Marinedrugs 13 01133.en - Id

Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.
com
Maret Narkoba2015,13, 1133-1174; doi:10.3390/md13031133

AKSES TERBUKA
obat laut
ISSN 1660-3397
www.mdpi.com/journal/marinedrugs
Tinjauan
Persiapan Chitin dan Chitosan dari Sumber Laut.

Struktur, Properti dan Aplikasi
Islem Younes1dan Marguerite Rinaudo2,*
1
Laboratorium Rekayasa Enzim dan Mikrobiologi, Universitas Sfax, Sekolah Teknik
Nasional, PO Box 1173-3038, Sfax, Tunisia; Email: islem.younes@gmail.com Aplikasi
2
Biomaterial, 6 rue Lesdiguières, Grenoble 38000, Prancis
* Penulis kepada siapa korespondensi harus ditujukan; Email: marguerite.rinaudo@sfr.fr ;

Telp: +336-1143-4806.
Editor Akademik: David Harding dan Hitoshi Sashiwa
Diterima: 26 Desember 2014 / Diterima: 16 Februari 2015 / Diterbitkan: 2 Maret 2015
Abstrak:Ulasan ini menjelaskan metode paling umum untuk pemulihan kitin dari
organisme laut. Secara mendalam, perlakuan enzimatik dan kimia untuk langkah
deproteinisasi dibandingkan, serta kondisi yang berbeda untuk demineralisasi.
Kondisi pembuatan kitosan juga dibahas, karena secara signifikan mempengaruhi
sintesis kitosan dengan berbagai tingkat asetilasi (DA) dan berat molekul (MW). Selain
itu, teknik karakterisasi utama yang diterapkan untuk kitin dan kitosan diingatkan,
menunjukkan peran kelarutannya dalam kaitannya dengan struktur kimia (terutama
distribusi gugus asetil di sepanjang tulang punggung). Aktivitas biologis juga
disajikan, seperti: antibakteri, antijamur, antitumor dan antioksidan. Menariknya,
hubungan antara struktur kimia dan aktivitas biologis ditunjukkan untuk molekul
kitosan dengan DA dan MW yang berbeda dan distribusi gugus asetil yang homogen
untuk pertama kalinya. Pada akhirnya, beberapa aplikasi farmasi dan biomedis
terpilih disajikan, di mana kitin dan kitosan diakui sebagai biomaterial baru yang
memanfaatkan biokompatibilitas dan biodegradabilitasnya.
Kata kunci:kitin; kitosan; deproteinisasi kimia dan enzimatik; demineralisasi;

karakterisasi; deasetilasi; aktivitas biologis; aplikasi biomedis
Maret Narkoba2015,13 1134
1. Perkenalan
Kitin atau poli (β-(1→4)-N-asetil-D-glucosamine) adalah polisakarida alami yang sangat penting, pertama kali
diidentifikasi pada tahun 1884 (Gambar 1). Biopolimer ini disintesis oleh sejumlah besar organisme hidup [1]
dan merupakan polimer alami yang paling melimpah, setelah selulosa. Dalam keadaan asli, kitin terjadi sebagai
mikrofibril kristal yang teratur yang membentuk komponen struktural dalam kerangka luar arthropoda atau di
dinding sel jamur dan ragi. Sejauh ini, sumber komersial utama kitin adalah cangkang kepiting dan udang.
Dalam pengolahan industri, kitin diekstraksi dengan perlakuan asam untuk melarutkan kalsium karbonat
diikuti dengan larutan basa untuk melarutkan protein. Selain itu, langkah penghilangan warna sering
ditambahkan untuk menghilangkan pigmen dan mendapatkan kitin murni yang tidak berwarna. Semua
perlakuan tersebut harus disesuaikan dengan sumber kitin, karena perbedaan ultrastruktur dari bahan awal
(ekstraksi dan pra-perawatan kitin akan dijelaskan nanti), untuk menghasilkan kitin berkualitas tinggi, dan
kemudian kitosan (setelah deasetilasi parsial). Kitin dapat diinfuskan dan sedikit larut selama transformasi
menjadi konformasi yang berbeda. Masalah kelarutannya merupakan masalah utama dalam pengembangan
pengolahan dan penggunaan kitin serta karakterisasinya.
Gambar 1.Struktur kimia kitin dan kitosan
Kitin memiliki lebih banyak aplikasi saat bertransformasi menjadi kitosan (dengan deasetilasi
parsial dalam kondisi basa) [2–4]. Kitosan adalah kopolimer acak dengan fraksi molar DA (derajat
asetilasi) β-(1→4)-N-asetil-D-glucosamine (Gambar 1) dan sebagian kecil (1-DA) dari --(1→4)-D
-glukosamin (Gambar 1). Tingkat asetilasi kitosan dicirikan oleh fraksi molarNunit -asetilasi (DA) atau
sebagai persentase asetilasi (DA%).
Kajian ini bertujuan untuk menyajikan pengetahuan mutakhir tentang morfologi kitin dan kitosan,
teknik utama yang diterapkan pada isolasi kitin dan produksi kitosan. Kemudian, metode terbaik
untuk karakterisasi dalam larutan atau keadaan padat juga ditunjukkan. Ditunjukkan bahwa untuk
produk biomedis, kitin dan kitosan harus sangat dimurnikan, karena sisa protein dan pigmen dapat
menyebabkan efek samping. Akhirnya, sifat biologis utama akan dianalisis dalam kaitannya dengan
struktur kimia (tingkat asetilasi dan berat molekul kitosan).
Mengenai aplikasi kitin dan kitosan, beberapa contoh yang digunakan untuk pelepasan obat, pembalut luka
atau biofilm dijelaskan. Penting untuk diingat bahwa kitin adalah polimer alami serta biokompatibel dan dapat
terurai secara hayati di dalam tubuh, sehingga banyak digunakan untuk aplikasi biomedis dan farmasi. Selain
itu, sifat pembentuk film yang baik sangat berharga untuk pembalut luka, kulit buatan atau kemasan.
2. Persiapan dan Karakterisasi Kitin
2.1. Morfologi Kitin
Bergantung pada sumbernya, kitin terjadi sebagai dua alomorf, yaitu bentuk α dan β [5,6], yang dapat
dibedakan dengan spektroskopi NMR inframerah dan solid-state bersama dengan difraksi sinar-X. Dalam
keadaan padat, rantai kitin dirakit oleh jaringan ikatan-H yang mengontrol kelarutan, pembengkakan dan
reaktivitas.
Isomorf α-Chitin sejauh ini merupakan yang paling melimpah; itu terjadi di dinding sel jamur dan
ragi, di tendon krill, lobster dan kepiting dan di kulit udang, serta di kutikula serangga. Selain kitin
asli, α-kitin secara sistematis dibentuk oleh: rekristalisasi dari larutan kitin [7,8], olehin vitro
biosintesis [9,10] atau polimerisasi enzimatik [11] karena stabilitas termodinamika yang tinggi dari
isomorf ini.
