MSP-1: PROTEINA PROTECTORA DE PLASMODIUM DURANTE LA

RESISTENCIA INMUNITARIA

JESUS IGNACIO JARAMILLO MONREAL

YAZDI PALOMA BRAVO BARRON
JAIME INSAUSTI MARTINEZ
DIEGO NUÑEZ DE ANDA
OCTAVIO CASTILLO

QBP: JULIA AURORA ALONZO ROJO

UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE DURANGO

FACULTAD DE MEDICINA

4º A

MAYO DE 2011
(1)
Introducción:

El paludismo o malaria, es uno de los problemas de salud más importantes en el

mundo actual, no sólo por la elevada mortalidad que provoca en las zonas
endémicas, si no por el aumento de casos fuera de las citadas zonas, debido a los
amplios movimientos demográficos que se producen en la actualidad (turismo,
migración, etc.). (2)

Algunas regiones de Latinoamérica como Colombia, Chile, Argentina, Costa Rica,

Panamá, México, tienen una gran incidencia, más aun en las zonas geográficas
con abundante vegetación, clima húmedo y caluroso, que es el adecuado habitad
para que el parasito prolifere. (2)

Ahora bien, dentro de nuestro protocolo abordaremos la respuesta inmune que

nuestro organismo adquiere frente al parasito, enfocándonos primordialmente en la
inmunidad adquirida y a las proteínas parasitarias que participan en dicha acción.

La respuesta innata para Plasmodium no se ha esclarecido completamente, se

postula que estos incluyen la activación de macrófagos, además de un aumento en
el número de las células NK. (3)

El desarrollo de inmunidad específica contra la malaria depende del nivel de

endemicidad de la infección en una población dada. En humanos, la inmunidad
adquirida contra los antígenos del Plasmodium se hace evidente durante los
primeros días de la segunda semana después de que la parasitemia puede ser
detectada, lo cual conduce a una reducción de la taza de multiplicación del
parásito.

La respuesta del parasito a la adaptación dentro del organismo depende de la

proteína de superficie del merozoíto MSP-1 que está asociada al fenómeno de
invasión de la malaria al glóbulo rojo, mientras que la proteína del antígeno EBA-
140 interactúa con las sialo-glicoproteínas de la superficie de los eritrocitos. (4)

Los investigadores concuerdan en la proteína MSP-1 que contiene los anticuerpos

son glicoproteínas que pueden proteger de enfermedades como la malaria por su
capacidad de unión a proteínas y consecuente neutralización de parásitos a través
del bloqueo del proceso de invasión.

En estos trabajos, se ha desarrollado un numero de ensayos para evaluar la

inhibición de la invasión de merozoítos de Plasmodium yoelii, una de las etapas
invasivas del parasito de la malaria, mediada por la Proteína de Superficie de
Merozoíto 1 (MSP-1), usando Anticuerpos Monoclonales (Mabs) dirigidos contra un
fragmento de 19 kDa de MSP-1 (MSP-1) (3,4,5)

El protocolo lo dirigiremos hacia la investigación de la acción de dicha proteína,

permitiendo así, comprobar la actividad inmunitaria de resistencia del parasito
dentro del organismo.
Objetivos:
 Objetivo general:

Interpretar con detalle la respuesta inmunológica de plasmodium dentro del

organismo hospedero, permitiendonos comprender la capacidad que tiene el
parasito de sobrevivencia y mantenimiento a nivel intracelular, por medio de la
investigación y estudio del ciclo de vida del parasito dentro de los eritrocitos.

 Objetivo especifico:

Investigar la adaptación y la ayuda especifica de la proteína merozoito MSP-1 al

fenómeno de la invasión de la malaria al glóbulo rojo permitiendo así, comprobar la
actividad inmunitaria de resistencia del parasito dentro del organismo.

Justificación:

Implementaremos el estudio en las regiones mas necesitadas del problema, con la

ayuda de los investigadores relacionados con la problemática, tratando de obtener
los resultados mas favorables, para tratar de entender la función de la proteína, en
cuestión de que nos ayude a dar una respuesta dell funcionamiento global de la
proteína MSP-1, conociendo esto, brindaremos a las autoridades correspondientes
los resultados para que ofrezcan la ayuda necesaria, siendo así las personas en
los lugares endémico los mas beneficiarios en cuestión a los resultados obtenidos.

