Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

Lihat diskusi, statistik, dan profil penulis untuk publikasi ini di: https://www.researchgate.net/publication/8429539

Keanekaragaman Kimia Produk Alam Laut Bioaktif: Sebuah Kasus Ilustrasi

Belajar

Artikel di dalam Kimia Obat Saat Ini · Agustus 2004

DOI: 10.2174/0929867043364973 · Sumber: PubMed

KUTIPAN BACA
50 684

4 penulis:

Valeria Costantino Ernesto Fattorusso

Universitas Napoli Federico II Universitas Napoli Federico II
190 PUBLIKASI 2.138 KUTIPAN 404 PUBLIKASI 13.578 KUTIPAN

LIHAT PROFIL LIHAT PROFIL

Marialuisa Menna Orazio Taglialatela-Scafati

Universitas Napoli Federico II Universitas Napoli Federico II
87 PUBLIKASI 1,780 KUTIPAN 249 PUBLIKASI 6.383 KUTIPAN

LIHAT PROFIL LIHAT PROFIL

Beberapa penulis publikasi ini juga mengerjakan proyek terkait ini:

Investigasi Kimia dan Biologis Tanaman Apiacea Lihat proyek

Ekstraksi senyawa bioaktif dari tanaman obat Lihat proyek

Semua konten yang mengikuti halaman ini diunggah oleh Marialuisa Menna pada 22 Mei 2014.

Pengguna telah meminta peningkatan file yang diunduh.

 Kimia Obat saat ini, 2004, 11, 1671-1692 1671

Keanekaragaman Kimia Produk Alam Laut Bioaktif: Studi Kasus

Ilustratif

Valeria Costantino, Ernesto Fattorusso*, Marialuisa Menna dan Orazio Taglialatela-Scafati

Dipartimento di Chimica delle Sostanze Naturali, Università di Napoli “Federico II”, melalui D. Montesano 49, I-80131
Napoli, Italia

Abstrak: Lingkungan laut mengandung sejumlah tumbuhan, hewan, dan organisme mikro, yang, karena
adaptasi yang unik terhadap habitatnya, menguraikan keanekaragaman produk alam yang luas dengan aktivitas
hayati yang spesifik. Produk-produk ini menyediakan sumber keragaman kimia yang kaya yang dapat digunakan
untuk merancang dan mengembangkan agen terapeutik baru yang berpotensi berguna. Keragaman besar
struktur yang ada pada organisme laut telah diilustrasikan melalui studi kasus sponsPlakortis simpleks, yang
analisis kimianya, dimulai di laboratorium kami sekitar sepuluh tahun yang lalu, mengungkapkan keragaman
dan kelimpahan metabolit sekunder yang luar biasa. Hasil yang diperoleh telah disajikan dengan maksud untuk
menarik beberapa kesimpulan relevansi umum. Khususnya masalah keterbatasan ketersediaan senyawa alam
untuk studi farmakologi struktural dan pendahuluan telah dibahas, masalah ini menjadi kendala serius ketika
penelitian farmakologis mencapai tahap yang lebih lanjut. Selanjutnya, asal usul kemodiversitas diPlakortis
simpleks dan, secara umum, pada invertebrata laut telah dibahas; dalam hal ini, kemungkinan peran kerja sama
dari mikro-organisme simbiosis dalam biosintesis berbagai kandungan metabolik yang khas dari organisme ini
telah dipertimbangkan.

Kata kunci: Kelautan, keanekaragaman kimia, produk alami bioaktif, glikolipid, alkaloid, poliketida, Plakortis simpleks,
tinjauan.

PENGANTAR contoh produk alam berharga yang banyak digunakan dalam

Bahwa alam merupakan sumber penting yang potensial untuk
obat-obatan yang bermanfaat telah dikenal sejak zaman dahulu.
Keragamannya yang besar berkembang selama beberapa miliar
tahun evolusi menghasilkan koeksistensi sejumlah besar spesies
yang berinteraksi satu sama lain dalam beberapa cara. Dalam proses
ini, kimia memainkan peran penting; dalam istilah sederhana, semua
organisme berbagi biokimia yang hampir sama yang diperlukan
untuk sel hidup tetapi, di samping itu, mereka menghasilkan
berbagai macam apa yang disebut "metabolit sekunder" yang
terlibat dalam interaksi antar organisme. Mempertimbangkan
jumlah spesies yang berbeda dan kemungkinan interaksi yang
hampir tak terbatas, tidak mengherankan bahwa berbagai macam
metabolit sekunder, yang dihasilkan dari tekanan evolusi untuk
melestarikan dan meningkatkan kehidupan organisme penghasilnya,
telah berevolusi menjadi senyawa kompleks secara struktural dan
biasanya stereokimiawi dengan potensi biologis. Dengan demikian,
alam telah melakukan kimia kombinatorial selama ribuan tahun dan
mewakili gudang nyata senyawa bioaktif baru.
Studi tentang metabolit sekunder secara historis terbukti
sangat bermanfaat dalam penemuan obat, menyediakan
sumber molekul bioaktif baru yang kaya secara struktural,
banyak di antaranya telah menjadi obat penyelamat jiwa
atau alat biomedis. Sekitar sepertiga obat terlaris di dunia
adalah produk alami atau turunannya; terkenal
* Alamat korespondensi dengan penulis ini di Dipartimento di Chimica
delle Sostanze Naturali, Università di Napoli “Federico II”, melalui D.
Montesano 49, I-80131 Napoli, Italia; Email: fattoru@unina.it
industri medis dan kesehatan hewan antara lain eritromisin
(antibiotik), amfoterisin B (agen fungisida), siklosporin A dan
FK506 (agen imunosupresif), lovastatin (agen
antikolesterolemia); sebanyak 25% obat antikanker yang saat
ini digunakan adalah bahan kimia alami, dengan 25% lainnya
berasal dari turunan sintetis produk alam [1,2]. Oleh karena
itu, penggunaan bahan alam hingga saat ini merupakan cara
yang paling berhasil untuk penemuan obat-obatan baru.
Saat ini, dengan kebutuhan yang terus-menerus
akan senyawa timbal seperti obat baru terhadap
jumlah target molekul yang semakin menantang,
ketersediaan perpustakaan yang kaya dari molekul
yang beragam secara kimiawi merupakan persyaratan
penting. Namun, penemuan obat telah memasuki era
yang lebih kompetitif di mana kualitas pengumpulan
bahan kimia dan waktu yang dibutuhkan dari
pengujian hingga pengembangan obat merupakan
faktor penting. Jadi, meskipun kebaruan kimia yang
terkait dengan produk alami lebih tinggi daripada
sumber lain, keragaman ini harus diakses lebih efisien
dan efektif. Sampai saat ini, salah satu masalah utama
yang terkait dengan penggunaan produk alami
sebagai timbal untuk obat baru adalah kompleksitas
prosedur penyaringan ekstrak, yang mahal dan
memakan waktu; Selain itu,
Saat ini, sebagian besar obat baru ditemukan
berdasarkan pendekatan molekuler, yang dapat dilakukan
tidak hanya melalui desain obat rasional yang dibantu oleh
teknik berbasis komputer atau melalui manipulasi genetik.

0929-8673/04 $45.00+.00 © 2004 Bentham Science Publishers Ltd.

1672 Kimia Obat Saat Ini, 2004, Vol. 11, No. 13 Fattorusso dkk.

target (pendekatan antisense), tetapi juga melalui
pendekatan pragmatis penyaringan acak. Pendekatan
terakhir untuk penemuan obat, yang juga disebut biologi
kombinatorial, telah diperbarui oleh perkembangan
terakhir dalam biologi molekuler, teknologi instrumentasi
dan informasi, sehingga sekarang dapat dilakukan pada
throughput tinggi yang tidak dapat dibayangkan, bahkan
beberapa tahun yang lalu [3-6]. Meningkatnya
ketersediaan target molekuler baru, potensi untuk
mengubahnya dengan rekayasa genetika, seperti
penyederhanaan proses de-replikasi melalui penggunaan
klon, menjadikan skrining acak sebagai alat yang sangat
menjanjikan untuk penemuan senyawa bioaktif baru;
perbaikan lebih lanjut tidak marjinal datang dari
penggunaan robotika untuk melakukan pengujian. Saat
ini,
Kemajuan terbaru dalam pemutaran acak memungkinkan
peningkatan besar dalam throughput yang akan dicapai, tetapi, di
sisi lain, mereka menimbulkan beberapa masalah agar mudah
diterapkan. Program penyaringan throughput tinggi membutuhkan
ketersediaan sejumlah besar senyawa untuk pengujian
yang harus berbeda secara struktural untuk meningkatkan
kemungkinan menemukan aktivitas pada target molekuler.
Persyaratan ini tidak dapat disediakan oleh sintesis organik
tradisional dan karenanya, selama beberapa tahun terakhir,
pendekatan baru, seperti kimia kombinatorial dan desain pemodelan
molekul berbasis komputer telah menjadi sumber tingkat baru
keragaman kimia. Awalnya, mereka tampaknya menurunkan nilai
produk alami dalam penemuan obat; namun, karena penggunaan
teknik ini telah matang, menjadi jelas bahwa mereka mencapai
kepentingan yang signifikan terutama dalam generasi perpustakaan
terfokus untuk program penemuan tertentu [5]. Memang, kimia
kombinatorial telah gagal untuk menggantikan program produk
alami sebagai sumber utama keanekaragaman kimia yang luas.
Sekarang jelas bahwa produk alami menawarkan sumber keragaman
molekul yang berpotensi tak terbatas yang tak tertandingi oleh
koleksi kimia sintetis atau kimia kombinatorial [6]; organisme alami
yang sederhana, terutama yang berada pada tingkat evolusi yang
lebih rendah, mampu menciptakan struktur baru dalam banyak cara
yang berbeda. Biosintesis metabolit sekunder dalam organisme
mikro, tumbuhan dan invertebrata mewakili kimia kombinatorial
pada tingkat yang paling luas dan serbaguna, dipandu oleh

HAI
OSO3-
HAI Cl Cl OH Cl OH OH Cl

OH
1 Cl Cl Cl Cl Cl Cl Cl OH
NC
NCS 5 6 SCN
OH
4
2
NCS
3
Cl Cl HAI

OHCHN n
OSO2NHMe
NaO3JADI OH
Cl 7
OH OH
Cl
5 6
OH OH
Aku H
HAI Aku
H
Aku HAI
Aku HO Wahai Aku

Aku HAI OH H
OH H
Aku H H
H H H H H HAI HO Wahai Aku

H
HAI HAI HAIH Aku Wahai Aku

H
Aku OH OH
HAI HAI H HAI
Aku Aku Aku H Aku H
HO
HO H
HHAI HAI
H
NaO3JADI OH
HHAI Aku H OH OH
Aku H OH H H H H
HAI
H Me Aku H HAI HAI HAI HAI OH HAI
HO OH OH
M H H H
e HAI OH
HAI H HAIH
HAI HAI HAI HO
oh aku OSO3tidak OH H H H H H H H H
HO OH OH OH
OH HO HAI
OH HH OH
OH OH
8

