AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSRAK LUMUT Leucobryum sp.

MENGGUNAKAN
METODE DPPH (1,1-diphenyl-2-picryhidrazyl)

Suci Hayati1), Dr. Fitmawati, M.Si2)

1)Mahasiswa
Program Studi S1 Biologi
2)
Dosen Bidang Botani Jurusan Biologi
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Riau
Kampus Bina Widya Pekanbaru, 28293, Indonesia
suci.hayati4086@student.unri.ac.id

ABSTRACT

Leucobryum sp. is a moss from Leucobryaceae family, that is known to contain active
compounds both primary and secondary metabolites, which can be used as antibacterial,
antioxidant and anticancer substances. This study used DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)
method and methanol as a solvent for extraction for analyzing antioxidant activity. Based on the
results of the antioxidant activity test, the IC50 value of Leucobryum sp. was 228.2268 ppm.

Key words: Antioxidants, DPPH, IC50, Leucobryum sp.

ABSTRAK

Lumut Leucobryum sp. merupakan lumut dari family Leucobryacea diketahui mengandung
senyawa aktif baik senyawa metabolit primer maupun sekunder, yang dapat dimanfaatkan
sebagai zat antibakteri, antioksidan, dan antikanker. Uji aktivitas antioksidan dalam penelitian ini
menggunakan metode DPPH (1,1-difenil-2-pikrilhidrazil) dan metanol sebagai pelarut untuk
ekstraksi. Berdasarkan hasil uji aktivitas antioksidan didapatkan nilai IC50 dari Leucobryum sp.
sebesar 228.2268 ppm.

Kata kunci: Antioksidan, DPPH, IC50, Leucobryum sp.

