Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

Jurnal Etnofarmakologi 73 (2000) 471–478

www.elsevier.com/locate/jethpharm

Isolasi dan karakterisasi glikosida flavonoid penangkap

radikal bebas dari bunga Spartium junceum
dengan fraksinasi yang dipandu aktivitas

Erdem Yeşilada A,*, Koichiro Tsuchiya B, Yoshihisa Takaishi B,

Kazuyoshi Kawazoe B
A Departemen Farmakognosi, Fakultas Farmasi, Uni Gaza6darurat, hipodrom, 06330 Ankara, Turki
B Fakultas Ilmu Farmasi, Tokushima Uni6darurat, 770 Tokushima, Jepang

Diterima 4 April 2000; diterima dalam bentuk revisi 5 Juli 2000; diterima 31 Juli 2000

Abstrak

Spartium junceum Bunga L. (Fabaceae) digunakan untuk pengobatan tukak lambung dalam pengobatan tradisional Turki.
Kemungkinan aktivitas seperti superoksida dismutase dari ekstrak, fraksi dan konstituen yang diperoleh melalui fraksinasi yang
dipandu aktivitas dipelajari dengan menggunakan spektrometri resonansi spin elektron in vitro, untuk menjelaskan peran
prinsip antioksidan dalam aktivitas antiulserogenik yang kuat dari ekstrak. Terlepas dari kenyataan bahwa triterpen,
spartitrioside, yang sebelumnya dilaporkan sebagai konstituen antiulcerogenic aktif bunga ditemukan hampir tidak aktif, fraksi
kaya flavonoid menunjukkan aktivitas antioksidan kuat. Lima glikosida flavonoid yang mengandung struktur katekol pada cincin
B diisolasi dari ekstrak butanol dan strukturnya dijelaskan menggunakan1Tangan
13Teknik C-NMR sebagai isoquercitrin (quercetin 3B-glukosida) (1,); luteolin 4'B-glukosida (2); kuersetin 3, 4%-diglukosida (3);

azaleatin 3B-glukosida (quercetin 5-methylether 3B-glukosida) (4), kuersetin 4%B-glukosida (5). Flavonoid (2) dan (4)
menunjukkan aktivitas antioksidan in vitro tertinggi dengan masing-masing 22,59 dan 19,08 U/ml. © 2000 Elsevier Science
Ireland Ltd. Semua hak dilindungi undang-undang.

Kata kunci: resonansi spin elektron; Spartium junceum; Aktivitas antioksidan; Aktivitas seperti superoksida dismutase; Perangkap berputar; Radikal
superoksida

1. Perkenalan borok dalam pengobatan tradisional Turki

Spartium junceum L. (Fabaceae) bunga
dilaporkan digunakan untuk pengobatan peptic
* Penulis yang sesuai. Faks: +90-312-2235018.E-
alamat email: yesilada@tr-net.net.tr (E. Yeşilada).
(Yeşilada et al., 1993). Dalam penelitian
sebelumnya, aktivitas antiulserogenik bunga
dilaporkan (Yeşilada et al., 2000) dan 'spartitrioside'
triterpen saponin diisolasi sebagai konstituen aktif
melalui fraksinasi yang dipandu bioassay in vivo
dan strukturnya dijelaskan dengan teknik spektral
(Yeşilada dan Takaishi, 1999).

