Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

Indo American Journal of Pharmaceutical Research, 2019 ISSN NO: 2231-6876

METODE RP-HPLC VALIDASI UNTUK PENENTUAN SIMULTAN IBUPROFEN DAN

PSEUDOEPHEDRIN DALAM FORMULASI FARMASI

Thakkalapally Lakshmi*1, Kasth Kranti2, Gupta Krishna R2, Ganorkar Anvesha V2, K.Parameshwar1
1Institusi Gurunanak Kampus Teknis-Sekolah Farmasi, Ibrahimpatnam, Hyderabad, TelanganA, India-501506.
2Smt. Kishoritai Bhoyar College of Pharmacy, Kamptee Baru-441002, Nagpur (MS).
INFORMASI ARTIKEL ABSTRAK
Sejarah artikel Metode HPLC fase terbalik yang akurat, tepat dan dapat direproduksi telah dikembangkan dan
Diterima 12/03/2019 divalidasi untuk estimasi simultan Ibuprofen dan Pseudoephedrine dalam bentuk sediaan
Tersedia secara online gabungan. Pemisahan dicapai dengan menggunakan Eclipse Phenyl 3.5µ, kolom (150×3.0mm)
01/05/2019 dan Metanol: 0,05% Triethylamine Buffer (4:96) pH disesuaikan menjadi 7,0 dengan asam o-
fosfat sebagai fase gerak yang menunjukkan puncak yang tajam dan terselesaikan pada laju
Kata kunci aliran 0,7 mL/menit dan deteksi UV pada 210 nm. Linearitas metode yang diusulkan dievaluasi
Ibuprofen, untuk rentang konsentrasi 12-240 g/mL (r=0,9999) untuk Ibuprofen, 7,2-145 g/mL(r=0,9999)
pseudoefedrin, untuk Pseudoephedrine. Waktu retensi untuk IBU dan PSD ditemukan masing-masing 8,26
Metode RP-HPLC, dan 4,999. Estimasi % rata-rata dan pemulihan obat ditemukan mendekati 100% yang mewakili
Validasi. keakuratan metode. Validasi metode yang diusulkan dilakukan untuk akurasi, presisi,
spesifisitas dan kekasaran menurut pedoman ICH. Metode yang diusulkan dapat berhasil
diterapkan dalam pekerjaan rutin untuk penentuan Ibuprofen dan Pseudoephedrine dalam
bentuk sediaan gabungan.

Penulis yang sesuai

Rao Lakshmi To
Sekolah Farmasi Institusi Teknis Gurunank,
Ibrahimpatnam, Hyderabad, Telangana,
India-501506.
contactlaxmi@yahoo.co.in

1976

Silakan kutip artikel ini di media sebagaiRao Lakshmi Todkk. Validasi Metode RP-HPLC untuk Penentuan Ibuprofen Dan
Pseudoephedrine Secara Simultan Dalam Formulasi Farmasi. Indo American Journal of Pharmaceutical Research.2019:9(04).
Halaman

Hak Cipta © 2019 Ini adalah artikel Akses Terbuka yang didistribusikan di bawah ketentuan jurnal Indo American of Pharmaceutical Research, yang
mengizinkan penggunaan, distribusi, dan reproduksi tanpa batas dalam media apa pun, asalkan karya aslinya dikutip dengan benar.
www.iajpr.com
Vol 9 Edisi 04, 2019. Rao Lakshmi T dkk. ISSN NO: 2231-6876

PENGANTAR
Ibuprofen (IBU) adalah obat yang digunakan dalam pengobatan nyeri, peradangan demam migranes Rheumatoid Arthritis. IBU,
Pekerjaan yang dilakukan sebelumnya pada kombinasi menggunakan pelarut asetonitril yang lebih mahal dan waktu
analisis juga lebih tinggi, oleh karena itu tujuan kami adalah menggunakan pelarut yang lebih murah dan mengurangi
waktu analisis. Makalah ini menyajikan metode RP-HPLC yang sederhana, akurat, dapat direproduksi, cepat untuk
analisis komponen secara simultan dalam formulasi tablet.

