bakteri bermanfaat sebagai anti parasit aktif, dan peluru
PENDAHULUAN
Indonesia Memiliki keanekaragaman hayati kedua
terbesar setelah Brazil keanekaragaman hayati yang
dimiliki Indonesia merupakan kekayaan yang tak ternilai
harganya. Sebagian besar penduduk di Indonesia
memanfaatkan tumbuhan untuk tujuan pengobatan
(Edy, 2008).
Salah satu tumbuhan berkhasiat sebagai pengobatan
adalah tumbuhan Pinang (Arecae semen) Yang secara
tradisional telah digunakan secara luas sejak ratusan
tahun lalu. penggunaan paling populer adalah kegiatan
menyirih dengan bahan campuran biji Pinang, daun
sirih, kapur. Ada juga yang mencampurnya dengan
tembakau (Chamima, 2012). kulitnya masih hijau
digunakan bersama dengan buah sirih untuk
menguatkan gigi, mengecilkan rahim, dan hormonnya
lebih tinggi karena masih pertumbuhan. Sedangkan
Pinang tua warnanya kuning, bijinya agak keras. Areca
catechu Merupakan tanaman famili Arecaceae Yang
berpotensi sebagai antikanker. Areca catechu Memiliki
efek antioksidan dan antimutagenik, antiringent, dan
obat cacing. biji buah pinang (Arecae semen)
Mengandung alkaloid seperti arekolin (C8H13NO2),
arekolidine, arekain, guvakolin, guvasine, dan
isoguvasine. Ekstrak biji Pinang mengandung
tanin terkondensasi, tanin terhidrolisis, flavan, dan
senyawa-senyawa fenol, asam galat, getah, lignin minyak
menguap dan tidak menguap serta
garam. ekstrak etanol buah pinang (Aracae semen)
Tersebut memperlihatkan aktivitas antioksidan dengan
kan IC50 sebesar 45,4 g/ml (Edy, 2008).
Pada penelitian sebelumnya oleh Edy (2008) hasilnya
menunjukkan bahwa perlakuan ekstrak etanolik biji
buah areca catechu (25-100 µg/ml) Selama 48 jam
menghambat pertumbuhan sel kanker sebesar 13-48%
(IC50 77 µg/ml), Sedangkan perlakuan arekolin (10-500
µg/ml) Menghasilkan penghambatan pertumbuhan sel
kanker sebesar 8 sampai 73% (IC50 180 g/ml). Hasil
penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol biji
Pinang (Arecae semen) Memiliki efek
antiproliferatif dengan menghambat pertumbuhan
kanker dan memacu apoptosis. Noni Puspawati (2012)
melakukan pengujian biji Pinang terhadap bakteri
Staphylococcus aureus dengan bunuh minimum adalah
1,57% dan bakteri Pseudomonas aeruginosa Adalah 25%.
Hasil menunjukkan bahwa ekstrak etanol biji Pinang
(Arecae semen) mempunyai aktivitas antibakteri lebih
efektif terhadap Staphylococcus aureus daripada Pseudomonas
aeruginosa (Desrini, 2015).
Ekstrak etanol serbuk biji pisang (Arecae
semen) efektif sebagai antibakteri terhadap pertumbuhan
1
air seni, juga bersifat stimulan karena mempercepat
denyut jantung dan tekanan darah. Selain itu tanaman
ini juga digunakan dalam pengobatan untuk gangguan
lambung dan cacingan juga disebut sebagai pengobatan
cacar, kolera dan penyakit kelamin.
Bakteri patogen pada saluran cerna merupakan
golongan bakteri yang dapat menyebabkan penyakit
infeksi pada saluran cerna manusia. Jenis bakteri yang
sering menyebabkan penyakit pada saluran cerna adalah
bakteri bakteri famili enterobacteriaceae diantaranya
adalah Escherichia coli, Salmonella typhi, dan Shigella
dysentriae. Enterobacteriaceae Merupakan bakteri gram
negatif yang bersifat anaerob fakultatif dan oksidase
negatif. Bakteri ini sering ditemukan pada feses dan
bagian tubuh yang terinfeksi. semua bakteri enterik
meragi glukosa menjadi glukosa dengan atau tanpa
disertai pembentukan gas mereduksi nitrat menjadi
nitrit, ada yang membentuk Indo dan ada yang tidak titik
perbedaan jenis karbohidrat yang difermentasi, produk
akhir metabolisme dan substrat yang digunakan menjadi
dasar pembagian spesies Enterobakteriaceae (Radji, M.
