CHA PTER 13

ANTIOKSIDAN ALAMI DAN

EFEKNYA PADA KULIT
Anne Pouillot,1 Luigi L.Polla,1 Philippe Tacchini,2
Alice Neequaye,2 Ada Polla,3 dan Barbara Polla1
1Alchimie Forever Sarl, Jenewa, Swiss
2EDEL Therapeutics SA, Lausanne, Swiss
3Alchimie Forever LLC, Washington, DC

13.1 PENGANTAR

Perawatan kulit antipenuaan mewakili segmen besar pasar produk kosmetik. Produk
semacam itu biasanya mengklaim mengandung "keajaiban dalam toples", yaitu, molekul aktif
unik yang mempertahankan aspek keremajaan kulit dengan mempromosikan aktivitas seluler
di epidermis dan dermis. Sejauh pengetahuan kami, bagaimanapun, tidak ada senyawa
antipenuaan ajaib seperti itu: pendekatan terbaik saat ini adalah menggabungkan antioksidan
alami antipenuaan yang bekerja secara sinergis. “Sinergi” berarti bahwa efek global dari
gabungan antioksidan alami ini akan lebih besar daripada jumlah efek spesifik masing-masing.
Dalam bab ini, kita akan mengembangkan konsep bagaimana antioksidan memainkan peran
penting dalam pencegahan penuaan dini. Kami juga akan membahas

. mengapa antioksidan menjadi bahan utama dalam kosmetik antipenuaan?

. mengapa antioksidan alami lebih disukai daripada yang sintetis oleh begitu banyak merek?
. apa pendekatan terbaik untuk mengukur konsentrasi, khasiat, dan efek jangka
panjang antioksidan pada kulit?
. apa yang dapat kita pelajari dari studi epidemiologi besar tentang antioksidan
berbasis nutrisi yang baru-baru ini diterbitkan?
. apa relevansi aplikasi topikal antioksidan tanaman (fitoantioksidan),
khususnya yang berkaitan dengan lapisan luar kulit, stratum korneum,
dibandingkan dengan antioksidan nutrisi?

Jawaban yang kami usulkan didasarkan pada data yang tersedia dan mungkin dapat berubah di masa
mendatang, tetapi jawaban tersebut memberikan dasar untuk penyelidikan lebih lanjut dan membuka jalan
bagi penggunaan fitoantioksidan yang optimal dalam pencegahan penuaan kulit.

Perumusan, Pengemasan, dan Pemasaran Produk Kosmetik Alami, Edisi pertama. Diedit
oleh Nava Dayan dan Lambros Kromidas.
2011 John Wiley & Sons, Inc. Diterbitkan 2011 oleh John Wiley & Sons, Inc.

239
240 BAB 13 ANTIOKSIDAN ALAMI DAN EFEKNYA TERHADAP KULIT

13.2 OKSIDAN DAN ANTIOKSIDAN

Pada bagian ini, kita akan meninjau data dasar tentang oksidan dan peran serta fungsinya dalam
penuaan kulit.

13.2.1 Oksidator
13.2.1.1 ROSandRNS Oksigen (O2) sangat penting untuk kehidupan organisme aerobik.
Namun, metabolitnya merupakan ancaman potensial bagi semua organisme hidup. Memang,
HAI2 dimetabolisme dalam jaringan hewan dengan reduksi berturut-turut pada anion superoksida
(O 2. ), hidrogen peroksida (H2HAI2), dan radikal hidroksil (.OH). Ini berbeda
metabolit disebut spesies oksigen reaktif (ROS). ROS adalah radikal bebas
(dengan elektron tidak berpasangan di bola orbital terluarnya) (O . 2 , .OH) atau nonradikal
(H2HAI2, oksigen tunggal (1HAI2)) [1]. Nitric oxide (NO.), beberapa fungsi yang tumpang
tindih dengan ROS, disintesis dariL-arginin dan oksigen oleh enzim yang disebut NO
sintase dan merupakan bagian dari spesies nitrogen reaktif (RNS) [1]. Dalam bab ini, kita pada
dasarnya akan fokus pada ROS.

13.2.1.2 Fungsi Fisiologis Pada konsentrasi rendah, ROS mengerahkan fungsi intraseluler
penting, sebagai utusan kedua, regulator gen, dan mediator untuk aktivasi sel (kinase
dan faktor transkripsi). Mereka juga memainkan peran kunci dalam pertahanan tubuh
kita terhadap organisme menular, peran dicontohkan oleh fakta bahwa pasien dengan
cacat genetik NADPH oksidase, enzim yang terlibat dalam produksi ROS oleh sel darah
putih pada infeksi, tunduk pada infeksi besar [2] . Selanjutnya, ROS merupakan
modulator kematian sel, baik apoptosis maupun nekrosis [1]. Di hadapan
konsentrasi O yang tinggi.2 , TIDAK. memungkinkan pembentukan peroksinitrit yang mengubah
potensial membran mitokondria, yang merupakan kunci jalur aktivasi yang mengarah ke
apoptosis seluler [3].

13.2.1.3 Stres Oksidatif Stres oksidatif didefinisikan oleh ketidakseimbangan antara ROS
dan antioksidan, ROS menjadi berlebihan. Stres oksidatif merusak sel dan matriks
ekstraseluler, DNA nukleus dan mitokondria, lipid membran, dan protein. Kerusakan
DNA (lesi untai tunggal, penghapusan basa, atau "ikatan silang" antara DNA dan protein)
membentuk dasar karsinogenesis kulit yang diinduksi UV. Peroksidasi lipid
mempengaruhi fosfolipid baik secara struktural maupun fungsional dan menghasilkan
membran yang kaku dan permeabel. Perubahan protein, baik langsung atau diaktifkan
oleh protease, direfleksikan di kulit baik oleh pengurangan jumlah total maupun
perubahan kolagen dan elastin [4]. Selain itu, produksi ROS atau RNS yang berlebihan
menginduksi kerusakan mitokondria, yang menyebabkan penurunan tajam ATP dan
kematian sel oleh nekrosis [5].

13.2.1.4 Paparan UV sebagai Sumber Utama Stres Oksidatif di

Kulit Paparan sinar UV (180–400 nm) menyebabkan kerusakan seluler multipel, dengan
menghasilkan 1HAI2, .OH, H2HAI2, dan ROS lainnya. Sinar UVB (290-320 nm) diserap
oleh kromofor epidermis seperti melanin dan asam urokanat dan timbal.
untuk mengarahkan kerusakan molekul sambil juga menghasilkan ROS. Dengan adanya H2HAI2,
 13.2 OKSIDAN DAN ANTIOKSIDAN 241

Radiasi UVB menyebabkan pembentukan .OH [6], yang menyebabkan kerusakan DNA.
Sinar UVA (320-400 nm) menembus lebih dalam di dermis, meningkatkan produksi ROS,
dan berkontribusi pada kerusakan aktinik jangka panjang. Baik UVA dan UVB
menginduksi aktivasi berbagai faktor transkripsi dalam sel kulit, termasuk NF-kB (faktor
transkripsi yang terlibat dalam inflamasi dan respon stres seluler) [7], yang pada
gilirannya dapat meningkatkan produksi matriks metaloproteinase (MMPs), keluarga
enzim yang mendegradasi kolagen dan elastin.
Kulit terus dipengaruhi oleh faktor lingkungan dan terutama radiasi UV [8]. Di
kulit, radikal bebas yang diinduksi oleh radiasi UV menyebabkan kerusakan DNA,
protein, dan mengacaukan membran keratinosit, yang menyebabkan penuaan dini pada
sel-sel kulit: “oksidasi¼penuaan.” Saat terkena radiasi UV, kulit mengalami perubahan
yang mengakibatkan inflamasi, photoaging, dan berbagai gangguan kulit [9]. Fotoaging
kulit disertai dengan kerutan, hilangnya elastisitas, peningkatan kerapuhan kulit, dan
penyembuhan luka yang lebih lambat.

