Deteksi antigen dalam diagnosis infeksi SARS-CoV-2
menggunakan imunoasai cepat
Panduan interim
11 September 2020
Latar belakang
Sejak awal pandemi COVID-19, laboratorium-
laboratorium telah terus menggunakan tes amplifikasi
asam nukleat (NAAT) seperti real time reverse-
transcription polymerase chain reaction (rRT-PCR)
untuk mendeteksi SARS-CoV-2, virus penyebab
penyakit tersebut. Di banyak negara, akses pada bentuk
tes ini menjadi tantangan. Tes diagnostik deteksi antigen
spesifik infeksi SARS-CoV-2 yang lebih andal tetapi
lebih terjangkau dan cepat sedang dikembangkan dan
dicari. Tes diagnostik deteksi antigen dirancang untuk
secara langsung mendeteksi protein SARS-CoV-2 yang
dihasilkan oleh virus yang bereplikasi di sekresi saluran
pernapasan. Tes ini dikembangkan untuk penggunaan
berbasis laboratorium dan dekat pasien dan disebut tes
diagnostik cepat, atau RDT. Lanskap pengembangan tes
diagnostik ini bersifat dinamis di mana hampir seratus
perusahaan mengembangkan atau membuat tes cepat
untuk deteksi antigen SARS-CoV-2 (1).
Dokumen ini memberikan anjuran mengenai potensi
peran RDT deteksi antigen (Ag-RDT) dalam diagnosis
COVID-19 dan perlunya pemilihan tes dengan teliti.
Informasi mengenai Ag-RDT dalam dokumen ini
memutakhirkan panduan yang diberikan dalam
pernyataan keilmuan yang berjudul WHO Advice on use
of point of care immunodiagnostics test for COVID-19
yang diterbitkan pada tanggal 8 April 2020. Panduan
penggunaan Ag-RDT akan dimutakhirkan secara berkala
seiring tersedianya bukti baru.
Sebagian besar Ag-RDT untuk COVID-19
menggunakan metode imunodeteksi sandwich dengan
format tes alur lateral yang mudah digunakan dan umum
dipakai untuk tes HIV, malaria, dan influenza. Ag-RDT
biasanya terdiri dari kaset plastik dengan rongga sampel
dan penyangga dan strip matriks nitroselulosa dengan
garis tes dengan antibodi terikat untuk kompleks antigen-
antibodi terkonjugasi target dan garis kontrol dengan
antibodi terikat untuk antibodi terkonjugasi. Dalam hal
RDT SARS-CoV-2, analit targetnya seringkali protein
nukleokapsid virus tersebut yang berjumlah lebih
banyak. Biasanya, semua material yang diperlukan untuk
melakukan tes, termasuk material pengambilan sampel
selain penghitung waktu, disediakan di dalam alat yang
dijual di pasaran.
-1-
Setelah spesimen saluran pernapasan diambil dan
dioleskan ke strip tes, hasilnya dibaca oleh operator
dalam waktu 10 sampai 30 menit dengan atau tanpa
bantuan instrumen pembaca. Penggunaan pembaca
menstandardisasi interpretasi hasil tes sehingga
mengurangi perbedaan interpretasi asai oleh operator
yang berbeda, tetapi memerlukan perlengkapan
pendukung. Sebagian besar tes yang saat ini diproduksi
memerlukan sampel usapan nasal atau nasofaringeal,
tetapi perusahaan-perusahaan sedang meneliti kinerja tes
mereka jika menggunakan jenis sampel alternatif seperti
air liur, cairan oral, dan sistem-sistem pengambilan
sampel untuk dapat memperluas opsi penggunaan dan
untuk memfasilitasi tes yang aman dan efisien. Secara
umum, kemudahan penggunaan dan singkatnya waktu
ketersediaan hasil Ag-RDT berpotensi memperluas
akses pada tes dan mengurangi penundaan diagnosis
dengan cara bergeser ke tes pasien dengan gejala awal
secara terdesentralisasi. Sisi sebaliknya dari kemudahan
pengoperasian Ag-RDT adalah sensitivitas yang lebih
rendah dibandingkan NAAT. Sangat sedikit Ag-RDT
SARS-CoV-2 yang sudah menjalani kajian regulasi
ketat. Hanya empat tes yang telah menerima Emergency
Use Authorization (EUA/izin penggunaan darurat)
United States Food and Drug Administration (US FDA),
dan hanya dua tes lain yang telah disetujui oleh
Pharmaceutical and Medical Devices Agency Jepang.
Hanya tiga perusahaan yang telah menyerahkan
dokumen untuk prosedur Emergency Use Listing
(EUL/daftar penggunaan darurat) WHO (2, 3).
Data tentang sensitivitas dan spesifisitas Ag-RDT untuk
SARS-CoV-2 yang sekarang ada diambil dari penelitian-
penelitian yang memiliki desain penelitian dan merek
sasaran evaluasi yang beragam. Penelitian-penelitian ini
menunjukkan bahwa sensitivitas Ag-RDT terhadap
sampel dari saluran pernapasan atas (usap nasal atau
nasofaringeal) tampak banyak berbeda-beda jika
dibandingkan NAAT, dengan rentang 0-94% (4-13)
tetapi spesifisitasnya konsisten dilaporkan tinggi
(>97%). Meskipun lebih banyak bukti aspek kinerja dan
operasional di lapangan masih diperlukan, Ag-RDT
paling mungkin bekerja dengan baik pada pasien dengan
jumlah virus tinggi (nilai Ct ≤25 atau >106 salinan
genomik virus/mL), yang biasanya terjadi pada fase
prasimtomatik (1-3 hari sebelum munculnya gejala) dan
fase simtomatik awal (dalam waktu 5-7 hari pertama
penyakit) penyakit ini (14, 15). Hal ini menjadi
 Deteksi antigen dalam diagnosis infeksi SARS-CoV-2 menggunakan imunoasai cepat: panduan interim
kesempatan untuk diagnosis awal dan interupsi transmisi
melalui isolasi terarah dan penentuan kohort kasus-kasus
yang paling infeksius dan kontak-kontak eratnya (16).
