PENGUJIAN AFLATOKSIN PADA KACANG TANAH

SECARA KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS (KLT)

DI LABORATORIUM SERVIS SEAMEO BIOTROP

LAPORAN PRAKTEK LAPANG

Oleh :
PHILENA NISIVIAN
B.1810340

JURUSAN TEKNOLOGI PANGAN DAN GIZI

FAKULTAS TEKNIK DAN ILMU PANGAN HALAL
UNIVERSITAS DJUANDA BOGOR
BOGOR
2021
PHILENA NISIVIAN
B.1810340

PENGUJIAN AFLATOKSIN PADA KACANG TANAH SECARA

KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS (KLT) DI LABORATORIUM SERVIS SEAMEO
BIOTROP
 PENGUJIAN AFLATOKSIN PADA KACANG TANAH
SECARA KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS (KLT)
DI LABORATORIUM SERVIS SEAMEO BIOTROP

Oleh :
PHILENA NISIVIAN
B.1810340

Laporan Praktek Lapang Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar
Sarjana Teknologi Pertanian pada Jurusan Teknologi Pangan dan Gizi,
Fakultas Teknik Dan Ilmu Pangan Halal, Universitas Djuanda Bogor

JURUSAN TEKNOLOGI PANGAN DAN GIZI

FAKULTAS TEKNIK DAN ILMU PANGAN HALAL
UNIVERSITAS DJUANDA BOGOR
BOGOR
2021
 UNIVERSITAS DJUANDA BOGOR
FAKULTAS TEKNIK DAN ILMU PANGAN HALAL
JURUSAN TEKNOLOGI PANGAN DAN GIZI

PENGUJIAN AFLATOKSIN PADA KACANG TANAH SECARA

KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS (KLT) DI LABORATORIUM SERVIS
SEAMEO BIOTROP

Oleh :
PHILENA NISIVIAN
B.1810340

Menyetujui,
Bogor, 18 November 2021

Noli Novidahlia, Ir., M.Si Santi Ambarwati, M.Si.

Dosen Pembimbing Pembimbing Lapang
 KATA PENGANTAR

Alhamdulillah, Puji dan syukur atas segala rahmat dan hidayah yang telah Allah
SWT berikan sehingga penulis dapat menyelesaikan Laporan Praktek Lapang yang
berjudul “Pengujian Aflatoksin Pada Kacang Tanah Secara Kromatografi Lapis Tipis
(KLT) Di Laboratorium Servis Seameo Biotrop” ini. Melalui laporan ini penulis
mengucapkan terima kasih kepada :
1. H. Amar Maruf, Ir., M.Si, sebagai Dekan Fakultas Teknik Dan Ilmu pangan
Halal
2. Tiana Fitrilia, S.Pd., M.Si, sebagai Ketua Jurusan Teknologi Pangan dan Gizi
3. Rosy Hutami, S.TP., M.Si, sebagai Dosen Pembimbing Akademik
4. Dr Zulhamsyah Imran, sebagai Direktur SEAMEO BIOTROP
5. Noli Novidahlia, Ir., M.Si, sebagai Dosen Pembimbing Lapang
6. Santi Ambarwati, M.Si., sebagai Pembimbing Lapang
7. Kedua Orang Tua penulis, atas perhatian dan dukungannya
8. Semua karyawan kerja selama melaksanakan Praktek Lapang di SEAMEO
BIOTROP
9. Rekan TPG 2018 Febriani Nadya E.P., Riska Yanuarningsih, Rijal Nur R., Mia
Hermiyanti yang selalu menyemangati
10. TU FIPHAL dan teman-teman Fakultas Teknik Dan Ilmu Pangan Halal,
Universitas Djuanda Bogor yang namanya tidak dapat disebutkan satu persatu.
Penulis menyadari bahwa laporan ini masih memerlukan perbaikan dan
penyempurnaan. Oleh sebab itu, kritik dan saran yang membangun sangat diharapkan
oleh penulis. Penulis berharap laporan ini dapat bermanfaat dan membantu
memberikan informasi tentang uji aflatoksin pada sampel kacang tanah.

Bogor, 18 November 2021

Penulis

i
 DAFTAR ISI

Halaman
KATA PENGANTAR.............................................................................................................i
DAFTAR ISI...........................................................................................................................ii
DAFTAR TABEL..................................................................................................................iv
DAFTAR GAMBAR..............................................................................................................v
DAFTAR LAMPIRAN.........................................................................................................vi
I. PENDAHULUAN...............................................................................................................1
A. Latar Belakang...........................................................................................................1
B. Tujuan.........................................................................................................................2
II. KEADAAN UMUM INSTANSI.......................................................................................3
A. Sejarah dan Perkembangan SEAMEO....................................................................3
B. Struktur Organisasi SEAMEO.................................................................................5
C. Sejarah Singkat SEAMEO BIOTROP.....................................................................9
D. Visi, Misi, dan Tujuan SEAMEO BIOTROP........................................................10
E. Ruang Lingkup SEAMEO BIOTROP....................................................................10
F. Fasilitas.....................................................................................................................11
G. Lokasi....................................................................................................................12
H. Ketenagakerjaan..................................................................................................12
I. Sistem Manajemen Mutu Laboratorium................................................................13
III. PENGUJIAN AFLATOKSIN PADA KACANG TANAH.........................................15
A. Analisa Dengan KLT...............................................................................................15
B. Pengujian Aflatoksin Sampel Kacang Tanah Dengan Metode TPI (Tropical
Products Institute).............................................................................................................18
C. Perhitungan Kandungan Aflatoksin.......................................................................20
IV. PEMBAHASAN.............................................................................................................21
A. Hasil...........................................................................................................................21
B. Pembahasan..............................................................................................................21
V. KESIMPULAN DAN SARAN........................................................................................27
A. Kesimpulan...............................................................................................................27
B. Saran.........................................................................................................................27
DAFTAR PUSTAKA...........................................................................................................28
LAMPIRAN.........................................................................................................................30
 DAFTAR TABEL

Halaman
1.Persyaratan Manajemen dan Teknis Sesuai ISO/IEC17025:2017......................................13
2.Data Hasil Pengujian Aflatoksin Dan Dibandingkan dengan SNI 7385:2009.....................21
 DAFTAR GAMBAR

Halaman
1. Chamber.............................................................................................................................15
2. Proses Spotting...................................................................................................................16
3. Proses elusi........................................................................................................................17
4. Struktur Aflatoksin.............................................................................................................22
 DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
1.Struktur Organisasi SEAMEO BIOTROP...........................................................................31
2. Struktur Organisasi Laboratorium Servis SEAMEO BIOTROP........................................32
3. Bagan Kerja.......................................................................................................................33
4. Data Perhitungan................................................................................................................35
5. Foto Dokumentasi Kegiatan Praktek Lapang.....................................................................36
 I. PENDAHULUAN

A. Latar Belakang

Indonesia merupakan negara beriklim tropis dengan suhu dan kelembapan

relatif yang menguntungkan bagi pertumbuhan mikroba. Masalah keamanan
pangan yang diakibatkan oleh kontaminasi mikroba masih menjadi masalah utama
bagi banyak pihak. Kontaminasi pangan oleh mikroba bisa berupa bakteri, virus,
kapang, ganggang, protozoa dan banyak lagi (Winiati et.al., 2012). Mikroba
tersebut dapat tumbuh karena bahan pangan memiliki sumber nutrisi yang
dibutuhkan dan lingkungan yang sesuai untuk mereka hidup dan berkembang.
Keberadaan kapang pada pangan ada yang bersifat menguntungkan dan ada juga
yang merugikan. Kapang yang merugikan dapat menurunkan mutu pangan dan
memproduksi toksin yang berbahaya jika dikonsumsi oleh manusia maupun
hewan. Salah satunya adalah aflatoksin, metabolit sekunder bersifat racun yang
dihasilkan oleh beberapa spesies kapang genus Aspergillus.
Kontaminasi aflatoksin pada pangan dan bahan pangan memerlukan perhatian
khusus, hal ini dikarenakan metabolit sekunder dari beberapa galur Aspergillus
flavus, Aspergillus paraciticus, dan Aspergillus nomius yang bersifat toksik baik
bagi hewan maupun manusia. Sifat toksik itu disebabkan oleh sifat karsinogenik,
hepatotoksik, dan mutagenik dari senyawa tersebut (Kasno, 2004). IARC
(International Agency Research on Cancer) yaitu badan riset kanker internasional
mengklasifikasikan aflatoksin sebagai kelas kesatu penyebab kanker pada
manusia, terutama aflatoksin jenis B1 (Kennedy, 2003).
Demi mempertimbangkan potensi bahaya pada kesehatan hewan dan manusia,
diperlukan penataan terhadap regulasi keamanan pangan dan pemantauan tingkat
aflatoksin terhadap batas maksimum yang telah ditentukan. Batas maksimum
aflatoksin pada kacang tanah dan produk olahannya berdasarkan SNI 7385:2009
yaitu, 15 ppb untuk AFB1, dan 20 ppb untuk total aflatoksin sedangkan
berdasarkan Peraturan BPOM NOMOR 8 TAHUN 2018 tentang batas maksimum

1
cemaran kimia dalam pangan olahan yaitu, 15 ppb untuk AFB1, dan 20 ppb untuk
total afla-
 2

toksin. Untuk mengetahui tingkat keamanan kacang tanah dan produk olahannya
maka perlu dilakukan pengujian aflatoksin di laboratorium. Laboratorium Pangan
dan Pakan SEAMEO BIOTROP merupakan salah satu laboratorium yang dapat
menguji kandungan aflatoksin pada bahan pangan maupun produk olahannya.