13.2.2 Antioksidan
Jaringan hidup memiliki mekanisme kontrol untuk menjaga keseimbangan ROS. Ketika ROS
dihasilkandalam hidup, banyak antioksidan ikut bermain. Kepentingan relatif mereka
tergantung pada ROS mana yang dihasilkan, bagaimana dan di mana mereka dihasilkan, dan
target kerusakan mana yang dipertimbangkan [1]. Tubuh kita mempertahankan diri dari
fenomena ini melalui antioksidan endogen [1, 10, 11]. Namun, ketika antioksidan endogen
menjadi tidak cukup atau tidak seimbang dalam pertahanan melawan oksidan, antioksidan
eksogen dapat membantu mengembalikan keseimbangan.
Antioksidan menghambat produksi ROS dengan mengais langsung,
mengurangi jumlah oksidan di dalam dan di sekitar sel kita, mencegah ROS
mencapai target biologisnya, membatasi penyebaran oksidan seperti yang terjadi
selama peroksidasi lipid, dan menggagalkan stres oksidatif sehingga mencegah
fenomena penuaan.

13.2.2.1 Antioksidan Endogen Antioksidan endogen pada dasarnya adalah enzim yang
secara katalitik menghilangkan oksidan. Antioksidan endogen utama adalah superoksida
dismutase, superoksida reduktase, katalase, dan glutation peroksidase. Enzim ini
memainkan peran kunci dalam mengurangi kandungan oksidan dan mencegah
kerusakan oksidatif. Molekul antioksidan endogen lainnya, seperti heme oksigenase,
meminimalkan ketersediaan oksidan. Enzim ini sangat diinduksi oleh stres oksidatif dan
menghilangkan oksidan (heme) sambil menghasilkan putatif
antioksidan (bilirubin yang masuk akal untuk 1HAI2) dan prooksidan (zat besi). Selain itu, kadar feritin
yang tinggi menghasilkan peningkatan kapasitas pemulungan besi yang dapat memberikan
peningkatan resistensi terhadap stres oksidatif [12].
Tingkat dan komposisi molekul antioksidan endogen berbeda dari jaringan ke
jaringan dan berdasarkan jenis sel. Baik sel punca embrionik maupun dewasa
mengekspresikan enzim antioksidan tingkat tinggi, yang menurun saat sel
berdiferensiasi [13]. Molekul antioksidan endogen sering meningkat setelah terpapar
oksidan [1]. Namun, "kolam antioksidan" ini secara bertahap dikonsumsi, karena
paparan oksidan meningkat seiring waktu.
242 BAB 13 ANTIOKSIDAN ALAMI DAN EFEKNYA TERHADAP KULIT

13.2.2.2 Eksogen Antioksidan eksogen antioksidan termasuk

antioksidan yang tidak dapat disintesis oleh tubuh kita seperti vitamin, elemen pelacak,
dan fitoantioksidan. Vitamin E (tokoferol) adalah antioksidan liposoluble yang paling
kuat. Ini menghambat peroksidasi lipid membran. Bereaksi dengan radikal bebas untuk
membentuk tokoferil radikal, zat stabil yang menghentikan reaksi berantai lipid
membran. Reaksi berantai adalah propagasi radikal bebas: molekul yang tidak stabil
oleh satu elektron pada gilirannya menjadi radikal bebas yang menghilangkan elektron
dari molekul lain yang dengan demikian menjadi radikal, dan seterusnya. Tokoferil
memiliki kemampuan untuk menghentikan jenis reaksi berantai ini oleh lipid membran.
Ia bekerja sama dengan antioksidan lain seperti vitamin C dan selenium. Vitamin C
adalah vitamin yang larut dalam air dan memiliki aktivitas antioksidan kuat yang
melindungi sel dari kerusakan akibat radikal bebas. Vitamin ini bereaksi dengan radikal
tokoferil untuk meregenerasi dan memulihkan vitamin E. Kemudian menjadi radikal
askorbil, yang juga relatif stabil. Elemen jejak seperti selenium adalah kofaktor penting
dari aktivitas enzim antioksidan.

13.2.2.3 Antioksidan yang Berasal dari Makanan Pada tahun 1992, Serge Renaud, profesor di
Universitas Bordeaux, mengusulkan sebagai "paradoks Prancis" kontradiksi nyata antara
nutrisi orang Prancis dan kesehatan mereka [14]. Di Barat Daya Prancis, makanan cukup kaya
lemak dan anggur siap dikonsumsi, namun kesehatan penduduk secara keseluruhan cukup
baik, prevalensi infark jantung lebih rendah daripada di Amerika Serikat, dan harapan hidup
lebih tinggi daripada di Timur Laut. dari Prancis. Penjelasan yang diusulkan untuk fenomena
ini adalah tingginya konsumsi polifenol dalam anggur merah yang dikonsumsi oleh penduduk
Perancis Barat Daya [15]. Polifenol dalam anggur merah ditemukan menghambat oksidasi
lipoprotein densitas rendah (LDL).in vitro, dan disarankan bahwa mereka dapat memberikan
efek kardioprotektif dengan membatasi oksidasi LDL dalam hidup.

Studi SUVIMAX (SUpplementation en VItamines et Mineraux AntioXidants) meneliti

7876 wanita Prancis berusia 35-60 tahun dan 5141 pria berusia 45-60 tahun (semuanya
tampak sehat) selama lebih dari 7 tahun (1994-2002). Setiap hari, mereka diberi plasebo
atau pil yang mengandung 120mg vitamin C, 30mgSebuah-tokoferol, 6mg b-karoten,
100 sayag selenium, dan seng 20mg. Suplementasi dosis rendah ini tidak memiliki efek
yang signifikan pada kejadian kanker atau penyakit kardiovaskular untuk kelompok
secara keseluruhan. Namun, untuk pria saja, ada efek pencegahan kanker kulit dan paru-
paru. Tampaknya juga bahwa makanan yang kaya akan berbagai fitoantioksidan (buah-
buahan, biji-bijian, dan sayuran) melindungi terhadap beberapa penyakit manusia; maka
program nutrisi di seluruh dunia: makan lima porsi buah dan sayuran setiap hari!

Karena risiko stres oksidatif meningkat seiring bertambahnya usia, dan karena
antioksidan endogen dikonsumsi secara bertahap dari waktu ke waktu, strategi pencegahan
sangat penting. Antioksidan alami memainkan peran kunci dalam strategi ini (Bagian 13.3).
Kulit, sebagai penghalang kulit, terus-menerus mengalami kerusakan dari lingkungan. Dengan
demikian, ia mengkonsumsi antioksidan endogennya yang dapat diisi ulang oleh antioksidan
eksogen yang diberikan secara topikal (Bagian 13.4). Juga, faktor nutrisi tertentu ditemukan
untuk mengatur antioksidan endogen.
 13.3 ANTIOKSIDAN ALAMI (FITOANTIOKSIDAN) 243

13.3 ANTIOKSIDAN ALAMI (FITOANTIOKSIDAN)

Tanaman menderita stres oksidatif yang disebabkan oleh radiasi UV seperti halnya hewan dan
manusia, tetapi tidak dapat melindungi diri mereka sendiri seperti yang dilakukan manusia dengan
cara eksogen dan oleh karena itu telah mengembangkan berbagai strategi dan molekul yang sangat
efektif untuk mempertahankan diri terhadap tekanan lingkungan. Misalnya, edelweiss atau lumut
kerak mengandung zat alami yang menyerap UVB dan bertindak sebagai “layar” [16, 17]. Tumbuhan
mengandung banyak antioksidan yang efektif dalam kombinasi ideal, yang disebut fitoantioksidan,
yang mampu melindungi sel mereka sendiri dan matriks ekstraseluler terhadap stres oksidatif yang
disebabkan oleh radiasi UV dan memberikan perlindungan kepada organisme lain pada konsumsi
atau aplikasi topikal.
Kebanyakan fitoantioksidan termasuk dalam polifenol atau terpen dan membentuk
famili dari banyak faktor dari banyak tanaman (Gambar 13.1). Polifenol disintesis oleh
tanaman, berpartisipasi dalam metabolismenya, dan berkontribusi pada pertahanannya
terhadap tekanan lingkungan. Polifenol ditemukan di akar, batang, bunga, dan daun semua
tanaman. Mereka berbeda di antara mereka sendiri dengan berat molekul, polaritas, dan
kelarutan. Polifenol mengandung gugus —OH yang terikat pada cincin benzena. Jumlah gugus
fenolik-OH dan posisi relatifnya merupakan penentu utama aktivitas antioksidan polifenol:
gugus fenolik ini memberikan efek antioksidan langsung, memodulasi fosforilasi protein, dan
menghambat peroksidasi lipid dengan bertindak sebagai pemecah rantai radikal peroksil.
Keluarga besar flavonoid, stilben, dan terpen (Tabel 13. 1) membantu mencegah stres oksidatif
seluler dan ekstraseluler dan memperlambat penuaan kulit; karotenoid melakukannya lebih
spesifik dengan pendinginan
oksigen tunggal (1HAI2). Lebih dari 4000 flavonoid yang berbeda telah diidentifikasi,
yang paling penting adalah antosianidin, flavanol, isoflavon, dan flavanon.
(Tabel 13.1).