Pasien yang menunjukkan presentasi lebih dari 5-7 hari
sejak munculnya gejala lebih mungkin membawa jumlah
virus yang lebih rendah, dan kemungkinan hasil negatif
palsu Ag-RDT lebih tinggi.
Meskipun kinerjanya diperkirakan mengalami batasan-
batasan ini, jika digunakan dan diinterpretasikan dengan
tepat Ag-RDT dapat memainkan peran penting dalam
memandu tatalaksana pasien, pengambilan keputusan
kesehatan masyarakat, dan surveilans COVID-19.
Setidaknya, Ag-RDT perlu mengidentifikasi jauh lebih
banyak kasus daripada yang terlewat (sensitivitas ≥80%)
dan memiliki spesifisitas yang sangat tinggi (≥97-100%).
Berdasarkan parameter-parameter kinerja ini, panduan
interim ini mengajukan beberapa potensi peran Ag-RDT
dan memberikan rekomendasi-rekomendasi umum
untuk pemilihan tes serta pertimbangan-pertimbangan
utama untuk implementasinya.
Rekomendasi-rekomendasi umum untuk penggunaan
Ag-RDT SARS-CoV-2
1. Ag-RDT SARS-CoV-2 yang memenuhi persyaratan
kinerja minimum sensitivitas ≥80% dan spesifisitas
≥97% dibandingkan asai referensi NAAT 1 dapat
digunakan untuk mendiagnosis infeksi SARS-CoV-2 di
situasi-situasi di mana NAAT tidak tersedia atau waktu
ketersediaan hasil tidak memberikan manfaat klinis.
Untuk mengoptimalisasi kinerja, tes dengan Ag-RDT
sebaiknya dilakukan oleh operator terlatih dengan sangat
mematuhi instruksi pembuat alat tes dalam waktu 5-7
hari sejak munculnya gejala.
2. Skenario-skenario yang sesuai untuk penggunaan Ag-
RDT SARS-CoV-2 meliputi:
i) Untuk merespons wabah COVID-19 di daerah,
lembaga, dan komunitas semi-tertutup yang
terpencil di mana NAAT tidak tersedia. Hasil Ag-
RDT positif dari beberapa suspek akan sangat
mengindikasikan wabah COVID-19 dan
memungkinkan implementasi segera langkah-
langkah pengendalian infeksi. Jika memungkinkan,
semua (atau setidaknya sebagian) sampel Ag-RDT
yang positif sebaiknya dibawa ke laboratorium yang
memiliki kemampuan NAAT untuk dikonfirmasi.
ii) Untuk mendukung investigasi wabah (misalnya,
di kelompok tertutup atau semi-tertutup seperti
sekolah, panti wreda, kapal pesiar, lembaga
pemasyarakatan, tempat kerja, asrama, dll.) Pada
wabah COVID-19 yang sudah dikonfirmasi NAAT,
1 Berdasarkan evaluasi yang dirancang dan dilaksanakan dengan
baik pada populasi yang representatif
-2-
Ag-RDT dapat digunakan untuk melakukan skrining
atas orang-orang yang berisiko dan untuk segera
mengisolasi kasus positif (dan memulai upaya
pelacakan kontak) serta memprioritaskan
pengambilan sampel NAAT dari orang-orang yang
hasil tes RDT-nya negatif.
iii) Untuk memantau tren insidensi penyakit di
masyarakat, terutama pada pekerja esensial dan
tenaga kesehatan selama wabah atau di daerah
dengan transmisi komunitas meluas di mana nilai
prediktif positif dan negatif hasil Ag-RDT cukup
untuk memungkinkan dilakukannya pengendalian
infeksi yang efektif. 2
iv) Jika terjadi transmisi komunitas meluas, RDT
dapat digunakan untuk deteksi dan isolasi dini kasus-
kasus positif di fasilitas layanan kesehatan,
pusat/tempat tes COVID-19, panti wreda, lembaga
pemasyarakatan, dan sekolah; pada tenaga garis
depan dan tenaga kesehatan; dan untuk pelacakan
kontak. Perlu dicatat bahwa tatalaksana aman untuk
pasien dengan sampel yang negatif RDT bergantung
pada kinerja RDT dan prevalensi COVID-19 (lihat
Lampiran). Hasil Ag-RDT yang negatif tidak bisa
sepenuhnya menyingkirkan kemungkinan infeksi
aktif COVID-19; karena itu, tes ulang atau lebih
disarankan tes konfirmasi (NAAT) sebaiknya
dilakukan jika memungkinkan (Gambar 1), terutama
pada pasien simtomatik.
v) Meskipun tidak secara khusus diizinkan untuk
penggunaan tes pada kontak asimtomatik,
penggunaan Ag-RDT demikian dapat menjadi
pertimbangan, karena kasus asimtomatik
menunjukkan jumlah virus yang mirip dengan kasus
simtomatik (17), meskipun dalam situasi ini hasil tes
Ag-RDT negatif sebaiknya tidak membatalkan
persyaratan karantina atas seorang kontak.
3. Dalam pertama kali memulai penggunaan klinis Ag-
RDT, negara-negara perlu mempertimbangkan memilih
tempat-tempat di mana tes konfirmasi NAAT sudah
tersedia sehingga staf dapat yakin akan asai tersebut,
mengonfirmasi kinerja RDT yang dipilih, dan
menyelesaikan setiap masalah implementasi yang
dihadapi. Di setiap tempat di mana NAAT akan
digunakan untuk tes konfirmasi pada pasien yang
diskrining menggunakan Ag-RDT, sampel kedua tes
diambil pada waktu yang hampir sama, atau paling
lambat dalam jarak 2 hari.