2011).
METODE PENELITIAN
Jenis penelitian
Metode yang digunakan pada penelitian ini adalah
metode eksperimental dengan tahapan penelitian yaitu
pengumpulan bahan identifikasi tumbuhan, pemeriksaan
makroskopik, pemeriksaan mikroskopik, pembuatan
ekstrak etanol biji Pinang (Arecae semen), Pembuatan
larutan pereaksi, skrining fitokimia dan Pengujian
aktivitas bakteri dengan metode difusi agar
menggunakan kertas cakram.
Persiapan sampel
- Pengambilan sampel
Sampel yang digunakan pada penelitian ini adalah biji
Pinang (Arecae semen). kegiatan pengambilan sampel
dilakukan di desa Wono Sari Tanjung Morawa Medan
Sumatera Utara.
Pembuatan pereaksi
- Pereaksi Bauchardat
Larutkan 2 gram iodium pekat dan 4 gram kalium iodida
pekat dalam air suling secukupnya hingga 100 ml.
- Pereaksi Dragendorff
Sebanyak 8 gram bismut nitrat dilarutkan dalam 20 ml
NNO3 kemudian dicampur kan dengan larutan kalium
iodida sebanyak 27,2 gram dalam 50 ml air suling.
Campuran dibiarkan sampai memisah secara sempurna
titik ambil larutan jernih dan diencerkan dengan air
secukupnya hingga 100 ml (Harbone, 1987).
- Pereaksi Mayer
Sebanyak 1,36 gram raksa (II) klorida dilarutkan
dalam air suling hingga 60 ml. pada wadah lain
ditimbang 5 gram kalium iodida, dilarutkan dalam 10 ml
air suling kemudian kedua larutan dicampur dan
ditambahkan air suling hingga 10 ml (Depkes RI, 1995).
- Pereaksi besi (III) klorida 1%
Sebanyak 1 gram besi (III) klorida dilarutkan dalam air
suling sampai 100 ml.
Pereaksi timbal (II) asetat 0,4 M
Larutan timbal (II) sebanyak 15,17 gram dilarutkan
dalam air suling hingga 100 ml.
- Pereaksi asam klorida 2 N
Larutan asam klorida pekat sebanyak 17 ml diencerkan
dengan air suling hingga 100 ml.
- Pereaksi natrium hidroksida 2 N
Sebanyak 8,001 1 gram pelet natrium hidroksida
dilarutkan dalam air suling hingga 100 ml.
- Reaksi asam sulfat 2 N
Larutan asam sulfat pekat sebanyak 9,8 ML dilarutkan
air suling hingga 100 ml.
- Pereaksi Lieberman-Bouchard
Campuran 5 gram bagian volume asam sulfat pekat
dengan 50 bagian volume etanol 95%, tambahkan 5
bagian volume asam asetat anhidrida ke dalam
campuran tersebut dinginkan (Depkes RI, 1995).
- Larutan kloralhidrat
Larutkan 50 gram kloralhidrat P dalam 20 ML air suling.
Pemeriksaan karakteristik simplisia
- Pemeriksa makroskopis
Pemeriksaan makroskopik meliputi bentuk, bau rasa dan
warna dari biji Pinang.
- Pemeriksaan mikroskopik
Pemeriksaan mikroskopis dilakukan terhadap serbuk
dan ekstrak simplisia biji Pinang. Caranya, yaitu pada
objek ditetesi dengan kloralhidrat Kemudian
ditambahkan sedikit serbuk simplisia dan ditutup dengan
kaca penutup Kemudian dilihat di bawah mikroskop.