β-chitin yang lebih jarang ditemukan berasosiasi dengan protein dalam kandang cumi-cumi [5,12] dan dalam tabung yang disintesis oleh
cacing pogonophoran dan vestimetiferan [13,14]. Parameter kristalografi dari dua isomorf memungkinkan kita untuk menyimpulkan bahwa
ada dua molekul antiparalel per sel satuan dalam α-kitin tetapi hanya satu dalam β-kitin dalam susunan paralel. Dalam dua struktur ini,
rantai diatur dalam lembaran dan dipegang oleh ikatan hidrogen intra-lembar. Selain itu, dalam α-kitin, ikatan hidrogen antar-lembar
mencegah difusi molekul kecil ke dalam fase kristal. Tidak ada ikatan hidrogen antar lembar yang ditemukan dalam struktur kristal β-kitin. Ini
mungkin menjelaskan pembengkakannya di hadapan molekul tamu polar (mulai dari air hingga alkohol dan amina) yang menembus kisi
kristal tanpa mengganggu susunan lembaran dan kristalinitas sampel. Penghapusan molekul tamu memungkinkan kita untuk kembali ke
keadaan semula β-kitin anhidrat. Reaktivitas isomorf β-kitin lebih besar daripada --isomorf, yang penting untuk transformasi enzimatik dan
kimia kitin [15]. Sebagai kesimpulan, baik - dan - bentuk tidak larut dalam semua pelarut umum. Ketidaklarutan ini merupakan masalah
utama dalam pandangan pengembangan pengolahan dan aplikasi kitin. yang penting untuk enzimatik dan kimia transformasi kitin [15].
Sebagai kesimpulan, baik - dan - bentuk tidak larut dalam semua pelarut umum. Ketidaklarutan ini merupakan masalah utama dalam
pandangan pengembangan pengolahan dan aplikasi kitin. yang penting untuk enzimatik dan kimia transformasi kitin [15]. Sebagai
kesimpulan, baik - dan - bentuk tidak larut dalam semua pelarut umum. Ketidaklarutan ini merupakan masalah utama dalam pandangan
pengembangan pengolahan dan aplikasi kitin.
2.2. Ekstraksi Kitin
Sumber utama bahan baku produksi kitin adalah kutikula berbagai krustasea, terutama kepiting dan udang.
Dalam krustasea atau lebih khusus kerang, kitin ditemukan sebagai konstituen dari jaringan kompleks dengan
protein yang diendapkan kalsium karbonat untuk membentuk cangkang kaku. Interaksi antara kitin dan
protein sangat erat dan terdapat juga sebagian kecil protein yang terlibat dalam kompleks polisakarida-protein
[16]. Dengan demikian, isolasi kitin dari kerang membutuhkan penghilangan dua konstituen utama cangkang,
protein melalui deproteinisasi dan kalsium karbonat anorganik melalui demineralisasi, bersama dengan
sejumlah kecil pigmen dan lipid yang umumnya dihilangkan selama dua langkah sebelumnya. Dalam beberapa
kasus, langkah dekolorisasi tambahan diterapkan untuk menghilangkan sisa pigmen. Banyak metode telah
diusulkan dan digunakan selama bertahun-tahun untuk menyiapkan kitin murni; Namun, tidak ada metode
standar yang diadopsi. Baik deproteinisasi dan demineralisasi dapat dilakukan dengan menggunakan
perawatan kimia atau enzimatik. Urutan dua langkah yang disebutkan sebelumnya dapat dibalik dengan
beberapa keuntungan, terutama bila
pengobatan enzimatik dipertimbangkan. Fermentasi mikroba juga digunakan; dalam hal ini langkah
deproteinisasi dan demineralisasi diproses secara bersamaan.
Terlepas dari perlakuan yang dipilih, isolasi kitin dimulai dengan pemilihan cangkang. Misalnya, untuk
lobster dan kepiting, pemilihan memiliki pengaruh penting pada kualitas bahan isolasi akhir selanjutnya.
Idealnya, cangkang dengan ukuran dan spesies yang sama dipilih. Pada udang, dinding cangkangnya lebih
tipis, sehingga isolasi kitin lebih mudah dibandingkan dengan jenis cangkang lainnya. Kerang yang dipilih
kemudian dibersihkan, dikeringkan dan digiling menjadi potongan-potongan kecil.
2.2.1. Ekstraksi Kimia
2.2.1.1. Deproteinisasi Kimia
Tahap deproteinisasi mengalami kesulitan karena terganggunya ikatan kimia antara kitin dan protein.
Ini dilakukan secara heterogen menggunakan bahan kimia yang juga mendepolimerisasi biopolimer.
Penghapusan protein sepenuhnya sangat penting untuk aplikasi biomedis, karena persentase populasi
manusia alergi terhadap kerang, penyebab utamanya adalah komponen protein.
Metode kimia adalah pendekatan pertama yang digunakan dalam deproteinisasi. Berbagai bahan
kimia telah diuji sebagai reagen deproteinisasi termasuk NaOH, Na2BERSAMA3, NaHCO3, KOH, K2
BERSAMA3, Ca(OH)2, Na2JADI3, NaHSO3, CaHSO3, Na3PO4dan Na2S. Kondisi reaksi sangat bervariasi di
setiap studi. NaOH adalah reagen preferensial dan diterapkan pada konsentrasi mulai dari 0,125 hingga
5,0 M, pada berbagai suhu (hingga 160 °C) dan durasi perawatan (dari beberapa menit hingga beberapa
hari). Selain deproteinisasi, penggunaan NaOH selalu menghasilkan deasetilasi parsial kitin dan hidrolisis
biopolimer yang menurunkan berat molekulnya.
2.2.1.2. Demineralisasi Kimia
Demineralisasi terdiri dari penghilangan mineral, terutama kalsium karbonat. Demineralisasi umumnya
dilakukan dengan perlakuan asam menggunakan HCl, HNO3, H2JADI4, CH3COOH dan HCOOH [17,18]. Di antara
asam-asam ini, reagen preferensial adalah asam klorida encer. Demineralisasi mudah dicapai karena
melibatkan penguraian kalsium karbonat menjadi garam kalsium yang larut dalam air dengan pelepasan
karbon dioksida seperti yang ditunjukkan pada persamaan berikut:
2 HCl + CaCO3 CaCl2+ H2O + CO2-
Sebagian besar mineral lain yang ada dalam kutikula kerang bereaksi serupa dan memberikan garam larut dengan
adanya asam. Kemudian, garam dapat dengan mudah dipisahkan dengan penyaringan fase padat kitin diikuti dengan
pencucian menggunakan air deionisasi.

Perawatan demineralisasi seringkali bersifat empiris dan bervariasi dengan derajat mineralisasi masing-masing
cangkang, waktu ekstraksi, suhu, ukuran partikel, konsentrasi asam, dan rasio zat terlarut/pelarut. Yang terakhir
tergantung pada konsentrasi asam, karena membutuhkan dua molekul HCl untuk mengubah satu molekul kalsium
karbonat menjadi kalsium klorida. Untuk mendapatkan reaksi yang lengkap, asupan asam harus sama dengan
jumlah mineral yang stoikiometrik, atau bahkan lebih besar. [19,20]. Karena sulit untuk menghilangkan semua
mineral (karena heterogenitas padatan), volume yang lebih besar atau larutan asam yang lebih pekat digunakan.
Demineralisasi dapat diikuti dengan titrasi asidimetri: evolusi pH menuju netralitas
sesuai dengan konsumsi asam tetapi persistensi keasaman dalam media menunjukkan akhir dari
reaksi [21].
Beberapa perlakuan demineralisasi sebelumnya digunakan, melibatkan berbagai kondisi reaksi. Secara
konvensional, demineralisasi dilakukan dengan menggunakan asam klorida encer pada konsentrasi yang
berbeda (hingga 10% b/v) pada suhu kamar, selama waktu inkubasi yang berbeda (Tabel 1). Di antara metode
tersebut adalah metode Muzzarelliet al.[22], Hackman [23,24], Andersonet al.[25] (Tabel 1).