4. Dalam situasi di mana tes konfirmasi NAAT tidak
memungkinkan, validitas setiap indikasi yang hasilnya
mungkin tidak tepat harus dicurigai, seperti misalnya,
pasien yang hasil tesnya positif tetapi sindrom klinisnya
2 Terdapat risiko tinggi hasil positif palsu di lingkungan dengan
prevalensi rendah; nilai prediktif positif adalah 78% jika prevalensi
10% dan kriteria-kriteria kinerja minimal terpenuhi, dan meningkat
hingga 93% jika prevalensinya 20%
 Deteksi antigen dalam diagnosis infeksi SARS-CoV-2 menggunakan imunoasai cepat: panduan interim
tidak sesuai dengan COVID-19 atau pasien di
lingkungan dengan prevalensi rendah yang hasil tesnya
positif (di mana nilai prediktif hasil tes positif rendah dan
risiko positif palsu tinggi). Peringatan-peringatan lain
mencakup pasien yang hasil tesnya negatif tetapi
memiliki sindrom yang sesuai, merupakan kontak erat
dari seorang kasus, atau dites di lingkungan dengan
prevalensi tinggi. Dalam situasi-situasi tersebut, tes
ulang sebaiknya dipertimbangkan, terutama jika ada
ketidakpastian tentang penanda visual hasilnya (garis
tampak redup atau kecukupan pengambilan sampel.
5. Penggunaan Ag-RDT tidak direkomendasikan di
tempat-tempat atau populasi-populasi dengan prevalensi
penyakit yang diperkirakan rendah (misalnya, skrining di
pintu masuk negara, kegiatan donor darah, bedah
elektif), terutama jika tes konfirmasi NAAT tidak
langsung tersedia. Penggunaan tersebut tidak
memungkinkan sampai tersedia data dari penelitian yang
berkualitas yang mengonfirmasi spesifisitas yang tinggi
(>99%) dari satu atau lebih alat tes Ag-RDT di pasaran.
Pemilihan tes yang akan diadakan dan
digunakan:
Terlepas dari keterbatasan jumlah Ag-RDT SARS-CoV-
2 yang saat ini tersedia di pasaran, produk-produk
dengan kualitas dan kinerja yang beragam diperkirakan
akan segera memasuki pasaran. Seperti yang dicatat di
Latar belakang, sebagian besar Ag-RDT SARS-CoV-2
di pasaran menggunakan format alur lateral dengan
indikator dari emas koloid atau pewarna lain yang jelas.
Beberapa sistem, seperti sebagian sistem yang mendapat
persetujuan dari US FDA berdasarkan EUA,
menggunakan indikator alternatif yang dapat
meningkatkan sensitivitas tetapi memerlukan alat khusus
untuk membaca dan menginterpretasi hasilnya.
Ada beberapa faktor yang perlu dipertimbangkan saat
memilih Ag-RDT untuk skenario-skenario di bagian
rekomendasi di atas. Faktor-faktor ini meliputi:
1. Kualitas data yang digunakan untuk
memvalidasi tes. Pertimbangan sebaiknya
meliputi sumber data (independen atau internal/
disponsori perusahaan) dan desain penelitian
(misalnya, standar referensi yang digunakan,
jenis spesimen, waktu antara pengambilan
sampel dan pelaksanaan tes, dan jumlah hari
sejak gejala muncul), jumlah subjek yang ikut
serta, dan lingkungan pelaksanaan penelitian.
Karena konsentrasi virus pada spesimen adalah
prediktor terbesar sensitivitas tes, pemilihan
pasien dan lokasi penelitian sangatlah penting.
Penelitian klinis prospektif biasanya lebih baik
dibandingkan penelitian retrospektif. Data dari
penelitian independen yang disponsori
perusahaan bermanfaat jika penelitiannya
dilakukan dengan baik.
-3-
2. Kinerja yang dilaporkan. Data yang
menunjukkan kinerja sebuah RDT harus dikaji
dengan teliti sebelum pengadaan dimulai.
Karena rendahnya prevalensi infeksi SARS-
CoV-2 yang masih aktif bahkan di tempat-
tempat dengan transmisi komunitas, diperlukan
spesifisitas yang tinggi ≥97% dan idealnya
≥99%) untuk menghindari banyak hasil positif
palsu. Sensitivitas bergantung pada status pasien
yang diteliti (derajat kesakitan, jumlah hari sejak
munculnya gejala, dll.) serta kualitas produk,
tetapi sensitivitas ini harus mencapai minimum
≥80%. Ukuran yang dapat digunakan adalah
sensitivitas tes pada pasien dengan ambang
siklus (Ct) rRT-PCR di bawah nilai tertentu
(misalnya, 28 atau 30), karena diperkirakan virus
ada dalam jumlah besar pada sampel saluran
pernapasan saat tes dilakukan dalam rentang ini,
dan sensitivitas tes juga tinggi (di atas 90%
menurut penelitian-penelitian yang sudah dan
belum diterbitkan) (4, 11). Namun, penting
untuk dicatat bahwa nilai Ct pada suatu
konsentrasi RNA target yang menjadi input
berbeda dari satu asai rRT-PCR dengan asai
rRT-PCR lainnya dan tidak mutlak kuantitatif.
3. Kualitas pembuatan dan status regulasi. Tes
sebaiknya diadakan dari pembuat-pembuat yang
bekerja berdasarkan sistem pengelolaan kualitas
(misalnya, ISO 13485) dan diberi setidaknya
persetujuan regulasi daerah atau hak menjual
bebas oleh negara pembuat. Seperti semua alat
diagnostik in vitro yang akan digunakan secara
klinis, RDT harus menjalani kajian regulasi yang
ketat dan transparan. Persetujuan atau izin dari
badan regulasi yang ketat dan/atau EUL WHO
sebaiknya sudah tersedia saat barang diadakan.
