REVIEWS

https://doi.org/10.1038/ s41580-020-0234-z

1Institut Kanker Stanford,

Fakultas Kedokteran
Universitas Stanford, Stanford,
CA, AS.
2Departemen Kedokteran,
Fakultas Kedokteran
Universitas Stanford, Stanford,
CA, AS.
3Departemen Biokimia, Fakultas
Kedokteran Universitas
Stanford, Stanford, CA, AS.
Ror
surel:
sartandi@stanford.edu
 manusia di homeostasis dan
penyakit
P  Ror
Caitlin M. Roake1,2,3 dan Steven E. Artandi
e
1,2,3

Abstrak | Telomerase adalah kompleks ribonukleoprotein, inti katalitiknya meliputi

r telomerase reverse transcriptase (TERT) dan non-coding human telomerase RNA (hTR), yang
berfungsi sebagai template untuk penambahan pengulangan telomer ke ujung kromosom. Ekspresi

a
telomerase pada manusia dibatasi pada jenis sel tertentu, dan tingkat telomerase dikontrol dengan
ketat dalam kondisi normal. Peningkatan tingkat telomerase ditemukan di sebagian besar kanker
pada manusia, dan kami baru-baru ini mulai memahami mekanisme yang digunakan sel kanker untuk
t meningkatkan aktivitas telomerase. Sebaliknya, mutasi germline pada gen yang relevan dengan
telomerase yang menurunkan fungsi telomerase menyebabkan berbagai kelainan genetik, termasuk
u diskeratosis congenita, fibrosis paru idiopatik, dan kegagalan sumsum tulang. Dalam Review ini, kami
membahas regulasi transkripsi TERT manusia, pemrosesan hTR, perakitan kompleks telomerase,
r lokalisasi seluler telomerase dan perekrutannya ke telomer, dan pengaturan aktivitas telomerase.
Kami juga membahas relevansi penyakit dari masing-masing langkah biogenesis telomerase ini.
a Telomer terdiri dari urutan berulang di ujungnya Dalam metazoa, dan khususnya pada manusia, ekspresi

n dari kromosom yang menjaga integritas linier

kromosom. Ujung kromosom ini harus jauh
terlihat dari jenis DNA linier lainnya, seperti bro-
ken DNA berakhir, yang ditakdirkan untuk diperbaiki.
t Telomerik
ion telomerase menjadi terbatas pada jenis sel tertentu
atau status sel. Ekspresi telomerase manusia paling tinggi
di germline dan di kompartemen sel progenitor,
tetapi terbatas pada banyak tipe sel yang dibedakan. Ini
pola terbatas mungkin telah berkembang sebagian untuk

e
urutan secara khusus terikat oleh satu set protein itu mengurangi
bersama-sama membentuk kompleks penampungan (Ara. 1a). risiko kanker, seperti yang ditunjukkan oleh hampir semua
Rak- tumor manusia

l terin kompleks berfungsi untuk memecahkan masalah proteksi

akhir
lem, dengan mencegah respons perbaikan DNA yang
peningkatan ekspresi telomerase. Mutasi germline

o dihasilkan
DNA bebas berakhir. Tanggapan ini termasuk aktivasi
dalam gen jalur telomerase yang menurunkan telomerase
Fungsi gagal sel punca menyebabkan penyakit diskeratosis

m Respon kerusakan DNA dan perbaikan secara non-homolog

penggabungan akhir, penggabungan akhir non-homolog
alternatif
congenita, anemia aplastik dan paru idiopatik

fibros. Penemuan genetik ini menunjukkan bahwa sel harus

e atau rekombinasi homolog1,2. Untuk melayani fungsi ini-

mempertahankan tingkat telomerase yang optimal, yang
cukup
fisien untuk mendukung homeostasis jaringan tetapi cukup
r tions, subunit protein dari shelterin merekrut banyak
kofaktor protein lainnya dan, dalam beberapa tahun terakhir,
rendah untuk

a
massa menurunkan risiko kanker. Selain kontrol yang ketat
pendekatan berbasis spektrometri telah memperluas lahan- tingkat enzim, telomerase diatur di beberapa
scape protein terkait shelterin3. Kritik kedua langkah tambahan.

s Masalah di ujung kromosom adalah pemendekan telomer,

yang terjadi karena DNA polimerase yang mensintesis
Dalam Review ini, kami membahas informasi terbaru
tentang bagaimana kompleks telomerase manusia diatur
terlambat dalam sel progenitor normal dan dalam sel kanker
e ukuran DNA dalam arah 5'-3 'mereplikasi tidak lengkap dan
untai tertinggal, sehingga menyebabkan pemendekan bertahap bagaimana proses ini diubah dalam penyakit. Transkripsi
urutan telomer dari waktu ke waktu. Masalah replikasi akhir ini dari gen TERT adalah kunci dalam regulasi telomerase
ekspresi dan menentukan tipe sel mana yang dapat
lem dipecahkan dengan evolusi telomerase, yaitu a mengekspresikan
ribonukleoprotein (RNP) dengan inti katalitik enzim telomerase. Pemrosesan ujung 3 hTR adalah
terdiri dari telomerase reverse transcriptase (TERT) dibutuhkan untuk membuat molekul hTR dewasa dan sub-
dicela dengan regulasi kuantitatif yang menentukan kondisi-
dan RNA tanpa kode, komponen RNA telomerase mapan
(TERC; selanjutnya disebut sebagai human telomerase RNA tingkat telomerase. Telomerase adalah multisubunit besar
(hTR)), yang berfungsi sebagai template untuk penambahan RNP, yang mencakup beberapa komponen protein dengan
telomerik berulang ke ujung kromosom. peran berbeda dalam fungsi telomerase. Majelis ini
Pada eukariota sel tunggal, telomerase diekspresikan sebagai kompleks membutuhkan aktivitas banyak pro-
secara stitutif untuk memungkinkan pembelahan dan
kelangsungan hidup sel jangka panjang. teins dan pergerakan kompleks yang berkembang melalui

Ulasan Alam | Biologi Sel Molekuler

 Pemelih m
Tinjau s araan e
telomer n
yang e
b tergang n
T gu t
C
A mendas u
D
Sebua B ari k
i
h 1 NH s serangk a
TCAB1 G
P2
Shelterin

A- k aian n
NOP e fenotipe
Rkot
10 r D
1a hTR jaringan j
CR4 / 5 Nk i o
HH n
G yang e
kotak m
P. A ditandai n
TAKSI

L ai
2 5 R
o n dengan
1 i
b H penipis
u / s
an sel
s A
H dan
C
A disfung s
N
O
/
TERT si organe
A
D
Katalis
Ara. 1 | Telomerase tahap l
C NHP2 inti
i berinteraksi dengan
RT akhir.
A
s Studi d
CTE

shelterin di telomer.
Substrat

3 k
AC Sebuah | Telomerase tentang i
A e SE
r adalah Sebuah
PU
keadaan
D SE
i i LU
ribonukleoprotein penyaki m
PU
s TPPLU n
NOP1 H
kompleks terdiri t inia
k 1 H 0k memun n
e o itu
m
perancah non-coding humantelomeraseRNA (hTR), theenzymetelomerasereversetranscriptase (TERT) dan kofaktor terkait. TERTbindstohTRmelaluiitstelomeraseRNAbindingdomain (notshown) atthepseudoknot / template (PK / T) domain andtheconservedregion4 / 5 (CR4 / 5) domainofhTR.Thedyskerincomplexcompris ingdyskerin, NOP10 andNHP-strandloindstotheH / ACHAdomain Dan urutan

gkinkan a
r
iniACA.TheH / ACAdomainofhTRalsocontainsaconservedfour-nukleotida motif dis ebut CABbox, yang mengikatproteintelomeraseCajalbodyprotein1 (TCAB1) .Templatergion dari hTR ′- endstrand.Thetelomererepeatsareboundbytheproteincomplexshelterin .Twodouble - untai DNA mengikat protein, telomeric repeat mengikat factor1 (TRF1) andTRF2, binddirectlytotelomeric DNA.TRF2 berinteraksi dengan RAP1

p penyeli
(als oknownasTRF2- interactingtelomeric protein1), andbothTRF1andTRF2interactwithTRF1 - berinteraksi factor2 nuklir (TIN2), whichalsobin dsTPP1.TPP1additionallybin dsthesingle -strand DNAbindin gprotein protection

i
l dikan
n
e
langsun t
k
s g darie
Disker
T in kerusak l
I an o
NP biokimi m
2O H- dari telomer protein 1
boxA a padae
T CA 3 (POT1) dan rekrutan
fungsi r
R 1 h telomerase untuk subkomparte
T telomer a
A telomer melalui itu N - men inti yang
P PKR/ T ase dis
terminal </s> </s> </s> berbeda.
1 Templat jaringan e
TR
F2 TRF1 e
</s> </s> </s> </s> Perekrutan
5 </s> </s> </s> </s> manusi
telomerase
TTAGGGTTAGGGTTAGGGTTAGGGTTAGGGTTAGGG
</s> </s> </s> </s> a. d
ke telomer
3 </s> </s> </s> </s> i
dikendalikan Trans e
</s> </s> </s> </s>
AATCCCAATCCCAATCCCAATCCC
</s> </s> </s> </s> oleh interaksi kripsi k
orang </s> domain protein- dan s
5
protein pemat p
Telomerase(SEPULUH) dari
spesifik, dan
TERT. angan r
b | Skema dari enzim diatur telom e
telomerase lebih lanjut erase
setelah s
menunjukkan itu Regulasi
i
hubungan dari TERT pengikatan penting
telomer. k
domain dengan hTR dari
Selama a
dan telomerase aktivitas
n
kofaktor, diadaptasi perkembanga telomera
n kanker, .
dari se
itu str uktur mikroskopis cryo -elektronofhumantelomerase.Telomeraseadoptsaflexible , RNA-terikat struktur dua lobus. Domain H / ACdarihTRditambat oleh dua kompleksskerin (dis kerin, NHP2, NOP10 dan GAR1) dan ole h TCAB1comprisesonelobe.Keduabagian ini berisi inti katalitik, di manaTRandTERT melin gkari substrat telomer. Keduanya dihubungkan ole hCR4 / 5domainhTR.CTE, ekstensi terminal

C; RT, reverse transcriptase; TRBD, telomeraseRNAbindingdomain. Dia daptasi dariref.49, SpringerNatureLtd.

TERT terjadi
diregulasi melalui R
melalui kontrol e
beragam transkri g
mekanisme psi u
untuk TERT, l
mendukung yang a
peningkatan menentu s
proliferasi sel kan i
yang terkait level
dengan TERT h
tumorigenesi dan T
s.
R dilakukan melalui proses D .natur
e e.com/
pematangan pasca transkripsi dari nrm
ujung 3 ′ nya, yang menetapkan D

level hTR matur dan, pada u

gilirannya, level kompleks A

telomerase matur(Ara. 2). n

Peraturan transkripsi TERT.

Transkripsi dari promotor
TERT sangat diatur dan
merupakan alat utama untuk
mengontrol tingkat telomerase
dalam berbagai jenis sel dan
keadaan seluler. TERT tidak
diekspresikan dalam fibroblas
manusia, yang menyebabkan
pemendekan progresif telomer
dan penuaan replikatif

ditemui

oleh
fibroblas

setelah
pembelahan

sel yang
luas dalam

kultur4-6.
'Batas

Hayflick'
ini (potensi

proliferasi
terbatas sel

manusia
primer)

diatasi
dengan

ekspresi
TERT yang

berlebihan
atau

melalui
pengenalan

mutasi
terkait

kanker
yang

mengaktifk
an

transkripsi
dalam w
promotor w
w
TERT4,7.
 Tinjau

Sebuah Promotor TERT tipe liar Promotor TERT mutan

GABPA – GABPB tetramer

Asli
TERT mRN
Situs ETS 250T atau Asli
TSS Aktivitas TSS Te
250C 228C 200GGAA 228T Situs ETS
Panjang tel

H3K27me3 H3K27me3 H3K27me3 H3K4me2 H3K9ac

H3K4me3

b Langsung
pematangan hTR
GELANDANGA
N
MTR4

PAPD5
ZCCHC7

m7G m2,2,7G
H-kotak ACA
5 3 AAA
Ekor
Hiper- prekursor hTR PABPN1 HTR
metilasi
PARN
DCP2 • CBC
TGS1
• LANJUT

Eksosom RNA
XRN1

Gambar 2 | regulasi inti katalitik TerT-hTr dari telomerase. a | Peraturan transkripsi telomerase reverse transcriptase (TERT) dan
peran mutasi dalam promotor TERT. Promotor tipe liar dari gen TERT sering dibungkam oleh trimetilasi gen-represif dari modifikasi
histon H3 Lys27 (H3K27me3). Promotor tipe liar berisi situs pengikatan asli (dengan motif GGAA) untuk kelompok faktor transkripsi
ETS. Pada tipe kanker yang beragam, C→Transisi T terjadi pada 124bp dan 146bp di hulu kodon start translasi, yang disebut
sebagai C228T dan C250T berdasarkan koordinat genomiknya. Mutasi ini saling eksklusif dan membuat situs pengikatan ETS
tambahan tiga hingga lima putaran heliks (tidak ditampilkan) dari situs ETS asli, yang optimal untuk merekrut ETS hetero-tetramer
GABPA-GABPB. Mutan
TERT alel lebih umum berasosiasi dengan RNA polimerase II dan ditandai dengan modifikasi H3K4me2, H3K4me3 dan histon
asetilasi H3 Lys9 (H3K9ac) yang mengaktivasi gen. Alel TERT mutan menyebabkan peningkatan regulasi transkripsi TERT dan
peningkatan aktivitas telomerase. TSS, situs awal transkripsi. b | Peraturan biogenesis human telomerase RNA (hTR). hTR
ditranskripsi sebagai molekul prekursor dengan 5′ tutup metilguanosin (m7G). M7G cap selanjutnya dimetilasi oleh trimetil-guanosin
sintase (TGS1) menjadi m2,2,7G.Mayoritas transkrip hTR memiliki (<10 nukleotida), ekor yang dikodekan secara genom. Prekursor
ini dipangkas secara eksonukleolitik untuk menghasilkan hTR yang matang. Prekursor hTR dapat di oligo- adenilasi dengan
non-kanonik poli (A) RNA polimerase PAPD5, yang merupakan anggota kompleks TRAMP bersama dengan RNA-eksosom
helikase MTR4 dan protein zinc-finger ZCCHC7. Bagian dari zat antara hTR adenilasi oligo ini adalah substrat untuk degradasi oleh
eksosom RNA, di mana mereka direkrut oleh kompleks penargetan eksosom nuklir (NEXT) dan kompleks ikatan inti nuklir (CBC).
hTR juga dapat mengalami penguraian oleh enzim pengurai sitoplasma DCP2 dan degradasi di 5′–3 arah dengan 5′–
3′exoribonuclease 1 (XRN1). Intermediet hTR oligo-adenilasi yang tersisa adalah
terikat oleh PABPN1 dan dapat dide-adenilasi oleh poli (A) ribonuklease terkait penyakit (PARN), yang mendorong pematangan dan
akumulasi hTR. Ada juga jalur pematangan langsung untuk prekursor hTR, yang berfungsi jika PARN dan PAPD5 tidak ada; enzim
yang terlibat dalam jalur ini masih belum diketahui. H- box, engsel untai tunggal dalam domain H / ACA.