0378-8741/00/$ - lihat materi depan © 2000 Elsevier Science Ireland Ltd. Hak cipta dilindungi undang-undang.
PII: S0378-8741(00)00327-5
472 E. Yeşilada dkk. / Jurnal Etnofarmakologi 73 (2000) 471–478
Baru-baru ini, peran spesies oksigen aktif dalam
patogenesis berbagai cedera mukosa lambung
telah ditunjukkan dan beberapa antioksidan
eksogen termasuk superoksida dismutase (SOD),
pemulung superoksida dan allopurinol, inhibitor
xanthine oksidase, dilaporkan menunjukkan efek
perlindungan in vivo terhadap cedera mukosa
lambung akut yang disebabkan oleh spesies
oksigen aktif (Perry et al., 1986; Pihan et al., 1987)
serta mengobati pasien dengan tukak lambung
(Salim, 1990). Oleh karena itu, baru-baru ini
diusulkan untuk mempelajari kemungkinan
aktivitas antioksidan dari ekstrak, fraksi dan/atau
senyawa antiulserogenik untuk menjelaskan cara
kerjanya (Yoshikawa et al., 1993).
Dalam penelitian ini, kemampuan scavenging
radikal hidroksil dari ekstrak, fraksi dan konstituen
yang diperoleh melalui fraksinasi yang dipandu
aktivitas dipelajari dengan menggunakan teknik
spektrometri resonansi spin elektron (ESR) in vitro,
untuk menjelaskan peran prinsip-prinsip antioksidan
dalam senyawa poten. aktivitas antiulcerogenic
tanaman.
2. Bahan-bahan dan metode-metode
2.1. bahan tanaman
S. junceum Bunga L. diperoleh dari Foça
(I:zmir) pada Mei 1997 dan spesimen voucher
disimpan di Herbarium Fakultas Farmasi,
Universitas Gazi (97A001).
2.2. Bahan kimia
5,5-dimetil-1-pirolina-n-oksida (DMPO) dan
xantin oksidase dibeli dari Sigma Chemical Co.
(St. Louis, MO), hipoksantin, asam
dietilentriaminepentaasetat (DETAPAC)
diperoleh dari Industri Kimia Murni Wako
(Osaka, Jepang). Bahan kimia lain yang
digunakan untuk proses fraksinasi dan isolasi
adalah sebagai berikut: Diaion HP-20 (Mitsubishi
Chem.), Sephadex LH-20 (Pharmacia Fine
Chemicals), silika gel (0.040-0.063Mm, Merck).
Pemisahan HPLC preparatif dilakukan pada
LiChrosorb RP-18 (7Mm) kolom menggunakan
MeOH–H2Sistem pelarut O (56–44). Analisis TLC
dilakukan pada pelat silika gel pralapis (Kieselgel 60F
254, Merck, Pasal 5719) menggunakan (a) CHCl3 –
MeOH–H2O (7:4.2:1) dan (b) n-BuOH-n-PrOH–AcH–H2O
(4:2:1:3) sistem pelarut. Pelat diperiksa di bawah sinar
UV dan kemudian divisualisasikan pada paparan NH33
uap dan kemudian dengan menyemprotkan 5% H2
JADI4/dalam reagen EtOH dan dipanaskan hingga 120
°C.
2.3. Eksperimen kimia
2.3.1. Ekstraksi dan tindakan6ity-fraksinasi terpandu
(Skema 1)
Ekstraksi bunga kering dengan MeOH dan H2O
(EH2O) dan fraksinasi ekstrak sebelumnya dengan
ekstraksi pelarut-pelarut dilakukan seperti yang
dijelaskan sebelumnya (Yeşilada et al., 2000). n
Ekstrak -BuOH kemudian diaplikasikan pada kolom
Diaion HP-20 dan dielusi dengan H2O dan MeOH
masing-masing. Eluen MeOH digabungkan dan
dimasukkan ke kolom MPLC pada silika gel dan
menggunakan CHCl3 –MeOH–H2O (10:3:0.3),
(9:3:0.5) dan (7:4.2:1) sistem pelarut, berturut-turut.
Eluen dikelompokkan menurut kontrol KLT dalam
sistem pelarut-a dan -b. Frs. 53-62 dan 63-71 yang
memiliki konstituen serupa dan menunjukkan
aktivitas yang sangat dekat digabungkan lebih
lanjut dan dikromatografi pada kolom Sephadex
LH-20 menggunakan MeOH sebagai eluen.
Fraksi gabungan 7-12 yang dielusi dari kolom
Sephadex dikromatografi ulang pada kolom
MPLC yang diisi dengan silika gel dan dielusi
dengan CHCl3 –MeOH–H2O (8:2:0.2), (10:3:0.3),
(9:3:0.35), (7:3:0.35) dan (7:3:0.5), berturut-turut.
Eluen digabungkan berdasarkan kontrol KLT
seperti dijelaskan di atas.
Seperti yang ditunjukkan pada Skema 1, Fraksi 600–
660 dan 661–795 yang menunjukkan aktivitas tertinggi
dan komposisi serupa digabungkan dan diterapkan pada
sistem HPLC preparatif baik pada mode normal maupun
mode daur ulang. Eluen kemudian dikelompokkan
menjadi tujuh, berdasarkan perilaku kromatografi pada
KLT. Setiap kelompok diuapkan sampai kering di bawah
tekanan yang dikurangi untuk menghasilkan; fraksi 1
memberi 50 mg1, fraksi 2 memberikan 24 mg campuran
1, fraksi 3 memberikan 10 mg 2, pecahan 4 adalah
 E. Yeşilada dkk. / Jurnal Etnofarmakologi 73 (2000) 471–478 473