- Penetapan kadar sari larut air
Sebanyak 5 gram serbuk simplisia, dimaserasi selama 24
jam dalam 100 ml air kloroform dalam labu tersumbat
sambil sesekali dikocok selama 6 jam pertama dibiarkan
selama 18 jam lalu disaring dan diuapkan 20 ml filtrat
sampai kering dalam cawan penguap yang berdasar data
yang telah dipanaskan dan ditara. Sisa dipanaskan pada
suhu 105 °C sampai bobot tetap titik dasar larut air
dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan
(Depkes, 1995).
- Penetapan kadar sari larut etanol
Sebanyak simplisia, dimaserasi selama 24 jam dalam 100
ml etanol 95% dalam labu tersumbat sambil sesekali
dikocok selama 6 jam pertama 6 jam pertama dibiarkan
selama 18 jam lalu disaring dan diuapkan 20 ml filtrat
sampai kering dalam cawan penguap yang berdasar data
yang telah dipanaskan dan ditara. Sisa dipanaskan pada
2
suhu 105 °C sampai bobot tetap titik dasar larut etanol
dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan
(Depkes, 1995).
- Penetapan kadar abu total
Sebanyak 5 gram serbuk simplisia yang telah dihaluskan
di timbang seksama dimasukkan ke dalam krus yang
telah di pijar dan ditara kemudian diratakan. Terus di
pijar perlahan-lahan sampai arang habis, pijaran
dilakukan pada suhu 600 °C selama 3 jam kemudian
didinginkan dan ditimbang sampai diperoleh bobot
tetap. kadar Abu dihitung terhadap bahan yang telah
dikeringkan (Depkes, 1995).
- Penetapan kadar abu tidak larut asam
Abu yang telah diperoleh dalam penetapan kadar abu
total didirikan dalam 25 ml asam klorida encer selama 5
menit bagian yang tidak larut dalam asam dikumpulkan
disaring dengan kertas saring dipijarkan kemudian
didinginkan dan ditimbang sampai bobot tetap titik
kadar abu yang tidak larut dalam asam dihitung terhadap
bobot yang dikeringkan (Depkes, 1995).
Skrining fitokimia
Pemeriksaan alkaloid tanin flavonoid saponin dan
steroid atau triterpenoid.
- Pemeriksaan alkaloid
Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 0,5 gram kemudian
dimasukkan ke dalam tabung reaksi lalu ditambahkan 1
ml asam klorida 2 N dan 9 ml air suling, dipanaskan di
atas penangas air selama 2 menit, didinginkan lalu
disaring. Filtrat dipakai untuk percobaan berikut :
1. Filtrat sebanyak 3 tetes ditambahkan 2 tetes larutan
Mayer akan terbentuk endapan menggumpal
berwarna putih atau kuning.
2. Filtrat sebanyak 3 tetes ditambahkan 2 tetes larutan
Bauchardat akan terbentuk endapan warna hitam.
3. Filtrat sebanyak 3 tetes ditambahkan 2 tetes larutan
Dragendorff akan terbentuk endapan berwarna
merah atau jingga.
Alkaloid dinyatakan positif jika terjadi endapan.
- Pemeriksaan tanin
Sebanyak 0,5 gram serbuk simplisia disaring dengan 10
ml air suling disaring lalu filtratnya diencerkan dengan
air suling sampai tidak berwarna. diambil 2 ml larutan
lalu ditambahkan 1-2 tetes besi (II) klorida 1%
terbentuk warna biru atau hijau kehitaman menunjukkan
adanya tanin.
- Pemeriksaan flavonoid
Sebanyak 10 gram serbuk simplisia ditambahkan 10 ml
air panas di didihkan selama 5 menit dan disaring dalam
keadaan panas ke dalam 5 ml. Filtrat ditambahkan 0,1 g
serbuk magnesium dan 1 ml asam klorida pekat dan 2
ml amil alkohol dikocok dan dibiarkan memisah.
flavonoid positif terjadi warna merah atau kuning atau
jingga pada lapisan amil alkohol.