terdeteksi pada fibroblas tikus 16. Meskipun ekspresi TERT

TERT-CreER
Strain tikus yang direkayasa untuk menginduksi ekspresi rekombinase
CreERT2, yang memungkinkan pelabelan fluoresensi sel pengekspres
telomerase in vivo.
yang kurang terbatas pada fibroblas tikus dibandingkan
dengan fibroblas manusia, munculnya reporter transkripsi
yang tertanam dalam lokus TERT telah mengungkapkan
bahwa promotor TERT sangat diatur dalam jaringan tikus.
Secara umum, ekspresi diferensiasi spermatogonia menjadi sel progenitor yang
telomerase sangat erat berkomitmen dan selanjutnya masuk ke meiosis, kadar secara bertahap. Pada tahap spermatid, aktivitas promotor
kaitannya dengan telomerase berkurang TERT dan ekspresi TERT tidak terdeteksi19.
jaringan germline pada Perkembangan penelusuran garis keturunan sel dari
organisme dari cacing penggunaan promotor TERT TERT- CreER strain tikus telah
hingga mamalia17-20. memungkinkan analisis pola ekspresi TERT dalam subset
Menggunakan reporter sel di dalam jaringan dan penilaian perilaku fungsional
transkripsi ketukan tikus mereka sebagai sel induk. Analisis usus halus
di TERT, kadar TERT menggunakan strain TERT-CreER transgenik
ditemukan tertinggi menunjukkan bahwa TERT diekspresikan dalam kriptus
pada spermatogonia usus tikus dan bahwa sel-sel TERT-positif ini berfungsi
yang tidak sebagai sel induk usus dalam memperbarui populasi sel-
berdiferensiasi, sel sel yang terdiferensiasi dari vilus usus. 21. Ketukan strain
induk mitosis pada testis TERT-CreER mengungkapkan adanya subset populasi
dewasa.19,20. Selama
Ulasan Alam | Biologi Sel Molekuler
Tinjau
Pseudouridylation
Perubahan enzimatik dari
hubungan antara basa urasil dan
bagian gula ribosa uridin untuk
membuat pseudouridin
isomernya.
hepatosit di hati orang dewasa dengan ekspresi TERT
tinggi dan polimerase II (Pol II) bersama dengan gen inangnya.
peningkatan aktivitas telomerase22. TERT initinggi hepatosit Sebaliknya, hTR ditranskripsikan dari lokus khusus
berfungsi sebagai sel induk hepatosit, mengisi kembali dengan promotornya
hati sendiri43,44.
dalam kondisi homeostatis dan setelah cedera22.
Bersama, RNA telomerase metazoan memperoleh kotak H / ACA
hasil ini menunjukkan bahwa, dalam memperbarui domain, yang mencakup jepit rambut – engsel – jepit
jaringan pada orang dewasa, rambut–
struktur ekor dengan engsel untai tunggal (kotak-H)
Ekspresi TERT diperkaya dalam populasi sel progenitor dari
tions untuk mendukung proliferasi jangka panjang
mereka, tapi itu urutan ANANNA dan ekor pendek yang berisi
TERT di-downregulasi atau dipadamkan dengan lebih
banyak perbedaan urutan ACA (Ara. 1a). Domain RNA ini dibagikan
sel keturunan tiated. Sel yang terdiferensiasi akhir, dengan subset dari snoRNA yang mengandung H /
seperti itu ACA dan
scaRNA45,46. H / ACA- mengandung snoRNA dan
sebagai miosit otot rangka, miosit jantung, neuron scaR-
dan spermatid, tidak memiliki ekspresi telomerase
bahkan pada tikus, NAs memandu pseudouridylation dari RNA ribosom dan
selanjutnya mendukung hubungan antara kapasitas
proliferatif dari RNA nuklir kecil, masing-masing 47. Kompleks
dan ekspresi TERT19,23. Pengayaan telomerase di
jaringan prizing dyskerin, NOP10 dan NHP2 mengikat H / ACA
Gugat sel nenek moyang sangat penting untuk fungsi sel mengurutkan dan mengeksekusi pseudouridylation pada
punca, seperti target
inaktivasi gen telomerase pada tikus menyebabkan cacat dari panduan RNA. Urutan H / ACA sangat penting
dalam sel induk spermatogonial, ruang bawah tanah untuk biogenesis telomerase metazoan, dan mutasi
gastrointestinal pada
nenek moyang dan sel induk hematopoietik11,19,24. domain H / ACA atau dalam komponen diskerin
penyebab kompleks hilangnya hTR dan penyakit
Studi pola ekspresi TERT di jaringan manusia diskeratosis
congenita (lihat di bawah). Menariknya, meski
terbatas, tetapi ada bukti bahwa TERT diekspresikan beberapa
di dalam sel induk dan kompartemen sel progenitor residu pseudouridine ada di hTR, relevansinya dengan
jaringan, termasuk di kriptus gastrointestinal fungsi telomerase masih belum jelas48. Namun,
dyskerin sangat penting untuk fungsi telomerase dengan
saluran, umbi folikel rambut, tonjolan folikel rambut dan mendukung
epidermis interfollicular25-30. Mekanisme yang digunakan stabilitas dan pemrosesan hTR (lihat di bawah).
TERT diperkaya dalam sel progenitor dan dibungkam
selama Domain H / ACA dari hTR berisi tiga-
ing diferensiasi pada tikus dan sisa-sisa manusia nukleotida urutan tertanam dalam terminal batang- loop
tidak diketahui. Sebuah inti TERT- promotor konstruksi
mencakup disebut kotak CAB, yang mengikat telomerase Cajal
protein tubuh 1 (TCAB1; Ara. 1a). TCAB1 diperlukan
melewati situs awal transkripsi tidak hanya aktif untuk
dalam pengekspresian sel kanker manusia tetapi juga baik aktivitas katalitik telomerase dan perdagangan
telomerase dalam manusia
fibroblas telomerase-negatif, menunjukkan bahwa
informasi telomerase ke badan Cajal, yang diusulkan untuk
regulasi tipe sel pengendali mation tidak dikodekan bantuan dalam perakitan RNP telomerase dan / atau
dalam dalam telomerase
diperdagangkan ke telomer (lihat di bawah). Ahli
promotor proksimal31-33 (Ara. 2a). Banyak penelitian biokimia
membedah promotor TERT dan mengidentifikasi
elemen cis iments dan struktur mikroskop elektron baru
mengungkapkan bahwa diskerin kompleks dan TCAB1
terikat oleh faktor transkripsi umum. Elemen dan adalah
faktor termasuk dua E-box dengan urutan CACGTG, komponen dari holoenzim telomerase matang49,50.
yang terikat oleh onkoprotein MYC dan antar- Mekanisme penghentian transkripsi hTR di
bertindak protein MAX dan MAD1, dan situs pengikatan vertebrata tidak diketahui karena, tidak seperti snoRNA
untuk terkait,
faktor transkripsi SP1, faktor stimulasi hulu yang tertanam dalam intron, hTR dewasa bukan
1 (USF1) dan USF2, ID2 dan ETS2 (refs34-37). Penting dibuat oleh spliceosome. Konsisten dengan variasi
kemajuan dalam memahami regulasi transkripsi panjang dan urutan RNA telomerase dalam evolusi
Oleh karena itu, pemrosesan RNA telomerase secara
dari TERT baru-baru ini dicapai dengan penemuan substansial
mutasi yang berbeda Meskipun
sangat antar pada tikus atau manusia tetap tidak diketahui. Lain tidak ada homolog protein NNS pada vertebrata,
berulang spesies. Pertanyaan terbuka yang penting adalah mengapa analog fungsional yang diusulkan adalah kompromi
pada Namun, keratinosit manusia Integrator
promotor satu kurang aktivitas telomerase dalam kultur tetapi plex, yang bertanggung jawab untuk penghentian
TERT di kesamaan menunjukkan telomerase transkripsi
jenis kanker adalah aktivitas di kulit manusia9,38. Akhirnya, kami kekurangan dari beberapa RNA non-coding (seperti RNA nuklir
yang konservasi fundamental kecil)
tersebar modifikasi pemahaman tentang bagaimana TERT lebih efektif
luas (Ara. 2a; post- dibungkam dan mRNA54-56. Setelah pengakhiran, NNS com-
Lihat di transcripti selama diferensiasi di jaringan manusia dibandingkan plex merekrut sebuah kompleks yang disebut kompleks
bawah). onal dengan TRAMP
ionisasi diferensiasi di jaringan tikus, atau memang apa yang Transkrip TLC1 dan dengan
RNA menjelaskan oligo-adenyilat itu demikian bilangan prima
Pembatasa telomerase mereka untuk degradasi oleh eksosom RNA, yang
n ekspresi dari untuk perbedaan regulasi TERT di banyak merupakan a
TERT ke eukariota spesies mamalia yang telah dipelajari39. multisubunit RNAse57. TRAMP homolog di verte-
sel sel tunggal
brates termasuk non-kanonik poli (A) RNA polimerase
progenitor ke
mamalia. sintesis dan pematangan hTR. RNA nonkode PAPD5 (juga dikenal sebagai TENT4B), homolog AIR2
Di ZCCHC7 dan MTR4 (refs58,59) (Gambar. 2b). Mirip
kompartem Saccharom hTR berisi template untuk penambahan telomer dengan
en dan yces berulang40-42 (Ara. 1a). Pada vertebrata, hTR dimiliki oleh kompleks ragi, oligo- adenilat TRAMP vertebrata
downregula cerevisiae, keluarga RNA tubuh Cajal kecil (scaRNA) dan kecil prekursor transkrip RNA telomerase.
si TERT transkripsi RNA nukleolus (snoRNA). Baik scaRNA dan snoR- Dalam kondisi mapan, hTR ada sebagai kumpulan
selama ter- NAs dikodekan dalam intron dan ditranskripsikan oleh
minasi RNA transkrip, sebagian besar berakhir di posisi 451
diferensiasi dari
sangat telomeras
mengontrol e RNA
aktivitas TLC1
telomerase, terjadi
tetapi melalui
mekanisme jalur Nrd1
pencapaian – Nab3 –
regulasi ini Sen1
(NNS)51-53.