B. Tujuan

1. Tujuan Umum
a. Untuk memenuhi salah satu persyaratan dalam menyelesaikan jenjang
program pendidikan strata satu (S-1) di Fakultas Ilmu Pangan Halal
Universitas Djuanda Bogor.
b. Untuk meningkatkan pengetahuan, kemampuan, pengalaman serta
menerapkan ilmu yang diperoleh dalam bidang disiplin Teknologi Pangan
dan Gizi yang dapat dipergunakan dalam dunia kerja.
c. Agar mahasiswa mampu mengintegrasikan kemampuan akademik dan
kemampuan analisis aflatoksin pada kacang tanah dan produk olahannya di
laboratorium pangan dan pakan SEAMEO BIOTROP.
2. Tujuan Khusus
Untuk mempelajari proses pengujian aflatoksin pada kacang tanah dan produk
olahannya menggunakan metode kromatografi Lapis Tipis (KLT) di
Laboratorium Pangan dan Pakan SEAMEO BIOTROP.
 II. KEADAAN UMUM INSTANSI

A. Sejarah dan Perkembangan SEAMEO

South East Asian Minister of Education Organization (SEAMEO) telah berdiri

sejak 30 November 1965. Lembaga ini merupakan suatu organisasi kerja sama
antar negara ASEAN dalam bidang pendidikan, ilmu pengetahuan dan
kebudayaan. Dengan berdirinya SEAMEO maka terbentuklah pusat-pusat studi di
negara-negara Asia Tenggara. SEAMEO BIOTROP (South East Asian Regional
Centre for Tropical Biology) adalah salah satu dari lembaga dibawah naungan
SEAMEO.
Dalam menjalankan roda organisasinya, SEAMEO mempunyai sekretariat
yaitu SEAMES (South East Asian Minister of Education Secretariate) yang
berlokasi di Bangkok, Thailand. SEAMES diketuai oleh seorang Presiden, yang
merupakan salah satu Menteri Pendidikan anggota SEAMEO yang dipilih setiap
tahun. SEAMES mempunyai kewenangan untuk menentukan arah serta ketentuan
lain yang penting bagi SEAMEO dan mengadakan sidang setahun sekali.
SEAMEO mempunyai beberapa pusat antara lain :
1. SEAMEO Regional Centre for Tropical Biology (BIOTROP).
2. SEAMEO RegionalCentre for History and Tradition (CHAT).
3. SEAMEO Regional Centre for Lifelong Learning (CELL).
4. SEAMEO Regional Centre for Education Innovation and Technology
(INNOTECH).
5. SEAMEO Regional Centre for Quality Improvement of Teachers and
Education Personnel (QITEP) in Language.
6. SEAMEO Regional Centre for Quality Improvement of Teachers and
Education Personnel (QITEP) in Mathematics.
7. SEAMEO Regional Centre for Quality Improvement of Teachers and
Education Personnel (QITEP) in Science.
8. SEAMEO Regional Centre for Education Science and Mathematics
(RESCAM).

3
9. SEAMEO Regional Language Centre (RELC).

4
 4

10. SEAMEO Regional Centre for Graduate Study in Research Agriculture

(SEARCA).
11. SEAMEO Regional Training Centre (RETRAC).
12. SEAMEO Regional Centre for Higher Education (RIHED).
13. SEAMEO Regional Centre for Food and Nutrition (RECFON).
14. SEAMEO Regional Centre for Archeology and Fine Arts (SPAFA).
15. SEAMEO Regional Tropical Medicine and Public Health Network for
Microbiology, Parasitology and Entomology (TROPMED).
16. SEAMEO Regional Tropical Medicine and Public Health Network Regional
Centre for Publich Health (TROPMED).
17. SEAMEO Regional Tropical Medicine and Public Health Network for
Tropical Medicine (TROPMED).
18. SEAMEO Regional Centre for Vocational and Technical Education
(VOCTECH).
19. SEAMEO Regional Centre for Special Education (SEN).
20. SEAMEO Regional Open Learning Centre (SEAMOLEC).

SEAMEO BIOTROP berdiri secara resmi pada tanggal 6 Februari 1968.

Merupakan salah satu lembaga di bawah naungan SEAMEO yang merupakan
pusat penelitian dan pelatihan biologi tropika berciri regional, dengan nama awal
Regional Centre for Training Research and Post Graduate Study in Tropical
Biology. Secara organisasi lembaga ini berada di bawah naungan National
Biologycal Institute (Lembaga Biologi Nasional) yang berlokasi di Kebun Raya
Bogor. Sejak tahun 1972, BIOTROP memisahkan diri dan mempunyai kantor
pusat sendiri.
SEAMEO BIOTROP memiliki Dewan Pembina (Governing Board)
beranggotakan sepuluh negara anggota tetap, yaitu: Indonesia, Brunei Darussalam,
Malaysia, Filipina, Singapura, Kamboja, Thailand, Timor Leste, Laos, dan
Vietnam. Selain mempunyai anggota tetap, SEAMEO BIOTROP mempunyai
anggota negara asosiasi (Associate Members), yaitu: Australia, Kanada, Perancis,
 5

dan Selandia Baru. SEAMEO BIOTROP merupakan salah satu SEAMEO Centre
tertua dan terbesar setelah SEARCA dan INNOTECH.
Dalam gerak langkahnya SEAMEO BIOTROP dibina dan diarahkan oleh suatu
dewan yang disebut dewan pembina. Selain itu, SEAMEO BIOTROP merupakan
salah satu Pusat Regional di bawah pengawasan Kementerian Pendidikan,
Kebudayaan, Riset, dan Teknologi. Dana operasional SEAMEO BIOTROP
berasal dari Pemerintah Indonesia. Dana khusus untuk pelaksanaan program-
programnya berasal dari sekretariat SEAMEO (SEAMES). Dana tersebut
merupakan dana iuran negara-negara anggota. Sedangkan untuk proyek-proyek
tertentu dibiayai dari donor internasional, nasional dan lokal.

B. Struktur Organisasi SEAMEO

SEAMEO BIOTROP dikepalai oleh seorang Direktur yang bertanggung jawab

terhadap terlaksanakannya kebijakan-kebijakan yang telah disepakati dan tugas-
tugas yang tercantum dalam rencana pengembangan lima tahun FYDP (Five Years
Development Plan). Dalam menjalankan tugasnya, Direktur dibantu oleh dua
orang Wakil Direktur, yaitu Wakil Direktur bidang Program serta Wakil Direktur
bidang Administrasi. Struktur organisasi SEAMEO BIOTROP dapat dilihat pada
lampiran1. Sedangkan struktur organisasi laboratorium servis SEAMEO
BIOTROP dapat dilihat pada lampiran 2. Berikut ini tugas dan Kewenangan
Personel Kunci pada laboratorium servis SEAMEO BIOTROP :
1. Manager Puncak
a. Menentukan dan mengesahkan Sistem Manajemen dan Kebijakan Mutu SL-
SEAMEO BIOTROP,
b. Mengkomunikasikan kebijakan dan sasaran mutu, strategi dan proses bisnis
laboratorium kepada seluruh personil SL di semua tingkatan organisasi,
c. Menciptakan dan mendukung nilai, keadilan, dan etika untuk perilaku di
seluruh tingkatan organisasi laboratorium,
d. Membangun budaya saling percaya dan integritas,
 6

