Standar Operasional Prosedur (SOP)

PEMERIKSAAN BAKTERI TAHAN ASAM

Nomor : SOP/UKP/68.7/X/2019
Revisi ke : 03
Berlaku Tanggal : 02 Oktober 2019

Disahkan
Kepala UPTD Puskesmas Japah

dr. Retna Wuwuh Nugraheni

NIP: 19711213 200604 2 012

DINAS KESEHATAN KABUPATEN BLORA

UPTD PUSKESMAS JAPAH
PEMERINTAH KABUPATEN BLORA
Jl. Japah – Todanan No.Telp. 0296 4319544 Japah (58257)
Email: japahpuskesmas@gmail.com
 PEMERIKSAAN BAKTERI TAHAN
ASAM
No. Dok. : SOP/UKP/68.7/X/2019
No. revisi : 03
SOP Tgl Terbit : 02 Oktober 2019
Halaman : 1/4

PUSKESMAS dr.Retna Wuwuh Nugraheni

JAPAH NIP: 19711213 200604 2 012

1. Pengertian Pemeriksaan BTA adalah pemeriksaan laboratorium untuk

mendeteksi adanya bakteri tahan asam Mycobacterium tuberculosis
dalam dahak pasien, secara mikroskopik dengan pengecatan Ziehl
Neelsen
Prinsip Pewarnaan Ziehl Neelsen :
1. M.tuberculosis mempunyai lapisan dinding lipid (Mycolic acid)
yang tahan terhadap asam
2. Proses pemanasan mempermudah masuknya Carbol Fuchsin
ke dalam dinding sel
Dinding sel tetap mengikat zat warna carbol fuchsin walaupun
didekolorisasi dengan asam alcohol
2. Tujuan Prosedur ini dibuat dan dimaksudkan agar petugas laboratorium
Puskesmas Japah dapat melakukan dan menegakkan diagnose
TBC, Menentukan tingkat penularan, Memantau kemajuan
pengobatan, Menentukan terjadinya kegagalan pada akhir
pengobatan dengan baik dan benar. Pemeriksaan tersebut penting
untuk membentuk keabnormalan etiologi tuberculose yang
ditemukan pada radiologi dada.
3. Kebijakan Surat Keputusan Kepala Puskesmas nomor 800/050/X/2019 tentang
Pelayanan Laboratorium UPTD Puskesmas Japah.
4. Referensi - PMK Nomor 37 tahun 2012 tentang Penyelenggaraan
Laboratorium Puskesmas
- PMK Nomor 43 Tahun 2013 Tentang Cara Penyelenggaraan
Laboratorium Klinik Yang Baik
- Pedoman Praktik Laboratorium Kesehatan Yang Benar, 2008
- Akiko FUJIKI , 2000. Buku Pedoman Mikroskopis TB Untuk
Program Tuberkulosis Nasional.

