SUMARIO
ORIGINAL
Brucelosis: comparación de
los test serológicos de diagnóstico
M. ORTIZ FERNÁNDEZ*, E. LOPERA LOPERA**, P. CEBALLOS GARCÍA*, R. MERINO CABALLERO*,
M. VALLE JIMÉNEZ***, F. GASCÓN LUNA ****
* Adjunto de Urgencias. ** Coordinadora de Urgencias. *** Adjunto de Análisis Clínicos.**** Jefe Serv. Análisis Clínicos.
Servicio de Urgencias. Hospital "Valle de los Pedroches". Pozoblanco (Córdoba).
Semergen 25 (1): 16-19.
OBJETIVOS: Análisis de los métodos serológicos de diagnóstico
de la brucelosis en el Área Norte de la provincia de Córdoba.
MATERIAL Y MÉTODOS: Estudio prospectivo de 21 pacientes
diagnosticados de brucelosis en un servicio de urgencias
hospitalario, con el objeto de valorar la utilidad de los tres
métodos serológicos de diagnóstico que se realizan en el Servicio
de Análisis Clínicos de nuestro centro: rosa de Bengala,
seroaglutinación de Wright y test de Coombs.
RESULTADOS: Exponemos los datos de los tres métodos
analíticos en el diagnóstico de brucelosis y en su seguimiento,
comparándolos entre ellos. El rosa de Bengala fue positivo en el
100% de los casos en la primera determinación, siendo al año del
85,71%. El test de Coombs fue positivo en el 85,71% de los casos
en la primera determinación, negativizándose al año el 100%. En
la seroaglutinación no obtuvimos diferencias significativas entre la
primera (33,3% de positivos) y la última determinación (19%). La
mayor concordancia la encontramos entre rosa de Bengala y test
de Coombs (80-85%) en las tres primeras determinaciones.
CONCLUSIONES: Valoramos la eficacia de cada una de estas
pruebas, concluyendo la alta rentabilidad del rosa de Bengala en
cuanto al diagnóstico inicial y del test de Coombs en cuanto al
seguimiento de la enfermedad.
■ PALABRAS CLAVE:
Brucelosis. Rosa de Bengala. Test de Coombs.
Aglutinación de Wright.
OBJECTIVES: Analysis of the serological diagnostic methods of
brucellosis in the North Health Area of the Cordoba province.
MATERIAL AND METHODS: Prospective study of 21 patients
diagnosed of brucellosis in a hospital emergency service to
evaluate the usefulness of the three serological diagnostic methods
performed in our center’s Clinical Analysis Service: rose bengal
test, Wright’s seroagglutination test, Coombs test.
RESULTS: We present the data of the three analytic methods to
diagnosis brucellosis and their follow-up, and compare them. The
rose bengal test was positive in 100% of the cases in the first
determination, and in 85,71% at one year. The Coombs test was
positive in 85.71% of the cases for the first determination, and
100% were negative at one year. In the seroagglutination test, we
did not obtain any significant differences between the first (33,3%
positives) and the final determination (19%). The greatest
concordance was found between the rose bengal and the Coombs
test (80-85%) in the first three determinations.
CONCLUSIONS: We evaluate the efficacy of each one of these tests
and conclude that the rose bengal test has high yield regarding the
initial diagnosis and the Coombs Test regarding the disease follow-up.
■ KEY WORDS:
Brucellosis. Rose Bengal. Coombs Test. Wright’s
Agglutination Test.
16
■ Introducción
La brucelosis es una infección causada por microor-
ganismos del género brucella, generalmente transmitida
al hombre por animales domésticos. La enfermedad se
caracteriza por fiebre, sudoración, debilidad y malestar
general, a menudo sin signos de localización (1-3).
El diagnóstico de brucelosis se basa en la sospecha
clínica de la enfermedad, que debe confirmarse por de-
mostración de brucella en el organismo y/o en la de an-
ticuerpos antibrucella en sangre.
Las pruebas serológicas son un método rápido, acce-
sible y de un coste aceptable. Su dificultad estriba en su
variable interpretación, dependiendo de si nos encontra-
mos en áreas endémicas o no (4, 5), áreas urbanas o ru-
rales (6) y de la elección de la titulación a partir de la
cual consideremos como positiva (4-8).
El diagnóstico serológico de la brucelosis en nuestro
hospital se basa en las pruebas rosa de Bengala, seroa-
glutinación de Wright y Coombs antibrucella (8-13):
– Rosa de Bengala (RB): prueba muy útil y rápida de
screening. Positiva en el 95-99% de los pacientes con
brucelosis. Su negatividad prácticamente descarta la en-
fermedad.
– Seroaglutinación (SAT): sensibilidad y especificidad
altas. La actividad aglutinante está ligada a inmunoglobu-
lina de tipo Ig M, Ig G e IgA. Puede observarse "fenó-
meno de prozona", con negatividad en los primeros tu-
bos y positividad en los siguientes.
– Test de Coombs (TC): se basa en la demostración de
anticuerpos antibrucella no aglutinantes de la clase Ig G.
El objetivo de nuestro trabajo es valorar la rentabili-
dad de las tres pruebas analíticas serológicas tanto en el
diagnóstico como en el seguimiento de la brucelosis, en
una zona con alta incidencia de la enfermedad (14, 15).
■ Material y métodos
El Hospital Comarcal de Pozoblanco se encuentra
enclavado en el Área Norte de la provincia de Córdoba,
atendiendo una población de aproximadamente 90.000
habitantes, de predominio rural y mayoritariamente de-
dicada al sector agro-ganadero.
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■ ■ ■ 20
20
■