e. Menggalakkan komitmen mutu di seluruh tingkatan laboratorium,

f. Memastikan pimpinan di seluruh tingkatan menjadi contoh positif untuk
personil laboratorium,
g. Menentukan dan menetapkan kebijakan mutu SL-SEAMEO BIOTROP,
h. Menetapkan proses komunikasi yang tepat bagi SL-SEAMEO BIOTROP,
untuk mencapai efektifitas Sistem Manajemen,
i. Menunjuk dan mengangkat personalia SL-SEAMEO BIOTROP,
j. Memimpin SL-SEAMEO BIOTROP untuk mencapai tingkat prestasi yang
lebih baik diukur dari mutu pelayanan termasuk mutu hasil pengujian,
keuntungan, pertumbuhan dan pendapatan,
k. Memimpin dan melaksanakan rapat kaji ulang manajemen SL-SEAMEO
BIOTROP.
2. Manager SL
a. Bertanggung jawab dalam penyusunan dokumen SMM, implementasi,
pemeliharaan, dan peningkatan Persyaratan Manajemen sesuai SNI ISO/IEC
17025:2017. Meliputi : Persyaratan Sumber Daya, Persyaratan Proses dan
Persyaratan Manajemen,
b. Bertanggung jawab dalam mengidentifikasi kejadian penyimpangan dari
Sistem Manajemen atau dari Prosedur untuk melaksanakan pengujian, serta
menentukan tindakan untuk pencegahan dan meminimalkan penyimpangan
tersebut,
c. Menandatangani Laporan Hasil Pengujian (LHP),
d. Bertanggung jawab dalam koordinasi program, pelaksanaan dan pelatihan
personil SL-SEAMEO BIOTROP,
e. Memberikan pelayanan administrasi kepada semua unsur dalam lingkungan
SL-SEAMEO BIOTROP,
f. Bertanggung jawab atas kepuasan pelanggan, penyelesaian pengaduan,
tindakan perbaikan dan tindakan pencegahan,
g. Bertanggung jawab dalam koordinasi program, pelaksanaan dan verifikasi
audit internal,
 7

h. Bertanggung jawab dalam koordinasi pengendalian dokumen,

i. Bertanggung jawab atas penyelesaian dokumen kontrak dan informasi serta
pengadaan barang,
j. Bertanggung jawab dalam pelaksanaaan urusan surat menyurat, kearsipan,
rumah tangga, serta urusan perlengkapan dan perawatan, Bertanggung jawab
dalam pelaksanaan tugas personalia dan keuangan,
k. Menyiapkan bahan dan Laporan Kaji Ulang Manajemen,
l. Membantu DDA dalam menentukan sistem manajemen mutu danmemonitor
pelaksanaan operasional SL- SEAMEO BIOTROP.
3. Supervisor Laboratorium
a. Bertanggung jawab dalam implementasi, pemeliharaan, dan peningkatan
Persyaratan Teknis sesuai SNI ISO/IEC 17025:2017. Meliputi : Persyaratan
Sumber Daya dan Persyaratan Proses,
b. Bertanggung jawab dalam mengidentifikasi kejadian penyimpangan dari
Sistem Manajemen atau dari Prosedur untuk melaksanakan pengujian, serta
menentukan tindakan untuk pencegahan dan meminimalkan penyimpangan
tersebut,
c. Menandatangani LHP sesuai surat keputusan KAN,
d. Bertanggung jawab untuk memperkecil hal-hal yang dapat mengakibatkan
kerusakan mutu hasil pengujian,
e. Berwenang melaksanakan tindak korektif jika ditemukan adanya
penyimpangan dalam pengujian,
f. Melaksanakan program jaminan mutu pengujian SL-SEAMEO BIOTROP,
g. Bersama Manajer SL memilih dan menentukan laboratorium untuk
melakukan kontrak pengujian,
h. Mengkoordinasikan uji profisiensi dan inter / intra laboratory cross
checking, serta bertanggung jawab dalam koordinasi validasi & verifikasi
metoda uji,
i. Merencanakan serta mengkoordinasikan garis besar program kerja analisis
serta memonitor pelaksanaan dan hasilnya,
 8

j. Mendistribusikan pelaksanaan pengujian kepada analis,

k. Memonitor pelaksanaan pengujian,
l. Mengecek kebenaran data analisis yang dilaporkan,
m. Bertanggung jawab sebagai penyelia dalam pengujian dan evaluasi hasil uji,
n. Melaksanakan uji profiensi, uji banding antar laboratorium, serta pengujian
reference material sebagai Pengawasan Mutu Internal. Pelaksanaan tersebut
dikordinasikan dengan analis terkait.
4. Bagian Administrasi
a. Menangani penerimaan contoh uji,
b. Menangani pencetakkan Lembar Hasil Pengujian setelah diperiksa oleh
Supervisor Laboratorium,
c. Menangani permohonan dan pengadaan barang/jasa dari masing-masing
laboratorium,
d. Menangani surat masuk dan surat keluar berkaitan dengan permohonan
pengujian, subkontrak, pengadaan barang dan jasa,
e. Menangani pembayaran biaya pengujian dan pengadaan barang/jasa,
f. Menangani pengarsipan dokumen-dokumen yang berkaitan dengan sistem
mutu.
5. Koordinator Sampling
a. Melakukan kaji ulang permohonan sampling dalam hal : Jumlah sampel dan
parameter uji yang dikehendaki dan memastikan transportasi dan akomodasi
petugas sampling, dan biaya sampling lainnya,
b. Mengkordinasikan permohonan sampling dari customer kepada Supervisor
Lab terkait, petugas Adminstrasi dan petugas sampling,
c. Menyiapkan surat jalan untuk petugas sampling,
d. Bertanggungjawab terhadap rekaman kegiatan sampling.
6. Koordinator K3L
a. Memastikan bahwa semua personel laboratorium mengenakan PPE
(Personel Protective Equipment) yang sesuai dengan jenis kegiatan,
 9

b. Memastikan operasional Instalasi Pengelolaan Air Limbah (IPAL) miliki

Lab Service berfungsi baik,
c. Melakukan pemantauan kualitas air limbah secara berkala, sesuai dokumen
UKL UPL yang telah disahkan oleh Badan Lingkungan Hidup Daerah
Bogor, serta memastikan berlakunya perijinan terkait imbah di SL-SEAMEO
BIOTROP,
d. Bertanggungjawab terhadap pengelolaan limbah di Lab Services.
7. Auditor Internal
a. Melaksanakan audit internal di Services Laboratory sesuai jadwal dan
lingkup yang telah ditentukan Ketua Tim Auditor, dan prosedur pelaksanaan
audit internal,
b. Menyediakan rekaman audit internal sesuai prosedur pelaksanaan audit
internal.
8. Analis Laboratorium
Melakukan pengujian dan pemeliharaan peralatan sesuai uraian tugas yang
ditentukan penyelia laboratorium.

C. Sejarah Singkat SEAMEO BIOTROP

BIOTROP didirikan berdasarkan hasil keputusan konferensi SEAMEC ke III

pada tanggal 6-9 Februari 1968. Kemudian namanya diubah menjadi SEAMEO
Regional Centre for Tropical Biology berdasarkan hasil keputusan konferensi
SEAMEC ke IV tanggal 7-10 Januari 1969 di Jakarta. Pada periode 1969-1972
SEAMEO-BIOTROP bernaung di bawah Lembaga Biologi Nasional Lembaga -
Ilmu Pengetahuan Indonesia (LBN LIPI) yang berlokasi di Kebun Raya Bogor.
Kemudian sejak tanggal 5 Juni 1972 SEAMEO-BIOTROP telah menempati
gedung tersendiri milik LBN (terpisah secara administratif) dan mulai pada tahun
1978 SEAMEO BIOTROP menempati gedung baru di Jalan Raya Tajur Km 6
Bogor. Sejak tahun 1979 BIOTROP telah menjadi salah satu Pusat Penelitian
Institut Pertanian Bogor dengan nama "Pusat Penelitian Biologi Tropika".
 10

D. Visi, Misi, dan Tujuan SEAMEO BIOTROP

SEAMEO BIOTROP memiliki visi menjadi pusat terkemuka yang

memperkaya dan mempromosikan nilai-nilai nyata biologi tropis di Asia
Tenggara. Misi yang dimiliki SEAMEO BIOTROP yaitu untuk menyediakan
pengetahuan ilmiah dan pengembangan kapasitas dalam melestarikan dan
mengelola biologi tropis berkelanjutan untuk kesejahteraan masyarakat dan
lingkungan di Asia Tenggara. SEAMEO BIOTROP mempunyai tujuan membantu
negara-negara anggota SEAMEO untuk menyelesaikan dan mengidentifikasi
masalah biologi kritis yang dihadapi serta meningkatkan perkembangan
perekonomian di negara tersebut dengan menyelenggarakan kegiatan untuk
mendukung tercapainya tujuan tersebut.