campuran dari 2 dan 3, fraksi 5 memberikan 8,5 mg 3
dan fraksi 6 memberikan 3 mg 4, fraksi 7 merupakan
campuran flavonoid. Fraksi 2 dikromatografi ulang
menggunakan sistem HPLC preparatif yang sama
dalam mode daur ulang dan memberikan 14 mg5.
2.3.2. Penjelasan struktur senyawa yang
diisolasi
Pemeriksaan pelat KLT di bawah sinar UV dan setelah
visualisasi dengan penyemprotan reagen
mengungkapkan bahwa senyawa ini memiliki kerangka
flavonoid. Struktur flavonoid terisolasi dijelaskan

Skema 1. Proses fraksinasi yang dipandu bioassay dari S. junceum flharga dan isolasi komponen antioksidan (angka tebal di
bawah fraksi mewakili aktivitas antioksidan dalam U/ml; flav, flavonoid).
474 E. Yeşilada dkk. / Jurnal Etnofarmakologi 73 (2000) 471–478

Skema 1. (Lanjutan)

tanggal dengan menggunakan 1H-NMR (400 MHz;
dengan TMS sebagai standar internasional) dan 13
Spektroskopi C-NMR (100,2 MHz) serta teknik 2D-
NMR yaitu COZY dan HMBC. Spektrum NMR
senyawa1, 2, 3 dan 5 diambil dalam CDCl3 dan 4
dalam CD3OH. Melalui interpretasi spektrum
senyawa ini ditemukan identik dengan senyawa
yang diketahui:1, isoquercitrin (quercetin 3B-
glukosida); 2, luteolin 4%B-glukosida; 3, kuersetin
3, 4%-diglukosida; 4, azaleatin 3B-glukosida
(quercetin 5-methylether 3B-glukosida) dan 5,
spiraeoside (kuersetin 4%B-glukosida) (Agrawal,
1989; Markham dan Geiger, 1994) (Gbr. 3).
2.4. Di dalam 6tindakan awal6percobaan
2.4.1. Metode perangkap spin resonansi spin
elektron
Aktivitas scavenging superoksida dari sampel uji
dan prinsip aktif diukur dengan menggunakan
metode spin trapping ESR menurut Miyagawa et al.
(1988) dan Yoshikawa dkk. (1993). Spektrum ESR
direkam dalam tabung ESR berdiameter 4 mm
pada suhu kamar dengan spektroskop JEOL JES
FE1X yang beroperasi pada pita-X. Pengukuran
dilakukan dalam kondisi berikut; RF 8 mV,
frekuensi modulasi 100 kHz, 2.0 G, amplitudo
modulasi 1.6×103
 E. Yeşilada dkk. / Jurnal Etnofarmakologi 73 (2000) 471–478 475

T, medan magnet 33749100 G, waktu respons 0,1
s, waktu sapuan 2 menit.
Radikal anion superoksida yang dihasilkan
oleh sistem hipoxantin-xantin oksidase
ditangkap oleh DMPO dan pengaruh sampel uji
dibandingkan dengan SOD standar (Gbr. 1 dan 2).
Untuk pengukuran sebenarnya, 50Ml hipoksantin
(2,0 nM), 50 Ml xantin oksidase (0,272 U/ml), 50Ml
DETAPAC (5,5 mM), 10 Ml DMPO (30%), dan 20 Ml
larutan sampel (10 mg dalam 1 ml 10% DMSO)