4. Kapasitas pembuatan dan bukti lanjutan
kualitas. Banyak perusahaan baru yang tidak
memiliki riwayat keberhasilan dalam
pembuatan, penjualan, dan dukungan alat
diagnostik in vitro memasuki pasar membawa
Ag-RDT SARS-CoV-2. Pengadaan perlu
mempertimbangkan produk-produk lain yang
tersedia dari perusahaan tersebut (terutama tes
alur lateral), persetujuan regulasi yang dimiliki
untuk produk diagnostik non-darurat, dan
kapasitas pembuatan dan kapasitas surveilans
pascapemasaran perusahaan. Banyak
perusahaan mampu membuat prototipe
berkualitas tinggi atau menyelesaikan tes dalam
jumlah kecil tetapi kesulitan meningkatkan
pembuatan untuk memenuhi permintaan global.
5. Distribusi dan dukungan teknis. Kapasitas
distribusi dan dukungan produk suatu pemasok
perlu dipertimbangkan, terutama di negara-
negara berpenghasilan rendah dan menengah,
terlebih lagi untuk tes yang membutuhkan
perlengkapan tambahan seperti pembaca.
 Deteksi antigen dalam diagnosis infeksi SARS-CoV-2 menggunakan imunoasai cepat: panduan interim
6. Kondisi pengiriman dan penyimpanan serta
masa hidup. Kapasitas bertahan di bawah
tekanan suhu dan masa hidup yang panjang
sangat penting dalam kemudahan penggunaan
Ag-RDT. Untuk produk-produk baru, masa
hidup harus diperkirakan berdasarkan studi
stabilitas dipercepat (biasanya dengan suhu yang
lebih tinggi), tetapi target masa hidup sebaiknya
minimal 12-18 bulan pada suhu 30 °C dan
idealnya 40 °C. Kebutuhan rantai dingin untuk
pengiriman dan/atau penyimpanan akan banyak
meningkatkan biaya dan kompleksitas
pengadaan dan distribusi.
7. Kebutuhan pengambilan spesimen. Ag-RDT
SARS-CoV-2 memiliki kebutuhan yang berbeda
terkait jenis spesimen, jumlah langkah
pemrosesan, kebutuhan waktu akurasi,
penggunaan, dan interpretasi hasil. Hal-hal ini
akan memengaruhi tingkat pelatihan dan
pengawasan yang dibutuhkan. Karena itu,
penilaian kemudahan penggunaan merupakan
pertimbangan penting di samping kinerja tes.
8. Isi alat tes. Isi alat tes standar tidak selalu
mencakup semua yang dibutuhkan untuk
melaksanakan dan mengendalikan kualitas tes,
dan isi ini harus diverifikasi sebelum pembelian
dilakukan. Beberapa Ag-RDT SARS-CoV-2
yang tersedia di pasaran menggunakan alat
pembaca.
9. Biaya tes. Biaya tes akan berbeda-beda sesuai
tes dan volume yang akan dibeli. Secara umum,
biaya Ag-RDT seharusnya tidak semahal tes
PCR. Biaya transportasi, tarif impor,
penyimpanan, pelatihan (dan pengawasan)
pengguna akhir), serta kegiatan tes pengendalian
kualitas pascapembelian yang diperlukan untuk
mendukung penggunaan RDT secara berkualitas
juga harus dipertimbangkan.
10. Ketersediaan, kelengkapan, dan kejelasan
instruksi penggunaan. Ketersediaan,
kelengkapan, dan instruksi penggunaan harus
jelas, diberi ilustrasi, dan ramah pengguna bagi
spesialis non-laboratorium.
Pertimbangan-pertimbangan implementasi:
1. Meskipun Ag-RDT lebih mudah dilakukan
dibandingkan NAAT, penggunaan Ag-RDT
masih harus mengikuti dengan ketat prosedur
anjuran pemasok serta memperhatikan
dokumentasi, pelaksanaan langkah-langkah
yang bergantung pada waktu atau volume,
kondisi penyimpanan, masa hidup,
perlengkapan, dan pengelolaan persediaan.
Semua operator tes harus dilatih tentang
pengambilan sampel, keamanan biologis terkait,
kinerja tes, interpretasi dan pelaporan hasil, serta
pengelolaan limbah. Langkah-langkah
pengendalian kualitas juga harus dilaksanakan.
-4-
2. Surveilans pasca-pemasaran dengan
pengawasan regulasi sangat penting untuk
menemukan kekurangan kinerja produk dan
merupakan persyaratan penting bagi pembuat.
Sistem kesehatan harus memastikan adanya
pemantauan dan evaluasi kegiatan tes diagnostik
COVID-19 dan mekanisme yang jelas untuk
masalah pelaporan (18).
3. Penggunaan sistem deteksi dengan alat-alatnya
membutuhkan pelatihan-pelatihan tambahan
(penggunaan instrumen, kalibrasi sesuai
kebutuhan, kondisi operasional) dan
infrastruktur yang memadai, seperti sumber
listrik yang dapat diandalkan.
4. Pengambilan sampel adalah salah satu faktor
terpenting yang berdampak pada kinerja Ag-
RDT. Instruksi penggunaan harus diikuti secara
teliti, dan setiap anggota staf yang mengambil
sampel harus dilatih tentang metodologinya.
5. Setiap tes memiliki metode khusus pengolahan
sampel setelah pengambilan. Instruksi harus
diikuti dengan tepat, dan reagen alternatif tidak
boleh digunakan (misalnya, air atau cairan lain,
bukan penyangga pengencer/pencampur).