E. Ruang Lingkup SEAMEO BIOTROP

Semua aktifitas yang dilakukan direncankan dalam Rencana Pengembangan

Lima Tahun FYDP. Dalam merumuskan program, penelitiaan, dan pelatihan
melalui tahapan-tahapan berikut, yaitu :
1. Workshop (khusus kalangan SEAMEO BIOTROP)
2. Melalui seminar dan forum nasional dengan mengundang peneliti pengguna
dan pemegang kebijakan
3. Seminar tingkat ASEAN, dihadiri peneliti, pengguna dan pemegang kebijakan.
Dalam hal ini Goverment Board Member (GBM) sebagai perwakilan untuk
menentukan standar prioritas penelitian dan pelatihan tingkat ASEAN
4. Adopsi kebutuhan penelitian dan pelatihan yang di hadiri oleh anggota GBM
dan SEAMEC (Dewan Penasehat SEAMEO). Hasil adopsi dituangkan dalam
buku Repelita FYDP dan Master plan. Hingga saat ini SEAMEO BIOTROP
memiliki lima buku FYDP dan satu buku Master Plan yang isinya tentang
pemeliharaan lingkungan.
 11

F. Fasilitas

Adapun fasilitas-fasilitas yang terdapat di SEAMEO BIOTROP yaitu :

1. Laboratorium Servis (Services Laboratory)
Pada tahun 2000 Laboratorium Servis (Service Laboratory) menjadi salah
satu bagian dari SEAMEO BIOTROP yang memberikan pelayanan jasa
laboratorium pengujian. Terbentuknya laboratorium ini berdasarkan keputusan
Sidang Dewan Pembina (Governing Board) SEAMEO BIOTROP. Sidang itu
diselenggarakan di Phnom Phen, Kamboja, pada tanggal 3-5 Oktober 2000.
Keberadaan laboratorium ini juga diperkuat dengan SK Direktur SEAMEO
BIOTROP No. 212.1/Dir-SK/SL/V/2003 tentang Penetapan Struktur Organisasi
dan Susunan Personalia Laboratorium Servis SEAMEO BIOTROP Bogor.
Laboratorium Servis ini terdiri dari 3 unit laboratorium, yaitu Laboratorium
Tanah dan Tanaman, Laboratorium Pangan dan Pakan, Laboratorium Air dan
Udara. Sejak Juli 2003 Laboratorium Servis telah mengimplementasikan SNI
19-17025-2000 sebagai jaminan sistem mutu laboratorium. Laboratorium ini
pun telah diakreditasi oleh Komite Akreditasi Nasional (KAN) dan
mendapatkan sertifikat SNI 19-17025-2000 pada Agustus 2004.
2. Perpustakaan
Perpustakaan SEAMEO BIOTROP memainkan peran penting dalam
memberikan informasi tentang Biologi Tropis kepada kliennya. Bagian
Perpustakaan, Dokumentasi dan Publikasi berada di bawah Departemen
Manajemen Pengetahuan. Yang termasuk dalam koleksi perpustakaan adalah
buku, peta, terbitan berkala, laporan, pamflet, buletin, tesis, dan informasi
sekunder, seperti bibliografi khusus, abstrak, database internal.
3. Asrama
SEAMEO BIOTROP terletak di atas lahan seluas 10 hektar dan terdiri dari
gedung perkantoran dan 8 laboratorium penelitian. Untuk mendukung kegiatan
SEAMEO BIOTROP, beberapa fasilitas telah dibangun dan ditingkatkan
selama bertahun-tahun. Fasilitas juga tersedia untuk penggunaan umum. Semua
 12

asrama ber-AC dengan kamar mandi pribadi, dilengkapi dengan air panas dan
TV. Saluran telepon dan internet nirkabel tersedia di dalam komplek SEAMEO
BIOTROP.
4. Tempat Konfrensi
Conference Hall SEAMEO BIOTROP ditujukan untuk konferensi, seminar
atau pertemuan ilmiah dengan kapasitas hingga 700 orang. Kondisi udara dan
sistem suara juga tersedia. Conference Hall SEAMEO BIOTROP tersedia
untuk umum dengan sewa untuk berbagai kegiatan, seperti pameran, wisuda
dan upacara pernikahan di akhir pekan atau hari kerja (jika tidak ada kegiatan
internal yang diadakan oleh SEAMEO BIOTROP).
5. Ruang Kelas
Ruang kelas dalam kompleks SEAMEO BIOTROP tersedia untuk tujuan
pertemuan dengan jumlah peserta yang sedikit. Tersedia beberapa ruang kelas
dan laboratorium komputer.
6. Tempat percobaan lapangan
Lapangan Eksperimen SEAMEO BIOTROP memiliki luas 4,57 hektar.
Lapangan percobaan digunakan untuk percobaan lapangan dan koleksi
tanaman, terutama untuk mendukung penelitian dan lapangan pembibitan.
Terkadang, lapangan percobaan digunakan untuk sesi praktikum berbagai
kursus pelatihan yang dilakukan oleh SEAMEO BIOTROP.

G. Lokasi

SEAMEO BIOTROP berlokasi di Jalan Raya Tajur No. Km 6, RT 05/RW 05,

Pakuan, Kecamatan Bogor Selatan, Kota Bogor, Jawa Barat, 16134.

H. Ketenagakerjaan

SEAMEO BIOTROP dikepalai oleh seorang Direktur. Direktur ini bertanggung

jawab atas pelaksanaan kebijakan dibantu oleh dua orang wakil direktur (Deputi).
Deputi direktur pertama menangani masalah program dan pemasaran, sedangkan
 13

deputi direktur kedua menangani manajemen sumberdaya dan komunikasi.

Masing-masing deputi direktur kedua membawahi bagian-bagian untuk
mendukung kegiatannya.
Terdapat enam departemen kerja untuk mendukung aktifitas dan program
kerja SEAMEO BIOTROP yaitu FAD (Finance and Accounting Department),
FMD (Facilities Management Department), GAPRD (General Administration and
Public Relation Department), KMD (Knowledge Management Department), dan
SLD (Services Laboratory Department).

I. Sistem Manajemen Mutu Laboratorium

Salah satu cara membuktikan bahwa suatu laboratorium penguji mempunyai

kompetensi teknis dalam menghasilkan data hasil uji, maka laboratorium tersebut
sebaiknya menerapkan Sistem Manajemen Mutu Laboratorium.
Laboratorium Servis SEAMEO BIOTROP telah mengimplementasikan Sistem
Manajemen Mutu Laboratorium sejak Juli tahun 2003. Sejak tahun 2004 hingga
saat ini, laboratorium servis SEAMEO BIOTROP telah terakreditasi ISO 17025
oleh KAN dan mendapatkan sertifikat dengan nomor akreditasi LP-221-IDN.
SNI 17025 merupakan persyaratan umum kompetensi laboratorium pengujian
dan laboratorium kalibrasi, yang berisi persyaratan manajemen dan teknis yang
harus dipenuhi oleh laboratorium pengujian dan kalibrasi, yang ingin menerapkan
sistem mutu. Syarat-syarat tersebut diantaranya dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1.Persyaratan Manajemen dan Teknis Sesuai ISO/IEC17025:2017

PERSYARATAN UMUM
1. Ketidakberpihakan
2. Kerahasiaan
PERSYARATAN STRUKTURAL
1. Persyaratan struktural
PERSYARATAN SUMBER DAYA
1. Umum
 14

2. Personel
3. Fasilitas dan kondisi lingkungan
4. Peralatan
5. Ketertelusuran metrologi
6. Produk dan jasa yang disediakan eksternal
PERSYARATAN PROSES
1. Kaji ulang permintaan, tender, dan kontrak
2. Pemilihan, verifikasi, dan validasi metode
3. Pengambilan sampel
4. Penanganan barang yang diuji atau dikalibrasi
5. Rekaman teknis
6. Evaluasi ketidakpastian pengukuran
7. Kepastian validitas hasil
8. Pelaporan hasil
9. Pengaduan
10. Pekerjaan yang tidak sesuai
11. Pengendalian data dan managemen informasi
PERSYARATAN MANAJEMEN
1. Pilihan
2. Dokumentasi sistem manajemen
3. Pengendalian dokumen sistem manajemen
4. Pengendalian rekaman
5. Tindakan untuk mengatasi risiko dan peluang
6. Peningkatan
7. Tindakan perbaikan
8. Audit internal
9. Kaji ulang manajemen
Sumber : Anwar Hadi, 2018
 III. PENGUJIAN AFLATOKSIN PADA KACANG TANAH

A. Analisa Dengan KLT

1. Penyiapan Chamber
Bejana pengembang tersedia dalam berbagai bentuk, bahan, dan ukuran.
Bisa dibeli langsung dipasaran atau menggunakan alat-alat gelas yang ada di
laboratorium, misalnya dapat menggunakan keler, botol dengan tutupnya, atau
gelas kimia dengan cawan petri sebagai tutupnya.