■
■

15 ■

15

10
10

5 5

0 0 ■

Basal 4ª semana 8ª semana Año Basal 4ª semana 8ª semana Año

Casos (+) ––
■ 21 21 21 18 Casos (+) ––
■ 18 17 15 0

Figura 1. Evolución de rosa de Bengala durante un año. Figura 2. Evolución test de Coombs durante un año.

Se realiza un estudio prospectivo de los pacientes
diagnosticados de brucelosis en el servicio de urgencias
del hospital durante un período de dos años, conside-
rando criterios de inclusión: cuadro clínico, epidemiolo-
gía compatible y RB positivo. Se consideró criterio de
exclusión pacientes que hubiesen padecido previamente
la enfermedad. A lo largo del estudio se excluyeron sie-
te casos, bien por no confirmación mediante SAT y TC
o por no haber acudido a todas las revisiones, finalizan-
do un total de 21 casos.
Todos los pacientes fueron tratados con asociación
de dos antibióticos (doxiciclina más estreptomicina o
doxiciclina más rifampicina) (9, 10, 16-18), determinán-
dose las tres pruebas serológicas en el momento de su
diagnóstico y posteriormente en su seguimiento a las
cuatro y ocho semanas y al año.
El RB fue realizado por medio del Brucelloside
Test (Biomerieux). Para la SAT se utilizó en principio
el reactivo test de Wright de Menarini Diagnósticos
S.A., mientras en la última fase del estudio se dispuso
Como método estadístico se han utilizado los valo-
res absolutos y relativos y el test de Concordancia bru-
ta para comparación de pruebas diagnósticas.
Para el proceso de los datos hemos utilizado el pro-
grama de base de datos EpiInfo V.6 y el paquete estadís-
tico Epidet V.4.
■ Resultados
La prueba RB se mantuvo positiva en los 21 casos
(100%) en las determinaciones primera, segunda y terce-
ra, negativizándose sólo tres (14.28%) al año (Fig. 1). En
estos tres pacientes también se negativizaron SAT y TC.
El TC fue positivo en la primera determinación en
18 casos (85.71%); en la segunda determinación se man-
tenía positivo en 17 (80.95%) y en la tercera en 15
8

del reactivo Brucella Abortus Antigen (Gamma Biolo- 7 ■

gicals, Inc). Para la realización del TC se usó el reacti-

6 ■

vo Wright-Test (Biomerieux). Se consideraron como

positivas las diluciones 1/160 tanto para SAT como 5 ■

para el TC, aunque no hemos encontrado unanimidad 4 ■

de criterios en la bibliografía consultada, oscilando las

3
diluciones consideradas como positivas desde 1/80 a
1/320 para ambas pruebas (4, 6, 7, 19-22). Así, por 2

