Cromatografa de gases. Cap.

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Existen dos tipos generales de cromatografa de gases (CG):
Cromatografa Gas-Slido
Fase estacionaria: Slido

Principios de la CG.
Volumen de retencin: Se tienen en cuenta los efectos de presin y temperatura. VR= tR F
Retenida

VM= tM F
no retenida

Cromatografa Gas-Liquido
Fase estacionaria: Liquido inmovilizado

F=flujo volumtrico promedio (mL/min), se estima midiendo la velocidad del gas de salida de la columna usando un medidor de pompas de jabn. Pero medir VR y VM depende de la presin dentro de la columna la temperatura de la columna

Principios de CG
VR y VM dependen de la presin promedio dentro de la columna La columna tiene una resistencia al flujo
En la entrada, P= alta, F= bajo En la salida, P= baja, F= alto
PF= constante

El factor de la cada de presin j se usa para calcular la presin promedio desde la presin de entrada Pinlet y la presin de salida Poutlet

Principios de CG
Factor de caida de presion j: 3[(Pinlet/Poutlet)2-1] j= 2[(Pinlet/Poutlet)3-1] Volumen de retencion corregido: 0 = jt F VR V0M= jtM F R

Principios de CG
Volumen de retencin especifico

V0R- V0M Vg= W

Masa de la fase estacionaria

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x

Tcolumna
Correccion para la Temperatura (K)

Relacion entre Vg y K
K Vg= Fe
x

Cromatografa de gases
Esquema general de un cromatgrafo de gases

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Tcolumna Fe=densidad de la fase estacionaria Fe=densidad Vg es un a parametro util para identificar especies Vg depende de la constante de distribucion para una T dada

Cromatografia de gases

Sistema de Inyeccin
La eficacia de la columna requiere que la muestra sea de un tamao apropiado. Es necesario que la muestra sea como un tapn de vapor. La inyeccin lenta de muestras demasiado grandes provoca un ensanchamiento de las bandas y una mala resolucin

Sistema de inyeccin Sistema de Inyeccin

En general, se inyecta la muestra con una micro jeringa a travs de un septum. El septum, esta situado en una cmara de vaporizacin instantnea en la cabeza de la columna. La cmara debe estar a 50 C por encima del punto de ebullicin del compuesto mas voltil.
Split: Mtodo de rutina
0.1-1% de la muestra va a la columna Resto a desperdicios

Splitless: Toda la muestra va a la columna

Ideal para anlisis cuantitativo Solo para anlisis de trazas o muestras de baja concentracin

On-column: Para muestras que se descomponen por encima de su punto de ebullicin- portal de inyeccin no calentado
La columna debe encontrarse a una temperatura baja para condensar la muestra en una banda estrecha Al calentar la columna la cromatografa comienza.

CG. Sistema de Inyeccin

CG. Sistema de Inyeccion

Configuracin del horno

La temperatura de la columna depende del punto de ebullicin de la muestra y del grado de separacin requerido. Programa de temperaturas: se utiliza para muestras con un amplio intervalo de puntos de ebullicin.

Elucin isotrmica

Programa de temperaturas

Programa de temperatura
A medida que la temperatura aumenta, la presin de vapor del analito aumenta y se eluye mas rpidamente. La columna alcanza la temperatura durante la separacin y las especies se separan segn su rango de polaridades o presin de vapor.

Detectores.Caractersticas
NECESARIO Adecuada sensibilidad (10-8-10-15 g soluto/s) Buena estabilidad y reproducibilidad Respuesta lineal a varios ordenes de magnitud Intervalo de temperaturas (0- 400oC) DESEADO Tiempo de respuesta corto Alta fiabilidad y manejo sencillo Respuesta semejante para todos los analitos No destructivo de la muestra

Detector de Ionizacion de Llama (FID)

Detector de Ionizacion de Llama (FID)

Los compuestos orgnicos se pirolizan en llama de H2/Aire, produciendo iones y electrones que conduce la electricidad a travs de la llama La seal depende del numero de tomos de C que entra por unidad de tiempo..Detector sensible a la masa Se aplica a compuestos orgnicos. Poco sensible a grupos carbonilos, aminas, alcoholes. No sensitivo a no-combustibles-H2O, CO2, SO2, NOx Elevada sensibilidad (10-13 g/s) Gran intervalo lineal, (107) Bajo ruido Destructivo de la muestra.