- Pemeriksaan saponin
Sebanyak 0,5 gram serbuk simplisia dimasukkan ke
dalam tabung reaksi lalu ditambahkan 10 ml air panas,
didinginkan, kemudian dikocok kuat-kuat selama 10
detik. jika terbentuk buih setinggi 1 sampai 10 cm yang
mantap dan tidak kurang dari 10 menit dan pada ada
penambahan satu tetes larutan asam klorida 2 N, buih
tidak hilang, menunjukkan adanya saponin.
- Pemeriksaan steroid/ triterpenoid
Sebanyak 1 gram serbuk simplisia dimaserasi dengan 20
ml etanol selama 2 jam, lalu disaring. Filtrat diuapkan
dalam cawan penguap. pada sisa dalam cawan penguap
ditambahkan 2 tetes asam asetat anhidrat dan 1 tetes
asam sulfat pekat (pereaksi Liebermann-
Bouchard). diteteskan pada saat akan meresmikan
sampel uji. timbul warna ungu atau merah kemudian
berubah menjadi hijau biru menunjukkan adanya
stereoid/ triterpenoid.
Pembuatan ekstrak biji Pinang (Arecae semen)
Sebanyak 500 gram serbuk simplisia dimaserasi
dimasukkan ke dalam wadah tertutup dan dibasahi
dengan etanol 96% sebanyak 500 ml dan ditutup dengan
aluminium foil dengan rapat serta disimpan pada tempat
yang tidak terkena sinar matahari langsung. didiamkan
selama 24 jam tetapi pada 6 jam pertama sekali
dilakukan pengadukan. setelah 24jam disaring ampasnya
diambil kembali dan ditambahkan dengan cairan penyari
yang sama dan jumlah yang sama lalu Diamkan selama
12 jam kemudian disaring kembali Hal tersebut
dilakukan pengulangan sebanyak 3 kali. hasil
penyaringan digabung lalu diuapkan dengan penangas
air hingga diperoleh ekstraksi kental biji pinang
(Handayani, 2016).
Sterilisasi alat
Alat-alat yang digunakan disterilkan terlebih dahulu
sebelum dipakai titik alat-alat gelas disterilkan di dalam
oven pada suhu 170 derajat Celcius selama 1 sampai 3
jam titik media disterilkan di autoklaf pada suhu 121
derajat Celcius selama 15 menit titik jarum Ose dan
pinset di pijar dengan api bunsen (Lay, 1994).
Pembuatan media
Media nutrient agar (NA) nutrient agar adalah medium
padat untuk pertumbuhan mikroorganisme yang umum
digunakan dalam berbagai kultur mikroorganisme.
Prosedur pembuatannya adalah sebanyak 23 gram
nutrient agar dimasukkan ke dalam erlenmeyer
Tambahkan air suling 1000 ml lalu dipanaskan sampai
larut lalu disterilkan di dalam autoklaf pada suhu 121
derajat Celcius selama 15 menit (Oxoid, 1982).
Media Mueller-Hinton agar (MHA)
Prosedur pembuatannya adalah sebanyak 38 gram
Mueller-Hinton agar (MHA) dimasukkan ke dalam
tabung atau botol untuk disterilisasi di dalam autoklaf
selama 15 menit, pada suhu 121 derajat Celcius selama 1
sampai 2 jam tunggu hingga agak dingin sekitar suhu 40
3
sampai 45 derajat Celcius. tuangkan ke dalam cawan
petri titik inokulasi mikroorganisme ke dalam cawan dan
inkubasi pada suhu 37 derajat celcius selama 24 jam.
Pembuatan media agar miring
Sebanyak 3 ml media nutrient agar yang sudah dicairkan
dimasukkan ke dalam tabung reaksi steril didiamkan
pada temperatur kamar sampai memadat pada posisi
miring titik kemudian disimpan dalam lemari pendingin
(Ditjen POM, 1995).
Pembuatan stok kultur
Diambil satu koloni bakteri escheria colli dengan
menggunakan jarum Ose lalu ditanamkan pada media
nutrient agar miring dengan cara menggores, setelah itu
diinkubasi dalam inkubator pada suhu 37 °C selama 18
sampai 24 jam. hal yang sama dilakukan pada bakteri
Salmonella typhi dan Shigella dysentriae.