5. Prosedur a. Petugas menyiapkan alat :

 1) Lampu spirtus (bunsen)
2) Mikroskop
3) Obyek glass
4) Lidi,tusuk gigi
5) Rak pengecatan
6) Pipet tes, penjepit
b. Petugas menyiapkan bahan :
1) Sputum/dahak
2) Reagen pewarnaan Ziehl Neelsen
( Carbol fuchsin 0,3 %, asam alcohol 3%, metilen biru 0,3%)
3) Minyak imersi
4) Air
c. Petugas membuat sediaan dahak :
1) Petugas mengambil sampel dahak pada bagian yang
purulen dengan lidi
2) Petugas menyebarkan dahak diatas obyek glass dengan
bentuk oval ukuran 2x3 cm kemudian meratakan dengan
gerakan spiral kecil-kecil. Petugas sebaiknya tidak
membuat gerakan spiral bila sediaan dahak sudah kering
karena akan menyebabkan aerosol.
3) Petugas mengeringkan pada suhu kamar kemudian
memfiksasi dengan melewatkan sediaan diatas api Bunsen
yang berwarna biru 3 kali selama 1-2 detik
d. Petugas mewarnai sediaan dahak yang telah kering :
1) Petugas meletakkan sediaan diatas rak dengan jarak
minimal 1 jari telunjuk
2) Petugas menuangkan carbol fuchsin 0,3% menutupi seluruh
permukaan sediaan
3) Petugas memanaskan sediaan dengan sulut api sampai
keluar uap (jangan sampai mendidih) kemudian
mendinginkan sediaan selama 5 menit.
4) Petugas membuang carbol fuchsin perlahan-lahan satu per
satu kemudian membilas dengan air mengalir
5) Petugas menuangkan asam alcohol 3% pada sediaan dan
membiarkan beberapa saat sampai tidak tampak sisa zat
warna merah lalu membilas dengan air sampai bersih
6) Petugas menuangkan metilen biru 0,3% hingga menutupi
seluruh sediaan selama 10-20 detik
7) Petugas membuang metilen biru satu per satu bilas dengan
 air, lalu mengeringkan sediaan .
e. Petugas melakukan pembacaan mikroskopis sediaan dahak
yang sudah diwarnai :
1) Petugas meletakkan sediaan dimeja mikroskop kemudiaan
menetesi dengan minyak imersi
2) Petugas melakukan pembacaan sediaan dahak
menggunakan mikroskop dengan lensa obyektif 10x untuk
menentukan fokus kemudian pada lensa obyektif 100x
dilakukan pembacaan disepanjang garis horizontal
terpanjang dari ujung kiri ke ujung kanan atau sebaliknya.
Dengan demikian akan dibaca minimal 100 lapang
pandang.
f. Petugas melaporkan hasil pembacaan hasil pemeriksaan
mikroskopis dengan mengacu pada skala International Union
Against To Lung Disease (IUATLD) :
Negatif : tidak ditemukan BTA dalam 100
lapang pandang
Scanty : ditemukan 1-9 BTA dalam 100
lapang pandang (tuliskan jumlah
BTA yang ditemukan
1+ : ditemukan 10-99 BTA dalam 100
lapang pandang
2+ : ditemukan 1-10 BTA setiap 1
lapang pandang (periksa minimal
50 lapang pandang)
3+ ditemukan ≥ 10 BTA dalam 1
lapang pandang (periksa minimal
20 lapang pandang)
6. Diagram Alir

menyiapkan alat dan bahan

Membuat sediaan dahak

Mewarnai sediaan dahak

Melakukan pembacaan mikroskop

7. Unit Terkait - Laboratorium

8. Hal-hal yang
perlu
diperhatikan
9. Dokumen
terkait
10. Rekaman Tgl. Mulai
No Halaman Yang dirubah Isi perubahan
Historis diberlakukan
perubahan 1 1 Nama Ka.TU
Cacuk
10-01-2018
Nuryanto, SE
2 1 UPT UPTD 14-04-2019
Penambahan Penambahan
3 1&2 14-04-2019
gelar Ka. Pusk gelar NS
Warna logo
4 1&2 Logo kabupaten 14-04-2019
kabupaten
No. Telp
No. Telp
5 1 (0296)431954 14-04-2019
085102100308
4
dr. Andriani dr. Ana
6 1 02-10-2019
monika N setiyana E.R
Nama Ka pusk Nama Ka pusk
7 3 02-10-2019
lama baru
Cover halaman
8 3 Semua format 02-10-2019
depan
Pembuatan
9 3 Isi SOP 02-10-2019
diagram alir
 Pemeriksaan
Bakteri Tahan Asam
LOGO PUSK
No. Dok : 210.11/UKP-VIII /SOP-LAB/I/2017
No. revisi : 01
Daftar Tgl Terbit : 10 Agustus 2019
Tilik Halaman :1 / 1

UPTD PUSKESMAS
JAPAH Teguh Ratmono S.Kep,Ns,M.Kes
NIP 19700303 199003 1006

Unit :…………………………………………………………………............
Nama Petugas :…………………………………………………………………............
Tanggal Pelaksanaan :………………………………………………………………….............

No Langkah Kegiatan Ya Tidak TB

1. Apakah petugas menyiapkan alat dan bahan
1 pemeriksaan ?
2. Apakah petugas membuat sediaan dahak sesuai
2 prosedur ?
3. Apakah petugas mewarnai sediaan dahak sesuai
2 prosedur ?
4. Apakah petugas melakukan pembacaan mikroskopis
3 sediaan dahak sesuai prosedur ?

5. Apakah petugas melaporkan hasil pemeriksaan dahak

4 sesuai skala IUATLD ?
Jumlah

CR : …………………….%

Blora,…………………
Pelaksana / Auditor

…………………………….......
NIP:………………....................