www.nature.com/nrm

dan minoritas melampaui nukleotida 451. Ujung 3 ini
ekstensi secara genom dikodekan oleh lokus hTR
dan, sebagai tambahan, sebagian besar molekul yang
diperluas memiliki
sess ekor adenosine pendek tanpa contoh60. Sudah
tidak jelas apakah molekul hTR diperpanjang terwakili
prekursor untuk hTR dewasa atau apakah mereka aber-
transkrip kata-kata kasar. Untuk menjawab pertanyaan
ini, RNA baru lahir
pengurutan - teknik untuk memperkaya RNA
akhir sebelum
kursor dan urutan ujung 3 ′ mereka - dikembangkan,
mengungkapkan bahwa hTR awalnya ditranskripsikan
sebagai perpanjangan
molekul sekitar 461 nukleotida, dan ini
prekursor diproses menjadi nukleotida 451- dewasa
RNA61 (Ara. 2b). Prekursor hTR yang lebih panjang,
melebihi 1.500
panjang nukleotida, juga telah dideteksi menggunakan
PCR
dengan transkripsi terbalik dan dapat mewakili sangat
baik
prekursor hTR awal yang dengan cepat diproses menjadi
bentuk pendek atau transkrip hTR yang tidak produktif
ditargetkan untuk dihancurkan oleh pengawasan RNA
nuklir62,63.
Prekursor hTR dengan cepat oligo-adenilasi primer
seperti poli (A) polimerase PAPD5 (refs61,63,64) (Gambar. 2b).
Intermediet hTR yang ter-adenilasi oligo dapat dideade-
nylated oleh poli (A) ribonuklease (PARN), yang ini-
akhirnya ditemukan sebagai gen yang bermutasi dalam
keluarga yang pendek
telomer dan fibrosis paru (lihat di bawah). Dalam
tidak adanya PARN, intermediet hTR awalnya
terakumulasi
dan kemudian terdegradasi, sehingga berkurang
tingkat hTR dan aktivitas telomerase yang berkurang
(lihat di bawah).
PARN telah meningkatkan aktivitas terhadap substrat
poli (A)
dan secara istimewa dapat menghilangkan ekor A yang
tidak memiliki template
prekursor hTR65,66. Alternatifnya, PARN bisa keduanya
hilangkan ekor A yang tidak diberi template dan potong
ekstensi genomik.
ion prekursor hTR untuk menghasilkan hTR dewasa. Ini
Ide disarankan atas dasar bukti untuk PARN
aktivitas in vitro menuju urutan ekor genom hTR62.
Namun, dengan tidak adanya PARN dan PAPD5, file
prekursor hTR
tingkat oligo-adenilasi dipertimbangkan-
lebih rendah, dan pematangan hasil transkrip hTR
biasanya61. Pengamatan ini menunjukkan adanya
tambahan 3′-5 ′ eksonuklease selain PARN itu
bertanggung jawab untuk memotong in vivo prekursor
hTR
menjadi panjang dewasanya secara langsung tanpa
persyaratan
Tinjau
Oligo- transkrip hTR adenilasi yang tidak dipro-
HTR matang didegradasi oleh eksosom RNA
(Ara. 2b). PABPN1 protein pengikat poli (A) (juga
dikenal sebagai PABP2) mengikat tran- hTR adenilasi
oligo-
skrip, dan kerugiannya menyebabkan hilangnya transkrip
hTR70.
PABPN1- oligo tak terikat- perantara hTR teradenilasi
ates tunduk pada degradasi oleh perekrutan
eksosom RNA nuklir dengan penargetan exosom nuklir
(NEXT) kompleks dalam hubungannya dengan cap
binding
kompleks (CBC)63,71. Menipisnya komponen eksosom,
NEXT atau CBC dapat menyelamatkan fenotipe hTR
rendah
tingkat karena kehilangan diskerin atau mutasi titik hTR-
dosa domain H / ACA, menunjukkan bahwa exosome
tersebut
berfungsi juga untuk menghilangkan hTR yang rusak atau
salah rakitan
transkrip71-73. Awal selama transkripsi, telomerase
RNA memperoleh m7G tutup monomethylguanosine,
yang mengalami hipermetilasi menjadi am2,2,7G
trimethylguano-
tutup sinus oleh enzim trimethylguanosine synthase
(TGS1)74,75 (Ara. 2b). Hypermethylation oleh TGS1 sup-
menekan akumulasi hTR, dan sel TGS1- negatif
garis menunjukkan peningkatan aktivitas telomerase dan
telomer
memanjang, menunjukkan bahwa TGS1 mengatur secara
negatif
telomerase76. Pemenggalan sitoplasma transkrip hTR
oleh DCP2 (juga dikenal sebagai m7GpppN-mRNA
hidrolase)
dan degradasi selanjutnya oleh 5′ – 3 ′ exoribonuclease 1
(XRN1) juga menyebabkan kerusakan hTR71. Jadi,
transkrip hTR
menjalani proses pematangan multistep yang meliputi
siklus adenilasi dan de-adenilasi yang bersama-sama
mengontrol tingkat hTR kondisi-mapan. Mekanisme ini
sangat penting untuk pengaturan tingkat telomerase, dan
banyak dari langkah-langkah ini terganggu dalam keadaan
penyakit.
Merakit holoenzim telomerase
Banyak protein terkait telomerase telah diidentifikasi
secara biokimia. Protein tersebut dapat dibedakan menjadi
dua
kelas: komponen terkait stabil dari holo-
enzim dan protein terkait sementara, yang biasanya
melayani fungsi dalam perakitan holoenzim tersebut (Kotak 1).
Inti telomerase. Semua enzim telomerase melintasi
evolusi berbagi inti katalitik yang sama, terdiri
 untuk oligo- adenilasi dan de- adenilasi. Salah satunya
kandidat exonuclease adalah Cajal body-localized 3′ – 5 ′
zoa menggunakan pendekatan biokimia77,78. TERT
RNA exonuclease TOE1, yang berkontribusi pada trim-
ming dari RNA inti kecil, snoRNA dan scaRNA sebagai
serta molekul prekursor hTR67-69.
in vitro cukup untuk menyusun kembali aktivitas
Kotak 1 | Holoenzim telomerase dan faktor asesorisnya tetapi hanya dengan adanya ekstrak sel yang menyediakan
meskipun menggabungkan telomerase reverse transcriptase (tert) dan telomerase
rNa
(htr) dengan adanya ekstrak sel menghasilkan aktivitas telomerase, perakitan tersebut
tidak dapat
terjadi di dalam sel hidup tanpa komponen lain dari holoenzim dan telomerase
tanpa banyak protein aksesori. Membedakan antara komponen
holoenzim dewasa dan protein pelengkap dapat dicapai melalui biokimia
dan studi genetik. komponen holoenzim telomerase secara stoikiometri
terkait dengan tert dan htr, seperti imunodeplesi holoenzim
komponen menghabiskan tingkat telomerase dan aktivitas dari ekstrak sel kanker
manusia.
Sebaliknya, protein aksesori dapat secara sementara dikaitkan dengan telomerase, dan
telomerase
immunodepletion tidak secara kuantitatif menguras tingkat atau aktivitas telomerase.
Genetik
studi juga penting untuk menentukan apakah faktor terkait telomerase
diperlukan untuk fungsi telomerase. Penipisan salah satu komponen holoenzim atau
faktor aksesori dapat mengurangi tingkat telomerase atau aktivitas telomerase, atau
merusak
fungsi telomerase, tergantung pada peran protein di jalur tersebut.
Ulasan Alam | Biologi Sel Molekuler
TERT dan telomerase RNA. Komponen inti ini
pada awalnya diidentifikasi dalam proto-
manusia
dan hTR kemudian dikloning, sebagian, pada
kesamaan urutan79. Ko- ekspresi TERT dan hTR
telomerase,
aktivitas enzimatik tambahan yang merangsang
telomerase
majelis80,81. Asosiasi TERT dan hTR tergantung
pada pengikatan struktur sekunder RNA di hTR oleh
TERT. Interaksi antara TERT dan hTR adalah medi-
dieduksi oleh domain tertentu di hTR dan TERT. Manusia
Protein TERT mengandung N-terminal domain (TEN), a
telomerase RNA binding domain (TRBD), katalitik
reverse transcriptase (RT) domain dan terminal C-
ekstensi (CTE). RNA telomerase manusia mengandung a
5 'pseudoknot / template (PK / T) domain yang template
penambahan pengulangan telomerase, domain pusat
terdiri dari persimpangan tiga arah antara simpul-simpul
batang
disebut wilayah konservasi 4/5 (CR4 / 5) dan 3 'H / ACA
domain (Ara. 1a).
Tinjau
WD40 ulangi
Sebuah domain protein dari
44-60 asam amino, yang
sering memediasi interaksi
protein-protein atau protein-
RNA.
fungsi telomerase in vivo membutuhkan perakitan
Informasi mendetail tentang interaksi TERT – hTR dengan
diturunkan dari struktur mikroskop elektronis dari komponen holoenzim yang terkait secara stabil, seperti
diskerin kompleks dan TCAB1, dan dengan asosiasi
kompleks telomerase, pada manusia dan Tetrahymena sementara
thermophila.dll, dan dari analisis biokimia49,82,83 (Ara. 1b). protein terkait, seperti pontin, reptin, dan pendamping
Percobaan biokimia menunjukkan bahwa TERT
mengikat seperti HSP90 dan TRiC.
domain PK / T dan CR4 / 5 domain hTR81,84
(Ara. 1a). Meskipun TERT dapat mengikat ke hTR
meskipun Lokalisasi telomerase
PK / T domain saja, tambahan mengikat dengan CR4 / 5 Perpanjangan telomer membutuhkan akses telomerase
diperlukan untuk aktivitas telomerase penuh84,85.
Struktural DNA telomerik. Namun, pemrosesan telomerase
komponen dan perakitan kompleks kemungkinan besar
Analisis menunjukkan bahwa domain TERT diatur terjadi
dalam karakteristik struktur cincin dari tran- terbalik di beberapa tempat di dalam nukleus, dan cacat pada
lainnya tempat tersebut
scriptases (Ara. 1b). Inti katalitik yang dirakit berisi proses menghasilkan mislokalisasi telomerase.
saluran sentral yang menampung template – substrat
RNA-DNA hybrid dan menyediakan jalan keluar yang
baru Lokalisasi ke tubuh Cajal. Seperti scaRNP lainnya, file
DNA telomer yang disintesis49,82,83. Banyak germline kompleks telomerase terlokalisasi pada badan Cajal,
tersebut yang
mutasi yang menyebabkan gangguan diskeratosis adalah kompartemen nuklir diperkaya dalam faktor
congenita sambungan-
ing dan proses terkait RNA lainnya93,104. Sang
asosiasi antara hTR dan hTERT (lihat di bawah). profesional-
tein coilin perancah tubuh Cajal; hilangnya coilin
mencabut
Pembentukan tubuh cajal dan mislokalisasi
Banyak kofaktor diperlukan untuk perakitan file telomerase105,106.
telomerase holoenzim. Meskipun inti katalitiknya Lokalisasi telomerase di badan Cajal juga dimediasi
oleh TCAB1, yang mengikat ke kotak CAB dari hTR;
cukup untuk aktivitas telomerase in vitro, telomer- dalam
holoenzim ase dalam ekstrak sel manusia terdiri dari a tidak adanya interaksi kotak TCAB1-CAB, telomerase
kompleks yang jauh lebih besar sekitar 500 kDa86,87. mislokalisasi ke nukleolus50,103,107,108 (Ara. 3).
Molekul tunggal, pencitraan sel hidup menunjukkan telo
Holoenzim telah diisolasi dengan pemurnian afinitas. itu
kation menggunakan protein TERT yang diberi tag,
antibodi terhadap Merase pameran perpanjangan waktu tinggal di Cajal
protein TERT endogen atau kromatografi afinitas tubuh109. Tujuan pelokalan telomerase di
dengan substrat oligonukleotida telomer DNA88-90. Badan Cajal masih belum jelas, karena telomere efektif
dipertahankan dalam sel kanker coilin- knockout
Stabilitas telomerase, aktivasi penuh dan perekrutan ke meskipun
telomer membutuhkan holoenzim yang dirakit, yang gangguan tubuh Cajal106,110. Selanjutnya telomerase
termasuk dua kompleks diskerin yang mengikat ke hTR
- tidak melokalisasi tubuh Cajal di sel tikus tertentu111.
satu di masing-masing dari dua penjepit rambut di
domain H / ACA. Namun demikian, tubuh Cajal tetap mungkin berfungsi
Diskerin dan NOP10 berinteraksi dengan RNA, dan pada
gilirannya fungsi penting dalam mengatur telomerase di seluler
GAR1 (yang bukan merupakan bagian dari kompleks konteks tingkat
diskerin) dan rendah ekspresi telomerase, atau tertentu
NHP2 berinteraksi dengan diskerin dan NOP10
49,91,92
(refs ). jenis sel yang belum dipelajari. Karena
tantangan teknis dalam mempelajari telomerase,
Dyskerin – NOP10 – NHP2 bekerja sama dengan situs subnuklirnya
Transkripsi snoRNA H / ACA tetapi GAR1 tidak, sug- pelokalan hanya dipelajari dalam beberapa jenis sel.
GAR1 gesting mungkin merupakan komponen non-inti
telo
merase yang dirakit pada tahap pematangan selanjutnya. Rekrutmen ke telomer dan asosiasi dengan shelterin.
GAR1 digabungkan dengan holoenzim berikut Perekrutan telomerase ke telomer dimediasi oleh
perekrutannya ke badan Cajal93-96. TCAB1 adalah stabil interaksi antara TERT dan shelterin pro-
komponen terkait dari holoenzim dan terlibat tein TPP1 (Ara. 1a). TPP1 terhubung ke file
kompleks shelterin melalui TRF1- nuklir yang
telomerase melalui interaksi dengan hTR CAB berinteraksi
 faktor 2 mengidentifikasi bahwa asosiasi dengan telomerase (POT1), yang secara langsung mengikat telomer untai
kotak. (TIN2), sementara dan tunggal
TCAB1 yang diperlukan untuk biogenesisnya. NAF1 mengikat overhang114. Hilangnya TPP1 atau TIN2 mengurangi
mengontr juga diskerin telomer-
ol membent dan diperlukan untuk asosiasi dyskerin yang stabil dengan rekrutmen ase ke telomer115. Interaksi spesifik
aktivitas uk telomerase96-98. SHQ1 adalah diskerin lain yang
katalitik kontak berinteraksi hubungan antara TERT dan TPP1 dimediasi oleh TEN
dan nuklir dengan protein yang memfasilitasi perakitan telomerase 99. Dua
untai AAA+ domain TERT dan patch asam amino di permukaan
ganda ATPases, pontin dan reptin, ikat ke TERT dan dys wajah lipatan pengikat oligosakarida / oligonukleotida
perdagang DNA- kerin dan mempromosikan perakitan telomerase menjadi
an protein sta- domain TPP1, disebut patch TEL87,106,115-117 (Ara. 3).
telomerase pengikat
rumit. Pontin dan reptin berasosiasi dengan telomerase Pentingnya patch TEL digarisbawahi oleh
(lihat di telomerik
di fase S, dan penipisannya menyebabkan hilangnya penemuan mutasi di wilayah TPP1 inilah yang
bawah). berulang-
hTR dan menyebabkan
faktor aktivitas telomerase88. TERT mengikat ke hTR dibantu
Selain pengikat oleh pemendekan telomer dan diskeratosis congenita berat118.
konstituen 1 (TRF1) Pencitraan sel hidup dari molekul telomerase tunggal
yang dan protein kejutan panas pendamping 90 (HSP90)100-102, dan terungkap
terkait TRF2 perakitan telomerase dengan TCAB1 membutuhkan
112,113
secara (refs ) pendamping- bahwa RNP telomerase berdifusi melalui inti dan
stabil ini . TPP1 satu TriC, yang didedikasikan untuk melipat kelas membentuk interaksi sementara dan jangka panjang
juga tertentu dengan
holoenzim terkait telomer109. Hilangnya TERT – TPP1 yang terikat oleh
telomeras dengan klien protein, termasuk WD40 ulangi-berisi mutasi
e, perlindun protein seperti TCAB1 (ref.103). Jadi, meski mini dari patch TEL pada sel induk embrionik manusia
beberapa gan aktivitas telomerase mal hanya membutuhkan TERT pemendekan telomer dan hilangnya viabilitas sel,
protein protein dan hTR, menggarisbawahi
telah telomer 1

www.nature.com/nrm
 Tinjau
CTC1, STN1 dan
TEN1, adalah
kompleks 129,130 trimerik
TRiC yang dilestarikan
HSP90
Inti
TERT
TCAB1