Fitoantioksidan

Polifenol Terpen

Flavonoid Stilbens Karotenoid Minyak esensial

Katekin resveratrol Likopen carnosol

kuersetin -Karoten Asam karnosat

Gambar 13.1 Fitoantioksidan: sebuah keluarga. Fitoantioksidan mewakili keluarga besar

molekul: polifenol dan terpen dengan subkategori termasuk flavonoid, stilben,
karotenoid, dan minyak atsiri. Beberapa contoh fitoantioksidan yang dijelaskan dalam bab ini
ditampilkan dalam huruf miring (diadaptasi dari Ref. [50]).
244 BAB 13 ANTIOKSIDAN ALAMI DAN EFEKNYA TERHADAP KULIT

TABEL 13.1 Tiga Keluarga Fitoantioksidan dengan Sumber dan Efek Masing-masing

Flavonoid Anthocyanidins Anthocyans Hadir dalam blueberry, anggur basil; Ref. [51]
pemulung radikal bebas yang
kuat; menghambat lipid
peroksidasi
Flavanol Katekin Hadir dalam teh hijau, biji anggur, Ref. [52]
lengkeng; menghambat produksi
H2HAI2 diinduksi oleh UV; melindungi
sistem antioksidan endogen
Flavonol kuersetin Hadir dalam teh hijau; bluberi, Ref. [44]
biji anggur, apel; melindungi
sistem antioksidan di kulit
Isoflavon Genistein Hadir dalam gingko biloba, soja; Referensi [52, 53]
meningkatkan aktivitas
antioksidan endogen
Flavanon Silymarin Hadirkan inmilk thistle; menghambat lipid Ref. [54]
peroksidasi; mempromosikan
regenerasi sel
Stilbens resveratrol Hadir dalam anggur, beri; menghambat Ref. [54]
produksi H2HAI2 dan
peroksidasi lipid
Terpen Karotenoid Likopen Menetralkan 1HAI2; mengais lipid Ref. [55]
Radikal bebas; mengurangi lipid
peroksidasi

13.4 MENGUKUR KAPASITAS ANTIOKSIDAN

Fitoantioksidan terdiri dari ribuan molekul dengan sifat antioksidan yang berbeda dan saling
melengkapi, termasuk pemulung radikal bebas, elisitor mekanisme pertahanan antioksidan,
chelators besi, layar fisik cahaya dan UV, sistem perbaikan langsung atau tidak langsung. Salah
satu keunggulannya terletak pada gabungan sifat antioksidannya. Di sini, kita akan fokus pada
metode yang tersedia untuk menentukan kapasitas antioksidannya. Hal ini dapat dilakukan
dengan metode analisis atau dengan mengukur efek antioksidan, baik secara langsung
maupun tidak langsung, misalnya dengan menganalisis tingkat perlindungan dari radiasi UV
yang ditimbulkannya.

13.4.1 Kuantifikasi Radikal Bebas

Sebagai fitoantioksidan mengais radikal bebas, kuantifikasi radikal bebas dapat
digunakan untuk memantau sifat pelindungnya. Teknik tersebut didasarkan pada
deteksi elektron tidak berpasangan dengan spektroskopi. Pengukuran langsung
radikal bebas sulit dilakukan karena waktu paruhnya sangat pendek. .OH, misalnya,
memiliki waktu paruh 106 s dan jarak difusi 10 nm. Resonansi spin elektron
 13.4 MENGUKUR KAPASITAS ANTIOKSIDAN 245

(ESR), bagaimanapun, memungkinkan pengukuran langsung dari generasi radikal;

penggunaan suhu dingin dapat berkontribusi untuk pengukuran yang lebih efektif [18].
Deteksi langsung pembentukan radikal bebas pada kulit manusia dan hewan setelah
terpapar radiasi UV telah diperoleh dengan spektroskopi ESR suhu rendah (196 C)
in vitro. Pendekatan ini tidak digunakan secara ekstensif dalam pengukuran rutin karena
kompleksitas dan biayanya.

13.4.2 Kuantifikasi Penanda Kerusakan

Peran protektif fitoantioksidan juga dapat diukur dengan menggunakan berbagai teknik
kuantifikasi produk akhir spesifik yang dihasilkan dari interaksi radikal bebas dengan
molekul target seperti DNA, lipid, zat antara metabolit, atau molekul reporter. Setelah
kuantifikasi penanda kerusakan ditetapkan, tingkat perlindungan yang diberikan oleh
antioksidan dapat dinilai. Namun, pengujian tersebut memerlukan penggunaan alat
berat di laboratorium, serta teknisi ahli, pada dasarnya digunakan untuk pengukuran
tidak langsung penyerapan oral makanan kaya antioksidan, suplemen kaya antioksidan,
dan/atau paparan bahan kimia berbahaya, dan termasuk pengikut:

. 8-hidroksi-20-uji deoksiguanosin (8OHdG). Dalam hal DNA

stres oksidatif, guanosin lebih disukai teroksidasi dan digunakan sebagai
biomarker. 8OHdG dideteksi dengan metode standar seperti kromatografi
kinerja tinggi (HPLC). Misalnya, penyerapan dermal dari hidrokarbon
aromatik polisiklik yang mengandung minyak terbukti meningkatkan
produksi 8OHdG urin [19].
. Tes Komet. Pengujian ini didasarkan pada elektroforesis gel molekul DNA. DNA
utuh dan rusak menunjukkan sifat migrasi yang berbeda. DNA yang rusak
menampilkan jejak seperti "komet" dan semakin tinggi kerusakannya, semakin
panjang jejaknya. Modifikasi uji Comet telah dikembangkan sehingga kapasitas
perbaikan DNA juga dapat dipantau. Uji ini telah digunakan untuk memantau
berbagai kondisi yang memodifikasi DNA, termasuk faktor pelindung makanan
[20, 21]. Morley dkk. menggunakan uji Comet untuk menyelidiki efek fotoprotektif
teh hijau dengan membandingkan kerusakan DNA yang disebabkan oleh paparan
UV dalam sel manusia yang dikultur dengan ada atau tidak adanya teh hijau [22].

. Zat reaktif asam tiobarbiturat (TBARS) dan malonaldehid (MDA) digunakan

sebagai biomarker oksidasi lipid dan digunakan untuk mengukur peran
fotoprotektif ekstrak asam rosmarinic baik in vitro dan dalam hidup, setelah
asupan oral [23].
. Uji isoprostan dianggap sebagai salah satu metode yang paling dapat diandalkan
untuk evaluasi stres oksidatif dalam hidup [24]. Isoprostan adalah produk seperti
prostaglandin yang terbentukin vivo dari peroksidasi asam arakidonat [25]. Dosis
mereka telah berhasil digunakan untuk menganalisis kerusakan kulit akibat sinar
UVB fotooksidatifdalam hidup, dan korelasi linier antara paparan UVB dan
generasi 8-isoprostan ditemukan [26].
246 BAB 13 ANTIOKSIDAN ALAMI DAN EFEKNYA TERHADAP KULIT

13.4.3 Kuantifikasi Kapasitas Antioksidan

Fitoantioksidan mencakup beberapa prinsip aktif yang berbeda. Beberapa dari
prinsip aktif ini dapat dimurnikan dan diukur secara terpisah dengan metode
analitik standar. Namun, ketika mengukur efek dari senyawa yang diisolasi,
modulasi positif atau negatif dari aktivitasnya oleh lingkungan biokimia diabaikan.
Oleh karena itu, berbagai uji telah dikembangkan untuk mengukur aktivitas
antioksidan global, sehingga interaksi ini dapat diperhitungkan. Mereka dapat
diklasifikasikan menurut reaksi kimia yang terlibat, apakah transfer elektron
(pengujian berbasis ET) atau transfer atom hidrogen (HAT). Tes ini, seperti yang
dibahas di bawah, digunakan untuk kuantifikasi kapasitas antioksidan makanan
kaya antioksidan, ekstrak tumbuhan, dan cairan biologis.