Hipotesis:
➢ MSP-1, realiza acividad inminitaria contra el hospedero.
➢ El hospedero no tiene proteccion contra MSP-1
➢ Para el plasmodiun dicha proteina, es la que tiene mas actividad inmunitaria.

Material y métodos:

 Universo de estudio:

Donde N es el tamaño de la población

alfa es el valor del error tipo 1
z es el valor del número de unidades de desviación estándar para una prueba de
dos colas con una zona de rechazo igual alfa.
0.25 es el valor de p2 que produce el máximo valor de error estándar, esto es p =
0.5
n es el tamaño de la muestra.
  Tamaño de muestra: 356 px que tengan alguna etapa de la enfrmedad.
http://www.elosiodelosantos.com/calculadoras/tamanyio_muestra.htm
Con esta formula, calculamos el universo de estudio.
 Criterios de inclusión:
 Tamaño de muestra:
 Serán px de ambos sexos
 Px que presenten las primeras etapas de la enfermedad
 px que residan en zonas endemica de enfermedad
 px que tengan el consentimiento de toma de muestra
 px que esten en alguna etapa de la enfermedad
 tiempo: el necesario para la toma de muestra y la realizcion de las pruebas
inmunologica para la proteina MSP-1
 muestras limpias
 Se realizaran muestras en sangre para determinar las proteínas

● Criterios de exclusión:
1.- que no esten con tx antipaludico
2.- que no tengan algun otro padecimiento que interfiera con el estudio
3.- que no este fuera del area de estudio

● Tipo de estudio:
Transversal descriptivo cuantitativo

● Ética:

Departamento de investigación del Hospital Universitario “Dr. Rodolfo Flores

Lepe”

Nombre del px:______________________________ Fecha:______________

Comunidad:_________________________ Etapa de la enfermedad______________

Por medio de este escrito, me permito comnicarle todo aspecto relacionado con el estudio:

Beneficios:
1.- Las autoridades encontraran una mejor forma de tratar su padecimiento.
2.- Mayor control de la enfermedad en su zona de residencia.
3.- Conoceremos a fondo su padecimiento.
4.- Reduccion de incidencia en su comunidad.
5.- Realizacion de campañas contra Paludismo

Riesgos:
1.- Riesgos minimos (nulos), pues solo se efectuara toma de sangre
2.- Posible inchazon en la zona de toma de muestra.

Los objetivos son los siguientes:

 Objetivo general:
Interpretar con detalle la respuesta inmunológica de plasmodium dentro del organismo
hospedero, permitiendonos comprender la capacidad que tiene el parasito de sobrevivencia
y mantenimiento a nivel intracelular, por medio de la investigación y estudio del ciclo de
vida del parasito dentro de los eritrocitos.

 Objetivo especifico:
Investigar la adaptación y la ayuda especifica de la proteína merozoito MSP-1 al fenómeno
de la invasión de la malaria al glóbulo rojo permitiendo así, comprobar la actividad
inmunitaria de resistencia del parasito dentro del organismo.

Con lo anterior:
1.- El procedimiento, sera llevado a cabo en un laboratorio de inmuniologia.
2.- Se realiza uan toma de sangre en brazo.
3.- Solo se tomara muestra a personas que presenten una etapa de la enfermedad.
4.- La toma de muestra y su nombre, solo seran revisados por personal autorizado,
proporcionadoles seguridad en sus resultados.

Encargado: Dr. Jesús Ignacio Jaramillo Monreal. Dpto de investigacion.

● Factores de riesgo
El cuestionario se anexa al final (anexo 1)

● Cronograma
Entregas Febrero Marzo 8 Abril 12 Mayo 12 Junio
22 y 29 y 26 y 19
Entrega de titulo     
de la investigación
Entrega de    
planteamiento del
problema
Justificación y uso   
de los resultados
Entrega de  
fundamento
teórico
Objetivo de  
investigación
Entrega de  
metodología

● Consentimiento informado

Departamento de investigación del Hospital Universitario “Dr. Rodolfo Flores

Lepe”
 DECLARACIÓN DE CONSENTIMIENTO INFORMADO

D./Dña …………………………, de ….. años de edad y con DNI nº ……….., manifiesta

que ha sido informado/a sobre los beneficios que podría suponer la extracción de un
volumen de X ml de mi sangre para cubrir los objetivos del Proyecto de Investigación
titulado “La respuesta inmune de plasmodium ” con el fin de conocer con exactitud la
proteína MSP 1, que actúa durante la respuesta inmune de.