BAHAN DAN METODE

Instrumentasi dan Kondisi
Kromatografi HPLC Shimadzu dilengkapi dengan pompa LC-10 ADvp, detektor UV SPD-10 M, injektor Manual Rheodyne
7725i dengan 5µL loop dan fase terbalik 3,5µ kolom Eclipse phenyl (150 x 3,0 mm) dengan ukuran pori 100HaiA digunakan untuk studi
kromatografi dan Metanol: Penyangga 0,05% Penyangga Trietilamina (4:96) pH disesuaikan ke 7,0 sebagai fase gerak yang menunjukkan
puncak yang tajam dan teratasi pada laju aliran 0,7 mL/menit dan deteksi UV pada 210 nm. Air kelas HPLC dan kertas saring whatman (no.41)
digunakan selama pekerjaan eksperimental.

bahan
Tablet multikomponen yang mengandung (IBU 200mg dan PSD 30mg) digunakan selama analisis. Semua bahan kimia dan reagen yang
digunakan adalah kelas HPLC. Semua sampel obat murni dipasok oleh Granules India Ltd., dan digunakan tanpa pemurnian lebih lanjut.

Persiapan stok dan larutan standar

Campuran Larutan stok yang mengandung IBU dan PSD dibuat dalam pengencer (buffer:acetonitrilie:80:20) dengan konsentrasi 120μg/mL IBU
dan 72μg/mL PSD.

Pembuatan larutan buffer

Trietilamina, 5.0mL dilarutkan dalam 960.0mL air HPLC grade water dan 40,0mL metanol dan disonikasi. pH adalah
disesuaikan menjadi 7,0 dengan asam ortofosfat.

Pengembangan dan validasi Metode HPLC

Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan metode baru yang sensitif, hemat biaya dan nyaman untuk penentuan HPLC
ibuprofen dan psuedoephedrine dalam bentuk sediaan tablet. Metode divalidasi untuk parameter seperti kesesuaian sistem, linieritas,
akurasi, presisi, dan ketahanan.

Kesesuaian sistem
Kesesuaian sistem dinilai dengan enam ulangan analisis standar campuran pada tingkat 100% untuk memverifikasi resolusi dan
reproduktifitas sistem kromatografi yang memadai untuk analisis yang akan dilakukan. Metode ini dievaluasi dengan
menganalisis pengulangan waktu retensi, luas puncak, faktor tailing untuk IBU dan PSD. Pelat teoritis (Singgung) kolom dan
resolusi antara puncak IBU dan PSD juga dipantau

Spesifisitas (Interferensi Plasebo)

Ditimbang plasebo ekivalen dengan 5 sediaan tablet ke dalam labu ukur 250mL, ditambahkan 140mL pengencer dan dilakukan
pengocokan selama 20 menit dengan kecepatan 200rpm. Kemudian 80mL pengencer ditambahkan, disonikasi selama 20 menit dengan
pengocokan antara didinginkan sampai suhu kamar dan dibuat volumenya dengan pengencer. Larutan disaring melalui penyaring Nylon
0.45µm. Sekitar 6,0 mL larutan yang disaring dipindahkan ke dalam labu takar 50 mL dan volume dibuat dengan pengencer.

Linearitas dan Jangkauan

Linearitas metode ditentukan dengan membangun kurva kalibrasi. Solusi standar IBU dan PSD di berbagai
tingkat konsentrasi (10%, -200%) digunakan untuk tujuan ini. Alikuot larutan stok standar campuran diencerkan dalam kisaran 0,6 mL
hingga 4,8 mL dalam serangkaian 50 mL untuk tingkat 10% dan labu ukur 20 mL dengan pengencer, volume dibuat hingga tanda
dengan pengencer untuk mendapatkan konsentrasi 12-240μg/mL untuk IBU dan 7.2-144.0μg/mL untuk PSD. Sebelum injeksi larutan,
kolom diseimbangkan setidaknya selama 30 menit dengan fase gerak. Area puncak kromatogram diplot terhadap konsentrasi IBU dan
1977