13.4.3.1 Pengujian Berbasis ET Tes ET didasarkan pada kapasitas reduksi antioksidan

dengan melibatkan satu reaksi redoks. Metode tersebut termasuk yang berikut:

. 2,20-difenil-1,10-picrylhydrazyl (DPPH) assay, dimana penurunan absorbansi

DPPH sebanding dengan konsentrasi penangkap radikal bebas.

. Uji kapasitas antioksidan setara trolox (TEAC), di mana interaksi antara

antioksidan dan 2,20 azinobis(3-etil benzothiazoline6-sulfonicacid) garam
diamonium (ABTS) mengakibatkan perubahan warna ABTS (dari biru hijau
menjadi tidak berwarna).

13.4.3.2 Assay Berbasis HAT Pengujian berbasis HAT melibatkan generator radikal bebas
sintetis, probe molekuler yang dapat teroksidasi, dan antioksidan yang akan diuji.
Kapasitas antioksidan tergantung pada kapasitas mendonorkan atom hidrogen. Metode
tersebut termasuk kapasitas absorbansi radikal oksigen (ORAC) dan parameter
antioksidan penjebak radikal total (TRAP) assays. Uji ORAC mengukur penghambatan
antioksidan dari kerusakan radikal bebas pada probe fluoresen dari waktu ke waktu,
dibandingkan dengan Trolox, analog yang larut dalam air.Sebuah-tokoferol [27]. Ini
sangat cocok untuk mengukur antioksidan yang bekerja lambat dan cepat dalam
makanan dan ekstrak tumbuhan (Gambar 13.2) [28]. Uji TRAP didasarkan pada sifat-sifat
"azo-inisiator" yang menghasilkan produksi radikal peroksil yang dapat memulai reaksi
berantai peroksidasi [29, 30].

13.4.3.3 Pengujian Berbasis Elektrokimia Tes berbasis elektrokimia adalah

digunakan untuk menentukan kapasitas redoks senyawa tunggal atau kompleks. Teknik
voltametri siklik telah disesuaikan dengan kuantifikasi kapasitas reduksi keseluruhan
antioksidan dengan berat molekul rendah dalam cairan biologis yang berbeda [31]. Pengujian
tersebut tidak memerlukan penggunaan reagen dan tidak bergantung pada absorbansi.
Mereka melakukannya, bagaimanapun, tergantung pada interaksi yang terjadi antara sampel
yang diuji dan permukaan elektroda. Uji EDEL yang baru-baru ini dikembangkan (EDEL
Therapeutics, Swiss) didasarkan pada titrasi antioksidan ideal dan virtual
 13.4 MENGUKUR KAPASITAS ANTIOKSIDAN 247

Blueberry (1 cangkir)

Artichoke (1 cangkir, hati)

Stroberi (1 cangkir)

Apel (1 buah)

Alpukat (1 buah)

Kentang (1 kentang)

Jeruk (1 buah)

Anggur (1 cangkir)

Asparagus (1/2 cangkir)

Antioksidan total
Mangga (1 cangkir irisan) kapasitas/sajian (µmol
setara trolox)
Bayam (4 daun)

Pisang (1 buah)

Brokoli (1/2 cangkir)

Buah Kiwi (1 buah)

Selada (4 daun)

Jagung (1/2 cangkir)

Tomat (1 tomat)

Wortel (1 wortel)

Kembang kol (1/2 cangkir)

Mentimun (1/2 cangkir)

0 2000 4000 6000 8000 10000 12000

Gambar 13.2 Hasil ORAC dari berbagai buah dan sayuran. Nilai ORAC yang lebih tinggi
menunjukkan aktivitas antioksidan yang lebih kuat. Dari yang diuji di sini, blueberry adalah
antioksidan paling kuat dengan nilai ORAC 11.400 (diadaptasi dari Ref. [28]).

(menunggu nomor paten WO/2009/039945), yang dapat digunakan untuk mengukur berbagai
sampel (produk, kosmetik, cairan biologis, dan kulit) dalam waktu kurang dari 20 detik.
Prosedur ini tidak memerlukan peralatan yang mahal atau berat (unit elektrokimia, yang
digunakan dalam kombinasi dengan komputer, bersifat portabel) dan dapat diterapkan
berulang kali ke berbagai sampel biologis, memungkinkan perbandingan langsung. Sampel
dapat dianalisis di lokasi saat pengumpulan, tidak perlu reagen, dan strip sekali pakai
mencegah risiko kontaminasi silang. Metode ini memungkinkan untukin vitro pengukuran
aktivitas antioksidan dari formulasi kosmetik yang berbeda dan in vivo efek pada kulit. Untukin
vivo pengukuran, sumur yang dirancang khusus yang mengandung PBS diterapkan ke dahi
selama 5 menit, waktu yang diperlukan untuk mengekstrak antioksidan kulit di PBS.
Antioksidan yang dilepaskan dalam PBS kemudian dapat diukur dengan elektroda di
supernatan. Prosedur ini dapat digunakan sebelum dan sesudah penerapan formulasi
pelindung pada kulit (Gambar 13.3a dan b). Dampak dari perlakuan yang berbeda juga dapat
diukur, yaitu UV dan/atau lingkungan
248 BAB 13 ANTIOKSIDAN ALAMI DAN EFEKNYA PADA KULIT

(Sebuah)

1.596
Produk 3
1350 EDEL

Produk 2
935 EDEL

Saya/(µA)

↑ Produk 1
533 EDEL

Kontrol
30 EDEL

0,000
0,000 → E(V) 1.200

(b)

0,132
Produk 3
105 EDEL

Produk 2
83 EDEL

Saya/(µA) Produk 1
69 EDEL
↑

Kulit
37 EDEL
Kontrol
29 EDEL

0,000
0,000 → E(V) 1.200

Gambar 13.3 Aktivitas antioksidan dari tiga produk kosmetik invitrodaninvivo. (a) Hasil antioksidan in
vitro dari tiga produk kosmetik dalam stoples mereka dibandingkan dengan larutan kontrol. Tiga
formula kosmetik berbeda yang mengklaim efek antioksidan dianalisis secara elektrokimia dengan
Edelscan (Edeltherapeutics, Swiss). Hasil adalah tema dari pengukuran rangkap tiga. Kontrolnya
adalah larutan buffer fosfat (PBS). (b) Hasil antioksidanin vivo produk kosmetik yang sama pada kulit.
100sayaLof PBS digunakan untuk mengekstrak antioksidan kulit dalam 5 menit, menggunakan
sumur khusus, pada 314mm2 daerah. Dua miligram produk dioleskan ke kulit selama 10 menit.
Antioksidan kulit diukur dengan elektrokimia dengan Edelscan sebelum dan sesudah aplikasi tiga
formula kosmetik serupa. Hasil adalah rata-rata dari pengukuran rangkap tiga. Sebelum aplikasi
produk, kulit mengandung antioksidan endogen, dan setelah aplikasi produk, tingkat antioksidan
kulit meningkat.
 13.5 STUDI KLINIS ANTIOKSIDAN NUTRISI DAN TOPIKAL 249

1600
Tomat
1400 blueberry
Teh hijau
1200

1000
EDEI

800

600

400

200

0
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 1.6 1.8 2
Konsentrasi (%)

