini
secara aktif mengirimkan progeni ke matriks kuku
dan berdiferensiasi ke dalam lempeng kuku (lihat
Gambar 8-4, panah hitam # 2). Demikian pula,
percobaan in vivo menunjukkan bahwa LRC kuku
dapat secara aktif berpartisipasi dalam regenerasi
kuku fungsional. Profil transkripsi dari LRC kuku
terisolasi mengungkapkan persyaratan untuk
pensinyalan BMP dalam pembentukan dan
diferensiasi kuku yang tepat (Gbr. 8-5). Dengan
demikian, pensinyalan BMP memandu NPFSC
menuju diferensiasi kuku, dan tanpa jalur ini, sel-sel
matriks berproliferasi lebih sedikit, dan KZ tidak
diamati di atas wilayah matriks (lihat Gambar 8-
5).24 Juga, diferensiasi lempeng kuku yang sesuai,
terganggu, dan tanpa pensinyalan BMP, kuku
tersebut mengadopsi epidermis in vivo (lihat
Gambar 8-5). Ini memperlihatkan perluasan lapisan
granular epidermis kulit di seluruh kuku dengan
penanda epidermis khas seperti keratin 1 (K1) dan
ekspresi loricrin yang diamati pada lempeng kuku
(lihat Gambar 8-5). Sebaliknya, penanda khas
lempeng kuku diferensiasi AE13 (keratin yang
diekspresikan pada korteks rambut dan lempeng
kuku) tidak terdeteksi (lihat Gambar 8-5).24
Menariknya, peran yang sama dari pensinyalan
BMP diamati dalam diferensiasi folikel rambut
yang tepat.25 Pengamatan ini juga konsisten, dan
fenotip itu bahkan lebih parah dari fenotipe dari
Msx2 dan Foxn1 mutan ganda; kedua gen
sebelumnya telah ditunjukkan sebagai target
pensinyalan BMP yang mengatur diferensiasi kuku
normal.26 Itu juga mirip dengan Foxn1 dan Hoxc13
mutan tunggal, dengan ekstensi menyimpang dari
stratum granulosum epidermal dalam struktur kuku
(lihat Gambar. 8-5).2,27 Selain itu, peran pensinyalan
BMP juga diperlukan untuk pemeliharaan
karakteristik LRC dari NPFSC (lihat Gambar 8-5),
seperti yang sebelumnya diamati dalam hfSCs.28
Disaat yang sama, populasi baru sel punca
bifungsional dalam wilayah NPF menampilkan
dinamika homeostatis plastik yang mampu
merespon cedera dan menunjukkan, mekanisme
terkoordinasi pelindung formasi umum yang bisa
terjadi antara kuku dan sekitar epidermis24
 Gambar 8-4 Lokalisasi skematis dari dua populasi sel punca di kuku. Lokalisasi sel punca proksimal lipatan kuku (NPFSCs) dengan
karakteristik penahan label (LRCs) siklus-lambat dalam lipatan proksimal kuku dan sel-sel punca kuku proksimal yang berkembang
cepat dalam matriks proksimal. NPFSC mengekspresikan keratin 15 (K15); keratin 19 (K19); dan pleckstrin seperti domain homologi,
keluarga A, protein anggota 1 (PHLDA1). NPFSC bertanda K15 berkontribusi dominan terhadap epidermis sekitar kuku ( 1, panah
hijau ) tetapi juga untuk matriks kuku dan diferensiasi kuku ( 2, panah hitam ) selama homeostasis kuku. NSC, ketika ditandai oleh
Lgr6, berpartisipasi dalam struktur matriks kuku dan diferensiasi lempeng kuku (NP) ( 3, panah hitam ). AE13, keratin yang
diekspresikan di korteks rambut dan lempeng kuku; IZ, zona menengah; Ki67, inti protein yang terkait dengan proliferasi sel; Lgr6,
protein G reseptor 6 kaya-leusin
 
berproliferasi ditemukan di sekitar daerah NPF dan
SEL PUNCA UNIPOTENT SIKLUS-CEPAT
berdiferensiasi menjadi sel-sel KZ untuk
DI ORGAN KUKU
membentuk lempeng kuku eksternal.
