MAKALAH MIKROBIOLOGI FARMASI

Deteksi Escherichia coli O157:H17 pada Feses Penderita Diare Akibat

Konsumsi Daging Sapi Tercemar

Untuk Memenuhi Tugas Mata Kuliah Mikrobiologi Farmasi dengan

Dosen Pengampu Ibu Dra. apt, Putranti Adirestu, M.S.

Disusun Oleh:

Nahda Fadilla Rudianto (3311201065)

Fazrina Aprilia (3311201070)

Ismi Oktaviani Mulyana (3311201072)

Sely Bonita (3311201080)

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS JENDERAL ACHMAD YANI

CIMAHI
Pendahuluan
Latar Belakang
Bakteri merupakan kelompok organisme
yang tidak mempunyai membrane inti sel
serta bersifat mikroskopik yaitu berukuran
sangat kecil, bakteri sendiri memiliki peran
yang sangat penting bagi kehidupan di bumi.
Bakteri sendiri memiliki beberapa jenis ada
kelompok bakteri yang kaya akan manfaat
dan ada juga kelompok bakteri yang
menyebabkan penyakit yang kerap disebut
pathogen. Salah satu bakteri patogen kerap di
jumpai dalam olahan pangan. Terdapat
beberapa klasifikasi bakteri, salah satunya
adalah bakteri anteri patogen yang banyak
menyebabkan penyakit pada saluran
pencernaan pada manusia lebih dari 80%
bakteri perusak ada makanan disebabkan
oleh bakteri anteri patogen.
Bakteri entri pathogen merupakan bakteri
yang terkenal umum menginfeksi saluran
pencernaan baik hewan ataupun
manusia.bakteri tersebut banyak ditemukan
di olahan pangan seperti makanan dan juga
minuman yang telah terkontaminasi. Bakteri
tersebut memiliki beberapa sifat salah
satunya merupakan bakteri gram negative
dan bakteri ini sangat umum menyebabkan
penyakit cerna. Bakteri entri pathogen
mencakup banyak family salah satunya
bakteri Escheria colli.
Escherichia coli O157:H7 adalah
penyebab penting foodborne disease di
banyak negara. Infeksi pada manusia oleh
bakteri Escherichia coli O157:H7 sering
dihubungkan dengan konsumsi daging sapi
yang kurang matang dan dapat menyebabkan
diare berdarah, nekrosis jaringan usus,
hemorraghic colitis (HC) dan hemolytic
uremic syndrome (HUS).
Diare merupakan salah satu penyebab
utama kematian balita di negara berkembang.
Penyakit ini disebabkan oleh infeksi bakteri
salah satu contohnya adalah bakteri
Escherichia coli O157:H7. Penelitian ini
bertujuan mendeteksi bakteri Escherichia
coli O157:H7 pada feses penderita diare
dengan metode kultur dan PCR,
membandingkan hasil pemeriksaan antara
kultur dan PCR dalam mendeteksi bakteri
Escherichia coli O157:H7 pada sampel feses
penderita diare dan mengetahui sensitivitas
dan spesifitas metode PCR dalam mendeteksi
bakteri Escherichia coli O157:H7 pada
sampel feses penderita diare.
Berdasarkan latar belakang diatas,
didapatkan rumusan masalah sebagai berikut:
1. Bagaimana Escherichia coli
menginfeksi manusia?
2. Bagaimana daging sapi bisa tercemar
oleh Escherichia coli?
3. Bagaimana deteksi Escherichia coli
pada feses manusia?
Tujuan yang ingin dicapai dalam
penelitian ini, yaitu sebagai berikut:
1. Untuk mengetahui cara Escherichia
coli menginfeksi manusia.
2. Untuk mengetahui bagaimana daging
sapi bisa tercemar oleh Escherichia
coli.
3. Untuk mendeteksi Escherichia coli
pada feses manusia.
Dalam hasil penelitian ini, diharapkan
penulis mampu memberikan pemahaman
