Detección de actividad antimicrobiana en bacterias marinas frente a

bacterias patógenas humanas

Gladys Pérez de la FI, Elsie Iglesias p2, Lourdes Grañal, Teresita Morales2, Alfredo Alfaro2

1 Instituto de Oceanologfa. Ciudad de La Habana, Cuba.

2 Instituto Finlay. Centro de Investigación-Producción de Vacunas y Sueros. Ciudad de La Habana, Cuba.

En el presente estudio se analizó la capacidad de producción de sustancias antimicrobianas por microorganismos

pertenecientes a la Colección de Bacterias Marinas del Instituto de Oceanología, frente a bacterias patógenas
humanas. Se utilizó la técnica de difusión en agar, empleando bloques de agar con el microorganismo patógeno a
evaluar. El 73% de las cepas marinas evaluadas produjeron sustancias capaces de inhibir el crecimiento de al menos
uno de los gérmenes patógenos estudiados (Neisseria meningitidis serogrupos A, B Y C, Streptococcus pneumoniae
serotipos 14, 6B Y 19F, Salmonella typhi y Corynebacterium diphtheriael. Esta última cepa resultó la más sensible.
Los resultados obtenidos sugieren la posible utilización de estas bacterias o sus compuestos antibacterianos en el
tratamiento de algunas enfermedades del hombre.
Palabras claves: bacterias, actividad antimicrobiana.

Introducción Materiales y Métodos

La mayoría de los antibióticos de origen microbiano se Microorganismos
obtienen de bacterias terrestres. Sin embargo, si se tiene en
Las bacterias evaluadas en esta investigación (88 cepas), se
cuenta la -
epidemia -
(11 del creciente aumento de aislaron en aguas y sedimentos de la plataforma insular de
resistencia desarrollada por microorganismos patógenos a Cuba yaguas oceánicas adyacentes, y pertenecen a la
los antibióticos comerciales; se hace cada vez más Colección de Bacterias Marinas del Instituto de Oceanología
necesaria la búsqueda de nuevos antibióticos y con ello la de Cuba, donde se conservan por subcultivos bajo aceite
exploración de fuentes tradicionalmente no explotadas para mineral estéril (1 61. Estas cepas fueron capaces de inhibir el
estos fines. crecimiento de la mayoría de los gérmenes reveladores de
actividad antimicrobiana ensayados por Pérez en 1995 (17).
Las bacterias marinas se reconocen, no sólo por
Las bacterias patógenas . humanas utilizadas fueron:
desempeñar un papel importante en la ecología del mar,
Neisseria meningitidis serogrupos A, B y C, Streptococcus
sino que por su extensión y diversidad también constituyen
pneumoniae serotipos 14, 6 B y 19 F, Salmonel/a typhi y
un recurso potencial de nuevas sustancias antibióticas (21.
Corynebacterium diptheriae de la Colección de Cultivos del
Este potencial es más importante debido a que las formas
Instituto Finlay. Todas las cepas de referencia, con
de vida marinas han evolucionado y se exponen a
excepción de Neisseria meningitidis serogrupos B (cepa
condiciones ambientales diferentes a las que habitan en el salvaje), estaban conservadas en Skim Milk por liofilización
medio terrestre. Estas diferencias hacen que las especies y congelación a -70 DC.
marinas produzcan moléculas totalmente nuevas (31.
Prueba de susceptibilidad
Numerosas investigaciones destacan la producción de
La presencia de actividad antimicrobiana se determinó por el
sustancias antimicrobianas por bacterias marinas (4, 5, 6, método de difusión en agar, mediante el empleo de bloques
7, 8, 9, 101. Algunas sugieren que éstas podrían ser de de agar con cultivos de bacterias marinas. Se utilizaron
gran utilidad en el control de enfermedades, tanto en bloques de 0,5 cm de diámetro y 0,2 cm de alto con
acuicultura (11, 12, 131 como en patología humana (14, cultivos de 120 horas de incubación, dispuestos de forma
151. equidistante en una placa petri de agar inoculada por
diseminación con la bacteria patógena a evaluar.
El presente trabajo tiene como objetivo principal determinar Posteriormente, la placa se colocó en refrigeración
la capacidad de inhibición que presentan sustancias (predifusión de 2-4 horas a 5 DC) y finalmente se incubó a
provenientes de bacterias marinas, frente a un grupo de 28 DC durante 24, 48 y 72 horas, de acuerdo con las
bacterias patógenas humanas. condiciones de cultivo del germen revelador (18).

2 VacciMonitor, febrero de 1999

Los medios de cultivo utilizados se presentan en la Tabla 1.

Tabla 1. Medios de cultivo empleados para el crecimiento y mantenimiento de los microorganismos

utilizados en este estudio

Medio No. 6 bacterias marinas de la CBM 19

Medio agar Mueller- Hinton N. meningitidis serogrupos A, B, e 20

Medio BHI S. pneumoniae serotipos 14, 6B Y 19 21

Medio Loeffler C. diphtheriae 22

Medio agar nutriente S. typhi 23

Lectura e interpretación:

La presencia de zonas claras de inhibición del crecimiento En comparación con estudios similares (7, 8, 10 12, 14,
alrededor de los bloques de agar con los cultivos a evaluar 15), en esta investigación presentaron actividad
antimicrobiana un mayor número de cepas, lo que evidencia
(halos de inhibición > 0,1 cm), revelaron la producción de
el alto potencial biomédico de la microbiota marina
sustancias antibacterianas provenientes de las bacterias
representada en la Colección de Bacterias Marinas del
marinas.
Instituto de Oceanología.