Dalam hal dinamika proliferasi sel,
Matriks kuku adalah kelanjutan morfologis sel NPF
perbedaan yang jelas diamati antara LRC kuku
yang saling menempel melalui IZ yang
siklus-lambat di NPF dan sel-sel matriks pembagi
membungkus ujung proksimal lempeng kuku (lihat
aktif setelah hanya 1 minggu periode chase.24
Gambar 8-4). Jadi, sel-sel progenitor matriks yang

Gambar 8-5 Sinyal tulang protein morfogenetik (BMP) diperlukan untuk diferensiasi kuku yang tepat. Pensinyalan BMP aktif
ditemukan dalam lipatan proksimal kuku dan matriks kuku (ditunjukkan oleh lingkaran merah). Penipisan BMP pada kuku
menunjukkan tidak adanya zona keratogen (KZ, lingkaran oranye), hiperplasia dari dasar kuku (lingkaran abu-abu), dan hilangnya sel
penahan label (LRCs), dan lapisan granular ektopik memanjang pada seluruh lempeng kuku. (lapisan epidermis kulit ditandai dengan
lingkaran hijau ). Penanda epidermal Keratin 1 (K1) dan Loricrin (Lor) secara ektopik diekspresikan dengan tidak adanya pensinyalan
BMP. Pewarnaan K1 positif ditemukan pada lipatan proksimal dan ventral kuku dari tikus kontrol. Ekspresi ektopik K1 (lapisan
epidermis kulit yang ditandai oleh lingkaran cokelat ) diamati pada ekspresi marker lempeng kuku AE13 (warna merah). Ekspresi
Loricrin ditemukan di lipatan proksimal sampai eponikium dan tidak ada di lempeng kuku tikus kontrol. Ekspresi loricrin ektopik
(lapisan epidermis kulit yang ditandai oleh lingkaran hijau gelap) diamati pada ekspresi marker pelat kuku AE13 (warna merah).
Jumlah sel yang berproliferasi di Mx (ditandai dengan lingkaran biru) tampaknya menurun, dan AE13, penanda diferensiasi lempeng
kuku, dikompromikan tanpa sinyal BMP. Dengan demikian, ekspresi ektopik dari penanda epidermal menunjukkan bahwa
pensinyalan BMP mungkin diperlukan untuk nasib kuku, dan tanpa itu, struktur kuku memperoleh fenotipe seperti epidermis.
 Pada saat tersebut, imunolabeling Ki67 terutama lemah yang berbatasan langsung dengan Ki67 yang
terlokalisasi pada sel-sel matriks yang berproliferasi sangat kuat, H2BGFP + LRC lipat proksimal (PF),
dan sebagian kecil dari sel-sel H2B-GFP + yang menunjukkan peningkatan proliferasi dalam matriks
dibandingkan dengan wilayah PF yang berdekatan
(lihat Gambar 8-4).
Jadi, area antara kedua daerah — matriks
yang berproliferasi dan PF IZ yang diam — telah
dideskripsikan mengandung sel H2B-GFP + dan
Ki67 + yang lemah, yang muncul dari dilusi label
H2B-GFP setelah pembelahan sel. IZ secara
bertahap berkurang ukurannya
meningkatnya periode chase, menjadi minimal
hanya setelah chase 2 minggu hingga benar-benar
menghilang setelah chase 4 minggu. Hal ini
menunjukkan adanya gradien dalam pembelahan sel
berkembang dari LRCS siklus-lambat yang relatif
stabil di NPF (melalui IZ dari sel-sel lebih aktif)
untuk secara cepat membagi sel matriks (lihat
Gambar. 8- 4).24
Dengan demikian, telah ditunjukkan bahwa
matriks kuku mengandung sel-sel progenitor yang
membelah dengan cepat yang bertanggung jawab
atas diferensiasi kuku. Namun, apakah sel-sel
matriks saja memiliki karakteristik sel punca dan
dapat menghasilkan seluruh perangkat
diselidiki dan dibahas lebih lanjut nanti dalam bab
ini.