6. Harus ada persyaratan keamanan biologis untuk
operator – alat pelindung diri, kantong sampah
bahaya biologis, dan ventilasi yang baik sangat
penting (19).
Metode
Dokumen Panduan Interim ini menggambarkan
kemungkinan skenario-skenario di mana Ag-RDT dapat
digunakan dan tidak dapat digunakan berdasarkan
kriteria kinerja minimal. Persyaratan kinerja minimal
untuk Ag-RDT ditetapkan melalui proses penyusunan
formal profil produk target (TPP) untuk alat diagnostik
SARS-CoV-2 prioritas (20). Persyaratan ini
mempertimbangkan perkembangan pemahaman
dinamika temporal peluruhan virus dan transmisibilitas
serta manfaat yang diharapkan tes lebih dini dan
diperluas.
Pencarian laporan peer-reviewed dan diterbitkan serta
laporan pracetak tentang keakuratan tes deteksi antigen
SARS-CoV-2 di titik perawatan/dekat pasien dilakukan
dari basis data PubMed dan medRxiv. Sebuah kajian
sistematis akurasi tes diagnostik diidentifikasi (21).
Selain itu, laporan independen yang tidak diterbitkan
tentang kinerja dua Ag-RDT SARS-CoV-2 dibagikan
secara tertutup dengan WHO. Panduan interim ini dikaji
oleh anggota-anggota WHO Reference Laboratory
Network for COVID-19 dan anggota-anggota WHO
COVID-19 Diagnostics Target Product Profile Review
Group, serta pakar-pakar eksternal lainnya.
 Deteksi antigen dalam diagnosis infeksi SARS-CoV-2 menggunakan imunoasai cepat: panduan interim
Kami menyadari kekurangan pada bukti-bukti yang
tersedia, seperti kecilnya jumlah sampel, pemilihan
sampel yang condong berdasarkan ada atau tidaknya
infeksi SARS-CoV-2, dan kurangnya informasi
terperinci di dalam penelitian-penelitian yang ditujukan
untuk memvalidasi tes terkait status gejala atau waktu
sejak munculnya gejala. Selain itu, kurangnya data dari
kasus asimtomatik, penggunaan tes yang tidak sesuai
instruksi pembuat, dan kinerja tes di laboratorium
dibandingkan di titik perawatan/dekat pasien membatasi
sifat umum rekomendasi-rekomendasi ini. Namun,
disimpulkan bahwa beberapa Ag-RDT mungkin
setidaknya memenuhi dan mungkin melebihi persyaratan
kinerja minimal pada tahap awal penyakit (dalam waktu
5-7 hari, saat jumlah virus dan risiko transmisi berada di
puncak). Memperluas tes agar berpotensi memutus
transmisi melalui penggunaan Ag-RDT dianggap lebih
bermanfaat dibandingkan tidak melakukan tes atau
melakukan tes yang hasilnya tidak dapat
dipertimbangkan dalam pengendalian infeksi akibat
waktu ketersediaan hasil yang sangat lama atau risiko
negatif palsu pada pasien dengan beban virus yang
rendah.
Kinerja tes
Kinerja Ag-RDT ditentukan oleh sensitivitas dan
spesifisitas tes untuk mendeteksi infeksi dibandingkan
dengan standar referensi, yaitu NAAT (biasanya rRT-
PCR).
Sensitivitas adalah persentase kasus positif menurut
standar referensi NAAT yang terdeteksi positif oleh Ag-
RDT yang dievaluasi.
Gambar 1. Bagan kemungkinan alur penggunaan RDT berbasis antigen (yang memenuhi kriteria kinerja) di
tempat dengan transmisi komunitas meluas dan tidak ada kapasitas NAAT.
-5-
Spesifisitas adalah persentase kasus negatif menurut
standar referensi NAAT yang terdeteksi negatif oleh Ag-
RDT yang dievaluasi. Prevalensi penyakit di masyarakat
yang dites sangat berdampak pada nilai prediktif suatu
hasil positif atau negatif (lihat Lampiran). Karena itu,
manfaat klinis suatu hasil tes positif atau negatif akan
bergantung pada tindakan apa yang diambil berdasarkan
hasil tes ini saat diinterpretasikan dalam konteks
prevalensi lokal.
Secara umum, semakin tinggi prevalensi infeksi SARS-
CoV-2 pada populasi yang dites, semakin tinggi orang
yang hasil tesnya positif mengalami COVID-19.
Semakin rendah prevalensi pada masyarakat, semakin
mungkin seorang pasien yang hasil tesnya negatif tidak
mengalami penyakit ini (lihat Lampiran). Sebagai
contoh, jika prevalensi infeksi SARS-CoV-2 yang aktif
di masyarakat adalah 1%, bahkan tes yang 99% spesifik
pun akan memberikan nilai prediktif positif yang buruk,
karena separuh hasil tes positif adalah positif palsu.
Peran RDT deteksi antigen untuk tatalaksana kasus dan
surveilans COVID-19
Penggunaan Ag-RDT dapat dipertimbangkan di negara
atau daerah di mana terjadi transmisi komunitas meluas,
di mana sistem kesehatan kelebihan beban, dan di mana
tidak memungkinkan melakukan tes atas semua kasus
suspek atau kasus suspek satu pun dengan NAAT.