PSD untuk mendapatkan kurva kalibrasi. Delapan konsentrasi standar campuran menjadi sasaran analisis regresi untuk menghitung
persamaan kalibrasi dan koefisien korelasi.
Halaman

www.iajpr.com
Vol 9 Edisi 04, 2019. Rao Lakshmi T dkk. ISSN NO: 2231-6876

Pengujian dalam Formulasi yang Dipasarkan

Sampel ditimbang setara dengan 5 sediaan tablet ke dalam labu takar 250mL, ditambahkan 140mL pengencer dan dikocok putar
selama 20 menit dengan kecepatan 200rpm. Kemudian 80mL pengencer ditambahkan disonikasi selama 20 menit dengan pengocokan
menengah, didinginkan hingga suhu kamar dan volume dibuat dengan pengencer. Sampel disentrifugasi selama 10 menit pada 5000RPM dan
larutan disaring melalui filter Nylon 0,45µm. Sekitar 6,0mL filtrat dipindahkan ke dalam labu ukur 50mL dan volume dibuat dengan pengencer.

Ketepatan
Akurasi adalah kedekatan kesepakatan antara nilai sebenarnya dan hasil tes. Akurasi ditentukan dengan cara
percobaan pemulihan, dengan penambahan obat aktif untuk formulasi plasebo di lima tingkat (50%, 75%, 100%, 125% dan 150%). Ditimbang
Pseudoephedrine API, Ibuprofen API dan plasebo ekivalen dengan 5 sediaan tablet ke dalam labu ukur 250mL, ditambahkan 140mL
pengencer dan dikocok selama 20 menit dengan kecepatan 200rpm. Kemudian 80mL pengencer ditambahkan, disonikasi selama 45 menit
dengan pengocokan sedang dan volume ditambah dengan pengencer. Sampel disentrifugasi selama 10 menit pada 5000RPM dan disaring
melalui filter Nylon 0,45µm. Sekitar 6,0 mL larutan yang disaring dipindahkan ke dalam labu takar 50 mL dan volume dibuat dengan
pengencer. Tiga ulangan di setiap level dipilih. Akurasi pada setiap level dihitung dari hasil pengujian sebagai persentase analit yang diperoleh
kembali dengan pengujian.

presisi
Ketepatan metode ditentukan dengan melakukan enam analisis berulang dari larutan sampel. Relatif
standar deviasi (% RSD) ditentukan untuk menilai ketepatan metode.

HASIL DAN DISKUSI

Pengembangan dan optimasi metode HPLC
Kondisi kromatografi yang dioptimalkan yang disebutkan di bawah ini dijaga konstan selama eksperimen dan fase
gerak dibiarkan seimbang dengan fase diam yang ditunjukkan oleh garis tetap.
Kolom - Kolom Eclipse phenyl 3.5μ (150 X 3.0mm)
Panjang Gelombang Deteksi - 210 nm
laju aliran - 0,7 mL/menit
Suhu: Ambient - (28-30 °C)
pH - 7.0
Fase Seluler - MET : Penyangga :: 4:96
Larutan 5μL dari standar campuran di atas disuntikkan melalui injektor manual dan kromatogram direkam menggunakan fase gerak. IBU dan
PSD diselesaikan dengan benar dengan puncak yang tajam dan menunjukkan waktu retensi yang wajar dalam fase gerak yang dipilih di atas.
Kromatogram standar untuk blanko dan obat-obatan yang dicatat masing-masing ditunjukkan pada gambar 1a dan 1b.

Gambar 1a: Kromatogram untuk Blank .

1978
Halaman

www.iajpr.com
Vol 9 Edisi 04, 2019. Rao Lakshmi T dkk. ISSN NO: 2231-6876

Gambar 1b: Kromatogram untuk standar Campuran.

Studi parameter kesesuaian sistem

Setelah kesetimbangan kolom dengan fase gerak, enam suntikan ulangan larutan 5μL larutan standar campuran adalah
disuntikkan melalui injektor manual dan kromatogram dicatat dan parameter kesesuaian sistem dicatat dan nilainya
ditunjukkan pada Tabel 1.

Tabel 1: Pengamatan Parameter Kesesuaian Sistem.