Pengecualian di atas terlihat dalam metode Horowitzet al.[26] dan Synowieckiet al.[27] di mana
demineralisasi dicapai masing-masing dengan asam format 90% dan HCl 22%, pada suhu kamar.
Sebagian besar metode tersebut termasuk perlakuan drastis yang dapat menyebabkan modifikasi, seperti
depolimerisasi dan deasetilasi kitin asli [28]. Untuk mengatasi masalah ini, metode lain telah
dikembangkan dengan menggunakan asam ringan (untuk meminimalkan degradasi). Misal seperti Austin
et al.[29] menggunakan asam ethylenediaminetetracetic (EDTA), Brine dan Austin [30] menggunakan
asam asetat. Peniston dan Johnson [31] mempelajari proses asam sulfur,dll.Namun, perlakuan tersebut
menghasilkan kitin dengan kadar abu sisa yang tinggi.
Demineralisasi menggunakan HCl biasanya dapat dicapai dalam 2 sampai 3 jam dengan pengadukan [19]. Namun, waktu reaksi
bervariasi dengan metode preparasi dari 15 menit [18] sampai 48 jam seperti yang terlihat pada Tabel 1. Waktu demineralisasi yang
lebih lama, bahkan sampai beberapa hari, menghasilkan sedikit penurunan kadar abu tetapi juga menyebabkan degradasi polimer
[32,33 ].
Selain itu, dilaporkan bahwa penggunaan suhu tinggi mempercepat reaksi demineralisasi dengan
meningkatkan penetrasi pelarut ke dalam matriks kitin. Dengan demikian, beberapa reaksi
demineralisasi dilakukan pada suhu yang lebih tinggi [34]. Selanjutnya, dilaporkan bahwa penetrasi
pelarut ke dalam matriks kitin sangat bergantung pada ukuran partikel. Menurut Marquis-Duval [35],
faktor penentu dalam demineralisasi berkaitan dengan area kontak antara matriks kitin dan pelarut.
Namun, dilaporkan bahwa suhu tinggi, inkubasi lebih lama, konsentrasi asam tinggi dan
granulometri mempengaruhi sifat fisiko-kimia akhir dari kitin yang dihasilkan.
Kesimpulannya, meskipun banyak kondisi eksperimental dapat ditemukan dalam literatur untuk
penghilangan mineral, efek pada berat molekul dan derajat asetilasi tidak dapat dihindari. Hanya Perkotet
al.[18] mempelajari ekstraksi kitin dari cangkang udang menggunakan kondisi ringan yang
memungkinkan mereka memperoleh kitin dengan DA yang tinggi. Demineralisasi dilakukan pada kondisi
berikut: pada suhu kamar, dengan adanya jumlah stoikiometri HCl 0,25 M sehubungan dengan
kandungan kalsium karbonat, selama 15 menit waktu inkubasi. Deproteinisasi kemudian diproses secara
klasik pada 70 ° C selama 24 jam menggunakan 1 M NaOH. Kondisi ini mempertahankan struktur kitin
dengan baik, dengan DA tinggi tetap di atas 95%. Sayangnya, jumlah sisa protein dan mineral tidak
ditentukan dan pengaruhnya terhadap MW tidak dipelajari.
Tabel 1.Perbandingan kondisi produksi kitin menurut literatur.

Deproteinisasi Demineralisasi
Sumber NaOH Suhu Nomor Suhu Referensi
Durasi (j) Konsentrasi HCl* Durasi (j)
Konsentrasi * (°C) dari Bath (°C)
Dari 2 sampai 7 15 menit hingga 1 jam dengan mandi
12 spesies krustasea 1 jam untuk masing-masing
0,3 M 80–85 berdasarkan 0,55 M Kamar diulang 2-5 kali [21]
dan cephalopoda mandi
sumber menurut sumbernya
Udang 0,125 M 100 1 0,5 1,25 M Kamar 1
[36]
0,75 M 100 1 -
Udang 1,25 M 100 1 0,5 1,57 M 20–22 1–3 [37]
Kepiting 0,5 M 65 1 2 1,57 M Kamar 5 [22]
Kepiting 1M 80 1 3 1M Kamar 12 [38]
Kepiting 1M 100 1 36 2M Kamar 48 [32]
Kepiting 1M 100 3 72 1M Kamar - [23]
Kepiting 1,25 M 85–90 3 24 1,37 M Kamar 24 [39]
Kepiting/Lobster 2,5 M Kamar 3 72 11 M − 20 4 [40]
Krill 0,875 M 90–95 1 2 0,6 M Kamar 2 [25]
Lobster 1M 100 5 12 2M Kamar 5 [24]
Cumi-cumi 2M Kamar 2 Semalam 1M Kamar Semalam [41]
2M 100 4
10% HCl
Lobster 10% 100 1 2.5 Kamar 18 [26]
90% bentuk
Krill 3,5% 25 1 2 3,5% 20 1.5 [42]
Lobster 5% 80–85 2 0,5 5% 70 4 [43]
Mundur 3,5% 65 1 2 1M Kamar 0,5 [44]
Kepiting 1M 50 1 6 1M 20 3 [30]
Udang 1% 65 1 1 0,5 M Kamar - [45]
Udang 3% 100 1 1 1M Kamar 0,5 [46]
Udang 4% 100 1 1 5% Kamar - [47]
* Konsentrasi reaktan dinyatakan dalam molaritas atau % b/v.
2.2.1.3. Proses Pengawetan Struktur Chitin
Sepengetahuan kami, belum ada penelitian yang melakukan produksi kitin dengan DA
dan MW tertinggi, bebas mineral dan protein.
Namun, hanya deasetilasi parsial yang dapat dikontrol (menggunakan solid state13C-NMR).
Selanjutnya, degradasi rantai juga dapat dievaluasi dengan viskometri tetapi setelah perawatan
tambahan,yaitu., solubilisasi sisa kitin dalam pelarut tertentu, atau setelah konversi menjadi produk larut
(kitosan). Namun demikian, dalam kasus terakhir, proses deasetilasi biasanya disertai dengan degradasi
polimer. Jadi, untuk memperkirakan pengaruh proses ekstraksi kitin, hanya DA yang ditentukan sebagai
indikasi tingkat degradasi kitin. Dapat diasumsikan bahwa semakin tinggi DA diperoleh untuk kitin yang
diekstraksi, semakin sedikit polimer yang terdegradasi.
Metode ekstraksi yang dioptimalkan dari produksi kitin murni dengan pengawetan maksimum
strukturnya (MW, DA) memungkinkan kita mendapatkan kitin yang sesuai dengan kitin asli dalam struktur
kutikula. Pendekatan ini diusulkan oleh Tolaimateet al. [21] yang menggunakan perawatan kimia untuk
demineralisasi dan deproteinisasi.
Dalam studi Tolaimateet al. [21], pendekatan baru diusulkan menggunakan rendaman berturut-turut
dengan konsentrasi HCl (0,55 M) dan NaOH (0,3 M) yang lebih rendah. Jumlah mandi untuk setiap langkah
tergantung pada spesies hewan yang diuji. Metode ini telah membuktikan kemanjuran yang baik pada
pengurangan protein dan mineral serta pengawetan bentuk kitin asli untuk 12 spesies krustasea dan
cephalopoda yang berbeda (Tabel 2). DA kitin yang disiapkan, ditentukan dengan13C-NMR, bervariasi
antara 96% dan 100% untuk semua spesies. Misalnya, untuk kulit udang, kitin yang diekstraksi adalah
asetat 100%. Sejauh ini, deasetilasi tingkat tinggi belum pernah disebutkan dalam literatur.
