Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

Akademi Ilmu Pengetahuan, Teknik dan Teknologi Dunia

Jurnal Internasional Ilmu Farmakologi dan Farmasi
Vol:3, No:7, 2009

Spektrofotometri Turunan Diterapkan pada

Penentuan Triprolidine Hidroklorida dan
Pseudoephedrine Hidroklorida dalam Tablet
dan Pengujian Pembubaran

L. Srifong, A. Chaidedgumjorn, dan K. Chaisuroj

PSE dikombinasikan dengan ibuprofen, fexofenadine, cetirizine

Abstrak—Sebuah metode spektrofotometri dikembangkan dan loratadine dalam campuran biner [8-9]. Namun, tidak ada
untuk kuantifikasi simultan pseudoefedrin hidroklorida (PSE) metode spektrofotometri turunan yang dilaporkan untuk
triprolidine hidroklorida (TRI) menggunakan metode turunan kedua penentuan simultan PSE dan TRI dalam pengujian disolusi.
Open Science Index, Farmakologi dan Ilmu Farmasi Vol:3, No:7, 2009 publikasi.waset.org/7441/pdf

(teknik zero-crossing). Amplitudo turunan kedua PSE dan TRI diukur

masing-masing pada 271 dan 321 nm. Kurva kalibrasi linier dalam
kisaran 200 hingga 1.000 g/ml untuk PSE dan 10 hingga 50 g/ml
untuk TRI. Metode tersebut divalidasi untuk spesifisitas, akurasi,
presisi, batas deteksi dan batas kuantisasi. Metode yang diusulkan
diterapkan pada pengujian dan pembubaran PSE dan TRI dalam
tablet komersial tanpa pemisahan kimia. Hasilnya dibandingkan
dengan yang diperoleh dengan metode resmi USP31 dan uji statistik
menunjukkan bahwa tidak ada perbedaan yang signifikan antara
metode pada tingkat kepercayaan 95%. Metode yang diusulkan
sederhana,
aplikasi kontrol.
Kata kunci—triprolidin, pseudoefedrin, Turunan
spektrofotometri, pengujian Disolusi.
Spektrofotometri derivatif adalah teknik analisis yang sangat
berguna untuk menentukan campuran biner dan
multikomponen obat dengan spektrum yang tumpang tindih.
Dalam karya ini, metode spektrofotometri derivatif dilaporkan
untuk mencapai penentuan simultan PSE dan TRI tanpa
pemisahan kimia sebelumnya. Tujuan dari pekerjaan ini adalah
untuk mengembangkan metode analitik alternatif untuk metode
USP31 yang memakan waktu dan membutuhkan reagen yang
mahal. Metode tersebut diterapkan pada analisis tablet dan
pengujian disolusi dan dibandingkan dengan metode resmi
USP31.
II. EXPERIMENTAL

sayaPENDAHULUAN A. Bahan

P
Standar PSE dan TRI diperoleh dari Devision of Medical
SEUDOEFEDRIN hidroklorida (PSE) adalah A
Sciences, Nonthaburi, Thailand. Semua reagen dan bahan kimia
obat simpatomimetik yang telah digunakan untuk
yang digunakan adalah kelas analitis dan diperoleh dari sumber
meredakan hidung tersumbat [1] dan tripolidin hidroklorida
lokal. Semua sediaan farmasi dibeli dari pasar lokal. Mereka
(TRI) adalah obat antihistamin [2]. Kombinasi PSE dan TRI
termasuk tablet Actifed® Nasolin® dan Profed®, yang diklaim
terbukti memberikan kontribusi yang berbeda untuk
mengandung 60 mg PSE dan 2,5 mg TRI.
pengobatan rinitis alergi [3] dan telah umum digunakan
dalam produk kombinasi pernapasan. B. Instrumentasi
Metode United States Pharmacopoeia (USP31) untuk
Agilent 8453E Diode array Spectrophotometer (Agilent,
kuantifikasi PSE dan TRI dalam formulasi gabungan dan uji
USA) digunakan. Aparatus disolusi adalah Varian Model VK
disolusi adalah HPLC fase normal [4]. Metode untuk
7000 (Varian, USA). Sistem HPLC terdiri dari pompa seri
penentuan simultan PSE dan TRI dalam formulasi farmasi
Agilent 1100, degasser pelarut, autosampler, detektor
dilaporkan termasuk HPLC [5-6] dan spektrofotometri
photodiode-array (DAD) dan perangkat lunak Chemstation
perbedaan [7]. Ada metode spektrofotometri turunan yang
diterbitkan untuk penentuan Versi A.08.01 (Agilent, USA).