Seperti semua tes diagnostik, tetapi terutama seperti tes
diagnostik dengan sensitivitas dan/atau spesifisitas yang
suboptimal, agar hasil tes RDT dapat diinterpretasikan
dan dijadikan dasar tindakan, prevalensi penyakit
(menurut standar referensi) harus diperkirakan
berdasarkan surveilans, karena prevalensi ini
 Deteksi antigen dalam diagnosis infeksi SARS-CoV-2 menggunakan imunoasai cepat: panduan interim

Tabel 1. Situasi di mana Ag-RDT SARS-CoV-2 sebaiknya tidak digunakan, menurut informasi yang ada saat ini

Jangan gunakan Ag-RDT SARS-CoV-2 Penjelasan

Pada orang tanpa gejala kecuali jika orang Probabilitas sebelum tes (kemungkinan pasien terkena penyakit
tersebut adalah kontak dari kasus konfirmasi sebelum tes berdasarkan epidemiologi, kontak kasus, temuan
klinis) rendah.
Jika tidak ada kasus atau hanya ada kasus Ag-RDT tidak direkomendasikan untuk tujuan surveilans rutin
sporadis atau tatalaksana kasus dalam situasi seperti ini. Hasil tes positif
kemungkinan positif palsu. Tes molekuler lebih disarankan.
Keamanan biologis dan langkah pencegahan dan Untuk melindungi tenaga kesehatan, pengambilan sampel saluran
pengendalian infeksi yang sesuai tidak tersedia pernapasan untuk tes apa pun pada pasien suspek COVID-19
diwajibkan menggunakan sarung tangan, jubah, masker, dan
pelindung wajah atau kacamata gogel (19, 22, 23)
Tatalaksana pasien tidak berubah berdasarkan Jika pasien dengan hasil tes positif dan negatif dirawat dengan
hasil tes cara yang sama karena NPP dan/atau NPN tidak diketahui atau
rendah, tes tidak memberikan manfaat.
Untuk skrining pintu masuk negara di bandara Prevalensi COVID-19 kemungkinan akan sangat bervariasi di
atau perbatasan antara para pelaku perjalanan, sehingga NPP dan NPN hasil tes
tidak mungkin ditentukan. Hasil tes positif dan negatif
memerlukan tes konfirmasi untuk meningkatkan NPP dan NPN
agar keputusan dapat diambil.
Pada skrining sebelum donor darah Hasil RDT positif tidak selalu berkorelasi dengan adanya virus
dalam darah. Pendonor darah yang tidak menunjukkan gejala
tidak memenuhi definisi kasus suspek (24).

menentukan nilai prediktif positif (NPP) dan negatif
(NPN) RDT (lihat Lampiran). Proses yang diusulkan
untuk pemanfaatan Ag-RDT untuk tatalaksana kasus
COVID-19 di tempat dengan transmisi komunitas
meluas ditunjukkan di Gambar 1. Di tempat tersebut,
probabilitas COVID-19 sebelum tes (kemungkinan
pasien terkena COVID-19 sebelum hasil tesnya
diketahui, berdasarkan faktor-faktor epidemiologis dan
klinis) relatif tinggi, dan hasil tes positif memiliki nilai
prediktif yang tinggi. Demikian juga, di tempat dengan
transmisi komunitas, nilai prediktif hasil RDT negatif
mungkin rendah, bahkan dengan adanya indikator-
indikator epidemiologis atau klinis pajanan atau penyakit
COVID-19.
Faktor-faktor yang memengaruhi kinerja tes
Sebagaimana disebutkan di atas, banyak faktor dapat
berdampak pada kinerja Ag-RDT. Karena itu, temuan
klinis dapat bervariasi. Hal-hal berikut harus
dipertimbangkan:
• faktor-faktor pasien seperti waktu sejak
munculnya penyakit dan tipe sampel status
imun;
• faktor-faktor virus seperti konsentrasi dan masa
peluruhan antigen virus dan variasi struktural
pada antigen target, reaktivitas silang dengan
virus lain.
• Target protein khusus, karena beberapa antigen
diproduksi dengan konsentrasi yang lebih tinggi
dibandingkan antigen lain, misalnya
nukleokapsid atau protein spike;
• isu desain atau kualitas produk, seperti:
- jumlah antibodi atau afinitas antigen
(-antigen) sasaran tidak mencukupi;
- pengemasan buruk dan pajanan pada
panas dan kelembapan saat dipindahkan
dan/atau disimpan dengan tidak tepat,
sehingga merusak antibodi alat tes; dan
- instruksi yang tidak jelas yang dapat
berdampak pada kinerja alat tes; dan
• pelatihan atau kompetensi operator tes yang
tidak memadai, yang dapat mengakibatkan
kekeliruan dalam persiapan Ag-RDT,
pelaksanaan tes, atau interpretasi hasilnya,
sehingga kesimpulan keliru.

• Jenis (saluran pernapasan atas atau bawah),
kualitas, dan pengolahan sampel, termasuk
kondisi penyimpanan dan pelarutan di dalam
media transportasi virus;
-6-
Pemutakhiran lebih lanjut dan rekomendasi spesifik
produk
WHO bekerja sama dengan kelompok-kelompok yang
mengevaluasi kinerja dan karakteristik operasional Ag-
RDT SARS-CoV-2 di pasaran untuk mengumpulkan
 Deteksi antigen dalam diagnosis infeksi SARS-CoV-2 menggunakan imunoasai cepat: panduan interim
secara sistematis bukti yang muncul dan
mengoordinasikan laporan terbaru. Saat ini, belum ada
bukti yang memadai tentang kinerja dan penggunaan
operasional yang merekomendasikan produk tertentu
yang ada di pasaran.
Referensi
1. Foundation for Innovative New Diagnostics. SARS-
CoV-2 Diagnostic Pipeline 2020 [Tersedia dari:
https://www.finddx.org/covid-19/pipeline/.
2. U.S. Food & Drug Administration. In Vitro Diagnostics
EUAs 2020 [Tersedia dari: https://www.fda.gov/medical-
devices/coronavirus-disease-2019-covid-19-emergency-use-
authorizations-medical-devices/vitro-diagnostics-euas.
