Definisi

ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) adalah suatu teknik biokimia berbasis plate
yang terutama digunakan dalam bidang imunologi untuk mendeteksi dan mengukur
konsentrasi antigen (peptida, hormon, protein) dan antibodi dalam suatu sampel.
Prinsip Elisa
1. Coating : antigen atau antibody diimobilisasi
2. Blocking : Antibodi atau antigen tidak ditutupi
3. Deteksi : Plate diinkubasi dengan antibody yang terkonjugasi dengan enzim.
4. Read Result : Substrat ditambahkan ke dalam plate yang akan menghasilkan
perubahan warna
Jenis Elisa
1. Direct
Antigen diimobilisasi pada well plate, dan kemudian dideteksi secara
langsung menggunakan antibodi yang terkonjugasi dengan enzim substrat, seperti HRP.
2. Indirect
Antigen diimobilisasi pada well plate, kemudian antibodi primer yang tidak
berlabel berikatan dengan antigen spesifik, kemudian antibodi sekunder terkonjugasi enzim
berikatan dengan antibodi primer.
3. Sandwich
Dalam sandwich ELISA, diperlukan sepasang antibodi yang cocok (antibodi
penangkap dan deteksi), yang masing-masing harus spesifik lokasi atau epitel dan tidak
boleh tumpang tindih pada antigen.
4. Competitive
Antigen diimobilisasi pada well plate, kemudian ditambahkan antibodi anti-A
yang terkonjugasi enzim (sebagai inhibitor antigen). Sampel yang mengandung antibodi
anti-A ditempatkan ke dalam sumur. Kedua antibodi akan bersaing untuk mengikat antigen.
Aplikasi Metode Elisa pada hormon insulin
Salah satu penggunakan aplikasi metode Elisa yaitu identifikasi hormon insulin, sebuah
penelitian yang dilakukan oleh Hayati (2019) yang meneliti kadar insulin dan kadar glukosa
darah pada tikus yang di induksi Bhispenol A, variabel kadar insulin pankreas tersebut
dihitung dengan menggunakan uji Elisa tekhnik Sandwich dengan panjang gelombang 450
nm
gambar kisen
dari gambar di atas didapatkan, hasil persamaan

gambar diatas merupakan kurva uji elisa pada perhitungan kadar insulin didapat persamaan
y= dan R