Aula 7 – Enzimas

Parte I

Profa. Juliana Inaba

 Catálise, qual é a sua importância?

• Catálise é fundamental para manutenção da vida

•Sacarose + O2 = CO2 + H2O + energia G -

• Catalisadores de reações, não são consumidos

• Apresentam alta especificidade
• Funcionam em condições amenas de pH e T
• Importância clínica e industrial
• Frederick W. Kuhne- ENZIMAS
 Atuam em sequências
organizadas nas
reações químicas

Catalisam degradação
de nutrientes

Catalisam a As atividades
Enzimas conservação de energia necessárias para
química sustentar a vida
são coordenadas!
Catalisam
transformação de
energia química

Catalisam síntese e
degradação de
macromoléculas
Enzimas
 ENZIMAS
• Com exceção de um seleto grupo de RNAs, TODAS AS
ENZIMAS SÃO PROTEÍNAS
• Sua atividade depende da conformação NATIVA da proteína.
• Possuem massa molecular que varia de 12.000-1.000.000
• Algumas enzimas dependem de outros grupos químicos,
além de seus aminoácidos para possuir atividade catalítica:
COFATORES= íons inorgânicos, como Fe2+, Mg2+, Mn2+, Zn 2+

COENZIMA= complexo orgânico ou

metalorgânico que se liga à enzima.

Coenzima A
GRUPO PROSTÉTICO= coenzima ou metal ligado de
maneira forte ou covalente à enzima.
Coenzimas
Holoenzimas
Cofator/ Coenzima+ Apoenzima= Holoenzima
Classificação das enzimas
 Classificação de enzimas
Reação catalisada + ASE
Ex) Urease – cliva uréia
DNA polimerase – polimerisa DNA
Método ambíguo ex: tripsina e pepsina
Sistema E.C -Comissão enzimática
Exemplo:
E.C 2.7.1.1
E. C.= enzyme comission
2. Classe:Transferase
7. Subclasse: fosfotransferase.
1. O OH é o receptor.
1. A glucose é o aceptor.
EXEMPLO DE REAÇÕES CATALISADAS POR ENZIMAS:
 Como as enzimas funcionam?

• Ambiente celular estável pH e T

• Formação de intermediários instáveis, rearranjo de ligações
e colisão correta
• Fornecem um ambiente químico onde as reações se tornam
mais favoráveis

Sítio ativo

Substrato
COMO OCORREM AS REAÇÕES QUÍMICAS?
S P
 Barreira de energia de ativação
• Redução da entropia das moléculas que estão
livres em solução
• Camada de solvatação do reagente estabiliza as
moléculas
• Distorções no substrato
• Alinhamento correto de moléculas para a reação

Sobrepor essas barreiras

 As enzimas afetam velocidade de reação

Glucose + 6 O2 ——› 6 CO2 + 6 H2O - 2870 kJ energia

Estado de transição

G++uncat
Energia Livre, G
G++cat

G

Progresso de reação
Resumindo...
 Aumento da velocidade de reação por ação enzimática

•O fato que diferencia as enzimas de catalisadores não enzimáticos é a

formação do COMPLEXO ENZIMA-SUBSTRATO (ES);

•A formação do complexo ES é mediada pelas mesmas forças que estabilizam

a estrutura das proteínas

•A energia derivada da interação ES é chamada de ENERGIA DE LIGAÇÃO;

•A energia de ligação é a principal fonte de energia usada para diminuir a

energia de ativação das reações
 Como as enzimas reduzem a energia de ativação?

Grupos catalícos participam da reação

Energia de ligação E + S  ES  E + P
Ajuste induzido (maximização das ligações ES)
Como as enzimas reduzem a energia de ativação?
Ligação fracas são otimizados no estado de transição

Energia Livre, G
Sem Enzima

Substrato Estado de Produto

Transição
Enzima complementar ao substrato

Energia Livre, G
Enzima complementar ao estado de transição

Energia Livre, G
A enzima sofre mudanças conformacionais quando o
substrato se liga, induzida por múltiplas interações
fracas com o substrato.

Isto é conhecido como AJUSTE INDUZIDO.

Importante***
 FATORES QUE AFETAM A VELOCIDADE DA REAÇÃO

1) EFEITO DA TEMPERATURA SOBRE A ATIVIDADE ENZIMÁTICA

2) EFEITO DO pH SOBRE A ATIVIDADE ENZIMÁTICA
3) EFEITO DA CONCENTRAÇÃO DO SUBSTRATO SOBRE A
ATIVIDADE ENZIMÁTICA

A velocidade da reação enzimática

aumenta com o aumento da
concentração do substrato .

 A saturação dos sítios de ligação

da enzima ocorre no platô, onde
tem-se a Vmax.
 Mecanismos de catálise enzimática

1. Proximidade e orientação (físico)

 Os substratos se aproximam dos grupos funcionais

catalíticos da enzima em uma orientação espacial
apropriada para que a reação possa ocorrer.
 Após o correto posicionamento do substrato, uma
modificação na conformação da enzima resulta em um
complexo enzima substrato orientado. Essa orientação leva
o complexo enzima substrato ao ESTADO DE TRANSIÇÃO.

MOVIMENTOS DE TRANSLAÇÃO, DE ROTAÇÃO

MOLECULAR E DE ROTAÇÃO INTERNA NOS
SUBSTRATOS.
2. Catálise ácido-base

A catálise ácido-base específica envolve o H+ e o OH- da água. Em geral,

outras espécies reativas atuam como doadores e aceptores de elétrons. Nos
dois caso, a enzima permite a formação de um estado de transição mais
estável através da transferência de elétrons.

Reagentes

Intermediário
instável

Produtos
2. Catálise ácido base – aminoácidos importantes
3. Catálise covalente
Um substrato ou fragmento faz ligação covalente com o aminoácido do
sítio ativo ou um co-fator enzimático.
Os intermediários podem apresentar alguma estabilidade, mas são
originados os produtos, a enzima, ou co-factor são regenerados.
Catálise das proteases de serina, como a tripsina, quimotripsina, ou
elastase. Estas enzimas hidrolisam as ligações amida de cadeias
polipeptídicas.
A-B + X: A-X + B A + X: + B

Quimiotripsina
 4. Catálise utilizando metais
1/4 a 1/3 de todas as enzimas necessitam de um íon metálico para sua
função.
É freqüente o uso de co-fatores metálicos, como K+, Mg2+ e Ca2+. Dão
estabilidade à conformação ativa ou permitem a ligação do substrato ao sitio
ativo.
Quando o íon metálico (Zn2+, Cu1,2+, Fe2,3+ e Co2,3+) é ligado ao sítio ativo, a
enzima é conhecida como metaloenzima.
Atuam como mediadores da reação de oxidação-redução (REDOX),
alterando seu estado durante a reação ou atuam como eletrófilos.
Participam de interação iônica com substrato ou intermediários