C. Metode Spektrofotometri Derivatif

L. Srifong bersama Departemen Kimia Farmasi, Fakultas Alikuot yang berbeda dari larutan PSE dan TRI disiapkan dan
Farmasi, Universitas Silpakorn, Istana Sanam Chandra, Nakhon Pathom
diencerkan dengan HCl 0,1 M untuk menghasilkan konsentrasi
73000, Thailand (penulis korespondensi memberikan telepon: +6634-255-800;
faks: +6634-255-801; e-mail: lawan@ su.ac.th). mulai dari 200 hingga 1000 μg/ml untuk PSE dan 10 hingga 50 μ
A. Chaidedgumjorn bekerja di Departemen Kimia Farmasi, g/ml untuk TRI. Spektrum turunan kedua direkam menggunakan
Fakultas Farmasi, Universitas Silpakorn, Istana Sanam Chandra, Nakhon Pathom larutan yang disiapkan terhadap HCl 0,1 M sebagai blanko. Nilai
73000, Thailand (email: author@lamar. colostate.edu).
K. Chaisuroj bersama dengan Pasokan Obat, 77/11 Thatamnak,
absorbansi turunan kedua (2D) untuk kedua senyawa diperoleh
nakornchaisri, Nakhonpathom, 73120 Thailand. (surel: dengan menggunakan lima konsentrasi yang berbeda dengan
qw_wp@hotmail.com ).

Penelitian & Inovasi Ilmiah dan Ilmiah Internasional 3(7) 2009 162 ISNI:0000000091950263
 Akademi Ilmu Pengetahuan, Teknik dan Teknologi Dunia
Jurnal Internasional Ilmu Farmakologi dan Farmasi
Vol:3, No:7, 2009

mengukur setiap konsentrasi terhadap pelarut blanko pada
panjang gelombang yang dipilih; 271 dan 321 nm untuk PSE
dan TRI, masing-masing. Nilai dari2D diplot terhadap
konsentrasi yang sesuai untuk membangun kurva kalibrasi.
D. Validasi Metode
Metode yang dikembangkan divalidasi sesuai dengan
dengan analisis TRI at λmaksimal 290nm. Titik nol-persimpangan
ditugaskan dari1D dan 2Spektrum D dari PSE dan
TRI (Gbr. 1b-1c). NS1D dan 2D titik zero-crossing PSE dan TRI
ditemukan pada 252, 257 dan 310 nm dan 231 dan 262 nm (Gbr.
1b) dan 256, 259 dan 321 nm dan 230, 249 dan 271 nm (Gbr. 1c),
masing-masing.
1.6

pedoman ICH [10] untuk validasi prosedur analitis untuk 1.4

menentukan linearitas, sensitivitas, presisi dan akurasi untuk
setiap analit. 1.2

E. Metode USP31 1

Metode kromatografi berdasarkan pemisahan HPLC 0.8

menggunakan kolom fase normal (ZORBAX RX-SIL, 4,6 x 150
0.6
mm, 5 μm) dengan fase gerak yang terdiri dari larutan
metanol dan amonium asetat (1 dalam 250) (17:3). Laju aliran 0.4
adalah 1,2 ml/menit. Deteksi UV ditetapkan pada 254 nm.
0.2
Volume injeksi untuk pengujian assay dan disolusi masing-
Open Science Index, Farmakologi dan Ilmu Farmasi Vol:3, No:7, 2009 publikasi.waset.org/7441/pdf

masing adalah 10 dan 50 l. Jumlah PSE dan TRI yang 0

(nm)
dilarutkan dibandingkan dengan larutan standar yang 220 270 320

konsentrasinya diketahui.
(A)
F. Analisis PSE dan TRI dalam Tablet
0,06
Untuk Metode Spektrofotometri Derivatif Kedua
Sepuluh tablet diserbuk halus, ditimbang, sebagian ekivalen
0,04
dengan 5 mg TRI dan 120 mg PSE dilarutkan dalam HCl 0,1 M,
dipindahkan secara kuantitatif ke dalam labu takar 50 ml,
sonikasi selama 15 menit, lengkapi hingga volume dengan HCl 0,02