Penyiapan inokulum
Diambil stop kultur bakteri Escherichia coli Dengan
menggunakan jarum Ose steril kemudian disuspensikan
ke dalam tabung yang berisi 10 ml larutan NaCl 0,9%
sampai diperoleh kekeruhan yang sama dengan larutan
standar Mc.Farland dimana konsentrasi bakteri 108
CFU/ml. Dipipet 0,1 ml larutan diatas kemudian
dimasukkan ke dalam labu takar 10 ml, ditambahkan
NaCl 0,9% sampai garis tanda di mana konsentrasi
bakteri menjadi 106 CFU/ml. hal yang sama dilakukan
pada bakteri Shigella dysentriae dan Salmonella typhi.
Pembuatan larutan uji ekstrak etanol biji pinang
(Areceae semen)
Sebanyak 4 gram ekstrak etanol biji pinang (Areceae
semen) Di timbang seksama dengan neraca analitik,
dilarutkan dengan pelarut DMSO (Dymethil sulfoxide)
Hingga volume total 8 ML dan diaduk hingga larut dan
dapat konsentrasi 500 mg per ml. kemudian dibuat
pengenceran dengan konsentrasi 400 mg/ml, 300
mg/ml, 200 mg/ml, 150 mg/ml, 100 mg/ml, 50
mg/ml, dan 25 mg/ml.
Metode pengujian efek antibakteri
Kedalam 0,1 ml inokulum Kemudian ditambahkan 20
ml media nutrient agar steril yang telah dicairkan dan
ditunggu hingga suhu mencapai 45 °C, dihomogenkan
dan dibiarkan sampai media memadat. selanjutnya
cakram kertas (diameter 6 mm) ke dalam dikeringkan
dan diletakkan titik kemudian diinkubasi pada suhu 37
°C selama 18 sampai 24 jam. selanjutnya diameter
daerah hambat di sekitar cakram kertas diukur dengan
menggunakan jangka sorong. pengujian dilakukan
sebanyak 3 kali ( Ditjen POM 1995).
HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil karakterisasi simplisia
- Makroskopik
Buah bentuk bulat telur sungsang memanjang, panjang
3, 5 - 7 cm, dinding buah berserabut, warna merah
jingga jika massa. Biji satu berbentuk seperti kerucut
pendek dengan ujung membulat pangkal agak datar
dengan suatu lekukan dangkal panjang 15 - 30
mm, permukaan luar berwarna kecoklatan sampai
coklat kemerahan.
- Mikroskopik
Hasil pemeriksaan biji pinang (Arecae semen) terdapat sel-
sel batu, berpigmen butir-butir aleuron.
- Karakteristik simplisia
Hasil pemeriksaan karakterisasi simplisia tumbuhan
pinang (Arecae semen) dapat dilihat pada tabel 1 di bawah
ini.
Tabel 1 Hasil karakterisasi simplisia dari tumbuhan
pinang muda dan pinang tua.
No Karakterisasi PM (%) PT (%)
1 Kadar sari larut air 18,02 12,93
2 Kadar sari larut etanol 30,58 21,03
3 Kadar abu total 4,19 3,89
4 Kadar abu tidak larut asam 0,35 0,57
Penetapan kadar simplisia biji pinang tua dan biji
pinang muda dilakukan menggunakan dua pelarut yaitu
air dan etanol. penetapan kadar sari larut air adalah
untuk mengetahui bahwa kadar senyawa kimia bersifat
polar yang terkandung di dalam simplisia sedangkan
kadar sari larut dalam etanol dilakukan untuk
mengetahui kadar senyawa larut dalam etanol baik
senyawa polar maupun senyawa non polar. Hasil
penetapan kadar sari larut air biji pinang tua 12,93% biji
pinang muda 18,02% sesuai dengan ketetapan MMI
yaitu harus besar dari 18%. Ini berarti simplisia layak
untuk dijadikan bahan baku dalam pembuatan obat
tradisional dan obat herbal terstandar sedangkan kadar
sari larut etanol biji pinang tua 21,93% biji pinang muda
30,58% titik nilai tersebut sesuai dengan ketetapan MMI
memiliki nilai lebih dari 9,7%. Dengan demikian
diketahui simplisia tersebut memiliki kandungan
senyawa senyawa yang layak untuk dilakukan ekstraksi.