Pontin
hTR
Reptin
Diskerin
kompleks

Tubuh Cajal

Fase S.
Shelterin OB

SEPULUH
TPP1

Telomer

Gambar 3 | perakitan dan perdagangan telomerase di dalam sel. Telomerase reverse

transcriptase (TERT) dilipat dengan bantuan chaperone heat shock protein 90 (HSP90),
sedangkan human telomerase RNA (hTR) diikat secara co-transcriptionally oleh
kompleks dyskerin, yang terdiri dari dyskerin, NOP10, NHP2 dan faktor terkait. NAF1.
Kofaktor pontin dan reptin mempromosikan perakitan hTR dengan kompleks diskerin dan
TERT. Telomerase dilokalisasi ke tubuh Cajal oleh telomerase Cajal body protein 1
(TCAB1), yang dilipat oleh kompleks TRiC pendamping. Dengan tidak adanya TCAB1,
telomerase salah letak ke nukleolus (tidak ditampilkan) dan tidak direkrut ke telomer.
Selama fase S,

pentingnya perekrutan telomerase untuk pemeliharaan

telomer117. Menariknya, penarikan TERT ke TPP1 dalam
konteks ini tidak dapat sepenuhnya menyelamatkan
pemendekan telomer, menunjukkan bahwa patch TEL
TPP1 manusia memiliki peran tambahan dalam aktivasi
telomerase.
TIN2 juga penting untuk pemeliharaan panjang
telomer119-122; jika tidak ada, TPP1 dan POT1 tidak dapat
melokalkan ke telomer123. Karena fungsi penghubung ini,
TIN2 diperlukan untuk perekrutan telomerase ke
telomer115. Merefleksikan pentingnya dalam pemeliharaan
panjang telomer, TIN2 bermutasi pada individu dengan
sindrom telomer pendek, dengan mutasi berkelompok
pada ekson 6, dekat daerah terminal C protein 124,125.
Meskipun mutasi ini tidak mempengaruhi lokalisasi TIN2
atau aktivitas telomerase, ada beberapa bukti bahwa
mutasi ini mengganggu perekrutan telomerase ke telomer
dalam sel manusia.126,127. Namun, model tikus dari mutasi
TIN2-K280E penyebab penyakit menunjukkan
pemendekan telomer melalui mekanisme telomerase-
independen.128. Lebih banyak penelitian diperlukan untuk
mengklarifikasi secara tepat bagaimana mutasi TIN2 ini
menyebabkan pemendekan telomer.
Protein telomer juga dapat menghambat aktivitas
telomerase di telomer. Kompleks CST, yang terdiri dari

yang mengikat overhang 3 'telomer (Ara. 4). Itu
Kompleks CST manusia membantu replikasi DNA pada telo meres dengan
menstimulasi DNA polimerase α- primase131. Selain itu, CST membatasi ekstensi
telomer dengan membatasi akses telomerase ke telomer dan menghambat stimulasi
telomerase oleh TPP1 – POT1 (lihat di bawah) 132. Dengan demikian, kompleks
CST dapat memfasilitasi peralihan dari elongasi telomerase yang dimediasi oleh
telomer untuk mengisi sintesis telomer.
Perekrutan telomerase ke telomer diatur dengan cara yang bergantung pada siklus
sel. Dalam ragi tunas dan ragi fisi, interaksi telomerase dengan telomer dibatasi pada
fase S.133. Demikian pula, dalam sel manusia, ko-lokalisasi telomerase dan telomer
terjadi terutama selama fase S. 134,135 (Gambar 3 dan 4). Perakitan enzim telomerase yang
diatur oleh siklus sel dapat menjelaskan beberapa pembatasan perekrutan telomerase ke
fase S. Sejalan dengan itu, hubungan antara TERT dan pontin bervariasi selama siklus
sel dan memuncak pada fase S. Menariknya, perakitan kompleks telomerase dengan
TCAB1 bervariasi selama siklus sel88. Asosiasi TCAB1-hTR hilang dalam sel mitosis,
menunjukkan bahwa beberapa elemen enzim telomerase dirakit dengan cara yang diatur
siklus sel136. Pengamatan ini sesuai dengan pentingnya TCAB1 yang telah ditetapkan
sebelumnya dalam perekrutan telomerase untuk telomerase dan menyarankan bahwa
regulasi TCAB1 yang mengikat ke telomerase menyumbang beberapa perekrutan yang
bergantung pada siklus sel. Dengan demikian, perekrutan telomerase ke telomer
membutuhkan interaksi antara TERT dan protein shelterin TPP1 dan terjadi terutama
selama fase S; Namun, mekanisme yang tepat yang mengontrol waktu dan regulasi
perekrutan ini masih belum diketahui.
Pengaturan aktivitas telomerase
Apakah aktivitas telomerase dapat diatur oleh kofaktor proteinnya telah menjadi bidang
studi aktif. TCAB1 awalnya dikarakterisasi sebagai protein telomerase yang diperlukan
Ulasan Alam | Biologi Sel Molekuler
untuk perdagangan telomerase ke badan Cajal dan untuk
mempertahankan panjang telomer.50,107. Pada sel manusia
dan tikus yang dihapus dari TCAB1 menggunakan
pengeditan genom, aktivitas katalitik telomerase
terganggu. Aktivitas telomerase yang berkurang dalam
sel-sel ini disebabkan oleh sebagian heliks RNA penting
dalam domain hTR CR4 / 5, yang pada gilirannya
mengganggu pengikatannya dengan TERT. 110. Temuan ini
menunjukkan bahwa pengikatan TCAB1 mendorong
keadaan telomer-ase yang aktif secara katalitik dengan
meningkatkan lipatan RNA dan mendorong asosiasi
TERT dan hTR yang tepat.(Ara. 4a).
Setelah direkrut ke telomer, telomerase harus
diaktifkan lebih lanjut untuk menambahkan pengulangan
telomer secara efisien. Regulasi telomerase di telomer
terjadi melalui aktivitas komponen shelterin. Karena
TPP1-POT1 mengikat DNA untai tunggal melalui POT1,
prediksi awal adalah bahwa telomerase dan TPP1-POT1
akan bersaing untuk pengikatan telomer, dan TPP1-POT1
akan menghambat aktivitas telomerase dengan
mengasingkan 3 'overhang. Untuk mendukung hipotesis
ini, ekspresi berlebih dari mutan POT1 yang tidak mampu
mengikat DNA untai tunggal menghasilkan pemanjangan
telomer yang cepat dengan meningkatkan aktivitas
telomerase di telomer.137. Berbeda dengan temuan ini,
penambahan TPP1 rekombinan dan POT1 menjadi
Tinjau

Fase S. Sebuah Pengerahan

P6.1

TCAB1

TAKSI
kotak

Shelterin OB SEPULUH

TPP1

POT1
Telomerase

TTAGGGTTAGGGTTAGGGTTAGGGTTAGGGTTAGGG 3
AATCCCAATCCCAATCCCAATCCC 5

b Perpanjangan Mempromosikan
prosestivitas

TTAGGGTTAGGGTTAGGGTTAGGG TTSEBUAH
AATCCCAATCCCAATCCCAATCCC

T TG
SEBUAH

Fase S / G2 terlambat c Penghentian dan pengisian

TTAGGGTTAGGGTTAGGGTTAGGGTTAGGGTTAGGGTTAGGG
AATCCCAATCCCAATCCCAATCCC

Gambar 4 | regulasi aktivitas telomerase di telomer. a | Perekrutan: telomerase direkrut ke telomer selama fase S melalui
kontak antara domain lipatan oligosakarida / oligonukleotida (OB) dari subunit kompleks shelterin TPP1 dan domain
terminal-N (TEN) dari telomerase reverse transcriptase (TERT). Aktivitas telomerase diatur oleh telomerase Cajal body
protein 1 (TCAB1), yang mengikat domain H / ACA dari human telomerase RNA (hTR) pada urutan empat nukleotida yang
dikonservasi yang disebut kotak CAB. Pengikatan TCAB1 menyebabkan perubahan konformasi di wilayah P6.1 dan P6b
dari domain wilayah lindung hTR 4/5 (CR4 / 5), yang meningkatkan aktivitas telomerase. Situs yang berinteraksi dengan
TCAB1 di hTR ditandai dengan warna merah. b | Perpanjangan: telomerase memanjang untai kaya G (oranye) dari
telomer. Telomerase
Prosestivitas - jumlah pengulangan telomer yang dapat ditambahkan telomerase dalam satu peristiwa pengikatan
primer - ditingkatkan oleh komponen shelterin TPP1 dan perlindungan protein telomer 1 (POT1). TPP1-POT1
mempromosikan prosestivitas telomerase dengan mendorong translokasi enzim telomerase di sepanjang substrat
telomer dan / atau dengan mencegah disosiasi telomerase dari primer telomer. c | Penghentian dan pengisian:
selama fase S akhir / fase G2, kompleks CST - yang terdiri dari CTC1, TEN1 dan STN1 - mengikat untai G (-kaya)
yang baru disintesis dari telomer dan mencegah telomerase mengaksesnya. CST juga merusak interaksi
telomerase dengan TPP1-POT1 dan meningkatkan aktivitas DNA polimeraseα- primase, yang mensintesis primer
RNA (garis merah) yang diperlukan untuk pengisian untai C telomerik.

www.nature.com/nrm
 Tinjau
hepatoseluler150-154.
Selanjutnya, mereka
telomerase in vitro menyebabkan peningkatan dua hingga
tiga kali lipat dalam prosestivitas telomerase
(didefinisikan sebagai jumlah pengulangan telomer yang
ditambahkan setelah satu peristiwa pengikatan
telomerase– primer)138-140. Penelitian lebih lanjut
menunjukkan bahwa TPP1-POT1 meningkatkan
prosestivitas telomerase secara in vitro dengan mencegah
disosiasi dari DNA telomerik atau dengan meningkatkan
efisiensi translokasi telomerase setelah setiap penambahan
berulang.138 (Ara. 4b). Stimulasi prosestivitas tel-omerase
dimediasi oleh patch TEL TPP1, yang juga berfungsi
dalam perekrutan telomerase116. Dalam hubungannya
dengan TPP1-POT1 rekombinan, penambahan TIN2
eksogen juga dapat merangsang prosestivitas telomer-ase
dalam sel.141. Meskipun studi in vivo tentang prosestivitas
telomerase kurang, secara teoritis mekanisme aktivasi
telomerase ini memungkinkan telomerase untuk
mensintesis saluran panjang DNA telomer secara in vitro
dengan hanya beberapa kejadian pengikatan primer.
Investigasi tambahan diperlukan untuk lebih memahami
peran ganda TPP1– POT1 dalam meningkatkan dan
menghambat fungsi telomerase.

Peningkatan regulasi telomerase hampir universal pada

kanker manusia. Upregulasi atau reaktivasi telomerase
terjadi di lebih dari 90% dari semua tumor manusia 142-144.
Meskipun telomerase tampak diekspresikan di sebagian
besar sel progenitor yang berkembang biak, jumlah
telomerase tidak cukup untuk mempertahankan telomer
selama penuaan dan dalam homeostasis. Tingkat
telomerase yang tidak mencukupi dapat menjelaskan
pengamatan umum bahwa telomer memendek di jaringan
manusia selama penuaan. Seperti dibahas di atas, banyak
jenis sel manusia primer yang tumbuh di laboratorium
sama sekali tidak memiliki telomerase dan menunjukkan
pemendekan telomer progresif dengan pembelahan sel.
Setelah fase lag yang panjang selama beberapa bulan,
fibroblas manusia berhenti membelah dan memasuki
keadaan penuaan replikatif. Kami sekarang memahami
bahwa penuaan replikatif disebabkan oleh subset telomer
yang sangat pendek yang kehilangan kemampuan untuk
melindungi ujung kromosom dan dikenali sebagai DNA
yang rusak, yang menginduksi respons kerusakan
DNA,145,146. Inaktivasi p53 dan RB memperluas proliferasi
sel dengan telomer yang sangat pendek, tetapi memuncak
pada krisis telomer: periode ketidakstabilan genomik dan
kematian sel. Meskipun krisis telomer mengganggu
pembelahan sel, hal itu juga dapat mendorong
transformasi maligna dengan mendorong translokasi non-
timbal balik, aneuploidi, dan perubahan nomor
salinan.147,148. Kematian sel yang disebabkan selama krisis
telomer didorong oleh autofagi 149. Dalam fibroblas,
ekspresi TERT yang berlebih membentuk kembali telo
merase, mencegah penuaan dan krisis sel, dan keabadian
sel ena-bles.4. Peningkatan regulasi telomerase pada tumor
manusia memiliki fungsi yang sama untuk memberikan
keabadian sel, sehingga memfasilitasi invasi tumor dan
metastasis.
Telomerase diregulasi pada kanker melalui berbagai
mekanisme, termasuk amplifikasi gen TERT dan gen
TERC pengkode-hTR. Mekanisme yang paling dipahami
dimana kanker meningkatkan transkripsi TERT adalah
melalui akuisisi mutasi nonkode di promotor TERT (Ara.
2a). Mutasi promotor TERT merupakan mutasi paling
umum pada beberapa jenis tumor, termasuk glioblastoma,
melanoma, kanker kandung kemih, dan karsinoma
 jaringan dengan tingkat pembaruan diri yang biasanya
rendah (seperti sistem saraf pusat, hati dan melanosit) dan
ketidakhadiran mereka dari kanker jaringan yang lebih
adalah mutasi nonkode yang paling umum pada kanker manusia 155. Mutasi promotor
proliferatif (seperti usus besar) dan darah), telah diusulkan
TERT mengaktifkan transkripsi TERT, menghasilkan peningkatan kadar mRNA,
bahwa jaringan dengan aktivitas telomerase basal rendah
peningkatan aktivitas telomerase, dan peningkatan panjang telomer di jalur sel
memerlukan aktivasi mutasi telomerase awal selama
karsinoma urothelial156. Dua mutasi transisi C → T yang umum terjadi terletak di
tumorigenesis.161. Untuk mendukung argumen ini, mutasi
promotor proksimal, 124bp dan 146bp hulu kodon start translasi. Mutasi ini disebut
promotor TERT terjadi pada awal, lesi prekursor pada
sebagai C228T dan C250T, berdasarkan koorinat genom hg19 (chr5, 1.295.228 C> T
kanker, seperti karsinoma sel hepato, kanker kandung
dan chr5, 1.295,25 C> T). Mutasi C228T dan C250T bersifat heterozigot, saling kemih, melanoma kulit, karsinoma tiroid, karsinoma sel
eksklusif dan membuat situs pengikatan de novo untuk faktor transkripsi keluarga skuamosa, karsinoma sel basal dan
ETS(Ara. 2a). oligodendroglioma153,162-164.
Promotor TERT yang bermutasi secara khusus merekrut GABPA faktor transkripsi
Selain memilih mutasi promotor TERT, kanker
keluarga ETS dengan kofaktornya GABPB 157. Kedua faktor transkripsi tersebut
meningkatkan transkripsi TERT dengan mekanisme yang
membentuk heterotramer yang mengikat motif pada penggerak TERT serta motif baru
beragam. Dalam beberapa kasus karsinoma hepatoseluler,
hasil mutasi. Dalam sel kanker yang menyimpan mutasi promotor TERT, mRNA
virus hepatitis B (HBV) dapat mengintegrasikan
TERT secara khusus berasal dari alel yang bermutasi 158. Konsisten dengan temuan ini,
genomnya di dekat promotor TERT, sehingga
alel tipe liar tetap ditandai dengan histon H3 Lys27 (H3K27me3) trimetilasi, yang
merupakan modifikasi histon penekan gen, sedangkan alel yang bermutasi ditandai menempatkan elemen peningkat virus di dekat promotor
dengan modifikasi histon aktif gen H3K4me2, H3K4me3 dan asetat histon H3 Lys9 tanpa mengganggu urutan pengkodean.165-168. Penataan
ulang kromosom dalam neuroblastoma memposisikan
(H3K9ac)158-160 (Ara. 2a). Jadi, mutasi pada promotor TERT dapat mencegah
pembungkaman normal promotor. Generasi mutasi promotor TERT ini dalam sel induk lokus TERT di dekat elemen peningkat yang kuat,
embrionik manusia yang mengekspresikan telomerase menghasilkan sedikit sehingga meningkatkan transkripsi TERT169,170. Lebih
peningkatan pada tingkat mRNA TERT. Namun, pada perbedaan-entiasi menjadi lanjut, dalam satu set hampir 7.000 sampel tumor, 4%
fibroblas, sel mutan mempertahankan ekspresi telo merase sedangkan garis sel kontrol memiliki amplifikasi dari gen TERT, paling sering pada
isogenik membungkam TERT.15. Mutasi promotor TERT juga dapat mengubah kontak kanker ovarium dan
jarak jauh lokus TERT untuk mendukung aktivasi transkripsi 160.
Frekuensi peningkatan regulasi TERT pada gejala kanker yang penting untuk
tumorigenesis. Berdasarkan pembatasan mutasi promotor TERT menjadi kanker
Ulasan Alam | Biologi Sel Molekuler
Tinjau