Gambar 13.4 Aktivitas antioksidan dari tiga ekstrak alami in vitro sebagai fungsi dari mereka
konsentrasi. Larutan stok 10% b/b ekstrak teh hijau, 5% b/b ekstrak blueberry, dan 0,5% b/b ekstrak
tomat masing-masing disiapkan dalam buffer fosfat, pH 7,4 (PBS). Setiap larutan selanjutnya
diencerkan 50%, 25%, dan 12,5%, masing-masing, ke dalam PBS dan kapasitas antioksidan diukur
segera dengan elektrokimia dengan Edeltherapeutics (Edeltherapeutics, Swiss). Hasil adalah rata-
rata dari pengukuran rangkap tiga. Teh hijau menyajikan aktivitas antioksidan yang lebih tinggi
daripada tomat atau blueberry.

paparan polusi. Gambar 13.4 menunjukkan hasil yang diperoleh dengan tiga bahan
alami yang berbeda: ekstrak teh hijau, tomat, dan blueberry, semuanya
mengandung fitoantioksidan yang kuat dan berfungsi sebagai referensi.
Kemampuan untuk mengukur sifat antioksidan fitoantioksidan dan efek
biologisnya akan meningkatkan pemilihan bahan aktif, serta proses pembuatan,
kontrol kualitas, dan pengemasan formulasi kosmetik alami, dan akan melengkapi
studi klinis tentang efek antioksidan terhadap menentukan strategi antioksidan
yang paling efektif.

13.5 STUDI KLINIS ANTIOKSIDAN NUTRISI DAN

TOPIKAL

13.5.1 Efek Suplemen Nutrisi pada Kulit

Efek antioksidan pada kanker dan penyakit kardiovaskular dijelaskan dengan baik. Tapi
bagaimana dengan efeknya pada kulit? Brosche dan Platt menunjukkan bahwa
konsumsi minyak borage meningkatkan fungsi sawar kulit pada individu lanjut usia,
diilustrasikan oleh penurunan transepidermal water loss (TEWL) [32]. Faktor nutrisi
spesifik mendukung hidrasi kulit, elastisitas, dan produksi sebum, dan merangsang sifat
fisiologis kulit [33-35]. Suplementasi dengan vitamin E, vitaminC, dan/atau karotenoid
terbukti memberikan perlindungan terhadap radiasi UV, meskipun faktor perlindungan
matahari relatif kecil dibandingkan dengan tabir surya topikal [34].
250 BAB 13 ANTIOKSIDAN ALAMI DAN EFEKNYA TERHADAP KULIT

13.5.2 Efek Suplementasi Antioksidan Makanan pada Kulit

Beberapa studi klinis dan laboratorium baru-baru ini menyelidiki efek pada
kulit suplemen antioksidan makanan. Di sini, kami melaporkan hasil studi ini, tiga
menyoroti kesimpulan mereka yang sangat menarik.

13.5.2.1 Studi tentang Suplementasi Epigallocatechin Gallate [36] Ini

Studi menyelidiki efek epigallocatechin gallate oral, antioksidan kuat dalam teh hijau,
pada dosis eritema minimal dan kerusakan kulit akibat sinar UV. Tikus betina tidak
berbulu diberi pakan normal dengan suplemen epigallocatechin gallate 1,5 ppm selama
8 minggu. Dosis eritema minimal ditentukan dan skor visual dan kehilangan air
transepidermal dinilai untuk mengevaluasi tingkat keparahan kerusakan kulit akibat
sinar UV. Pada minggu ke 8 penelitian, konsumsi epigallocatechin gallate meningkatkan
dosis eritema minimal secara signifikan. Perubahan keparahan sengatan matahari yang
diinduksi radiasi UV dalam fungsi penghalang epidermis juga dilemahkan oleh
suplementasi epigallocatechin gallate. Asupan epigallocatechin gallate secara teratur
memperkuat toleransi kulit dengan meningkatkan dosis eritema minimal
dan dengan demikian mencegah gangguan epidermal yang diinduksi UV fungsi penghalang dan kulit
kerusakan.

13.5.2.2 Studi Suplementasi dengan Sebuah Campuran dari Berbagai

Antioksidan [37] Tiga puluh sembilan sukarelawan dengan tipe sehat II kulit adalah
dibagi menjadi tiga kelompok (tidak¼13) dan ditambah untuk jangka waktu 12 minggu.
Kelompok 1 menerima campuran likopen (3mg/hari), lutein (3mg/hari),b-karoten (4,8 mg/
hari), Sebuah-tokoferol (10mg/hari), dan selenium (75mg/hari). Kelompok 2 dilengkapi
dengan campuran likopen (6mg/hari),b-karoten (4,8 mg/hari),
Sebuah-tokoferol (10mg/hari), dan selenium (75mg/hari). Kelompok 3 adalah kelompok plasebo.
Kepadatan dan ketebalan kulit ditentukan dengan pengukuran ultrasound. Kekasaran dan
penskalaan kulit berkurang dengan suplementasi dengan mikronutrien antioksidan. Pada kelompok
plasebo, tidak ada perubahan yang ditemukan pada salah satu parameter.

13.5.2.3 Belajar terus b-Suplementasi Karoten [38] Enam belas sehat

wanita diberi dosis b-karoten (30mg/hari) selama 10 minggu. Setelah masa suplementasi
10 minggu, suplementasi dilanjutkan dengan paparan sinar matahari alami selama 13
hari. Selama periode ini, perkembangan eritema pada subjek yang telah mengambilb-
karoten jauh lebih sedikit dibandingkan pada kelompok plasebo. Suplementasi denganb-
karoten (30mg/hari) sebelum dan selama paparan sinar matahari memberikan
perlindungan terhadap sengatan matahari.
Studi-studi ini menunjukkan bahwa suplementasi antioksidan oral dapat melindungi
terhadap kerusakan kulit akibat sinar UV dan meningkatkan kualitas kulit. Bagaimana aplikasi
topikal kosmetik kaya antioksidan dibandingkan dengan suplementasi nutrisi?

13.5.3 Efek Antioksidan Topikal pada Kulit

Teh hijau, rosemary, anggur, dan tomat adalah empat contoh klasik tanaman yang paling banyak
dipelajari untuk aktivitas antioksidan langsungnya pada kulit dan sel-sel kulit. in vivo dan
in vitro dan menjadi referensi untuk buah dan sayuran lainnya.
 13.6 DARI PELAT KE TOPLES KE STRATUM CORNEUM 251

13.5.3.1 Teh Hijau Teh hijau mengandung empat flavonoid utama: epicatechin,
epicatechin gallate, epigallocatechin, dan epigallocatechin-3-gallate. Ini
molekul memiliki kemampuan untuk mengais ROS: O 2 . , .OH, H2HAI2, dan 1HAI2. Katiya
dkk. telah menunjukkan bahwa epigallocatechin dioleskan pada tikus yang terpapar UVB
menghambat produksi H2HAI2 baik di dermis maupun di epidermis [39].

13.5.3.2 Rosemary Rosemary mengandung berbagai antioksidan, khususnya

diterpen fenolik: carnosol dan asam carnosic mewakili lebih dari 90% sifat
antioksidan ekstrak rosemary [40]. Molekul lipofilik ini mengais radikal bebas lipid,
sehingga memungkinkan pengurangan peroksidasi lipid dan menghambat
kerusakan oksidatif pada lipid permukaan kulit [41]. Pretreatment fibroblas
manusia dengan asam carnosic menghasilkan penekanan elevasi RNA messenger
metaloproteinase-1 yang disebabkan oleh iradiasi UVA. Asam karnosat juga
memiliki potensi fotoprotektif [42].

13.5.3.3 Biji Anggur Biji anggur adalah sumber utama resveratrol dan quercetin.
Resveratrol stilben menghambat peroksidasi lipid yang diinduksi oleh UVB dan secara
signifikan mengurangi ketebalan kulit yang diinduksi UVB dan edema pada tikus yang
tidak berbulu [43]. The iron chelator flavonoid quercetin mempertahankan dan
melindungi aktivitas glutathione peroxidase, catalase, dan superoxide dismutase setelah
terpapar radiasi UV [44].