Gambar 1. Chamber
2. Penyiapan Lempeng KLT
Pelat KLT dapat dibuat sendiri atau dibeli langsung dari pasaran. Pelat KLT
komersial pada umunya lebih seragam sehingga dapat memberikan daya ulang
yang baik, tetapi dapat juga membuat sendiri pelat KLT dengan kualitas yang
baik. Untuk pemakaian, ukuran disesuaikan dengan banyak sampel yang
dianalisis. Pada pengujian ini digunakan Plat KLT, MERCK No. 1. 05554,
Silica Gel 60, F254.
3. Penotolan Sampel
Sampel dilarutkan dalam pelarut yang sesuai (hampir semua pelarut organik
dapat digunakan dan biasanya dipilih yang mudah menguap), air digunakan
hanya bila tidak dapat dicari pelarut organik yang sesuai. Untuk keperluan
analisis kuantitatif sample harus ditimbang, demikian juga pelarut yang
digunakan. Kemudian larutan sample disimpan dalam wadah yang tertutup

15
 16

rapat untuk menghindari penguapan. Setelah itu ditotolkan sampel sebanyak 10

µL pada plat. Sedangkan untuk penotolan standar setiap standar yang ditotolkan
memiliki konsentrasi sama tetapi dengan volume berbeda membentuk deret
standar dari 1 µLl-10 µL. Penotolan dapat dilakukan dengan pipet mikro.
Untuk keperluan kuantitatif digunakan quantitative microsyringe. Sampel
ditotolkan pada pelat KLT konvensional sebagai bercak bulat atau garis, 1,5-2,0
cm dari tepi bawah. Untuk memudahkan penotolan dibuat garis tipis dengan
pensil, yang disebut garis awal. Pada garis awal ini biasanya ditotolkan bercak-
bercak dengan garis tengah 3-6 mm, bercak tersebut diusahakan diameternya
seragam. Penotolan bercak pada pelat KLT dapat dilakukan berulangulang dan
dilakukan hati-hati agar pelat tidak rusak . Penotolan sampel yang terlalu
banyak menyebabkan bercak hasil pengembangan berbentuk tidak bulat
(asimetri) dan perubahan harga Rf. Totolan sample didiamkan sampai kering,
totolan sampel pada lempeng yang telah kering siap untuk dielusi
/dikembangkan.

Gambar 2. Proses Spotting

4. Proses elusi
Pengembangan (elusi) dilakukan dengan cara mencelupkan dasar pelat KLT
yang telah ditotoli sampel dalam sistem pelarut (eluen) yang telah jenuh dalam
chamber, eluen yang digunakan adalah kloroform:aseton dengan perbandingan
9:1. Elusi yang dilaksanakan dalam ruangan tertutup tersebut diakhin setelah
ujung zat pelarut pada pelat telah mencapai batas yang ditentukan pada
adsorben (ujung garis) biasanya memerlukan waktu ± 10 menit. Kemudian
 17

diambil dan dikeringkan, sebaiknya menggunakan aliran gas nitrogen untuk

mencegah terjadinya kerusakan sampel karena oksidasi.

Gambar 3. Proses elusi

5. Visualisasi dan Identifikasi
Visualisasi dimaksudkan untuk melihat komponen penyusun yang sudah
terpisah setelah proses pengembangan. Berikut ini beberapa teknik dalam
visualisasi:
a. Visualisasi Destruktif
Cara destruktif akan merusak komponen secara irreversible, baik merusak
sebagian atau semua komponen. Cara ini dapat dipakai untuk pengukuran
secara kualitatif maupun kuantitatif.
b. Visualisasi Non-destruktif
Visualisasi non destruktif membiarkan komponen tetap utuh, biasanya
digunakan untuk KLT preparatif dan beberapa jenis KLT kuantitatif atau
kualitatif, di antaranya penyemprotan dengan air, penggunaan sinar UV, dan
penampakkan dengan uap iodium.
c. Visualisasi umum
Visualisasi bersifat umum maksudnya untuk semua atau sebagian senyawa
organik. Menggunakan beberapa regensia umum untuk KLT.
d. Visualisasi spesifik
Visualisasi spesifik bersifat khas untuk senyawa jenis atau golongan tertentu.
Beberapa reagensia spesifik dipakai untuk mendeteksi dengan cara kualitatif
dan berguna untuk mengenal adanya gugus tertentu dalam senyawa yang
dipisahkan.
 18

Identifikasi dapat dikerjakan dengan membandingkan posisi spot dengan

senyawa standar yang diteliti (ditotolkan) pada pelat percobaan yang sama
dalam UV box. Spot yang memiliki warna perpendaran yang sama dengan
warna perpendaran standar dapat dinyatakan bahwa spot tersebut sama dengan
spot standar.

B. Pengujian Aflatoksin Sampel Kacang Tanah Dengan Metode TPI (Tropical

Products Institute)

1. Ruang Lingkup
Metode penentuan kandungan aflatoksin B1, B2, G1, G2 menggunakan KLT
dapat diterapkan untuk kacang tanah dan produk olahannya dengan minimal
konsentrasi 3 µg/kg.
2. Acuan
Tropical Products Institute (TPI)
3. Prinsip
Aflatoksin dalam contoh diekstrak menggunakan methanol dan dihilangkan
lemaknya memakai heksana Pemurnian dilakukan memakai kloroform dan
dehidrasi dengan natrium sulfat anhidrat. Identifikasi aflatoksin dilakukan
memakai metode KLT satu dimensi Konsentrasi aflatoksin ditentukan dengan
membandingkan perpendaran antara sampel dan standar dibawah sinar
ultraviolet.
4. Alat dan Bahan
Alat Bahan
a. Neraca analitik a. Larutan standar kerja aflatoksin B1
b. Blender b. Metanol p.a.
c. Labu kocok c. n-Heksana
d. Corong kaca d. NaCl p.a. dan larutan NaCl 2,2 %
e. Erlenmeyer 250 mL e. Kloroform p.a.
f. Hot plate f. Aseton p.a.
 19

g. Vial gelas g. Larutan pengembang kloroform

h. Pipet serologi 25 mL aseton (9:1)
i. Micro syringe 10 µL
j. Plat KLT, MERCK No. 1. 05554,
Silica Gel 60, F254
k. Bejana kromatografi (chamber)
l. UV Box
m. Kertas saring whatman No. 1
n. Dryer
o. Aluminium foil
p. Shaker
5. Cara Kerja
a. Ekstraksi
1) Ditimbang 25 gram kacang tanah ke dalam Erlenmeyer 250 mL,
ditambahkan 10 mL NaCl 10 % secara kuantitatif, ditambahkan 50 mL
methanol pa Campuran ini diaduk menggunakan shaker selama 15 menit,
campuran disaring dengan kertas saring berabu
2) Dimasukkan filtrat ke dalam labu kocok 250 mL
3) Ditambahkan 25 mL heksan secara kualitatif, kemudian dikocok
4) Fraksi methanol (lapisan bawah) ditampung, sedangkan lemak dan
heksan (lapisan atas) dibuang
5) Fraksi methanol yang ditampung diekstrak kembali dengan 25 mL
heksan, kemudian ditampung dan lapisan atas dibuang
6) Ditambahkan 25 mL kloroform, kemudian dikocok
7) Fraksi kloroform-metanol (lapisan bawah) ditampung dalam vial kaca
yang diatasnya telah disiapkan corong dan kertas saring beserta Na2SO4
anhidrat
8) Fraksi methanol-air (lapisan atas) diekstrak kembali dengan 25 mL
kloroform, kemudian ditampung dalam vial kaca tersebut
b. Pemurnian
 20

Cairan hasil ekstraksi diuapkan diatas hot plate sampai menjadi residu,
kemudian residu ditambahkan 200 µL kloroform secara kuantitatif
c. Identifikasi aflatoksin
1) Disiapkan beyana kromatografi yang berisi larutan pengembang.
dibiarkan hingga jenuh
2) Larutan contoh dibercakkan pada lempeng kromatografi sebanyak 10 uL
bersama dengan deret standar aflatoksin 1-10 mL
3) Lempeng kromatografi tersebut dimasukkan dalam bejana kromatografi
yang berisi larutan pengembang yang telah jenuh, lalu dielusi sampai
eluen mencapai batas atas
4) Hasil elusi dikeringkan dengan dryer
5) Setelah kering diamati dibawah lampu UV dengan panjang gelombang
365 nm.
6) Uji kualitatif dilakukan dengan membandingkan waktu rambat (Rf)
bercak contoh dan standar, sedangkan uji kuantitatif dilakukan dengan
membandingkan intensitas perpendaran bercak contoh dan standar.