Penetapan kadar abu total dilakukan untuk
mengetahui kadar senyawa anorganik dalam simplisia
misalnya Mg, Ca, Na dan Pb. Sedangkan penetapan
kadar abu tidak larut dalam asam untuk mengetahui
kadar senyawa yang tidak larut dalam asam misalnya
silika. Penetapan kadar abu total simplisia biji pinang
tua 3,89%, biji pinang muda 4,19%. sesuai dengan MMI
kurang dari 8% dan kadar abu tidak larut asam biji
pinang tua 0,57%, biji pinang muda 0,3 5%. Adanya
kandungan abu tidak larut dalam asam yang rendah
menunjukkan adanya pasir atau pengotor yang lain
dalam kadar rendah.
Hasil skrining fitokimia
4
Dilakukan skrining fitokimia terhadap tumbuhan pinang
meliputi pemeriksaan alkaloid tanin flavonoid saponin
steroid atau triterpenoid. hasil skrining dapat dilihat pada
tabel 2 di bawah ini.
Tabel 2 hasil skrining senyawa kimia biji pinang
No Golongan senyawa Serbuk Ekstrak
1 Alkaloid + +
2 Tanin + +
3 Flavonoid + +
4 Saponin + +
5 Steroid/Triterpenoid + +
Keterangan :
(+) positif : mengandung golongan senyawa
Serbuk/ekstrak biji pinang (Arecae semen) yang
ditambah dengan pereaksi Dragendroff memberikan
endapan warna merah atau jingga dengan pereaksi
Bouchardat memberikan endapan coklat dan dengan
pereaksi Mayer terbentuk endapan kuning. Ini
menunjukkan adanya alkaloid. Alkaloid dianggappositif
jika endapan paling sedikit dua atau tiga kali pereaksi
yang ditambahkan. Flavonoid dengan menambahkan
Mg, HCl dan Amil alkohol pada lapisan Amil alkohol
ini dianggap bahwa 8 positif pada biji Pinang.
Penambahan asam asetat dan HCl pekat memberikan
warna biru menunjukkan adanya steroid atau
triterpenoid. Skrining pada tanin dengan penambahan
FeCl3 kan warna hijau kehitaman menunjukkan adanya
tanin (Famsworth, 1996). skrining saponin positif
dengan memberikan bisa kurang lebih 1 cm selama 30
detik ( Depkes RI, 1995).
Dari hasil skrining fitokimia minyak didapatkan
hasil bahwa biji pinang (Arecae semen) mengandung
senyawa alkaloid tanin saponin flavonoid dan
triterpenoid. Hasil yang diperoleh dari pengujian
senyawa kimia dapat diketahui bahwa ekstrak etanol di
biji pinang (Arecae semen) mengandung senyawa alkaloid
tanin saponin flavonoid dan triterpenoid fungsi
pengujian dilakukan secara triplo. Uji kandungan
senyawa kimia ekstrak etanol biji pinang ini dilakukan
untuk mengetahui senyawa-senyawa yang terlarut setelah
proses ekstraksi simplisia dengan pelarut etanol dengan
diketahuinya kandungan senyawa dalam ekstrak etanol
biji pinang maka dapat diperkirakan mekanisme kerja
dari ekstrak etanol biji pinang menghambat
pertumbuhan bakteri dan penyembuhan penyakit seperti
cacingan luka diare sembelit disentri senyawa yang
terkandung dalam ekstrak biji pinang arek semen adalah
senyawa-senyawa yang larut dalam pelarut semi polar
seperti etanol hal ini sesuai dengan penelitian yang
dilakukan oleh Sa’roni dan Adjirni, di mana ekstraksi
biji pinang dengan pelarut etanol mengandung senyawa
alkaloid saponin tanin dan flavonoid serta triterpenoid
(Asa, 2014)
Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol biji
pinang muda (EEPM)
Hasil uji aktivitas antibakteri EEBPM dapat
menghambat pertumbuhan bakteri Eschericia coli, Shigella
disentriae, dan Salmonella typhi. Aktivitas suatu zat
antibakteri untuk menghambat pertumbuhan dan
membunuh mikroorganisme tergantung pada
konsentrasi dan dan jenis bakteri digunakan. Hasil
pengukuran EEBPM dapat dilihat pada tabel 3.