13.5.3.4 Tomat Tomat kaya akan likopen, antioksidan kuat yang dipelajari secara luas
dan karotenoid antikarsinogenik dengan kemampuan mereduksi yang kuat dan
karotenoid paling efektif dalam menangkap 1HAI2. Lycopene mengais radikal lipid, mengurangi
peroksidasi lipid, dan mencegah eritema yang disebabkan oleh radiasi UV pada
kulit [45].

13.6 DARI PELAT KE TOPLES KE STRATUM

CORNEUM

Karena asupan antioksidan makanan mencegah efek penuaan pada berbagai organ termasuk
kulit, orang dapat mempertanyakan mengapa sangat penting untuk menerapkan
fitoantioksidan pada lapisan atas kulit, stratum korneum. Faktanya adalah bahwa produksi
lokal ROS setelah terpapar radiasi UV dan/atau bahaya lingkungan lainnya memerlukan
aplikasi antioksidan topikal untuk mencegah kerusakan kulit lokal yang diinduksi ROS secara
optimal.

13.6.1 Stratum Korneum: Struktur dan Fungsi

Stratum korneum merupakan lapisan terluar dari kulit. Ini 10–20sayam tebal, meskipun
ketebalan ini bervariasi dari beberapa mikrometer hingga milimeter tergantung pada bagian
tubuh. Ini hanya mengandung 15% air (sedangkan seluruh tubuh mengandung 65% dan
jantung 76% air) dan terdiri dari dua komponen struktural yang berbeda: korneosit dan lipid
antar sel. Elias mengusulkan "model bata dan mortir," yang menurutnya
252 BAB 13 ANTIOKSIDAN ALAMI DAN EFEKNYA TERHADAP KULIT

stratum korneum terdiri dari sel-sel datar (batu bata) yang dikelilingi oleh matriks lipid
(mortar) [46].
Stratum korneum hanya mewakili 10% dari keseluruhan kulit tetapi
berkontribusi pada lebih dari 80% fungsi sawar kulit; itu mencegah hilangnya air
dari epidermis dan memberikan perlindungan dari lingkungan luar melalui
antioksidannya.
Stratum korneum, karena lokasinya yang kritis pada antarmuka antara tubuh dan
lingkungan, terus-menerus terpapar oksidan, termasuk radiasi UV, oksidan kimia,
polutan udara, dan mikroorganisme. Stratum korneum adalah jaringan paradoks yang
terdiri dari sel-sel yang tidak membelah, tetap merupakan jaringan yang aktif secara
metabolik, mampu melindungi dirinya sendiri, untuk berkomunikasi, dan untuk bertukar
[47]. Stratum korneum, mirip dengan jaringan hidup manusia lainnya, mengandung
sejumlah enzim antioksidan endogen, seperti katalase, superoksida dismutase, dan
glutathione peroksidase [48].

13.6.2 Stratum Korneum sebagai Target Fitoantioksidan

Topikal
Stratum korneum adalah target utama bagi ahli kosmetik untuk menyelidiki
penetrasi dan kemanjuran produk kosmetik. Banyak sekaliin vitro penelitian telah
dilakukan untuk menunjukkan penetrasi bahan kosmetik dan efeknya pada
struktur dan metabolisme sel-sel kulit. Namun, belum jelas apakah ada dan jika
demikian sejauh manain vivo penetrasi senyawa dari formulasi kosmetik. Selain itu,
kurangnya penetrasi bahan aktif produk bisa jadi bukan merupakan karakteristik
negatif. Memang bahan-bahan tersebut masih mampu melindungi
stratumcorneum terhadap oksidatif dan kerusakan lingkungan lainnya.

Stratum korneum membutuhkan antioksidan untuk melindungi dirinya dari lingkungan.

Sebuah-Tokoferol di satu sisi terakumulasi di bagian bawah stratum korneum, memberikan
perlindungan terhadap peroksidasi lipid dan memungkinkan stabilisasi bilayer lipid.
Fitoantioksidan di sisi lain menetralkan oksidasi stratum korneum yang diinduksi UV dan
memberikan perlindungan dari lingkungan. Penggunaan fitoantioksidan dalam produk
kosmetik dapat merangsang stratum korneum untuk beregenerasi, untuk melindungi dirinya
sendiri — dan dengan demikian epidermis dan dermis yang mendasarinya — dari efek
berbahaya UV dan racun lingkungan lainnya, dan menyehatkan kulit dengan cara yang sama
seperti makan buah dan sayuran memelihara seluruh tubuh: "dari piring ke toples."

13.7 GANDA PHYTOANTIOXIDANTS DALAM KOSMETIK: STUDI

KASUS

Apa hubungan antara semua data ini dan dunia kosmetik saat ini dan bagaimana
sains memengaruhi formulasi? Untuk mengatasi masalah ini, contoh penggunaan
formulasi kosmetik dan efek fitoantioksidan akan dibahas.
 13.8 KESIMPULAN DAN PERSPEKTIF 253

Pada tahun 1999, kami merumuskan, menurut standar kualitas Swiss (SwissCos
[49]), serum Diode1 dan Diode2 untuk wanita (Alchimie Forever, Jenewa, Swiss). Serum
ini mengandung molekul antioksidan konsentrasi tinggi, memiliki sifat antipenuaan, dan
berkontribusi pada memudar dan pencegahan bintik-bintik coklat. Serum ini disajikan
dalam dua botol: botol pertama, Diode1, berisi air, gum selulosa, klorfenesin dan
metilparaben, dan 5% ekstrak rosemary dari Maroko (disediakan oleh pemasok Swiss
Cosmetochem), yang mengandung banyak molekul antioksidan seperti fenolat terpen,
asam carnosic, dan carnosol yang memiliki kemampuan untuk mengais radikal bebas
lipid, mengurangi peroksidasi lipid, dan memiliki sifat antiinflamasi (Bagian 13.5.3.2) [41];
botol kedua, yang disebut Diode2, berisi air, gum selulosa, klorfenesin, dan
methylparaben, dan 10% ekstrak teh hijau dari China (disediakan oleh pemasok Swiss
Botanica). Polifenol antioksidan utama dalam teh hijau adalah katekin, epikatekin, dan
turunannya (Bagian 13.5.3.1). Sifat antioksidan dan penyembuhan teh hijau telah
dipelajari secara rinci di kulit [39]. Pengukuran yang dilakukan oleh EDEL Therapeutics
digunakan untuk mendokumentasikanin vitro dan in vivo sifat antioksidan dari serum
Diode1 andDiode2. Hasilnya ditunjukkan pada Gambar 13.5a dan b. Gambar ini
menunjukkan bahwa kedua serum memberikan aktivitas antioksidan yang terukur baik
di dalam botol maupun setelah aplikasi pada kulit, menunjukkan aktivitas antioksidan
yang persisten.dalam hidup.
Jenis pengukuran ini harus digeneralisasi untuk mengkonfirmasi efek antioksidan yang diklaim dari
produk perawatan kulit dan memungkinkan perbandingan di antara mereka.

13.8 KESIMPULAN DAN PERSPEKTIF

Dalam bab ini, kami membahas sejumlah topik termasuk mengapa antioksidan
menjadi bahan utama dalam kosmetik antipenuaan dan mengapa antioksidan
alami lebih disukai daripada sintetis oleh sejumlah merek. Kami mendefinisikan
stres oksidatif sebagai ketidakseimbangan antara ROS dan antioksidan. Di kulit,
kelebihan radikal bebas yang diinduksi oleh UV menyebabkan kerusakan pada
makromolekul seluler dan mengganggu kestabilan membran keratinosit, yang
menyebabkan penuaan dini. Tubuh kita mempertahankan diri dari fenomena ini
melalui antioksidan endogen dan eksogen. Antioksidan alami memainkan peran
kunci dalam strategi ini karena tanaman telah mengembangkan berbagai strategi
untuk mengatasi gangguan lingkungan. Mereka menghasilkan molekul yang
sangat efektif untuk mempertahankan diri terhadap tekanan lingkungan.