Gambar (1). Contoh keanekaragaman kimia senyawa yang diisolasi dari organisme laut.
Produk Alam Laut Bioaktif
enzim yang diekspresikan oleh kumpulan gen yang luas berevolusi selama miliaran
tahun.
Penyelidikan bahan kimia yang dihasilkan oleh
sumber-sumber alam awalnya difokuskan pada
organisme terestrial. Sejak tahun 1960-an, para
peneliti mulai memandang lautan sebagai sumber
senyawa unik yang baru dan belum tersentuh –
mungkin tidak mengherankan mengingat lebih dari
60% biosfer bumi adalah lautan. Lingkungan laut
merupakan sumber yang kaya akan tumbuhan, hewan
dan organisme mikro, yang karena adaptasi mereka
terhadap habitat yang unik ini, menghasilkan berbagai
macam metabolit sekunder tidak seperti yang
ditemukan pada spesies terestrial. Telah diketahui
bahwa sebagian besar senyawa laut dihasilkan oleh
invertebrata seperti spons, tunikata dan coelenterata
[7]. Kekayaan metabolit sekunder mereka telah
dikaitkan dengan peran pertahanan kimia yang
dimainkan oleh konstituen ini;
Lebih dari 13.000 produk alami laut baru telah ditemukan,
dengan peningkatan yang nyata dalam sepuluh tahun terakhir;
spons mendominasi sebagai sumber senyawa baru (hampir
40%), diikuti oleh coelenterata (21%) dan mikroorganisme (15%)
[11]. Semua organisme laut telah memberikan parade yang
tampaknya tak berujung dari struktur baru yang sangat tidak
biasa; secara biogenetik, mereka dapat dimasukkan dalam jalur
biosintetik utama yang diusulkan untuk metabolit sekunder
terestrial sedangkan, secara struktural, mereka sering memiliki
gugus fungsi yang muncul secara unik atau dominan laut.. Salah
satu fitur yang paling sering muncul adalah keberadaan atom
halogen, yang dapat dikaitkan dengan kelimpahan relatif unsur-
unsur ini di lingkungan laut; terkadang halogen hadir dalam
jumlah yang cukup besar, seperti dalam senyawa1 [12]. Isonitril,
isothiocyanate, thiocyanate dan formamide, diwakili oleh
senyawa2
[13], 3 [14], 4 [15] dan 5 [16] masing-masing, adalah fungsi
lebih lanjut yang pada dasarnya telah ditemukan dalam
senyawa laut. Gugus kimia sebagai karbonimida diklorida
yang ada dalam senyawa6 [17] atau gugus sulfamat dalam
haplosamat A (7) [18] hanya ditemukan dalam metabolit
spongal.
Singularitas senyawa turunan laut tidak terbatas pada
fungsi, tetapi juga menyangkut kerangka karbonnya,
misalnya kelas struktural polieter, yang merupakan dasar
dari sebagian besar racun laut, diwakili dengan baik oleh
maitotoxin (8), toksin non-protein terbesar yang memiliki
kerangka yang tersusun oleh 164 atom karbon [19].
Sementara studi awal dalam produk alami laut
merupakan survei metabolisme sekunder laut, studi terbaru
telah difokuskan, untuk tingkat yang lebih besar, pada
penemuan metabolit dengan aktivitas biomedis yang relevan
[20,21]. Melalui upaya gabungan ahli kimia produk alam laut
dan ahli farmakologi, sejumlah senyawa yang menjanjikan
telah diidentifikasi dan beberapa di antaranya sudah dalam
tahap uji klinis lanjutan atau telah dipilih sebagai kandidat
yang menjanjikan untuk evaluasi pra-klinis yang
diperpanjang. Sebagian besar produk ini termasuk dalam
bidang terapi kanker; kasus alkaloid laut ecteinascidin 743
(ET-743), senyawa anti-tumor yang sangat efektif
Kimia Obat Saat Ini, 2004, Vol. 11, No. 131673
terhadap tumor padat, adalah contoh ilustrasi [22].
ET-743 adalah senyawa paling canggih di antara produk
alami laut (atau analog) yang saat ini sedang dalam
penyelidikan klinis dan diharapkan memasuki pasar obat
di Eropa pada tahun depan. Contoh lebih lanjut yang
akan disebutkan adalah bryostatin dan dolastatin,
diisolasi dari bryozoanBugula neritina dan dari kelinci laut
Dolabella auricularia, masing-masing, yang juga telah mencapai
tahap akhir uji klinis [23-25]. Arabinofuranosyladenine (ara-A),
turunan dari ara-U, diisolasi dari spons
Cryptotethya crypta [26], mungkin merupakan senyawa
bioaktif yang paling menonjol dari spons. Telah ditemukan
untuk menampilkan aktivitas virus anti-herpes ampuh
karena penghambatan kompetitif polimerase virus [27, 28].
Pseudopterosins, glikosida diterpen yang tidak biasa diisolasi
dari gorgonianPseudopterogorgia elisabethae, terbukti
menghambat fosfolipase A2; enzim kunci dalam biosintesis
mediator inflamasi eicosanoid [29]. Sebuah analog
sederhana dari senyawa ini saat ini dalam uji klinis fase I
sebagai agen anti-inflamasi baru yang potensial. Contoh luar
biasa lebih lanjut adalah ziconotide, peptida linier 25 asam
amino penghilang rasa sakit yang telah berhasil
menyelesaikan uji klinis fase III untuk dua aplikasi terapeutik:
untuk mengurangi rasa sakit yang terkait dengan penyakit
ganas seperti kanker atau AIDS, dan sebagai analgesik untuk
nyeri neuropatik non-ganas. Senyawa ini telah ditemukan
dalam racun moluska lautconus magusdan memberikan efek
analgesik karena penyumbatan saluran kalsium [30].
Bahkan jika hasil ini menggambarkan peningkatan
dampak dari bidang ini pada penelitian biomedis, mereka
juga menunjukkan bahwa organisme laut telah dievaluasi
untuk fungsi biologisnya hanya pada tingkat awal, bila
dibandingkan dengan rekan-rekan mereka di darat. Jumlah
metabolit turunan laut, yang telah memasuki uji klinis, masih
sangat kecil jika dibandingkan dengan keragaman kimia
senyawa bioaktif yang kaya di lautan, yang mewakili subjek
tinjauan ini. Sebenarnya, karena banyaknya molekul bioaktif
yang sejauh ini diisolasi dari organisme laut, luasnya materi
ini sungguh luar biasa dan sulit untuk dimasukkan ke dalam
deskripsi yang sistematis. Tambahan, diskusi komprehensif
tentang keanekaragaman kimia harus mempertimbangkan
organisme produsen yang termasuk dalam filum yang
sangat berbeda dan tergantung pada tingkat evolusinya,
mereka dapat menampung berbagai simbion uniseluler
yang berkontribusi pada metabolisme sekunder mereka.
Oleh karena itu, kami memutuskan untuk membahas topik
ini melalui kasus ilustrasi spons,Plakortis simpleks, yang
analisis kimianya, dimulai di laboratorium kami sekitar
sepuluh tahun yang lalu, mengungkapkan keragaman dan
kelimpahan metabolit sekunder yang luar biasa. Hasil yang
diperoleh akan dibahas kemudian dengan maksud menarik
beberapa kesimpulan relevansi umum.
METABOLIT BIOAKTIF DARI SPONS PLAKORTIS
SIMPLEX
Kami mulai belajar P. simpleks awalnya memusatkan
perhatian kita pada komposisi glikolipidnya; namun,
selain sejumlah glikolipid baru, spons ini juga terbukti
menghasilkan beberapa metabolit poliketida dan
alkaloid. Banyak dari molekul ini adalah senyawa baru
1674 Kimia Obat Saat Ini, 2004, Vol. 11, No. 13 Fattorusso dkk.

OH
OH
H OH
HAI HAI
HAI R1 ATAU CH
1021
HAI OH
H H NH
HO NH HAI
OH H
OH HO HAI C10H21
HAI R2 HO
H H OH
OH

HO OH OH OH
OH
HO OH
OH
HAI HAI HAI
R1 OH
HAI
OH
HAI

H H H H
H H HH HH HHO
HH HH HH
OH HAI HAI
HHAI O HO OH HAI O HO
HO HAI
HAI HAI HAI HAI HAI
HO OH
H OH
HHHAI H
OH H OH H OH H
H
H H H H H H H H H H H

OH
H
H
HO HAI
HO H
H OH OH
H HAI H
H HAI
HO HAI
H OH HHAI OH
H H HAI
R1
HO HAI

HAI
HAI COOH
HAI
HAI COOCH3 OH
HAI
HAI

HAI HAI HAI

HAI H3BERSAMA
H HAI COOCH3
HAI H3COOC
OH
H3COOC

HAI COOCH3
H
HAI OCH3 Cl OH
H BERSAMA

OH

HAI HAI COOH

- H
Saya OOC OH
HAI-
HAI COOCH3
n+ + H
n n HAI OH
Saya H CH3

Gambar (2). Contoh representatif dari keanekaragaman molekul yang ditemukan di Plakortis simpleks.

diberkahi dengan bioaktivitas yang menjanjikan (imunomodulasi, struktur masing-masing senyawa yang diperoleh. Namun, untuk
antimalaria, sitotoksik). menyoroti berbagai alat yang dikembangkan selama tahun-
tahun terakhir untuk membantu pekerjaan ahli kimia produk
Di halaman berikut, kami mensurvei isolasi dan
alami, beberapa strategi umum yang digunakan baik untuk
penjelasan struktur metabolit baru yang ditemukan
isolasi dan untuk penjelasan struktur diilustrasikan. Penekanan
dari P. simpleks. Ini benar-benar di luar maksud
khusus ditujukan pada deskripsi teknik yang memungkinkan
tinjauan ini untuk merinci prosedur isolasi, serta studi
solusi masalah stereostruktural yang cukup kompleks yang
spektral dan kimia, yang digunakan untuk menetapkan
hanya memiliki sedikit bahan.
Produk Alam Laut Bioaktif Kimia Obat Saat Ini, 2004, Vol. 11, No. 131675

Skema 1. Prosedur isolasi untuk P. Simplex.

Glikolipid memiliki perilaku amfifilik. Prosedur isolasi yang kami

kembangkan dirangkum dalam Skema1.
Banyak glikolipid yang menarik terdapat dalam spons dalam
Sebagai keuntungan tambahan, kami menemukan bahwa
jumlah kecil dan, sangat sering, sebagai campuran homolog yang
metodologi ini menyatukan dalam fraksi kromatografi yang
berbeda dalam bagian lipid dari molekul untuk panjang dan
terdefinisi dengan baik kelas senyawa lain yang berbeda yang
percabangan rantai alkil. Oleh karena itu, untuk mempelajari molekul
kami minati. Produk murni kemudian dapat dengan mudah
semacam ini, kami perlu menyiapkan yang sederhana dan efisien
diperoleh dengan HPLC.
prosedur isolasi dengan mempertimbangkan bahwa glikolipid

Gambar (3). Pengaruh asetilasi pada resonansi 1H NMR glikolipid.