Untuk menemukan sel punca pada kuku,
Takeo dan rekannya menggunakan
penelusuran garis keturunan tikus transgenik. Di
bawah kendali keratin 14 (K14) Cre recombinase-
mutated estrogen receptorase (Cre-ER)
dipromosikan promotorase (K14-Cre-ER), mereka
menandai keratinosit di lapisan basal epidermis
kulit dan epidermis kuku dengan mengaktifkan
ekspresi LacZ.29 Dalam sistem itu, ekspresi LacZ
didorong oleh promotor Rosa26,
pengaktifannya mengikuti penghilangan
mediated removal stop floxed cassette. Dengan
demikian, memungkinkan pelabelan secara genetis
bagian kecil dari sel epidermis kuku K14, termasuk
sel-sel matriks kuku dan sel dasar, menggunakan
injeksi tamoxifen tunggal dan kemudian menilai
partisipasi sel-sel berlabel LacZ dalam regenerasi
kuku selama periode waktu yang panjang. Lebih
dengan dari 5 bulan, jumlah keturunan LacZ + dari sel- sel
epitel kuku berlabel K14 meluas secara linear dan
distal, bertahan sebagai garis-garis yang muncul
hanya dari matriks proksimal tetapi tidak dari
matriks distal. Sel matriks proksimal memiliki
karakteristik sel epidermis yang tidak
berdiferensiasi yang mengekspresikan keratin 17
(K17) selain K14 dengan penanda Ki67 yang sangat
berproliferasi (lihat Gambar 8-4). Sel-sel matriks
proksimal yang terisolasi memiliki kemampuan
pembentukan koloni tertinggi secara in vitro, suatu
karakteristik umum dari sel-sel punca epitel.
Dengan demikian, hasil pelabelan berkepanjangan
bersama dengan data kultur in vitro menunjukkan
kuku bahwa matriks proksimal yang membelah dengan
cepat mengandung sel - sel yang dapat
memperbaharui diri, memenuhi kriteria NSC yang
menopang pertumbuhan kuku (lihat Gambar 8-4).29
sistem Menariknya, analisis ekspresi gen antara
matriks proksimal dan matriks distal
mengungkapkan bahwa sel-sel matriks proksimal
yang diperkaya dengan NSC dengan jalur pensinyalan
Wnt.29 Memang, analisis menggunakan dua tikus
Wnt berbeda menegaskan bahwa meskipun sinyal
Wnt mulai dari bagian distal dari daerah NSC K17-
positif dan bertahan ke dalam matriks distal K17-
dan negatif, tidak ada sinyal di ujung proksimal matriks
Cre- kuku. Secara konsisten, komponen jalur
pensinyalan Wnt seperti Tcf1 (juga dikenal sebagai ekspresi sel matriks kuku yang mengekspresikan
faktor inti hepatosit 1a), mediator inti pensinyalan Lgr6.
Wnt, dan Wls (Wntless homologue) tidak  
diekspresikan pada akhir proksimal NSCs, tetapi PERAN EPITEL KUKU DALAM
beberapa keratin yang mengandung TCF1 dan REGENERASI JARI (DIGIT)
tempat pengikatan konsensus LEF1 diregulasi Ujung-ujung jari manusia, mirip dengan beberapa
dalam matriks distal, sehingga menunjukkan mamalia, termasuk tikus, mampu regenerasi total
keterlibatan langsung pensinyalan Wnt dalam setelah cedera seperti yang dialami amfibi.31, 32

diferensiasi kuku. Ini diverifikasi oleh penghapusan Menariknya, kemampuan ini terbatas pada area
aktivasi pensinyalan Wnt dalam epitel kuku dengan yang berhubungan dengan kuku, dan penelitian
menghilangkan β- catenin (mediator esensial sebelumnya menunjukkan bahwa transplantasi kuku
