Machine Translated by Google

33.2.65 dituangkan ke dalam labu atau tabung. Rekam ke 0,0001 g terdekat. Gunakan pompa
Metode Resmi AOAC 998.06 dispenser untuk segera menambahkan 70 ± 0,5 mL H2O ke dalam labu, bilas
Kandungan Kasein Nitrogen Susu susu di leher labu ke dalam bohlam. (Bagian tes tambahan mungkin
ditimbang pada titik ini, tetapi penambahan asam asetat dan natrium asetat
Metode Kjeldahl
Metode langsung ditambah filtrasi harus terjadi dalam waktu 15 menit setelah menimbang susu dan
Aksi Pertama 1998 menambahkan air. Ini meminimalkan degradasi proteolitik kasein.)
Aksi Terakhir 2001 0,75 ± 0,02 mL 10% asam asetat, C(b), ke dalam labu, dan aduk perlahan. Pastikan
semua asam ditambahkan ke bohlam labu. Biarkan campuran pada suhu kamar selama
(Berlaku untuk susu mentah segar. Kandungan kasein N akan berkurang dengan
10 menit. Tambahkan 0,75 ± 0,02 mL natrium asetat, C(a), dan aduk
waktu penyimpanan susu karena pemecahan kasein bahkan pada 4EC. Kasein N
dengan lembut. Tuang campuran dari labu Kjeldahl melalui kertas saring berlipit
kandungan susu yang dipanaskan akan menjadi tinggi secara artifisial karena whey
(Whatman No. 1, 15 cm, bebas N, atau setara) dan kumpulkan filtratnya.
denaturasi protein)
(Sebagian endapan kasein akan tertinggal dalam labu dan sebagian lagi akan tertampung
pada kertas saring. Endapan tidak perlu dihilangkan
Hasil studi antar laboratorium yang mendukung penerimaan dari labu.) Biarkan tiriskan sepenuhnya sebelum tuang berikutnya.
metode:
Segera setelah menuangkan campuran ke dalam kertas saring (jangan biarkan
sr = 0,015; sR = 0,025; RSDr = 0,597%; RSDR = 0,988%; r = 0,044; endapan mengering di leher labu Kjeldahl), gunakan dispenser pompa untuk menambahkan
R = 0,072 (dihitung berdasarkan persamaan protein: N × 6,38). 30 ± 0,5 mL larutan buffer, C(c), ke dalam labu Kjeldahl, membilas sisa-sisa endapan
sr = 0,0024; sR = 0,0040, RSDr = 0,597%; RSDR = 0,988%; pada leher labu hingga ke dalam bulb. Putar untuk mencampur. Tuang campuran
r = 0,0068; R = 0,0113 (dihitung berdasarkan persen N). ke kertas saring yang sama setelah penyaringan pertama selesai, dan gabungkan
Hasil studi antar laboratorium didasarkan pada hasil dari 9 laboratorium yang bekerja filtrat (gunakan sisi leher labu yang sama untuk semua tuangkan untuk mengurangi area
sama dengan outlier statistik dihapus dari dimana endapan dapat melekat). Segera bilas leher Kjeldahl
kumpulan data.
dengan tambahan 30 ± 0,5 mL alikuot larutan buffer, C(c), aduk
untuk mencampur, dan menyaring melalui kertas saring yang sama setelah penyaringan kedua adalah
SEBUAH.
Prinsip
menyelesaikan. Tambahkan filtrat ke 2 filtrat sebelumnya. Filtrat harus
Kasein diendapkan dari susu pada pH 4,6 menggunakan asam asetat dan larutan
bersih dan bebas dari partikel. Jika partikulat muncul, daur ulang
dium asetat dalam labu atau tabung Kjeldahl. Larutan yang diasamkan, yang mengandung
saring melalui kertas saring yang sama atau uji ulang. Buang filtrat.
komponen N nonkasein dari bagian uji, adalah:
Keluarkan kertas saring setelah penyaringan dan setelah kertas saring mengering
dipisahkan dari endapan kasein dengan penyaringan. Kandungan nitrogen dari endapan
agak. Pastikan tidak ada endapan pada kertas saring yang hilang. Jepit filter pa per di
ca sein ditentukan seperti pada 991.20 (lihat 33.2.11).
bagian atas dan putar sisi dan bawah untuk membentuk bentuk lonjong. Jika ada

B. Aparat endapan tetap pada bibir dalam atau luar labu Kjeldahl,
lap dengan kertas saring agar endapan menempel pada kertas saring. Masukkan kertas
Lihat 991.20B dan I (lihat 33.2.11) dan sebagai tambahan:
saring ke dalam labu Kjeldahl. Tambahkan katalis K2SO4, CuSO4ÿ5H2O sebagai
(a) Dispenser pompa.—Untuk penambahan 70 ± 0,5 mL H2O.
larutan, dan H2SO4 seperti pada 991.20D atau K (lihat 33.2.11). Labu mungkin
(b) Dispenser pompa.—Untuk penambahan 30 ± 0,5 mL larutan buffer.
dihentikan dan dicerna kemudian. Mencerna dan menyaring blanko (termasuk
C. Reagen kertas saring) setiap hari tes dilakukan. Buat catatan kosong

Lihat 991.20C atau J (lihat 33.2.11) dan sebagai tambahan: nilai-nilai. Jika nilai blanko berubah, identifikasi penyebabnya (misalnya, perubahan

(a) Larutan natrium asetat.—1M/ L, menggunakan kadar analitik jadi dium asetat atau sumber reagen, preparasi larutan yang salah, peralatan gelas kotor).

natrium asetat trihidrat. Pindahkan 4,10 ± 0,01 g jadi dium asetat atau 6,80 ± 0,01 g E. Penentuan
natrium asetat trihidrat ke dalam 50 mL Lanjutkan seperti pada 991.20E atau L (lihat 33.2.11).
labu ukur dan encerkan sampai volume dengan H2O 20°C. Siapkan segar
F. Verifikasi Pemulihan Nitrogen
mingguan.
Lanjutkan seperti pada 991.20F atau M (lihat 33.2.11), kecuali tambahkan kertas saring
(b) Larutan asam asetat.—10% (v/v), menggunakan kaca kelas analitik
asam asetat sosial. ke semua labu pemulihan.

(c) Larutan penyangga. —Encerkan 1 ± 0,1 mL natrium asetat dan 1 ± G. Perhitungan

0,1 mL 10% asam asetat ke 100 mL dengan air 20EC. Siapkan segar Hitung kasein N dalam susu seperti pada 991.20G (lihat 33.2.11).
mingguan.
Referensi: J. AOAC Int. 81, 763 (1998).

D. Persiapan untuk Uji Bagian Penetapan Federasi Susu Internasional (1964)

dari kandungan kasein susu. Int. Makanan Susu. Berdiri.,
Campurkan susu 38 ± 1EC seperti pada 925.21 (lihat 33.2.02). Segera tempatkan
Nomor 29, Int. Dairy Fed., Brussel, Belgia.
ditimbang bagian uji (5 ± 0,1 mL) ke dalam labu destruksi Kjeldahl (atau
Rowland, SJ (1938) Penentuan distribusi nitro gen dalam susu. J.
tabung pencernaan), baik dengan menimbang langsung ke dalam labu tared atau dengan
Susu Res. 9, 42–46.
menentukan perbedaan antara berat wadah kecil
dengan susu dan berat wadah setelah susu Revisi: Maret 2002

© 2002 AOAC INTERNATIONAL