Pemikiran saat ini adalah bahwa kombinasi dari fitoantioksidan yang berbeda akan
menjadi strategi pertahanan terbaik melawan ROS. Kami juga merinci pendekatan terbaik
untuk mengukur antioksidan dan efeknya, yang akan mengarah pada formulasi kosmetik yang
lebih baik untuk pencegahan penuaan kulit dini.
Sehubungan dengan aplikasi topikal fitoantioksidan, kami menyimpulkan bahwa
stratum korneum adalah target utama untuk formulator kosmetik, karena memerlukan
kontribusi antioksidan untuk melindungi diri dari lingkungan. Fitoantioksidan
254 BAB 13 ANTIOKSIDAN ALAMI DAN EFEKNYA PADA KULIT

(Sebuah)

1200

1000

800
EDEL

600

400

200

0
Kontrol Dioda 1 Dioda 2

(b)

46,473 Dioda2: 41 EDEL

Dioda1: 40 EDEL

Di sebuah)

↑
Kulit: 26 EDEL

0,002
0,000 E(V) 1.200
↑

Gambar 13.5 Aktivitas antioksidan Diode1 dan Diode2 in vitro dan dalam hidup. (Sebuah)
Hasil antioksidan in vitro dari Diode1 rosemary dan Diode2 serum teh hijau. Serum teh hijau
menampilkan aktivitas antioksidan yang lebih tinggi daripada serum rosemary. (b) Hasil
antioksidanin vivo serum teh hijau Diode1 rosemary dan Diode2 diukur langsung di dahi.
Aktivitas antioksidan rosemary dan teh hijau tetap ada setelah dioleskan pada kulit dengan
aktivitas teh hijau yang lebih tinggi lagi.
 REFERENSI 255

menetralkan oksidasi stratum korneum yang diinduksi UV, memberikan perlindungan dari lingkungan, dan
dalam produk kosmetik dapat merangsang stratum korneum untuk beregenerasi. Oleh karena itu,
fitoantioksidan harus digunakan baik secara topikal maupun oral dan harus diintegrasikan ke dalam strategi
antipenuaan apa pun. Penggunaan fitoantioksidan dalam produk kosmetik memungkinkan seseorang untuk
menyehatkan kulit dan mengisinya dengan antioksidan dengan cara yang sama seperti kita memberi nutrisi
pada tubuh kita dengan makan buah dan sayuran.
Studi lebih lanjut di sepanjang garis ini, khususnya pada kapasitas antioksidan formula kosmetik
cosmetic dalam hidup, akan membuka jalan untuk kesehatan alami, kesejahteraan, dan kulit awet muda
berbasis sains yang optimal.

REFERENSI

1. Halliwell B, Gutteridge JMC. Radikal Bebas dalam Biologi dan Kedokteran. edisi ke-4 New York: Pers
Universitas Oxford, 2007.
2. Brown JR, Goldblatt D, Buddle J, MortonL, Thrasher AJ. Berkurangnya produksi mediator anti-inflamasi
selama apoptosis neutrofil dan fagositosis makrofag pada penyakit granulomatosa kronis (CGD).J.
Leukok. Biol.2003;73(5):591–599.
3. Poderoso JJ. Pembentukan peroksinitrit dalam fisiologi terapan oksida nitrat mitokondria.
Lengkungan. Biokimia. Biofis.2009;484(2):214–220.
4. Zaw KK, Yokoyama Y, Abe M, Ishikawa O. Katalase mengembalikan ekspresi mRNA yang diubah dari
kolagen dan matriks metaloproteinase oleh fibroblas dermal yang terpapar spesies oksigen reaktif. Eur.
J. Dermatol. 2006;16(4):375–379.
5. Pacher P, Beckman JS, Liaudet L. Oksida nitrat dan peroksinitrit dalam kesehatan dan penyakit. Fisiol. Putaran.
2007;87(1):315–424.
6. Nishigori C, Hattori Y, Toyokuni S. Peran spesies oksigen reaktif dalam karsinogenesis kulit. Antioksidan.
Redoks. Sinyal.2004;6(3):561–570.
7. Reelfs O, Tyrrell RM, Pourzand C. Ultraviolet Pelepasan besi langsung yang diinduksi radiasi adalah modulator
kunci dari aktivasi NF-kappaB pada fibroblas kulit manusia. J. Berinvestasi. Dermatologi.2004;122
(6):1440–1447.
8. Mariethoz E, RichardMJ, Polla LL, Kreps SE, Dall'Ava J, Polla BS. Ketidakseimbangan oksidan/antioksidan pada
penuaan kulit: faktor lingkungan dan adaptif.Pdt. Lingkungan. Kesehatan1998;13(3):147–168.
9. Scharffetter-KochanekK, BrenneisenP,Wenk J, HerrmannG,MaW, Kuhr L,Meewes C,WlaschekM. Fotoaging
kulit dari fenotipe ke mekanisme.Eks. Gerontol.2000;35:307–316.
10. Erenel G, Erbas D, Aricioglu A. Radikal bebas dan sistem antioksidan. ibu. Med. Pol.1993;25
(1):37–43.
11. Chaudiere J, Ferrari-Iliou R. Antioksidan intraseluler: dari mekanisme kimia hingga biokimia.
Kimia Makanan. racun.1999;37(9–10):949–962.
12. Vile GF, Basu-Modak S, Waltner C, Tyrrell RM. Heme oxygenase 1 memediasi respons adaptif terhadap stres
oksidatif pada fibroblas kulit manusia.Prok. Natal akad. Sci. Amerika Serikat1994;91:2607–2610.
13. Dernbach E, Urbich C, Brandes EP, Hofmann WK, Zeiher AM, Dimmeler S. Gen terkait stres antioksidan
dalam sel progenitor yang bersirkulasi: bukti peningkatan resistensi terhadap stres oksidatif. Darah
2004;104(12):3591–3597.
14. Renaud S, de Lorgeril M. Anggur, alkohol, trombosit, dan paradoks Prancis untuk penyakit jantung koroner.
Lanset 1992;339(8808)::1523–1526.
15. Frankel EN, Waterhouse AL, Teissedre PL. Fitokimia fenolik utama dalam anggur California terpilih dan
aktivitas antioksidannya dalam menghambat oksidasi lipoprotein densitas rendah manusia.J. Pertanian.
Kimia Makanan.1995;43:890–894.
16. Vigneron JP, Rassart M, Vertesy Z, Kertesz K, Sarrazin M, Biro LP, Ertz D, Lousse V. Struktur optik dan
fungsi rambut filamen putih menutupi bract edelweiss. fisik. Pdt. E: Stat. Nonlin. Fisik Materi Lunak.
2007;71:011906.
256 BAB 13 ANTIOKSIDAN ALAMI DAN EFEKNYA TERHADAP KULIT