1676 Kimia Obat Saat Ini, 2004, Vol. 11, No. 13
Karena jumlah kecil yang umumnya tersedia untuk studi
struktural, kami mencoba untuk mengatasi penjelasan struktur
glikolipid dengan memanfaatkan pengalaman yang telah kami
peroleh selama bertahun-tahun dengan teknik NMR daripada
menggunakan metodologi degradasi yang dikembangkan oleh
kelompok penelitian lain [31] yang sedang digunakan saat itu.
Masalah yang luar biasa dari pendekatan ini adalah tumpang tindih
yang kuat dari proton gula yang beresonansi di wilayah spektrum
yang cukup sempit. Kami menemukan bahwa sinyal tumpang tindih
dapat dikurangi secara dramatis menggunakan glikolipid perasetilasi
karena dispersi sinyal yang lebih baik di dalamnya.1spektrum H-NMR.
Akhirnya, jika tidak ada fungsi ester lebih lanjut dalam glikolipid
(seperti yang terjadi pada sphingolipid, tetapi tidak untuk
gliserolipid), glikolipid perasetilasi dapat dikembalikan ke struktur
alaminya, menggunakan metanolisis yang dikatalisis basa.
[32], untuk melakukan pengujian biologis. Gugus asetil yang
sudah ada dalam senyawa alami dapat dibedakan dengan
mengasetilasi sejumlah kecil fraksi glikolipid menggunakan
anhidrida trideuteroasetat sebagai ganti anhidrida asetat.
A. Glikosfingolipida
Glycosphingolipids (GSLs) adalah komponen
karakteristik dari membran sel eukariotik, di mana
mereka melayani berbagai fungsi melalui interaksi
dengan banyak biofaktor. Pada permukaan sel, GSL dapat
berinteraksi dengan toksin, virus dan bakteri, dan
interaksi dengan reseptor dan enzim telah dijelaskan
memiliki beberapa signifikansi fisiologis. Sejumlah GSL
berperan sebagai antigen terkait tumor dan dalam
imunoterapi bentuk kanker individu.
Sejumlah besar GSL yang berbeda telah diisolasi sampai
sekarang, terutama dari jaringan organ hewan tingkat tinggi.
Sebagian besar GSL yang diketahui berasal dari organisme laut
[33], kebanyakan dari mereka adalah serebrosida dan
gangliosida yang diisolasi dari echinodermata (bintang laut, bulu
babi, holothurian atau moluska).
Dalam beberapa tahun terakhir, minat ilmiah pada GSL
meningkat karena peran yang dapat mereka mainkan
sebagai agen imunomodulasi terapeutik. Laporan pertama
imunomodulasi GSL datang dari kelompok Jepang yang pada
tahun 1993 mengisolasi agelasphin (9) dari spons Agelas
mauritiana [34].
OH
HAI
ATAU
OH
H NH
HAI 10 R =
HHO HAI
R
HO
H H OH
11 R` =
12 R` =
13 R =
Gambar (5). Struktur plakosida AD.
Fattorusso dkk.
OH
OH OH
H HAI R1
H HAI
H R1 , R2 = rantai alkil
HO NH OH
H OH
H HAI R2
9 OH
Gambar (4). Struktur agelasfin.
Agelasphin hadir di Agelas mauritiana sebagai campuran
homolog yang berbeda dalam komposisi rantai asam lemak
(FA) dan LCB. Agelasphins menunjukkan aktivitas biologis
yang sangat menarik: mereka memamerkanin vivo
efek antitumor ketika diuji pada melanoma murine B16 yang
ditanamkan secara intraperitoneal. Efek aditif diamati ketika
senyawa ini diberikan dalam kombinasi dengan adriamisin,
agen kemoterapi yang terkenal. Agelasphins kemudian diuji
untuk mengevaluasi efek imunomodulasi mereka
menggunakan uji MLR (reaksi limfosit campuran) yang
menunjukkan aktivitas imunostimulasi yang ditandai pada
konsentrasi di bawah 1
μ g/ml. Selain itu, agelasphin terbukti tidak sitotoksik,
sehingga diyakini bahwa senyawa ini bertindak sebagai
pengubah respons biologis (BIO) [35] dan aktivitas
antitumornya yang ditandai disebabkan oleh aktivasi sistem
kekebalan. Kelompok yang sama mensintesis analog dekat
agelasphin, KRN7000 [36] yang dianggapsebagai agen
antikanker baru, bertindak melalui stimulasi sistem
kekebalan tubuh. Bukti lebih lanjut mengkonfirmasi
kegunaan KRN7000 sebagai terapi kanker kemudian
diperoleh. Secara khusus, hubungan antara efek antitumor
dan aktivasi sel pembunuh alami (NK) diselidiki dan
disarankan bahwa KRN7000 mungkin meningkatkan aktivitas
NK tidak secara langsung, tetapimelalui aktivasi sel T. Selain
itu, telah diusulkan bahwa KRN-7000 bertindak melalui
aktivasi sel penyaji antigen, seperti sel dendritik
[37]. Uji klinis pertama dengan agen ini, yang mencakup
studi farmakokinetik, baru-baru ini telah selesai [38].
Mempelajari komposisi GSL dari spons Agelas
[39] dan axinella [40] kami menemukan sepuluh -GSL yang lebih
kompleks yang memiliki galaktosa glikosilasi pertama oleh gula yang
berbeda di posisi yang berbeda dan dengan sejumlah unit gula mulai
dari 2 sampai 5.
C10H21
C10H21
R=H
C10H21 R = H
C10H2 1 R = Glc
C10H21 R = Glc
Produk Alam Laut Bioaktif
ATAU
HAI
C10H21 H2/PtO2
NH
Gula HAI C1 0H21
ATAU
ATAU
saya CH
102 1
x HO
HAI
1. KMnO4/NalO4
2. CH N
22
HAI
C1 0H21
saya x C10H2 1
X, Y = CH2 HC + H2C
CH
CH3 CH3
Skema 2. Degradasi kimia skala mikro dari plakosida.
Senyawa ini telah diuji untuk menilai aktivitas
imunomodulasi mereka menggunakan uji proliferasi sel
T, dan kami menemukan bahwa beberapa, tetapi tidak
semua, dari mereka adalah agen imunostimulan. Data
yang diperoleh menunjukkan posisi 2 gula bagian dalam
menjadi titik penting untuk aktivitas imunostimulasi:
glikosilasi pada posisi ini mengakibatkan hilangnya efek
stimulasi pada proliferasi limfosit.
Menyelidiki komposisi glikolipid spons
P. simpleks kami menemukan empat GSL unik yang memiliki fitur
struktural yang belum pernah ada sebelumnya di antara produk alami.
Mereka adalah -gactosylceramides, bernama plakosides AD (10-
13) [32,41], yang residu galaktosanya dialkilasi pada O-2 oleh
gugus 3,3-dimetilalil. Plakosida sangat menarik dari sudut
pandang struktural, karena mereka adalah contoh pertama
GSL dengan gula terprenilasi dan juga GSL alami pertama
dengan seramida yang mengandung siklopropana.
Selain itu, keberadaan galaktosa terprenilasi pada posisi 2
yang sangat penting adalah sangat penting sehubungan dengan
aktivitas biologisnya. Faktanya, dalam uji proliferasi sel T,
mereka ditemukan menghambat proliferasi sel limfonode
murine yang diaktifkan dengan concanavalin A. Aktivitas
imunosupresif ini sangat menarik, karena, tidak seperti
kebanyakan imunosupresan yang digunakan secara klinis,
plakosida tidak sitotoksik, seperti yang ditunjukkan oleh respon
negatif terhadap uji MTT.
Karena struktur dan bioaktivitasnya yang unik,
plakosida menarik perhatian ahli kimia sintetik. Dua
sintesis independen plakoside A telah dilaporkan [42,
43]. Konfigurasi absolut dari dua cincin siklopropana
kemudian ditentukan oleh degradasi kimia plakosida A
alami. Fragmen turunan yang diperoleh dari rantai
alkil plakosida A dibandingkan dengan yang disintesis
Kimia Obat Saat Ini, 2004, Vol. 11, No. 131677
ATAU
HAI CH
1021
x
NH
AcOH Gula HAI C10H21
kamu
ATAU
1. HCl/MeOH
2. Kromatografi
NH2
C10H21
kamu
ATAU
1. KMnO4/NalO4
2. CH2n2
GLC-MS saya
kamu
HAI
+
CH2 H2C
CH3
sampel dengan konfigurasi absolut yang diketahui [44].
Kelompok Nicolaou juga mengevaluasi senyawa sintetik
dengan MLR dan uji proliferasi sel sumsum tulang murine
dan menemukan, berbeda dengan data yang kami laporkan
menggunakan uji proliferasi sel T, hanya aktivitas
imunosupresif sederhana pada sistem sel ini.
Masalah utama yang kami hadapi dalam membangun
struktur plakosida adalah penentuan panjang rantai alkil dan
lokasi dua cincin siklopropana, dengan mempertimbangkan juga
bahwa kami hanya memiliki 1-2 miligram masing-masing cincin
di tangan kami. Untuk mengatasi masalah ini, kami
mengembangkan prosedur degradasi skala submilligram
sebagaimana diuraikan dalam Skema2.
B. Glikogliserolipid
Glycoglycerolipids (GGLs) adalah konstituen normal dari
membran organisme fotosintesis, dan di dunia laut hadir
hampir secara eksklusif di alga dan cyanobacteria (ganggang
biru-hijau). GGL laut tidak menunjukkan variasi struktural
yang besar. Sampai saat ini yang paling banyak ditemukan
adalah senyawa yang bagian gliserolnya berikatan dengan
satu atau dua residu galaktosa
(monogalactosyldiacylglycerol dan digalactosyldiacylglycerol)
atau satu unit sulfoquinovose (sulfoquinovosyldiacylglycerol).
Dalam fraksi glikolipid dari P. simpleks kami
menemukan crasserides (1 4 a - 1 4m), analog yang
sangat dekat dari glikoglicerolipid, memiliki siklitol
beranggota lima, bukan bagian gula, terkait dengan
molekul gliserol melalui ikatan eter.
Sebenarnya, crasserides tersebar luas di spons
laut. Sejak isolasi pertama kami di spons
Pseudoceratina crassa [45], kami menemukan mereka di semua spesies Karibia
yang telah kami pelajari sampai sekarang [46], menunjukkan bahwa
1678 Kimia Obat Saat Ini, 2004, Vol. 11, No. 13 Fattorusso dkk.

OH sebuah R1 =
HO

b R1 =
HO OH

HAI c R1 =
HAI
R1
HAI d R1 =

HAI e R1 =

14
HO OH
3` HAI NS1 =
4` 2` R1
HO 5` HAI
1` 1``` g R1 =
HAI
1 h R1 =

2 OH
3 saya R1=
10"
HAI
1" l R1 =
16
Bapak1=

Gambar (6). Struktur crasserides dan isocrasserides.

crasserides dapat memainkan peran ekologis penting dalam
spons. Crasserides selalu dikaitkan dengan sejumlah kecil
isocrasserides (15a-15m), metabolit di mana rantai asil
terkait dengan satu gugus hidroksil siklitol daripada ke
bagian gliserol [46].
Tes dilakukan pada ikan Carassius auratus menunjukkan
bahwa crasserides memiliki aktivitas antifeedant pada
konsentrasi 30 μg/cm2 pelet makanan, menunjukkan peran
potensial senyawa ini sebagai pencegah alami dari pemangsa.
Hampir pada saat yang sama, sebuah grup Jepang melaporkan

HO OH HO OH
saya R1
+
HO OH OH
dll3N/MeOH H O HAI
HAI HAI HAI
GLC-MS
R1
HAI OH

HAI HAI

HAI

AcO AcOAg/AcOH
Saya
surutnya

SayaONA
MeOH, refluks

OH CrO3
COOH
AcOH

CH2n2

COOMe

GLC-MS
Skema 3. Degradasi kimia skala mikro dari crasserides.
Produk Alam Laut Bioaktif Kimia Obat Saat Ini, 2004, Vol. 11, No. 131679

H Xyl-II Xyl-II
H
H H HO
HO 4'
RO HAI HAI
RO
16 RO
H ORH H
H H ORH
AR=H
B R = CH3BERSAMA

C R = CD3BERSAMA

H H H H H
H 5VI HHO HHO H H HAI 4II HHO H
HO 4V 5V 4IV 5IV 4 5IISaya
AKU AKU AKU

5II
4VI
RO RO R HAI RHAI HHO
RO 2IV
4Saya

2VI V 2 2II
HAI
2
HAI HAI HAI HAI
AKU AKU AKU 5Saya

RO 3111 HAI
3IV H 1IV
2Saya

3VI 1VI 3V 1V 3II 1II RO 1

1AKU AKU AKU

H ORH H ATAU ORH H HAI

RH H ORH
H H H H H H
3Saya 1Saya

H ORH 29
H

28 24 20 16 12 8
4
17
35 34 33 32 31 30

Gambar (7). Struktur plakopolyprenoside dan plaxyloside.

isolasi crasserides [47], dari spons laut Okinawa, dalam konformasi dua kursi, dan pergeseran kimia yang diamati
menunjukkan bahwa senyawa ini juga memiliki aktivitas bergantung pada kontribusi masing-masing. Oleh karena itu,
stimulasi pada faktor pertumbuhan saraf (NGF). perilaku konformasi gula yang berbeda dalam rantai senyawa
karbohidrat perasetilasi17b juga menyebabkan berbeda 1
Seperti untuk plakosida, kami perlu melakukan
Tangan 13C pergeseran kimia dalam gula yang berbeda. Adapun
degradasi kimia crasserides untuk menilai struktur
pelarut, sinyal dalam1Spektrum H NMR senyawa 17b
rantai asil dan posisi cabang metil dalam rantai alkil
menunjukkan dispersi yang jauh lebih baik ketika
(lihat Skema 3).
spektrum direkam dalam C6D6 daripada CDCl3. Hasil
C. Poliisoprenoid Glikolipid ini dapat dijelaskan oleh perisai anisotropik yang kuat
Plakopoliprenosida (16) [48] dan plaxyloside (17) [49] efek molekul benzena yang dapat lebih efektif mengubah
adalah glikolipid yang memiliki alkohol poliisoprenoid linier C-35
perbedaan konformasi menjadi perbedaan kimia
bergeser.
sebagai aglikon dan rantai gula yang secara eksklusif terdiri dari unit
- xylopyranose. H
4 HH H ATAU
5 HAI
HO 5 OH
Glikosida terpen polisiklik sangat umum pada tumbuhan dan 2 1
HO ATAU H HAI H H
organisme laut, tetapi plaxyloside dan plakopolyprenoside, yang 3 H 1 H
memiliki aglikon asiklik, dapat dianggap sebagai contoh pertama OH 4H 3 2
H
H OH OH
dari kelas glikolipid baru, tidak pernah ditemukan pada filum
organisme hidup lain yang lebih mirip dengan lemak. glikolipid 4C1 1C4

yang mengandung asam.

Gambar 4(8). Konformasi
1 C1 dan C4 dari -xilopyranoside.
Plaksilosida (17) memiliki bagian aglikon yang sama dengan
Alasan mengapa gula dalam lingkungan kimia yang
plakopolyprenoside, tetapi rantai sakarida liniernya
sangat mirip menunjukkan perilaku konformasi yang
terdiri dari enam daripada dua, residu -xylopyranose,
sangat berbeda tidak sepenuhnya jelas saat ini. Ini bisa
membuat molekul jauh lebih polar. Karena strukturnya
berasal dari preferensi rantai karbohidrat perasetilasi
yang berulang, proton dan karbon memberi sinyal NMR
fleksibel untuk konformasi terlipat, di mana interaksi
dari rantai karbohidrat senyawa17 sangat tumpang tindih
elektrostatik yang menguntungkan antara atom
satu sama lain, mencegah baik penetapan resonansi dan
bermuatan sebagian dari gugus asetil gula yang berbeda
pengukuran konstanta kopling. Namun, penentuan
dimungkinkan.
struktur plaxyloside bisa berhasil
dicapai dengan menggunakan plaxyloside peracetylated 17b dan C6D6 D. Bakteriohopanoid
sebagai pelarut. Bahkan, dalam senyawa17b semua enam pentosa
Bacteriohopanoids adalah metabolit bakteri khas yang
gula berada dalam keseimbangan antara dua kursi yang mungkin
memiliki asal biogenesis campuran. Mereka terdiri dari
konformasi 1C4 dan 4C1 (lihat Gambar. 8), tetapi kontribusinya
pentasiklik triterpenoid hopane aglikon terkait dengan gula-
kurang stabil 1C4 kursi terbukti jauh lebih tinggi pada
turunan polihidroksilasi C5 rantai. Sebenarnya, mereka bukan
gula di tengah rantai daripada di
glikolipid, tetapi kami menemukannya sebagian besar sebagai
ujung rantai.
konstituen fraksi glikolipid karena polaritasnya mirip dengan
Perilaku konformasi yang berbeda ini sangat penting senyawa lain yang dijelaskan sampai sekarang. Telah diketahui
untuk penjelasan struktur karena, mempengaruhi 1Tangan 13 dengan baik bahwa bakteriohopanoid memainkan peran
Pergeseran kimia C gula menghindari tumpang tindih biologis penstabil membran sama seperti sterol pada organisme
lengkap dari sinyal gula di kedua spektrum yang diamati tingkat tinggi.
untuk senyawa nonasetat. Jelas, pergeseran kimia berbeda
1680 Kimia Obat Saat Ini, 2004, Vol. 11, No. 13 Fattorusso dkk.

19
R OH OH HAI 35
21 30
12 OH OH
25 26 17 22
OH 28 HAI
H
29

18 R=H 27
19 R=Aku

Gambar (9). Struktur hopanoid.