sampel adenokarsinoma paru171. Yang penting, TERT Mutasi heterozigot di T

mutasi promotor di glioblastoma dan TERT belakang- hTR) atau gen TERT umum ditemukan pada TBD da
rangements masing-masing eksklusif dengan mutasi haploinsufisiensi (penurunan kadar
dalam TERC biasanya mengurangi atau menu
di ATRX atau DAXX, yang merupakan pendamping histone itu
biasanya tidak aktif dalam sel kanker yang menggunakan a tingkat hTR. Kebanyakan mutasi TERC
telomerase-independen mekanisme telomer utama- PK / T domain hTR, yang mengikat T
tenance, disebut perpanjangan telomere alternatif urutan template untuk transkripsi te
(ALT). ALT didasarkan pada rekombinasi homolog mutasi ini merusak pengikatan TERT d
dan menggunakan break-
induced replikasi untuk mensintesis trek telomerase, tetapi pertahankan
DNA telomer. ALT pada sel kanker berakibat lama Mutasi di domain CR4 / 5
dan telomer heterogen dan kurangnya telomerase mengurangi aktivitas katalitik telomerase, d
ekspresi172. ALT adalah mekanisme umum telomer hTR – TERT asosiasi84,179. Mutasi pa
pemeliharaan pada glioblastoma, tumor neuroendokrin daerah hTR sering menyebabkan hilangnya hTR melal
dan sarkoma tertentu173. mengikat diskerin ished180. Mu
Peningkatan regulasi hTR pada kanker kurang dipelajari, TERT gen pada individu dengan TBD
tetapi beberapa bukti menunjukkan bahwa, seperti TERT, hTR adalah
trans- di seluruh bingkai bacaan terbuka,
secara skrip diaktifkan pada tumor manusia. Peningkatan mutasi somatik pada promotor TERT
dalam jumlah salinan dari gen pengkode-hTR yang dimiliki TERC kanker. Mutasi pengkodean dalam TERT biasany
terdeteksi pada berbagai jenis kanker, termasuk di untuk mengurangi aktivitas katalitik, meskipun
vix, ovarium dan kanker paru-paru174,175. Akhirnya, meskipun demikian menjaga fungsi katalitik181. Temuan in
memperkirakan bahwa lebih dari 90% kanker meningkatkan regulasi
tel- bahwa mutasi TERT dapat mengganggu asp
aktivitas omerase, kebanyakan tumor telomerase-positif kurang biologi merase, termasuk kestabilan pro
TERT mutasi promotor. Sebuah studi tentang pengurutan data perakitan atau rekrutmen ke telomer. Untuk
dari> 18.000 tumor dan cocok sam- jaringan normal gagasan, mutasi dalam domain TERT T
Ples menemukan bahwa, di antara pengekspresian
TERT tumor, 32% C- terminus mengganggu perekrutanny
membawa mutasi promotor TERT, amplifikasi gen Konsisten dengan pentingnya perekru
atau pengaturan ulang kromosom171. Pengamatan ini untuk pemeliharaan telomer, muta
menyarankan tumor yang memiliki telomerase terdeteksi telah diidentifikasi di TPP1 yang secara khusus mengga
aktivitas tetapi tidak ada mutasi TERT yang aktif harus di-upreg- tindakan dengan TERT dan mengganggu perekru
ulate telomerase oleh beberapa mekanisme lain. Satu pos- ke telomer118.
alat sible untuk memodulasi aktivitas telomerase terkait Kompleks diskerin inti (dis
untuk efek posisi telomer, cara epigenetik oleh NOP10) mengenali bahwa domain hTR H
pemendekan telomer mana yang dapat meningkatkan ekspresi penting untuk stabilitas dan pemrosesan
dari telomer-proksimal gen, seperti TERT176,177. Lebih lanjut gen pengkode diskerin mengurangi kadar dan
pekerjaan diperlukan untuk memastikan apakah ini umum yang X-linked bentuk diskeratosis congenit
mekanisme peningkatan transkripsi TERT mutasi pada NOP10 dan NHP2 tela
selama karsinogenesis. Ini juga masih harus dilihat apakah dalam bentuk resesif autosom dari diskera
sel kanker meningkatkan aktivitas telomerase dengan mekanisme lain Mutasi langka juga ditemukan pad
anisme, seperti meningkatkan perakitan, perekrutan hingga ing kofaktor terkait dyskerin NAF1, yan
telomer atau aktivitas katalitik telomerase. penurunan kadar hTR183-185. Cara umum
Kadar hTR berkurang pada TBD
yang menonaktifkan PARN186. Mutasi seperti it
Telomerase yang berkurang memicu kegagalan jaringan
penyakit. Berbeda sekali dengan peningkatan regulasi telomerase di bentuk resesif somal dari fibrosis
kanker, penurunan germline dalam fungsi telomerase sebelum anemia aplastik dan diskeratosis cong
cipitates satu set penyakit gagal jaringan yang ditandai oleh hanya terjadi di domain pengikat nuk
telomer yang sangat pendek. Penyakit ini, yang sudah diketahui dari PARN. Mutasi PARN memperlambat tingkat pe
sebagai gangguan biologi telomer (TBD), sangat luar biasa mengarah ke akumulasi relatif pre
heterogen dalam tingkat keparahannya dan dapat bermanifestasi pada penurunan global pada tingkat hTR dewasa
lahir, di masa kanak-kanak atau bahkan di usia paruh baya. Klasik mutasi resesif somal dalam gen pen
gangguan insufisiensi telomerase awalnya didefinisikan sebagai juga telah diidentifikasi pada TBD1
dyskeratosis congenita, yang bersifat multiorgan, sistemik berada di domain ulangi WD40- da
penyakit yang ditandai dengan pigmentasi kulit yang tidak normal, Protein TCAB1 dilipat oleh kompleks pen
sehingga menyebabkan hilangnya protein TCA
kuku distrofik, gagal sumsum tulang dan predisposi-
untuk kanker tertentu, termasuk kanker sel skuamosa mutasi ini secara langsung merusak m
cinoma dan leukemia178. Berdasarkan genetik dan komponen pengkodean holoenz
temuan klinis, sekarang dipahami bahwa mutasi pada
gen yang relevan dengan telomerase juga dapat menyebabkan idio
fibrosis paru patik, anemia aplastik, dan hati
fibrosis dan sirosis (Meja 1). Mutasi di setiap kom-
unsur holoenzim telomerase telah diidentifikasi.
berhasil pada individu dengan TBD dan telah memberikan wawasan
ke dalam struktur dan fungsi telomerase.
mutasi pada individu dengan TBD jug
TIN2, di CTC1 dan di pengatur perpan
helikase 1 (RTEL1), yang merupakan DNA helika
dalam pemeliharaan integritas telom
mencolok bahwa sebagian besar mutasi penyebab TBD
mengurangi level atau fungsinya, dengan demikian me
peran sentral hTR dalam fungsi telomerase.
www.nature.com/nrm
 Tinjau

Tabel 1 | Telomerase dan gen terkait telomer bermutasi pada gangguan kegagalan jaringan
Penyakit yang berhubungan dengan
gen Produk Fungsi normal hilangnya
fungsi
TERC hTR Non-coding Template RNA untuk telomer Anemia aplastik, diskeratosis congenita,
perpaduan fibrosis paru
TERT TERT Reverse transcriptase yang mengkatalisis telomer Anemia aplastik, diskeratosis congenita,
perpaduan fibrosis paru
DKC1 Diskerin Sintase pseudouridine yang mengontrol hTR Diskeratosis congenita, anemia aplastik,
pengolahan fibrosis paru
TINF2 TIN2 Protein shelterin yang menghubungkan DNA Diskeratosis congenita, anemia aplastik

mengikat protein TRF1 dan TRF2 dengan TPP1

PARN PARN Eksonuklease RNA yang membantu pematangan hTR Diskeratosis congenita, fibrosis paru

WRAP 53 TCAB1 Protein WD40 yang mengikat hTR dan mempromosikan Diskeratosis congenita

Pelipatan RNA dan lokalisasi telomerase

CTC1 CTC1 Komponen kompleks CST itu Diskeratosis congenita, Coats plus

mempromosikan replikasi DNA telomer

RTEL1 RTEL1 DNA helikase yang meningkatkan stabilitas telomer Diskeratosis congenita, fibrosis paru

selama replikasi
Nola2 NHP2 Komponen kompleks diskerin Diskeratosis congenita

Nola3 NOP10 Komponen kompleks diskerin Diskeratosis congenita

Naf1 NAF1 Komponen kompleks diskerin Fibrosis paru

ACD TPP1 Protein shelterin yang merekrut TERT ke telomer Diskeratosis congenita, anemia aplastik