Gambar 1. Plot regresi linier (a) rasio tinggi puncak vs konsentrasi SOD, (b) aktivitas antioksidan SOD vs konsentrasi SOD. Setiap
titik menunjukkan nilai rata-rata dari tiga pengukuran.
476 E. Yeşilada dkk. / Jurnal Etnofarmakologi 73 (2000) 471–478
Gambar 2. Spektrum ESR diperoleh (1) dengan 10% DMSO dalam H2O
sebagai kontrol, (2) dengan flavonoid 4 dalam pengenceran 10 kali, (3)
dengan flavonoid 4 dalam pengenceran 100 kali. Aktivitas seperti SOD
dihitung dengan membagi rasio kontrol sinyal-ke-noise (B/A) dengan
sampel uji (D/C) dan pengurangan 1.
atau SOD ditambahkan ke 80 Ml buffer fosfat (pH 7,8).
Kurva kalibrasi SOD dibangun dengan menguji
0,3846, 0,7469, 1,154, 1,923 dan 3,846 U/ml SOD,
masing-masing (Gbr. 1). Reaksi dimulai dengan
penambahan xantin oksidase, kemudian sebagian
campuran reaksi dipindahkan ke dalam tabung, dan
sinyal radikal hidroksil stabil yang dihasilkan diukur 1
menit kemudian dengan menggunakan spektroskopi
ESR. Konsentrasi radikal yang terperangkap
ditentukan dengan membandingkan intensitas tinggi
sinyal ESR turunan medan rendah pertama dan
amplitudonya. 10% DMSO dalam H2O, yang
digunakan untuk menyiapkan larutan sampel,
digunakan sebagai larutan blanko (kontrol) dan diuji
secara bersamaan. Rasio tinggi puncak rata-rata dari
larutan DMSO 10% ditemukan dekat dengan H . suling
2O, 4.788 dan 4.984 U/ml, masing-masing.
Hasilnya dinyatakan dalam sinyal (S) hingga noise
(N) rasio, dihitung dengan membagi rata-rata
intensitas sinyal kontrol (b/a) dengan membagi
rata-rata intensitas sinyal sampel uji (d/c)
menggunakan persamaan berikut (Gbr. 2):
B/A
Aktivitas seperti SOD= 1,
D/C
di mana A adalah tinggi kebisingan dan B, tinggi
sinyal kontrol dalam cm dan C, tinggi kebisingan
dan D, tinggi sinyal sampel uji dalam cm. Hasil
dinyatakan sebagai unit arbitrer (unit/ml).
3. Hasil dan Pembahasan
Spesies radikal bebas reaktif baru-baru ini
disarankan untuk berkontribusi pada cedera
seluler dalam patogenesis berbagai kerusakan
mukosa lambung (Yoshikawa et al., 1993). Di
antaranya, radikal hidroksil dikenal sebagai spesies
oksigen yang sangat reaktif, yang bereaksi cepat
dengan bahan biologis, menyebabkan kerusakan
oksidatif. Teknik spin trapping ESR menggunakan
DMPO telah digunakan untuk deteksi tidak
langsung dan spesifik dari radikal hidroksil dan
kuantifikasi aktivitas penangkapan radikal bebas
(Yoshikawa et al., 1993).
Bunga segar dari S. junceum digunakan dalam
pengobatan tukak lambung dalam pengobatan
tradisional Turki dan saponin triterpenik baru,
spartitrioside, sebelumnya diisolasi sebagai prinsip
antiulserogenik aktif (Yeşilada et al., 2000). Untuk
menjelaskan dan mengevaluasi cara kerja, aktivitas
antioksidan spartitrioside (fraksi 5-6 kolom LH-20)
juga diselidiki, tetapi aktivitas yang sangat lemah
ditemukan. Di sisi lain, fraksi induk (fraksi
gabungan 53-62 dan 63-71 kolom MPLC-I) memiliki
aktivitas antioksidan yang luar biasa (masing-
masing 19,048 dan 19,689 U/ml) (Skema 1).