Selain tetrol sederhana yang diketahui 18, kami diglikosilasi oleh disakarida yang dibentuk oleh -galaktosa yang
menemukan turunan 12-metil baru 19 [50] dan jumlah dihubungkan dengan -glukosa melalui gugus hidroksil pada posisi
yang lebih besar dari bakteriohopanoid baru lebih lanjut, 4. Simpleksida telah diisolasi sebagai campuran kompleks homolog
32,35anydrobacteriohopantetrol 20 [51]. Jumlah total dari yang memiliki rantai alkil dengan panjang dan percabangan yang
tiga metabolit setinggi 50% dari berat sterol. Data ini bervariasi.
memperkuat hipotesis kami tentang kemungkinan peran
Untuk menetapkan komposisi yang tepat dari rantai
struktural bacteriohopanoids dalam membran selP .
alkil homolog dan posisi gugus hidroksil pada rantai,
simpleks.
kami membuat skala mikro sederhana (200 μg) prosedur
Sangat menarik untuk dicatat bahwa, meskipun mekanisme degradasi (Skema 5).
dimana hopana diubah menjadi bacteriohopanoids pada bakteri
Alkohol sekunder rantai panjang terglikosilasi tidak pernah
tidak diketahui secara rinci, telah ditunjukkan bahwa
dilaporkan sebagai senyawa alami, sehingga simpleksida adalah anggota
C5 rantai samping sebagian besar bakteriohopanoid berasal
pertama dari kelas baru glikolipid. Diuji pada sel T yang distimulasi
dari ribosa, yang stereokimianya dipertahankan dalam
dengan concanavalin A, mereka menunjukkan aktivitas penghambatan
panetetrol [52]. Seperti yang ditunjukkan dalam Skema4,
yang kuat pada proliferasi mereka: mereka menyebabkan penghambatan
turunan C-adenosil dari 20, yang telah diisolasi dari
proliferasi 43% pada konsentrasi serendah 0,01
Rhodopseudomonas acidophila [53] dan turunan C-
μ g / mL, yang naik menjadi 79% pada 1μg/mL. Aktivitas
ribosyl yang tidak pernah diisolasi dari sumber alami
imunosupresif ini tidak terkait dengan aktivitas sitotoksik, seperti
telah diusulkan menjadi perantara biosintetik [54].
yang ditunjukkan oleh respons negatif dalam uji MTT pada
Menggabungkan 20 cocok dengan hipotesis semua konsentrasi yang diuji.
biogenetik ini, karena dapat diproduksi oleh siklisasi
bacteriohopanetetrol 18, melalui cabang dari urutan
Derivatif Poliketida
biogenetik di atas yang melibatkan penghilangan
reduktif adenin, atau, sebagai alternatif, pengurangan
Metabolit sekunder yang berasal dari jalur poliketida [56] dan
fungsi asetal zat antara (lihat Skema 4).
mengandung kelompok sikloperoksida yang stabil merupakan
E. Glikolipid Atipikal komponen khas dari ekstrak organik yang diperoleh dari spons laut
milik keluarga Plakinidae. Senyawa pertama dari kelas ini yang
spons P. simpleks juga mampu menghasilkan glikolipid
dilaporkan adalah plakortin (22), sikloperoksida beranggota enam
atipikal yang tidak dapat dimasukkan dalam salah satu kelas
yang ditemukan pada tahun 1978 oleh Faulkner dan rekan kerja di
utama glikolipid. Kami menyebutnya metabolit simpleksida (21) [
Plakortis halicondrioides [57]. Setelah diisolasi, beberapa poliketida
55] karena strukturnya yang sangat sederhana, yaitu, bagian
terkait telah muncul dalam literatur, dan sebagian besar senyawa
lipid yang tidak biasa yang terdiri dari alkohol sekunder rantai
yang diisolasi mempertahankan beberapa fitur utama: cincin 1,2
sangat panjang yang terdiri dari 34-37 atom karbon. Gugus
dioksan tersubstitusi pada posisi
hidroksil, terletak hampir di tengah rantai, adalah

NH2

n n

n n HAI
HAI OH
hidrolisis OH
[H]
HO
OH OH
OH OH
OHOH
?
[H]
?
[H] HAI

OH OH

Skema 4. Jalur biogenetik untuk hopanoid.

Produk Alam Laut Bioaktif Kimia Obat Saat Ini, 2004, Vol. 11, No. 131681

OH
H - Hlc
6'''
4''' HO
HO 5''' 2''' 1''' H
HO
3''' H
OH OH 3'
6' R2
H HAI 2'
4'' 6'' HO
H 5'' 2'' R1
HO 1'' O 1 3
3'' H 2 6
- Gal OH
H
H

21

7 7
R1, R2 = 17 11% 18%
18
7 7 19
17 6% 11%

7
54%
18

Gambar (10). Struktur simpleksida.

3 dengan residu asetat dan masing-masing pada posisi plakortides FH, diisolasi dari P. halichondrioides [63],
4,6,6 dengan rantai alkil [58]. Sifat rantai alifatik pada telah terbukti meningkatkan Ca2+ penyerapan oleh
posisi 6 bersama-sama dengan stereokimia pusat retikulum sarkoplasma jantung melalui aktivasi Ca2+
asimetris milik cincin sikloperoksida mewakili situs utama ATPase. Meskipun mekanisme terperinci dari
variasi struktural dalam kelas metabolit ini. Beberapa keanekaragaman hayati yang kaya ini masih perlu
analog yang memiliki cincin sikloperoksida beranggota diungkapkan, umumnya diyakini bahwa fungsi
lima (1,2-dioksolana) sebagai pengganti 1,2 dioksan yang sikloperoksida reaktif memainkan peran kunci.
lebih umum juga telah dilaporkan (misalnya plakortide E,
Premis-premis ini mendorong kami untuk memulai
23) [59].
penyelidikan kimia fraksi apolar yang diperoleh dari ekstrak
Beberapa sifat farmakologis telah diungkapkan untuk organik P. simpleks. Analisis ini terbukti sangat bermanfaat,
metabolit sikloperoksida ini: plakortin dilaporkan sebagai agen menghasilkan isolasi lebih dari selusin metabolit baru dan
antibakteri [57], sementara beberapa analognya menunjukkan penemuan bioaktivitas baru yang menarik. Sebagai hasil
antijamur [60], antileishmanial [61], atau sitotoksik. pertama, kami menemukan bahwa plakortin merupakan
[62] kegiatan. Akhirnya, anggota lain dari keluarga ini, misalnya senyawa yang sangat utama dari fraksi ini (sekitar

3' 3'
6' R2 6' R2
2' TsCl 2'
21 MeOH/HCl
R1 R1
HO 1 3 TsO 1 3
2 6 2 6

DBU

3' 3'
6' R2 6' R2
2' 2'

R1 R1
1 1 3
3 2 6
2 6

KMnO 4/NalO 4

3' 3'
6' R2 2' 6' R2
HOOC 2'
1
HOOC R1 COOH 2 R1
3
12 6 HOOC 3
6

Skema 5. Degradasi skala mikro dari simplexide.

1682 Kimia Obat Saat Ini, 2004, Vol. 11, No. 13 Fattorusso dkk.

15
9 5
4
10 6 HAI COOCH3
HAI 3 COOCH3 HAI
13 OO COOCH3
HAI 1
23 24
22

Gambar (11). Struktur plakortin (22), plakortida E (23), dan dihidroplakortin (24).

20% dari seluruh ekstrak organik, persentase yang
sangat tinggi untuk metabolit sekunder), bersama
dengan turunan baru 9,10-dihydro yang kami beri nama
dihydroplakortin (24) [64].
Terlepas dari kemunculan plakortin yang luas dan
kemungkinan perannya dalam biogenesis banyak analog
(lihat di bawah), konfigurasi absolut dari empat pusat
stereogeniknya C-3, C-4, C-6 dan C-8 tidak diketahui. .
Memang, hanya konfigurasi relatif di sekitar cincin
sikloperoksida plakortin yang ditentukan oleh Faulkner
dkk. [57] oleh studi pergeseran yang diinduksi lantanida.
Oleh karena itu, definisi konfigurasi absolut plakortin dan
dihydroplakortin merupakan tugas pertama kami [64]. Ini
dicapai melalui strategi degradasi kimia diikuti oleh
derivatisasi dengan bahan pembantu kiral, seperti yang
ditunjukkan pada Skema berikut6.
Dua metabolit baru lebih lanjut merupakan kumpulan
sikloperoksida dari P. simpleks, yaitu plakortide I (25) e J (26),
keduanya dicirikan oleh rantai alkil yang lebih kompleks
pada C-6. Molekul-molekul ini diisolasi bersama dengan
turunan diol yang sesuai, misalnyadetik-plakortida I (27)
[65], dan struktur stereonya ditentukan dengan penerapan
strategi yang sama yang dijelaskan di atas untuk plakortin.
Ini merupakan laporan pertama analog diol dari plakortin
atau plakortide cycloperoxides.
Metabolit baru ini dievaluasi untuk aktivitas sitotoksik
terhadap WEHI 164, garis sel fibrosarcoma murine,
menggunakan uji konversi MTT untuk menilai viabilitas sel. Plakortides I
dan J menghambat pertumbuhan sel pada 72 jam dengan
IC50 2.5 dan 4.0 μg/mL, masing-masing; sedangkan
senyawa diol jauh lebih kurang aktif daripada yang sesuai
sikloperoksida (IC50 > 15 μg/mL). Hasil ini tampaknya menunjukkan
bahwa bagian sikloperoksida sebagian besar bertanggung jawab
untuk aktivitas sitotoksik yang ditunjukkan oleh beberapa molekul
ini. Namun, harus dicatat bahwa gugus sikloperoksida tidak cukup
untuk memberikan aktivitas sitotoksik yang signifikan terhadap
metabolit kelas ini; memang, menariknya, plakortin dan di atas
semua dihydroplakortin hanya menunjukkan sitotoksisitas yang
sangat marjinal dalam tes yang sama yang dilakukan pada panel
garis sel yang besar [64].
Di sisi lain, kehadiran bagian sikloperoksida telah diakui
sebagai penting untuk aktivitas anti-malaria artemisinin.28),
lakton seskuiterpen, pertama kali diisolasi dari tanaman
Artemisia tahun sebagai agen yang berpotensi aktif
terhadap strain resisten klorokuin dari Plasmodium
falciparum. Artemisinin dan turunan semisintetik yang larut
dalam minyak (misalnya artemeter dan arteether) dan larut
dalam air (misalnya artesunat) semakin banyak digunakan
dalam terapi, terutama dalam kombinasi dengan antimalaria
tradisional (misalnya meflokuin).
Meskipun belum sepenuhnya disetujui, beberapa bukti menunjukkan
bahwa kelompok endoperoksida artemisinin (dan banyak turunan
semisintetik) bereaksi dengan pusat besi hem (atau dengan besi lain yang
mengandung struktur seluler) sehingga menimbulkan,

HAI COOCH3 HAI COOCH3

HAI HAI
22 24
KMnO4/NalO4 H/10% Pd H/10% Pd
2 2
di dalam T=BuOH

HOOC

HAI COOCH3 HO COOCH3

HAI HO
(R) atau (S)-PGME, (R) atau (S)MTPA klorida
PyBoP, HOBT, n-metilmorfolina dalam piridin kering
di DMF

H3COOC HNOC
*
HAI COOCH3 HO COOCH 3
HAI HAI HAI
H3BERSAMA
*
F3C

Skema 6. Penentuan konfigurasi absolut plakortin (22) dan dihidroplakortin (24).