pensinyalan Wnt) pada epitel dewasa yang setelah amputasi pada phalanx tengah dapat
ditunjukkan oleh kurangnya AE13, penanda untuk menyebabkan diferensiasi tulang digit ektopik.31-33
sel-sel keratin kuku. Menariknya, tanpa catenin atau Jadi, pengamatan ini menunjukkan bahwa epitel
Wntless, seluruh epitel kuku menunjukkan kuku memiliki fungsi khusus, menciptakan
karakteristik daerah NSC dengan sel Ki67-positif lingkungan regeneratif permisif untuk regenerasi
dan sangat berkembang, sehingga menegaskan digit. Baru-baru ini, beberapa komponen seluler dan
peran penting pensinyalan Wnt dalam diferensiasi molekuler dari proses regenerasi digit telah
kuku. ditemukan oleh Takeo dkk.29 Memang, proses ini
Selain itu, dalam sebuah studi baru-baru ini, diatur dan tergantung pada keberadaan organ kuku
para ilmuwan mengidentifikasi populasi sel yang yang bertumpuk dan interaksi timbal baliknya
mengekspresikan mediator pensinyalan Wnt, Lgr6 dengan blastema yang mendasarinya. Telah
(protein G reseptor 6 kaya-leusin), sebagai penanda ditunjukkan bahwa epitel kuku, khususnya NSC
sel punca kunci untuk kuku, yang terlokalisasi yang terletak di matriks kuku proksimal dan
dalam proksimal kuku matrix, sehingga konsisten diferensiasinya, digabungkan secara langsung
dan mengkonfirmasi penemuan sebelumnya oleh dengan kemampuan untuk mengatur regenerasi
Takeo dkk.30 Memang, Lgr6 adalah penanda digit. Pada tingkat molekuler dalam model tikus,
molekuler khusus untuk NSCs, sehingga pensinyalan Wnt / aten-catenin dari epitel kuku
menimbulkan lempeng kuku dan berkontribusi telah terbukti diperlukan untuk regenerasi digit.
terhadap pertumbuhan kuku dari waktu ke waktu Model yang diusulkan saat ini adalah bahwa NSC
(lihat Gambar 8-4). Dengan demikian, data ini dalam matriks proksimal menimbulkan sel-sel
mengkonfirmasi bahwa pensinyalan Wnt kanonik matriks distal dengan aktivasi Wnt (melalui
(yang menghasilkan lokalisasi β- catenin ke inti Wntless), dan, secara bersamaan, NSC dan sel-sel
matriks kuku) secara luas berkorelasi dengan matriks distal berdiferensiasi menjadi lempeng kuku
(Gbr. 8-6).
Gambar 8-6 Hubungan molekuler antara diferensiasi epitel kuku dan regenerasi digit. Sel punca kuku (NSC) dalam matriks
proksimal (lingkaran oranye gelap) memunculkan sel-sel matriks distal (lingkaran biru) dengan aktivasi Wnt (Wntless) dalam kondisi
homeostasis. Kedua sel matriks proksimal dan distal berdiferensiasi menjadi lempeng kuku (warna merah). Setelah amputasi di distal
(garis putus-putus merah), sel-sel epitel kuku mulai meregenerasi lokasi luka bersama dengan aktivasi Wnt signaling untuk
berdiferensiasi menjadi sel-sel matriks distal dan lempeng kuku. Aktivasi Wntless ini dalam epitel kuku diperlukan untuk
mempromosikan (panah biru) persarafan blastema (hijau), yang diperlukan (panah hijau) untuk ekspresi Fgf2 dalam regenerasi epitel
kuku (lingkaran biru). Selanjutnya, fibroblast growth factor 2 (FGF2) mempromosikan proliferasi (tanda panah hitam) sel
mesenkimal positif Runx2, yang pada akhirnya mengarah ke regenerasi digit. (Diadaptasi dari Takeo M, Chou WC, Sun Q, et al.