Dengan demikian, penelitian ini dilakukan untuk
menentukan komponen antioksidan aktif dalam
fraksi ini melalui fraksinasi yang dipandu aktivitas.
Ekstrak MeOH difraksinasi seperti yang
dijelaskan dalam Skema 1. Efek antioksidan dari
ekstrak EtOAc ditentukan sangat tinggi dan
ditemukan terutama terdiri dari flavonoid
 E. Yeşilada dkk. / Jurnal Etnofarmakologi 73 (2000) 471–478
pada pemeriksaan KLT. Flavonoid adalah konstituen
antioksidan terkenal dari tanaman (Kandaswami dan
Middleton Jr, 1994) dan membenarkan aktivitas
antiulcerogenic in vivo yang bergantung pada dosis
ekstrak ini (44,0-49,3% inhibisi) seperti yang dilaporkan
dalam penelitian sebelumnya (Yeşilada et al., 2000).
Dengan demikian, penelitian lebih lanjut dilakukan padan
Ekstrak -BuOH yang dilaporkan memiliki aktivitas
antiulserogenik in vivo yang lebih kuat (penghambatan
88,0%) (Yeşilada et al., 2000).
Ekstrak BuOH difraksinasi dengan teknik
pemisahan kimia pada kolom Diaion HP-20,
silika gel (MPLC-I) dan Sephadex LH-20. Fraksi
kaya flavonoid yang diperoleh dari sistem
terakhir, fraksi 7-12, selanjutnya dilakukan
pemisahan kromatografi pada kolom silika gel
(MPLC-II) dan RP-18 (preparative HPLC) untuk
menghasilkan lima glikosida flavonoid dan
strukturnya dijelaskan dengan sarana spektral
(Gbr. 3).
Arora dkk. (1998) dan van Acker dkk. (1996)
mempelajari aktivitas antioksidan flavonoid untuk menilai
hubungan struktur-aktivitas, dengan menggunakan
teknik yang berbeda untuk menentukan kapasitas
pengkelat besi sebagai indeks untuk evaluasi. Menurut
Gambar 3. Struktur Flavonoid Terisolasi.
477
untuk hasil studi ini, substitusi bagian jenis
katekol atau pyrogallol pada cincin B tampaknya
penting untuk sifat pemulung flavonoid. Adanya
substituen hidroksil pada skleton flavonoid
meningkatkan aktivitas, sedangkan substitusi
metoksil menekan aktivitas antioksidan. Telah
disarankan bahwa untuk efektivitas maksimum
C3Gugus -OH yang terikat pada C2 -C3
ikatan rangkap dan berdekatan dengan C4 Fungsi –
okso di ring C, seperti yang ada di quercetin, adalah
prasyarat. Kesimpulan yang sama juga ditunjukkan
dalam makalah review Kandaswami dan Middleton Jr
(1994) dan Rice-Evans et al. (1996). Selanjutnya, Rice-
Evans et al. (1996) menunjukkan bahwa C3
dan C5Gugus -OH dengan C4 Fungsi –okso dalam cincin A
dan C diperlukan untuk aktivitas maksimum. Beberapa
penulis (van Acker et al., 1996) juga mengklaim bahwa C5
,C7-hidroksilasi pada cincin A memiliki sedikit pengaruh
pada aktivitas, namun, Rice-Evans et al. (1996)
menyangkal kesimpulan seperti itu berdasarkan temuan
eksperimental mereka setidaknya untuk aktivitas
antioksidan dalam fase air.
Seperti yang ditunjukkan dalam Skema 1ScS,
semua flavonoid yang diisolasi dengan fraksinasi yang
dipandu aktivitas dalam penelitian ini memiliki bagian
katekol yang berkorelasi dengan hasil penelitian
sebelumnya. 1, isoquercitrin (quercetin 3B-glukosida)
menunjukkan aktivitas antioksidan sedang (7,959 U/
