JURNAL HASIL PENELITIAN

PERBANDINGAN KADAR FLAVONOID, FENOLIK DAN TANIN

PADA DAUN SINTRONG (Crassocephalum crepidioides) DENGAN
METODE EKSTRAKSI SECARA MASERASI DAN REFLUKS
Oleh :

FERRY AGUSTIAN

D1A181594
Pembimbing 1 : Apt. Ginayanti Hadisoebroto, M.Si ( )

Pembimbing 2 : Rina Anggraeni, M.Si ( )

ABSTRAK

Salah satu tumbuhan yang mengandung senyawa obat, yaitu tanaman Daun Sintrong (Crassocephalum
Crepidioides). Daun Sintrong berasal dari Afrika Tropis, dan kini telah menyebar ke seluruh wilayah Tropika
di Asia. Penelitian ini bertujuan untuk mengidentifikasi mengenai kadar flavonoid, tanin, fenolik ekstrak
Daun Sintrong yang di-esktraksi dengan cara maserasi dan refluks. Selain itu, untuk mengetahui perbedaan
kadar flavonoid, tanin, dan fenolik pada Daun Sintrong yang di ekstraksi dengan cara maserasi dan refluks.
Metode penelitian yang digunakan yaitu dengan cara melakukan Pengumpulan Bahan Tanaman, Determinasi
Taman, Pembuatan Simplisia, Penetapan Kadar Air, Metode Ekstraksi Maserasi, Metode Ekstraksi Refluks,
dan Penetapan Kadar Fenolik , Flavonoid dan Tanin. Hasil penelitian menunjukkan bahwa hasil penetapan
kadar fenolik untuk metode ekstraksi maserasi diperoleh 118,68 mg/GAE/g ekstrak dan kadar fenolik untuk
metode ekstraksi refkuks adalah 136,55 mg/GAE/g ekstrak, dari kadar flavonoid untuk metode ekstraksi
maserasi diperoleh 24,46 mg/QE/g ekstrak dan kadar flavonoid untuk metode ekstraksi refkuks adalah 31,13
mg//QE/g ekstrak, sedangkan untuk kadar tanin untuk metode ekstraksi maserasi diperoleh 80,17 mg/TAE/g
ekstrak dan kadar tanin untuk metode ekstraksi refluks adalah 92,55 mg/TAE/g ekstrak. Dari hasil penelitian
didapatkan bahwa Jumlah kadar flavonoid, fenolik, dan tanin denganm metode ekstraksi refluks lebih besar
dari metode ekstraksi maserasi.

Kata Kunci: Flavonoid, Fenolik, Tanin, Daun Sintrong, Ekstraksi, Maserasi, Refluks

ABSTRACT

One of the plants that contain medicinal compounds, namely the Sintrong Leaf plant (Crassocephalum
Crepidioides). Sintrong leaves come from Tropical Africa, and have now spread throughout the Tropical
region in Asia. This study aims to identify the levels of flavonoids, tannins, phenolic extracts of Sintrong
Leaf extracted by maceration and reflux. In addition, to determine the differences in the levels of flavonoids,
tannins, and phenolics in Sintrong Leaves extracted by maceration and reflux. The research method used is
by collecting plant material, gardening determination, making simplicia, determining water content,
maceration extraction method, reflux extraction method, and determining phenolic, flavonoid and tannin
levels. The results showed that the phenolic content for the maceration extraction method was 118.68
mg/GAE/g extract and the phenolic content for the reflux extraction method was 136.55 mg/GAE/g extract,
from the flavonoid content for the maceration extraction method, 24, 46 mg/QE/g extract and flavonoid
content for reflux extraction method was 31.13 mg//QE/g extract, while for tannin content for maceration
extraction method obtained 80.17 mg/TAE/g extract and tannin content for extraction method reflux was
92.55 mg/TAE/g extract. From the results of the study, it was found that the total content of flavonoids,
phenolics, and tannins using the reflux extraction method was greater than the maceration extraction method.

Keywords: Flavonoids, Phenolics, Tannins, Sintrong Leaves, Extraction, Maceration, Reflux