Meja 2.Perbandingan produksi kitin dari berbagai sumber menurut Tolaimateet al.[48].
Jumlah Jumlah
Sumber Mandi Deproteinisasi Mandi Demineralisasi DA
0,3 M; NaOH 80 °C; 1 jam 0,55 M HCl; 25 °C; 2 jam
Cirripedia Anatife 4 2 100
Kepiting merah 3 5 97
Reptansi
Kepiting marmer 3 3 99
Brachyura
Kepiting laba-laba 3 3 96
Lobster 3 3 -
Udang karang 7 3 100
Reptansi
lobster sandal 3 2 -
Makrura
Air tawar
3 2 -
udang karang
Udang merah muda 3 3 100

Natantia
Udang abu-abu 2 2 100
Stomatopoda Squilla 3 3 100
Cephalopoda Cumi-cumi 2 2 100
2.2.2. Ekstraksi Biologi Kitin
Ekstraksi dengan perlakuan kimia memiliki banyak kelemahan: (i) merusak sifat fisiko-kimia kitin dan
menyebabkan penurunan MW dan DA yang berdampak negatif pada sifat intrinsik kitin yang dimurnikan; (ii)
mempengaruhi limbah cair yang mengandung beberapa bahan kimia (iii) meningkatkan biaya proses
pemurnian kitin. Selanjutnya, pengembangan teknik ekstraksi hijau berdasarkan konsep 'Kimia hijau'
mendapatkan perhatian yang lebih besar, mendukung penerapan enzim dan mikroorganisme untuk ekstraksi
kitin. Sebuah studi banding dilakukan oleh Khanafari et al.[49] untuk ekstraksi kitin dari kulit udang dengan
metode kimia dan biologi. Hasil penelitian menunjukkan bahwa cara biologis (menggunakan mikroorganisme)
lebih baik daripada cara kimiawi karena mempertahankan struktur kitin. Bustos dan Healy [50] juga
menunjukkan bahwa kitin yang diperoleh dengan deproteinisasi kulit udang dengan berbagai mikroorganisme
proteolitik memiliki berat molekul lebih tinggi dibandingkan dengan kitin kerang yang dibuat secara kimiawi.
Ekstraksi biologis kitin menawarkan reproduktifitas tinggi dalam waktu yang lebih singkat, manipulasi yang
lebih sederhana, konsumsi pelarut yang lebih kecil, dan masukan energi yang lebih rendah. Namun, metode
biologis masih terbatas pada studi skala laboratorium.
Baru-baru ini, dua ulasan telah melaporkan metode biologis yang paling umum digunakan untuk ekstraksi
kitin [51,52],yaitu., penggunaan enzim proteolitik untuk mencerna protein atau proses fermentasi
menggunakan mikroorganisme yang memungkinkan pencernaan protein dan mineral.
Penggunaan enzim dalam langkah deproteinisasi pertama kali disebutkan dalam paten asli Rigbv dari tahun 1934
tetapi minat baru dalam pendekatan ini telah diperbarui sejak tahun 1977. Pekerjaan ini telah mengarah pada proses
fermentasi bakteri asam laktat, dipelajari lebih luas kemudian oleh Guerrero Legarreta.et al. [53] dan Ciraet al. [54].
2.2.2.1. Deproteinasi enzimatik
Ekstraksi kitin membutuhkan penggunaan protease. Enzim proteolitik terutama berasal dari
sumber tanaman, mikroba dan hewan. Banyak protease seperti alkalase, pepsin, papain, pankreatin,
devolvase, dan tripsin menghilangkan protein dari cangkang krustasea dan meminimalkan
deasetilasi dan depolimerisasi selama isolasi kitin. Perlakuan ini dapat dilakukan baik setelah, atau
sebelum tahap demineralisasi bahan padat, yang mengubah aksesibilitas reaktan.
Baik protease yang dimurnikan maupun yang diekstraksi mentah digunakan dalam langkah
deproteinisasi. Namun, enzim yang dimurnikan secara komersial mahal dibandingkan dengan
protease mentah, yang tidak hanya lebih murah tetapi juga lebih efisien karena adanya
protease yang hidup berdampingan. Protease mentah terutama berasal dari bakteri dan jeroan
ikan, protease bakteri menjadi yang paling umum. Hewan laut memiliki kelas enzim fungsional
yang sama, yang terdapat dalam jaringan hewan dan dapat diperoleh kembali dalam bentuk
aktif dan stabil untuk penggunaan komersial. Di beberapa negara penghasil ikan utama, produk
sampingan mewakili sekitar 50% dari panen makanan laut [55]. Bahan-bahan ini sebagian besar
kurang dimanfaatkan dan dibuang sebagai limbah. Dengan demikian,
Harus dicatat bahwa efisiensi metode enzimatik lebih rendah daripada metode kimia dengan
sekitar 5% -10% sisa protein yang biasanya masih terkait dengan kitin yang diisolasi. Akhir
kitin yang diisolasi kemudian dapat diolah dengan perlakuan NaOH tambahan (dalam kondisi yang lebih ringan dan untuk waktu
yang lebih singkat) untuk meningkatkan kemurniannya dan mempertahankan struktur kitin.
Banyak laporan telah menunjukkan penerapan protease bakteri dalam langkah deproteinisasi. Sebagai
contoh, Synowiecki dan Al-Khateeb [56] menerapkan deproteinisasi enzimatik pada limbah udang yang
sebelumnya didemineralisasi untuk menghasilkan kitin dan hidrolisat protein yang bernilai nutrisi.
Alcalase 2.4 L (Novo Nordisk A/S), endopeptidase serin yang diperoleh dariBacillus licheniformis,
digunakan. Enzim ini dipilih karena spesifisitasnya untuk asam amino hidrofobik terminal, yang umumnya
mengarah pada produksi hidrolisat yang tidak pahit dan memungkinkan kontrol tingkat hidrolisis yang
mudah. Hidrolisat yang diperoleh merupakan sumber asam amino esensial yang baik dalam aplikasi
makanan. Namun, efektivitas deproteinisasi dibatasi oleh adanya residu peptida kecil dan asam amino
yang melekat pada molekul kitin yang bertahan setelah hidrolisis enzimatik. Metode ini memungkinkan
isolasi kitin yang mengandung sekitar 4% pengotor protein. Kemurnian seperti itu cukup untuk banyak
aplikasi kitin non-medis. Gilberg dan Stenberg [57] juga menggunakan alcalase 2,4 L untuk pemulihan
kitin, protein hidrolisat dan asthaxanthin.
Maniet al.[58] membandingkan isolasi kitin dari limbah udang menggunakanBacillus cereusSV1 protease
alkali mentah dengan penggunaan 1,25 M NaOH. Cangkang udang didemineralisasi setelah deproteinisasi
menggunakan perlakuan HCl encer. Kandungan protein residu secara signifikan lebih tinggi pada kitin yang
diisolasi dengan deproteinisasi enzimatik daripada yang diperoleh dengan perlakuan alkali (10% berbanding
6%).
