PRAKTIKUM BIOLOGI PERKEMBANGAN TUMBUHAN

Nama : Tri Purwa Ningrum

NIM : 18308141064

RESUME JURNAL
“Pollen Grain Germination and Pollen Tube Growth in Pistil of Rice”

A. DASAR TEORI
a. Penyerbukan terjadi ketika serbuk sari mendarat di kepala putik. Jika cocok, tabung
polen muncul melalui salah satu lubang butir dan tumbuh melalui stigma, stilus,
plasenta, mikropil, dan akhirnya ke dalam kantung embrio.
b. Pada tahun 1979, Yang et al [1] mempelajari perkembangan tabung polen, dan
menemukan bahwa tabung polen memiliki dua jalur perkembangan yang berbeda,
yaitu perkembangan sporofit dan gametofit, selain itu ia juga mempelajari
pembentukan jalur tabung polen pada gandum, dan membagi proses perkembangan
tabung polen gandum menjadi tiga tahap: perkecambahan tabung polen,
pembentukan jalur tabung polen, dan deposit callose.

B. TUJUAN :
- Mengetahui dinamika pertumbuhan tabung serbuk sari pada tumbuhan padi, dalam hal
ini yang diamati yaitu laju pertumbuhan dan jalur tabung serbuk sari di stigma dan
ovarium yang dapat diketahui dengan menggunakan mikroskop fluoresensi.

C. METODE :
a. Bahan yang dibutuhkan :
Padi varietas Yangdao 6 dan galur sitoplasma jantan steril (CMS) YW-2S. Kuntum
YW-2S diserbuki dengan serbuk sari Yangdao 6 untuk mempelajari
perkecambahan butir serbuk sari dan pemanjangan tabung.
b. Langkah kerja :
- Pengamatan perkecambahan butir serbuk sari padi dilakukan secara in vitro.
 Media kultur kentang cair (Kandungan : 15% sukrosa, 5% pati kentang, 0,0005%
asam borat, dan 80% air suling) → ditebarkan di atas kaca objek → Butir serbuk
sari padi diletakkan pada kaca objek setelah media kultur yang panas didinginkan
terlebih dahulu → slide diamati di bawah mikroskop dengan kamera digital,
diamati perkecambahan butir serbuk sarinya (setiap 1 menit gambar diambil).
- Pengamatan pertumbuhan tabung polen pada putik di bawah mikroskop
fluoresensi.
Spikelet berbunga dari galur YW-2S dengan cepat diserbuki dengan serbuk sari
Yangdao 6 → Ovarium pada 1, 2, 3, 5, 10, 20, 30, 40, 60, dan 120 menit setelah
penyerbukan segera dimasukkan ke dalam FAA dan difiksasi selama 24 jam →
dimasukkan ke dalam larutan alkohol 70% → direhidrasi dalam larutan alkohol
50%, 30% dan 10% → ovarium dipindahkan ke larutan NaOH 2 mol/L selama 12
jam, dicuci dua kali dalam air suling, dan kemudian diwarnai dengan larutan anilin
biru 0,05% selama 12 jam → Ovarium yang telah melunak diletakkan pada slide
kaca bersih untuk diamati di bawah mikroskop fluoresensi, dan gambar diambil
secara digital. Laju pertumbuhan tabung polen dihitung dengan mengukur panjang
tabung polen pada titik waktu yang berbeda setelah penyerbukan.

D. HASIL DAN PEMBAHASAN

Perkecambahan butir serbuk sari padi dan pemanjangan tabung polen pada media
kultur kentang.

Serbuk sari padi yang dibiakkan
pada media kultur kentang
[menit ke-2] : Sebagian [menit ke-4] : kemudian,
besar serbuk sari mulai tabung serbuk sari memanjang,
berkecambah sebagian besar tabung serbuk
sari kira-kira sepanjang
diameter butir sebuk sari
 [menit ke-6] :
Panjang tabung serbuk sari
melebihi dua kali diameter butir
serbuk sari.
[menit ke-8] :
Tabung serbuk sari 3x
diameter butir serbuk sari
dan ujung tabung serbuk
sari sudah membesar
[menit ke-10] :
Ujung tabung serbuk sari
pecah, sementara inklusi
dilepaskan, ujung tabung
serbuk sari berhenti
memanjang.

PEMBAHASAN :

Seperti yang ditunjukkan pada Tabel 1, tingkat pengaturan benih diubah secara
teratur sesuai dengan titik waktu ketika stigma dihilangkan.