Parameter PSD IBU

Waktu retensi 4.976 8.256
Faktor tailing 1.1 1.1
Pelat Teoritis 15251 4057
Resolusi

Spesifisitas (gangguan plasebo)

Tidak ada gangguan plasebo dengan puncak utama Ibuprofen dan pseudoefedrin yang diamati.

Studi Linearitas
Grafik konsentrasi obat vs area di bawah kurva diplot untuk kedua obat. Koefisien korelasi,
intersep, kemiringan dan Bias yang dihitung dicatat pada Tabel 2.

Tabel 2: Hasil Studi Linieritas.

Parameter pseudoefedrin Ibuprofen

Koefisien Korelasi 0.9999 0.9999
Mencegat 12699 10234
Lereng 14992 12394
Bias 1.2 0,7

Pengujian kadar logam

Isi PSD dan IBU dihitung dengan membandingkan area standar dengan area sampel dan hasilnya ditunjukkan pada
Tabel 3.
Tabel 3: Hasil pengujian.

% Pengujian kadar logam % Pengujian kadar logam

S.Tidak Sampel
pseudoefedrin Ibuprofen
01 Contoh-1 100.8 99.1
02 99.6
1979

Contoh-2 101.2
03 Contoh-3 101.0 98.9
04 Contoh-4 101.1 99.1
05 98.8
Halaman

Contoh-5 100.8
06 Contoh-6 101.6 99.4
Berarti 101,08 99.15
%RSD 0,3 0,3

www.iajpr.com
Vol 9 Edisi 04, 2019. Rao Lakshmi T dkk. ISSN NO: 2231-6876

Ketepatan
Untuk memastikan keandalan dan akurasi dari metode studi pemulihan dilakukan dengan metode penambahan standar. Jumlah obat murni
yang diketahui ditambahkan ke plasebo dan isinya dianalisis dengan metode yang diusulkan dan rata-rata % pemulihan dihitung pada setiap tingkat
untuk IBU dan PSD masing-masing dicatat dalam Tabel 3a dan 3b.

Tabel 3a: Hasil akurasi untuk PSD.

% Pemulihan untuk % Rata-rata dari

Tingkat Akurasi % RSD
Pseudoephedrine Pseudoephedrine
50% Persiapan-1 100.8
50% Persiapan-2 100.2 100,5 0,3
50% Persiapan-3 100,5
75% Persiapan-1 99,5
75% Persiapan-2 98.9 99.23 0.31
75% Persiapan-3 99.3
100% Persiapan-1 100.0
100% Persiapan-2 100.0 99.87 0,23
100% Persiapan-3 99.6
125% Persiapan-1 101.1
125% Persiapan-2 100,7 101.0 0,26
125% Persiapan-3 101.2
150% Persiapan-1 100,7
150% Persiapan-2 101.0 100.87 0.15
150% Persiapan-3 100,9

Tabel 3b: Hasil akurasi untuk IBU.

SNama yang cukup % Pemulihan untuk Ibuprofen % Rata-rata Ibuprofen % RSD

50% Persiapan-1 102.0
50% Persiapan-2 101.6 101,83 0.2
50% Persiapan-3 101.9
75% Persiapan-1 100.3
100.83
75% Persiapan-2 100,4 0.83
75% Persiapan-3 101.8
100% Persiapan-1 99.3
100% Persiapan-2 100.1 99.9 0,53
100% Persiapan-3 100.3
125% Persiapan-1 98.8
125% Persiapan-2 99.1 0,3
99.1
125% Persiapan-3 99.4
150% Persiapan-1 100.1
150% Persiapan-2 99,5 99.77 0.31
150% Persiapan-3 99.7

presisi
1980

Presisi dievaluasi dengan menyiapkan 6 sampel sesuai metode uji untuk Tablet Ibuprofen dan Pseudoephedrine dan % RSD untuk
keduanya ditemukan 0,3 untuk Ibuprofen dan 0,3 untuk Pseudoephedrine keduanya, ditemukan baik dalam kriteria penerimaan.
Halaman