0,1 M, saring dan kemudian encerkan 2,5 ml filtrat menjadi 10,0

ml. Larutan diukur untuk absorbansi turunan kedua seperti 0
yang dijelaskan dalam bagian II.C. 220 270 320 (nm)

Untuk Metode USP31 - 0,02

Sepuluh tablet diserbuk halus, ditimbang, sebagian ekivalen

dengan 5 mg TRI dan 120 mg PSE disuspensikan dalam fase - 0,04

gerak, dipindahkan secara kuantitatif ke dalam labu ukur 50 ml,

sonikasi selama 15 menit, lengkapi hingga volume dengan filter - 0,06
fase gerak dan kemudian encerkan 1,0 ml filtrat hingga
10,0 ml dengan fase gerak. (B)

G. Pengujian Pembubaran 0,02

Uji disolusi tablet Profed® dilakukan dalam 45 menit

menurut metode USP31 [4], dalam 900 ml air pada
37.0±0.1 °C (n=6) di Aparatur 2 (dayung). Jumlah obat yang
terlarut diambil sampelnya, dikumpulkan (n=3) dan dianalisis
dengan metode turunan yang disajikan pada bagian II.C. dan
metode USP31 di bagian II.E. Jumlah obat terlarut dihitung 220 270 320 (nm)

dibandingkan dengan larutan standar yang konsentrasinya

diketahui. Hasil yang diperoleh dari kedua metode secara
statistik dibandingkan dengan berpasanganT-uji pada selang
kepercayaan 95%.

AKU AKU AKU. RHASIL DAN DPEMBAHASAN

- 0,03
A. Pengembangan Metode
orde nol (0D) spektrum TRI menunjukkan tanda (C)
tumpang tindih dengan spektrum PSE (Gbr. 1a), sehingga TRI Gbr. 1 Spektrum absorpsi PSE (600 g/ml), ( line) dan TRI
mengganggu analisis PSE sedangkan PSE tidak mengganggu (30 g/ml), (---- baris); (a) orde nol (b) turunan pertama dan (c)
turunan kedua

Penelitian & Inovasi Ilmiah dan Ilmiah Internasional 3(7) 2009 163 ISNI:0000000091950263
 Akademi Ilmu Pengetahuan, Teknik dan Teknologi Dunia
Jurnal Internasional Ilmu Farmakologi dan Farmasi
Vol:3, No:7, 2009

2 2

1 1

0 0
(nm) (nm)
220 270 320 220 270 320

(A) (D)
0.1 0.1
Open Science Index, Farmakologi dan Ilmu Farmasi Vol:3, No:7, 2009 publikasi.waset.org/7441/pdf

0 0
220 270 320 (nm) 220 270 320 (nm)

- 0.1 - 0.1

(B) (e)
0,05 0,01

0 0
220 270 320 (nm) 220 270 320 (nm)

- 0,05 - 0,01

(C) (F)

Gambar 2 Kurva kalibrasi PSE 200-1.000 g/ml; (a) orde nol, (b) turunan pertama dan (c) turunan kedua. Kurva kalibrasi TRI 10-50
g/ml; (d) orde nol (e) turunan pertama dan (f) turunan kedua

Pemilihan panjang gelombang yang optimal didasarkan pada Namun, penentuan PSE dengan adanya TRI lebih akurat saat
kenyataan bahwa nilai absolut dari spektrum turunan total pada menggunakan 2teknik D.
panjang gelombang yang dipilih memiliki respon linier terbaik
B. Validasi Metode
terhadap konsentrasi analit. Spektrum penyerapan PSE dan TRI
dalam kisaran 200-1000 g/ml dan 10-50 g/ml diukur (Gbr. 2a-2f). Kekhususan