PENDAHULUAN
Latar Belakang
Salah satu tumbuhan yang mengandung
senyawa obat yaitu tanaman daun sintrong
(Crassocephalum crepidioides). Daun sintrong
berasal dari Afrika tropis, kini telah menyebar ke
seluruh wilayah tropika di Asia. Kemudian
menyebar ke India, Indonesia, Filipina, Thailand,
dan sekarang menyebar ke Myanmar dan Vietnam.
Kerap ditemui di tanah-tanah terlantar yang subur,
tepi sungai, tepi jalan, perkebunan, di sawah-sawah
yang mengering, terutama di bagian yang lembab,
hingga ketinggian 250-2.500 mdpl. Selain dapat
digunakan sebagai lalapan, daun sintrong digunakan
sebagai obat bisul. Secara tradisional daun sintrong
juga digunakan sebagai nutraceutikal dan juga
dipercaya bisa mengobati berbagai macam penyakit,
seperti untuk mengatasi gangguan pencernaan, getah
daunnya dapat digunakan untuk mengobati sakit
perut, rebusan daun dapat digunakan untuk
mengobati sakit kepala, mengobati luka,
antelmintik, antiinflamasi, antidiabetes, dan
antimalaria. Kandungan kimia yang terdapat dalam
daun sintrong adalah saponin, flavonoid, tanin dan
polifenol.
Flavonoid merupakan satu senyawa
antioksidan golongan fenolik alam yang terbesar dan
terdapat dalam tumbuhan, sehingga dipastikan
terdapat flavonoid yang telah di ekstrak pada
tumbuhan (Azizah, 2014). Pentingnaya manfaat
flavonoid sebagai antioksidan, maka penetapan
kadar flavonoid total pada daun sintrong
(Crassocephalum crepidioides) perlu dilakukan,
sehingga pemanfaatan daun sintrong lebih
dimaksimalkan dalam alternatif pengobatan herbal
berbagai macam penyakit.
Tanin biasanya terdapat pada bagian
tanaman yang spesifik seperti daun, buah, kulit
dahan dan batang. Tanin adalah polifenol tanaman
yang berfungsi mengikat dan mengendapkan
protein. Tanin juga dipakai untuk menyamak kulit
(Andriyani, 2010). Dalam dunia pengobatan, tanin
berfungsi untuk mengobati diare, menghentikan
pendarahan, dan mengobati ambeien.
Senyawa fenolik merupakan kelompok
senyawa terbesar yang berperan sebagai antioksidan
alami pada tumbuhan. Senyawa
fenolik memiliki satu (fenol) atau lebih (polifenol)
cincin fenol, yaitu gugus hidroksi yang terikat pada
cincin aromatis sehingga mudah teroksidasi dengan
menyumbangkan atom hidrogen pada radikal bebas
(Dhurhania dan Novianto,2018).
Berdasarkan latar belakang di atas, maka
perlu di lakukan penelitian yang lebih intensif
mengenai perbandingan kadar flavonoid, tanin dan
fenol dari daun sintrong (Crassocephalum
crepidioides) dengan metode ekstraksi secara
infundasi dan maserasi, sehingga potensi tumbuhan
ini sebagai bahan baku obat untuk pencegahan
maupun pengobatan berbagai penyakit dapat lebih
dikembangkan dengan maksimal.
Identifikasi Masalah
Berdasarkan latar belakang di atas, maka
permasalahan yang dapat diidentifikasi dalam
penelitian ini adalah :
1. Berapa kadar flavonoid, tannin dan fenolik
ekstrak daun sintrong yang diekstraksi
dengan cara maserasi dan refluks?
2. Apakah terdapat perbedaan kadar
flavonoid, tannin dan fenolik pada daun
sintrong yang diekstraksi dengan cara
maserasi dan refluks?
Tujuan Penelitiaan
1. Mengetahui berapa kadar flavonoid, tannin
dan fenolik ekstrak daun sintrong yang
diekstraksi dengan cara maserasi dan
refluks?
2. Mengetahui apakah terdapat perbedaan
kadar flavonoid, tannin dan fenolik pada
daun sintrong yang diekstraksi dengan cara
maserasi dan refluks?
Manfaat Penelitian
Dari hasil penelitian ini dapat memberikan
informasi mengenai kadar flavonoid, tannin dan
fenolik pada daun sintrong.
Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini akan dilaksanakan pada
bulan April sampai Juni 2022 di Laboratorium
Bahan Alam dan Laboratorium Instrumen, Jurusan
Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan Alam (FMIPA) Universitas Al-
Ghifari, Bandung, Jawa Barat.
Metodologi Penelitian
Pengumpulan Bahan Tanaman
Simplisia yang digunakan pada penelitian
ini yaitu daun asam sintrong yang diperoleh dari
Desa Hegarmanah, Kecamatan Cikancung,
Kabupaten Bandung.
Determinasi Tanaman
Determinasi bahan dilakukan di
Laboratorium Taksonomi Tumbuhan Departemen
Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan
Alam (FMIPA) Universitas Padjajaran (UNPAD)
Bandung.
Pembuatan Simplisia
Langkah pertama dalam pembuatan
simplisia adalah pengumpulan bahan baku, ada pula
beberapa faktor yang mempengaruhi antara lain :
umur tumbuhan atau bagian tumbuhan pada waktu