Produk Alam Laut Bioaktif Kimia Obat Saat Ini, 2004, Vol. 11, No. 131683

HAI COOH HAI COOH OH COOH

HAI HAI HO

25 26 27

Gambar (12). Struktur plakortida I (25) dan J (26), dan seco-plakortide I (27).

setelah penataan ulang struktural, menjadi radikal yang berpusat falciparum strain; sementara, yang menarik, cycloperoxide
pada C. Spesies terakhir ini akan menjadi entitas terakhir yang plakortide E beranggota lima yang secara struktural mirip (23
bertanggung jawab atas anti-Plasmodium aktivitas, bertindak ) terbukti praktis tidak aktif, menunjukkan bahwa ukuran
sebagai agen alkilasi terhadap makromolekul dalam protozoa [66]. cincin sikloperoksida penting untuk bioaktivitas. Pola respon
plakortin dan dihydroplakortin muncul
H mirip dengan artemisinin meskipun IC50S
HAI berbeda hampir 2 log.
HAI
HAI
H
HAI
HAI COOCH3
28 HAI
HAI

Gambar (13). Struktur kimia artemisinin (28). 29

Didorong oleh kebutuhan mendesak untuk menemukan obat
baru yang aktif melawan malaria, wabah yang menyebabkan
setidaknya 2 juta kematian setiap tahun, kami memutuskan untuk
menilai aktivitas antimalaria dari cycloperoxides yang diturunkan
dari spons, dimulai dengan senyawa utama yang diekstraksi dari P.
simpleks: plakortin, dihydroplakortin, dan cycloperoxide plakortide E
beranggota lima [67].
Ketiga molekul tersebut diuji terhadap strain D10
(rentan klorokuin) dan W2 (resistensi klorokuin). P.
falciparum. Pertumbuhan parasit ditentukan
secara spektrofotometri (OD650) dengan mengukur
aktivitas parasit laktat dehidrogenase (LDH), menurut a
versi modifikasi dari metode Makler dalam kontrol dan kultur yang
diberi obat. senyawa22 dan 24 menunjukkan aktivitas antimalaria
yang sangat baik dan identik (kisaran ng/mL) terhadap keduanya P.
Gambar (14). Struktur kimia plakortide L (29).
Sekali lagi, kehadiran cincin 1,2-dioxane tidak cukup
untuk memastikan aktivitas antimalaria. Memang, plakortide
L (29), analog dekat plakortin yang diisolasi dari yang lain
Plakortis spesies, kemudian terbukti benar-benar
tanpa bioaktivitas [68].
Mekanisme kerja plakortin, serta endoperoksida sederhana
lainnya, masih jauh untuk dijelaskan sepenuhnya; namun, temuan di
atas menunjukkan bahwa pengaturan spasial dari bagian
sikloperoksida yang cocok untuk memungkinkan interaksi dengan
target bersama dengan kemampuan molekul untuk menembus di
dalam sel yang terinfeksi kemungkinan menjadi parameter penting.
Meskipun plakortin kurang aktif dibandingkan artemisinin, kesederhanaan
strukturalnya membuatnya menjadi senyawa timbal yang ideal untuk

9
4
10 6
3 1
HAI COOCH3
HAI
22 (C3-OO-C6)

HAI HAI
HAI COOCH3
H HAI
H HAI
OH

H3COOC Plakorton (C3-O-C6 + C1-O-C4)

Furano-ester (C3-O-C6)
Plakortether (C6-O-C9)

Skema 7. Gambaran skematis hubungan plakortin dengan tiga kelas metabolit turunan (plakortethers, furano-esters, dan
plakortones).
1684 Kimia Obat Saat Ini, 2004, Vol. 11, No. 13
pengembangan alternatif obat antimalaria baru untuk
yang sekarang tersedia. Dalam hal ini, upaya kami saat ini
difokuskan baik pada isolasi analog baru dari sumber laut
(mungkin memungkinkan perpanjangan hubungan
struktur-aktivitas awal yang sudah dikembangkan) dan
pada sintesis molekul alami bioaktif (plakortin dan
dihydroplakortin) dan analognya untuk lebih memahami
mekanisme kerja turunan sikloperoksida sederhana dan
untuk merancang kandidat obat dengan aktivitas
antimalaria yang lebih kuat.
15
4 HAI
HAI
30 2 metabolit yang sangat menarik secara farmakologis: mereka
H3COOC
H3COOC
Gambar (15). Struktur kimia furanoester 30 dan 31.
Kehadiran gugus sikloperoksida yang sangat reaktif dalam
struktur plakortin tidak hanya bertanggung jawab atas aktivitas
biologisnya yang nyata tetapi, kemungkinan besar, memiliki
peran kunci dalam produksi rangkaian kaya poliketida terkait
yang telah kami isolasi dari P. simpleks. Molekul-molekul ini
termasuk dalam tiga kelompok struktural yang berbeda:
furanoesters, plakortones dan plakortethers. Skema7 secara
skematis menggambarkan hubungan kimia antara metabolit ini
dan senyawa induk plakortin yang didalilkan.
Mirip dengan turunan sikloperoksida, struktur kasar
dari metabolit ini telah ditentukan secara rutin melalui
penerapan teknik spektroskopi, sementara penjelasan
stereokimia absolutnya memerlukan prosedur
transformasi kimia skala mikro untuk memungkinkan
reaksi molekul dengan bahan pembantu kiral yang sesuai
atau, sebagai alternatif, untuk membandingkan produk
yang diperoleh dengan molekul yang stereokimianya
sudah diketahui.
Furanoester 30 dan 31 terkait erat dengan plakortin
dan dihydroplakortin, masing-masing, tetapi struktur
kimianya sangat tersusun ulang, menunjukkan adanya
8 OHC
4
6
HAI
30
COOCH3
HAI
OH2C
F3C
HAI
H3BERSAMA
HAI
Skema 8. Konversi kimia yang digunakan untuk menentukan stereokimia mutlak senyawa30.
Fattorusso dkk.
ikatan rangkap antara C-2 dan C-3 dan jembatan eter untuk
menghubungkan C-3 dan C-6, menghasilkan cincin tetrahidrofuran
dengan sp2 karbon pada C-2 [64].
Stereokimia mutlak senyawa 30 telah disimpulkan
dengan bantuan strategi derivatisasi kimia yang
dirangkum dalam Skema 8 [64]. Konfigurasi absolut
ditentukan untuk atom karbon kiral dari30 adalah
sama dengan pusat kiral plakortin yang sesuai.
Kelas kedua Plakortis metabolit, plakortones, terkait erat
dengan furano-ester yang dijelaskan di atas [59]. Strukturnya
mengandung atom oksigen tunggal untuk menghubungkan C-3
dan C-6, tetapi, selain itu, mereka menunjukkan gugus -lakton
yang terkondensasi dengan cincin tetrahidrofuran, yang berasal
31 dari ikatan oksigen ester C-1 dengan C-4. Plakorton adalah
telah menunjukkan aktivasi kuat dari retikulum sarkoplasma Ca2+
ATPase, dan, akibatnya, mereka memiliki aplikasi potensial
dalam mengoreksi kelainan relaksasi yang terkait dengan
beberapa bentuk gagal jantung manusia. Pendekatan
sintetik untuk inti 2,6dioxabicyclo[3.3.0]octan-3-one mereka
baru-baru ini dijelaskan [69].P. simpleks memberikan dua
anggota baru dari kelas ini, bernama plakortone E (32) dan F (
33), berbeda untuk rantai alkil pada C-6 [70].
6
HAI HAI
3
32 H 1O
HAI
HAI
33
H HAI
Gambar (16). Struktur kimia plakortones E (32) dan F (33).
Lebih-lebih lagi, P. simpleks telah terungkap menjadi sumber
plakortethers AG (34-40) [71], yang mewakili kelas turunan
plakortin non-peroksida yang belum pernah terjadi sebelumnya.
OsO4/NalO4 HAI
HAI
NaBH4 dalam MeOH
(R) atau (S)MTPA klorida
HOH2C
dalam piridin kering
HAI
HAI
LiAIH4 dalam eter kering
HO OH
OH
Produk Alam Laut Bioaktif Kimia Obat Saat Ini, 2004, Vol. 11, No. 131685

15
11 9
6 1
HAI COOCH3
H
34
OH HAI COOCH3
H
35 OH

HAI COOCH3
H Cl H HAI
OH COOCH3
36 HAI H
37 OH

HAI COOCH3
HO H H R HAI COOCH3
OH
38 R = -OCH3 39 OH
R = -OCH3 40

Gambar (17). Struktur kimia plakortethers AG (34-40).

Strukturnya, dicirikan oleh cincin tetrahidrofuran yang
menghubungkan C-6 dan C-9, berbagi dengan plakortin tulang
punggung karbon dan stereokimia absolut dari pusat asimetris
yang sesuai. Ketujuh plakortether pada dasarnya berbeda hanya
untuk fungsionalisasi pada C-10: pada plakortether A (34) C-10
adalah bagian dari ikatan rangkap; di plakortether B (35) dari
satu ikatan; di plakortether D (37); merupakan gugus karbonil
yang terdapat pada plakortether E (38) direduksi menjadi gugus
alkohol. Di antara senyawa yang diisolasi, plakortether C (36),
sangat menarik karena mewakili senyawa terklorinasi pertama
yang ditemukan dalam a
Plakortis spons. Plakortethers F (39) dan G (40) adalah dua analog
lebih lanjut dari kelas ini meskipun mereka secara konsisten berbeda
dari turunan tetrahidrofuran yang dijelaskan di atas karena ia sama
sekali tidak memiliki fragmen tiga karbon C-10/C-
12. Dalam hal ini, C-9 adalah karbon asetal yang menghubungkan
langsung gugus metoksi, dan kedua plakortether F dan G adalah
epimer pada C-9.
Semua senyawa yang diisolasi telah dievaluasi aktivitas
sitotoksiknya (menggunakan uji MTT) terhadap dua garis sel
tumor yang berbeda, WEHI 164 (fibrosarcoma murine) dan
RAW 264-7 (makrofag murine), terbukti sepenuhnya tidak
aktif terhadap garis sel pertama; ketika,
menariknya, plakortethers A, B, D, dan E menunjukkan selektif
aktivitas melawan garis sel kedua. IC mereka50, diperoleh sebagai rata-
rata dari setidaknya tiga pengukuran, berkisar antara 7 hingga 11
μ g/mL. Plakortethers C, F, dan G juga tidak aktif
menuju garis sel kedua (IC50 > 20 μg/mL). Harus
mencatat bahwa, di antara kelas C18 plakortethers, hanya
turunan klorin, plakortether C, benar-benar tidak aktif.
Struktur kasar dari kelas metabolit baru ini dapat
dengan mudah ditentukan melalui penerapan teknik 2D
NMR (COSY, HMQC, HMBC), sedangkan geometri relatif di
sekitar cincin beranggota lima disimpulkan dengan
pemeriksaan puncak korelasi yang ditunjukkan oleh 2D
spektrum NMR ROESY. Sebaliknya, penentuan
stereokimia absolut dari lima (enam untuk plakortethers
C dan E) karbon stereogenik terbukti sangat menantang.
Memang, hanya satu dari karbon kiral mereka (yaitu C-
3) mendukung gugus fungsi (alkohol) yang mudah bereaksi dengan
gugus tambahan kiral: prosedur yang umumnya diperlukan untuk
penjelasan stereokimia produk alami yang diperoleh dalam jumlah
kecil. Oleh karena itu, satu-satunya kesempatan yang tersisa adalah
mencoba menghubungkan konfigurasi absolut dari salah satu
metabolit baru dengan yang telah ditentukan untuk plakortin. Untuk
tujuan ini, kami menguraikan tiga langkah semi-

Zn/AcOH

HAI COOCH3 OH
HAI COOCH3
HO
22
n-iodosuksinimida dalam CH3CN

HAI OCH3
H BERSAMA

35
OH HAI COOCH3
Ph3SnH/2,2`azobis -(isobutironitril) H
+ Saya OH

HAI COOCH3
H
OH

Skema 9. Semisintesis plakortether B (35) dari plakortin (22).

1686 Kimia Obat Saat Ini, 2004, Vol. 11, No. 13 Fattorusso dkk.

NaBH4 dalam MeOH

HAI HAI COOCH3
COOCH3 H
H
OH HAI OH
OH Plakortether D (37)
Plakortether E (38) + HS (CH2 )2 SH/BF3 -Et2HAI
epimernya di C-10

Ph3SnH/2,2`azobis -(isobutironitril)

HAI COOCH3
H
OH H
Plakortether B (35) HAI COOCH 3
S S
OH
H2/Pd
Ph3SnH/2,2`azobis -(isobutironitril)

HAI COOCH3 HAI COOCH3

H H
OH H Cl OH
Plakortether A (34) Plakortether C (36)

Skema 10. Interkonversi kimia di antara plakortethers.

sintesis kerangka plakortether B dari plakortin yang
diuraikan dalam Skema 9.
Plakortether A (34) dan CE (36-38) saling
berkorelasi dan/atau terkait dengan plakortether B (34) melalui
serangkaian transformasi kimia yang digambarkan dalam skema
10, sehingga mencapai penentuan stereokimia absolut mereka
yang jelas. Konversi ini menunjukkan bahwa plakortether A dan
CE sebenarnya memiliki konfigurasi absolut yang sama pada C-3,
C-4, C-6, C-8, dan C-9 dari plakortether.
B.
Untuk melengkapi penjelasan stereostruktur
plakortether C dan E, stereokimia pada C-10 perlu
dihubungkan dengan karbon kiral lainnya. Masalah ini
dihadapi melalui penggunaanberbasis J
analisis konfigurasi, baru-baru ini diusulkan oleh Murata [72].
Penerapan teknik ini untuk plakortethers C dan E, masing-
masing, memungkinkan penjelasan stereokimia lengkap dari
molekul-molekul ini (Gbr. 1a).18).
Singkatnya, sejumlah poliketida baru yang secara struktural
terkait dengan plakortin telah ditemukan sebagai komponen minor
dari fraksi apolar dari ekstrak organik P.sederhana dan struktur
stereonya sepenuhnya ditentukan dengan menggunakan bahan
yang sangat terbatas yang tersedia. Perlu dicatat bahwa semua
metabolit ini tidak memiliki bagian sikloperoksida yang khas tetapi
berbagi dengan plakortin baik kerangka karbon maupun stereokimia
dari atom karbon kiral yang sesuai. Pengamatan ini memperkuat
hipotesis bahwa plakortin dapat memainkan peran penting dalam
biogenesis metabolit non-peroksida ini. Untuk

H9 H9
H10 C11 H10 OH

C9 C9

C8 HAI C8 HAI

Cl Sumbu C9-C10 dari plakortether C C11 Sumbu C9-C10 dari plakortether E

eritro
3J (H9-H10) = kecil 3J (H9-H10) = kecil
tiga
3J (H10-C8) = kecil 3J (H10-C8) = kecil
3J (H9-C11) = kecil 3J (H9-C11) = besar
2J (H9-C10) = kecil 2J (H9-C10) = besar
2J (C9-H10) = kecil 2J (C9-H10) = kecil