www.iajpr.com
Vol 9 Edisi 04, 2019. Rao Lakshmi T dkk. ISSN NO: 2231-6876

KESIMPULAN
Pengembangan metode Ibuprofen dan Pseudoephedrine dengan mengacu pada metode USP metode individu telah dimodifikasi
untuk membentuk metode gabungan Untuk mendapatkan dasar yang stabil dengan mengubah kondisi kromatografi dan program isokratik
dilakukan. Berdasarkan kondisi akhir selama pengembangan, % assay Ibuprofen dan Pseudoephedrine ditemukan memuaskan tanpa
gangguan blanko/plasebo dengan baseline yang stabil. Oleh karena itu validasi metode uji untuk estimasi % assay Ibuprofen dan
Pseudoephedrine dengan HPLC dilakukan. Metode ini dapat diadopsi untuk pengendalian kualitas rutin obat tersebut dalam formulasi
gabungan

UCAPAN TERIMA KASIH

Penulis berterima kasih kepada Granules India Ltd. yang telah menyediakan sampel obat standar dan juga kepada Sekolah Farmasi Institusi Gurunanak
yang telah menyediakan fasilitas untuk melaksanakan pekerjaan tersebut.

REFERENSI
1. Farmakope Amerika Serikat 35, Konvensi Farmakope Amerika Serikat, Rockville, 3470
2. Farmakope Amerika Serikat 35, Konvensi Farmakope Amerika Serikat, Rockville, 4476
3. N. Ramalakshmi, Savita, CN Nalini dan S. Arunkumar, Pengembangan Metode dan Validasi Kombinasi Methocarbamol dan Ibuprofen
Menggunakan RP-HPLC, J. Chem. Bio. Phy. Sci. Detik. J, 2017; 7(4): 919-929.
4. Vu Dang Hoang, Dong Thi Ha Ly, Nguyen Huu Tho, dan Hue Minh Thi Nguyen Spektrofotometri UV Penentuan Serentak
Parasetamol dan Ibuprofen dalam Tablet Gabungan dengan Transformasi Derivatif dan Wavelet. Jurnal Dunia Ilmiah, 2014;
2014 :1-13
5. Pengembangan dan Validasi Metode HPLC U. Samba Moorthy, J. Sunil dan M. Sanjith Nath untuk Estimasi Simultan Ibuprofen
dan Pseudoephedrine dalam Bentuk Dosis Farmasi, Asian Journal of Research in Chemistry, 2010; 3(4): 859- 861
6. Singhvi I dan Chaturvedi SC. Metode Spektrofotometri untuk Estimasi Ibuprofen dan Pseudoephedrine Hydrochloride dalam Bentuk
Dosis Gabungan, Asian Journal of Chemistry, 10(4): 879-884
7. Chitlange SS., Sakharkar DM, Wankhede SB dan Wadodkar SG. Metode Kromatografi Lapis Tipis Kinerja Tinggi untuk estimasi
simultan Ibuprofen dan Pseudoephedrine Hydrochloride, Indian J Pharm Sci, 2008; 70(3): 398-400
8. Langlois Marie-Helene, Dallet Philippe, Kauss Tina dan Dubost Jean-Pierre. Penentuan Simultan Ibuprofen dan
Pseudoephedrine Hidroklorida dalam Tablet Farmasi dengan HPLC Fase Terbalik, Anal. Lett., 2009; 42 (18): 2951-2961
9. Sarılmiser Hande Kazak, Ozcelik N. Orcun, Arslan Banu Ozkirm, Tambang Gokalp, Ustaoglu Arzu, Dude Udaya Kumar dan Knezevic
Zdravka. Pengembangan dan validasi metode uji HPLC sederhana untuk ibuprofen, pseudoefedrin hidroklorida dan klorfeniramin
maleat dalam bentuk sirup. J. Kimia Metrol. 2017; 11(2):61-67.
10. Burge Asci Ozlem, Aksu Donmez, Abdurrezzak Bozdogan dan Sidika Sungur. Penentuan Ibuprofen, Pseudoephedrine HCl,
Chlorpheniramine Maleate dan Nipagen dengan Kromatografi Cair dan Desain Faktorial Fraksional, Bab 30, Inovasi dalam
Biologi Kimia, 285-290.

54878478451190303

1981
Halaman

www.iajpr.com