ejemplo, Martín Moreno et al (5) tomando como "pa-

1
trón oro" los hemocultivos consideran como positi-
vos títulos de 1/160 para SAT y 1/320 para TC, obte- 0
Basal 4ª semana 8ª semana Año
niendo una alta sensibilidad para SAT y TC (93 y 92%, Casos (+) ––
■ 7 6 5 4

respectivamente) y una alta especificidad (97 y 100%,

respectivamente). Figura 3. Evolución de seroaglutinación durante un año.

17
 SEMERGEN

(71.42%). En la revisión al año el TC fue negativo en 21

casos (100%) (Fig. 2). En ningún paciente se produjo au- TABLA I
mento del título entre las ocho semanas y el año. Análisis de concordancia entre los
La SAT resultó negativa en 14 casos (66.66%) en la tres métodos serológicos
primera determinación, manteniéndose de forma similar 4.ª 8.ª
en la segunda y tercera (15 y 16, respectivamente). En Basal Año
el control anual 4 fueron positivas (Fig. 3). Si hubiése- seman. seman.
mos considerado como positivos títulos de 1/80 (21) los SAT-TC 0,47 0,47 0,52 0.80
resultados obtenidos serían muy similares a los presen- RB-TC 0,85 0,80 0,80 0,14
tados con 1/160, obteniendo incluso una menor concor- RB-SAT 0,33 0,28 0,33 0,33
dancia con TC en la cuarta determinación. SAT: seroaglutinación
En la figura 4 se exponen datos conjuntos de las tres TC: test de Coombs
pruebas donde se puede apreciar la diferencia de sensi- RB: rosa de Bengala
bilidad entre SAT y TC.
El análisis de concordancia bruta realizado entre SAT-TC,
RB-TC y RB-SAT reflejó los datos expuestos en la tabla I. Destacamos la rentabilidad en un servicio de urgen-
Observamos una buena concordancia bruta (supe- cias de la prueba RB, de gran rapidez y escaso coste, y
rior al 80%) solamente entre RB y TC en sus tres pri- de una alta sensibilidad demostrada (5,8), tanto que la
meras determinaciones, siendo muy pequeña (14%) al hemos considerado como uno de los criterios diagnósti-
año, ya que el RB se negativiza muy tardíamente. cos (apoyado posteriormente por las otras dos pruebas),
Respecto a la SAT sólo obtenemos una concordancia siempre que el paciente no hubiese padecido brucelosis
bruta aceptable (80%) en su relación con el TC en la previamente. No hemos podido valorar en qué momento
determinación al año. Es llamativa la falta de concordan- se negativiza la prueba, ya que esto sólo ocurrió en tres
cia respecto al TC en las tres primeras determinaciones casos (entre las 8 semanas y el año), dato que tampoco
al igual que ocurre con el RB. hemos encontrado en la bibliografía consultada. Por tan-
to, carece de valor en el seguimiento de la enfermedad.
■ Discusión En cuanto al TC, los datos obtenidos reflejan la im-
portante concordancia con el RB en la primera determi-
La sospecha de brucelosis en una zona de alta inci- nación (85.71%) y su disminución progresiva a lo largo
dencia de la enfermedad debe estar presente en cualquier de un año, en relación con la resolución clínica de la en-
síndrome febril sin foco aparente. Esto, y el hecho de que fermedad. Ariza et al (23) encuentran que el período
este tipo de cuadro febril sea frecuentemente remitido medio de persistencia de positividad fue de 11,2 meses
desde Atención Primaria a los servicios de urgencias hos- para SAT y de 21,7 para TC, cuando en nuestro caso el
pitalarios, nos ha llevado a estudiar el comportamiento TC se negativizó en el 100% de los casos a los 12 me-
de las pruebas analíticas serológicas en nuestro medio. ses incluso considerando positivos títulos de 1/160. Por
esto lo consideramos el test de elección para la confir-
mación del diagnóstico, el seguimiento y el despistaje de
25
cronificación de la enfermedad.
■ ■ ■
Los datos más sorprendentes los hemos encontrado
20
en los resultados de la SAT, no habiendo podido confir-
+
+ ■