panen, dan lingkungan tempat tumbuh. Setelah
bahan baku terkumpul maka tahap selanjutnya
adalah sortasi basah yaitu untuk memisahkan
kotoran dan bahan asing yang ikut terbawa.
Dilanjutkan dengan pencucian simplisia, guna
menghilangkan tanah dan pengotor lainnya yang
melekat pada simplisia menggunakan air mengalir.
Setelah simplisia bersih lalu dilakukan perajangan,
untuk mempermudah proses pengeringan terutama
pada simplisia bertekstur tebal. Pengeringan
dilakukan dengan cara di angin- anginkan sampai
simplisia benar-benar kering. Tujuan pengeringan
ini untuk menghentikan reaksi enzimatik dan
mengurangi kadar air sehingga simplisia tidak
rentan ditumbuhi oleh jamur. Jika proses
pengeringan sudah selesai maka tahap selanjutnya
adalah sortasi kering dengan tujuan untuk
memisahkan benda- benda asing seperti bagian
tanaman yang tidak diinginkan dan pengotor-
pengotor lain yang masih ada dan tertinggal pada
simplisia kering. Setelah sortasi kering maka perlu
dilakukan pengepakan agar simplisia tidak rusak
atau berubah mutunya. Penyimpanan simplisia harus
di tempat yang kering, tidak lembab, dan terhindar
dari sinar matahari langsung. (Hartini dan
Wulandari, 2016).
Penetapan Kadar Air
Digunakan alat moisture balance, yaitu
dimasukkan 2 gram serbuk simplisia dalam pinggan
berlapis alumunium foil yang telah ditara dengan
memposisikan jarum di tengah skala terlebih dahulu
kemudian diukur kadar airnya pada suhu 105ºC
hingga jarum pada alat tidak berubah atau konstan,
kemudian jarum pada alat diputar hingga jarum
berada di posisi tengah kembali, maka akan didapat
persen kadar air (Elfiyani dkk., 2014).
𝐵𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑎𝑤𝑎𝑙−𝐵𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑎𝑘ℎ𝑖𝑟
Kadar Air = x 100%
𝐵𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑎𝑤𝑎𝑙
Metode Ekstraksi Maserasi
Pembuatan ekstrak daun sintrong
dilakukan dengan cara maserasi. Sebanyak 100
gram serbuk daun sintrong dimasukkan ke dalam
etanol 70% sebanyak 1000 mL (1:10) dan
didiamkan selama 3 x 24 jam dalam suhu kamar dan
setiap 24 jam, pelarut diganti dengan yang baru.
Ekstrak disaring untuk memisahkan ampas dan
filtratnya. Selanjutnya, filtrat dievaporasi pada suhu
40°C sampai tidak ada pelarut yang menetes lagi
sehingga didapatkan ekstrak kental. (Simanungkalit
dkk., 2020). Nilai rendemen ditentukan dengan
menggunakan rumus di bawah ini:
Metode Ekstraksi Refluks
Daun sintrong halus ditimbang sebanyak
100 gram lalu dimasukkan ke dalam labu alas bulat,
kemudian ditambahkan pelarut etanol 70 %
sebanyak 500 mL (1:5). Merangkai alat refluks,
kemudian sampel diekstraksi pada suhu 50ºC selama
3 jam hingga 3 kali pengulanagan. Larutan yang
sudah selesai diekstraksi disaring dengan
menggunakan kain planel, lalu dimasukkan ke
dalam erlenmeyer.
Penapisan Fitokimia
Penapisan fitokimia simplisia dan ekstrak
dilakukan untuk mengetahui senyawa kimia dalam
daun sintrong dengan cara kualitatif. Penapisan ini
dilakukan terhadap sampel simplisia dan ekstrak
daun sintrong yang dilakukan dalam penelitian ini
meliputi :
Identifikasi Flavonoid
Sebanyak 1 gram ekstrak ditambahkan
dengan air panas secukupnya, kemudian dididihkan
selama 5 menit lalu disaring. Filtrat sebanyak 5 mL
ditambahkan 0,05 g serbuk Magnesium dan 1 mL
asam klorida pekat, kemudian dikocok kuat-kuat.
Uji positif ditunjukkan dengan terbentuknya warna
merah, kuning atau jingga (Baud dkk., 2014).
Identifikasi Tanin
Sebanyak 1 gram ekstrak ditambahkan
dengan 10 mL air panas. Kemudian tambahkan 1-2
tetes pereaksi Besi (III) klorida, jika terjadi warna
biru kehitaman atau hijau kehitaman menunjukkan
adanya tanin (Sari dkk., 2021).
Identifikasi Fenolik
Sebanyak 1 gram ekstrak ditambahkan dengan
larutan FeCl3 1%. Hasil ditunjukkan dengan
terbentuknya warna hijau, merah, ungu, biru tua,
biru, biru kehitaman, atau hijau kehitaman
(Khadijah dkk., 2017).
Penetapan Kadar Flavonoid
Penentuan panjang gelombang maksimum (ƛ
maks) kuersetin
Penentuan panjang gelombang maksimum
kuersetin dilakukan dengan running larutan
kuersetin pada range panjang gelombang 400 – 550
nm. Hasil running menunjukkan panjang gelombang
maksimum tersebut yang digunakan untuk
mengukur serapan dari sampel ekstrak etanol daun
sintrong (Aminah dkk., 2017).
Pembuatan kurva standar kuersetin
Ditimbang sebanyak 25 mg baku standar