Dalam penelitian lain, deproteinisasi enzimatik dioptimalkan oleh Youneset al.[59] sebelum
demineralisasi. Dalam penelitian ini banyak protease mikroba yang dibandingkan berdasarkan
efisiensinya dalam deproteinisasi kulit udang. Enam protease mikroba mentah basa dariBacillus
mojavensisA21,Bacillus subtilisA26,B. licheniformisNH1,B. licheniformisMP1,Vibrio metschnikovii
J1 danAspergillus clavatusES1, digunakan. Derajat deproteinisasi tertinggi diperoleh dengan
B.mojavensisA21 protease, sekitar 76%. Kemudian, pengaruh kondisi reaksi,yaitu., terutama
rasio enzim/substrat, suhu dan waktu inkubasi, pada derajat deproteinisasi dioptimalkan
menggunakan metodologi permukaan respons untuk mencapai deproteinisasi 88% dalam
kondisi optimal.
Baru-baru ini banyak protease mentah alkali ikan dan invertebrata laut telah diterapkan untuk
deproteinisasi kulit udang. Mukhin dan Novikov [60] mempelajari kemungkinan menggunakan limbah
krustasea baik sebagai substrat maupun sebagai sumber protease. Protein cangkang didegradasi dengan
protease mentah yang diisolasi dari hepatopankreas kepiting. Tujuannya adalah untuk mengoptimalkan
hasil hidrolisat protein. Namun, bahkan dalam kondisi terbaik,yaitu., suhu = 50 °C, waktu = 12 jam, pH =
8,4, rasio Enzim/Substrat 6 g/kg, derajat hidrolisis tidak pernah lebih tinggi dari 80%.
Kamuet al. [61] menggunakan protease basa dari ikan kalajengking merahScorpaena skrofauntuk
limbah udang deproteinasi hingga 85%. Aktivitas protease alkali mentah ini mungkin terkait dengan ikan
yang memakan terutama krustasea dan moluska yang menginduksi sifat dan spesifisitas enzimnya.
Sebaliknya, ketika ekstraksi dilakukan dengan proses kimia, urutan dua langkah (deproteinisasi dan
demineralisasi) tidak memiliki pengaruh yang signifikan terhadap kualitas dan hasil kitin akhir [62].
Namun, jika deproteinisasi enzimatik diterapkan, mineral yang terdapat dalam kutikula dapat
menurunkan aksesibilitas protease dan mempengaruhi efisiensi deproteinisasi kulit udang. Dengan
demikian, demineralisasi harus dilakukan terlebih dahulu.
2.2.2.2. Fermentasi
Biaya penggunaan enzim dapat dikurangi dengan melakukan deproteinisasi melalui proses fermentasi,
yang dapat dicapai dengan mikroorganisme endogen (disebut auto-fermentasi) atau dengan menambahkan
strain mikroorganisme terpilih. Yang terakhir ini dapat dicapai dengan fermentasi satu tahap, fermentasi dua
tahap, ko-fermentasi atau fermentasi berturut-turut.
Banyak spesies mikroorganisme diusulkan untuk fermentasi cangkang krustasea seperti yang
dirangkum oleh Arbiaet al.[51]. Metode fermentasi dapat dipisahkan menjadi dua kategori utama:
fermentasi asam laktat dan fermentasi asam non-laktat.
(a) Fermentasi Asam Laktat
Fermentasi cangkang krustasea dapat dilakukan dengan cara diseleksiLactobacillussp. saring

sebagai inokulum yang menghasilkan asam laktat dan protease. Asam laktat diperoleh dengan
konversi glukosa sehingga kondisi pH silase yang lebih rendah menekan pertumbuhan
mikroorganisme pembusuk. Asam laktat bereaksi dengan kalsium karbonat, mengarah pada
pembentukan endapan kalsium laktat yang dipisahkan dari cangkang yang lebih ringan yang
diambil dan dibilas dengan air. Proses ini dapat diwujudkan baik pada cangkang krustasea yang
telah dimurnikan, atau pada limbah udang utuh (termasuk kepala dan jeroan). Dengan
demikian, deproteinisasi dan pencairan protein secara simultan dapat terjadi oleh aksi protease
yang dihasilkan oleh strain tambahan, atau oleh bakteri usus yang ada dalam sistem usus
udang yang diberi perlakuan, atau oleh protease yang ada dalam biowaste itu sendiri. Efisiensi
fermentasi asam laktat tergantung pada banyak faktor,
Contohnya Choritet al.[66] menggunakan metodologi permukaan respon untuk mengoptimalkan efisiensi
demineralisasi pada kulit udang yang difermentasi. Variabel yang diuji adalah: konsentrasi sukrosa, nilai pH
awal dan waktu perendaman, menggunakanPediococcussp. L1/2. Hasil menunjukkan peningkatan derajat
demineralisasi (disebabkan oleh konsentrasi sukrosa yang lebih tinggi dan waktu perendaman) serta efek
penting dari pH awal. Derajat demineralisasi mencapai sekitar 83% pada pH 7, dibandingkan dengan 68% pada
pH 6 (konsentrasi sukrosa 50 g/L dan waktu perendaman 72 jam).
Kalau tidak, Raet al. [64] mempelajari pengaruh parameter fermentasi yang berbeda (pH awal, konsentrasi
glukosa awal dan inokulasi dengan jumlah yang berbeda dariLactobacillus) pada derajat deproteinisasi dan
demineralisasi. Pengobatan kombinasi denganLactobacillusdan penurunan pH limbah awal dengan
penambahan asam asetat menghasilkan deproteinisasi yang lebih rendah dan derajat demineralisasi yang
lebih tinggi daripada perlakuan denganLactobacillusatau asam secara individual. Selain itu, inokulasi dengan
Lactobacillus menghasilkan keluaran cairan protein berkualitas tinggi, sedangkan limbah autofermentasi
(karena adanya mikroflora udang) memberikan fraksi protein bau yang kuat. Pada fermentasi dengan bakteri
asam laktat, efisiensi demineralisasi dan kualitas produk turunannya tinggi, dan penambahan protease
komersial bahkan dapat meningkatkan deproteinisasi.
(b) Fermentasi Non Asam Laktat
Dalam fermentasi asam non-laktat, bakteri dan jamur digunakan untuk fermentasi cangkang
krustasea, misalnya:Basilsp. [67–69],Pseudomonassp. [65,70,71] danAspergillussp.[72].
Ghorbel-Bellaajet al. [69] mengevaluasi enam proteolitikBasilstrain pada fermentasi

limbah udang:Bacillus pumilusA1,B.mojavensisA21,B. licheniformisRP1,B. cereusSV1,
B. amyloliquefaciensAn6 danB.subtilisA26. Hasil menunjukkan bahwa semuaBasilstrain mampu deproteinize
limbah udang. Derajat deproteinisasi tertinggi diperoleh dengan menggunakanB. cereusSV1. Para penulis ini
juga telah menguji peran jumlah tambahan glukosa pada fermentasi dan mereka menyimpulkan bahwa
glukosa tidak berpengaruh signifikan terhadap derajat deproteinisasi dan peningkatan demineralisasi.
Siniet al. [68] telah mempelajari fermentasi kulit udang dalam kaldu jaggery menggunakanB.subtilis.Sekitar
84% protein dan 72% mineral dihilangkan; setelah langkah ini residu diberi perlakuan dengan 0,8 N HCl dan 0,6
N NaOH untuk mengurangi sisa protein dan mineral ke tingkat yang memuaskan sekitar 0,8% protein dan 0,8%
mineral.