NS2Spektrum D menunjukkan resolusi dan linieritas kurva Spesifisitas metode dinilai dengan membandingkan
kalibrasi PSE yang lebih baik. Oleh karena itu, 271 nm (titik spektrum yang diperoleh dari formulasi komersial dan
persimpangan nol TRI) dan 321 nm (amplitudo nol PSE) dipilih campuran sintetis dari larutan standar. Spektrum
untuk penentuan simultan PSE dan TRI dalam campuran biner, penyerapan serupa (Gbr. 3) mengungkapkan tidak ada
masing-masing. gangguan dari eksipien dalam tablet.
Spektrofotometri langsung (orde nol) juga dapat
digunakan untuk penentuan TRI saja pada 290 nm. Sebuah
korelasi linier diperoleh antara absorbansi pada 290 nm dan
konsentrasi yang sesuai dalam kisaran 10-50 g/ml dan
ditemukan linier (y = 0,0218c - 0,0952,R2= 0,9919).

Penelitian & Inovasi Ilmiah dan Ilmiah Internasional 3(7) 2009 164 ISNI:0000000091950263
 Akademi Ilmu Pengetahuan, Teknik dan Teknologi Dunia
Jurnal Internasional Ilmu Farmakologi dan Farmasi
Vol:3, No:7, 2009

3 Ketepatan menengah ditentukan oleh uji antar-hari dari tiga

Campuran biner
tingkat 80%, 100% dan 120% dari label yang diklaim dalam
2.5 edi aktif rangkap tiga. RSD untuk analisis antar hari ditemukan
Nasolin 4,14% dan 1,93% untuk PSE dan TRI, masing-masing (Tabel I).
2 Prof ed
Batas deteksi (LOD) dan batas kuantitasi (LOQ)
LOD dan LOQ dari PSE dan TRI dihitung sebagai:
3.3σ/S dan 10σ/S di mana adalah standar deviasi intersep
Daya serap

1.5
dan S adalah kemiringan kurva kalibrasi (n=3). Data disajikan
pada Tabel I.
1
C. Aplikasi
0,5 Metode USP31 tidak hanya memakan waktu tetapi juga
memakan pelarut organik karena sistem HPLC fase normal
0
membutuhkan banyak pelarut organik (heksana, isopropanol
220 270 320 (nm) dan metanol) untuk mencuci kolom. Sedangkan metode
spektrofotometri turunan yang dikembangkan cepat dan
Gbr. 3 Spektrum serapan campuran biner dan larutan sampel nyaman menurut analisis tanpa pemisahan kimia dan
komersial (Actifed®, Nasolin® dan Profed®) mengandung persiapan fase gerak. Hal ini menunjukkan keunggulan
PSE 600 μg/ml dan TRI 25 μg/ml metode spektrofotometri sederhana atas prosedur HPLC.
Open Science Index, Farmakologi dan Ilmu Farmasi Vol:3, No:7, 2009 publikasi.waset.org/7441/pdf

