PEWARNAAN

SEDERHANA
LABORATORIUM MIKROBIOLOGI

Kediri, IIK Bhakti Wiyata

Novia Agustina, S.Si., M.Sc.
STAINING
• Sebagian besar mikroorganisme tidak berwarna sehingga perlu
pewarnaan untuk pengamatan
• Untuk melihat bentuk sel bakteri  (warna) spesimen harus
kontras dengan latar belakang dari lapang pandang mikroskop
• Cat pewarna (stains)  larutan yang berisi pelarut (akuades atau
ethanol) dan molekul pewarna (biasanya derivat dari benzena)
• Prinsip : zat warna akan bergabung secara kimiawi dengan
protoplasma bakteri
• Fungsi : mengamati morfologi, struktur dan sifat bakteri
Macam – macam pewarnaan :

• Regresif staining  Pewarnaan mengunakan lebih dari 1 macam cat

Contoh : pewarnaan Gram, Zielh Neelsen
• Progresif staining  Pewarnaan yang mengunakan 1 macam cat saja
Contoh : pewarnaan sederhana
• Negatif staining  Pewarnaan yang diwarnai latar belakang saja sedang
kuman tidak terwarnai dan tampak terang
Contoh : Pewarnaan kapsul
• Metha cromatik staining , contoh : Pewarnaan Granula
SEDIAAN PREPARAT
• Sediaan  Mikroorganisme
yang diletakan pada kaca obyek
sebagai sarana untuk pewarnaan
guna diamati morfologinya.
Smear
Preparation

Fixation
Fungsi fiksasi

• Untuk membunuh kuman.

• Agar kuman mudah diwarnai
• Agar kuman sebelum dan sesudah diwarnai bentuknya tetap.
• Agar preparat tahan lama bila disimpan
Pewarnaan sederhana : hanya digunakan untuk satu macam pewarna
dan bertujuan mewarnai seluruh sel mikroorganisme. Contoh: carbol
fuchsin, safranin, gentian violet, malachite green, methylene blue

Tujuan :
- Untuk melihat morfologi kuman
- Untuk melihat susunan kuman
- Untuk melihat sifat kuman terhadap pewarnaan
- Untuk mengarahkan pemeriksaan
- Untuk membantu klasifikasi kuman
 Tahapan Pewarnaan Sederhana
1 2

4
5
6
Kriteria preparat
HASIL PEWARNAAN

Methilen Blue

• Bentuk : Coccus
• Susunan : Bergerombol
• Warna : Biru
• Cat : Methilen Blue
Carbol Fuschin

• Bentuk : Batang
• Susunan : Menyebar
• Warna : Merah
• Cat : Carbol Fuschin
Gentian Violet

• Bentuk : Batang
• Susunan : Menyebar
• Warna : Ungu
• Cat : Gentian violet
Safranin = merah Malachit green = hijau