Gambar (18). Penerapan metode Murata pada sumbu C-9/C-10 plakortether C (36) dan E (38).
Produk Alam Laut Bioaktif
HAI
HAI
H
22
HAI
30
H3COOC
Skema 11. Usulan jalur biogenetik yang menghubungkan plakortin (22) dan senyawa furano-ester 30.
misalnya, kemungkinan jalur biogenetik yang menghubungkan
plakortin dan senyawa yang mengandung tetrahidrofuran 30 telah
diusulkan dalam Skema 11.
Secara analog, plakortether secara biogenetik dapat
diturunkan dari plakortin mengikuti reaksi yang ditunjukkan
dalam Skema 12.
Dalam hal ini, pembukaan reduktif cincin
sikloperoksida plakortin akan didorong oleh siklisasi
elektrofilik simultan dari turunan ,δ alkohol tak jenuh.
Ketika gugus elektrofilik adalah proton, reaksi ini
menimbulkan plakortether B (35). Semua plakortether
lain dapat berasal baik dari agen elektrofilik yang
berbeda dan dari modifikasi kimia selanjutnya pada
plakortether B.
Penggunaan struktur utama yang serbaguna (mudah
dimodifikasi dari sudut pandang kimia) dan relatif melimpah,
seperti plakortin, dapat dipertimbangkan sebagai strategi umum
yang digunakan oleh organisme laut (dalam hal ini spons) untuk
memperkaya bahan kimia (dan, akibatnya, farmakologis)
keragaman metabolisme sekunder mereka. Dalam hubungan ini,
peran plakortin yang dijelaskan di atas dalam biosintesis banyak
analog adalah satu-satunya contoh yang mungkin. Kasus lain
yang mencerahkan dibentuk oleh oroidin [73], alkaloid pyrrole-
imidazole utama dari spons dari genusAgelas. Oroidin
sebenarnya merupakan prekursor yang didalilkan dari banyak
alkaloid bioaktif yang berasal dari tahap oksidatif/reduktif
(misalnya dispacamides antihistamin [74]), isomerisasi (misalnya
keramadine antiserotonergik [75]), siklisasi (misalnya agelastatin
sitotoksik [76]), dimerisasi ( misalnya sceptrin antibakteri kuat
[77]) dari
struktur dasarnya [78].
COOCH3
OO
H Enzo
22
+
E
Skema 12. Usulan jalur biogenetik yang menghubungkan plakortin (22) dan plakortether.
Kimia Obat Saat Ini, 2004, Vol. 11, No. 131687
-
COOCH3 HAI COOCH3
HAI
-B-Enzo HB-Enz
- H2HAI
HAI
OH
H3COOC
Alkaloid
Komposisi alkaloid dari Plakortis spons tidak mencerminkan
kekayaan yang luar biasa dari kedua poliketida dan kelompok
glikolipid metabolit: untuk pengetahuan kita, senyawa
pyrrolidino-tyramine plakoridine A [79], pyrrolo-acridine
plakinidines AC [80] dan sitotoksik -carbolines plakortamines AD
[81] ] adalah satu-satunya alkaloid yang diperoleh dari Plakortis
spons. Penyelidikan kami terhadap fraksi paling polar dari
ekstrak organikP. simpleks
menghasilkan empat alkaloid baru; tiga iodoindoles
plakohypaphorines AC (41-43) [82], dan merupakan
turunan piridinium simplakidin A (44) [83].
Plakohypaphorines AC adalah metabolit sekunder yang
luar biasa karena mereka mewakili senyawa iodoindole
pertama dari sumber laut dan darat. Memang, meskipun
beberapa alkaloid yang mengandung yodium telah
dilaporkan sampai saat ini dari organisme laut (misalnya
geodimolide A [84] dan dakaramine [85]), semuanya
menunjukkan atom yodium terkait dengan cincin benzena
dari unit turunan tirosin. Selain itu, ikatan atom halogen
pada C-7 dari inti indol plakohypaphorines patut
diperhatikan karena hanya 5- atau 6-halogen (biasanya
bromin) turunan indole tersubstitusi yang telah ditemukan
sebagai metabolit spongal. Di sisi lain, 7-haloindoles telah
dilaporkan sebagai metabolit mikroba [86], dan pengamatan
ini menunjukkan asal mikroba plakohypaphorines.
Alkaloid piridinium simplakidin A (44) memiliki
C17 bagian poliketida, berbagi dengan plakortethers tulang
punggung karbon dan konfigurasi absolut dari asimetris
pusat tetapi menghubungkan cincin pyridinium di C-10. Meskipun
alkaloid pyridinium tidak jarang ditemukan pada spons laut,
HAI COOCH3
H
E OH
1688 Kimia Obat Saat Ini, 2004, Vol. 11, No. 13
HAI
R
HAI-
n+
R1 n H
R2 H OH
41 42 43
RHHI
R1 HIH
R2 AKU AKU AKU
Gambar (19). Struktur kimia plakohypaphorines AC (41-43) dan simplakidin A (44).
keragaman struktural dalam senyawa ini agak terbatas.
Kelas pertama turunan piridinium terdiri dari struktur
makrosiklik dengan rantai alkil linier yang dihubungkan pada
posisi C-3 dan N-1 dari unit piridinium (misalnya halitoksin
[87]). Kelas struktural lain termasuk homarin atau trigonelin
yang masing-masing tersubstitusi pada C-3 atau C-2, dengan
rantai alkil sederhana. Oleh karena itu, simplakidin A adalah
contoh unik dari alkaloid piridinium yang memiliki inti trigonelin
yang tersubstitusi pada posisi 4 dengan bagian turunan
poliketida kompleks. Simplakidine A dapat diturunkan secara
biogenetik dari plakortin seperti yang ditunjukkan pada Skema13
. Dalam hal ini, siklisasi elektrofilik akan didorong oleh serangan
simultan C-10 pada C-4 unit trigonellin.
Simlakidin A (44) hanya menunjukkan sitotoksisitas yang lemah
terhadap garis sel makrofag murine dan, karena satu-satunya
perbedaan dari 44 dengan plakortether B aktif (35) adalah
adanya cincin piridinium pada C-10, polaritas tinggi dari
kelompok ini dapat memiliki efek merusak pada kemampuan
untuk melintasi membran sel.
KOMENTAR KONKLUSIF
Variasi dan inovasi struktural dianggap sebagai ciri
khas molekul yang dielaborasi oleh invertebrata laut dan,
tidak diragukan lagi, kandungan metabolisme spons
Karibia. P.sederhana mewakili tujuan di bidang ini.
Sebenarnya, keragaman struktural dan aktivitas biologis
metabolit yang ditemukan dalam spons ini juga
mengejutkan bagi para peneliti, yang telah lama tertarik
pada kimia produk alami laut, memberikan kesempatan
untuk membuat beberapa komentar umum.
Masalah Analisis Struktural Skala Mikro
Pernyataan pertama dan paling jelas adalah bahwa
analisis ekstensif dari kandungan metabolisme suatu
organisme adalah tugas yang kompleks, melelahkan dan
memakan waktu. Salah satu kendala utama untuk diatasi
diwakili oleh terbatasnya ketersediaan senyawa yang diteliti;
dalam beberapa tahun terakhir, masalah ini semakin penting
karena kesulitan dalam mengumpulkan sejumlah besar
bahan biologis, yang dilindungi dengan benar untuk alasan
pelestarian lingkungan. Kadang-kadang, ahli kimia produk
alami dapat memperoleh hanya beberapa lusin gram bahan
biologis, sesuai dengan beberapa gram ekstrak organik,
sebagian besar disusun oleh metabolit primer biasa. Jadi,
ada kesulitan yang jelas dalam isolasi
Fattorusso dkk.
HAI COOH
-OOC
+
n 44
CH3
dan penentuan struktur molekul baru, serta dalam
penyelidikan aktivitas biologisnya memiliki beberapa
miligram senyawa murni. Selanjutnya, proses ini harus
dikelola dalam kerangka waktu penemuan obat modern
dan kecepatan dari memprioritaskan hit hingga
mengidentifikasi struktur kimia sangat penting.
Untungnya, saat ini ahli kimia produk alam dapat
menggunakan teknik analisis mikro baru yang sangat
informatif; di antaranya, analisis NMR, yang merupakan
teknik tidak merusak, merupakan dasar untuk penentuan
struktural dan, berkat peningkatan terus-menerus dari
kinerja instrumen, ini membutuhkan lebih sedikit bahan
sampel dan menjadi lebih informatif daripada beberapa
tahun yang lalu. Selain itu, analisis spektral NMR
memberikan keuntungan yang tak ternilai dalam
memulihkan bahan yang akan digunakan kemudian untuk
tes biologis. Saat ini, teknik ini memungkinkan untuk
menetapkan struktur, termasuk semua detail stereokimia,
untuk molekul yang juga cukup kompleks, seperti plakosida
[32], yang memiliki sedikit lebih dari satu miligram bahan.
Akses ke Potensi Farmasi
Identifikasi kimia dari molekul yang ada dalam ekstrak biologis
hanyalah satu langkah dari penyelidikan penuh mereka dan,
seringkali, itu tidak mewakili yang pertama, minat utama adalah
kemungkinan penggunaannya di berbagai bidang terapan,
khususnya sebagai agen terapeutik. Pemilihan yang diperlukan dari
tes yang digunakan menghasilkan batasan konsekuen untuk
mendeteksi potensi biologis penuh dari metabolit yang ada dalam
ekstrak kasar. Kadang-kadang, bioaktivitas menarik dari metabolit
laut telah ditemukan bertahun-tahun setelah mereka diisolasi dan
diselidiki secara kimia. Hal ini terjadi pada plakortin; molekul ini
diisolasi pada tahun 1978 dari aPlakortis sp. oleh Faulkner [57], yang
menentukan strukturnya, terlepas dari beberapa detail stereokimia,
dan melaporkan senyawa ini memiliki aktivitas antimikroba yang
lemah. Setelah sekitar 25 tahun, kami mengisolasi ulang plakortin
dariP. simpleks dan membuktikan bahwa itu berpotensi aktif
melawan Plasmodium, mengusulkannya sebagai senyawa timbal
yang menarik untuk terapi antimalaria [67]. Selain plakortin,
beberapa kasus paralel dapat disebutkan. Di antara mereka, kita
dapat mengingatkan diterpen eunicellane sitotoksik dari karang
lunak [88]. Sepuluh tahun setelah laporan sarcodictyns, Fenicaldkk.
mengungkapkan bahwa eleutherobin yang terkait erat dan molekul
lain dari kelas yang sama diberkahi dengan aktivitas anti-tumor yang
kuat karena taksonomi
Produk Alam Laut Bioaktif
seperti mekanisme aksi yang melibatkan polimerisasi tubulin
dan stabilisasi mikrotubulus [89].
Dari pertimbangan di atas dapat disimpulkan bahwa
penemuan senyawa baru untuk tujuan farmasi dapat dicapai
tidak hanya melalui analisis yang akurat dari ekstrak yang
belum dijelajahi, tetapi juga melalui pemeriksaan ulang
ekstrak dari spesies yang telah diselidiki, menggunakan
skrining biologis yang luas. Kemudian, strategi yang
ditargetkan, dikombinasikan dengan metode penyaringan
throughput tinggi, memastikan bahwa bahan kimia alami
dapat menjadi agen farmakoterapi baru.
Asal Usul Keanekaragaman Hayati
Di antara banyak organisme laut, beberapa di antaranya
tampaknya memiliki potensi sintetik yang jauh lebih efisien dan
ini adalah kasusnya P. simpleks. Kapasitas ini tidak mewakili
atribut satu spesies, tetapi dimiliki oleh sejumlah spons, tunikata,
bryozoa, atau moluska lainnya. Keanekaragaman hayati yang
tidak biasa dari invertebrata ini adalah sumber daya yang harus
dieksploitasi secara memadai, tetapi, pada saat yang sama, itu
merupakan masalah yang harus ditafsirkan.
Metabolisme sekunder invertebrata laut yang sangat kaya
dapat dijelaskan berdasarkan salah satu isu utama dalam
penelitian produk alam laut modern, yaitu individuasi produsen
nyata metabolitnya. Pertanyaan muncul dengan bukti yang
diperoleh yang menunjukkan bahwa invertebrata laut
menampung mikroorganisme, seperti bakteri, cyanobacteria
dan jamur, dalam jaringan mereka, di mana mereka berada di
ruang ekstra dan intra-seluler. Dalam beberapa kasus,
organisme mikro terkait dapat membentuk hingga 40% dari
biomassa, seperti yang telah dibuktikan untuk spons Mediterania
Aplysina aerophoba [90-93]. Kimia bakteri laut telah menerima
perhatian yang meningkat selama sepuluh tahun terakhir
[94-97]. Alasan utama untuk minat ini adalah kelimpahan dan
keragaman filogenetik mereka, serta kapasitas sebagian besar
dari mereka untuk bertahan hidup dalam kondisi lingkungan
yang ekstrim karena adaptasi enzim dan metabolisme yang tidak
biasa. Akhir-akhir ini, asosiasi mikroorganisme-spons telah
diselidiki secara khusus.
Spons adalah metazoa primitif yang mungkin merupakan
titik awal ledakan metazoa selama Prakambrium. Mereka
berbagi banyak fitur fungsional dengan protozoa uniseluler,
seperti nutrisi, organisasi seluler, pertukaran gas, reproduksi
dan respons terhadap rangsangan eksternal [98], tetapi, di sisi
lain, spons juga merupakan metazoa sejati yang memiliki
beberapa kesamaan dengan eukariot yang lebih tinggi, seperti
sebagai gen dan protein yang sangat homolog dengan analog
vertebrata [99]. Spons memiliki sel amoeboid yang memfagosit
bakteri dan, pada saat yang sama, merupakan filter feeder yang
efisien; sebagai hasil dari aktivitas fungsional yang terus
menerus, sejumlah mikroorganisme transien (satu ml air laut
mengandung sekitar satu juta mikroba) terperangkap di dalam
sistem vaskular atau tetap menempel pada permukaan spons. Di
dalamA.erofoba, misalnya, konsentrasi bakteri melebihi
konsentrasi air laut di sekitarnya sebanyak dua atau tiga kali
lipat.
Hubungan antara spons dan mikroorganisme yang hidup secara
permanen atau sementara di dalam saat ini telah dipahami secara
terbatas. Studi terbaru berdasarkan eksperimen makan dengan
spesies bakteri yang berbeda menyarankan
Kimia Obat Saat Ini, 2004, Vol. 11, No. 131689
bahwa spons inang dapat membedakan antara bakteri komensal dan
yang berasosiasi secara permanen dengan inang. Menariknya, studi
keragaman 16S rDNA mengungkapkan bahwa spons yang termasuk
dalam spesies yang sama tetapi dikumpulkan dari laut yang berbeda
dan pada kedalaman yang berbeda menunjukkan komunitas
mikroba yang seragam secara signifikan. Menurut Hentschel, Penulis
makalah baru-baru ini yang menarik di bidang ini, spons dapat
dianggap sebagai "fermentor mikrobiologis" yang mengandung
mikroorganisme laut purba yang spesifik dan evolusioner baru [100].
Beberapa peran diyakini dimainkan oleh mikroorganisme
yang tertahan: mereka berfungsi sebagai makanan dan
memperkaya makanan inangnya melalui fiksasi nitrogen dan
karbon. Selain itu, kemungkinan besar mereka terlibat dalam
biosintesis produk alami yang diperoleh dari spons [101].
Akibatnya, keberadaan bakteri permanen tidak diragukan lagi
tidak relevan untuk kemodiversitas spons yang luar biasa, tetapi
kontribusi nyata mikroorganisme terhadap metabolisme
sekunder spons belum sepenuhnya dipahami dan dievaluasi; ini
pada dasarnya disebabkan oleh kegagalan sebagian besar upaya
untuk membiakkan secara permanen bakteri yang berasosiasi
dengan spons di luar inangnya.
Kadang-kadang, ada bukti yang menunjukkan
keterlibatan mikroorganisme terkait dalam biosintesis
senyawa yang dikumpulkan dari inang spons. Dalam
hal ini, perlu dicatat bahwa bukti yang meyakinkan
hadir untuk mendukung keterlibatan cyanobacteria
dalam biosintesis senyawa yang ada di spons tropis,
Disidea herba [102]. Ciri-ciri kandungan metabolik
spons dapat menjadi indikasi keterlibatan bakteri
dalam biosintesis senyawa tersebut; ini terjadi ketika
satu organisme terbukti mengandung berbagai kelas
metabolit yang tidak biasa, ketika konsentrasi
metabolit sangat rendah, atau ketika struktur
metabolit mengingatkan pada jalur biogenetik bakteri.
Menurut kami, P. simpleks dapat dianggap sebagai
contoh yang baik dari spons dengan kandungan
metabolik yang dapat disumbangkan oleh
mikroorganisme terkait. Asumsi ini didasarkan pada
beberapa bukti, seperti variasi struktural yang tidak biasa
dari senyawa yang diuraikan oleh spons dan adanya
hopanoid, yang umumnya dianggap sebagai metabolit
bakteri. Sebenarnya,P. simpleks adalah eukariota
pertama yang terbukti mengandung mereka; Selain itu,
salah satu hopanoid yang diisolasi telah dihipotesiskan
sebagai perantara kunci dalam jalur biogenetik hopanoid
yang diterima. Jika asal non-spongalnya benar, kontribusi
mikroba pada metabolisme sekunderP. simpleks
harus signifikan karena jumlah senyawa hopanoid
yang relatif besar yang diperoleh dari ekstrak spons.
Dukungan lebih lanjut untuk kerjasama yang diusulkan
bakteri untuk chemodiversity dari P. simpleks adalah adanya
plakohipaforin, yang merupakan molekul yang mengandung
yodium yang khas dari metabolisme bakteri. Akhirnya, hipotesis
biogenetik yang diajukan untuk molekul seperti plakortin
menggambarkan jalur poliketida dengan partisipasi gugus asil
yang umumnya terlibat dalam metabolisme bakteri.
Saat ini, asal usul P. simpleks senyawa bisa menjadi
satu-satunya objek spekulasi tetapi kami sangat yakin
1690 Kimia Obat Saat Ini, 2004, Vol. 11, No. 13
bahwa studi tentang biogenesis metabolit invertebrata laut
adalah topik yang menarik, yang harus dipertimbangkan
dengan cermat untuk pengembangan kimia produk alam
laut di masa depan. Alasan utama keragaman molekuler
mereka yang unik kemungkinan terletak pada kondisi
lingkungan laut, yang mendukung hubungan dekat dan
permanen antara organisme yang berbeda.
Masalah Pasokan
Kami membahas di atas ketersediaan terbatas sebagian
besar senyawa bioaktif yang dielaborasi oleh invertebrata
laut, menunjukkan bahwa saat ini tidak merupakan
hambatan serius untuk isolasi dan penentuan struktur serta
untuk tes biologis awal. Masalah sebenarnya muncul ketika
tes positif awal merujuk produk untuk penyelidikan lebih
lanjut. Mereka dapat dengan mudah diatasi, jika penelitian
terus menggunakan molekul sebagai timbal; dalam hal ini,
informasi awal tentang hubungan struktur-aktivitas
seringkali dapat diperoleh dengan memanfaatkan seringnya
kemunculan bersama dari serangkaian senyawa yang terkait
erat daripada satu contoh jenis senyawa. Kehadiran
kumpulan analog mungkin merupakan strategi pertahanan
kimia, dimana organisme dilindungi terhadap berbagai
organisme, karena resistensi terhadap berbagai senyawa
dengan struktur serupa cenderung terjadi. Berbagai
senyawa dapat menunjukkan sinergisme dalam aktivitas
biologisnya dan sifat ini mungkin menarik untuk
pengembangan obat.
Keterbatasan ketersediaan senyawa alami dapat menjadi
kendala serius bagi penelitian yang ditujukan untuk penggunaan
langsungnya dalam terapi, yang berkembang sesuai dengan
prosedur biasa, yang pertama-tama melibatkan pengujian. in vivo,
diikuti dengan evaluasi praklinis dan kemudian dengan uji klinis, di
mana jumlah gram diperlukan.
Pasokan produk alami menjadi masalah berukuran
besar, sangat sering tidak larut, ketika dilisensikan,
karena obat dan sintesis yang ekonomis tidak dapat
dilakukan. Penggunaan industri spesies laut
membutuhkan sejumlah besar bahan baku yang
dikumpulkan dari stok alami. Pengumpulan ini, dalam
jangka panjang, akan memberikan dampak signifikan
pada komunitas bentik dan akan menjadi tekanan
berat pada spesies sasaran. Dengan demikian,
produksi bunga karang, tunicates dan bryozoa pada
tanaman budidaya laut yang dirancang khusus telah
dipertimbangkan. Saat ini, sejumlah penelitian
multidisiplin menargetkan pengembangan teknologi
baru untuk tanaman budidaya laut invertebrata laut
untuk produksi spesies yang relevan dengan
lingkungan yang sesuai dengan lingkungan.B. neritina
dan tunikata E. turbinata, sumber ET-743 dan bryostatin,
masing-masing, dapat berhasil dikultur [103].
Kemungkinan asal mikroba dari molekul bioaktif yang
diperoleh dari invertebrata laut baru-baru ini membuka
perspektif baru dan menarik untuk sintesisnya di tingkat
komersial. Isolasi dan budidaya produsen mikroba yang
dicurigai baik dari air laut di sekitarnya atau dari jaringan
invertebrata dapat memberikan jawaban yang lebih memuaskan
untuk masalah pasokan yang mendesak. Jika bakteri adalah
Fattorusso dkk.
memang, produsen metabolit bioaktif yang menarik, transfer
kluster gen yang bertanggung jawab untuk biosintesis masing-
masing produk alami ke vektor yang cocok untuk fermentasi
skala besar dapat memberikan strategi alternatif sehingga
menghindari kesulitan yang dapat diperkirakan sebelumnya
dalam kultur bakteri simbiosis.
KESIMPULAN
Sedikit dari keanekaragaman hayati laut telah
dieksplorasi untuk tujuan farmasi dan permintaan obat
baru yang terus berlanjut sebagian dapat dipenuhi oleh
cadangan besar molekul aktif yang diuraikan oleh
organisme laut. Kemajuan dalam metode pemisahan dan
analisis berarti bahwa senyawa aktif dapat diisolasi dan
diidentifikasi dengan cepat dari ekstrak produk alami dan
menghilangkan banyak hambatan teknis untuk
menggunakan senyawa turunan laut dalam kampanye
penyaringan throughput tinggi. Untuk mencapai target
ini, penelitian harus sangat interdisipliner, tidak terbatas
pada penyelidikan kimia yang ketat. Dan diharapkan
dapat melewati batas penelitian akademis yang
sederhana. Sayangnya, kelompok penelitian yang saat ini
tertarik pada kimia produk laut tidak terlalu mengenal
tidak hanya tren molekuler dalam penelitian obat,
kimia dari P. simpleks, di mana kami memutuskan
untuk menggambarkan kemodiversitas senyawa
bioaktif dari laut, tidak diragukan lagi menunjukkan
peran yang dapat dimainkan oleh metabolit laut
sebagai petunjuk untuk penemuan obat. Pada saat
yang sama, ini merupakan contoh penelitian
akademis, yang telah diperpanjang selama beberapa
tahun pada satu organisme, dan dilakukan oleh
sekelompok ahli kimia produk alami yang berinteraksi
secara episodik dengan ahli farmakologi yang bekerja
di universitas. Dengan demikian, hal ini juga
menggambarkan batasan dari jenis penelitian
semacam itu, dan sebagian juga menjelaskan alasan
dari sedikitnya jumlah senyawa laut yang saat ini
dalam uji klinis. Kami sangat yakin bahwa, dalam era
baru penemuan dan pengembangan obat, peluang
untuk mengeksploitasi keragaman molekuler dan
biofungsionalitas produk alam laut sangat besar,
REFERENSI
[1] O'Neill, M.; Lewis JA dalamAgen Obat Manusia dari Tumbuhan,
Kinghorn, AD, Balandrin, MF , Eds.; Seri Simposium ACS 534;
Masyarakat Kimia Amerika: Washington, DC,1993, 48. Cragg, GM;
[2] Newmann, DJ; Snader KMJ.Nat. Melecut., 1997,
60, 52.
[3] Silva, CJ; Brian P.; Peterson T.Obat-obatan dan Ilmu Farmasi, 2002, 114
, 357. Harvey, AL Tren di Farmasi. ilmu pengetahuan.,1998, 20, 196.
[4] Strohl, WR Penemuan Narkoba Hari Ini, 2000, 5, 39. Harvey, AL
[5] Penemuan Narkoba Hari Ini, 2000, 5, 294. Michl, J.; Gladysz, JA;
[6] George, SM, Eds.Kimia Putaran.,1993, 93,
[7]
1671.
[8] McClintock, JB; Baker, BJ, Eds.Ekologi Kimia Laut, CRC Press:
Boca Raton, Florida, 2001.
[9] Proksch, P.; Ebel, R.inAlkaloid, biokimia, ekologi dan aplikasi
obat, Robert, MR; Wink, M. Eds., Pleno: New York,1998.
Produk Alam Laut Bioaktif Kimia Obat Saat Ini, 2004, Vol. 11, No. 131691