Selain itu, tidak ada penggunaan pelarut organik yang dapat

Linearitas dan Jangkauan
mengurangi biaya analisis.
Rentang untuk PSE dan TRI dioptimalkan pada 200–1000 Kandungan PSE dan TRI dalam sampel tablet komersial
dan 10–50 μg/ml, masing-masing. Penyerapan turunan dianalisis dengan metode spektrofotometri dan USP3131
kedua PSE dan TRI diukur pada 271 dan 321 nm. Linieritas yang diusulkan (Tabel II). Uji t berpasangan diterapkan untuk
dievaluasi dengan metode regresi kuadrat terkecil. Koefisien perbandingan antara hasil dari kedua metode ini pada
korelasi kurva standar (n = 3) untuk semua dua obat lebih interval kepercayaan 95%. yang dihitungT nilai tidak melebihi
besar dari 0,99. Nilai rata-rata dari nilai kritis dua-ekor yang sesuai (Tabel 2), menunjukkan
korelasi koefisien, kemiringan dan intersep ditunjukkan pada bahwa tidak ada perbedaan yang signifikan (P>0,05) antara
Tabel I. isi rata-rata PSE dan TRI yang diuji dengan metode UV dan
USP31.
TABEL I
METODE VALIDASI RHASIL Untuk pengujian disolusi, metode ini dimodifikasi dengan
Parameter PSE TRI mengukur absorbansi orde nol TRI pada 290 nm sebagai ganti 2
Rentang linieritas (μg/ml) 200-1.000 10-50 Amplitudo D dari TRI pada 321 nm yang sangat rendah. Jumlah
Persamaan regresi (y)A terlarut PSE dan TRI ditentukan dengan metode
mencegat (a) - 0,0008 0,0001
spektrofotometri dan USP31 dibandingkan secara statistik pada
Kemiringan (b) 0,00018 0,0004
Koefisien korelasi 0,9995 0,9974
interval kepercayaan 95% (Tabel III). Data menunjukkan bahwa
LOD (μg/ml) 17.6 1.2 tidak terdapat perbedaan yang signifikan (P>0,05) antara hasil
LOQ (μg/ml) 53.2 3.8 yang diperoleh dari metode ini dibandingkan dengan metode
Presisi (%RSD) USP31 sejak dihitungT nilai lebih rendah dari nilai kritis dua-ekor
Pengulangan (n=7) 0.33 0,78
yang sesuai. Keduanya memenuhi kriteria toleransi USP31 untuk
presisi menengah (n=9) 4.14 1.93
Ketepatan pembubaran PSE dan TRI yang tidak kurang dari 75% dari jumlah
% pemulihan (n= 98.1 102.2 yang tertera pada label, dilarutkan dalam 45 menit.
9)% RSD 0,66 2.24
Kekhususan tidak ada gangguan tidak ada gangguan
A Y = a + bc, di mana c adalah konsentrasi obat dalam dan Y adalah amplitudo pada
TABEL II
panjang gelombang tertentu dalam spektrofotometri turunan. DKEMATIAN PSE DAN TRI DI DALAM CKOMERSIAL TMAMPU OLEH
DERIVATIF SPECTROFOTOMETRI DAN USP31METODE
Ketepatan % dideklarasikan±SD (PSE) % dinyatakan±SD (TRI)
2D271 nm 2D321 nm
Akurasi ditentukan dengan metode penambahan standar. metode USP31 USP31
Diaktifkan® 99,6±2,08 100,7±0,65 99,9±2,88 95,9±0,91
Tiga tingkat standar yang berbeda (80%, 100% dan 120%) Nasolin® 104,8±2,47 103,2±0,56 98,8±0,23 101,6±0,85
dibubuhkan ke tablet komersial dalam rangkap tiga. Rata- Profed® 100,7±0,19 102,6±0,78 100,1±1,59 101,1±0,96
rata persentase pemulihan dan RSD dihitung. Rata-rata % Rata-rata±SD 101,7±2,74 102,2±1,29 98,7±2,15 100,5±1,40
T-Uji: memasangkan dua sampel sarana
pemulihan PSE dan TRI ditemukan 98,1% dan T status - . 450 - 3.598
102,2%, masing-masing (Tabel I). T Kritis 4.303 4.303

presisi
Pengulangan metode ditentukan dengan menguji tujuh
larutan standar PSE dan TRI pada konsentrasi masing-
masing 20 dan 400 g/ml. RSD pengulangan adalah
0,33% dan 0,78% untuk PSE dan TRI, masing-masing (Tabel I).
IV. CKESIMPULAN
Sebuah metode spektrofotometri derivatif dikembangkan dan
menunjukkan keuntungan yang sederhana, cepat, hemat biaya
dan hemat waktu. Tes statistik mengkonfirmasi metode ini

Penelitian & Inovasi Ilmiah dan Ilmiah Internasional 3(7) 2009 165 ISNI:0000000091950263
 Akademi Ilmu Pengetahuan, Teknik dan Teknologi Dunia
Jurnal Internasional Ilmu Farmakologi dan Farmasi
Vol:3, No:7, 2009

sebanding dengan metode USP31 dan dapat digunakan pseudoefedrin dengan beberapa antagonis reseptor histamin H1 menggunakan
metode spektrum rasio turunan. J Pharm Biomed Anal., jilid 31(4), Maret 2003,
sebagai metode analisis alternatif untuk penentuan simultan
hlm. 801-809.
kedua obat ini. Oleh karena itu, metode ini disarankan untuk [10] ICH-Q2(R1) “Validasi pada Prosedur Analitis: Teks dan Metodologi, 2005.
analisis rutin PSE dan TRI dalam bentuk sediaan tablet dan
pengujian disolusi.