He sido informado/a de los posibles perjuicios que la extracción de una muestra de X ml

de sangre puede tener sobre mi bienestar y salud.

He sido también informado/a de que mis datos personales serán protegidos e

incluidos en un fichero que deberá estar sometido a y con las garantías de la ley 15/1999
de 13 de diciembre.

Tomando ello en consideración, OTORGO mi CONSENTIMIENTO a que esta extracción

tenga lugar y sea utilizada para cubrir los objetivos especificados en el proyecto.

XXX, a XX de XXXX de 2011.

____________________________________________
Fdo. D/Dña

● Área experimental:

 Las muestras seran guardadas ebn contenedor refrugerado, para la conserva

de las mismas.

 Las muestras seran llevadas al laboratorio, para llevar a cabo las pruebas
experimentales.

 Contaremos con la ayuda de tres médicos expertos en inmunología

 Las tomas de muestra seran analizadas en un laboratorio equipado para

inmunología

 Para el manejo del eqipo contaremos con el apoyo de un laboratorista

experimental
 Los anticuerpos monoclonales (Mabs) serán evaluados previamente en un
ensayo de transferencia pasiva que inhibía el crecimiento del parásito y
también serán caracterizados. Para evaluar la inhibición de la invasión se
utilizara un panel de cinco de estos Mabs (B10, B6, F5, D3 and D9) hechos
contra el fragmento C-terminal de la MSP-1 de P yoelii. Para comparar el efecto
de la inhibición se realizara una prueba ANOVA. (6,7) (metodo con el que
analizaremos la muestra)

 Los resultados obtenidos, segran entregados a las autoridades

correspondientes, para que estas apliquen las medidas consiguientes.

 Se realizaran los estudios posteriores correspondientes.

Referencias:

1.- GUÍA PARA LA ELABORACIÓN Y PRESENTACIÓN DE TRABAJOS ESCRITOS

Nora Cañón Vega
Coordinadora Área de Información y Documentación
UNIVERSIDAD DE LA SALLE
FACULTAD DE SISTEMAS DE INFORMACIÓN Y DOCUMENTACIÓN
2.- Ginecología y Obstetricia Clínica 2004;5(4):204-210. Paludismo y gestación.
Antonio Payà Ramón Carreras Servicio de Obstetricia y Ginecología
Hospital del Mar IMAS Universitat Autónoma de Barcelona

3.- http://docencia.udea.edu.co/vicedocencia/trabajos/amanda/actividad_5.htm

4.- Holder AA, Freeman RR. Byosynthesis and proccesing of a Plasmodium

Falciparum scizont antigen recognized by immune serum and a monoclonal
antibody. J Exp Med 1982;156:1528-1538.

5.- Depto de microbiologia y parasitologia/ PALUDISMO

Dra. Teresa Uribarren Berrueta
Departamento de Microbiología y Parasitología, Facultad de Medicina, UNAM.
berrueta@servidor.unam.mx

6.-
HIJAR G, Gisely, QUINO A, Higinio, PADILLA R, Carlos et al. Variabilidad genética
de Plasmodium falciparum en pacientes con malaria grave y malaria no complicada
en Iquitos - Perú. Rev. perú. med. exp. salud publica, jul./set 2002, vol.19, no.3, p.131-
135. ISSN 1726-4634.

7.- Evaluation of the inhibition of invasion in vitro of P. yoelii strain

with different monoclonal antibodies raised against MSP-119
Lilian Spencer1, Daniela Quintana1 and Luis Hidalgo2
1Departamento de Biología Celular, Universidad Simón Bolívar, Caracas, Venezuela. 2Bioterio, Universidad
Simón Bolívar, Caracas, Venezuela.