Aktivasi Wnt dalam pertumbuhan kuku pasangan epitel kuku ke regenerasi digit. Nature. 2013; 499 (7457): 228-232.) Amputasi pada
tingkat matriks distal yang mengekspresikan Wntless (tetapi NSC dalam matriks proksimal tetap utuh), lokasi luka ditutupi oleh
regenerasi sel epitel kuku, yang pada gilirannya mengaktifkan pensinyalan Wnt (Wntless) untuk berdiferensiasi menjadi sel matriks
distal dan lempeng kuku (lihat Gambar 8-6). Aktivasi jalur Wnt mempromosikan persarafan blastema melalui semaphorin 5a
(Sema5a, molekul panduan akson), yang diregulasi dalam epitel kuku, dan kontrol 3 minggu setelah amputasi. Sebaliknya, persarafan
diperlukan untuk ekspresi fibroblast growth factor 2 (FGF2) dalam regenerasi epitel kuku (lihat Gambar 8-6). Kemudian FGF2
mempromosikan proliferasi progenitor Runx2-positif atau osteoblas Sp7, yang pada akhirnya mengarah ke regenerasi digit yang
digabungkan (lihat Gambar 8-6). Menariknya, reseptor untuk ligan FGF2 FGFR1 diekspresikan dalam blastema mesenkimal
(progenitor Runx2); dengan demikian, jalur ERK dapat direkrut untuk mengaktifkan dan mempertahankan proliferasi mereka (lihat
Gambar 8-6).

Dengan demikian, diferensiasi kuku diatur
oleh mekanisme independen WNT yang terkait
dengan regenerasi digit. Memang, penghapusan
Wnt (pada β- catenin conditional knockout [KO]
tikus) menghasilkan kurangnya diferensiasi kuku
yang bermanifestasi dengan tidak adanya ekspresi
TopGal dalam matriks kuku (gen untuk jalur WNT)
dan ekspresi AE13 (penanda untuk keratinisasi sel
lempeng kuku), dan regenerasi tulang terhambat.
Selain itu, sel-sel progenitor Runx2,
mesenkimal, dan osteoblas Sp7 di bawah epitel
matriks kuku pada pada β- catenin conditional
knockout tidak distimulasi untuk berproliferasi atau
memproduksi BMP4. Selain itu, persarafan
Wntdependent dapat meningkatkan regenerasi digit
karena Sema5a diregulasi dalam epitel kuku 3
minggu setelah amputasi pada pada β- catenin
conditional knockout tikus. Data-data ini sepakat
bahwa denervasi (saraf dilepas melalui operasi
sebelum amputasi) menekan pertumbuhan blastema
sel yang serupa dengan yang diamati pada pada
conditional knockout tanpa ekspresi FGF2 dalam
epitel kuku setelah denervasi.34,35 Menariknya, dan diferensiasi kuku dan regenerasi digit
meskipun setelah amputasi sel-sel matriks kuku tampaknya menjadi mekanisme utama yang
proksimal, stabilisasi β- catenin menginduksi mengoordinasikan regenerasi jaringan epitel dan
ekspresi TCF1 dan regenerasi matriks distal dan mesenkimal dalam regenerasi digit mamalia (lihat
pembentukan sel-sel blastema yang dipersarafi Gambar 8-6). Memang, yang menarik, beberapa
dengan baik, stabilisasi β- catenin pada epitel kuku kelainan kuku pada manusia yang mungkin hanya
tidak mendorong regenerasi digit. Setelah amputasi memengaruhi kuku termasuk anonychia turunan
proksimal ke niche (ceruk) NSC. Oleh karena itu, dan displasia kuku kongenital terisolasi. Keluarga
epidermis matriks proksimal yang tersisa tidak yang terpengaruh dengan anonychia turunan
dapat menanggapi stabilisasi β- catenin, dan memiliki hipoplasia kuku yang parah di mana
regenerasi digit tidak dapat dipulihkan, yang mutasi pada R-spondin 4 (Rspo4), yang terlibat
berbeda dengan fungsi matriks distal. dalam jalur pensinyalan Wnt, diidentifikasi,
Hasil ini konsisten dengan penghambatan menunjukkan peran penting Rspo4 dalam
regenerasi ujung-ujung prope setelah ablasi Lgr6, perkembangan kuku.36
agonis penting dari jalur Wnt yang menandai NSC  
dan menghasilkan lempeng kuku.30 Selain itu, KESIMPULAN
ekspresi Lgr6 tidak hanya terbatas pada matriks Sel punca memiliki potensi pembaharuan diri
kuku tetapi lebih luas diekspresikan dalam subset jangka panjang dan mampu berdiferensiasi menjadi
sel di ujung digit, yaitu, dalam osteoblas tulang dan berbagai jenis sel yang berbeda. Kegigihan dan
kelenjar keringat ekrin. Oleh karena itu, sel yang multipotensi ini sangat penting untuk pemeliharaan
mengekspresikan Lgr6 tidak hanya menandai epitel jaringan selama homeostasis dan perbaikan. Karena
NSC tetapi juga berkontribusi pada blastema, yang potensi regeneratifnya yang luar biasa, memahami
menunjukkan tidak hanya langsung tetapi juga tidak proses pemeliharaan dan pengaturannya akan
langsung potensial untuk sel yang mengekspresikan membuktikan kegunaannya dalam regenerasi
Lgr6 selama regenerasi ujung-digit.30 Memang, jaringan dan pengobatan berbagai gangguan pada
peran ini telah dikonfirmasi oleh analisis tikus kuku.
