LAPORAN PRATIKUM

MIKROBIOLOGI

ACARA : PENGENALAN DAN PEMBUATAN MEDIA

DISUSUN OLEH :

IRWANDA
2101040002

Kelompok Pratikum :
Nilai Laporan Tanggal dan Paraf Asisten

LABORATORIUM MIPA
FALKUTAS PERTANIAN
UNIVERSITAS ALMUSLIM
2021
 BAB 1
PENDAHULUAN

A. LATAR BELAKANG
Untuk menelaah mikroorganisme di laboratorium, kita harus dapat
menumbuhkan mereka. Mikroorganisme dapat berkembang biak dengan
alami atau dengan bantuan manusia. Mikroorganisme yang dikembangkan
oleh manusia diantaranya melalui substrat yang disebutmedia. Untuk
melakukan hal ini, haruslah dimengerti jenis-jenis nutrien yang
diisyaratkanoleh bakteri dan juga macam lingkungan fisik yang menyediakan
kondisi optimum bagipertumbuhannya.Mikroorganisme yang kita isolasi
harus kita ketahui jenis medium yang disukaisehingga dapat tumbuh dengan
baik pada media.
Dalam hal ini medium ini akan digunakanoleh mikroorganisme sebagai
sumber energi untuk melakukan pertumbuhan danperkembangbiakan maka
hendaknya harus sesuai dengan komposisi bahan medium.Berdasarkan hal
tersebut di atas maka dilakukanlah praktikum ini untuk mempelajari macam-
macam medium, cara- cara pembuatan dari beberapa medium dan sekaligus
mengetahuibahan- bahan yang digunakan serta komposisi juga fungsi dari
masing- masing bahantersebut dalam membantu pertumbuhan
mikroorganisme tersebut. Sehingga nantinyadiharapkan dapat menumbuhkan,
mengisolasi dan menguji sifat fisiologi atau perhitungan mikroorganisme
tertentu.
Berdasarkan latar belakang diatas maka dilakukan pratikum “Pembuatan
Media Dan Sterilisasi” ini guna memberikan pemahaman kepada kita tentang
hal-hal yang berkaitan dengan sterilisasi dan pembuatan media serta
menambah pengetahuan dan keterampilan tentang teknik atau tata cara
sterilisasi dan pembuatan media dalam mikrobiologi.
B. Tujuan Praktikum
Tujuan dari praktikum pembuatan media ini antara lain sebagai berikut :
1. Mengenal bermacam-macam jenis dan kegunaan media
2. Mengetahui cara pembuatan berbagai media
3. Mengetahui pentingnya sterilisasi dan cara pembuatannya
 BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

Praktek sterilisasi medium dan alat-alat secara umum dapat dilakukan secara
fisik (misalnya pemanasan, pembekuan, pengeringan, liofilisasi, radiasi), secara
kimiawi (misalnya antiseptik, disinfektan), secara bio-logis (dengan antibiotika).
Sterilisasi dengan antibiotika tidak umum digunakan, tetapi lebih banyak
digunakan untuk tujuan khemoterapi (pegobatan). Pemilihan cara sterilisasi yang
akan dipakai tergantung dari beberapa hal misalnya macam bahan dan alat yang
disterilkan, ketahanan terhadap panas, dan bentuk bahan yang disterilkan (padat,
cair, atau berbentuk gas) (Waluyo, 2008).
Media adalah susunan bahan baik bahan alami (seperti tauge, kentang, daging,
telur, wortel dan sebagainya) ataupun bahan buatan (berbentuk senyawa kimia,
organik ataupun anorganik) yang dipergunakan untuk pertumbuhan dan
perkembangbiakan mikroba. Mikroorganisme memanfaatkan nutrisi media berupa
molekul-molekul kecil yang dirakit untuk menyusun komponen sel. Dengan
media pertumbuhan maka dapat dilakukan isolasi mikroorganisme menjadi kultur
murni dan juga memanipulasi komposisi media pertumbuhannya (Hidayat , 2006).
Media berfungsi untuk menumbuhkan mikroba, isolasi, memperbanyak
jumlah, menguji sifat-sifat fisiologi dan perhitungan jumlah mikroba, dimana
dalam proses pembuatannya harus disterilisasi dan menerapkan metode aseptis
untuk menghindari kontaminasi pada media. Nutrien agar adalah medium umum
untuk uji air dan produk dairy. NA juga digunakan untuk pertumbuhan mayoritas
dari mikroorganisme yang tidak selektif, dalam artian mikroorganisme heterotrof.
Media ini merupakan media sederhana yang dibuat dari ekstrak beef, pepton, dan
agar. NA merupakan salah satu media yang umum digunakan dalam prosedur
bakteriologi seperti uji biasa dari air, sewage, produk pangan, untuk membawa
stok kultur, untuk pertumbuhan sampel pada uji bakteri, dan untuk mengisolasi
organisme dalam kultur murni dengan caradisterilisasi dengan autoklaf pada
121°C selama 15 menit (Fathir, 2009).
 Menurut Atlas ( 2005 ), komposisi Nutrien Agar per liter sebagai berikut :
1. Agar 15,0 gram
2. Peptone 5,0 gram
3. NaCl 5,0 gram
4. Yeast Extract 2,0 gram
5. Beef Extract 1,0 gram
6. pH 7,4 ± 0,2 pada 25°C