Detector de Conductividad Trmica Utiliza cambios en la (TCD) conductividad trmica de la

corriente de gas ocasionados por las molculas de analito (catarmetro). Elemento (Pt, Au, W) calentado elctricamente cuya temperatura depende de la conductividad trmica (CT) del gas ( resistencia). La CT de He o H2 es elevada. En presencia de compuestos orgnicos la CT disminuye y aumenta la temp. Simplicidad, amplio rango lineal(105). No destructivo Baja sensibilidad(10-8 g/s)

GC-MS (espectrometra de masa)

MS: mide la razn masa/radio (m/z) de los iones producidos por la muestra. La mayora de los iones que se generan estan univalentemente cargados.

Detector Quimiluminiscente de Azufre (SCD)

Se basa en una reaccin entre ciertos compuestos de azufre y ozono. El eluente se mezcla con H2y aire y se queman en un FID. Los gases resultantes se mezclan con ozono generando luminiscencia. La intensidad de luminiscencia es proporcional a la concentracin de azufre. til para cuantificar mercaptanos

Detector de captura de electrones (ECD)

El eluente pasa sobre un emisor beta ( Ni-63) y provoca la ionizacin del gas portador. En ausencia de especies orgnicas se obtiene una corriente constante. La corriente disminuye en presencia de molculas orgnicas que tienden a capturar los electrones. Selectivo a compuestos con grupos funcionales electronegativos ( halgenos, quinonas, nitros, perxidos) Altamente sensibles, bajo rango lineal No alteran la muestra significativamente.

Detector de emisin atmica

El eluyente se introduce en una plasma de He obtenido por microondas, que se acopla a un espectrofotmetro de emisin Aplicacin al anlisis de los componentes de la gasolina y derivados.

Detector de emisin atmica

Detector Termoinico (TID)

Detector selectivo para compuestos orgnicos que contienen P y N. til en la determinacin de pesticidas. Semejante a FID. El fluyente se quema en una llama que fluye alrededor de una bola de silicato de rubidio calentada elctricamente (600-800 C). No esta bien establecido el mecanismo pero eso hace que se produzcan gran cantidad de iones a partir de las molculas que contienen P y N.

Otros Detectores
Detector de fotoionizacin
El eluyente se irradia con luz UV provocando la ionizacin de las molculas

Columnas y fases estacionarias en CG

Dos tipos de columnas
Empaquetadas
Material de soporte slido formado por partculas de slice recubiertas con liquido (,100-300 m dimetro) en un tubo de vidrio. Ideal para gran escala pero lenta e ineficiente

Detector fotomtrico de llama

Anlisis de pesticidas e hidrocarburos Selectivo a compuestos que contienen S y P.

Capilares/ tubulares abiertas

Columnas capilares/tubulares abiertas

Ideal para una mayor velocidad de anlisis y eficacia pero solo aplicable a muestras pequeas WCOT (wall coated open tubular) < 1 m de liquido recubriendo el interior de un tubo de slice. Actualmente, se utilizan capilares de slice fundida con un recubrimiento externo protector de poliimida SCOT ( support coated open tubular ) 30 m de liquido soportado en el interior de un tubo de slice. La superficie interna esta revestida de una capa fina tal como tierra de diatomeas.