Tabel 3 Hasil pengukuran diameter daerah hambatan
pertumbuhan bakteri Eschericia coli, Shigella disentriae, dan
Salmonella typhi dari ekstrak etanol biji pinang muda
(EEBPM).
Diameter daerah hambat (mm)
Konsentrasi
No Eschericia Shigella Salmonella
(mg/ml)
coli disentriae typhi.
Gambar 1 Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol
1 500 17,33 16,23 15,50
biji pinang muda (EEBPM) terhadap bakteri Escherichia
2 400 16,46 15,63 14,23
coli.
3 300 16,36 14,16 13,80
4 200 15,40 12,43 13,60
5 150 14,36 10,86 12,36
6 100 13,23 8,86 10,02
7 50 11,80 7,33 7,80
8 25 9,40 6,73 6,30
9 Blanko - - -
Keterangan :
(*) : Hasil rata – rata tiga kali pengulangan
(-) : Tidak ada hambatan
DMSO : Dimetilsulfoksida
Pada tabel 3 terlihat bahwa konsentrasi yang dapat
memenuhi persyaratan yang ditetapkan oleh farmakope
Indonesia rendah 95 dengan batas daerah hambatan
yang efektif kurang dari 14-16 mm. berdasarkan hasil
pengukuran diameter daerah hambatan memperlihatkan
bahwa EEBPM memberikan aktivitas antibakteri pada
konsentrasi optimum menghambat pertumbuhan bakteri
Esherichia coli pada konsentrasi 150 mg/ml mempunyai
daerah hambat 14,36 mm. Shigella dysentriae konsentrasi
300 mg/ml mempunyai daerah hambat 14,16 mm,
Salmonella thypi konsentrasi 400mg/ml mempunyai
daerah hambat 14,23 mm. Dengan KHM konsentrasi 25
mg/ml masing - masing 9,40 mm, 6,73 mm dan 6,30
mm. Zona hambat antibakteri ekstrak etanol biji pinang
muda terlihat pada gambar 1 dibawah ini.

Gambar 2 Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol

biji pinang muda (EEBPM) terhadap bakteri Shigella
dysentriae

5
 Salmonella typhi pada konsentrasi 500
mg/ml memberikan daerah hambat 14,2 lemak dan
diperoleh KHM pada konsentrasi 25 mg/ml, masing-
masing 7,63 mm, 6,16 mm, dan 6,00 mm.
Pada pengujian EEBPM dan EEBPT, aktivitas
terhadap ketiga bakteri sama-sama memberikan daya
hambat tetapi memberikan hasil yang berbeda yaitu
Eschericia coli memberikan warna hambat yang lebih
besar dibandingkan terhadap bakteri Shigella dysentriae
dan bakteri Salmonella typhi pada berbagai variasi
konsentrasi dikarenakan bakteri tersebut memiliki
dinding sel yang berbeda titik namun keduanya
mengandung golongan senyawa sebagai antibakteri yaitu
adanya senyawa alkaloid (Ozcelik, et al, 2011), Flavonoid
(Cowan, 1999), tannin (Ashok, 2012), saponin dan
triterpenoid (Harbone , 1987).
Pada penelitian sebelumnya aktivitas hambatan S.