C. Perhitungan Kandungan Aflatoksin

S × Y × Vp
Kandungan Aflatoksin (µg/kg) = × fp
W ×Z
S = Volume standar (µL) yang memberikan perpendaran setara dengan Z µL
contoh
Y = Konsentrasi aflatoksin standar dalam µL/mL (ppm)
Vp = Volume pelarut (µL) yang dibutuhkan untuk melarutkan hasil ekstrak
contoh (µL)
Z = Volume ekstrak contoh (µ;) yang dibutuhkan untuk memberikan
perpendaran yang setara dengan S µL standar aflatoksin
W = Bobot contoh yang diekstrak (gram)
Fp = Faktor pengenceran
 IV. PEMBAHASAN

A. Hasil

Berikut ini tabel hasil pengujian aflatoksin pada sampel kacang tanah dan
produk olahannya dari kacang tanah secara KLT No Order 1107/PP/VII/2021.
Tabel 2.Data Hasil Pengujian Aflatoksin Dan Dibandingkan dengan SNI
7385:2009
No Contoh Kode Contoh Hasil (ppb) Batas Maksimum (ppb)
3132 Kacang tanah AFB1 19,91 AFB1 = 15
Total = 20
3133 Sukro AFBI 5,14 AFB1 = 15
Total = 20
3134 Sambel pecel AFB1 < MDL AFB1 = 15
Total = 20
Keterangan :
AFB1 = Aflatoksin B1
Total = Jumlah aflatoksin B1, B2, G1, G2
Pada pengujian ini dilakukan analisa kandungan aflatoksin B1 secara KLT pada
tiga sampel, yaitu kacang tanah (3132), sukro (3133), sambel pecel (3134). Dari
ketiga sampel terdeteksi aflatoksin B1 dan memperoleh hasil, pada sampel 3132
sebesar 15.9 ppb, pada sampel 3133 sebesar 5.14 ppb, dan pada sampel 3134 <
MDL. Setelah mengetahui hasil pengujian aflatoksin pada sampel kemudian hasil
pengujian dibandingkan dengan batas maksimum kandungan aflatoksin pada
kacang tanah dan produk olahannya sesuai SNI 7385:2009, dengan tujuan untuk
mengetahui apakah sampel tersebut layak untuk dikonsumsi atau tidak.

B. Pembahasan

Mikotoksin adalah metabolit sekunder yang dihasilkan oleh beberapa galur

cendawan tertentu yang dapat menimbulkan gangguan pada kesehatan atau bahkan

21
 22

kematian dan mempunyai pengaruh biologis terhadap mahluk hidup lain terutama
manusia maupun hewan. Gejala penyakit yang ditimbulkan oleh mikotoksin
disebut mikotoksikosis (Bullerman, 1978 dalam Ambarwati, 1996).
Berbagai Jenis mikotoksin yang terdapat dalam bahan pangan cukup
mengkhawatirkan, mengingat kemungkinan dihasilkannya berbagai jenis
mikotoksin oleh cendawan. Akan tetapi tidak semua pangan yang tercemar oleh
jamur mengandung mikotoksin (Sardjono, 1998). Penelitian mengenai mikotoksin
ini berkembang dengan ditemukannya aflatoksin, yaitu suatu kelompok senyawa
dengan susunan yang mirip satu sama lain dan dihasilkan oleh beberapa strain
(galur) A. flavus (Anonim, 1994).
A. flavus dan A. parasiticus merupakan jamur yang dapat tumbuh subur di
daerah tropis basah seperti Indonesia. Selain kedua jenis jamur tersebut, aflatoksin
pun dapat diproduksi oleh Penicillium dan Rhizopus (Rachmawati, 2003). A.
flavus adalah cendawan penghasil aflatoksin dan merupakan salah satu jenis
mikotoksin yang sangat berpengaruh terhadap keamanan pangan dunia.

Gambar 4. Struktur Aflatoksin

 23

Saat ini telah diketahui sedikitnya 4 macam aflatoksin alamiah yang paling
sering dijumpai, yaitu aflatoksin B1, B2, G1, dan G2 berdasarkan penampakan
fluoresensinya pada lempeng KLT dibawah sinar UV yang memberikan
perpendaran berwarna biru untuk B dan warna hijau untuk G (Winarno, 2008).
Selain jenis induk, terdapat pula jenis aflatoksin yang merupakan turunan dari
jenis induk yaitu aflatoksin Ml (Gambar 4) dan aflatoksikol (Ro), jenis ini sering
dijumpai pada berbagai produk ternak seperti susu, telur, daging, dan hati, serta
pada limbah peternakan seperti urin dan tinja. Hal ini dapat terjadi jika
sebelumnya ternak yang bersangkutan telah mengkonsumsi pakan yang tercemar
aflatoksin (Globlatt, 1969).
Tingkat daya racun (toksisitas) aflatoksin sangat bervariasi, tergantung dari
jenisnya. Salah satu contohnya yaitu aflatoksin B2 dan aflatoksin G2 mempunyai
daya racun yang rendah yaitu 1/60 - 1/100 kali dibandingkan aflatoksin B1 dan
tidak terlalu berbahaya. Umumnya, aflatoksin induk mempunyai toksisitas yang
lebih tinggi dibandingkan dengan turunannya (Rachmawati, 2003).
Aflatoksin mempunyai sifat kelarutan yang sangat rendah dalam air (10-20
pg/mL), tetapi mudah larut dalam pelarut organik. Bobot molekulnya diatas 300
g/mol dengan titik leleh sekitar 200-305 °C, sehingga tergolong senyawa yang
tahan terhadap temperatur tinggi (xerotolerant). Toksisitas senyawa ini dapat
berkurang bila bereaksi dengan asam, basa, atau oksida (Rachmawati, 2003).
Kacang tanah sebagai bahan pangan dapat menjadi substrat yang baik bagi
jamur toksigenik (A. flavus) yang menghasilkan mikotoksin sehingga dapat
menurunkan produksi kacang tanah secara kuantitas dan kualitas (Sauer et al,
1992). Bila A. flavus telah memproduksi aflatoksin, maka biji kacang akan terasa
pahit bila dimakan. Kandungan aflatoksin yang tinggi dikenali dari warna biji yang
makin cokelat dan rasa yang semakin pahit (Kasno, 2004). Kontaminasi aflatoksin
pada biji kacang tanah merupakan masalah penting terhadap kualitas bahan pangan
di seluruh dunia, dimana jenis aflatoksin yang paling sering ditemukan adalah B1
(Miskiyah, 2005).
 24

Ciri-cin kacang tanah yang baik dan rendah aflatoksin, dicirikan dengan biji
kering, mengkilat dan utuh. Adapun tanda-tanda biji yang diduga tercemar dengan
aflatoksin, ciri-cirinya adalah sebagai berikut : telah mengalami kerusakan fisik,
biji terbelah, kulit ari mengelupas, warna biji kusam. Muncul pertumbuhan jamur
di permukaan kacang, menyebabkan kacang memiliki warna yang sesuai dengan
spora jamur yang dihasilkan, hijau, hitam, coklat (Nauli, 2015).
Pertama kali sampel diterima di ruang administrasi bagian penerimaan contoh.
Pada tahap pertama dilakukan kaji ulang permintaan dengan customer yang
bersangkutan, yaitu dengan mengisi form Surat Permohonan Pemeriksaan Contoh.
Dengan demikian customer bisa mengetahui nomor order, nomor sampel, dan
waktu pengujian sampai mendapatkan Laporan Hasil Pengujian. Waktu yang
dibutuhkan laboratorium untuk menguji sampel sampai didapatkannya hasil
berbeda-beda, untuk pengujian aflatoksin dengan KLT membutuhkan waktu 3
minggu (15 hari kerja). Setelah sampel diterima oleh admin, selanjutnya sampel
diberi label nomor contoh dan didistribusikan ke laboratorium pangan dan pakan
untuk diuji.
Dalam proses pengujian terdapat dua tahapan analisa, yaitu tahap defatting dan
tahap clean up. Sedangkan untuk mengetahui kandungan aflatoksin dilakukan
identifikasi menggunakan KLT. Pada tahap defatting, didalam sampel umumnya
terdapat zat-zat pengotor yang dapat mengganggu pada saat pengamatan. Oleh
karena itu perlu dilakukan tahapan ini untuk memisahkan aflatoksin dari zat
pengotor yang tidak dikehendaki. Pengotor yang bersifat non polar seperti lemak
dan sejenisnya dapat dipisahkan dengan menggunakan pelarut non polar, misalnya
n-heksan. Pada tahap clean up, sampel yang mengandung aflatoksin diekstrak
menggunakan pelarut kloroform, karena aflatoksin lebih suka larut didalam pelarut
kloroform. Selanjutnya sampel didehidrasi menggunakan Na2SO4 anhidrat,
kemudian diuapkan sampai terbentuk residu. Pemilihan pelarut sangat perlu
diperhatikan. Menurut Adnan (1997) pemilihan sistem larut atas dasar like
disolves like yang artinya untuk memisahkan sampel yang bersifat non polar
digunakan pelarut yang bersifat non polar juga. Seperti halnya aflatoksin yang
 25