[10] Pawlik, JR Kimia Putaran., 1993, 93, 1911. [46] Costantino, V.; Fattorusso, E.; Mangoni, A.J.Nat. Melecut., 2002, 65,
[11] Tumpul, JW; Polisi, BR; Munro, MHG; Northcote, PT; Prinsep, 883.
MR, Faulkner, DJ Nat. Melecut. Reputasi.,2003, 20, 1. [47] Ishibashi, M.; Zeng, C.; Kobayashi, J.J.Nat. Melecut., 1993, 56,
[12] Ciminiello, P.; Dell'Aversano, C.; Fattorusso, E.; Forino, M.; 1856.
Magno, S.; Di Rosa, M.; Ianaro, A.; Poleti, P.Selai. Kimia Soc., [48] Costantino, V.; Fattorusso, E.; Mangoni, A.; Di Rosa, M.; Ianaro,
2002, 124, 13115. A. Segi empat, 2000, 56, 1393.
[13] Hagedone, MR; Burreson, BJ; Scheuer, PJHelv. Chim. Akta, [49] Costantino, V.; Fattorusso, E.; Kaisar, C.; Mangoni, A.Eur.
1979, 62, 2484. J.Org. Kimia.,2001, 4457.
[14] Burgoyne, DL; Dumdei, EJ; Anderson, RJSegi empat, 1993, [50] Costantino, V.; Fattorusso, E.; Kaisar, C.; Mangoni, A.
49, 4503. Segi empat, 2000, 56, 3781.
[15] Capon, RJ; Skene, C.; Liu, EH; Lacey, E.; Gill, JH; Heiland, [51] Costantino, V.; Fattorusso, E.; Kaisar, C.; Mangoni, A.
K.; Friedel, T.J.Org. Kimia, 2001, 66, 7765. Segi empat, 2001, 57, 4045. Rohmer, M. Aplikasi Murni
[16] Dia, HY; Faulkner, DJ; Shumsky, JS; Hong, K.; Clardy, JJ.Org. [52] Kimia, 1993, 65, 1293. Neunlist, S.; Rohmer, M.Biokimia. J.
Kimia, 1989, 54, 2511. Wratten, SJ; Faulkner, DJSelai. Kimia Soc [53] , 1985, 228, 769.
[17] ., 1977, 99, 7367. Qureshi, A.; Faulkner, DJSegi empat, 1999, [54] Seemann, M.; Bisseret, P.; Tritz, JP; Hooper, AB; Rohmer, M.
[18] 55, 8232. Lett tetrahedron. 1999, 40, 1681.
[19] Murata, M.; Legrand, AM; Ishibashi, Y.; Fukui, M.; Yasumoto, [55] Costantino, V.; Fattorusso, E.; Mangoni, A.; Di Rosa, M.; Ianaro,
T. Selai. Kimia Soc., 1993, 115, 2060. A. Bioorg. Med. Kimia Lett., 1999, 9, 271. Stierle, BD;
[20] Irlandia, CM; Polisi, BR; Foster, MP, Mc Donald, LA; radisky, [56] Faulkner, DJJ.Org. Kimia1980, 45, 3396. Higgs, MD;
DC; Swersey, JC dibioteknologi kelautan. Produk alami [57] Faulkner, DJJ.Org. Kimia1978, 43, 3454. Casteel, DA Nat.
farmasi dan bioaktif, jilid. 1, Diedit oleh Attaway, DH; [58] Melecut. Reputasi.1999, 16, 55.
Zaborsky, ATAU, New York, Pers Pleno,1993, Jil. 1. Keranjang, [59] Patil, AD; Freyer, AJ; Kacang, MF; Carte, BK; Westley, JW; Johnson,
[21] BKCurr. pendapat. Bioteknologi.,1993, 4, 275. RK; Lahouratate, P.Segi empat, 1996, 52, 377. Kobayashi, M.;
[22] Valoti, G.; Nicoletti, MI; Pellegrino, A.; Jimeno, J.; Hendriks, H.; [60] Kondo, K.; Kitagawa, I.Kimia Farmasi. Banteng.,
D'Incalci, M.; Kain Adil, G.; Gavazzi, R.Kli Bisa. Res., 1998, 4, 1993, 41, 1324.
1977. [61] Compagnone, RS; Pina, IC; Rangel, HR; Belati, F.; Suarez,
[23] Varterasia, ML; Pemberton, PA; Hulburd, K.; Rodriguez, AI; Rami Reddy, MV; Faulkner, DJSegi empat, 1998, 54,
DH; Murgo, A.; Al-Katib, AMMenginvestasikan. Obat Baru, 2001, 19, 3057.
245. [62] Fontana, A.; Ishibashi, M.; Kobayashi, J.Segi empat, 1998, 54,
[24] Blackhall, FH; Ranson, M.; Radford, JA; Hancock, BB; Soukop, 2041.
M.; McGown, AT; Robbins, A.; Halbert, G.; Jayson, [63] Patil, AD; Freyer, AJ; Carte, BK; Johnson, RK; Lahouratate,
GC sdr. J. Kanker, 2001, 84, 465. P. J.Nat. Melecut., 1996, 59, 219.
[25] Vaishampayan, U., Glode, M.; Du, W.; Kraft, A.; Hudes, G.; Wright, J.; [64] Cafieri, F.; Fattorusso, E.; Taglialatela-Scafati, O.; Ianaro, A.
Husain, M.klinik Kanker Res., 2000, 6, 4205. Bergmann, W.; Feeney, RJ Segi empat, 1999, 55, 7045.
[26] J.Org. kimia., 1951, 16, 981. Muller, WEG; Zahn, RK; Bittlingmeier, K.; [65] Fattorusso, E.; Taglialatela-Scafati, O.; Ianaro, A.; Di Rosa, M.
[27] Falke, D.Ann. Akademik New York. ilmu pengetahuan., 1977, 284, 34. Segi empat, 2000, 56, 7959. Wu, Y.; Yue, Z.-Y.; Liu, H.-H.Helv.
[66] Chim. Akta, 2001, 84, 928. Fattorusso, E.; Parapini, S.;
[28] Muller, WEG; Zahn, RK; Beyer, R.; Falke, D.Ilmu pengetahuan virus, 1977, [67] Campagnuolo, C.; Basilico, N.; Taglialatela-Scafati, O.;
76, 787. Tarameli, D.J. Antimikroba. Kemo.,
[29] Mayer, AM; Jacobson, PB; Fenik, W.; Jacobs, RS; Glaser, 2002, 50, 883.
KB Ilmu Kehidupan., 1998, 62, PL401. Olivera, BM diNarkoba dari [68] Hu, J.-F.; Gao, H.-F.; Kelly, M.; Haman, MTSegi empat,
[30] laut, Fusetani N. Ed., Kager: Basel, 2000, hal.74-85. 2001, 57, 9379.
[69] Hayes, PY; Dapur, W.Selai. Kimia Soc., 2002, 124, 9718.
[31] Sweeley, CC; Tao, RVP, Eds.Metode dalam Kimia Karbohidrat, [70] Cafieri, F.; Fattorusso, E.; Taglialatela-Scafati, O.; Ianaro, A.; Di
1972, Jil. 6. Rosa, M.Segi empat, 1999, 55, 13831.
[32] Costantino, V.; Fattorusso, E.; Mangoni, A.; Di Rosa, M.; Ianaro [71] Campagnuolo, C.; Fattorusso, E.; Taglialatela-Scafati, O.; Ianaro,
A. J.Am.Chem. Soc., 1997, 119, 12465. Fattorusso, E.; A.; Pisano, B.Eur. J.Org. Kimia.,2002, 61.
[33] Mangoni, A.InKemajuan dalam Kimia Produk Alami Organik, [72] Matsumori, N.; Kaneno, D.; Murata, M.; Nakamura, H.;
Hertz, W.; Kirby, GW; Moore, RE; Steiglich, W.; Tam, Ch. Eds., Tachibana, K.J.Org. Kimia, 1999, 64, 866. Forenza, S.; Minale,
Springer-Verlag: Wina,1997, hal. 215-301. [73] L.; Riccio, R.; Fattorusso, E.J. Kimia. Soc. Kimia komuni., 1971,
1129.
[34] Natori, T.; Koezuka, Y.; Higa, T.Lett tetrahedron., 1993, 34, [74] Cafieri, F.; Carnuccio, R.; Fattorusso, E.; Taglialatela-Scafati,
5591. O.; Vallefuoco, T.Bioorg. Med. Kimia Lett.,1997, 7, 2283.
[35] Motoki, K.; Kobayashi, E.; Uchida, T.; Fukushima, H.; Koezuka, [75] Nakamura, H.; Ohizumi, Y.; Kobayashi, J.; Hirata, Y.
Y. Bioorg. Med. Kimia Lett., 1995, 5, 705. Akimoto, K.; Natori, T.; Lett tetrahedron., 1984, 25, 2475.
[36] Morita M.Lett. tetrahedron, 1993, 34, [76] D'Ambrosio, M.; Guerrero, A.; Debitus, C.; Ribes, O.; Pusset, J.;
5593. Leroy, S.; Pietra, F.J. Kimia. Soc. Kimia komuni., 1993, 1305.
[37] Yamaguchi, Y.; Motoki, K.; Ueno, H.; Maeda, K.; Kobayashi, E.; [77] Walker, R.; Faulkner, DS; Van Engen, D.; Clardy, JSelai. Kimia
Inoue, H.; Fukushima, H.; Koezuka, Y.Penelitian Onkologi, Soc., 1981, 103, 6772. Al Mourabit, A.; Potier, P.Eur. J.Org.
1996, 8, 399. [78] Kimia, 2001, 237. Takeuchi, S.; Ishibashi, M.; Kobayashi, J.
[38] Krul, M.; Mathot, RAA; Giaccone, G.; Punt, CJA; Mawar, H.; [79] J.Org. Kimia, 1994,
Hillebrand, MJX; Ando, Y.; Nishi, N.; Tanaka, H.; Schellens, 59, 3712.
JHM; Beijnen, JHKemo kanker. Farmakol.,2002, 49, [80] Barat, RR; Mayne, CL; Irlandia, CM; Brinen, LS; Clardy, J
287. Lett tetrahedron., 1990, 31, 3271.
[39] Costantino, V.; Fattorusso, E.; Mangoni, A.; Di Rosa, M.; Ianaro, [81] Sandler, JS; Colin, PL; Hooper, JNA; Faulkner, DJJ.Nat. Melecut.
A.; Mafia, P.Segi empat, 1996, 52, 1573. , 2002, 65, 1258.
[40] Costantino, V.; Fattorusso, E.; Mangoni, A.; Aknin, M.; Gaydou, [82] Campagnuolo, C.; Fattorusso, E.; Taglialatela-Scafati, O.Eur. J.Org.
EM Liebigs Ann. kimia, 1994, 1181. Costantino, V.; Fattorusso, E.; Kimia, 2003, 284.
[41] Mangoni, A.Segi empat, 2000, 56, [83] Campagnuolo, C.; Fattorusso, C.; Fattorusso, E.; Ianaro, A.; Pisano,
5953. B., Taglialatela-Scafati, O.Organisasi Lett.,2003, 5, 273. Chan, WR;
[42] Nicolau, KC; Li, J.; Zenke, G.Helv. Chim. Akta, 2000, 83, 1977. [84] Tinto, WF; Manchand, PS; Percy, S.; Todaro, L.J.Org. Kimia, 1987,
[43] Tashiro, T.; Akasaka, K.; Ohrui, H.; Fattorusso, E.; Mori, KEur. 52, 3091.
J.Org. kimia., 2002, 3659. [85] Diop, M.; Sam, A.; Costantino, V.; Fattorusso, E.; Mangoni, A.J.Nat.
[44] Mori, K; Takuya, T.; Akasaka, K.; Ohrui, H.; Fattorusso, E. Melecut., 1996, 59, 271. Sachler, O.; Van Pee, KHZNaturforsch, C.
Lett tetrahedron., 2002, 43, 3719. Costantino, V.; Fattorusso, E.; [86] Biosci., 1980, 35C,
[45] Mangoni, A.J.Org. Kimia, 1993, 340, dan referensi yang dikutip di dalamnya.
58, 186.
1692 Kimia Obat Saat Ini, 2004, Vol. 11, No. 13 Fattorusso dkk.