Columnas tubulares abiertas

Columnas empaquetadas
Se fabrican con tubos de vidrio, metal, con longitud de 2 a 3 metros y dimetro de 4 mm Se empaquetan con un material de relleno slido finamente dividido y homogneo. El material de relleno se puede recubrir con una delgada capa de FE liquida.(SCOT)

Columnas empaquetadas. Materiales de soporte slidos

Sirven para retener y ubicar la fase estacionaria Partculas esfricas, pequeas, uniformes, buena resistencia fsica, superficies especifica de 1m2/g. Tierras de diatomeas: esqueletos de miles de especies de plantas unicelulares que habitaban mares y lagos

Columnas empaquetadas. Tamaos de partculas

Eficacia aumenta con la disminucin de la partcula. La diferencia de presin varia inversamente con el cuadrado del dimetro de la partcula. No es conveniente trabajas con presiones superiores a 50psi. Las partculas son por lo general de 250-170 micrmetros

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Adsorcin sobre los rellenos de la columna empaquetada o las paredes de capilar

Se produce adsorcin fsica de analitos polares sobre las superficies de silicato. Resultan picos distorsionados La adsorcin se produce por los grupos silanol (SiOH) formados por la humedad y tienen afinidad por molculas orgnicas polares. Se desactivan con dimetilclorosilano y posterior lavado con metanol. La slice fundida tiene menos problemas de adsorcin

La Fase Estacionaria Liquida inmovilizada (SCOT)

Propiedades:
Baja volatilidad ( punto de ebullicin del liquido debe ser al menos 100oC mayor que la temperatura de trabajo mxima de la columna) Estabilidad trmica Qumicamente Inerte Qumicamente unida al soporte K y para una buena resolucin Muchas estn basadas en polisiloxanos o polietilenglicol (PEG)

HO-CH2-CH2-(O-CH2-CH2) n -OH
Polietilen glicol

POLISILOXANOS

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La Fase Estacionaria

Fases estacionarias
Las FE usualmente se inmovilizan unidas (bonding) y/o se entrecruzan ( cross-linked).
Unidas-unin covalente al soporte de la fase estacionaria Entrecruzada- reaccin de polimerizacin despus de unirse individualmente a las molculas de la FE

Fases estacionarias
FE no-polares ideales para analitos no polares.
Analitos no-polares retenidos preferentemente

Fases estacionarias

FE polares ideales para analitos polares

Analitos polares retenidos preferentemente

Espesor de la FE (0.1-5m) afecta a la retencin y la resolucin- pelculas mas delgadas para analitos voltiles presentan una resolucin mas pobre. Existen FE quirales desarrolladas para la separacin de enantimeros (farmacuticas).

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Aplicaciones de la cromatografa Gas-Liquido

Tiempos y volmenes de retencin proporcionan identificacin cualitativa Alturas de pico o reas proporcionan informacin cuantitativa.
INDICE DE RETENCION (I) Kovats (1958) Es igual a 100 veces el numero de carbonos del compuesto sin considerar el relleno de la columna, la temperatura u otras condiciones cromatograficas Para una serie homologa la representacin del log del tiempo de retencin ajustado frente al numero de carbonos es lineal.

Indice de retencin

Cromatografa Gas-Slido
Se basa en la absorcin de sustancias gaseosas sobre superficies slidas Se utilizan columnas de relleno o capilares estas denominadas columnas tubulares abiertas de capa porosa (PLOT). Tipos de adsorbentes:
Tamices moleculares Polmeros porosos.

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Tamices moleculares
Son intercambiadores de iones de silicato de aluminio. Tamao del poro depende del tipo de catin. Se clasifican segn el dimetro mximo de las molculas que pueden entrar en los poros ( 4, 5 10 y 13 ) Las molculas mas pequeas penetran en el interior de las partculas donde tiene lugar la adsorcin Se pueden utilizar para separar molculas pequeas de grandes ( He, O2, N2, metano, CO)

Polmeros porosos
Se fabrican a partir de estireno polimerizado con divinilbenceno. El tamao de poro en estas bolas es uniforme y se controla por el grado de polimerizacin. Aplicacin en la separacin de especies polares (H2S, xidos de nitrgeno, cloruro de vinilo).

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