mar la alta sensibilidad encontrada en la literatura

15 + (5,6,8). Por contra, hemos obtenido un baja concordan-
cia entre la SAT y el TC en las dos primeras determina-
10
ciones (entre 47-52%) y un número relativamente alto
* de casos positivos al año (19%), en pacientes totalmente
5 * * * asintomáticos y con TC negativo. Diversos factores in-
trínsecos a la metodología utilizada en la SAT podrían
Casos (*) 0 +
R. Bengala ––
■
Basal

21
4ª semana

21
8ª semana

21
Año

18
estar en el origen de estos resultados. Por un lado, la
Coombs + 18 17 15 0 variabilidad interobservador, al ser una técnica de inter-
SAT
* 7 6 5 4
pretación subjetiva, sumado al cambio de antígeno utili-
SAT: seroaglutinación
zado durante el período de estudio al haberse utilizado
Figura 4. Evolución comparada de los tres test serológicos durante un año. dos reactivos de distinto fabricante, teniendo en cuenta

18
SUMARIO
que no existe una estandarización internacional de estos
antígenos. También debemos valorar la posibilidad de
efecto prozona en el screening de la SAT previo a la titu-
lación. Además de los aspectos metodológicos, la pre-
sencia de SAT negativa con TC positivo estaría justifica-
da en estadios subagudos de la enfermedad.
Como refiere Ariza (7), no existe en España un cen-
tro de referencia que permita homogeneizar los resulta-
dos serológicos, existiendo una importante diferencia
entre laboratorios, el antígeno y la metodología utiliza-
da. Por tanto, para aumentar la eficacia diagnóstica de
esta prueba se hace necesaria una estandarización meto-
dológica y una disminución de la posibilidad de efecto
prozona, para lo cual nuestro laboratorio ha pasado a
utilizar el RB como screening único previo a la titulación.
Por otro lado, se hace necesario un estrecho contacto
entre los clínicos y los profesionales del laboratorio, ya
que un mejor conocimiento del estadio de la enferme-
Bibliografía
1. KAYE D, PETERSDORF R. Brucelosis. En: Braunwald et al
(Eds). Harrison: Principios de Medicina Interna. Undécima edi-
ción española 1989; 751-754.
2. GARCÍA SAN MIGUEL J. Brucelosis. En: Farreras-Rozman
Eds. Medicina Interna. Undécima edición 1988; 2090-2096.
3. ROCA B. Brucelosis. Medicina Integral 1990; 15 (8); 37-49.
4. RODRÍGUEZ TORRES A. Brucela. En: Pumarola et al (Eds).
Microbiología y parasitología clínica, 2ª ed. Barcelona: Salvat Edi-
tores S.A. 1987; 495-501.
5. MARTÍN S, GUINEA L, CARRERO P, VISADO R, GARCÍA
S, CALVO T, REVERTE D. El diagnóstico de la brucelosis en un
área endémica. Valoración de las pruebas diagnósticas habitua-
les. Med Clín (Barc) 1992; 98:481-487.
6. RODRÍGUEZ A, FERMOSO J. Brucelosis. En: Foz A, Roy C,
Eds. Patología infecciosa básica. Idepsa 1989; 50-62.
7. ARIZA J. Diagnóstico de la brucelosis en la actualidad. Med
Clín (Barc) 1992; 98: 494-495.
8. GARCÍA P, FERNÁNDEZ MT, PAREDES F. Microbiología Clí-
nica Práctica. Universidad de Cádiz 1993; 342-347.
9. ABARCA M, MARTÍN P, MARTÍN JA. Diagnóstico y trata-
miento de la brucelosis y salmonelosis. En: Gutiérrez F, García
JD. Manual de Diagnóstico y Terapéutica Médica. Hospital 12 de
Octubre 1990; 633-635.