ZCCHC8 ZCCHC8 Komponen penargetan exosome nuklir Fibrosis paru

kompleks
Telomerase dan gen terkait telomer yang bermutasi pada kelainan biologi telomer terdaftar dari yang paling umum hingga yang
paling tidak umum. CST, CTC1 – STN1 – TEN1; hTR, RNA telomerase manusia; PARN, poli (A) ribonuklease; RTEL1, pengatur
elongasi helikase telomer 1; TCAB1, telomerase Cajal body protein 1; TERC, komponen RNA telomerase; TERT, telomerase
reverse transcriptase; TIN2, TRF1- berinteraksi faktor inti 2; TRF1, faktor pengikatan berulang telomer 1.
Meskipun ada kemajuan
Kesimpulan dan perspektif masa depan penting, kami terus
Telomerase berevolusi untuk memberikan solusi kekurangan pemahaman
sederhana untuk replikating kromosom berakhir pada tentang elemen regulasi cis
eukariota sel tunggal, tetapi kompleks telomerase telah dan faktor trans-acting yang
diasumsikan lebih penting dalam metazoa kompleks yang mengaktifkan transkripsi
berumur panjang, seperti manusia. Tantangan mendasar TERT dalam sel progenitor
dalam mendukung pembelahan sel yang kuat untuk normal dan yang
pembaruan jaringan sekaligus mengurangi kemungkinan membungkam TERT selama
berkembangnya kanker menyebabkan meningkatnya diferensiasi. Berbagai tingkat
pentingnya telomerase pada manusia. Persyaratan untuk kendali telomerase sangat
memfasilitasi pembaruan sel sambil menekan kanker, penting karena peningkatan
dikombinasikan dengan karakteristik khusus RNP, atau penurunan aktivitas
menjelaskan kerumitan regulasi kompleks telomerase. telomerase di luar kisaran
Fitur-fitur ini menjelaskan kontrol transkripsi yang sangat sempit dikaitkan dengan
bagus dari ekspresi TERT, kebutuhan untuk secara tepat penyakit manusia. Meskipun
memproses dan menstabilkan RNA telomerase, regulasi ada kemajuan penting, kami
perakitan kompleks aktif dan regulasi perekrutan enzim ke terus kekurangan
telomer. Dalam organisme dan jaringan, sel tertentu pemahaman tentang elemen
dilisensikan untuk mengekspresikan telomerase, dan regulasi cis dan faktor trans-
jumlah telomerase bervariasi dengan status diferensiasi acting yang mengaktifkan
sel. Berbagai tingkat kendali telomerase sangat penting transkripsi TERT dalam sel
karena peningkatan atau penurunan aktivitas telomerase di progenitor normal dan yang
luar kisaran sempit dikaitkan dengan penyakit manusia. membungkam TERT selama
 diferensiasi. Berbagai tingkat kendali telomerase sangat
penting karena peningkatan atau penurunan aktivitas
telomerase di luar kisaran sempit dikaitkan dengan
penyakit manusia. Meskipun ada kemajuan penting, kami
terus kekurangan pemahaman tentang elemen regulasi cis
dan faktor trans-acting yang mengaktifkan transkripsi
TERT dalam sel progenitor normal dan yang
membungkam TERT selama diferensiasi.
Telomerase RNA pernah dianggap tidak teratur dan
diekspresikan di mana-mana. Studi tentang TBD telah
mengungkapkan tingkat baru yang mengejutkan dari
pengaturan hTR, yang melibatkan fungsi beberapa
enzim dalam memproses ujung 3-nya. Enzim ini
mengontrol tingkat pematangan hTR dan, pada
gilirannya, menentukan kondisi mapannya
Ulasan Alam | Biologi Sel Molekuler
level. Pematangan hTR ditentukan oleh kompleks dis-
kerin inti, yang mengikat domain hTR H / ACA. Dengan
demikian, evolusi domain H / ACA dalam RNA
telomerase di metazoa berfungsi untuk menentukan
mekanisme pemrosesan RNA, sambil mengatur level dan
melindungi ujung 3 'hTR. Berdasarkan pengamatan ini,
kompleks diskerin kemudian dapat dianggap sebagai
telomerase
Proses akhir RNA dan kompleks penstabil. Fitur ini secara
visual terbukti dalam struktur mikroskop elektron-cryo
telomerase manusia, yang menunjukkan kompleks
diskerin inti berada jauh dari situs katalitik TERT. Enzim
pemrosesan-hTR PAPD5 dan PARN dapat memodulasi
tingkat hTR, yang merupakan jalan terapeutik potensial
untuk individu dengan TBD. Cara potensial lainnya untuk
memodulasi aktivitas telomerase termasuk perakitan
telomerase, perekrutan ke telomer atau menggunakan
aktivator dan inhibitor katalitik.
Peningkatan regulasi telomerase hampir universal
pada berbagai jenis kanker tetapi sekarang paling baik
dipahami pada kanker dengan mengaktifkan mutasi
pada promotor TERT. Mutasi nonkode sederhana ini
membuat situs pengikatan kon-sensus baru untuk
faktor transkripsi GABP, dan dengan demikian
menargetkan GABP telah disarankan sebagai cara
untuk menghambat TERT dalam subset kanker ini.
Namun, mayoritas kanker pada manusia tidak memiliki
mutasi promotor TERT, dan oleh karena itu kendali
transkripsi TERT pada kanker masih kurang dipahami.
Kemajuan di bidang ini dapat meningkatkan
pemahaman kita tentang regulasi TERT pada kanker
dan memberikan jalan baru untuk terapi kanker.
Dipublikasikan secara online xx xx xxxx
Tinjau
1. \ Palm, W. & de Lange, T. Bagaimana shelterin melindungi
telomer mamalia. Annu. Rev. Genet. 41,
301–334 (2008).
2. \ Lazzerini-Denchi, E. & Sfeir, A. Berhenti menarik saya
string - apa yang diajarkan telomer kepada kita tentang
Respon kerusakan DNA. Nat. Rev. Mol. Biol Sel. 17,
364–378 (2016).
3. \ Grolimund, L. et al. Kromatin telomerik kuantitatif
protokol isolasi mengidentifikasi status telomer yang berbeda.
Nat. Komun.4, 2848 (2013).
4. \ Bodnar, AG dkk. Perpanjangan masa hidup sebesar
pengenalan telomerase ke dalam sel manusia normal.
Ilmu 279, 349–352 (1998).
5. \ Hayflick, L. & Moorhead, PS Budidaya serial
strain sel diploid manusia. Exp. Res sel. 25,
585–621 (1961).
6. \ Allsopp, RC dkk. Prediksi panjang telomer
kapasitas replikasi fibroblas manusia. Proc. Natl
Acad. Sci. Amerika Serikat89, 10114–10118 (1992).
7. \ Chiba, K. et al. Mutasi pada promotor
TERT gen telomerase berkontribusi pada tumorigenesis
dengan mekanisme dua langkah. Sains 357, 1416–1420
(2017).
8. \ Romanov, SR dkk. Mamalia manusia normal
sel epitel secara spontan lolos dari penuaan dan
memperoleh perubahan genom. Alam 409, 633–637
(2001).
9. \ Kiyono, T. dkk. Baik inaktivasi Rb / p16INK4a dan
Aktivitas telomerase dibutuhkan untuk mengabadikan manusia
sel epitel. Alam 396, 84-88 (1998).
10. \ Weng, NP, Levine, BL, Juni, CH & Hodes, RJ
Ekspresi teregulasi dari aktivitas telomerase pada manusia
Perkembangan dan aktivasi limfosit T. J. Exp.
Med. 183, 2471–2479 (1996).
11. \ Lee, HW dkk. Peran penting telomerase tikus di
organ yang sangat proliferatif. Alam 392, 569–574
(1998).
12. \ Wright, WE, Piatyszek, MA, Rainey, WE, Byrd, W.
& Shay, aktivitas JW Telomerase di germline manusia
dan jaringan dan sel embrio. Dev. Genet. 18,
173–179 (1996).
13. \ Thomson, JA et al. Garis sel induk embrio diturunkan
dari blastokista manusia. Sains 282, 1145–1147
(1998).
14. \ Chiu, CP dkk. Ekspresi diferensial telomerase
aktivitas pada nenek moyang hematopoietik dari orang dewasa
sumsum tulang manusia. Sel Induk 14, 239–248
(1996).
15. \ Chiba, K. et al. Promotor TERT terkait kanker
mutasi membatalkan pembungkaman telomerase. eLife 4,
e07918 (2015).
16. \ Prowse, KR & Greider, CW Developmental dan
spesifik
jaringan regulasi telomerase tikus dan
panjang telomer. Proc. Natl Acad. Sci. Amerika Serikat 92,
4818–4822 (1995).
17. \ Meier, B. et al. trt-1 adalah Caenorhabditis elegans
subunit katalitik dari telomerase. PLoS Genet. 2, e18
(2006).
18. \ Harel, I. et al. Sebuah platform untuk eksplorasi cepat
penuaan dan penyakit dalam waktu singkat secara alami
bertulang belakang. Sel 160, 1013–1026 (2015).
19. \ Pech, MF dkk. Telomerase tinggi adalah ciri khas dari
spermatogonia yang tidak berdiferensiasi dan diperlukan untuk
pemeliharaan sel induk germline jantan. Genes Dev.
29, 2420–2434 (2015).
20. \ Garbuzov, A. dkk. Pemurnian GFRα1+ dan GFRα1 -
sel punca spermatogonial menunjukkan ketergantungan pada
relung
mekanisme penentuan nasib. Stem Cell Rep.10,
553–567 (2018).
21. \ Montgomery, RK dkk. Telomerase mouse terbalik
ekspresi transcriptase (mTert) menandai siklus perlahan
sel induk usus. Proc. Natl Acad. Sci. Amerika Serikat 108,
179–184 (2011).
22. \ Lin, S. dkk. Hepatosit terdistribusi mengekspresikan
telomerase mengisi kembali hati di homeostasis dan
cedera. Nature 556, 244–248 (2018).
23. \ Artandi, SE dkk. Ekspresi telomerase konstitutif
mempromosikan karsinoma mammae pada tikus yang menua.
Proc. Natl Acad. Sci. Amerika Serikat99, 8191–8196 (2002).
24. \ Allsopp, RC, Morin, GB, DePinho, R., Harley, CB
& Weissman, IL Telomerase diperlukan untuk memperlambat
memperpendek telomer dan memperpanjang umur replikatif
HSC selama transplantasi serial. Darah 102,
517–520 (2003).
25. \ Gunes, C. & Rudolph, KL Peran telomer di
sel induk dan kanker. Sel 152, 390–393 (2013).
26. \ Aubert, dinamika G. Telomere dan penuaan. Prog. Mol.
Biol. Terjemahan Sci.125, 89–111 (2014).
27. \ Amit, M. et al. Embrio manusia yang diturunkan secara klonal
garis sel induk mempertahankan sifat majemuk dan proliferatif
potensi untuk budaya jangka panjang. Dev. Biol.
227, 271–278 (2000).
28. \ Yui, J., Chiu, CP & Lansdorp, PM Telomerase
aktivitas dalam calon sel induk dari hati janin dan
sumsum tulang dewasa. Blood 91, 3255-3262 (1998).
29. \ Morrison, SJ, Prowse, KR, Ho, P. & Weissman, IL
Aktivitas telomerase dalam sel hematopoietik adalah
terkait dengan potensi pembaruan diri. Kekebalan 5,
207–216 (1996).
30. \ Schepers, AG, Vries, R., van den Born, M.,
van de Wetering, M. & Clevers, H. Lgr5 batang usus
sel memiliki aktivitas telomerase yang tinggi dan acak
memisahkan kromosom mereka. EMBO J.30,
1104–1109 (2011).
31. \ Wick, M., Zubov, D. & Hagen, organisasi G. Genomic
dan karakterisasi promotor dari pengkodean gen
transcriptase terbalik telomerase manusia (hTERT).
Gen 232, 97–106 (1999).
32. \ Takakura, M. et al. Kloning telomerase manusia
promotor gen subunit katalitik (hTERT) dan
identifikasi urutan promotor inti proksimal
penting untuk aktivasi transkripsi di abadi
dan sel kanker. Res kanker. 59, 551–557 (1999).
33. \ Horikawa, I., Cable, PL, Afshari, C. & Barrett, JC
Kloning dan karakterisasi wilayah promotor
dari gen reverse transcriptase telomerase manusia.
Res kanker. 59, 826–830 (1999).
34. \ Wu, KJ dkk. Aktivasi langsung transkripsi TERT
oleh c-MYC. Nat. Genet. 21, 220–224 (1999).
35. \ Greenberg, RA dkk. Telomerase terbalik
gen transcriptase adalah target langsung dari c- Myc tetapi
sedang
tidak setara secara fungsional dalam transformasi seluler.
Onkogen 18, 1219–1226 (1999).
36. \ Goueli, BS & Janknecht, R. Peraturan telomerase
membalikkan aktivitas gen transkriptase ke hulu
faktor stimulasi. Onkogen 22, 8042–8047 (2003).
Kyo, S. dkk. Sp1 bekerja sama dengan c- Myc untuk
37. \ mengaktifkan
transkripsi terbalik telomerase manusia
gen transcriptase (hTERT). Res asam nukleat. 28,
669–677 (2000).
38. \ Harle-Bachor, C. & Boukamp, aktivitas P. Telomerase di
lapisan basal regeneratif dari epidermis tidak manusiawi
kulit dan pada kulit yang kekal dan berasal dari karsinoma
keratinosit. Proc. Natl Acad. Sci. Amerika Serikat 93,
6476–6481 (1996).
39. \ Gomes, NM dkk. Biologi komparatif mamalia
telomer: hipotesis tentang negara leluhur dan
peran telomer dalam penentuan umur panjang.
Penuaan Sel 10, 761–768 (2011).
40. \ Bachand, F., Kukolj, G. & Autexier, C. Ekspresi
hTERT dan hTR dalam cis menyusun kembali dan manusia
aktif
telomerase ribonukleoprotein. RNA 6, 778–784
(2000).
41. \ Weinrich, SL dkk. Rekonstitusi manusia
telomerase dengan template komponen RNA hTR
dan subunit protein katalitik hTRT. Nat. Genet.
17, 498–502 (1997).
42. \ Beattie, TL, Zhou, W., Robinson, MO &
Harrington, L. Rekonstitusi telomerase manusia
aktivitas in vitro. Curr. Biol. 8, 177–180 (1998).
43. \ Feng, J. et al. Komponen RNA manusia
telomerase. Sains 269, 1236–1241 (1995).
44. \ Blasco, MA, Funk, W., Villeponteau, B. & Greider, CW
Karakterisasi dan perkembangan fungsional
regulasi RNA telomerase tikus. Ilmu 269,
1267–1270 (1995).
45. \ Kiss, T., Fayet, E., Jady, BE, Richard, P. & Weber, M.
Biogenesis dan perdagangan intranuklir kotak manusia
C / D dan H / ACA RNP. Cold Spring Harb. Symp.
Bergalah. Biol.71, 407–417 (2006).
46. \ Mitchell, JR, Cheng, J. & Collins, K. Kotak H / ACA
RNA nukleolus kecil seperti domain pada manusia
telomerase RNA 3 ′ end. Mol. Biol Sel. 19, 567–576
(1999).
47. \ Matera, AG, Terns, RM & Terns, MP Tanpa kode
RNA: pelajaran dari nuklir kecil dan kecil
RNA nukleolus. Nat. Rev. Mol. Biol Sel. 8, 209–220
(2007).
48. \ Kim, NK, Theimer, CA, Mitchell, JR, Collins, K. &
Feigon, J. Pengaruh pseudouridylation pada struktur
dan aktivitas jepit rambut P6.1 yang secara katalitik penting
dalam RNA telomerase manusia. Res asam nukleat. 38,
6746–6756 (2010).
49. \ Nguyen, THD dkk. Struktur cryo- EM dari
terikat substrat holoenzim telomerase manusia.
Alam 557, 190–195 (2018).
50. \ Venteicher, AS et al. Telomerase manusia
protein holoenzim yang dibutuhkan untuk tubuh Cajal
lokalisasi dan sintesis telomer. Ilmu 323,
644–648 (2009).
51. \ Jamonnak, N. dkk. Yeast Nrd1, Nab3, dan Sen1
peta yang mengikat menyarankan
transcriptome-wide beberapa
peran dalam pemrosesan RNA pasca transkripsi. RNA 17,
2011–2025 (2011).
52. \ Kuehner, JN, Pearson, EL & Moore, C. Mengurai sarana
sampai akhir: penghentian transkripsi RNA polimerase II.
Nat. Rev. Mol. Biol Sel. 12, 283–294 (2011).
53. \ Noel, JF, Larose, S., Abou Elela, S. & Wellinger, RJ
Budding yeast telomerase RNA transkripsi terminasi
ditentukan oleh jalur terminasi RNA non-coding Nrd1 /
Nab3. Res asam nukleat. 40, 5625–5636 (2012).
54. \ Baillat, D. et al. Integrator, mediator multiprotein dari
pemrosesan RNA nuklir kecil, berasosiasi dengan
Pengulangan C-terminal dari RNA polimerase II. Sel
123, 265–276 (2005).
55. \ Rubtsova, MP dkk. Integrator adalah komponen kunci dari
biogenesis RNA telomerase manusia. Sci. Rep.9, 1701
(2019).
56. \ Stadelmayer, B. et al. Kompleks integrator mengatur
Jeda / pelepasan RNA polimerase II yang dimediasi
NELF dan prosestivitas pada gen pengkodean. Nat.
Komun. 5, 5531–5531 (2014).
57. \ Tudek, A. et al. Basis molekuler untuk
mengoordinasikan penghentian transkripsi dengan
degradasi RNA noncoding. Mol. Sel 55, 467–481
(2014).
58. \ Lubas, M. et al. Profil interaksi mengidentifikasi kompleks
penargetan exosome nuklir manusia. Mol. Sel 43, 624–637
(2011).
59. \ Schilders, G., van Dijk, E. & Pruijn, GJ C1D dan hMtr4p
berasosiasi dengan subunit eksosom manusia PM / Scl-100
dan terlibat dalam pemrosesan praRNA. Res asam nukleat.
35, 2564–2572 (2007).
60. \ Goldfarb, KC & Cech, TR 3 'terminal keragaman MRP
RNA dan RNA noncoding manusia lainnya
diungkapkan oleh pengurutan yang dalam. BMC Mol.
Biol. 14, 23 (2013).
61. \ Roake, CM dkk. Gangguan kinetika pematangan RNA
telomerase memicu penyakit. Mol. Sel 74, 688–700 (2019).
62. \ Tseng, CK, Wang, HF, Schroeder, MR & Baumann, P.
Kompleks H / ACA mengganggu triplex dalam prekursor
hTR untuk mengizinkan pemrosesan oleh RRP6 dan
PARN. Nat. Komun. 9, 5430 (2018).
63. \ Tseng, CK et al. Pemrosesan dan kontrol kualitas RNA
telomerase manusia. Rep. Sel 13, 2232–2243 (2015).
64. \ Bulan, DH et al. Poly (A) -specific ribonuclease (PARN)
memediasi pematangan ujung 3 komponen RNA
telomerase. Nat. Genet. 47, 1482–1488 (2015).
65. \ Henriksson, N., Nilsson, P., Wu, M., Song, H. &
Virtanen, A. Pengakuan residu adenosin oleh situs
aktif ribonuklease poli (A) spesifik. J. Biol. Chem.
285, 163–170 (2010).
66. \ Wu, M. et al. Wawasan struktural tentang mekanisme
pengikatan poli (A) dan katalitik PARN manusia. EMBO J.
24, 4082–4093 (2005).
67. \ Lardelli, RM dkk. Mutasi biallelic pada 3 ′ exonuclease
TOE1 menyebabkan hipoplasia pontocerebellar dan
mengungkap peran dalam pemrosesan snRNA. Nat. Genet.
49, 457–464 (2017).
68. \ Son, A., Park, JE & Kim, VN PARN dan TOE1
merupakan modul pematangan ujung 3 untuk RNA non-
coding nuklir. Rep. Sel 23, 888–898 (2018).
69. \ Deng, T. dkk. TOE1 bertindak sebagai eksonuklease 3 'untuk
RNA telomerase dan mengatur pemeliharaan telomer. Res
asam nukleat. 47, 391–405 (2019).
70. \ Nguyen, D. et al. Jalur pematangan ujung 3 yang
bergantung poladenilasi diperlukan untuk sintesis RNA
telomerase manusia. Rep. Sel 13, 2244–2257 (2015).
71. \ Shukla, S., Schmidt, JC, Goldfarb, KC, Cech, TR
& Parker, R. Penghambatan peluruhan RNA telomerase
menyelamatkan defisiensi telomerase yang disebabkan oleh
diskerin atau cacat PARN. Nat. Struct. Mol. Biol. 23, 286–292
(2016).
72. \ Boyraz, B. dkk. Manipulasi posttranscriptional dari TERC
membalikkan ciri molekuler penyakit telomer. J. Clin.
Menginvestasikan. 126, 3377–3382 (2016).
73. \ Fok, WC dkk. Modulasi TERC posttranscriptional oleh
penghambatan PAPD5 menyelamatkan perkembangan
hematopoietik pada diskeratosis congenita. Blood 133,
1308–1312 (2019).
74. \ Mouaikel, J., Verheggen, C., Bertrand, E., Tazi, J. &
Bordonne, R. Hypermethylation dari struktur tutup ragi
snRNA dan snoRNA membutuhkan methyltransferase
yang dilokalisasi ke nukleolus. Mol. Sel 9, 891–901
(2002).
75. \ Tang, W., Kannan, R., Blanchette, M. & Baumann, P.
Telomerase RNA biogenesis melibatkan pengikatan
sekuensial oleh kompleks Sm dan Lsm. Nature 484, 260–
264 (2012).
76. \ Chen, L. et al. Hilangnya hipermetilase TGS1 manusia
mendorong peningkatan RNA telomerase dan
pemanjangan telomer. Rep. Sel 30, 1358–1372.e5 (2020).
www.nature.com/nrm

