KEMENTERIAN PERINDUSTRIAN REPUBLIK INDONESIA

PUSAT PENDIDIKAN DAN PELATIHAN INDUSTRI

SEKOLAH MENENGAH KEJURUAN - SMAK BOGOR

INSTRUKSI KERJA

LABORATORIUM : ANALISIS INSTRUMEN 3

NAMA ALAT : HPLC Chromaster

PENGOPERASIAN INSTRUMEN

 Pengaktifan Instrumen dan Aplikasi Instrumen pada Komputer

1) Hidupkan instrumen dengan menekan tombol ON/OFF pada alat.

2) Nyalakan bagian instrumen secara berurutan, Pump Auto Sampler Column Oven
Detektor.
3) Nyalakan komputer/PC dan Printer yang telah tersambung dengan alat.

 Sistem Purging
1) Klik dua kali software “Hitachi Chromaster Maintenance” untuk melakukan purging.
2) Setelah muncul tampilan Chromaster Maintenance Software, klik Connect.

3) Kemudian Klik Maintenance.

4) Pada bagian Pump, atur perbandingan fase gerak yang digunakan. Kemudian klik Apply.
5) Nyalakan Flow, dengan klik Turn On.
6) Tunggu hingga Pressure stabil.
7) Jika terdapat gelembung udara pada selang, pilih larutan A/B/C/D pada 100% Flow.
Kemudian klik Purge On. Akan muncul perintah untuk membuka katup pada bagian pompa.
Buka katup berlawanan dengan arah jarum jam.
8) Ditunggu selama beberapa menit hingga gelembung udara hilang.
 KEMENTERIAN PERINDUSTRIAN REPUBLIK INDONESIA
PUSAT PENDIDIKAN DAN PELATIHAN INDUSTRI
SEKOLAH MENENGAH KEJURUAN - SMAK BOGOR

INSTRUKSI KERJA

9) Setelah gelembung hilang, klik Purge Off dan tutup katup searah dengan jarum jam.
10) Pada bagian Auto Sampler, klik Wash pada Needle Wash (tunggu selama 15 detik). Lalu, klik
Wash pada Rinse Port Wash (tunggu selama 15 detik).
11) Jika sudah selesai, klik Close.

 Preview Run
1) Buka software “Open Lab Control Panel”. Login dengan memasukkan username dan
password (username: siswa; password: chromaster5430). Kemudian klik OK.

2) Setelah muncul tampilan kerja, klik Browse, akan muncul menu Select Project. Lalu klik
Thiamin.
3) Klik Launch , tunggu beberapa saat hingga muncul tampilan Instrumen Wizard-HPLC.
Jika tampilan tidak muncul, klik ikon Instrument Wizard , kemudian klik Create New
Method.
4) Pada menu Instrument Setup, setting bagian Pump, Oven, Auto Sampler, dan Detektor.
5) Pada bagian Pump. Isi Solvent Name A/B/C/D sesuai dengan isi larutan pada botol A/B/C/D
di Reservoir. Kemudian atur perbandingan larutan dengan klik tabel pada %A/%B/%C/%D.
Kemudian masukkan Flow Rate pada tabel.

6) Pada bagian Auto Sampler, Sense Missing Vial jangan dicentang.

7) Set Air Volume 0 µL.
 KEMENTERIAN PERINDUSTRIAN REPUBLIK INDONESIA
PUSAT PENDIDIKAN DAN PELATIHAN INDUSTRI
SEKOLAH MENENGAH KEJURUAN - SMAK BOGOR

INSTRUKSI KERJA

8) Pada bagian Oven, isi temperatur kolom (700C) dan temperatur di Time Table (300C).

9) Pada bagian Detektor, setting Lamp Mode (D2) yang digunakan, stop time (4 menit), dan
centang channel 1 serta isi panjang gelombangnya (254 nm).

10) Set default pada bagian Aux Traces, Baseline Check, dan Trigger.
11) Setelah selesai, simpan metode dengan klik File Save As Method.
12) Beri nama pada file, lalu klik Save.

 Pembuatan Sequence Run dan Penginputan Parameter pada Software HPLC

1) Klik ikon Instrument Wizard , pilih Create a Sequence.
2) Isi Sample ID, Data File, Number of Unknown Run in Sequences (selain standar), dan
Repetitions per Run. Klik Next.
3) Isi Unknown vials of Sequences, Calibration vials of Sequences, dan volume injeksi (20 µL).
Klik Next.
4) Isi jumlah deret standar kalibrasi dan pengulangannya. Klik Next.
 KEMENTERIAN PERINDUSTRIAN REPUBLIK INDONESIA
PUSAT PENDIDIKAN DAN PELATIHAN INDUSTRI
SEKOLAH MENENGAH KEJURUAN - SMAK BOGOR

INSTRUKSI KERJA

5) Klik Finish.

6) Setelah selesai, simpan sequences dengan klik File Save As Sequences.

7) Beri nama pada file, lalu klik Save.

 Sequence Run
1) Start Sequence dengan mengklik “Sequence” lalu “Process”.
2) Pilih tempat untuk menyimpan hasil analisis. Misal di “Data” lalu klik “oke”.

3) Isi di “Result Path” dengan mengetik “D:\hasil”.

4) Masukkan vial dan tempatnya ke alat. (Harus tepat! Tidak boleh terlalu masuk atau kurang
masuk).
 KEMENTERIAN PERINDUSTRIAN REPUBLIK INDONESIA
PUSAT PENDIDIKAN DAN PELATIHAN INDUSTRI
SEKOLAH MENENGAH KEJURUAN - SMAK BOGOR

INSTRUKSI KERJA

5) Klik Start.

● Penampilan Kromatogram
1) Klik Launch Offline.
2) Klik File Open Result Set Pilih method yang ingin ditampilkan.

● Penyimpanan dan Proses mencetak Kromatogram

1) Klik Report Standard Report.
2) Klik kanan Import Report Pilih template di Desktop.
3) Pada window laporan yang terbentuk, klik Print > Pilih Print as PDF > Namakan File > OK
4) Close window laporan.
5) Ulangi untuk semua kromatogram hingga selesai.

Nama Siswa NIS Tanda Tangan

Anna Pratiwi
17.63.08596
Nur Hasanah
M. Rizki
17.63.08747
Maulana S.
Nada Diani
17.63.08757
Khairunnisa
Nurlaila
17.63.08776
Agustina