ml). Dalam kasus, glikosilasi bergeser ke C4' posisi ring
B seperti pada 5 (kuersetin 4%B-glukosida), aktivitas
antioksidan meningkat dua kali (13,736 U/ml). Di sisi
lain, aktivitas itu secara drastis berkurang oleh
glikosilasi kedua C3 dan C4%-OH posisi seperti di 3 (
quercetin 3, 4%-diglucoside) (0,793 U/ml). Namun,
aktivitasnya sangat meningkat dengan metilasi C5
Gugus -OH seperti pada 4 (azaleatin 3B-glukosida)
(19,086 U/ml). Aktivitas antioksidan tertinggi dalam
penelitian ini ditentukan untuk2, luteolin 4%B-
glukosida (22,593 U/ml). Dengan demikian, hasil
penelitian ini sebagian berkorelasi dengan yang
dijelaskan dalam penelitian yang disebutkan di atas.
Cotelle dkk. (1996) mempelajari sifat antioksidan dari
24 gugus hidroksil yang mengandung aglikon flavonoid,
baik yang berasal dari sintetis maupun alami, untuk
membangun hubungan struktur-aktivitas. Mereka
menggunakan berbagai teknik, seperti uji DPPH, sistem
xanthine/xanthine oxidase (X/XO) dengan
478 E. Yeşilada dkk. / Jurnal Etnofarmakologi 73 (2000) 471–478
chemiluminescence, penghambatan xanthine
oxidase (XO) oleh spektroskopi UV, penghambatan
MDA, dan uji ESR untuk penilaian aktivitas
scavenging dan antioksidan. Sebagai konsekuensi
dari studi mereka, mereka mengusulkan bahwa C7
-hidroksiflavon adalah inhibitor kompetitif kuat XO,
mungkin dengan menggantikan C2 atau C6-OH dari
xantin pada sisi aktif enzim. Mereka menemukan
luteolin sebagai salah satu hidroksi flavonoid
paling aktif pada model yang digunakan, terutama
terhadap XO. Terlepas dari kesimpulan van Acker
et al. (1996) bahwa substituen pada C7
posisi tidak mempengaruhi aktivitas pemulungan
flavonoid, hasil yang dilaporkan oleh Cotelle et al.
(1996) tampaknya berkorelasi dengan penelitian
ini. Karena, sistem X/XO juga digunakan dalam
penelitian ini dan semua flavonoid yang
didefinisikan memiliki C7Gugus -OH dan
luteolin-4%- glukosida, 2, ditemukan sebagai
senyawa antioksidan paling kuat.
Meskipun sedikit data yang tersedia mengenai efek
antioksidan glikosida flavonoid, umumnya diusulkan
bahwa glikosilasi flavonoid mengurangi aktivitasnya
bila dibandingkan dengan aglikon yang sesuai (Rice-
Evans et al., 1996). Sebenarnya, ini mungkin tidak
penting untuk efek in vivo, karena ikatan glikosidik
mungkin dihidrolisis sampai batas tertentu dalam
kondisi lambung untuk memberikan gugus hidroksil
bebas. Tetapi jelas bahwa bis-glikosilasi seperti pada3,
secara drastis mengurangi aktivitas in vitro, meskipun
C . bebas7Gugus -OH dilaporkan penting untuk
aktivitas XO.
Selain itu, terlepas dari laporan negatif bahwa
substitusi metoksil menekan aktivitas antioksidan
(Arora et al., 1998), kami mengamati efek kuat
dengan 4. Hasil yang bertentangan ini dapat
dijelaskan oleh penggunaan teknik yang berbeda
dalam studi ini serta mekanisme yang berbeda
yang memerlukan penyelidikan lebih lanjut.
Sebagai kesimpulan, terlepas dari fakta bahwa
prinsip antiulserogenik in vivo yang kuat dari bunga,
spartitrioside, glikosida triterpen, tidak menunjukkan