Gambar 3. Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol aurens oleh ekstrak etanol biji pinang disebabkan
biji pinang muda (EEBPM) terhadap bakteri Salmonella pengaruh senyawa bioaktif atau metabolit sekunder yang
thypi terdapat pada ekstraksi alkaloid memiliki aktivitas
Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol Pinang antibakteri dengan cara mengganggu terbentuknya
tua (EEBPT) komponen jembatan silang peptidoglikan pada sel
Hasil uji aktivitas antibakteri EEBPT dapat bakteri sehingga lapisan dinding sel tidak terbentuk
menghambat pertumbuhan bakteri Esherichia coli, Shigella secara utuh dan sel akan lisis. Saponin merupakan zat
dysentriae, dan Salmonella thypi. Aktivitas suatu zat aktif yang dapat meningkatkan permeabilitas membran
antibakteri untuk menghambat pertumbuhan atau sehingga terjadi hemolisis sel apabila saponin
membunuh Mikroorganisme dapat dilihat pada tabel 4. berinteraksi dengan sel bakteri bakteri akan pecah atau
Tabel 4 hasil pengukuran diameter daerah lisis. Tanin merupakan target utama pada polipeptida
hambatan pertumbuhan bakteri Esherichia coli, Shigella dinding sel yang akan menyebabkan kerusakan pada
dysentriae, dan Salmonella thypi ekstrak etanol pinang tua dinding sel. Flavonoid merupakan senyawa fenol yang
(EEBPT). mempunyai kecenderungan untuk mengakibatkan
Diameter daerah hambat (mm) perubahan komposisi fosfolipid membran dengan
Konsentrasi
No Eschericia Shigella Salmonella pemberontakan dan dinding sel yang lisis. mekanisme
(mg/ml)
coli disentriae typhi. terpenoid sebagai antibakteri adalah reaksi dengan porin
1 500 16,30 15,76 14,26 (protein transmembran) pada luar dinding sel bakteri
2 400 15,53 14,16 13,56 membentuk ikatan polimer yang kuat sehingga
3 300 14,46 12,10 11,90 mengakibatkan rusaknya protein.
4 200 13,30 10,20 8,86 Zona hambat antibakteri ekstrak etanol biji Pinang
5 150 11,40 9,83 7,80 tua terlihat pada gambar dibawah ini.
6 100 9,50 7,80 7,46
7 50 8,20 7,30 6,13
8 25 7,63 6,16 6,00
9 Blanko - - -
Keterangan :
(*) : Hasil rata – rata tiga kali pengulangan
(-) : Tidak ada hambatan
DMSO : Dimetilsulfoksida
Pada EEBPT memberikan aktivitas antibakteri pada
konsentrasi optimum menghambat pertumbuhan bakteri
Escherichia coli pada konsentrasi 300
mg/ml memberikan diameter daerah hambat 14,46
bakteri Shigella dysentriae pada konsentrasi 400
mg/ml memberikan daerah rambat 14,16 bakteri

6
 Gambar 4 uji antibakteri ekstrak etanol biji Pinang
tua (EEBPT) terhadap bakteri Eschericia coli.
dan kadar abu tidak larut atau 0,35%. Hasil karakterisasi
simplisia pinang tua kadar sari larut air 12,93%, kadar
sari larut etanol 21,03% kadar abu total 3,89% dan kadar
abu tidak larut asam 0,57%.
Hasil skrining fitokimia serbuk biji pinang diperoleh
senyawa alkaloid flavonoid, saponin,
steroid/triterpenoid dan tanin. hasil uji aktivitas
antibakteri ekstrak etanol biji pinang muda dan biji
pinang tua memiliki efektivitas terhadap pertumbuhan
bakteri.

Gambar 5 Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol

biji pinang tua (EEBPT) terhadap bakteri Shigella
dysentriae

Gambar 6 Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol

bijipinang tua (EEBPT) terhadap bakteri Salmonella typhi
Dari gambar diatas terlihat jelas zona daya hambat
bakteri Eschericia coli, Shigella dysentriae, Salmonella typhi,
ekstrak biji pinang muda maupun biji pinang tua.
Semakin tinggi konsentrasi maka daya hambatnya
semakin besar.

KESIMPULAN
Hasil penelitian yang dilakukan terhadap biji pinang
(Arecae semen), diperoleh kesimpulan, karakterisasi
simplisia biji pinang muda pada sari larut air 18,02% dan
kadar sari larut etanol 30,58%, kadar abu total 4,19%