3. Agency PaMD. PMDA’s Efforts to Combat COVID-19
2020 [Tersedia dari: https://www.pmda.go.jp/english/about-
pmda/0002.html.
4. Porte L, Legarraga P, Vollrath V, Aguilera X, Munita
JM, Araos R, et al. Evaluation of novel antigen-based rapid
detection test for the diagnosis of SARS-CoV-2 in respiratory
samples. Int J Infect Dis. 2020:S1201- 9712(20)30405-7.
5. Diao B, Wen K, Chen J, Liu Y, Yuan Z, Han C, et al.
Diagnosis of Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2
Infection by Detection of Nucleocapsid Protein. medRxiv.
2020:2020.03.07.20032524.
6. Lambert-Niclot S, Cuffel A, Le Pape S, Vauloup-
Fellous C, Morand-Joubert L, Roque-Afonso AM, et al.
Evaluation of a Rapid Diagnostic Assay for Detection of
SARS-CoV-2 Antigen in Nasopharyngeal Swabs. J Clin
Microbiol. 2020;58(8).
7. Mertens P, De Vos N, Martiny D, Jassoy C, Mirazimi A,
Cuypers L, et al. Development and Potential Usefulness of
the COVID-19 Ag Respi-Strip Diagnostic Assay in a
Pandemic Context. Front Med (Lausanne). 2020;7:225-.
8. Blairon L, Mokrane S, Wilmet A, Dessilly G, Kabamba-
Mukadi B, Beukinga I, et al. Large-scale, molecular and
serological SARS-CoV-2 screening of healthcare workers in
a 4-site public hospital in Belgium after COVID-19 outbreak.
J Infect. 2020:S0163- 4453(20)30514-4.
9. Mak GC, Cheng PK, Lau SS, Wong KK, Lau CS, Lam
ET, et al. Evaluation of rapid antigen test for detection of
SARS-CoV-2 virus. Journal of clinical virology : the official
publication of the Pan American Society for Clinical
Virology. 2020;129:104500-.
10. Nagura-Ikeda M, Imai K, Tabata S, Miyoshi K,
Murahara N, Mizuno T, et al. Clinical evaluation of self-
collected saliva by RT-qPCR, direct RT-qPCR, RT-LAMP,
and a rapid antigen test to diagnose COVID-19. J Clin
Microbiol. 2020:JCM.01438-20.
11. Omi K, Takeda Y, Mori M. SARS-CoV-2 qRT-PCR Ct
value distribution in Japan and possible utility of rapid
antigen testing kit. medRxiv. 2020:2020.06.16.20131243.
12. Scohy A, Anantharajah A, Bodéus M, Kabamba- Mukadi
B, Verroken A, Rodriguez-Villalobos H. Low performance of
rapid antigen detection test as frontline testing for COVID-19
diagnosis. J Clin Virol. 2020;129:104455.
13. Weitzel T, Legarraga P, Iruretagoyena M, Pizarro G,
Vollrath V, Araos R, et al. Head-to-head comparison of four
-7-
antigen-based rapid detection tests for the diagnosis of
SARS-CoV-2 in respiratory samples. bioRxiv.
2020:2020.05.27.119255.
14. Weiss A, Jellingsø M, Sommer MOA. Spatial and
temporal dynamics of SARS-CoV-2 in COVID-19 patients:
A systematic review and meta-analysis. EBioMedicine.
2020;58.
15. Arons MM, Hatfield KM, Reddy SC, Kimball A, James
A, Jacobs JR, et al. Presymptomatic SARS-CoV-2 Infections
and Transmission in a Skilled Nursing Facility. New England
Journal of Medicine. 2020;382(22):2081-90.
16. Bullard J, Dust K, Funk D, Strong JE, Alexander D,
Garnett L, et al. Predicting infectious SARS-CoV-2 from
diagnostic samples. Clinical infectious diseases : an official
publication of the Infectious Diseases Society of America.
2020:ciaa638.
17. Lee S, Kim T, Lee E, Lee C, Kim H, Rhee H, et al.
Clinical Course and Molecular Viral Shedding Among
Asymptomatic and Symptomatic Patients With SARS-CoV-
2 Infection in a Community Treatment Center in the Republic
of Korea. JAMA Internal Medicine. 2020.
18. World Health Organization. Post-market surveillance of
in-vitro diagnostics. 2015.
19. World Health Organization. Laboratory biosafety
guidance related to coronavirus disease 2019 (COVID-19)
2020 [dimutakhirkan 13 Mei 2020. Tersedia dari:
https://www.who.int/publications/i/item/laboratory-biosafety-
guidance-related-to-coronavirus-disease-2019-(covid-19).
20. World health Organization. COVID-19 Target product
profiles for priority diagnostics to support response to the
COVID-19 pandemic v.0.1 2020 [dimutakhirkan 31 Juli
2020. Tersedia dari:
https://www.who.int/publications/m/item/covid-19-target-
product-profiles-for-priority-diagnostics-to-support-
response-to-the-covid-19-pandemic-v.0.1.
21. Dinnes J, Deeks JJ, Adriano A, Berhane S, Davenport C,
Dittrich S, et al. Rapid, point‐of‐care antigen and molecular‐
based tests for diagnosis of SARS‐CoV‐2 infection. Cochrane
Database of Systematic Reviews. 2020(8).
22. World Health Organization. Infection prevention and
control during health care when COVID-19 is suspected 2020
[dimutakhirkan 19 Maret 2020. Tersedia dari:
https://www.who.int/publications/i/item/laboratory-
biosafety-guidance-related-to-coronavirus-disease-2019-
(covid-19).
23. World Health Organization. Rational use of personal
protective equipment (PPE) for coronavirus disease (COVID-
19) 2020 [dimutakhirkan 4 April 2020. Tersedia dari:
https://www.who.int/publications/i/item/rational-use-of-
personal-protective-equipment-for-coronavirus-disease-
(covid-19)-and-considerations-during-severe-shortages.