1
PENDAHULUAN
Penggunaan flora untuk mengobati suatu
penyakit yang diwariskan secara turun
temurun dari leluhur masih ada sampai
sekarang, salah satunya lumut (Juli et al.
2013). Lumut merupakan tumbuhan tingkat
rendah yang dapat beradaptasi dilingkungan
basah dan kering, seperti Indonesia (Saputra
2013). Tumbuhan epifit ini yang banyak
ditemukan tumbuh di batang pohon, kayu
mati, kayu lapuk, tanah, atau batuan, dengan
penyinaran yang cukup (Windadri 2009).
Lumut Leucobryum sp. merupakan salah
satu anggota dari family Leucobryaceae
yang berpotensi untuk dimanfaatkan sebagai
bahan obat-obatan karena dilaporkan
mengandung senyawa aktif metabolit primer
maupun sekunder. Menurut Krisnayana
(2010), senyawa yang terkandung tersebut
dapat digunakan sebagai senyawa
antibakteri, antifungi, antitumor, antioksidan
dan antikanker. Pengujian aktifitas
antibakteri pada lumut L. aduncum dapat
menghambat pertumbuhan bakteri E. coli >
50% (Makajanma et al. 2020). Kemampuan
antibakteri pada lumut ditentukan oleh
keberadaan senyawa bioaktif yang ada di
dalamnya seperti alkaloid, flavonoid,
polifenol, saponin dan terpenoid (Fadhillah
2010). Berdasarkan penelitian senyawa
tersebut, lumut juga berpotensi sebagai
antioksidan. Antioksidan merupakan
senyawa pemberi elektron pada senyawa
yang tidak berpasangan (radikal bebas).
Antioksidan dapat meredam atau
mengurangi dampak negatif radikal bebas
dengan cara mengikat lalu mengubahnya
menjadi tidak berbahaya bagi tubuh.
Pengujian antioksidan dapat dilakukan
secara in vitro dengan metode DPPH (1,1-
difenil-2-pikrilhidrazil). Metode ini efektif
dan sering digunakan dalam uji antioksidan
dikarenakan sederhana, cepat, dan akurat
(Parkash 2001).
Berdasarkan informasi bahwa lumut
Leucobryum sp. mengandung senyawa aktif
metabolit primer maupun sekunder dan
aktivitas antibakteri tersebut, sehingga perlu
dilakukan penelitian tentang aktivitas
antioksidan ekstrak lumut Leucobryum sp.
menggunakan metode DPPH (1,1-diphenyl-
2-picryhidrazyl). Penelitian ini bertujuan
untuk mengetahui nilai aktivitas antioksidan
pada ekstrak metanol lumut Leucobryum sp.
yang ditinjau dari nilai IC5O, guna
mengembangkan peluang pemanfaatannya
sebagai tumbuhan obat.
METODE PENELITIAN
a. Waktu dan tempat
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan
Desember 2019 sampai dengan Juli 2020.
Pengambilan sampel lumut Leucobryum sp.
dilakukan di Taman Hutan Raya
(TAHURA) Sultas Syarif Hasyim Provinsi
Riau. Uji aktivitas antioksidan dilakukan di
Laboratorium Botani Jurusan Biologi dan
Laboratorium Kimia Organik Jurusan Kimia
FMIPA Universitas Riau.
b. Alat dan Bahan
Alat yang digunakan dalam penelitian
ini adalah : neraca analitik, vacum rotary
evaporator, microplate reader, botol vial,
grinder, botol stok berwarna coklat.
Bahan yang digunakan dalam penelitian
ini berupa sampel lumut yang diambil dari
2
lapangan,1,1-difenil-2-pikrilhidrazil(DPPH),
dan metanol.
c. Uji Aktivitas Antioksidan
Persiapan Sampel
Sampel lumut yang masih segar
dikeringkan dengan menggunakan oven
dengan suhu 50˚C, Selanjutnya lumut
dihaluskan sampai berbentuk serbuk,
kemudian simplisia disiapkan untuk
diekstraksi.
Pembuatan dan Penyiapan Ekstrak
Sampel diekstrak menggunakan metode
Chai et al. (2012), simplisia yang ditimbang
sebanyak 2,5 gr. Selanjutnya di rendam
dengan pelarut metanol dan di inkubasi
selama 2 hari, kemudian larutan di saring
untuk mendapatkan ekstrak Leucobryum sp.
selanjutnya ekstrak yang telah disaring
dipindahkan kebotol fial, ekstrak dituang
hingga setengah dari botol dan dibiarkan
dalam keadaan terbuka agar menguap.
Sehingga hanya ekstrak kering yang tersisa
pada botol fial.
Uji Aktivitas Antioksidan dengan Metode
DPPH(1,1-difenil-2pikrilhidrazil)
Sampel sebanyak dilarutkan
menggunakan MeOH sehingga konsentrasi
sampel menjadi 1000 μg/mL. Ekstrak yang
telah diencerkan diambil menggunakan
mikropipet sebanyak 50 μl dan dimasukkan
kedalam masing-masing sumuran dengan
konsentrasi 1000 μg/mL sumuran pertama,
500 μg/mL sumuran kedua, 250 μg/mL
sumuran ketiga, 125 μg/mL sumuran
keempat, 62,5μg/mL sumuran kelima,
31,25μg/mL sumuran keenam, yang masing
- masing ditambahkan 80 μg/mL larutan
DPPH, dan perlakuan dilakukan sebanyak
tiga kali ulangan. Kemudian di inkubasi
selama 30 menit, lalu absorbansinya di ukur
pada panjang gelombang 515 nm
menggunakan microplate reader. Persentase
inhibisi (penghambatan) radikal bebas
DPPH dari masing - masing konsentrasi
larutan sampel dihitung dengan
menggunakan rumus :
% Inhibisi = Absorban Blanko – Absorban Sampel × 100%
Absorban Blanko
d. Analisis Data
IC50 dihitung menggunakan analisis
regresi linear di Microsoft Excel Software.
Hasil perhitungan dianalisis secara deskriptif
berdasarkan tabel 1 yang menunjukkan nilai
IC50 terhadap tingkat aktivitas antioksidan.
Tabel 1 Tingkat aktivitas antioksidan
dengan nilai IC50 (Molyneux 2004).
No Nilai IC50 Tingkat Aktivitas
Antioksidan
1 IC50 <50 ppm Sangat Kuat
2 50 ppm<IC50>150 ppm Kuat
3 100 ppm<IC50 >150 ppm Sedang
4 150 ppm<IC50 >200 ppm Lemah
5 IC50 >200 ppm Sangat Lemah
HASIL DAN PEMBAHASAN
Uji aktivitas antioksidan dalam
penelitian ini menggunakan metode DPPH
(1,1-difenil-2-pikrilhidrazil), karena ujinya
yang sederhana, mudah, cepat dan peka
serta hanya memerlukan sedikit sampel
(Hernani 2005). Metode ini didasarkan pada
penurunan serapan radikal DPPH melalui
mekanisme donasi atom hidrogen dari
senyawa antioksidan. Keberadaan senyawa
antioksidan akan mengubah warna larutan
DPPH dari violet menjadi kuning.
3
Perubahan ini menunjukkan efisiensi bahwa ekstrak metanol lumut Leucobryum
penangkal radikal bebas (Molyneux 2004). sp. menghasilkan nilai x dengan persamaan
y = 24.64x-83.80 dengan nilai R sebesar
Menurut Cadenas & Packer (2002),
0.977. Berdasarkan hasil perhitungan
antioksidan dapat menghambat beberapa
analisis regresi linier tersebut didapatkan
dampak negatif dari radikal bebas,
nilai IC50 Leucobryum sp. sebesar 228.2268
diantaranya seperti gangguan produksi
ppm. Menurut Hanani et al. (2005), suatu
DNA, mempengaruhi pembuluh darah, serta
bahan uji dikatakan memiliki aktivitas
produksi lapisan lipid pada dinding sel.
antioksidan yang kuat apabila memiliki nilai
Pelarut yang digunakan adalah metanol
IC50 kurang dari 50 ppm, maka
karena memiliki kemampuan polaritas yang
Leucobryum sp. memiliki kemampuan yang
lebih tinggi dan metanol merupakan pelarut
lemah dalam menangkal radikal bebas
universal yang sering digunakan dalam
berdasarkan nilai IC50 yang didapatkan
mengeluarkan ekstrak dari suatu sampel. Hal
pada uji ini. Hal ini dikarenakan menurut
ini didukung oleh Nurdin (2010), metanol
Handoko (2016), beberapa faktor yang
merupakan pelarut yang baik digunakan
mempengaruhi hasil uji antioksidan adalah
karena pelarut ini memiliki sifat yang
faktor lingkungan seperti Ph, kelembaban,
mampu melarutkan hampir semua
salinitas, suhu, keasaman, dan lain – lain.
komponen, sehingga senyawa akan larut
Diketahui bahwa lokasi pengambilan sampel
dengan pelarut yang memiliki sifat
memiliki pH 5.4, suhu 280C, dan
kepolaran yang sama. Hasil analisis uji
kelembaban 83%.
aktivitas antioksidan dilihat melalui nilai
IC50. Semakin rendah nilai IC50 maka
KESIMPULAN
semakin besar kemampuan dalam
Berdasarkan penelitian yang telah
menangkal radikal bebas (Wijaya 2015).
dilakukan diperoleh hasil uji aktivitas
Hasil pengujian ektrak metanol lumut
antioksidan memperlihatkan bahwa ekstrak
Leucobryum sp. dapat dilihat pada Gambar
lumut Leucobryum sp. memiliki aktivitas
1.
antioksidan penangkap radikal bebas DPPH
dengan nilai IC50 sebesar 228.2268 ppm,
hasil tersebut menunjukkan bahwa
Leucobryum sp. memiliki kemampuan
radikal bebas yang rendah