17. Rancan F, Rosan S, Boehm K, Fernandez E, Hidalgo ME, Quihot W, Rubio C, Boehm F, Piazena H, Oltmanns
U. Perlindungan terhadap iradiasi UVB oleh filter alami yang diekstraksi dari lumut.
J. Fotokimia. fotobiol. B2002;68(2–3):133–139.
18. KopaniM, Celec P, Danisovic L, Michalka P, BiroC. Stres oksidatif dan resonansi spin elektron.klinik Chim.
Akta2006;364(1–2):61–66.
19. NilssonR, Nordlinder R,MoenBE, OvreboS, BleieK, SkorveAH, HollundBE, TagessonC. Peningkatan ekskresi
urin 8-hydroxydeoxyguanosine pada personel ruang mesin yang terpapar hidrokarbon aromatik
polisiklik.Menempati. Mengepung. Med.2004;61(8):692–696.
20. Hoelzl C, Knasmuller S, Misik M, Collins A, Dusinska M, Nersesyan A. Penggunaan tes elektroforesis gel sel
tunggal untuk mendeteksi efek pelindung DNA dari faktor makanan pada manusia: hasil dan tren
terbaru. mutasi. Res.2009;681:68–79.
21. Valverde M, Rojas E. Biomonitoring lingkungan dan pekerjaan menggunakan uji Comet. mutasi. Res.
2009;681:93–109.
22. Morley N, Clifford T, Salter L, Campbell S, Gould D, Curnow A. Polifenol teh hijau
( )-epigallocatechin gallate dan teh hijau dapat melindungi DNA seluler manusia dari kerusakan akibat
sinar ultraviolet dan radiasi yang terlihat. Fotodermatol. Fotoimunol. difoto.2005;21(1):15–22.
23. Sanchez-CampilloM, Gabaldon JA, Castillo J, Benvente-Garcia O, Del BanoMJ, Alcaraz M, Vicente
V, Alvarez N, Lozano JA. Asam Rosmarinic, agen foto-pelindung terhadap UV dan radiasi pengion lainnya.
Kimia Makanan. racun.2009;47(2):386–382.
24. Montuschi P, Barnes P, Roberts LJ, II. Wawasan tentang stres oksidatif: isoprostan.Curr.Med. Kimia
2007;14(6):703–717.
25. MilneGL, Musiek ES, Morrow JD. F2-isoprostan sebagai penanda stres oksidatif oxidativedalam hidup: gambaran.
Biomarker 2005;10:10S–23S.
26. Schneider LA, Bloch W, Kopp K, Hainzl A, Rettberg P, Wlaschek M, Horneck G, ScharffetterKochanek K. 8-
Isoprostane adalah biomarker terkait dosis untuk kerusakan photo-oxidative ultraviolet (UV) B
dalam hidup: studi percontohan dengan dosimetri UV pribadi. sdr. J. Dermatol.2006;154(6):1147–1154.
27. Cao G, Alessio HM, Cutler RG. Uji kapasitas absorbansi radikal oksigen untuk antioksidan.Radikal Bebas.
Biol. Med.1993;14(3):303–311.
28. Wu X, Beecher GR, Holden JM, Haytowitz DB, Gebhardt SE, Sebelumnya RL. Kapasitas antioksidan lipofilik
dan hidrofilik dari makanan umum di Amerika Serikat.J. Pertanian. Kimia Makanan.
2004;52:4026–4037.
29. Wayner DD, Burton GW, Ingold KU, Locke S. Pengukuran kuantitatif dari total, kemampuan antioksidan
penangkap radikal peroksil plasma darah manusia dengan peroksidasi terkontrol. Kontribusi penting
dibuat oleh protein plasma.FEBS Lett. 1985;187(1):33–37.
30. Ghiselli A, Serafini M, Natella F, Scaccini C. Total kapasitas antioksidan sebagai alat untuk menilai status redoks:
tampilan kritis dan data eksperimen. Radikal Bebas. Biol. Med.2000;29(11):1106-1114.
31. Kohen R, Nyska A. Oksidasi sistem biologis: fenomena stres oksidatif, antioksidan, reaksi redoks, dan
metode untuk kuantifikasinya. racun. Patol.2002;30(6):620–650.
32. Brosche T, Platt D. Pengaruh konsumsi minyak borage pada metabolisme asam lemak, kehilangan air
transepidermal dan parameter kulit pada orang tua. Lengkungan. Gerontol. Geriatr.2000;30(2):139–150.
33. Rampoldi R, Macedo N, Alallon W, Sanguimetti J. Vitamin E topikal dan radiasi ultraviolet pada kulit
manusia. Med. Cutan. Ibero Lat. Saya.1990;18(4):269–272.
34. Boelsma E, Hendriks HFJ, Roza L. Nutrisi perawatan kulit: efek kesehatan dari mikronutrien dan asam
lemak. Saya. J.klin. nutrisi2001;73:853–864.
35. Yamamoto Y. Peran spesies oksigen aktif dan antioksidan dalam photoaging. J. Dermatol. Sci.
2001;27:1S–4S.
36. Jeon HY, Kim JK, Kim WG, Lee SJ. Efek suplementasi epigallocatechin gallate oral pada dosis eritema
minimal dan kerusakan kulit yang diinduksi UV.Farmakol Kulit. Fisiol.2009;22(3):137–141.
37. HeinrichU, Tronnier H, StahlW, BejotM, Maurette JM. Suplemen antioksidan meningkatkan parameter yang
berkaitan dengan struktur kulit pada manusia.Farmakol Kulit. Fisiol.2006;19(4):224–231.
38. Biesalski HK, Hemmes C, Hopfenmuller W, Schmid C, Gollnick HP. Efek paparan sinar matahari yang
terkontrol pada plasma dan kadar beta-karoten di kulit.Radikal Bebas. Res.1996;24(3):215–224.
39. Katiyar SK, Challa A, McCormick TS, Cooper KD, Mukhtar H. Pencegahan imunosupresi yang diinduksi UVB
pada tikus oleh polifenol teh hijau ( )-epigallocatechin-3-gallate
 REFERENSI 257

mungkin terkait dengan perubahan dalam produksi IL-10 dan IL-12. Karsinogenesis 1999;20(11): 2117–
2124.
40. Aruoma OI, Halliwell B, Aeschbach R, Loligers J. Sifat antioksidan dan pro-oksidan dari konstituen
rosemary aktif: carnosol dan asam carnosic. Xenobiotika 1992;22(2):257–268.
41. Calabrese V, Scapagnini G, Catalano C, Dinotta F, Geraci D, Morganti P. Studi biokimia antioksidan alami
yang diisolasi dari rosemary dan penerapannya dalam dermatologi kosmetik. Int. J. Jaringan Bereaksi.
2000;22(1):5–13.
42. Offord EA, Gautier JC, Avanti O, Scaletta C, Runge F, Kr€amer K, Applegate LA. Potensi fotoprotektif
likopen, beta-karoten, vitamin E, vitamin C dan asam karnosat dalam fibroblas kulit manusia yang
disinari UVA.Radikal Bebas. Biol. Med.2002;32(12):1293-1303.
43. Afaq F, Adhami VM, Ahmad N. Pencegahan kerusakan jangka pendek yang dimediasi radiasi ultraviolet B oleh
resveratrol pada tikus tidak berbulu SKH-1. racun. aplikasi farmasi.2003;186(1):28–37.
44. Kahraman A, Inal ME. Efek perlindungan quercetin pada ultraviolet A stres oksidatif yang diinduksi cahaya
dalam darah tikus.J. Aplikasi racun.2002;22(5):303–309.
45. Stahl W, Heinrich U, Aust O, Tronnier H, Sies H. Produk kaya likopen dan fotoproteksi diet.
fotokimia. fotobiol. Sci.2006;5:238–242.
46. Elias PM. Lipid epidermis, fungsi penghalang, dan deskuamasi.J. Berinvestasi. Dermatologi.
1983;80:44S–49S.
47. Pouillot A, DayanN, PollaAS, Polla LL, PollaBS. Stratumcorneum: sebuah paradoks ganda.J. Kosmetik.
Dermatologi.2008;7:143–148.
48. Thiele JJ. Target oksidatif di stratum korneum: dasar baru untuk strategi antioksidan.Farmakol Kulit.
aplikasi Fisiol Kulit.2001;14:87S–91S.
49. http://www.swisscos-guarantee.ch/guarantee.html.
50. Liu RH. Potensi sinergi fitokimia dalam pencegahan kanker: mekanisme aksi.J. Nutr.
2004;134:3479S- 3485S.
51. Nakajima JI, Tanaka I, Seo S, YamazakiM, SaitoK. Profil LC/PDA/ESI-MS dan aktivitas pembersihan radikal
antosianin dalam berbagai buah beri.J. Bioma. Bioteknologi.2004;5:241–247.
52. Afaq F, Mukhtar H. Antioksidan botani dalam pencegahan fotokarsinogenesis dan fotoaging.
Eks. Dermatologi.2006;15:678–684.
53. RiganoD, CardileV, FormisanoC,MaldiniMT, Piacente S, Bevilacqua J, RussoA, Senatore F. Genista sessilifolia DC dan
Genista tinctoria L. menghambat sinar UV dan kerusakan DNA yang diinduksi oksida nitrat dan pertumbuhan sel
melanoma manusia. Kimia Biol. Berinteraksi.2009;180(2):211–219.
54. Baliga MS, Katiyar SK. Kemoprevensi fotokarsinogenesis oleh tumbuhan diet terpilih.
fotokimia. fotobiol. Sci.2006;5:243–253.
55. Andreassi M, Stanghellini E, Ettorre A, Di Stefano A, Andreassi L. Aktivitas antioksidan likopen yang
dioleskan. J.Eur. akad. Dermatologi. Venerol.2004;18(1):52–55.