TABEL III
DISOLUSI TESTING DARI PSE AND TRI DI DALAM PROFED® TMAMPU OLEH
SPECTROFOTOMETRI DAN USP31 METODE
% terlarut (PSE) % terlarut (TRI)
2D271 nm
metode USP31 A290 nm USP31
Tablet 1 101,5 100,2 123.8 123,5
Tablet 2 93.5 96.6 99,5 96.2
Tablet 3 101,5 100,4 99.1 87.2
Tablet 4 93,5 98,8 91.1 109.7
Tablet 5 101,5 100,8 93.0 91.6
Tablet 6 101,5 101,9 103.1 109,9
Rata-rata 98,8 99,8 101.6 103.0
SD 4.14 11.76 1.87 13.67
T-Uji: memasangkan dua sampel sarana
T status - . 639 - . 692
Open Science Index, Farmakologi dan Ilmu Farmasi Vol:3, No:7, 2009 publikasi.waset.org/7441/pdf

T Kritis 2.571 2.571

2D271 nm
metode USP31 A290 nm USP31
Dikumpulkan 1 101.5 100,8 94.6 88.9
Dikumpulkan 2 93.5 101.0 99.1 102.0
Dikumpulkan 3 101.5 100.3 102.3 98.8
Rata-rata 98.8 100,7 98.7 96.4
SD 4.62 3.88 0.39 6.74
T-Uji: memasangkan dua sampel sarana
T status . 042 1.107
T Kritis 4.303 4.303

APENGETAHUAN
Penulis berterima kasih kepada fakultas Farmasi, Universitas
Silpakorn yang telah mendukung hibah proyek ini.

REFERENSI
[1] TC Westfall dan DP Westfall, "Agonist dan antagonis adrenergik." Goodman
dan Gilman adalah dasar farmakologis terapi, editor, LL Brunton, JS Lazo
dan KL Parker, edisi ke-11, McGraw-Hill, New York, 2006, hlm. 260.

[2] JE Hoover, "Obat histamin dan antihistamin." Ramignton Ilmu dan Praktik
Farmasi, jilid 21, 2005, hlm. 1546-1550.
[3] L. Diamond, K. Gerson, A. Cato, K. Peace dan JG Perkins, “Evaluasi triprolidine
dan pseudoefedrin dalam pengobatan rinitis alergi.” Ann Alergi., jilid 47(2),
Agustus 1981, hlm. 87-91.
[4] USP31, Farmakope Amerika Serikat ke-31 2008, Konvensi Farmakope AS,
Inc., Rockville, MD, 2008, hlm. 3125-3127.
[5] JG Ramaekers dan JF O'Hanlon, “Performa tinggi uji kromatografi cair untuk
penentuan parasetamol, pseudoefedrin hidroklorida dan triprolidine
hidroklorida.” J Pharm Biomed Anal., vol.12(3), Maret 1994, hlm. 379-382.

[6] A. Meran, J. Morse dan TG Gibbs, "Performa tinggi uji kromatografi cair
untuk penentuan parasetamol pseudoefedrin HCl triprolidine HCl dalam
sediaan farmasi."
Pak J.Pharm Sci., jilid 6(1), Januari 1993, hlm. 29-34.
[7] G. Davidson dan LMM Mkoji, “Pengujian simultan triprolidine, pseudoefedrin
dan dekstrometorfan dalam persiapan gabungan dengan
spektrofotometri perbedaan turunan.” J Pharm Biomed Anal., jilid 6(5),
1988, hlm. 449-460.
[8] M. Palabiyik, E. Dinç dan F. Onur, “Penentuan spektrofotometri simultan
pseudoefedrin hidroklorida dan ibuprofen dalam sediaan farmasi
menggunakan rasio spektrum turunan
spektrofotometri dan teknik kalibrasi multivariat. J Pharm Biomed Anal.,
jilid 34(3), Februari 2004, hlm. 473-483.
[9] H. Mahgoub, AA Gazy, FA El-Yazbi, MA El-Sayed dan RM Youssef, “Penentuan
spektrofotometri campuran biner

Penelitian & Inovasi Ilmiah dan Ilmiah Internasional 3(7) 2009 166 ISNI:0000000091950263