Gambar 1 Kurva Hubungan Konsentrasi Ekstrak
Metanol Terhadap Persentase Inhibisi
Berdasarkan persamaan grafik kurva
analisis regresi linier tersebut dapat dilihat
DAFTAR PUSTAKA
Cadenas E, Packer l. 2002. Handbook of
Antioxidants. Marcel Dekker Inc:
Switzerland.
Chai TT, Panirchellvum E, Ong HC, Wong
FC. 2012. Phenolic contents and
antioxidant properties of Stenochlaena

4
 palustris, an edible medicinal fern. activity. SonglklanakarinSci. Technol.
Botanical Studies. 53:439-446. 26(2): 211-219.
Fadhilla R. 2010. Aktivitas Antimikroba Nurdin M, Supriyanti TMF, Zackiyah. 2010.
Ekstrak Metanol Lumut Hati Penentuan Pelarut Terbaik
(Marchantia paleacea) Terhadap DalamMengekstrak Senyawa Bioaktif
Bakteri Patogen Dan Pembusuk Dari Kulit Batang (Artocarpus
Makanan. [Tesis]. Bogor: Institut heterophyllus). Jurnal Sains dan
Pertanian Bogor. Teknologi. 1(2): 150-158.
Handoko F. 2016. Studi Etnofitomedika: Prakash A. 2001. Antioxidant Activity.
Tumbuhan Obat Suku Melayu Natuna Medallion Laboratories Analytical
di Kabupaten Natuna, Provinsi Progress. 19: 2.
Kepulauan Riau dan Skiring Fitokimia.
[Skripsi]. Pekanbaru. FMIPA Saputra A. 2013. Identifikasi Lichen di
Kebun Raya Bukit Sari Kabupaten
Universitas Riau.
Tebo Provinsi Jambi. [Skripsi].
Hanani E, Mun’im A, Sekarini R. 2005. Jambi: FKIP Universitas Negeri
Identifikasi senyawa antioksidan Jambi.
dalam spons Callyspongia sp. dari
Kepulauan Seribu. Majalah Ilmu Windadri FI. 2009. Keanekaragaman Lumut
Pada Marga Pandanus Di Taman
Kefarmasian. 2(3):127-133.
Nasional Ujung Kulon, Banten.
Hernani, Raharjo M. 2005. Tanaman Jurnal Natur Indonesia. 11(2): 89-93
berkhasiat Antioksidan. Penebar
Wijaya D, Purnama YP, Settya R, Rizal M.
Swadya: Jakarta.
2015. Screening Fitokimia dan
Juli A, Rudiyansyah, Gusrizal. 2013. Uji Aktivitas Daun Enceng Gondok
Fitokimia dan Aktivitas Antioksidan (Echornia crasipes). Jurnal Kimia
Tumbuhan Paku Uban (Nephrolepis Valensi. 1(1):65-69.
biserrata (Sw) Schhott). JKK. 2(2):
118-122.
Krisnayana, IM. 2010. Laporan Akhir
Program Kreatifitas Mahasiswa
Bidang Penelitian potensi Lumut
Sebagai Zat Antimikroba.
https://docplayer.info/155195919.htm
l (Akses Pekanbaru 02 Oktober
2019).
Makajanma MM, Taufik I, Faizal A. 2020.
Activity Antioxidant Of Extract
Leucobryum aduncum and
Campylopus schmidii. Biodiversitas.
21(6): 2751-2758.
Molyneux P. 2004. The use of the stable free
radical diphenyl picrylhydrazyl
(DPPH) for estimating antioxidant