[87] Schmitz, FJ; Hollenabeak, KH; Campbell, DCJ.Org. Kimia, [96] Bernan VS di Ekologi Kimia Laut, McClintock, JB; Baker, BJ
1978, 43, 3916. Eds., CRC Press: Boca Raton, Florida,2001, hal. 567-
[88] D'Ambrosio, M.; Guerrero, A.; Pietra F.Helv. Chim. Akta, 1987, 592.
70, 2019. [97] Henschel, U. KimiaBiokimia 2002, 3, 1151. Bergquist, PR
[89] Lindel, T.; Jensen, Humas; Fenik, W.; Panjang, BH; Casazza, AM; [98] spons, Pers Universitas California: Berkeley,
Carboni, J.; Fairchild, CRSelai. Kimia Soc.,1997, 119, 8744. Vacelet, 1978.
[90] J. J. Mikroskop., 1971, 12, 363. Wilkinson, CR Maret Bio., 1978, 49, [99] Mehl, D.; Muller, saya.; Muller WEG diPerspektif Multidisiplin
[91] 161. Wilkinson, CR dalam Alga dan Simbiosis, Reisser, W. Ed., Ilmu Spons Watanabe. SAYA; Fusetani, N. Eds, Springer:
[92] Biopress: Bristol, 1992, hal 112-151. Vacelet, J.; Donadey, C.J. Tokio,1998, hal.133-155.
Exp.Mar. Ekol., 1977, 30, 301. Bernan VS; Greenstein M; Maiese [100] Hentschel, U.; Schmid, M.; Wagner, M.; Fieseler, L.; Gernert, C.;
[93] WMAdv. di Mikrob Terapan.,1997, 43, 57. Jensen, Humas; Fenical, Hacker, JMikrobiol FEMS. Ekol., 2001, 35, 305. Kobayashi, J.;
[94] W.inNarkoba dari Laut. Fusetani, N.Ed., Kager: Basel, 2000, hlm. [101] Ishibashi, M.Kimia Putaran., 1993, 93, 1753. Unson, MD; Faulkner,
6-29. [102] DJpengalaman, 1993, 44, 1021. Mendola, D. in Narkoba dari laut
[95] [103] Fusetani, N.Ed., Kager: Basel,
2000, hal. 120-133.
Lihat statistik publikasi