GOT (ASAT) Mod.

IFCC

Test liquiUV

Aspartate aminotransferase (EC 2.6.1.1)

Ukuran kemasan

REF4 12211 16x5 ml kit M komplit

12011 10x10 ml kit komplit

12021 8x50 ml kit komplit

12032 4x250 ml kit komplit

IVD

Metode

Metode kinetik untuk pengukuran aktivitas ASAT berdasarkan rekomendasi Expert

panel of the IFCC (international federation og clinical chemistry).

Prisip reaksi.

GOT
2-oxoglutarate + L- Aspartate L- glutamate + oxaloasetate

Oxaloasetate + NADH + H+ MDH

L- malate + NAD+

Isi komposisi reagen

REF 12211 12011 12021 12031

BUF 16x4 ml 10x8 ml 8x40 ml 4x50 ml

SUB 1x16 ml 2x10 ml 8x10 ml 4x50 ml

BUF Buffer, reagen Enzym

Buffer TRIS (pH 7,8) 100 mmol/l

L- aspartate 290 mmol/l

LDH ≥ 600 U/I

MDH ≥ 600 U/I

SUB Substrat, reagen starting

2-oxuglutarate 12 mmol/l

NADH 0,18 mmol/l

Persiapan reagen dan stabilitas

Prosedur 1 dengan substrat start

Reagen siap pakai. Reage stabil, bahkan setelah di buka sampai tanggal kadarluarsa
jika disimpan terlindung dari sinar pada 2-8 ℃ hindari kontaminasi reagen!

Prosedur 2 dengan start sampel

REF 12031 dan 12021 : larutan isi satu botol Sub ke dalam satu botol BUF campur
dengan baik.

REF 12211, pipet 1 ml dari botol SUB ke dalam satu botol BUF campur dengan baik

REF 12011 pipet 2 ml dari botol SUB ke dalam satu botol BUF campur dengan baik.

Reagen kerja stabil selama 4 minggu pada 2-8 ℃ dan 5 hari pada 15-25℃

Specimen
Serum, plasma heparin atau EDTA, hindari hemolisa
Kehilangan aktivitas dalam 3 hari : pada + 4℃ : -8%
Pada 20-25℃ : -10%
Pemeriksaan
Panjang gelombang : Hg 365 nm, 340 nm atau Hg 334 nm
Celah optic : 1 cm
Suhu : 25℃ , 30℃ , atau 37℃
Pengukuran : Terhadap udara (penurunan absorbans)
Hangatkan reagen dan cuvet pada suhu yang di kehendaki. Suhu harus di jaga konstan
(± 0,5℃ ) selama pemeriksaan.

Prosedur 1 dengan start reagen

Pipet ke dalam cuvet 25℃ , 30℃ 37℃
Sampel 200 µl 100 µl
BUF 1000 µl 1000 µl
Campur, inkubasi selama 5 menit pada suhu yang dikehendaki
SUB 250 µl 250 µl
Campur, baca absorbans setelah 1 menit dan jalankan stopwatch. Baca
absorbans lagi tepat setelah 1,2 dan 3 menit

Prosedur 2 dengan start sampel

Pipet ke dalam cuvet 25℃ , 30℃ 37℃

Sampel 200 µl 100 µl
Reagen kerja 1000 µl 1000 µl
Campur, baca absorbans setelah 1 menit setelah dijalankan
stopwatch.baca absorbans lagi tepat tetap setelah 1,2 dan 3 menit

Metode semi mikro, untuk metode makro volume 2 kali.

Perhitungan
Untuk perubahan absorbans per menit ( ∆ A / menit) dalam 0,06-0,08 (Hg 365 nm) atau
0,12- 0,16 (Hg 334, 340 nm) (prosedur 1+2) pengukuran hanya dari 2 menit pertama
digunakan untuk perhitungan (1 menit inkubasi, 2 menit pengukuran).

Hitung aktivitas GOT dalam sampel menggunakan factor berikut:

Prosedur 1 dengan start reagen

Hg 334 nm 340 nm Hg 365 nm

U/I (25℃ , 30℃ )= ∆ A / menit 1173 1151 2132
x 2184 2143 3971
U/I (37℃ )=∆ A / menit x

Prosedur 2 dengan start sampel

Hg 334 nm 340 nm Hg 365 nm

U/I (25℃ , 30℃ )= ∆ A / menit x 971 952 1765
U/I (37℃ )=∆ A / menit x 1780 1745 3235

Factor kenversi dari tradisional unit (U/I) dalam SI-units (kat/I):

1 U/I : 16,67 x 103 µkat/I

µkat/I : 60 U/I

Tampilan Karakteristik

Linearitas

Jika perubahan absorbans per menit (∆ A / menit) atau aktivitas melebihi

25℃ , 30℃ 37℃

Hg 365 nm ∆ A / menit = 0,080 170 U/I 320 U/I
Hg 334/ 340 nm ∆ A / menit = 0, 160 190 U/I 350 U/I

Encerkan 0,1 sampel dengan 0,9 ml garam fisiologis (0,9%) dan ulangi pengukuran
menggunakan pengenceran ini. Kalikan hasil dengan 10. Jika serum yang di periksa
aktivitasnya sangat tinggi, mungkin menunjukan absirbans sangat rendah karena
sebagian besar NADH telah dipakai sebelum melakukan pembacaan pertama. Dalam
hal ini, sampel dapat di lakukan kembali seperti pada pengenceran tersebut di atas.

Data tampilan ini bi dibaca pada laporan verifikasi via:

www.human.de/data/gb/vr/EN-GOTLI.pdf atau

www.human-de.com/dat/GB/VR/EN-GOTLI.pdf

Nilai Rujukan

suhu 25℃ 30℃ 37℃

Pria Sampai 18 U/I Sampai 25 U/I Sampai 37 U/I
Wanita Sampai 15 U/I Sampai 21 U/I Sampai 31 U/I

Kontrol kualitas

Semua serum kontrol dengan kadar GOT yang di tentukan dengan metode ini dapat di
pakai.dianjurkan untuk memakai HUMATROL, atau SERODOS.

Otomasi
Adaptasi khusus untuk analyzer otomatis dapat dibuat sesuai permintaan.

Catatan

BUF dan SUB mengandung natrium azida (0,095%). Jangan tertelan. Hindari kontak
dengan kulit dan selaput membrane

Referensi
1. Clin, Chim. Acta 70, 19-42 (1976)
2. Synopsis der Lamberkrankheiten,: H. Wallnofer, E. Schmidt und F.w Schmidt,
Georg thieme verlag, sturgart 1974
3. Thefeld, W. et al., Dtsch, Med Wschr, 99,343 (1974)
4. ISO 15223 medical devices- symbols to be used with medical device labels,
labeling and invormation to be suppled