kepada masyarakat luas, terkait penyakit
yang disebabkan oleh bakteri Escherichia
coli.
Pembahasan
Menurut K. A. Bettlelheim (dalam
Zakia Bakri et al, 2015), Escherichia coli
merupakan bakteri komensal, patogen
intestinal dan patogen ekstraintestinal yang
dapat menyebabkan infeksi traktus urinarius,
meningitis, dan septicemia. Sebagian besar
dari bakteri Escherichia coli berada dalam
saluran pencernaan hewan maupun manusia
dan meruakan flora normal namun ada yang
bersifat patogen yang dapat menyebabkan
diare pada manusia.
Infeksi Escherichia coli O157:H7
pada manusia bersifat verotoksigenik telah
menyebabkan 16.000 kasus penyakit melalui
makanan (Food Borne Diseases) dan 900
orang meninggal per tahun di AS (Sartika et
al, 2005, dalam Zakia Bakri et al, 2015).
Infeksi bakteri Escherichia coli O157:H7
pada manusia ditandai dengan manifestasi
klinis yang luas mulai dari tanpa
menunjukkan gejala klinis atau asimtomatis
sampai terlihat adanya diare berdarah atau
tanpa berdarah (Dutta et al, 2011; Peter et al,
2011, dalam Zakia Bakri et al, 2015).
Escherichia coli O157:H7 merupakan
penyebab utama food borne disease. Infeksi
pada manusia oleh bakteri Escherichia coli
O157:H7 sering dihubungkan dengan
konsumsi daging sapi yang kurang matang.
Di Indonesia, penelitian tentang
kontaminasi bakteri Escherichia coli
O157:H7 telah dilakukan oleh Sartika et al
pada tahun 2005 di Rumah Potong Hewan
Cibinong, Rumah Potong Hewan kota Bogor,
Peternakan Sapi Perah Kukusan, Peternakan
Sapi Perah Depok dan Peternakan Sapi Perah
Batutulis Kota Bogor. Dalam penelitian
tersebut didapatkan hasil daging sapi yang
bersal dari RPH Cibinong dan RPH Kota
Bogor menunjukkan hasil positif 100%
terkontaminasi Escherichia coli O157:H7.
Penelitian ini dilakukan di
Laboratorium Mikrobiologi Fakultas
Kedokteran Universitas Andalas Padang dari
Januari 2012 sampai Juni 2012. Sampel pada
penelitian ini adalah bagian dari daging sapi
yang sering dikonsumsi manusia dan diambil
dari semua sapi yang dipotong pada hari saat
pengambilan sampel di RPH Lubuk Buaya.
Escherichia coli O157:H7 biasanya
ditemukan dalam saluran pencernaan sapi
dan tidak menyebabkan sapi tersebut
menderita sakit. Keberadaan Escherichia coli
O157:H7 pada daging sapi yang akan
didistribusikan pada masyarakat menandakan
syarat kesehatan makanan tidak terpenuhi.
Menurut SNI 7388:2009 tentang Batas
Maksimum Cemaran Mikroba dalam Pangan,
batas dosis infeksi untuk bakteri Escherichia
coli O157:H7 adalah 10-100 cfu/mL.
Penelitian mengenai deteksi bakteri
Escherichia coli dilakukan oleh Zakia Bakri
et al pada tahun 2014. Penelitian ini
dilaksanakan di Rumah Sakit Umum Daya
dan Rumah Sakit Labuang Baji selama bulan
Juni sampai desember 2014. Identifikasi dan
deteksi bakteri Escherichia coli O157:H7
dilaksanakan di Laboratorium Biologi
Molekuler dan Immunologi Bagian
Mikrobiologi Fakultas Kedokteran
Universitas Hasanuddin. Penelitian ini
dilakukan pada bulan juni sampai november
2014. Jenis Penelitian ini adalah eksperimen,
untuk mendeteksi keberadaan bakteri
Escherichia coli O157:H7 pada feses bakteri Escherichia coli lain, sedangkan
penderita diare. pertumbuhan bakteri lain dihambat