Banyak faktor yang telah dilaporkan mempengaruhi proses fermentasi dan akibatnya efisiensi
deproteinisasi dan demineralisasi [65,66,73]. Ghorbel-Bellaajet al. [70] menggunakan desain faktorial Plackett-
Burman untuk menyaring faktor-faktor utama yang mempengaruhi penggunaan efisiensi fermentasi
P.aeruginosaA2. Metode ini sangat berguna dalam studi pendahuluan, di mana tujuan utamanya adalah
untuk memilih variabel yang dapat diperbaiki atau dihilangkan dalam proses optimasi lebih lanjut. Hanya
empat variabel yang dilaporkan efektif pada derajat deproteinisasi dan demineralisasi: konsentrasi kulit
udang, konsentrasi glukosa, ukuran inokulum dan waktu inkubasi. Di bawah kondisi ini: pH media awal,
suhu, kecepatan agitasi dan volume kultur tidak berpengaruh pada efisiensi fermentasi yang diamati.
Kemudian, dari metodologi permukaan respon, pada kondisi optimal untuk kulit udang terfermentasi,
demineralisasi maksimum adalah 96%, dan deproteinisasi adalah 89% [70].
Enzim proteolitik dilepaskan dari jamurA.nigerjuga diuji untuk efisiensi deproteinisasi dan demineralisasi
cangkang krustasea. Tenget al. [74] mengevaluasi produksi kitin secara bersamaan dari cangkang udang dan jamur
dalam proses fermentasi satu pot di mana protease dari jamur menghidrolisis protein menjadi asam amino yang
pada gilirannya bertindak sebagai sumber nitrogen untuk pertumbuhan jamur. Hasil penelitian menunjukkan bahwa
sisa protein pada kitin udang hasil isolasi berada di bawah 5%. Kandungan protein dalam kitin jamur lebih tinggi
(10%–15%). Mereka menyimpulkan bahwa suplementasi jamur dan kulit udang dengan glukosa dalam satu reaktor
menyebabkan pelepasan protease oleh jamur dan meningkatkan deproteinisasi kulit udang. Protein terhidrolisis
pada gilirannya digunakan untuk pertumbuhan jamur, menyebabkan pH medium lebih rendah dan demineralisasi
lebih lanjut dari kulit udang.
Berbagai metode biologis ekstraksi kitin oleh mikroorganisme lebih sederhana, lebih produktif dan ramah
lingkungan jika dibandingkan dengan proses kimia. Namun, fermentasi mikroba memiliki kekurangan seperti:
waktu pemrosesan yang lebih lama dibandingkan dengan metode kimia, aksesibilitas protease yang lebih
buruk (disebabkan oleh adanya mineral yang menyebabkan tingginya residu protein). Namun demikian, tingkat
deproteinisasi dapat diperbaiki tergantung pada persyaratan penggunaan akhir khususnya untuk aplikasi
biomedis. Ini dapat dicapai dengan menggunakan proses simultan atau berurutan seperti fermentasi dua
langkah atau kofermentasi mikroorganisme. Untuk mendapatkan kitin yang sangat murni, proses bioteknologi
harus dilengkapi dengan perlakuan kimia ringan lebih lanjut untuk menghilangkan sisa protein dan mineral.
Baru-baru ini, Gortani dan Hours [52] menyimpulkan bahwa proses industri yang hemat biaya, cepat, dan
mudah dikontrol untuk memproduksi kitin dengan MW dan DA tinggi masih memerlukan pengembangan lebih
lanjut dan optimalisasi proses ekstraksi, seperti: meminimalkan degradasi dan penurunan kitin tingkat
pengotor ke tingkat yang memuaskan sangat diinginkan untuk aplikasi tertentu.
2.3. Karakterisasi dan Kelarutan Kitin
Dalam keadaan padat, rantainya paralel pada β-chitin dan antiparalel pada --chitin [75]. Struktur kristal
mereka ditinjau dalam makalah yang berbeda menggunakan metode difraksi sinar-X [76-79],
spektroskopi IR [80-86], dan NMR [87-90]. Kondisi padat13C-NMR adalah teknik yang umum digunakan
untuk diferensiasi dua isomorf [88], untuk penentuan derajat deasetilasi kitin (DD) dan untuk mengontrol
kondisi pemurnian. Gambar 2 menunjukkan spektrum khas untuk --kitin dan kitosan dengan derajat
asetilasi yang berbeda [90].
Gambar 2.13Spektrum C NMR untuk (SEBUAH) kitin dan kitosan (B) diperoleh dengan
reasetilasi homogen DA = 0,60; (C) kitosan komersial dari Pronova DA = 0,2; (D) kitin yang
terdeasetilasi penuh. Direproduksi dengan izin dari [90]. Hak Cipta 2000 American
Chemical Society.
Sayangnya, sifat fisik kitin dalam larutan tidak dapat dianalisis dengan benar karena data yang buruk
terutama disebabkan oleh kesulitan dalam pembubaran polimer ini. Pembubaran diinginkan untuk
memperkirakan berat molekul tetapi juga untuk memproses kitin (kitin tidak dapat diproses dalam keadaan
cair). Kehadiran agregat dalam larutan menghalangi pengukuran hamburan cahaya dan melebih-lebihkan
berat molekul. Oleh karena itu, teknik yang paling dapat diterapkan di sini adalah viskometri di mana
parameter Mark-Houwink diketahui berdasarkan kondisi termodinamika yang digunakan (pelarut, suhu). Salah
satu sistem yang paling dikenal didasarkan pada pembentukan kompleks antara kitin dan LiCl (pada 5% berat
dalam pelarut DMAC) dalam pelarut dimethylacetamide. Nilai eksperimental parameterKdansebuahterkait
viskositas intrinsik [-] dan berat molekul M untuk kitin dalam pelarut ini diperkirakan dari persamaan Mark-
Houwink yang terkenal menurut:
[η] (mL/g) = KMsebuah (1)

dengan K = 7,6 ×10−3, a = 0,95 pada 30 °C [91] dan K = 2,4 ×10−1, a = 0,69 pada 25 °C [92].
Ulasan tentang kitin dan kitosan termasuk pertanyaan tentang kelarutannya baru-baru ini diterbitkan
dalam kaitannya dengan pemrosesan serat [93]. Telah dibuktikan bahwa kitin dapat diproses dari larutan.
Selain itu, kitin, seperti polisakarida lain yang berasal dari selulosa, memiliki sifat pembentuk film yang
baik dan stabilitas yang baik yang didorong oleh pembentukan jaringan ikatan hidrogen.
antara rantai yang diperpanjang. Kitin memberikan sifat asli pada bahan baru karena biokompatibilitasnya,
biodegradabilitas dan non-toksisitas, dengan aktivitas antimikroba dan imunogenisitas yang rendah.
3. Preparasi dan Karakterisasi Kitosan
3.1. Persiapan Kitosan
Istilah kitosan biasanya mengacu pada keluarga polimer yang diperoleh setelah deasetilasi kitin ke
berbagai tingkat. Faktanya, derajat asetilasi, yang mencerminkan keseimbangan antara dua jenis residu
(Gambar 1), membedakan kitin dari kitosan. Ketika DA (dinyatakan sebagai persentase molar) lebih
rendah dari 50% mol, produknya diberi nama kitosan dan menjadi larut dalam larutan berair asam [94].
Selama deasetilasi, gugus asetil dihilangkan tetapi juga terjadi reaksi depolimerisasi, yang ditandai
dengan perubahan MW kitosan.
Kitin dapat diubah menjadi kitosan dengan persiapan enzimatik [95-98] atau proses kimia [99.100].
Metode kimia digunakan secara luas untuk tujuan komersial pembuatan kitosan karena biayanya yang
rendah dan cocok untuk produksi massal [100].
3.1.1. Deasetilasi Kimia
Dari sudut pandang kimia, asam atau basa dapat digunakan untuk mendeasetilasi kitin. Namun,
ikatan glikosidik sangat rentan terhadap asam; oleh karena itu, deasetilasi alkali lebih sering
digunakan [100,101].