kuersetin dan dilarutkan dalam 25 mL etanol.
Larutan stok dipipet sebayak 1 mL dan dicukupkan
volumenya sampai 10 mL dengan etanol sehingga
diperoleh konsentrasi 100 ppm. Dari larutan standar
kuersetin 100 ppm, kemudian dibuat beberapa
konsentrasi yaitu 6 ppm, 8 ppm, 10 ppm, 12 ppm dan
14 ppm. Dari masing-masing konsentrasi larutan
standar kuersetin dipipet 1 mL. Kemudian
ditambahkan 1 mL Alumunium klorida 2% dan 1
mL kalium asetat 120 mM. Sampel diinkubasi
selama 30 menit pada suhu kamar. Absorbansi
ditentukan menggunakan metode spektrofotometri
UV-Vis pada panjang gelombang maksimum yang
diperoleh. (Aminah dkk., 2017).
Penetapan kadar flavonoid ekstrak etanol daun
sintrong
Ditimbang 15 mg ekstrak, dilarutkan dalam
10 mL etanol 70%, sehingga diperoleh konsentrasi
1500 ppm. Dari larutan tersebut dipipet 1 mL
kemudian ditambahkan 1 mL larutan Alumunium
klorida 2% dan 1 mL kalium asetat 120 mM. Sampel
diinkubasi selama 30 menit pada suhu kamar.
Absorbansi ditentukan menggunakan metode
spektrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang
maksimum yang diperoleh. Sampel dibuat dalam
tiga replikasi untuk setiap analisis dan diperoleh
nilai rata – rata absorbansi (Aminah dkk., 2017).
Penetapan Kadar Tanin
Pembuatan Larutan Standar Asam Tanat 1000
ppm
Sebanyak 25 mg asam tanat ditimbang
kemudian dilarutkan dengan aquadest dalam gelas
kimia. Selanjutnya dimasukkan dalam labu ukur 25
mL dan ditambahkan aquadest sampai tanda batas.
Larutan tersebut dijadikan sebagai larutan induk
1000 ppm, dari larutan tersebut dibuat larutan
standar dengan konsentrasi 10, 20, 30, 40, 50 ppm
(Pratama dkk., 2019).
Pembuatan Larutan Natrium Karbonat Jenuh
Pembuatan larutan Natrium karbonat jenuh
dilakukan dengan cara menimbang sebanyak 7,5
gram Natrium karbonat kemudian dilarutkan dengan
aquadest dalam gelas kimia dan dipanaskan pada
suhu 60ºC. Setelah larut sempurna dimasukkan ke
dalam labu ukur 100 mL (Pratama dkk., 2019).
Penetapan Panjang Gelombang Maksimum
Salah satu konsentrasi larutan baku yaitu
30 ppm diambil dan diukur serapannya pada rentang
panjang gelombang 400–800 nm. Panjang
gelombang yang menunjukkan nilai serapan
tertinggi merupakan panjang gelombang maksimum
(Pratama dkk., 2019).
Pengukuran Larutan Standar Asam Tanat
Larutan standar dari masing–masing
konsentrasi 10, 20, 30, 40, 50 ppm diambil sebanyak
1 mL selanjutnya dicampur dengan 1 mL reagen
Folin- Ciocalteau. Campuran dibiarkan selama 3
menit kemudian ditambah dengan Natrium karbonat
jenuh sebanyak 1 mL dan diletakkan di tempat yang
tidak terkena cahaya selama 30 menit untuk proses
homogenisasi. Setelah itu, dilakukan pengukuran
dengan spektrofotometri UV-Vis. Hasil pembacaan
absorbansi yang diperoleh digunakan untuk
pembuatan kurva kalibrasi standar terhadap
konsentrasi dari larutan standar asam tanat (Pratama
dkk., 2019).
Analisis Kadar Tanin.
Sebanyak 15 mg maserat ditimbang dan
dilarutkan dengan aquabidestilata sampai 10 mL.
Jika belum larut sempurna bisa dibantu dengan alat
yang berfungsi untuk menghomogenkan larutan.
Dipipet 1,0 mL sampel dengan seksama, 1,0 mL
reagen Folin-Ciocalteau, didiamkan selama 3 menit,
ditambankan 1,0 mL larutan Natrium karbonat
jenuh. Diinkubasi selama 30 menit, kemudian
dibaca serapannya pada panjang gelombang
maksimum. kemudian dibaca serapannya pada
panjang gelombang maksimum. Sampel dibuat
dalam tiga replikasi untuk setiap analisis dan
diperoleh nilai rata – rata absorbansi (Pratama dkk.,
2019).
Penentuan Kadar Fenolik
Penentuan Panjang Gelombang Maksimum
Dengan modifikasi, yaitu: 1 mL asam galat
dengan konsentrasi 1000 ppm yang dibuat dengan
cara: timbang 25 mg asam galat kemudian
dilarutkan dalam 25 mL etanol 70%. Kemudian
dipipet sebanyak 1 mL kemudian ditambahkan 1 mL
reagen Folin-Ciocalteu, dikocok dan didiamkan
selama 3 menit. Kemudian ditambahkan 1 mL
larutan Na2CO3 7,5%, dikocok homogen dan
didiamkan selama 30 menit. Absorbansi kemudian
diukur pada panjang gelombang 600-800 nm
(Jubaidah dkk., 2019).
Pembuatan Kurva Baku Asam Galat dengan
Reagen Folin-Ciocalte
Dipipet 1 mL larutan standar (60, 70, 80, 90
dan 100 ppm) dimasukkan ke dalam tabung reaksi
ditambahkan 1 mL reagen Folin-Ciocalteau kocok,
didiamkan selama 3 menit. Ditambahkan larutan
natrium karbonat 7,5% 1 mL kocok sampai
homogen, diamkan selama 30 menit pada suhu
kamar. Diukur absorbansi panjang gelombang