minim-Lgr6, yang memiliki kedua kuku dan Penemuan saat ini menunjukkan model di
regenerasi tulang yang defek, namun masih belum mana sel-sel stem dalam organ kuku ada dalam dua
jelas apakah osteoblas Lgr6-positif berkontribusi mode aktivasi yang berbeda — siklus lambat dan
untuk fenotipe ini. yang berproliferasi aktif — untuk memenuhi
Dengan demikian, peran sel-sel ini dalam kebutuhan kuku yang terus tumbuh.24, 29 Data ini
homeostasis normal tulang dan regenerasi digit menunjukkan bahwa kuku mengandung gradien sel
masih harus ditentukan di masa depan. Secara punca dari lambat hingga cepat, dengan NPFSC
kolektif, fungsi ganda pensinyalan Wnt dalam garis siklus lambat di lipat proksimal, sel yang lebih aktif
keturunan NSC yang mengarahkan pembentukan
di IZ, dan akhirnya NCS berproliferasi cepat di
daerah matriks proksimal kuku.
Secara kolektif, model ini mendukung
pandangan terkini tentang dinamika dan potensi sel
punca dewasa di beberapa organ dan jaringan
selama homeostasis dan regenerasi. Sebagai contoh,
label, NPFSC, dan NCS proliferatif cepat
menghadirkan hierarki dinamis yang mirip dengan
yang dijelaskan dalam hfSCs di mana beberapa
hfSCs berpartisipasi dalam siklus rambut baru dan
hfSC lainnya dari atas selubung akar luar (ORS)
dari folikel yang tumbuh kembali. Tonjolan baru
dengan hfSC.37 Selama aktivasi tonjolan ini, gradien
sel hingga cepat diamati dalam ORS yang
membentang dari daerah tonjolan ke arah matriks.
Mengapa organ kuku memiliki dua populasi
sel punca? Satu jawaban mungkin datang dari
pengamatan sistem serupa dari dua populasi sel
punca dengan dinamika siklus sel yang berbeda di
usus. Di usus, sel-sel punca LRC siklus lambat telah
diidentifikasi dalam posisi +4 kripte usus yang
diekspresikan Bmi1.38,39 Sebaliknya, sel punca
siklus cepat juga ditemukan di bagian bawah kripte
yang mengekspresikan Lgr5,40 dan kedua populasi
sel punca mampu berdiferensiasi menjadi semua
garis keturunan usus.39 Yang menarik, baru-baru ini,
dengan tidak adanya sel punca Lgr5 + yang
berproliferasi cepat, sel punca Bmi1 dapat
mempertahankan pergantian normal usus sambil
mengisi kembali populasi sel punca Lgr5 +.41 Ini
menunjukkan bahwa sel Bmi1 +, terlokalisasi di
mana LRC ditemukan, bertindak sebagai populasi
sel punca cadangan. Dengan demikian, sistem
cadangan serupa antara dua populasi sel punca pada
kuku, yaitu NPFSC dan NSC, mungkin ada untuk
melindungi pemeliharaan organ kuku secara
keseluruhan. Dengan demikian, akan menarik untuk
membahas lebih lanjut hal ini di masa depan. Secara
keseluruhan, ini menunjukkan bahwa NSC dalam
matriks proksimal29 mengintegrasikan lipatan
proksimal yang berdekatan sebagai lokasi NPFSC
bifungsional.24 Secara kolektif, contoh-contoh ini
menandai plastisitas yang melekat pada populasi sel
punca dewasa dalam epitel kuku, dan NPFSC siklus
lambat dalam jaringan yang berproliferasi kuat ini
mungkin mewakili sistem cadangan untuk NSC saat
ada tekanan, cedera, atau penipisan populasi sel
punca.