ItuN-deasetilasi kitin dapat dilakukan secara heterogen [102], atau secara homogen [103].
Umumnya, dalam metode heterogen, kitin direaksikan dengan larutan NaOH pekat panas selama
beberapa jam, dan kitosan diproduksi sebagai residu tak larut yang terdeasetilasi hingga∼85%–99%.
Menurut metode homogen, kitin alkali dibuat setelah dispersi kitin dalam NaOH pekat (30 g NaOH/
45 g H2O/ 3 g Kitin) pada 25 °C selama 3 jam atau lebih, diikuti dengan pelarutan dalam es serut
sekitar 0 °C. Metode ini menghasilkan kitosan yang dapat larut dengan derajat asetilasi rata-rata
48%–55% [99]. Proses ini menghasilkan deasetilasi dengan gugus asetil terdistribusi secara merata di
sepanjang rantai, misalnya kitosan dengan DA = 10% setelah 580 jam pada suhu 25 °C [103].
Rinaudo dan Domard [104] melaporkan bahwa kelarutan kitosan dapat dicirikan tidak hanya oleh
fraksi 2-acetamido-2-deoxy-Dunit -glukosa dalam molekul tetapi juga olehNdistribusi gugus -asetil.
Aiba [105] menunjukkan bahwa reaksi deasetilasi yang dilakukan dalam kondisi heterogen
memberikan distribusi yang tidak teraturN-asetil-D-glukosamin danD-residu glukosamin dengan
beberapa distribusi gugus asetil blok di sepanjang rantai polimer. Dengan demikian, kelarutan dan
tingkat agregasi kitosan dapat bervariasi dalam larutan berair yang menyebabkan perubahan
karakteristik rata-ratanya. Misalnya, sifat fisika-kimia kitosan tersebut mungkin berbeda dari kitosan
asetat acak yang diperoleh dalam kondisi homogen.
Selain itu, variasi pembuatan kitosan juga dapat mengakibatkan perubahan: DA, distribusi gugus asetil
sepanjang rantai, MW dan viskositas dalam larutan [106,107].
Faktanya, banyak parameter dalam reaksi deasetilasi dapat memengaruhi karakteristik
kitosan akhir [108]. Misalnya, Rege dan Block [109] telah menyelidiki pengaruh suhu, waktu
pemrosesan dan geser mekanis pada karakteristik kitosan, dan menemukan bahwa suhu dan
waktu proses berpengaruh signifikan terhadap DA dan MW. Tolaimateet al.[110] melaporkan bahwa
kitosan DA sangat dipengaruhi oleh suhu dan pengulangan langkah basa. Wu dan Bough [45]
mempelajari efek waktu dan konsentrasi NaOH. Tsaih dan Chen [111] juga meneliti pengaruh waktu
reaksi dan suhu. Semua studi ini dilakukan dengan menggunakan eksperimen klasik satu variabel pada
satu waktu. Laporan-laporan ini menunjukkan bahwa BM dan DA kitosan terutama dipengaruhi oleh
konsentrasi NaOH, waktu reaksi, suhu, dan pengulangan langkah basa. Faktor tambahan seperti reagen
reaksi, atmosfer, ukuran partikel, kitin dan rasio pelarut, dan sumber bahan baku juga diuji dalam
penelitian lain [100,102,110,112].
Weskaet al.[113] mencoba mengoptimalkan deasetilasi kitin dengan metodologi permukaan respons
(mengendalikan MW dan/atau DA) menggunakan variabel suhu dan waktu reaksi. Hwanget al.[114]
mempelajari pengaruh suhu, waktu dan konsentrasi NaOH pada deasetilasi. Changet al.[102] melaporkan
pengaruh konsentrasi NaOH, suhu dan rasio larutan/kitin dan menemukan bahwa DA kitosan menurun
dengan peningkatan suhu dan konsentrasi NaOH. Parameter lain, seperti: penggunaan rendaman alkali
berturut-turut, kondisi atmosfer, dan adanya aditif yang berbeda dapat memengaruhi deasetilasi tetapi
sebelumnya tidak dipertimbangkan dalam studi optimisasi.
Deasetilasi diselidiki menggunakan tujuh faktor: reagen alkali, konsentrasinya, suhu, waktu reaksi,
penggunaan rendaman berturut-turut, kondisi atmosfer dan penggunaan natrium borohidrida, zat
pereduksi [115]. Untuk tujuan itu, desain faktorial fraksional diterapkan dan model matematis dibuat
untuk memungkinkan pengoptimalan kondisi eksperimental kitosan dari DA yang diinginkan. Hasil
dengan jelas mengungkapkan pengaruh yang signifikan dari suhu dan sifat reagen alkali (perlakuan
NaOH jauh lebih efisien daripada KOH). Telah ditemukan bahwa DA secara signifikan dipengaruhi oleh
penggunaan rendaman berturut-turut, waktu reaksi dan konsentrasi alkali. Sebaliknya, kondisi atmosfer
(nitrogen atau udara) dan penggunaan zat pereduksi (NaBH4) tidak berpengaruh signifikan pada DA
kitosan tetapi MW kitosan lebih tinggi di bawah nitrogen atmosfer dan penambahan natrium borohidrida
yang mencegah degradasi polimer. Hasil ini sesuai dengan yang sebelumnya diperoleh dengan
thiophenol dan NaBH4digunakan sebagai pemulung oksigen dan agen pereduksi, masing-masing [116].
3.1.2. Deasetilasi enzimatik
Deasetilasi kimia juga memiliki kelemahan: konsumsi energi; limbah larutan alkali pekat, sehingga
meningkatkan pencemaran lingkungan, berbagai produk larut dan tidak larut yang luas dan
heterogen.
Untuk mengatasi kelemahan ini dalam pembuatan kitosan, metode enzimatik alternatif yang
mengeksploitasi deasetilase kitin telah dieksplorasi. Penggunaan kitin deasetilase untuk konversi kitin menjadi
kitosan, berbeda dengan prosedur kimia yang saat ini digunakan, menawarkan kemungkinan proses yang
terkontrol dan tidak terdegradasi, menghasilkan produksi kitosan baru yang terdefinisi dengan baik [117].
Metode ini khusus digunakan untuk menyiapkan oligomer kitosan.
Kitin deacetylase (EC 3.5.1.41) mengkatalisis hidrolisisN-ikatan acetamido dalam kitin untuk
menghasilkan kitosan. Kehadiran aktivitas enzim ini telah dilaporkan pada beberapa jamur [118-123] dan
spesies serangga [124]. Enzim yang paling banyak dipelajari adalah yang diekstraksi dari jamurMucor
rouxii[95.118.119],Absidia coerulea[120],Aspergillus nidulans[121] dan dua strainColletotrichum
lindemutianum[122.123]. Semua enzim adalah glikoprotein dan disekresikan ke daerah periplasma atau
ke media kultur. Selain itu, semua enzim menunjukkan stabilitas termal yang luar biasa pada suhu
optimalnya (50 °C), dan menunjukkan spesifisitas yang sangat kuat untuk β-(1,4)-linked N-asetil-D- polimer
glukosamin. Namun, enzim bervariasi secara signifikan dalam kandungan MW dan karbohidratnya dan
menampilkan kisaran pH optimal yang luas. Menarik untuk diperhatikan bahwa kitin deasetilase,
diproduksi olehC. lindemuthianumdanA.nidulans,tidak dihambat oleh asetat (produk dari deasetilasi)
yang membuat mereka cocok untuk aplikasi bioteknologi potensial [121-123].