756,40 nm dan buat kurva kalibrasi hubungan
absorbansi dengan asam galat (Jubaidah dkk., 2019).
Penetapan Kadar Fenolik
dengan modifikasi, yaitu: sebanyak 15 mg
ekstrak kental daun sintrong dilarutkan dengan 10
mL etanol 70%, Larutan kemudian dipipet sebanyak
1 mL, ditambahkan 1 mL reagen Folin-Ciocalteu
dan dikocok. Diamkan selama 3 menit, kemudian
ditambahkan 1 mL larutan Na2CO3 7,5%
Campuran dikocok homogen dan didiamkan selama
30 menit. Absorbansi larutan ekstrak diukur dengan
menggunakan spektrofotometri UV-Vis pada
panjang gelombang maksimum. Dilakukan tiga kali
pengulangan. Analisis data dilakukan dengan
metode kurva standar, regresi linear y = bx + a
dibuat berdasarkan data absorbansi dan konsentrasi
larutan standar asam galat (Alfian dkk., 2012).
HASIL DAN PEMBAHASAN
Penyiapan dan Pembuatan Simplisia
Simplisia yang digunakan pada penelitian ini
yaitu daun asam sintrong yang diperoleh dari Desa
Hegarmanah, Kecamatan Cikancung, Kabupaten
Bandung. Sebanyak 5 kg daun sintrong segar
digunakan untuk mendapatkan 500 gram simplisia
daun sintrong.
Hasil Determinasi Bahan
Determinasi tanaman dilakukan di
Laboratorium Taksonomi Tumbuhan Departemen
Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan
Alam (FMIPA) Universitas Padjajaran (UNPAD)
Bandung. Berdasarkan surat hasil determinasi
nomor 56/HB/03/2022 menyatakan bahwa tanaman
yang digunakan adalah benar tanaman daun
sintrong dengan nama latin (Crassocephalum
crepidioides (Benth.) S. Moore.)
Penetapan Kadar Air
Hasil pengukuran kadar air dengan
menggunakan moisture balance dari simplisia daun
adalah 4,8%. Hasil penetapan kadar air
menunjukkan bahwa simplisia tersebut telah
memenuhi syarat kadar air karena batas maksimal
kadar air adalah 10% (Depkes RI, 2008).
Hasil Ekstraksi
Ekstraksi Maserasi
Ekstraksi tanaman daun sintrong dilakukan
dengan metode maserasi dengan menggunakan
pelarut yang sesuai etanol 70%, simplisia dimasukan
ke dalam maserator sebanyak 100 gram simplisia
kemudian di tambahkan pelarut sampai seluruh
simplisia terendam. Simplisian di rendam selama
3x24 jam dengan penggantian pelarut setiap 24 jam.
Selanjutnya dilakukan pemekatan dengan penangas
air pada suhu <60ºC.
Tabel 1.
Hasil Ekstraksi Dan Rendemen Ekstrak
( Maserasi )
Sample Berat Berat Rendemen
Sample Ekstrak Ekstrak
(%)
Daun 100 24 gram 24%
Ekstraksi Refluks
Daun sintrong halus ditimbang sebanyak
100 gram lalu dimasukkan ke dalam labu alas bulat,
kemudian ditambahkan pelarut etanol 70 %
sebanyak 500 mL. Merangkai alat refluks, kemudian
sampel diekstraksi pada suhu 50ºC selama 3 jam
hingga 3 kali pengulanagan. Larutan yang sudah
selesai diekstraksi disaring dengan menggunakan
kain planel, Selanjutnya dilakukan pemekatan
dengan penangas air pada suhu <60ºC.
Tabel 2.
Hasil Ekstraksi Dan Rendemen Ekstrak
( Refluks )
Sample Berat Berat Rendemen
Sample Ekstrak Ekstrak
(%)
Daun 50 7,5 gram 15 %
Tabel 3.
Hasil Penapisan Fitokimia
Senyawa Hasil
Flavonoid +
Tanin +
Fenol +
Keterangan
 (+) = Terdeteksi
 (-) =Tidak terdeteksi
Hasil diperoleh menunjukkan ekstrak
etanol daun insulin positif mengandung golongan
senyawa , flavonoid, tanin, dan fenol.
Pengujian tanin dengan penambahan FeCl3
terbentuk endapan warna hijau kehitaman, endapan
larut gelatinmenunjukan positif tanin
Hasil pengujian flavonoid menunjukkan
adanya kandungan flavonoid pada ekstrak etanol
daun waru karena terjadi perubahan warna kuning
yang disebabkan adanya reaksi reduksi oleh Mg
yang dilakukan dalam suasana asam pada
penambahan asam klorida. Reaksi reduksi dengan
magnesium dan asam klorida memberi warna
kuning-merah menunjukan adanya flavonon,
kalkon.
Pengujian Fenol dengan penambahan
FeCl3 Terbentuk endapan berwarna hijau kehitaman
menunjukan positif fenol
Hasil Penetapan Kadar Flavonoid
Penentuan Panjang Gelombang Maksimum
Analisis flavonoid dilakukan dengan
menggunakan Spektrofotometri UV-Vis karena
flavonoid mengandung sistem aromatik yang
terkonjugasi sehingga menunjukkan pita serapan
kuat pada daerah spektrum sinar ultraviolet dan
spektrum sinar tampak. Pengukuran serapan panjang
gelombang maksimum dilakukan running dari
panjang gelombang 400 – 450 nm. Hasil running
menunjukkan panjang gelombang maksimum
standar baku kuarsetin berada pada panjang
gelombang 435 nm. Panjang gelombang maksimum
tersebut yang digunakan untuk mengukur serapan
dari sampel ekstrak etanol daun sintrong.