sifatnya sedikit polar, akan lebih larut dalam pelarut yang lebih bersifat sedikit
polar juga. Dalam hal ini Pelarut tersebut adalah kloroform. Sampel di spotting
pada plat yang sudah disediakan, masuk ke tahap dielusi, dan terakhir pembacaan
di UV Box. Hasil perpendaran sampel dibandingkan dengan hasil perpendaran
deret standar.
Hasil analisa dapat dibandingkan dengan standar SNI yang telah ditetapkan,
maka dapat dilihat terdapat satu sampel yang melebihi batas maksimal kandungan
aflatoksin yang diizinkan, yaitu sampel 3132. Sampel 3132 menunjukan
kandungan AFB1 sebesar 19.91 ppb, sudah melebihi batas maksimal yang
diperbolehkan yaitu 15 ppb. Aflatoksin pada sampel 3133 mengandung AFB1
sebesar 5.14 ppb, dan sampel 3134 mengandung AFB1 lebih kecil dari 3,01 ppb.
Kedua sampel masih dibawah batas maksimal yang diperbolehkan yaitu 15 ppb.
Sampel 3132 tidak boleh dikonsumsi, sesuai dengan peraturan yang berlaku
dikarenakan sudah terkontaminasi aflatoksin dengan jumlah melebihi batas
keamanan yang diizinkan.
Ketiga sampel ini merupakan salah satu penelitian mahasiswa yang ingin
membuktikan apakah dengan dilakukannya proses pengolahan bahan pangan
menjadi produk dapat menurunkan aflatoksin pada sampel kacang tanah atau
tidak. Pada sampel kacang tanah (3132) didapatkan hasil aflatoksin B1 19.91 ppb.
Dimana hasil aflatoksin B1 ini sudah melebihi batas maksimal kadar aflatoksin
yaitu 15 ppb. Akan tetapi setelah kacang tanah diolah menjadi produk sukro
(3133) hasil kadar aflatoksin B1 menjadi 5.14 ppb, pada produk ini kacang tanah
dibalut adonan pilus dan digoreng. Dan produk sambel pecel (3134) hasil kadar
aflatoksin B1 menjadi < MDL, pada produk ini kacang digoreng terlebih dahulu
kemudian dihaluskan kemudian ditambahkan rempah-rempah dan di masak hingga
kering. Hal ini membuktikan bahwa setelah kacang tanah diolah menjadi suatu
produk tertentu, mampu menurunkan kadar aflatoksin, salah satu proses yang
dapat menurunkan kadar aflatoksin yaitu dengan pemanasan dan pemberian
bahan-bahan lain ke dalam produk. Meskipun aflatoksin tidak dapat dihilangkan
100 %, akan tetapi aflatoksin pada bahan pangan dapat diminimalisir dengan
 26

perlakuan pascapanen, seperti tepat panen, sortir saat pemanenan (Dorner, 2008a),
sebelum 24 jam sebaiknya kacang tanah sudah selesai dirontokkan kemudian
dijemur atau dikeringanginkan (Rahmianna et al, 2015), penurunan kadar air
polong kacang tanah hingga <12 % dalam 2 hari, menunjukkan tingkat
kontaminasi aflatoksin yang cukup rendah (0,4–3,8 ppb) (Paramawati et al., 2006),
pengupasan polong harus semaksimal mungkin, mengatur kondisi ruang
penyimpan yang sejuk (suhu 27 ℃) dan kering (kelembaban nisbi 56–70 %),
sortir bahan pangan sebelum diolah menjadi produk, pengolahan menjadi produk
makanan (ICAR 1987 dalam Ginting dan Beti, 1996), perlakuan pemanasan
seperti perebusan, penyangraian dan penggorengan hanya dapat menurunkan kadar
aflatoksin 33–75 % karena sifatnya yang tahan panas (titik cair 268–269 ℃)
(Dharmaputra et al. 2003), sedangkan pemanasan dengan microwave pada suhu
124 ℃ selama 15 menit dapat menurunkan 96 % aflatoksin B1 (Farag et al. 1996),
perlakuan fisik, seperti penjemuran selama 7 jam dapat mengurangi 10,2 %
aflatoksin B1. Perlakuan kimia, seperti penggunaan garam dapur (5 %), asam
propionat (1 %) dan asam asetat (2,5 %) pada penyimpanan 90 hari biji kacang
tanah, mampu mengurangi aflatoksin 99,5–100 % (Reddy, 1996).
Akan tetapi sampel kacang tanah ini juga turut mendapatkan perlakuan
prapanen yang bertujuan untuk meminimalisir tercemar aflatoksin selama di
petani. Tindakan prapanen kacang tanah diantaranya tanam awal untuk
mengoptimalkan lengas tanah untuk pertumbuhan tanaman (Pettit, 1984),
pengairan pada masa kekeringan untuk mencegah stress, populasi jamur A. flavus
di dalam tanah akan berkurang dengan pemberian hara kalsium pada kondisi tanah
mengering (tanpa pengairan) (Wiatrak et al. 2006), aplikasi dolomit pada saat
pengisian polong. Hasil aflatoksin pada sampel kacang tanah (3132) yaitu 19.91
ppb, hal ini membuktikan bahwa perlakuan prapanen kacang tanah di petani amat
sangat berpengaruh pada kadar aflatoksin kacang tanah, karena tanpa tindakan
prapanen, kacang tanah akan memiliki kadar aflatoksin yang jauh lebih tinggi
sesuai pada kasus ditemukannya kontaminasi aflatoksin pada 35 % dari 82 sampel
 27

kacang tanah yang diperoleh dari pasar tradisional dan pasar swalayan di
Indonesia dengan kisaran 5 – 870 ppb (Razzazi-Fazeli et al, 2004).
Menurut Nauli (2015) selain sudah banyak tersedia metode deteksi cepat
kandungan aflatoksin yang bisa digunakan oleh petani dilapangan untuk
mengevaluasi proses pasca panen yang berlangsung, diantaranya Agree-Screen for
Aflatoxins (Neogen), AgraStrip Aflatoxin Test (Romers Lab), Aflacard B1 dan
Total (R-Biopharm Rhone), AflaCheck (Vicam).
 V. KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan

Dari hasil pengujian yang dilakukan untuk menganalisa kandungan aflatoksin

B1 secara KLT pada tiga sampel kacang tanah dan produk olahannya. Hasil
analisa kemudian dibandingkan dengan standar SNI 7385:2009. Kode masing-
masing sampel adalah sampel kacang tanah dengan nomor sampel 3132, sampel
kacang sukro dengan nomor sampel 3133, dan sampel sambel pecel dengan nomor
sampel 3134. Pada sampel 3134 tidak terdapat kandungan aflatoksin, yang artinya
sampel aman untuk dikonsumsi. Pada sampel 3133 terdeteksi kandungan
aflatoksin B1 sebesar 5.14 ppb, akan tetapi sampel ini masih aman karena dibawah
standar maksimal aflatoksin B1. Dan pada sampel 3132 terdeteksi kandungan
aflatoksin B1 sebesar 19.91 ppb, sampel ini sudah melebihi standar maksimal
aflatoksin B1 yaitu 15 ppb, oleh karena itu sampel tersebut tidak dapat dikonsumsi
karena tidak memenuhi standar kelayakan pangan.

B. Saran

Dalam pengujian aflatoksin untuk mendapatkan hasil yang lebih akurat dapat
digunakan alat yang lebih sensitif seperti HPLC. Selain itu sudah banyak tersedia
metode deteksi cepat kandungan aflatoksin menggunakan kit. Disamping itu, bagi
para petani, pedagang, pengumpul bahan-bahan pangan yang mudah tercemar
aflatoksin maupun produsen produk olahan berbahan pangan yang berpotensi
tercemar aflatoksin agar memperhatikan kondisi komoditi saat masa prapanen,
panen, pasca panen, penyimpanan dan pengolahannya.

27
 DAFTAR PUSTAKA

Adnan, Muhammad. 1997. Teknik Kromatografi Untuk Analisis Bahan Makanan.

