Karena bakteri gram positif memiliki susunan dinding sel lapisan peltidoglikan yang lebih tebal. Sehingga pada saat pemberian zat warna utama (GV) sudah mengikat, maka vakteri gram Positif berwarna ungu. Jika sudah mengikat zat warna utama (GV), sulit dilunturkan dengan alkohol 96%
Mengapa bakteri gram negatip warna merah ?
Karena bakteri gram negatif melepaskan zat warna utama (GV) pada saat proses pelunturan (decolorisasi) dengan alkohol 96% dan mengikat zat warna penutup ( fuchsin)
Tugas
Mengapa tidak dilakukan fiksasi?
Pengecatan negatif tidak memerlukan proses fiksasi terlebih dahulu, karena proses fiksasi dapat membuat sel menjadi mengkerut. Biasanya, pengecatan negatif berfungsi untuk melihat bentuk, ukuran dan kapsul sel. Jika pada pengecatan negatif dilakukan juga proses fiksasi, akan membuat perubahan pada ukuran sel sehingga ukuran sel menjadi tidak akurat. Lagipula, salah satu fungsi dari proses fiksasi adalah untuk membuat proses pewarnaan bakteri menjadi lebih baik. Sementara itu, pengecatan negatif hanya mewarnai latar belakang dan tidak akan mewarnai permukaan sel sehingga proses fiksasi tidak perlu dilakukan
Mengapa bakteri tidak menyerap zat warna?
Pengecatan negatif menggunakan tinta cina atau nigrosin. Tinta cina atau nigrosin merupakan jenis pewarna asam dan bermuatan negatif. Tinta cina tidak akan bisa berikatan dengan dinding sel dari bakteri karena sama-sama bermuatan negatif, sehingga tinta cina hanya akan mewarnai permukaan preparat atau dengan kata lain membuat gelap latar belakang dari bakteri. Prinsip dari pengecatan negatif adalah membuat kontras latar belakang objek sehingga objek yang transparan dan tidak terwarnai menjadi lebih jelas terlihat