Tabel 4.
Panjang Gelombang Maksimum Kuersetin
Panjang Gelombang Gambar 2.
Sampel Maksimum Absorbansi Kurva Regresi Linier Standar
Kuersetin
Kuersetin 436.5 nm 0.235
Standar asam galat dibuat dengan
konsentrasi 14, 16, 18, 20, dan 22 ppm dari larutan
standar 1000 ppm. Pada pengukuran kurva kalibrasi
asam galat pada panjang gelombang 436,5 nm
diperoleh persamaan regresi linear y = 0.0269x -
0.1424 dengan nilai R2 = 0.9998. Nilai (R2) ini
mendekati angka 1 yang menunjukkan bahwa
persamaan regresi tersebut adalah linier.

Penetapan Kadar Kuersetin

Larutan sampel ekstrak daun sintrong
dibuat dengan melarutkan 15 mg ekstrak dalam 10
ml etanol 70%, kemudian dibuat replikasinya
Gambar 1. sebanyak tiga kali. Absorbansi diukur pada panjang
Panajang gelombang Maksimum Kuersetin gelombang 436,5 nm. Hasil pengukuran absorbansi
dapat dilihat pada Tabel 6 dan 7.
Pembuatan Kurva Baku Kuersetin
Kurva baku dibuat dengan Tabel 6.
menghubungkan konsentrasi larutan standar dengan Absorbansi Flavonoid dari Sampel Daun
hasil serapannya. Kurva standar dibuat dengan Sintrong (Maserasi)
variasi konsentrasi 14, 16, 18, 20, dan 22 ppm diukur
pada panjang gelombang maksimum 436,5 nm. Sampel Absorbansi
Hasil ditunjukkan pada Tabel 5. Sampel 1 0.473
Sampel 2 0.457
Tabel 5.
Sampel 3 0.486
Konsentrasi dan Absorbansi Standar Kuersetin
Rata-rata 0.472
Konsentrasi (ppm) Absorbansi
Tabel 7.
14 0.234
Absorbansi Flavonoid dari Sampel Daun
16 0.289 Sintrong (Refluks)
18 0.340
Sampel Absorbansi
20 0.397
Sampel 1 0.543
22 0.449 Sampel 2 0.612
Sampel 3 0.533
Kurva baku kuersetin dibuat berdasarkan Rata-rata 0.562
data absorbansi dan konsentrasi larutan standar
kuersetin. Hasil kurva standar ditunjukkan pada Dari data absorbansi di atas kemudian
Gambar 2. dimasukkan ke dalam regresi linier yang telah
didapatkan yaitu y = 0.0269x - 0.1424. Sehingga
dari hasil penelitian ini diperoleh kadar fenolik
ekstrak daun sintrong dan untuk metode ekstraksi
maserasi diperoleh 24,46 mg/QE/g ekstrak dan
kadar fenolik untuk metode ekstraksi refkuks adalah ditunjukkan pada Tabel 9.
29,19 mg/QE/g ekstrak.
Tabel 9.
Konsentrasi dan Absorbansi Standar Asam
Hasil Penetapan Kadar Fenolik Galat
Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Konsentrasi (ppm) Absorbansi
60 0.418
Penentuan kadar fenolik ditentukan dengan
menggunakan spektrofotometri UV-Vis dengan 70 0.52
standar asam galat. Asam galat dipilih sebagai 80 0.615
standar karena merupakan salah satu senyawa 90 0.718
fenolik dengan struktur sederhana, memiliki sifat 100 0.802
yang stabil, dan tersedia dalam keadaan murni.
Pengukuran panjang gelombang maksimum Kurva baku asam galat dibuat berdasarkan
bertujuan agar mengetahui daerah serapan yang data absorbansi dan konsentrasi larutan standar asam
dapat dihasilkan berupa nilai absorbansi standar galat. Hasil kurva standar ditunjukkan pada
asam galat yang diukur serapannya menggunakan Gambar 4.
alat spektrofotometer UV-Vis. Penentuan kadar
fenolik dilakukan menggunakan metode Folin-
Ciocalteu. Prinsip dari metode ini adalah reduksi
fosfomolibdat-fosfotungstat oleh inti aromatis
senyawa fenolik sehingga terbentuk kompleks
molibdenum tungsten yang berwarna biru. Reaksi
antara reagen Folin-Ciocalteu hanya dapat terjadi
pada suasana basa, sehingga diperlukan
penambahan natrium karbonat untuk membuat
lingkungannya menjadi basa. Suasana basa ini dapat
mendisosiasi proton pada senyawa fenolik menjadi
ion fenolat (Dewantara, 2021).
Absorbansi diukur pada panjang Gambar 4.
gelombang 600-800 nm, hasil yang didapatkan Kurva Regresi Linier Standar Asam
ditunjukkan pada Tabel Galat

Tabel 8. Standar asam galat dibuat dengan

Panjang Gelombang Maksimum Asam Galat konsentrasi 60, 70, 80, 90, dan 100 ppm dari larutan
standar 1000 ppm. Pada pengukuran kurva kalibrasi
Panjang asam galat pada panjang gelombang 735,60 nm
Gelombang diperoleh persamaan regresi linear y = 0.0097x -
Sampel Absorbansi 0.1582 dengan nilai R2 = 0.999. Nilai (R2) ini
Maksimum
(nm) mendekati angka 1 yang menunjukkan bahwa
Asam galat 735,60 0,518 persamaan regresi tersebut adalah linier.

Penetapan Kadar Fenolik

Larutan sampel ekstrak daun sintrong
dibuat dengan melarutkan 15 mg ekstrak dalam 10
ml etanol 70%, kemudian dibuat replikasinya
sebanyak tiga kali. Absorbansi diukur pada panjang
gelombang 735,60 nm. Hasil pengukuran absorbansi
dapat dilihat pada Tabel 10 dan 11.