Resultados y Discusión En cuanto al amplio espectro de actividad desarrollado por

las cepas marinas, una (1 %) inhibió el crecimiento de todas
Los resultados de este estudio se presentan en la Tabla 2. las bacterias patógenas probadas, 5 cepas (6%) contra
Se observa que 63 cepas marinas (73%) fueron capaces de siete o más, 8 (9%) frente a seis o más, 9 (10%) contra
inhibir el crecimiento de al menos uno de los gérmenes cinco o más, 16 (18%) frente a cuatro o más, 23 (26%)
patógenos evaluados. contra tres o más y 31 (35%) frente a dos o más (Tabla 2).

Tabla 2. Espectro de actividad de las cepas productoras de sustancias antimicrobianas evaluadas

frente a las bacterias patógenas de humanos
2 2 2 3 4
14 68 19F

VacciMonitor, Año 8 No. 2 3

I

Tabla 2. Espectro de actividad de las cepas productoras de sustancias antimicrobianas evaluadas

frente a las bacterias patógenas de humanos (Continuación)

1 1 2 I 3 I 4
Cepas de la Colección de Bacterias Marinas A B 19F

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CBM 113 Bacillus sp. - - - - - -
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CBM 117 Bacillus sp. - - - -
CBM 119 Bacillus s, - - - -
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CBM122 Bacilluss,
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CBM 140_Bacillus sp. - - - - -
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CBM 163 Bacilo Gram - - - - -
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4 VacciMonitor, febrero de 1999

 Tabla 2. Espectro de actividad de las cepas productoras de sustancias antimicrobianas evaluadas
frente a las bacterias patógenas de humanos (Continuación)
1 1 1 2 2 2 3
A B e 14 6B I 19F

Leyenda:
Neisseria meningitidis serogrupo A: 1-A Streptococcus pneumoniae serotipo 19F: 2-19
Neisseria meningitidis serogrupo B: 1-B Salmonella typhi: 3
Neisseria meningitidis serogrupo C: 1-C Corynebacterium diphtheriae: 4
Streptococcus pneumoniae serotipo 14: 2-14 Presencia de halo de inhibición: +
Streptococcus pneumoniae serotipo 6B: 2-6B Ausencia de halo de inhibición: -
El 50% de las bacterias marinas estudiadas mostraron diphtheriae, resultando ésta la cepa patógena más sensible
actividad antimicrobiana contra Corynebacterium (Tabla 3).

Tabla 3. Número y porcentajes de cepas marinas que presentaron actividad antimicrobiana

frente a las cepas patógenas humanas

VacciMonitor, Año 8 No. 2 5

 El descubrimiento y aislamiento de bacterias marinas efectivos, debido a que como consecuencia del uso y abuso
productoras' de sustancias antimicrobianas ha dado de los antibióticos los microorganismos desarrollan nuevas
definitivamente importancia al fenómeno de antagonismo formas de resistencia, se impone la necesidad de explorar
microbiano en el medio marino. Este hecho pudiera indicar ambientes no tradicionalmente explotados para estos fines,
que las bacterias marinas desempeñan un papel como lo es el medio marino.
determinante en el carácter autodepurador que se la ha
Las bacterias marinas productoras de sustancias
adjudicado al mar, como ya han sugerido y comprobado
antibacterianas detectadas en esta investigación
otros investigadores (5, 6, 24).
constituyen una fuente potencial de nuevas sustancias de
No obstante, como señala Lodeiros y colaboradores en interés para la medicina. El verdadero valor de estos
1988 (131. las características físico-químicas del mar suelen organismos debe esperar por los estudios químico-
ser adversas a microorganismos de origen telúrico, lo cual biológicos correspondientes de las sustancias
contribuye a determinar dicho carácter y gran parte del antimicrobianas producidas por las bacterias de la Colección
mismo se debe a sustancias no sólo producidas por de Bacterias Marinas del Instituto de Oceanología.
bacterias o microorganismos en general, sino también por
organismos superiores desde el punto de vista sistemático, Conclusiones
lo cual es constatado por García-Tello y Cedeño en 1975
(25). El 73% de las cepas estudiadas frente a bacter~as patógenas
humanas presentó actividad contra al menos un germen y el
I Dada la tendencia actual de las empresas transnacionales 1% frente a los ocho patógenos ensayados.

I
I productoras de medicamentos de buscar antibióticos más Corynebacterium diphtheriae resultó la más sensible.

I
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6 VacciMonitor, febrero de 1999

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Detection of Antimicrobial Activity against Human Pathogenic Bacteria from Marine Bacteria

Abstract

In the present study the production of antimicrobial
was analyzed using the agar diffusion method.
substances against the growth of at least one
Streptococcus pneumoniae serotypes 14, 68 and
diphtheriae was the most sensitive. The results
substances in the prevention and control of human
substances against human pathogen bacteria in different marine bacteria
It was determined that 73% of the evaluated strains yield inhibitory
pathogenic bacteria (Neisseria meningitidis, serogroups A, 8 and C;
19F, Salmone/la typhi y Corynebacterium diphtheriae). Corynebacterium
suggest the possibility of using marine bacteria or their antibacterial
disease.

Key Words: bacteria, antimicrobial activity.

Recíbído:junio/98 Aprobado:enero/99