77. \ Greider, CW & Blackburn, EH Identifikasi aktivitas
transferase terminal telomer spesifik dalam ekstrak
tetrahymena. Sel 43, 405–413 (1985).
78. \ Lingner, J. & Cech, TR Pemurnian telomerase dari euplotes
aediculatus: kebutuhan primer 3 'overhang. Proc. Natl Acad.
Sci. USA 93, 10712–10717 (1996).
79. \ Nakamura, TM dkk. Homolog subunit katalitik telomerase
dari fisi ragi dan manusia. Sains 277, 955-959 (1997).
80. \ Tesmer, VM dkk. Dua fragmen tidak aktif dari RNA integral
bekerja sama untuk merakit telomerase aktif dengan subunit
katalitik protein manusia (hTERT)
in vitro. Mol. Biol Sel. 19, 6207–6216 (1999). 81. \
Mitchell, JR & Collins, K. Telomerase manusia
aktivasi membutuhkan dua interaksi independen antara
telomerase RNA dan telomerase reverse transcriptase.
Mol. Sel 6, 361-371 (2000).
82. \ Jiang, J. et al. Struktur tetrahymena telomerase
mengungkapkan subunit, fungsi, dan interaksi yang
sebelumnya tidak diketahui. Science 350, aab4070
(2015).
83. \ Jiang, J. et al. Struktur telomerase dengan DNA telomerik.
Sel 173, 1179–1190 (2018).
84. \ Chen, JL, Opperman, KK & Greider, CW Sebuah struktur
simpul-batang yang kritis dalam domain CR4-CR5 dari
RNA telomerase mamalia. Res asam nukleat. 30, 592–597
(2002).
85. \ Robart, AR & Collins, K. Investigasi perakitan
holoenzim telomerase manusia, aktivitas, dan
prosestivitas menggunakan varian subunit terkait
penyakit. J. Biol. Chem. 285, 4375–4386 (2010).
86. \ Schnapp, G., Rodi, HP, Rettig, WJ, Schnapp, A. & Damm,
K. Protokol pemurnian afinitas satu langkah untuk
telomerase manusia. Res asam nukleat. 26, 3311–3313
(1998).
87. \ Xin, H. et al. TPP1 adalah homolog dari ciliate TEBP- β dan
berinteraksi dengan POT1 untuk merekrut telomerase.
Nature 445, 559–562 (2007).
88. \ Venteicher, AS, Meng, Z., Mason, PJ, Veenstra, TD
& Artandi, SE Identifikasi ATPases pontin dan reptin
sebagai komponen telomerase penting untuk perakitan
holoenzyme. Sel 132, 945–957 (2008).
89. \ Cohen, SB dkk. Komposisi protein telomerase manusia yang
aktif secara katalitik dari sel-sel abadi. Sains 315, 1850–
1853 (2007).
90. \ Fu, D. & Collins, K. Pemurnian kompleks telomerase
manusia mengidentifikasi faktor-faktor yang terlibat dalam
biogenesis telomerase dan regulasi panjang telomer. Mol.
Sel 28, 773–785 (2007).
91. \ Egan, ED & Collins, K. Mekanisme perakitan RNP H /
ACA yang ditingkatkan untuk RNA telomerase
manusia. Mol. Biol Sel. 32, 2428–2439 (2012).
92. \ Egan, ED & Collins, K. Biogenesis ribonukleoprotein
telomerase. RNA 18, 1747–1759 (2012).
93. \ Jady, BE, Bertrand, E. & Kiss, T. RNA telomerase manusia
dan scaRNA H / ACA kotak berbagi sinyal lokalisasi
khusus tubuh Cajal yang umum. J. Sel berbagai. 164, 647–
652 (2004).
94. \ Zhu, Y., Tomlinson, RL, Lukowiak, AA, Terns, RM
& Terns, MP Telomerase RNA terakumulasi dalam tubuh
Cajal dalam sel kanker manusia. Mol. Biol. Sel 15, 81-90 (2004).
95. \ Chang, BD et al. Fenotipe mirip penuaan
membedakan sel tumor yang mengalami penghentian
proliferasi terminal setelah terpapar agen antikanker.
Res kanker. 59, 3761–3767 (1999).
96. \ Darzacq, X. et al. Rakitan RNP bertahap di lokasi
transkripsi H / ACA RNA dalam sel manusia. J. Sel
berbagai. 173, 207–218 (2006).
97. \ Wang, C. & Meier, UT Arsitektur dan perakitan mamalia H /
ACA nukleolus kecil dan ribonukleoprotein telomerase.
EMBO J. 23, 1857–1867 (2004).
98. \ Hoareau- Aveilla, C., Bonoli, M., Caizergues- Ferrer, M.
& Henry, Y. hNaf1 diperlukan untuk akumulasi snoRNP H /
ACA kotak manusia, scaRNP, dan telomerase. RNA 12, 832–840
(2006).
99. \ Grozdanov, PN, Roy, S., Kittur, N. & Meier, UT SHQ1
diperlukan sebelum NAF1 untuk perakitan RNP nukleolus
kecil H / ACA dan telomerase. RNA 15, 1188–1197
(2009).
100. \ Holt, SE dkk. Persyaratan fungsional p23 dan Hsp90
dalam kompleks telomerase. Genes Dev. 13, 817–826
(1999).
101. \ Toogun, OA, Dezwaan, DC & Freeman, BC Pendamping
molekuler hsp90 memodulasi beberapa aktivitas
telomerase. Mol. Sel. Biol. 28, 457–467 (2008).
102. \ Keppler, BR, Grady, AT & Jarstfer, MB
Peran biokimia dari heat shock protein 90 chaperone
complex dalam membangun aktivitas telomerase manusia. J.
Biol. Chem. 281, 19840–19848 (2006).
Ulasan Alam | Biologi Sel Molekuler
103. \ Freund, A. et al. Kontrol proteostatik dari fungsi
telomerase melalui pelipatan TCAB1 yang dimediasi
TRiC. Sel 159, 1389–1403 (2014).
104. \ Cristofari, G. et al. Akumulasi RNA telomerase manusia
dalam tubuh Cajal memfasilitasi perekrutan telomerase
ke telomer dan perpanjangan telomer. Mol. Sel 27, 882–
889 (2007).
105. \ Stern, JL, Zyner, KG, Pickett, HA, Cohen, SB
& Bryan, TM Rekrutmen Telomerase membutuhkan TCAB1
dan badan cajal secara independen. Mol. Biol Sel. 32, 2384–2395
(2012).
106. \ Zhong, FL dkk. TPP1 OB- lipat domain mengontrol
pemeliharaan telomer dengan merekrut telomerase ke
ujung kromosom. Sel 150, 481–494 (2012).
107. \ Zhong, F. dkk. Gangguan perdagangan telomerase oleh
mutasi TCAB1 menyebabkan diskeratosis congenita.
Genes Dev. 25, 11–16 (2011).
108. \ Tycowski, KT, Shu, MD, Kukoyi, A. & Steitz, JA Protein
WD40 yang dilestarikan mengikat sinyal lokalisasi tubuh
Cajal dari partikel scaRNP. Mol. Sel 34, 47–57 (2009).
109. \ Schmidt, JC, Zaug, AJ & Cech, TR Pencitraan sel langsung
mengungkapkan dinamika perekrutan telomerase ke
telomer. Sel 166, 1188–1197 e1189 (2016).
110. \ Chen, L. et al. Sakelar aktivitas dalam telomerase manusia
berdasarkan konformasi RNA dan dibentuk oleh TCAB1.
Sel 174, 218–230 (2018).
111. \ Tomlinson, RL, Li, J., Culp, BR, Terns, RM & Terns,
MP A Cajal body-independent pathway untuk
perdagangan telomerase pada tikus. Exp. Res sel. 316,
2797–2809 (2010).
112. \ Brokoli, D., Smogorzewska, A., Chong, L. &
de Lange, T. Telomer manusia mengandung dua protein
yang berhubungan dengan Myb, TRF1 dan TRF2. Nat.
Genet.
17, 231–235 (1997).
113. \ Chong, L. dkk. Protein telomer manusia. Ilmu
270, 1663–1667 (1995).
114. \ Baumann, P. & Cech, TR Pot1, kemungkinan telomer
protein pengikat akhir dalam ragi fisi dan manusia.
Ilmu 292, 1171–1175 (2001).
115. \ Abreu, E. et al. TPP1 tertambat TIN2 merekrut
telomerase manusia ke telomer in vivo. Mol. Biol Sel. 30,
2971–2982 (2010).
116. \ Nandakumar, J. et al. Patch TEL dari telomer protein
TPP1 memediasi perekrutan dan prosestivitas telomerase.
Nature 492, 285–289 (2012).
117. \ Sexton, AN et al. Identifikasi genetik dan molekuler
dari tiga fungsi TPP1 manusia dalam tindakan
telomerase: rekrutmen, aktivasi, dan pengaturan titik
setel homeostasis. Genes Dev. 28, 1885–1899 (2014).
118. \ Kocak, H. et al. Sindrom Hoyeraal-Hreidarsson yang
disebabkan oleh mutasi germline di patch TEL dari telomer
protein TPP1. Genes Dev. 28, 2090–2102 (2014).
119. \ Houghtaling, BR, Cuttonaro, L., Chang, W. & Smith, S.
Hubungan molekul dinamis antara pengatur panjang telomer
TRF1 dan pelindung ujung kromosom TRF2. Curr. Biol. 14,
1621–1631 (2004).
120. \ Ye, JZ et al. Protein yang berinteraksi dengan POT1 PIP1:
pengatur panjang telomer yang merekrut POT1 ke
kompleks TIN2 / TRF1. Genes Dev. 18, 1649–1654 (2004).
121. \ Liu, D. dkk. PTOP berinteraksi dengan POT1 dan mengatur
lokalisasinya ke telomer. Nat. Biol Sel. 6, 673–680 (2004).
122. \ Kim, SH, Kaminker, P. & Campisi, J. TIN2, pengatur
baru panjang telomer dalam sel manusia.
Nat. Genet.23, 405–412 (1999).
123. \ Takai, KK, Kibe, T., Donigian, JR, Frescas, D. &
de Lange, T. Perlindungan telomer oleh TPP1 / POT1
membutuhkan
menambatkan ke TIN2. Mol. Sel 44, 647–659 (2011).
124. \ Savage, SA et al. TINF2, sebuah komponen dari
kompleks perlindungan telomer shelterin, bermutasi
pada diskeratosis congenita. Saya. J. Hum. Genet. 82,
501–509 (2008).
125. \ Walne, AJ, Vulliamy, T., Beswick, R., Kirwan, M.
& Dokal, I. Mutasi TINF2 menghasilkan telomer yang
sangat pendek: analisis kohort besar pasien dengan diskeratosis
congenita dan sindrom kegagalan sumsum tulang terkait. Blood
112, 3594–3600 (2008).
126. \ Frank, AK dkk. Subunit shelterin TIN2 memediasi
perekrutan telomerase ke telomer. PLoS Genet. 11,
e1005410 (2015).
127. \ Yang, D., He, Q., Kim, H., Ma, W. & Songyang, Z. TIN2
protein dyskeratosis congenita missense mutan rusak
sehubungan dengan telomerase. J. Biol. Chem. 286, 23022–
23030 (2011).
128. \ Frescas, D. & de Lange, T. Mutasi diskeratosis kongenita
TIN2 menyebabkan pemendekan telomer yang tidak
tergantung telomerase pada tikus. Genes Dev. 28, 153–
166 (2014).
Tinjau
129. \ Miyake, Y. et al. Kompleks mamalia seperti RPA Ctc1 –
Stn1 – Ten1 mengikat DNA untai tunggal dan melindungi
telomer secara independen dari jalur Pot1. Mol. Sel 36, 193–
206 (2009).
130. \ Surovtseva, YV et al. Komponen pemeliharaan telomer 1
yang disimpan berinteraksi dengan STN1 dan
mempertahankan ujung kromosom pada eukariota yang
lebih tinggi. Mol. Sel 36, 207–218 (2009).
131. \ Casteel, DE et al. Sebuah kofaktor DNA polimerase- α ·
primase dengan homologi untuk replikasi protein A-32
mengatur replikasi DNA dalam sel mamalia.
J. Biol. Chem.284, 5807–5818 (2009).
132. \ Chen, LY, Redon, S. & Lingner, J. CST manusia
kompleks adalah terminator aktivitas telomerase.
Alam 488, 540–544 (2012).
133. \ Nandakumar, J. & Cech, TR Menemukan akhirnya:
perekrutan telomerase ke telomer.
Nat. Rev. Mol. Biol Sel.14, 69–82 (2013).
134. \ Jady, BE, Richard, P., Bertrand, E. & Kiss, T. Perekrutan
RNA telomerase dan badan Cajal yang bergantung pada
siklus sel ke telomer manusia. Mol. Biol. Sel 17, 944–954
(2006).
135. \ Tomlinson, RL, Ziegler, TD, Supakorndej, T.,
Terns, RM & Terns, MP Seluler yang mengatur
perdagangan telomerase manusia ke telomer. Mol.
Biol. Sel 17, 955–965 (2006).
136. \ Vogan, JM dkk. Telomerase manusia yang diminimalkan
mempertahankan telomer dan menyelesaikan peran
endogen protein H / ACA, TCAB1, dan badan Cajal.
eLife 5, e18221 (2016).
137. \ Loayza, D. & de Lange, T. POT1 sebagai
transduser terminal kontrol panjang telomer
TRF1. Nature 424, 1013–1018 (2003).
138. \ Latrick, CM & Cech, TR POT1-TPP1 meningkatkan
prosestivitas telomerase dengan memperlambat disosiasi
primer dan membantu translokasi. EMBO J. 29, 924–933
(2010).
139. \ Wang, F. dkk. Kompleks telomer POT1-TPP1 adalah faktor
prosestivitas telomerase. Nature 445, 506–510 (2007).
140. \ Zaug, AJ, Podell, ER, Nandakumar, J. & Cech, TR Interaksi