Tabel 10.
Absorbansi Fenolik dari Sampel Daun Sintrong
Gambar 3. (Maserasi)
Panajang gelombang Maksimum Asam Galat
Sampel Absorbansi
Pembuatan Kurva Baku Asam Galat Sampel 1 0.741
dengan variasi konsentrasi 60, 70, 80, 90, Sampel 2 0.761
dan 100 ppm dari larutan induk 1000 ppm. Sampel 3 0.700
khKemudian diukur pada panjang gelombang Rata-rata 0.734
maksimum 735,60 nm. Hasil yang didapat
 Tabel 11. 40, 50, 60, dan 70 ppm diukur pada panjang
Absorbansi Fenolik dari Sampel Daun Sintrong gelombang maksimum 688,40 nm. Hasil
(Refluks) ditunjukkan pada Tabel 13.
Tabel 13.
Sampel Absorbansi Konsentrasi dan Absorbansi Standar Asam
Sampel 1 0.806 Tanat
Sampel 2 0.825 Konsentrasi (ppm) Absorbansi
Sampel 3 0.831 30 0.219
Rata-rata 0.820 40 0.312
50 0.434
60 0.605
Dari data absorbansi di atas kemudian
70 0.702
dimasukkan ke dalam regresi linier yang telah
didapatkan yaitu y = 0.0097x - 0.1582. Sehingga
dari hasil penelitian ini diperoleh kadar fenolik Kurva baku asam tanat dibuat berdasarkan
ekstrak daun sintrong dan untuk metode ekstraksi data absorbansi dan konsentrasi larutan standar asam
maserasi diperoleh 118,68 mg/GAE/g ekstrak dan tanat. Hasil ditunjukkan pada Gambar 6.
kadar fenolik untuk metode ekstraksi refkuks adalah
136,55 mg/GAE/g ekstrak.

Hasil Penetapan Kadar Tanin

Penentuan Panjang Gelombang Maksimum

Penetapan kadar tanin dilakukan dengan
menggunakan metode spektrofotometri UV–
Visibel. Sebelum dilakukan penentuan kadar
terlebih dahulu dilakukan penentuan panjang
gelombnag maksimum. Penentuan panjang
gelombang maksimum bertujuan untuk mengetahui
besarnya panjang gelombang yang dibutuhkan
larutan asam tanat untuk mencapai serapan
maksimum. (Pratama dkk., 2019). Penentuan
panjang gelombang maksimum standar asam tanat
diukur pada rentang 600-800 nm. Hasil ditunjukkan
pada Tabel 12.
Tabel 12.
Panjang Gelombang Maksimum Asam Tanat
Panjang gelombang
Sampel Abs.
(nm)
Asam Tanat 688,40 0,518
Gambar 6.
Kurva Regresi Linier Standar Asam
Tanat
Pada pengukuran kurva kalibrasi asam
tanat pada panjang gelombang 688,40 nm diperoleh
persamaan regresi linear y = 0,0126x - 0,1751
dengan nilai koefisien korelasi sebesar 0,9901.
Nilai (R2) yang mendekati satu menunjukkan bahwa
persamaan regresi tersebut adalah linear.
Hasil Penetapan Kadar Tanin
Larutan sampel ekstrak daun sintrong
dibuat dengan melarutkan 15 mg ekstrak dalam 10
ml aquabidestilata. Selanjutnya dibuat replikasinya
sebanyak tiga kali. Absorbansi diukur pada panjang
gelombang 688,40 nm. Hasil pengukuran absorbansi
dapat dilihat pada Tabel 14 dan 15.

Tabel 14.
Absorbansi Tanin dari Sampel Daun Sintrong
(Maserasi)