ANDI, Yogyakarta.
Ambarwati, S. 1996. Produksi mikotoksin pada jagung yang dikeringkan dan dipipil
dengan berbagai cara [Skripsi]. Universitas Pakuan Bogor, Bogor.
[BPOM RI] Badan Pengawas Obat Dan Makanan Republik Indonesia. 2018.
Peraturan Badan Pengawas Obat Dan Makanan Republik Indonesia Nomor 8
Tahun 2018 tentang Batas Maksimum Cemaran Kimia Dalam Pangan
Olahan. Badan Pengawas Obat Dan Makanan Republik Indonesia, Jakarta.
[BSN] Badan Standarisasi Nasional. 2009. SNI 7385:2009 tentang Batas Maksimum
Kandungan Mikotoksin Dalam Pangan. Badan Standarisasi Nasional,
Jakarta.
Bullerman, L.B. 1978. Significance of mycotoxin to food safety and human health.
J.Food Protection 42:65.
Dharmaputra, O.S., I. Retnowati., A.S.R. Putri, dan S. Ambarwati. 2003. Aspergillus
flavus and aflatoxin in peanuts at various stages of delivery chain in Pati
regency. Paper presented at 21st ASEAN/3rd APEC Seminar in Postharvest
Technology in Nusa Dua, Bali, Indonesia, 23– 26 August 2003.
Dorner J.W. 2008a. Management and prevention of mycotoxin in peanuts. Food
Additives and Contaminants Part A 25(2):203–208.
Farag, R.S., M.M. Rashed and A.A.A. Abo Higger. 1996. Aflatoxin destruction by
microwave heating. Int. J. Food Sci. Nutr. 47:197–208.
Ginting, E. dan J.A. Beti. 1996. Upaya penyediaan bahan baku 'bebas' aflatoksin
mendukung agroindustri kacang tanah. Di dalam N. Saleh, K. Hartojo,
Heriyanto, A. Kasno, A.G. Manshuri, Sudaryono dan A. Winarto (ed).
Risalah Seminar Nasional Prospek Pengembangan Agribisnis Kacang Tanah
di Indonesia. Edisi Khusus Balitkabi No. 7–1996. hlm 388–405.
Globlatt, L.A. 1969. Introduction In Globlatt. L.A. (ed). Aflatoxin : Scientific
Background, Control and Implacation. Academic Press, Sydney. pp. 1-10.
Hadi, Anwar. 2018. Persyaratan Umum Kompetensi Laboratorium Pengujian Dan
Laboratorium Kalibrasi ISO/IEC 17025 : 2017. PT Gramedia Pustaka
Utama, Jakarta.
ICAR. 1987. Aflatoxin in Groundnuts. New Delhi, ICAR.
IPB. 1994. Kursus singkat biologi cendawan, atas kerjasama Institut Pertanian Bogor
dan Direktorat jenderal Pendidikan Tinggi DEPDIKBUD. IPB Bogor : 11-29
Januari 1994.

28
 29

Kasno A. 2004. Pencegahan Infeksi Aspergillus flavus dan kontaminasi aflatoxin

pada kacang tanah. Jurnal Litbang Pertanian 23: 75-79.
Kennedy IR. 2003. An overview of aflatoxin contaminan in food and feed risk
assesment and management. University Of Sydney, Sydney.
Miskiyah, et al. 2005. Status Kbntaminan Aflatoksin Pada Kacang Tanah Dan Produk
Olanannya. Prosiding Seminar Nasional Teknologi lnovatif Pascapanen
untuk Pengembangan lndustri Berbasis Pertanian, Bogor : 7-8 September
2005. hlm. 508-520.
Nauli, Riska. 2015. Pengujian aflatoksin pada sampel kacang tanah metode TPI
secara Kromatografi Lapis Tipis (KLT) di laboratorium servis SEAMEO
BIOTROP. Universitas Djuanda, Bogor.
P. Rahayu, Winiati. 2012. Mikrobiologi Pangan. IPB Press, Bogor.
Paramawati, R., R.W. Arief dan S. Triwahyudi. 2006. Upaya menurunkan
kontaminasi aflatoksin B1 pada kacang tanah dengan teknologi pascapanen
(Studi kasus di Lampung). J. Enjiniring Pertanian 4(1):1–8.
Pettit, R.E. 1984. Yellow mold and aflatoxin. In D.M. Porter et al. (Eds.).
Compendium of Peanut Diseases. The Am. Phytophat. Soc. p 35–36.
Rachmawati S. 2003. Aflatoksin dan Pengembang ELISA kit. Di dalam : Pelatihan
Metode ELISA untuk Mendeteksi aflatoksin pada Pakan, Balai Penelitian
Veteriner Bogor, 25-26 Juni 2003.
Rahmianna, A.A., Ginting, R., Yusnawan, E. 2015. Kontaminasi aflatoksin dan cara
pengendaliannya melalui penanganan pra dan pascapanen. Di dalam
Prosiding Balai Penelitian Tanaman Aneka Kacang dan Umbi, Malang : 18
Juni 2015. Hlm 329-347.
Razzazi-Fazeli E, Noviandi CT, Porasuphatana S, Agus A, Bӧhm J. 2004. A survey
of aflatoxin B1 and total aflatoxin contamination in baby food, peanut and
corn products sold at retail in Indonesia analysed by ELISA and HPLC.
Mycotoxin Res 20(2):51-8. doi : 10.1007/BF02946735.
Reddy, U. 1996. Aflatoxin –its prevention and detoxification. Food and Nutrition
News of Acharta N.G. Ranga Agric. Univ. 1(4):1–4.
Sardjono. 1998. Pencemaran pangan oleh jamur, potensi bahaya dan Pencegallantlya.
Agritech 18:2: 23 - 27.
Sauer DB, Meronuck RA, Christensen CM. 1992. Microflora. Di dalam : Sauer DB,
edito. Storage of Cereal Grain ang Their Product. Ed ke-4. St. Paul :
American Association of Cereal Chemist. Hlm 313-340.
 30

Wiatrak P.J., Wright D.I., Marios J.J., and Wilson D. 2006. Effect of irrigation and
gypsum application on aflatoxin in peanuts. Soil Crop Sci. Soc. Florida Proc.
65:5–8.
Winarno. F. G. 2008. Kimia Pangan Dan Gizi. M-Brio Press, Bogor.
LAMPIRAN
 31

Lampiran 1.Struktur Organisasi SEAMEO BIOTROP

 32

Lampiran 2. Struktur Organisasi Laboratorium Servis SEAMEO BIOTROP

 33

Lampiran 3. Bagan Kerja

Tahap 1 : Ekstraksi

+ 10 mL NaCl 2,2% Di shaker

+ 50 mL Metanol CCC selama 20 menit,
Kemudian di saring,
Ditimbang sampel 25 gram
ditampung fraksi
metanol

Lapisan bawah
ditampung, lapisan
atas dibuang

Fraksi
Metanol Defatting
2 x 25 ml n-heksan

Tahap 2 : Defatting

Tahap 3 : Clean Up

Lapisan bawah (fraksi Lapisan atas + 25 ml

kloroform) ditampung, kloroform, diekstrak
Filtrat disaring kembali
+ 1 g Na2SO4 anhidrat
hingga bening

Lapisan bawah
diekstrak dengan
25 ml kloroform

Lapisan bawah Filtrat dipekatkan

ditampung, disatukan dengan diuapkan
dengan hasil diatas pemanas,
tampungan yang hingga terbentuk
pertama, lapisan atas residu Sisa penguapan yang
dibuang
merupakan
aflatoksin, kemudian
+ 200 µL kloroform
 34

Spotting sampel pada lempeng yang

sudah disiapkan
Keterangan :
Sampel di spotting sebanyak 10 µL.
Spotting deret standar (1-10 µL) dengan
larutan standar kerja 1-4 ppm. Dielusi dengan eluen
kloroform : aseton
(9:1)

Dikeringkan
dengan dryer

Diamati dibawah lampu UV dengan

panjang gelombang 365 nm
 35

Lampiran 4. Data Perhitungan

No Kode W (g) FP V. Spot V. Akhir Kons. STD V. STD Hasil

Contoh Contoh (µL) (µL) (ppm) (µL) (ppb)
3132 Kacang tanah 27.0025 1 10 500 2.15 5 19,91
3133 Sukro 25.0895 1 10 200 2.15 3 5.14
3134 Sambel pecel 25.0882 1 10 200 2.15 0 < MDL

S × Y × Vp
Kandungan aflatoksin (µg/kg) = × FP
W ×Z
5× 2.15 ×200
Kandungan aflatoksin (Kacang tanah) = × 2 = 19.91 ppb
27.0025× 10
3× 2.15 ×200
Kandungan aflatoksin (Sukro) = × 1 = 5.14 ppb
25.0895× 10
0 ×2.15 ×200
Kandungan aflatoksin (Sambel pecel) = × 1 = 0 ppb
25.0882× 10
 36

Lampiran 5. Foto Dokumentasi Kegiatan Praktek Lapang

Proses preparasi sampel Sukro

A B C

Keterangan :
A. 3132 = Kacang tanah
B. 3133 = Sukro
C. 3134 = Sambel pecel

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 A BC IRM C

Deret Standar