aktivitas antioksidan seperti SOD in vitro yang luar
biasa, beberapa flavonoid yang diperoleh dari ekstrak
yang sama ditemukan memiliki persyaratan struktural
untuk aktivitas seperti SOD yang kuat. Hasil penelitian
ini mungkin memiliki kontribusi untuk interpretasi
efek antiulserogenik dari obat tradisional ini.
Ucapan Terima Kasih
Penulis pertama, EY, mengakui menerima
hibah dari Fujii-Otsuka International Fund untuk
studi di Jepang.
Referensi
Agrawal, PK, 1989. Karbon-13 NMR Flavonoid. lain,
Amsterdam.
Arora, A., Nair, MG, Strasburg, GM, 1998. Struktur-aktif-
hubungan untuk aktivitas antioksidan dari serangkaian
flavonoid dalam sistem liposomal. Biologi dan Kedokteran
Radikal Bebas 24, 1355–1363.
Cotelle, N., Bernier, JL, Catteau, JP, Pommery, J., Dompet,
JC, Gaydou, EM, 1996. Sifat antioksidan hidroksi-flavon.
Biologi dan Kedokteran Radikal Bebas 20, 35–43.
Kandaswami, C., Middleton Jr, E., 1994. Pemulung radikal bebas
ing dan aktivitas antioksidan flavonoid tanaman. Dalam:
Armstrong, D. (Ed.), Radikal Bebas dalam Kedokteran
Diagnostik. Plenum Press, New York, hlm. 351–375.
Markham, KR, Geiger, H., 1994. Magnetik nuklir 1H
spektroskopi resonansi flavonoid dan glikosidanya dalam
heksadeuterodimetilsulfoksida. Dalam: Harborne, JB (Ed.),
Flavonoid, Kemajuan dalam Penelitian sejak 1986. Chapman &
Hall, London.
Perry, MA, Wadhwa, S., Taman, DA, Pickard, W., Granger,
DN, 1986. Peran radikal oksigen dalam lesi yang diinduksi
iskemik di perut kucing. Gastroenterologi 90, 362–367.
Pihan, G., Regillo, C., Szabo, S., 1987. Radikal bebas dan lipid
peroksidasi pada cedera mukosa lambung yang diinduksi
etanol atau aspirin. Penyakit dan Ilmu Pencernaan 32, 1395–
1401. Rice-Evans, CA, Miller, NJ, Paganda, G., 1996. Struktur-
hubungan aktivitas antioksidan flavonoid dan asam fenolik. Biologi
dan Kedokteran Radikal Bebas 20, 933–956. Salim, AS, 1990.
Radikal bebas yang diturunkan dari oksigen dan pencegahannya
kekambuhan ulkus duodenum: pendekatan baru. American
Journal of Medical Sciences 300, 1–6.
van Acker, SABE, van den Berg, DJ, Tromp, MNJL,
Griffioen, DH, van Bennekom, WP, van der Vijgh, WJ, Bast,
A., 1996. Aspek struktural aktivitas antioksidan flavonoid.
Biologi dan Kedokteran Radikal Bebas 20, 331–342.
Yoshikawa, T., Naito, Y., Tanigawa, T., Kondo, M., 1993. Gratis
aktivitas pemulungan radikal dari agen anti-ulkus baru
rebamid dipelajari oleh resonansi spin elektron. Arzneimittel
Forschung/Penelitian Obat 43, 363–366.
Yeşilada, E., Honda, G., Sezik, E., Tabata, M., Goto, K,
Ikeshiro, Y., 1993. Pengobatan Tradisional di Turki IV.
Pengobatan rakyat di subdivisi Mediterania. Jurnal
Etnofarmakologi 39, 3138.
Yeşilada, E., Takaishi, Y., 1999. Saponin dengan anti-ulkus
efek genic dari bunga S. junceum. Fitokimia 51, 903–908.
Yeşilada, E., Takaishi, Y., Fujita, T., Sezik, E., 2000. Anti-ul-
efek serogenik bunga S. junceum pada model uji in vivo
pada tikus. Jurnal Etnofarmakologi 70, 219-226.