fungsional antara telomer protein TPP1 dan telomerase.
Genes Dev. 24, 613–622 (2010).
141. \ Pike, AM, Strong, MA, Ouyang, JPT & Greider, CW
TIN2 berfungsi dengan TPP1 / POT1 untuk merangsang
prosestivitas telomerase. Mol. Biol Sel. 39, e00593–18
(2019).
142. \ Greider, CW & Blackburn, EH Telomer, telomerase dan
kanker. Sci. Saya. 274, 92–97 (1996).
143. \ Counter, CM et al. Pemendekan telomer yang terkait
dengan ketidakstabilan kromosom ditahan dalam sel abadi
yang mengekspresikan aktivitas telomerase. EMBO J. 11,
1921–1929 (1992).
144. \ Kim, NW et al. Asosiasi spesifik aktivitas telomerase
manusia dengan sel abadi dan kanker. Sains 266, 2011-
2015 (1994).
145. \ Takai, H., Smogorzewska, A. & de Lange, T. fokus
kerusakan DNA pada telomer disfungsional. Curr. Biol. 13,
1549–1556 (2003).
146. \ d'Adda di Fagagna, F. dkk. Respons pos pemeriksaan
kerusakan DNA pada penuaan yang diprakarsai oleh
telomer. Nature 426, 194–198 (2003).
147. \ Artandi, SE dkk. Disfungsi telomer mendorong
translokasi non-timbal balik dan kanker epitel pada tikus.
Nature 406, 641–645 (2000).
148. \ Davoli, T., Denchi, EL & de Lange, T. Kerusakan
telomer yang persisten menyebabkan bypass mitosis
dan tetraploidi. Sel 141, 81–93 (2010).
149. \ Nassour, J. et al. Kematian sel autofagik membatasi
ketidakstabilan kromosom selama krisis replikatif.
Nature 565, 659–663 (2019).
150. \ Horn, S. dkk. Mutasi promotor TERT pada melanoma
familial dan sporadis. Science 339, 959–961 (2013).
151. \ Killela, PJ et al. Mutasi promotor TERT sering terjadi
pada glioma dan sebagian tumor yang berasal dari sel
dengan tingkat pembaruan diri yang rendah. Proc. Natl
Acad. Sci. USA 110, 6021–6026 (2013).
152. \ Huang, FW dkk. Mutasi promotor TERT yang sangat
berulang pada melanoma manusia. Science 339, 957–
959 (2013).
153. \ Kinde, I. et al. Mutasi promotor TERT terjadi pada awal
neoplasia urothelial dan merupakan penanda awal penyakit
dan kekambuhan penyakit dalam urin. Res kanker. 73,
7162–7167 (2013).
154. \ Vinagre, J. dkk. Frekuensi mutasi promotor TERT pada
kanker manusia. Nat. Komun. 4, 2185 (2013).
155. \ Weinhold, N., Jacobsen, A., Schultz, N., Sander, C. & Lee,
W. Analisis luas genome dari mutasi regulasi noncoding
pada kanker. Nat Genethttps://doi.org/10.1038/ ng.3101
(2014).
Tinjau
156. \ Borah, S. et al. Kanker. Mutasi promotor TERT dan
reaktivasi telomerase pada kanker urothelial. Sains 347,
1006–1010 (2015).
157. \ Bell, RJ dkk. Kanker. Faktor transkripsi GABP secara
selektif mengikat dan mengaktifkan promotor TERT mutan
pada kanker. Sains 348, 1036–1039 (2015).
158. \ Stern, JL, Theodorescu, D., Vogelstein, B., Papadopoulos,
N. & Cech, TR Mutasi promotor TERT, beralih ke kromatin
aktif, dan ekspresi TERT monoallelic di beberapa kanker.
Genes Dev. 29, 2219–2224 (2015).
159. \ Xi, L., Schmidt, JC, Zaug, AJ, Ascarrunz, DR
& Cech, TR Strategi penyuntingan genom dua langkah yang
baru dengan CRISPR-Cas9 memberikan wawasan baru tentang
aksi telomerase dan ekspresi gen TERT. Genome Biol. 16, 231
(2015).
160. \ Akincilar, SC et al. Interaksi kromatin jarak jauh
mendorong aktivasi promotor TERT mutan. Cancer
Discov. 6, 1276–1291 (2016).
161. \ Killela, PJ dkk. Mutasi promotor TERT sering terjadi pada
glioma dan sebagian tumor yang berasal dari sel dengan
tingkat pembaruan diri yang rendah. Proc. Natl Acad. Sci.
USA 110, 6021–6026 (2013).
162. \ Nault, JC dkk. Frekuensi telomerase tinggi
mutasi somatik promotor reverse-transcriptase pada
karsinoma hepatoseluler dan lesi preneoplastik. Nat.
Komun. 4, 2218 (2013).
163. \ Shain, AH et al. Evolusi genetik melanoma dari lesi
prekursor. N. Engl. J. Med. 373, 1926–1936 (2015).
164. \ Heidenreich, B., Rachakonda, PS, Hemminki, K. &
Kumar, R. mutasi promotor TERT dalam
perkembangan kanker. Curr. Opin. Genet. Dev. 24,
30–37 (2014).
165. \ Ferber, MJ dkk. Integrasi virus hepatitis B (HBV) dan
human papillomavirus (HPV) ke dalam gen human
telomerase reverse transcriptase (hTERT) pada kanker hati
dan serviks. Onkogen 22, 3813-3820 (2003).
166. \ Paterlini- Bréchot, P. et al. Mutagenesis insersi terkait virus
hepatitis B sering terjadi pada kanker hati manusia dan
berulang kali menargetkan gen telomerase manusia.
Onkogen 22, 3911-3916 (2003).
167. \ Bellon, M. & Nicot, C. Peraturan telomerase dan telomer:
virus tumor manusia mengambil kendali. J. Natl Cancer
Inst. 100, 98–108 (2008).
168. \ Kawai- Kitahata, F. et al. Analisis komprehensif mutasi
dan integrasi virus hepatitis B pada karsinoma
hepatoseluler dengan gambaran klinikopatologi. J.
Gastroenterol. 51, 473–486 (2016).
169. \ Valentijn, LJ et al. Pengaturan ulang TERT sering
terjadi pada neuroblastoma dan mengidentifikasi tumor
agresif. Nat. Genet. 47, 1411–1414 (2015).
170. \ Peifer, M. et al. Aktivasi telomerase oleh pengaturan
ulang genom di neuroblastoma risiko tinggi. Nature 526,
700–704 (2015).
171. \ Barthel, FP et al. Analisis sistematis panjang telomer
dan perubahan somatik pada 31 jenis kanker. Nat.
Genet. 49, 349–357 (2017).
172. \ Pickett, HA & Reddel, RR Mekanisme aktivitas molekuler
dan derepresi pemanjangan alternatif telomer. Nat. Struct.
Mol. Biol. 22, 875–880 (2015).
173. \ Dilley, RL & Greenberg, RA ALTernative pemeliharaan
telomer dan kanker. Trends Cancer 1, 145–156 (2015).
174. \ Soder, AI et al. Amplifikasi, peningkatan dosis dan
ekspresi in situ dari gen telomerase RNA pada kanker
manusia. Onkogen 14, 1013-1021 (1997).
175. \ Sugita, M. et al. Definisi molekuler dari domain amplifikasi
kecil dalam 3q26 pada tumor serviks, ovarium, dan paru.
Genet Kanker. Sitogenet. 117, 9–18 (2000).
176. \ Yuan, X., Larsson, C. & Xu, D. Mekanisme yang
mendasari aktivasi transkripsi TERT dan aktivitas
telomerase pada kanker manusia: aktor lama dan pemain
baru. Onkogen 38, 6172–6183 (2019).
177. \ Kim, W. dkk. Pengaturan TERT gen telomerase
manusia oleh efek posisi telomer- lebih lama
jarak (TPE-OLD): implikasi untuk penuaan dan
kanker. PLoS Berbagai. 14, e2000016 (2016).
178. \ Armanios, M. & Blackburn, EH Sindrom telomer. Nat.
Rev. Genet. 13, 693–704 (2012).
179. \ Brown, Y. et al. Persimpangan tiga arah yang kritis
dipertahankan pada RNA ragi yang sedang bertunas dan
telomerase vertebrata. Res asam nukleat. 35, 6280–6289
(2007).
180. \ Trahan, C. & Dragon, F. Dyskeratosis congenita mutasi
dalam domain H / ACA dari RNA telomerase manusia
mempengaruhi perakitannya menjadi pra-RNP. RNA 15,
235–243 (2009).
181. \ Zaug, AJ, Crary, SM, Jesse Fioravanti, M., Campbell, K.
& Cech, TR Banyak varian penyakit terkait hTERT
mempertahankan aktivitas enzimatik telomerase tinggi.
Res asam nukleat. 41, 8969–8978 (2013).
182. \ Mitchell, JR, Wood, E. & Collins, K. Telomerase
komponen yang rusak dalam penyakit manusia dyskeratosis
congenita. Nature 402, 551–555 (1999).
183. \ Vulliamy, TJ et al. Mutasi pada dyskeratosis congenita:
dampaknya pada panjang telomer dan keragaman
presentasi klinis. Blood 107, 2680–2685 (2006).
184. \ Stanley, SE dkk. Mutasi hilangnya fungsi pada faktor
biogenesis RNA NAF1 merupakan predisposisi untuk
fibrosis-emfisema paru. Sci. Terjemahan Med. 8, 351ra107
(2016).
185. \ Walne, AJ et al. Heterogenitas genetik pada autosomal
recessive dyskeratosis congenita dengan satu subtipe akibat
mutasi pada protein NOP10 terkait telomerase.
Bersenandung. Mol. Genet. 16, 1619–1629 (2007).
186. \ Stuart, BD et al. Urutan exome menghubungkan mutasi di
PARN dan RTEL1 dengan fibrosis paru familial dan
pemendekan telomer. Nat. Genet. 47, 512–517 (2015).
187. \ Batista, LF et al. Pemendekan dan hilangnya telomer
pembaruan diri pada diskeratosis congenita diinduksi sel
induk berpotensi majemuk. Nature 474, 399–402 (2011).
188. \ Walne, AJ et al. Mutasi pada kompleks capping telomer
pada kegagalan sumsum tulang dan sindrom terkait.
Haematologica 98, 334–338 (2013).
189. \ Walne, AJ, Vulliamy, T., Kirwan, M., Plagnol, V. & Dokal,
I. Mutasi konstitusional di RTEL1 menyebabkan
diskeratosis congenita parah. Saya. J. Hum. Genet. 92, 448–
453 (2013).
190. \ Vulliamy, T. et al. Komponen RNA telomerase bermutasi
pada diskeratosis congenita autosom dominan. Nature 413,
432–435 (2001).
191. \ Vulliamy, T., Marrone, A., Dokal, I. & Mason, PJ Asosiasi
antara anemia aplastik dan mutasi pada telomerase RNA.
Lancet 359, 2168–2170 (2002).
192. \ Armanios, MY et al. Mutasi telomerase pada keluarga
dengan fibrosis paru idiopatik. N. Engl. J. Med. 356, 1317–
1326 (2007).
193. \ Yamaguchi, H. et al. Mutasi pada TERT, gen untuk
telomerase reverse transcriptase, pada anemia aplastik. N.
Engl. J. Med. 352, 1413–1424 (2005).
194. \ Armanios, M. et al. Haploinsufisiensi telomerase reverse
transcriptase menyebabkan antisipasi pada diskeratosis
congenita autosomal dominan. Proc. Natl Acad. Sci. USA
102, 15960–15964 (2005).
195. \ Heiss, NS dkk. Diskeratosis congenita terkait-X
disebabkan oleh mutasi pada gen yang sangat
terkonservasi dengan fungsi nukleolus yang diduga. Nat.
Genet. 19, 32–38 (1998).
196. \ Alder, JK et al. Kegunaan diagnostik dari pengujian
panjang telomer dalam pengaturan berbasis rumah sakit.
Proc. Natl Acad. Sci. USA 115, E2358 – e2365 (2018).
197. \ Anderson, BH et al. Mutasi pada CTC1, menyandikan
komponen pemeliharaan telomer 1, menyebabkan Coats
plus. Nat. Genet. 44, 338–342 (2012).
198. \ Vulliamy, T. et al. Mutasi pada komponen telomerase
NHP2 menyebabkan sindrom penuaan dini diskeratosis
congenita. Proc. Natl Acad. Sci. USA 105, 8073–8078
(2008).
199. \ Guo, Y. et al. Kegagalan sumsum tulang yang diturunkan
terkait dengan mutasi germline ACD, gen yang mengkode
protein telomer TPP1. Blood 124, 2767–2774 (2014).
200. \ Gable, DL et al. ZCCHC8, komponen penargetan eksosom
nukleus, bermutasi pada fibrosis paru familial dan
diperlukan untuk pematangan RNA telomerase. Genes Dev.
33, 1381–1396 (2019).
Ucapan Terima Kasih
Pekerjaan ini didukung oleh hibah NIH CA197563 dan AG056575
kepada SEACMR didukung oleh Hibah Pelatihan MSTP
GM007365 dan oleh Gerald J. Lieberman Fellowship.
Kontribusi penulis
Penulis memberikan kontribusi yang sama untuk semua aspek
artikel.
Minat yang bersaing
Penulis menyatakan tidak ada kepentingan yang bersaing.
Catatan penerbit
Springer Nature tetap netral sehubungan dengan klaim yurisdiksi
dalam peta yang diterbitkan dan afiliasi kelembagaan.
© Springer Nature Limited 2020
www.nature.com/nrm