Semua penemuan menarik tentang populasi
sel punca di organ kuku dan hubungan timbal
baliknya ini serta interaksi timbal balik antara sel
punca dan ceruk sel punca membantu mengungkap
konsep baru dalam biologi sel punca dan memiliki
potensi translasi besar yang dapat berdampak besar
pada pengobatan regeneratif. Memang, dalam
regenerasi ujung-digit tikus, telah ditunjukkan
bahwa walaupun epitel kuku dengan sel -sel
puncanya sangat penting untuk mengatur proses ini,
lain halnya dengan germ-layer dan turunan sel
punca / sel progenitor sangat penting untuk berhasil
menyelesaikan regenerasi ini.42 Dengan demikian,
di masa depan, penelitian ini berpotensi
mengembalikan anatomi dan struktur fungsional
dan mengatur penuh regenerasi digit, termasuk
tulang, persarafan, dan pembuluh darah, dan kulit
bersama dengan kuku, karena itu menguntungkan
individu dari amputasi digit.
Hasil ini telah menunjukkan hubungan
langsung antara diferensiasi NSC dan regenerasi
digit dan menunjukkan bahwa NSC mungkin
memiliki potensi terapeutik untuk berkontribusi di lipatan proksimal ventral dan matriks kuku
terhadap pengembangan pengobatan baru untuk mungkin memberikan pemahaman penting dari
orang yang diamputasi. Ini adalah masalah yang biologi organ kuku pada tingkat molekuler, yang
sangat penting karena banyak orang diamputasi jari dapat berpotensi memberikan wawasan merancang
tangan atau kaki di seluruh dunia karena terapi translasi untuk menumbuhkan kembali
kecelakaan. Data regenerasi kuku dan digit baru- anggota tubuh yang lebih besar dan jaringan
baru ini mulai membuka jalan menuju terbukanya nonregeneratif lainnya di masa depan. Oleh karena
mekanisme mendasar yang diperlukan untuk itu, menentukan potensi regeneratif NSCs dan
mengekspos potensi regeneratif ini. Oleh karena itu, NPFSCs ini dan mekanisme molekuler yang
penemuan baru dalam biologi kuku kemungkinan mengaturnya secara in vivo (dengan maksud agar
besar akan meningkatkan pemahaman kita tentang terapi baru) dapat muncul menuju keberhasilan
mekanisme mendasar yang diperlukan untuk regenerasi organ kuku dan penyembuhan luka,
mengatur regenerasi digit dengan peluang untuk termasuk perawatan pasien yang diamputasi.
membuka potensi regeneratif luas untuk menyusun
kembali seluruh anggota tubuh di luar regenerasi
digit.
Meskipun studi lebih lanjut diperlukan
untuk karakterisasi lebih lanjut dari populasi sel
punca ini dalam organ kuku, data ini dapat memberi
sedikit petunjuk pada penanda sel punca yang
diduga untuk kuku manusia di masa depan.
Memang, yang menarik, pengamatan awal pada
manusia dari lipatan proksimal ventral diusulkan
menjadi NSC pada kuku manusia embrionik yang
sedang berkembang berdasarkan pada ekspresi
penanda sel punca, K15, K19, dan PHLDA1 dengan
karakteristik diam-diam yang mungkin mewakili
NPFSC pada tikus.23 Sebaliknya, matriks kuku
manusia mengandung penanda sel yang sangat
proliferatif yakni Ki67, mirip dengan matriks kuku
tikus, yang mungkin mirip seperti NSCs sel punca
yang sangat proliferatif pada matriks proksimal
tikus.23 Dengan demikian, identifikasi lanjut,
karakterisasi, dan isolasi dari dua populasi yang
berbeda dari sel punca di kuku organ pada manusia