Populasi penelitian ini adalah semua Tabel 1. Identifikasi bakteri Escherichia coli
pasien diare rawat inap di Rumah Sakit O157:H7 dengan medium CHROMagar
Labuang Baji dan Rumah Sakit Umum Daya. O157
Sampel penelitian adalah 28 feses pasien
Nomor Bagian Jumlah Jumlah
diare anak. Pengambilan sampel sesuai
Sapi Tubuh yang Koloni
dengan angka kejadian di Rumah Sakit
yang Dijadikan (cfu/mL)
dengan memperhatikan kriteria inklusi dan
Dijadikan Sample
eks. Pemeriksaan sampel feses dilaksanakan
Sampel (gram)
di Laboratorium Biologi Molekuler dan
Sapi 1 Paha 10 gram 8.300
Immunologi Bagian Mikrobiologi Fakultas
Depan
Kedokteran Universitas Hasanuddin.
Sapi 2 Usus 10 gram 141.100
Pemeriksaan sampel feses dilakukan dengan
Sapi 3 Limpa 10 gram -
metode kultur dan PCR. Identifikasi bakteri
Sapi 4 Daging 10 gram 16.600
dilakukan dengan metode kultur dan
Punggung
disesuaikan dengan buku identifikasi bakteri
Sapi 5 Lidah 10 gram -
sedangkan deteksi molekuler dilakukan
Sapi 6 Daging 10 gram 16.600
dengan metode PCR.
Paha
Analisis Masalah Belakang
Sapi 7 Babat 10 gram 2490
Untuk penelitian daging sapi tercemar
Sapi 8 Paru 10 gram -
telah dilakukan terhadap sepuluh sampel Sapi 9 Daging 10 gram 8.300
yang diisolasi pada medium CHROMagar,
dada
didapatkan tujuh sampel (70%) positif
Sapi 10 Usus 10 gram 1.660
terkontaminasi bakteri Escherichia coli
O157:H7 seperti yang disajikan pada table 1.
Hal ini ditunjukkan oleh koloni berwarna Pada penelitian ini, ditemukan
ungu yang tumbuh pada medium kontaminasi bakteri Escherichia coli
CHROMagar O157. O157:H7 pada tujuh sampel sapi, yaitu sapi 1,
sapi 2, sapi 4, sapi 6, sapi 7, sapi 9, dan sapi
Sebagaimana yang dilaporkan
10 dengan jumlah koloni (CFU/mL) secara
Marlina (dalam Rizki et al, 2016)
berurutan 8.300, 141.100, 16.600, 16.600,
CHROMagar O157 merupakan medium
2.490, 8.300, 1.660. Adanya perbedaan
identifikasi yang sangat selektif yang hanya
jumlah koloni antar sampel sapi disebabkan
dapat mengidentifikasi bakteri Escherichia
oleh beberapa faktor yang menjadi sumber
coli saja. Medium ini mengandung bahan
kontaminasi bakteri Escherichia coli
kromogenik yang akan memberikan warna
O157:H7 seperti berikut:
ungu untuk bakteri Escherichia coli O157:H7
dan warna biru metalik untuk pertumbuhan
 1. Kontaminasi silang antara tangan
pemotong hewan, yang sebelumnya
telah terkontaminasi, dengan daging
yang akan dipotong.
2. Alat yg dipakai untuk memotong
daging sapi, yang sebelumnya juga
telah terkontaminasi menjadi sarana
untuk bakteri Escherichia coli
O157:H7 berpindah tempat ke daging
sapi yang akan dipotong.
3. Lantai tempat pemotongan daging
yang juga telah terkontaminasi
mengakibatkan daging baru yang
akan dipotong juga akan
terkontaminasi.
Untuk penelitian deteksi Escherichia coli
pada feses manusia ini melibatkan 28
penderita diare. Terdiri dari perempuan
sebanyak 10 (35,71 %) dan laki-laki
sebanyak 18 orang (64,29%) dengan usia