- Menit ke-5 : tidak ada floret yang dibuahi ketika stigma dihilangkan pada 5 menit
setelah penyerbukan, yang menunjukkan bahwa tabung polen belum tumbuh ke dalam
ovarium pada saat itu.
- Menit ke-10 : hanya beberapa kuntum yang dibuahi, dan tingkat pengaturan benih
hampir nol. Ujung tabung serbuk sari pecah, sementara inklusi dilepaskan, ujung
tabung serbuk sari berhenti memanjang. Hal ini mungkin karena media kentang tidak
dapat mensimulasikan putik beras yang sebenarnya, dan tidak memenuhi persyaratan
pemanjangan normal tabung polen. Selain itu, laju pertumbuhan tabung polen
bervariasi pada suhu yang berbeda, yaitu 1400–1600 m/jam dalam media kultur
kentang pada suhu optimum 30°C untuk perkecambahan butir serbuk sari.
- Menit ke- 10-15 : tingkat pengaturan benih meningkat dari 8,7% menjadi 61,1%
selama waktu untuk menghilangkan stigma pada 15-50 menit setelah penyerbukan.
Semakin lambat stigma dihilangkan, semakin tinggi tingkat pengaturan benih. Ketika
titik waktu untuk menghilangkan stigma tertunda dari 50 menit menjadi 120 menit
setelah penyerbukan, tingkat pengaturan benih meningkat cukup lambat. Hasilnya
konsisten dengan pengamatan pemanjangan tabung polen di bawah mikroskop
fluoresensi.
 - Menit ke-30 : Tabung polen padi tumbuh ke dalam ovarium, sedangkan jalur tabung
polen dari stigma ke ovarium terbentuk dan sel sperma dalam tabung polen dilepaskan
ke kantung embrio pada saat itu. Dengan demikian, penghilangan stigma hampir tidak
berpengaruh pada set benih ketika tabung polen telah mencapai ovarium.

Perkecambahan butir polen dan dinamika pertumbuhan tabung polen pada putik padi

[menit ke-2] : [menit ke-20] : [menit ke-40] :

Butir serbuk sari berkecambah
pada stigma
Tabung polen memasuki Pembesaran ujung
ovarium, kemudian terus
memanjang di ovarium
sampai 25 menit setelah
penyerbukan

[menit ke-5] : [menit ke-30] : [menit ke-50]

Tabung polen lebih panjang dari Ujung tabung polen Butiran serbuk sari mengerut,
diameter butir polen. Laju membesar di ovarium, inklusi hampir habis.
pertumbuhan tabung polen pada
stigma sekitar 1500 m/jam.

[menit ke-40] :
[menit ke-10 – 15] : [menit ke-60] :
Tabung polen tumbuh
Sebagian besar tabung polen Sumbat callose di dalam
melalui mikropil ke dalam
tumbuh menjadi stilus, laju tabung polen terbentuk,
bakal biji, Sementara
pertumbuhan mencapai sekitar sehingga inklusi tidak bisa
sejumlah kecil callose
5000 m/jam pada stilus. mengalir ke bakal biji.
terbentuk di tabung polen,
yang mungkin mencegah
inklusi mengalir mundur.
PEMBAHASAN :

Karakteristik perkecambahan butir serbuk sari dan pertumbuhan tabung serbuk sari
pada gandum dan beras adalah sebagai berikut:

- Menit ke- 2-3 setelah penyerbukan : setelah penyerbukan, butir serbuk sari dari beras
dan gandum berkecambah.
- Menit ke-10 setelah penyerbukan : setelah penyerbukan, tabung polen yang baru
muncul tidak mencapai ovarium, sehingga penghilangan stigma pada periode ini akan
mengakibatkan kegagalan pembuahan kuntum.
- Menit ke-20 setelah penyerbukan : hanya beberapa kuntum yang dibuahi dan tingkat
pembentukan benih cukup rendah ketika stigma dihilangkan. Ketika tabung polen
memanjang sampai beberapa panjang, sebagian besar inklusi dalam butiran polen
pindah ke bagian depan tabung polen untuk memberikan nutrisi bagi pertumbuhan
tabung berikutnya, sehingga penghilangan stigma memiliki sedikit efek pada
pertumbuhannya pada periode itu.
- Menit ke 30-40 setelah penyerbukan : banyak tabung serbuk sari diamati di ovarium
beras dan gandum yang menunjukkan bahwa jalur tabung polen dari stigma ke ovarium
sudah terbentuk pada 30 menit setelah penyerbukan. Sementara itu, beberapa tabung
polen tumbuh melalui mikropil ke dalam bakal biji, dan terkadang beberapa tabung
polen tumbuh bersama menjadi bakal biji. Tingkat pengaturan benih melebihi 35%
karena stigma telah dihilangkan pada 40 menit setelah penyerbukan, yang
menunjukkan bahwa jalur tabung polen pada dasarnya terbentuk pada waktu itu.
- Menit ke 40-50 setelah penyerbukan : ujung beberapa tabung polen membesar secara
tidak normal, dan callose diendapkan di dalamnya. Jalur tabung polen terbentuk
sempurna pada saat itu. Tingkat pengaturan benih padi dan kuntum gandum dengan
stigma dihapus sebagian besar meningkat, menjadi lebih dari 55%. Tingkat pengaturan
benih beras dengan stigma dihapus selama 20-50 menit setelah penyerbukan lebih
tinggi dari gandum. Ini mungkin disebabkan oleh suhu yang berbeda saat berbunga.
Gandum berbunga di musim semi saat suhu relatif rendah, sedangkan padi berbunga di
musim panas. Dengan demikian, tabung serbuk sari tumbuh lebih cepat dan tingkat
pengaturan benih lebih tinggi dibandingkan dengan gandum.
- Menit ke- 50-60 setelah penyerbukan : serbuk sari mengkerut, inklusinya habis, dan
sejumlah besar callose terbentuk, menghalangi tabung polen. Tingkat pengaturan benih
cukup tinggi dengan stigma dihilangkan pada periode ini, dan 55% pada gandum, dan
mencapai 61,1% pada beras ketika stigma dihilangkan pada 50 menit setelah
penyerbukan. Tingkat pengaturan benih gandum dan beras berada di atas 65% ketika
stigma dihilangkan pada 60 menit setelah penyerbukan, mendekati tingkat dalam
kondisi alami.

Mekanisme yang mungkin terlibat dalam pertumbuhan terarah tabung polen

Umumnya pada tumbuhan banyak tabung polen masuk ke ovarium, tetapi hanya
sedikit yang mencapai dasar ovarium, dan akhirnya hanya satu tabung polen yang melewati
mikropil dan mengalami pembuahan ganda. Pada beras, sebagian besar tabung serbuk sari,
ketika mereka sampai ke ovarium, berhenti tumbuh dan ujungnya membesar secara tidak
normal. Mungkin karena kurangnya kemampuan untuk memanjang dan masuk ke mikropil
dalam tabung polen, atau ketika satu tabung polen melewati mikropil, kemudian dapat
menghalangi tabung polen lainnya ke dalam mikropil, sehingga tabung polen lainnya
tumbuh tidak normal dan akhirnya mati.

Tian dan Yuan telah mempelajari pertumbuhan tabung serbuk sari tembakau, dan
menemukan bahwa pertumbuhan tabung polen terpolarisasi dan pemanjangan tabung
polen dihasilkan dari vesikel sekretorik yang dihasilkan oleh aparatus Golgi, yang mungkin
berkaitan dengan arah pertumbuhan tabung polen ke dalam kantung embrio.

Perkecambahan butir polen dan arah pertumbuhan tabung polen diduga berkaitan
erat dengan kalsium. Dalam jurnal “The primary observation of calcium distribution
during the anther development of tobacco” oleh Zheng at al, menunjukkan bahwa kalsium
ditemukan dalam gaya tembakau. Studi pada labu handuk oleh Chu et al, menunjukkan
bahwa konsentrasi kalsium rendah 0,01-1,00 mmol/L dapat mendorong perkecambahan
butir polen dan pemanjangan tabung polen, sedangkan konsentrasi tinggi 10 mmol/L
menghambat. Selain itu, Yang dan Zhou, menyarankan bahwa pertumbuhan tabung polen
dikaitkan dengan hormon tanaman.
DAFTAR PUSTAKA
Hu Y, Zhao J. Morphologic character of pollen tube growth and embryo development during
sexual reproductive process of Arabidopsis thaliana. J Wuhan Univ, 2006, 52(2): 241–246.

Xie C T, Qiu Y L, Ge L L, Chen S H, Tian H Q. The distribution of calcium in the stigma and
style of tobacco during pollen germination and tube growth. Acta Physiol Sin, 2005,
31(1): 53-61. (in Chinese with English abstract)

Tian H Q, Yuan T. Calcium function in fertilization process in angiosperms. Acta Physiol Sin,
2000, 26(5): 369–380. (in Chinese with English abstract)

Yang H Y, Zhou C. Review of Studies on sexual reproduction in Plants. Wuhan: Wuhan

University Press, 2001. (in Chinese)