Media pertumbuhan mikroorganisme adalah suatu bahan yang terdiri dari

campuran zat- zat makanan (nutrisi) yang di perlukan mikroorganisme untuk
penumbuhannya. Mikroorganisme memanfaatkan nutrisi media berupa molekul-
molekul kecil yang dirakit untuk menyusun komponen sel. Dengan media
pertumbuhan dapat dilakukan isolat mikroorganisme menjadi kultur murni dan
juga memanipulasi komposisi media pertumbuhannya (Indra, 2008).
 BAB III
METODEOLOGI
A. Waktu dan Tempat
Pratikum ini dilaksanakan pada hari Selasa tanggal 05 Oktober 2021 jam
09.00 sampai selesai di laboratorium MIPA-1 Falkutas Pertanian Universitas
Al-Muslim.

B. Bahan dan Alat

Bahan yang digunakan dalam pratikum ini adalah : Nutrien Agar (NA),
Potato dekstrosa agar (PDA), Aquades, kapas, kertas, dan kertas berlabel.
Alat yang di gunakan dalam pratikum ini adalah :
1. Spatula
2. Gelas ukur
3. Autoclave
4. Busen
5. Cawan petri
6. Hot plate
7. Labu erlenmever
8. Timbangan anatik

C. Skema Kerja
Skema kerja pada pratikum ini yaitu :
Mengkuti tata tertib yang berlaku di laboratorium.

Menyiapkan alat dan bahan yang di butuhkan.

Mengisi air di dalam autoclave

Menyiapkan cawan petri dam membungkusnya dengan kertas

Menimbang semua bahan sesuai jumlah yang diperlukan

 Melarutkan bahan Aquades 50 ml

Menutup larutan menggunakan kapas kemudian Memasukan medium tersebut

kedalam autoclave untuk di sterilisasi dengan suhu 121 derajat celcius

Mengeluarkan alat dan bahan dari Autoclave tunggu hingga dingin

Memanaskan kembali larutan agar ang membeku setelah itu di tuangkan

kedalam cawan petri steril dan non-steril di dekat Bunsen agar tidak
terkontaminasi bakteri lain

Melabeli cawan sesuai agar dan tempat yang di gunakan

 BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Hasil Pengamatan
Adapun hasil peraktikum pembuatan media dan sterilisasi adalah sebagai
berikut.
1. Media NA
sebagai pemadat, karena sifatnya yang mudah membeku dan mengandung
karbohidrat yang berupa galaktam sehingga tidak mudah diuraikan oleh
mikroorganisme.
2. Media PDA
untuk pertumbuhan jamur dan yeast

Gambar 1.1 hasil PDA steril dan PDA non steril

Dari gambar tersebut dapat di lihat perbedaan PDA steril tidak banyak
ditumbuhi jamur sedangkan pada PDA non steril terdapat gumpalan jamur
yang lumayan banyak.