10. WORLD HEALTH ORGANIZATION. A guide to the diag-
nosis, treatmen and prevention of human brucellosis. En: Elberg
SS, ed. documento VPH/81.31. Ginebra, 1981.
11. DÍAZ R, MARAVÍ-POMA E, RIVERO A. Comparison of
counterimmunoelectrophoresis with other serological test in the
diagnosis of human brucellosis. Bull WHO 1976; 53: 417-424.
12. FOZ A. Diagnóstico serológico de la brucelosis humana. En:
Guía práctica de diagnóstico de la brucelosis humana. Vallado-
lid, Ed. Sever Cuesta 1997; 55-112.
Correspondencia: M. Ortiz Fernández. C/ Hilario Angel Calero, 15,
1º dcha. 14400 Pozoblanco (Córdoba).
ORIGINAL
dad facilitaría la interpretación y validación de los resul-
tados analíticos.
Actualmente para el diagnóstico de brucelosis debe-
mos de apoyarnos en un cuadro clínico sugestivo y rea-
lización de RB, TC y SAT, con interpretación individuali-
zada de títulos (según zona endémica o no, rural o
urbana, comportamiento de laboratorio y seguimiento
en el tiempo), dejando para casos dudosos técnicas me-
nos accesibles (ELISA, hemocultivos, etc.).
De nuestro estudio podríamos destacar la alta renta-
bilidad de la prueba RB en el diagnóstico inicial de bru-
celosis. También encontramos alta rentabilidad del TC
en la confirmación del diagnóstico y el seguimiento de la
enfermedad, así como en el despistaje de cronificación.
En cuanto a la SAT hemos hallado datos contradictorios
a los reflejados en la bibliografía, no habiéndonos sido
de utilidad ni en el diagnóstico ni en el seguimiento de
la enfermedad en nuestro medio.
13. DÍAZ R, MARAVÍ-POMA E, DELGADO G, RIVERO A.
Rosa Bengala plate agglutinatión and counterimmunoelectrop-
horesis test on spinal fluid in the diagnosis of brucella meningi-
tis. J Clin Microbiol 1978; 7: 236-237.
14. DELEGACIÓN PROVINCIAL DE SALUD. Córdoba.
Memoria 1995. Sección de Epidemiología.
15. CENTRO NACIONAL DE EPIDEMIOLOGÍA. Instituto de
Salud Carlos III. Boletín epidemiológico semanal. 1995. Vol. 3.
16. ARIZA J, GUDIAL F, PALLARÉS R, RUFÍ G, FERNÁNDEZ-
VILADRICH P. Comparative trial of rifampin-doxycicline versus
tetracycline-streptomycin in the therapy of human brucellosis.
Antimicrob Agents Chemother 1985; 28: 548-551.
17. BOUZA E. Tratamiento antimicrobiano de la brucelosis.
Información terapéutica de la Seguridad Social 1981; 5: 155-
160.
18. ARIZA J. Tratamiento antimicrobiano actual de la brucelo-
sis. Med Clín (Barc) 1983; 81: 870-876.
19. SUBIRATS E, VILA L, VILA T, MARGALEF N. Seroprevalencia
de la brucelosis en La Cerdanya. Med Clín (Barc) 1995; 105: 48.
20. COLMENERO JD, PORRAS JJ, VALDIVIESO P et al. Bru-
celosis: estudio prospectivo de 100 casos. Med Clín (Barc)
1986; 86: 43-48.
21. FOZ A. Brucelosis. En: Perea JE, ed. Enfermedades infecc-
ciosas. Patogénesis y diagnóstico. Cap. 26. Barcelona: Salvat,
1983.
22. DÍAZ R, MARAVÍ-POMA E, FERNÁNDEZ S, GARCÍA
MERLO S, RIVERO A. Brucelosis: estudio de 222 casos. Parte
IV: diagnóstico de la brucelosis humana. Revista Clínica Espa-
ñola 1982; 166: 107-110.
23. ARIZA J, PELLICER T, PALLARÉS R, FOZ A, GUDIAL F.
Specific antiboy profile in human brucellosis. Clin Infect Dis
1992; 14: 131-140.
19