Sampel Absorbansi
Gambar 5.
Panajang gelombang Maksimum Asam Tanat Sampel 1 0.698
Sampel 2 0.667
Pembuatan Kurva Baku Asam Tanat Sampel 3 0.676
Kurva baku dibuat dengan menghubungkan Rata-rata 0.680
konsentrasi larutan standar dengan hasil serapannya.
Kurva standar dibuat dengan variasi konsentrasi 30,
 Tabel 15.
Absorbansi Fenolik dari Sampel Daun Sintrong
(Refluks)
Sampel Absorbansi
Sampel 1 0.752
Sampel 2 0.759
Sampel 3 0.764
Rata-rata 0.758
Dari data absorbansi di atas kemudian
dimasukkan ke dalam regresi linier yang telah
didapatkan yaitu y = 0,0126x - 0,1751. Sehingga
dari hasil penelitian ini diperoleh kadar fenolik
ekstrak daun sintrong dan untuk metode ekstraksi
maserasi diperoleh 80,17 mg/TAE/g ekstrak dan
kadar fenolik untuk metode ekstraksi refkuks adalah
92,55 mg/TEA/g ekstrak.
Kesimpulan
Dari hasil penelitian yang telah dilakukan maka
dapat disimpulkan bahwa :
1. Kadar flavonoid dalam daun sintrong untuk
metode ekstraksi maserasi diperoleh 24,46
mg/QE/g ekstrak dan kadar flavonoid
untuk metode ekstraksi refkuks adalah
31,13 mg//QE/g ekstrak.
2. Kadar fenolik dalam daun sintrong untuk
metode ekstraksi maserasi diperoleh
118,68 mg/GAE/g ekstrak dan kadar
fenolik untuk metode ekstraksi refkuks
adalah 136,55 mg/GAE/g ekstrak.
3. Kadar tanin dalam daun sintrong untuk
metode ekstraksi maserasi diperoleh 80,17
mg/TAE/g ekstrak dan kadar tanin untuk
metode ekstraksi refkuks adalah 92,55
mg/TAE/g ekstrak.
4. Jumlah kadar flavonoid, fenolik, dan tanin
dengn metode ekstraksi refluks lebih besar
dari metode ekstraksi maserasi.
DAFTAR PUSTAKA
Alfian, Riza dan Susanti, H., 2012., Penetapan
Kadar Fenolik Ekstrak Metanol
Kelopak Bunga Rosella Merah
(Hibiscus sabdariffa Linn.) Dengan
Variasi Tempat Tumbuh Secara
Spektrofotometri., Jurnal Ilmiah
Kefarmasian, 2(1), 73-80.
Aminah, Tomayahu N, dan Abidin Z, 2017,
Penetapan Kadar Flavonoid Total
Ekstrak Etanol Kulit Buah Alpukat
(Persea americana Mill.) dengan
Metode Spektrofotometri Uv-Vis.
Jurnal Fitofarmaka Indonesia, Vol. 4
No.2.
Andriyani D, Utami P, dan Dhiani B, 2010,
Penetapan Kadar Tanin Daun
Rambutan (Nephelium lappaceum.L.)
Secara Spektrofotometri Ultraviolet
Visibel. PHARMACY, Vol. 07 No.02,
ISSN 1693-3591.
Azizah D, Kumolowati E, dan Faramayuda F,
2014, Penetapan Kadar Flavonoid
Metode Alumunium klorida pada
Ekstrak Metanol Kulit Buah Kakao
(Theobroma cacao L.). Kartika Jurnal
Ilmiah Farmasi, Vol. 2 No 2, Hal 45-49,
ISSN 2354-6565.
Baud G, Sangi M, Koleangan H, 2014, Analisis
Senyawa Metabolit Sekunder Dan Uji
Toksisitas Ekstrak Etanol Batang
Tanaman Patah Tulang (Euphorbia
tirucalli L.) Dengan Metode Brine
Shrimp Lethality Test (BSLT). Jurnal
Ilmiah Sains Vol. 14 No. 2.
Depkes., 2008., Farmakope Herbal
Indonesia. Jakarta: Departemen
Kesehatan Republik Indonesia.
Dewantara, L.A.R., Ananto, A.G., Andayani, Y.,
2021., Penetapan Kadar Fenolik Total
Ekstrak Kacang Panjang (Vigna
unguiculata) dengan Metode
Spektrofotometri UV-Visible., Jurnal
Ilmu Kefarmasian ,Vol 2 (1) hal. 13-19.
Dhurhania, C.E. dan Novianto A., 2018., Uji
Kandungan Fenolik Total dan
Pengaruhnya terhadap Aktivitas
Antioksidan dari Berbagai Bentuk
Sediaan Sarang Semut (Myrmecodia
pendens)., Jurnal Farmasi dan Ilmu
Kefarmasian Indonesia., Vol. 5(2), 62-
68.
Elfiyani R, Radjab N, dan Harfiyyah L, 2014,
Perbandingan Penggunaan Asam
Sitrat dan Tartrat Terhadap Sifat
Fisik Granul Effervescent Ekstrak
Kering Kulit Buah Manggis (Garcinia
mangostana L.). Media Farmasi, Vol.
11 No.1,Hal 7-17.
Hartini S, dan Wulandari T, 2016, Buku Panduan
Praktikum Farmakologi Fitokimia.
Jurnal Laboratorium Farmakognosi-
Fitokimia Fakultas Farmasi Universitas
Sanata Dharma, hal. 0–22.
Jubaidah, S., Sundu, R., Sabriningsih, N., 2019.,
Penetapan Kadar Fenolik Total Fraksi
Polar dan Nonpolar Daun Rambai
Laut (Sonneratia Caseolaris L.)
dengan Metode Spektrofotometri Uv-
Vis., Jurnal Riset Kefarmasian
Indonesia., Vol. 1(2) hal. 140-147.
Khadijah, Jayali1 A, Umar S, Sasmita L, 2017,
Penentuan Total Fenolik Dan
Aktivitas Antioksidan Ekstrak
EtanolDaun Samama (Anthocephalus
macrophylus) Asal Ternate, Maluku
Utara., Jurnal Kimia Mulawarman
 Volume15.
Pratama M, Razak R, dan Rosalina V, 2019,
Analisis Kadar Tanin Total Ekstrak
Etanol Bunga Cengkeh (Syzygium
aromaticum L.) Menggunakan
Metode Spektrofotometri Uv-Vis.
Jurnal Fitofarmaka Indonesia, Vol. 6
No.2, 368-373.
Sari M, Ulfa R, dan Marpaung M, 2021,
Penentuan Aktivitas Antioksidan dan
Kandungan Flavonoid Total Ekstrak
Daun Papasan (Coccinia grandis L.)
Berdasarkan Perbedaan Pelarut
Polar. Jurnal Riset Kimia, 7(1), 2021:
30-41.
Simanungkalit E, Duniaji A, dan Ekawati I, 2020,
Kandungan Flavonoid dan Aktivitas
Antibakteri Ekstrak Etanol Daun
Sintrong (Crassocephalum crepidiodes)
Terhadap Bakteri Bacillus cereus.
Jurnal Itepa, 9 (2), Hal 202-210, ISSN :
2527-8010.