termuda 3 bulan dan tertua 7 tahun, yang
terbanyak umur antara range 1-7 tahun 15
orang (53,57%). Dari data klinik sebagian
besar pasien mengalami gejala dengan
frekuensi muntah sebanyak (78,57 %),
demam sebanyak (71,49%), gejala dengan
perut kejang sebanyak (3,57 %), sakit perut
(10,72%), gejala dengan dehidrasi ringan
hingga sedang sebanyak (35,72%), tinja
encer sebanyak (64,29%), dan tinja dengan
lender (17,86%).
Hasil identifikasi dengan metode kultur
menunjukkan koloni yang tumbuh pada
medium Mac Conkey Agar tampak
berbentuk bulat, tepi rata, permukaan halus
dengan warna koloni. Koloni bakteri yang
dicurigai sebagai bakteri Escherichia coli
O157:H7 kemudian dilakukan uji biokimia
IMVIC dan TSIA untuk menegaskan bahwa
koloni yang tumbuh merupakan isolat
Escherichia coli O157:H7. Hasil Uji
biokimia menunjukkan koloni isolat
Escherichia coli O157:H7 pada medium
TSIA (+), Metyl Red (+), VP (-), Urea (-),
Sitrat (-), uji fermentasi laktosa, glukosa,
sukrosa dan mannitol (+). Jenis bakteri yang
berhasil diidentifikasi pada sampel feses
dengan metode kultur yaitu bakteri
Enterobacter agglomeran sebanyak 16 isolat
(57,14%), bakteri Alcaligenes faecalis
sebanyak 1 isolat (3,57%), bakteri
Escherichia coli O157:H7 sebanyak 9 isolat
(32,14%), bakteri Klebsiella sp sebanyak 1
isolat (3,57%) dan bakteri Proteus vulgaris
sebanyak 1 isolat (3,57%). Hasil uji PCR
memperlihatkan pita fragmen DNA dengan
ukuran 239 bp Hal ini menunjukkan bahwa
pada sampel terdapat bakteri Escherichia coli
O157:H7 sedangkan pada sampel yang tidak
menunjukkan pita fragmen DNA
menunjukkan bahwa tidak ditemukan bakteri
Escherichia coli O157:H7 (Gambar 1 dan 2).
Dari 28 sampel feses yang diuji dalam
penelitian ini, sebanyak 13 (46,42%)
terdeteksi bakteri Escherichia coli O157:H7
dengan menggunakan metode PCR namun
tidak terdeteksi dengan metode kultur.
Sebanyak 9 (32,14%) sampel terdeteksi
bakteri Escherichia coli O157:H7 dengan
menggunakan metode kultur. Disimpulkan
bahwa PCR memiliki tingkat sensivitas 100 %
dan spesifitasnya adalah 78 %.
 Daftar Pustaka

http://scholar.unand.ac.id/5417/2/1.%20BA
B%201.pdf

http://pasca.unhas.ac.id/jurnal/files/52435abf
763dcb5a297f0901f4eec515.pdf

http://jurnal.fk.unand.ac.id/index.php/jka/arti
cle/view/586
Kesimpulan

Hasil penelitian menunjukkan bahwa

dari 28 sampel feses anak berumur 0-14
tahun yang di diagnosis diare, diperoleh 6
sampel positif (21.42%). Escherichia coli
O157:H7 dengan metode kultur dan 13
sampel (46,43%) positif bakteri Escherichia
coli dengan metode PCR. Tidak dapat diuji
sensitivitas dan spesifitas penelitian ini. Perlu
penelitian lebih lanjut dengan jumlah sampel
yang lebih banyak terutama pada pasien anak
anak.

Berdasarkan penelitian ini dapat

disimpulkan juga bahwa 70% dari sampel
daging sapi yang berasal dari RPH Lubuk
Buaya terkontaminasi bakteri Escherichia
coli O15:H7. Escherichia coli O15:H7 telah
melewati batas dosis infeksi yaitu 10-100
CFU/mL.