SPEKTROFOTOMETER

Spektrofotometer adalah alat yang digunakan untuk mengukur absorbansi dengan cara melewatkan cahaya
dengan panjang gelombang tertentu pada suatu objek kaca atau kuarsa yang disebut kuvet.
 FUNGSI SPEKTROFOTOMETER
• Spektrofotometer UV-Vis adalah alat yang
digunakan untuk mengukur transmitansi,
reflektansi dan absorbsi dari cuplikan sebagai
fungsi dari panjang gelombang.

• Secara Prinsip kerja yaitu pengukuran pada

panjang gelombang maksimum yang
ditentukan yaitu nilai absorbansinya adalah
0,2 – 0,8
 SPEKTROFOTOMETER UV-VIS
• Spektrofotometer salah satu metode analisa
kuantitatif zat kimia berdasarkan sifat
absorbansinya terhadap radiasi sinar efek
tromagnetik serta interaksinya antara zat kimia
dengan radiasi sinar elektromagnetik
• Spektrofotometri UV-Vis adalah anggota teknik
analisis spektroskopik yang memakai sumber REM
(radiasi elektromagnetik) ultraviolet dekat
(190-380 nm) dan dan sinar tampak ( 380 – 780
nm) dengan memakai instrumen
spektrofotometer.
 Bagian-Bagian
Spektrofotometer
 Cara Kerja Spektrofotometer UV-Vis
Cara kerja alat spektrofotometer UV-Vis yaitu:

1. sinar dari sumber radiasi diteruskan menuju

monokromator.

2. Cahaya dari monokromator diarahkan terpisah

melalui sampel dengan sebuah cermin berotasi.

3. Detektor menerima cahaya dari sampel secara

bergantian secara berulang-ulang, Sinyal listrik dari
detektor diproses, diubah ke digital dan dilihat
hasilnya,

4. selanjutnya perhitungan dilakukan dengan

komputer yang sudah terprogram.
Bagian-bagian Spektrofotometer
1. Sumber sinar polikromatis : sebagai sumber
sinar polikromatis dengan berbagai macam
rentang panjang gelombang.
2. Monokromator : sebagai penyeleksi panjang
gelombang yaitu mengubah cahaya yang
berasal dari sumber sinar polikromatis
menjadi cahaya monokromatis.
3. Sel sampel : sebagai tempat meletakan
sampel.
4. Detektor : menangkap cahaya yang
diteruskan dari sampel dan mengubahnya
menjadi arus listrik.
5. Read out : suatu sistem baca yang
menangkap besarnya isyarat listrik yang
berasal dari detektor.
Fungsi dan manfaat scr umum
1. Untuk proses preformulasi
2. Untuk proses formulasi
3. Untuk analisis kandungan obat, dll
Prinsip kerja
Bila cahaya (monokromatik maupun
campuran) jatuh pada suatu medium
homogen, sebagian dari sinar masuk akan
dipantulkan sebagian diserap dalam medium
itu dan sisanya diteruskan. Nilai yang keluar
dari cahaya yang diteruskan dinyatakan dalam
nilai absorbansi karena memiliki hubungan
dengan konsentrasi sampel (Hukum Lambert
Beer)
Persyaratan Hukum Lambert Beer
1. Radiasi yang dipakai harus monokromatik
2. Energi radiasi yang diabsorpsi oleh sampel
tidak menimbulkan reaksi kimia
3. Sampel (larutan) yang mengabsorbsi harus
homogen
4. Tidak terjadi fluoresensi atau phosporesensi,
dan indeks refraksi tidak berpengaruh
terhadap konsentrasi, jadi larutan tidak pekat
(harus encer).
Proses penyerapan cahaya oleh zat dalam sel sampel.
Terlihat bahwa zat sebelum melewati sel sampel lebih terang atau
lebih banyak di banding cahaya setelah melewati sel sampel
Jenis Spektrofotometer
1. Spektrofotometer tipe UV
- Cahaya dgn 190-380 ‫ ג‬nm
- Menganalisa sampel yang tidak berwarna
Jenis Spektrofotometer
2. Spektrofotometer tipe Visibel
- Cahaya yg dpt dilihat oleh mata manusia :
cahaya dgn 400-800 ‫ ג‬nm
- Menganalisa sampel yang berwarna
Jenis Spektrofotometer
3. Spektrofotometer tipe UV-Vis
- Gabungan dari tipe UV dan Visibel
- Sumber chy : ultra violet dan tampak
- Penangkapan objek melalui gelombang pjg
yg berbeda satu dgn yg lain
- Bisa digunakan utk sampel yg berwarna
maupun tidak berwarna.
Pengamatan hasil UV, Vis dan UV-Vis
Jenis Spektrofotometer
4. Spektrofotometer tipe Infra Merah (IR)
- Menyelidiki antar molekul dgn paparan
radiasi elektromagnetik
- Aplikasix untuk analisa kualitatif dan
kuantitatif
- Fgs utama : mengidentifikasi syw organik yg
terdiri dari spektrum komplek dan terdiri dari
banyak puncak
Gambar hasil spektro IR
5. Spektrofotometer tipe Serapan Atom (SSA)
- Untuk menganalisis benda padat
- Penyerapan sinar atau cahaya dari sumber
atom yang telah dibebaskan oleh nyala
panjang gelombang.
- Serapan cahaya pada logam logam tertentu
dalam kimia analitik dapat menentukan
konsentrasi dari beberapa unsur logam
tertentu.
Jenis Spektrofotometer
6. Spektrofotometer tipe Resonansi Magnetik
Inti (RMI)
- Untuk menentukan struktur molekul dari
komponen alami maupun buatan.
- Untuk studi molekul organik yang mampu
menciptakan atom hidrogen dalam jumlah
banyak.
Jenis Spektrofotometer
7. Spektrofotometer tipe Pendar Molekular
(Pendar Fluor/Fosfor)
- Berdasarkan proses penyerapan dan
pengemisian radiasi
- Memanfaatkan energi radiasi yang tidak
dapat teremisikan, alat ini bekerja dengan
cara mengubah bentuk energi yang tidak
teremisikan menjadi energi panas atau termal.