B. Pembahasan
Alat yang akan di gunakan dalam suatu penelitian atau pratikum harus
disterilisasi terlebih dahulu untuk membebaskan semua bahan dan peralatan
tersebut dari semua bentuk kehidupan. Steriliasi merupakan suatu proses
unntuk mematikan semua organisme yang terdapat pada suatu benda.
 Potato Dextrose Agar (PDA) Merupakan media komplek dan media
diferensiasi untuk pertumbuhan jamur dan yeast sehingga sering di gunakan
sebagai uji untuk menentukan jumlah jamur dan yeast dengan menumbuhkan
mikroba pada permukaan sehingga akan membentuk kooni yang dapat diikat
dan dihitung (Fardiaz, 1993).
Pembuatan Potato Dextrose Agar (PDA), Pada pembuatan PDA ini
awalnya adalah mencapurkan ekstra kentang dengan PDA dan agar.
Tujuannya adalah untuk membuat nutrisi untuk mikroba yang mengandung
substansi jaringan tumbuhan yang dapat larut dalam air. Dan agar di gunakan
sebagai bahan pembuatan media.
Pembuatan Nutriet Agar (NA), Pada pemuatan NA ini dengan cara
mencampurkan ekstra daging dengan pepton dan agar. Ekstra sapi
mengandung substansi jaringan hewan yang dapat larut dalam air, meliputi
karbohidrat, senywa nitrogen organik, vitamin yang dapat larut dalam air, dan
garam-garam. Penambahan pepton untuk sumber utama nitrogen organik,
dapat pula mengandung vitamin dan kadang-kadang karbohidrat, bergantung
kepada jenis bahan berkandung protein yang dicernakan. Dan agar digunakan
sebagai bahan pemadatan media.
Adapun faktor-faktor yang mempengaruhi kesalahan pada saat pratikum
adalah :
1. Alat yang digunakan tidak steril
2. Bahan yang digunakan sudah terkontaminasi dengan zat lain
3. Kurangnya ketelitian praktikan pada saat melakukan percobaan baik pada
saat penimbangan maupun pada saat titrasi
4. Kurang teliti pada saat membaca volume titrasi

Autoclave adalah alat pemanas tertutup yang digunakan untuk

mensterilisasi suatu benda menggunakan uap bersuhu dan bertekanan tinggi
(121ͦ c) selama kurang lebih 15 menit. Penurunan tekanan pada autoklaf tidak
dimaksudkan untuk membunuh mikroorganisme, melainkan meningkatkan
suhu dalam autokaf. Suhu yang tinggi inilah yang akan membunuh
mikroorganisme. Faktor-faktor yang mempengaruhi sterilisasi antara lain:
1) Kelembaban
2) Konsentrasi gas
3) Suhu
4) Distribusi gas dalam chamber pengsterilan
 BAB V
PENUTUP
A. Kesimpulan

Alat yang akan di gunakan dalam suatu penelitian atau pratikum harus
disterilisasi terlebih dahulu untuk membebaskan semua bahan dan peralatan
tersebut dari semua bentuk kehidupan. Steriliasi merupakan suatu proses
unntuk mematikan semua organisme yang terdapat pada suatu benda

B. Saran
Saran yang saya berikan mungkin mengenai kelengkapan alat-alat yang
belum memadai untuk melakukan pratikum agar dapat dilengkapi.
 DAFTAR PUSTAKA

Anisah, dan Rahayu,T., 2015. Media Alternatif untuk Pertumbuhan Bakteri

Menggunakan Sumber Karbohidrat yang Berbeda. Jurnal pendidikan
biologi FKIP UNS.
Fitri, A., dkk, 2014. Peralatan, Sterilisasi dan Media Pertumbuhan Mikroba.
Jurnal Praktikum Mikrobiologi Dasar. FMIPA Unmul.
Hafsah, P., 2009. Mikrobiologi. Penerbar swadaya. Jakarta
http://dinilinda0598.blogspot.com/2017/04/sterilisasi-dan-pembuatan
medium.html Di akses 16 oktober 2021
https://123dok.com/document/zgr9dm8q-laporan-praktikum-pembuatan-media-
dan-st.html Di akses 17 Oktober 2021