24. World Health Organization. WHO COVID-19 Case
definition 2020 [dimutakhirkan 7 Agustus 2020. Tersedia
dari: https://www.who.int/publications/i/item/WHO-2019-
nCoV- Surveillance_Case_Definition-2020.1.
 Deteksi antigen dalam diagnosis infeksi SARS-CoV-2 menggunakan imunoasai cepat: panduan interim

Ucapan terima kasih
Dokumen ini disusun dengan berkonsultasi dengan:
Eksternal: Sergio Carmona, FIND, Swiss; Arlene Chua,
Médecins Sans Frontières, Swiss; Antonino Di Caro,
Istituto Nazionale per le Malattie Infettive Lazzaro
Spallanzani, Italia; Sally Hojvat, Partners in Diagnostics,
AS; Erik Karlsson, Institut Pasteur du Cambodge,
Kamboja; Rosanna Peeling, London School of Hygiene
& Tropical Medicine, Inggris; Leo Poon, Hong Kong
University, China, Hong Kong SAR; Chantal Reusken,
RIVM, Belanda; Bill Rodriguez, Draper Richards,
Kaplan Foundation, AS; Jilian Sacks, FIND, Swiss;
Anne von Gottberg, National Institute for
Communicable Diseases, Afrika Selatan
WHO: Jane Cunningham dan Mark Perkins (pemimpin),
Amal Barakat, Golubinka Boshevksa, Lisa Carter, Lora
Chernyshova, Radu Cojocaru, Janet Victoria Diaz,
Soudeh Ehsani, Belinda Louise Herring, Francis
Inbanathan, Alexandr Jaguparov, Iaroslava
Maksymovych, Marco Marklewitz, Jairo Mendez- Rico,
Karen Nahapetyan, Dmitriy Pereyaslov, Anne
Perrocheau, Irena Prat, Artem Skrypnyk, Maja
Stanojevic, Ute Ströher, Maria Van Kerkhove, Karin von
Eije.
Pernyataan kepentingan
Pernyataan kepentingan dikumpulkan dari semua
kontributor eksternal dan dikaji untuk menemukan setiap
konflik kepentingan. Tidak ada konflik kepentingan
yang signifikan yang dinyatakan.

WHO terus memantau dengan cermat perubahan-perubahan situasi yang dapat memengaruhi panduan interim ini. Jika
ada faktor apa pun yang berubah, WHO akan menerbitkan pemutakhiran lebih lanjut. Jika tidak, panduan interim ini
akan habis masa berlakunya 2 tahun setelah tanggal penerbitan.

@ World Health Organization 2020. Sebagian hak dilindungi. Karya ini tersedia berdasarkan lisensi CC BY-NC-SA
3.0 IGO.

Nomor referensi WHO: WHO/2019-nCoV/Antigen_Detection/2020.1

-8-
 Deteksi antigen dalam diagnosis infeksi SARS-CoV-2 menggunakan imunoasai cepat: panduan interim

Lampiran

Nilai prediktif positif (NPP) dan nilai prediktif negatif (NPN) dan jumlahtes positif asli (PA), positif palsu (PP), negatif asli (NA), dan negatif palsu (NP) pada populasi 10 000
dengan perkiraan prevalensi COVID-19 5, 10, 20, 30% dan berdasarkan kriteria kinerja yang dianjurkan: sensitivitas 70, 80, 90% dan spesifisitas 98% dan 100%

Contoh prevalensi Prevalensi Sensitivitas Spesifisitas NPN NPP PA PP NA NP Jumlah dengan Jumlah tes Total
populasi target (%) penyakit positif
70 98 98 60 350 238 9263 150 500 588 10000
70 100 98 88 350 48 9453 150 500 398 10000
Populasi umum
80 98 99 63 400 238 9263 100 500 638 10000
bergejala; kontak- 5
80 100 99 89 400 48 9453 100 500 448 10000
kontak kasus indeks
90 98 99 65 450 238 9263 50 500 688 10000
90 100 99 90 450 48 9453 50 500 498 10000
70 98 97 76 700 225 8775 300 1000 925 10000
Transmisi komunitas;
70 100 97 94 700 45 8955 300 1000 745 10000
pasien simtomatik
datang ke fasilitas 80 98 98 78 800 225 8775 200 1000 1025 10000
layanan kesehatan; 80 100 98 95 800 45 8955 200 1000 845 10000
kontak kasus indeks; 10 90 98 99 80 900 225 8775 100 1000 1125 10000
lembaga dan 90 100 99 95 900 45 8955 100 1000 945 10000
komunitas tertutup
dengan wabah yang
terkonfirmasi
70 98 93 88 1400 200 7800 600 2000 1600945 10000
Simtomatik di pusat 70 100 93 97 1400 40 7960 600 2000 1440 10000
rujukan; skrining
tenaga kesehatan atau 80 98 95 89 1600 200 7800 400 2000 1800 10000
20
tenaga kesehatan 80 100 95 98 1600 40 7960 400 2000 1640 10000
simtomatik; panti 90 98 98 90 1800 200 7800 200 2000 2000 10000
wreda
90 100 98 98 1800 40 7960 200 2000 1840 10000
70 98 88 92 2100 175 6825 900 3000 2275 10000
70 100 89 98 2100 35 6965 900 3000 2135 10000
Tenaga kesehatan/
tenaga kebersihan 80 98 92 93 2400 175 6825 600 3000 2575 10000
30
simtomatik; penghuni 80 100 92 99 2400 35 6965 600 3000 2435 10000
panti wreda 90 98 96 94 2700 175 6825 300 3000 2875 10000
90 100 96 99 2700 35 6965 300 3000 2735 10000

-9-