Efisiensi kitin deasetilase, diisolasi dari jamurM.rouxii, pada sediaan kitosan diuji menggunakan
kitin sebagai substrat (baik morfologi kristal maupun amorf) [125]. Derajat deasetilasi tetap sangat
rendah (<10%) menunjukkan bahwa enzim tidak terlalu efektif pada kitin yang tidak larut. Hasil
serupa juga diperoleh dengan menggunakan deasetilase kitin yang diisolasi dari sumber lain
[120.122.123]. Dengan demikian, pretreatment substrat kitin sebelum penambahan enzim
tampaknya diperlukan untuk meningkatkan aksesibilitas gugus asetil ke enzim dan karenanya untuk
meningkatkan hasil deasetilasi. Untuk itu, percobaan telah dilakukan dalam kondisi homogen
menggunakan kitin deasetilase dariM.rouxiidengan kitosan larut air yang dideasetilasi sebagian
[126]. Dalam kondisi tertentu, enzim mampu mendeasetilasi kitosan hingga 97% (deasetilasi dari
kitosan awal dengan DA = 0,32 dan tingkat polimerisasi angka rata-rata 30) [126].
Temuan ini menunjukkan bahwa pengembangan proses yang dapat dikontrol menggunakan
deasetilasi enzimatik pada substrat kitin adalah proses alternatif yang menarik yang dapat menghasilkan
pembuatan polimer kitosan baru dan oligomer yang lebih menarik.
3.2. Karakterisasi dan Kelarutan Kitosan
Kitosan diperoleh dari deasetilasi parsial kitin menjadi larut dalam media asam berair ketika rata-
rata derajat asetilasi DA lebih rendah dari 0,5. Faktanya, batas ini bergantung pada distribusi gugus
asetil di sepanjang rantai. Pada tahap ini, dimungkinkan untuk mendapatkan karakterisasi lengkap
dari polimer tetapi mungkin berbeda dari bahan awal, khususnya berat molekulnya berkurang
selama deasetilasi dalam media basa kuat, seperti yang disebutkan sebelumnya.
Sifat fisik kitosan dalam larutan sangat bergantung pada DA dan distribusi gugus asetil di sepanjang
rantai. Distribusi kelompok asetil secara blok, yang disebabkan oleh deasetilasi heterogen yang dilakukan
pada kitin keadaan padat, menyebabkan asosiasi rantai bahkan dalam larutan encer dan pembentukan
agregat serta kesulitan dalam penentuan berat molekul [127,128]. Selain itu, kitosan yang terdeasetilasi
penuh dapat diasetilasi kembali dalam fase homogen [129] untuk mendapatkan sampel yang larut dalam
kondisi asam hingga DA.∼0,6 dalam kaitannya dengan distribusi acak gugus asetil. Dalam kondisi
tersebut, keberadaan -NH bebas2kelompok, tersedia pada posisi C-2
Dunit -glucosamine sepanjang rantai, memungkinkan untuk melakukan reaksi spesifik dalam kondisi
homogen [130-136].
Langkah pertama dalam karakterisasi kitosan adalah penentuan berat molekulnya (setelah disolusi),
kemudian DA dan akhirnya distribusi gugus asetil sepanjang rantai (dengan NMR). Selain itu, pelarut yang
berbeda berdasarkan asam asetat telah diusulkan, misalnya: asam asetat 0,3 M ditambahkan dengan
natrium asetat (hingga 0,1 atau 0,2 M) dalam larutan berair. Kehadiran eksternal
garam diperlukan untuk menyaring tolakan elektrostatik jarak jauh antara rantai bermuatan. Chitosan juga
larut dalam asam asetat atau asam klorida pada pH lebih rendah dari 6 (pK intrinsiknya sekitar 6,5) [1].
Penentuan rata-rata DA untuk kitosan dapat dilakukan dengan teknik yang berbeda: spektroskopi
inframerah [86], analisis dasar, dan titrasi potensiometri, tetapi1H keadaan cair [89] dan keadaan padat13C-NMR
[90.137.138] lebih disukai. Spektroskopi inframerah harus digunakan dengan hati-hati karena hasil interpretasi
terkait dengan kesulitan dalam mengadopsi garis dasar yang nyaman. Masalah ini juga dibahas sebelumnya
untuk sampel dengan DA yang berbeda [86]. Saat sekarang,1H NMR tampaknya menjadi teknik yang paling
nyaman untuk mendapatkan DA yang benar untuk sampel yang larut. Contoh diberikan pada Gambar 3. Selain
itu,13C NMR juga nyaman untuk penentuan DA dalam kasus kitin murni hingga kitosan terdeasetilasi penuh
dengan kesepakatan yang baik antara pengukuran dalam keadaan padat dan fase cair (Gambar 2) [90].
Gambar 3.1Spektrum H-NMR kitosan dengan DA~0,06 di D2O pada pH~4, T = 85 °C dan konsentrasi polimer 5
g/L. Sinyal pada 4,9 ppm adalah untuk H-1 dariD-glucosamine unit, pada 4,7 ppm adalah untuk H-1 dariN
-asetil-D-glukosamin, pada 3,2 ppm untuk H-2 dan pada 2,1 ppm untuk -CH3dari kelompok asetil yang
memungkinkan untuk mendapatkan DA.
Penting untuk mengingat medan yang tinggi itu13Spektroskopi C-NMR penting untuk menetapkan
distribusi gugus asetil sepanjang rantai kitosan [139140].
Selanjutnya, distribusi berat molekul dan berat molekul rata-rata serta viskositas intrinsik juga
memainkan peran penting. Namun, larutan kitosan harus bebas dari agregat, sehingga pemilihan pelarut
kitosan harus dilakukan dengan hati-hati. Berat molekul rata-rata viskometrik biasanya dihitung dari
viskositas intrinsik (dampak lebih rendah dari fraksi kecil agregat) menggunakan hubungan Mark-
Houwink [1]. Untuk menentukanKdansebuahparameter, MW mutlak harus dihitung dengan
menggunakan teknik hamburan cahaya; namun demikian, nilai yang diperoleh biasanya terlalu tinggi
karena kepekaan yang tinggi terhadap pembentukan agregat [127.128]. Artefak ini dapat dihilangkan
misalnya dengan penggunaan asam asetat 0,3M/natrium asetat 0,2M (pH = 4,5) pelarut yang tidak
membentuk agregat dalam campuran ini [141]. Dalam kondisi tersebut, nilai M absolut diperoleh dari
kromatografi eksklusi sterik (SEC) yang dilengkapi dengan viskometer dan detektor hamburan cahaya on
line yang memungkinkan untuk menentukan parameter Mark-Houwink tanpa fraksinasi dan juga untuk
mendapatkan hubungan antara jari-jari girasi dan molekul. berat [142]. ItuK(mL/g) dansebuah parameter
pada 25 °C adalah 7,9 ×10−2dan 0,796 masing-masing.
Nilai relatif tinggi yang diperoleh untuk parametersebuahsesuai dengan karakter semi-kaku dari
polisakarida ini yang mengontrol dimensi, volume hidrodinamik dan kontribusi viskometriknya.
Kekakuan berhubungan dengan panjang persistensi (Lt) dari rantai: kitosan dalam media asam
berperilaku seperti polielektrolit, jadi panjang persistensi total sebenarnyaLtpada konsentrasi ionik
tertentu sama dengan kontribusi intrinsikLpdan kontribusi elektrostatikLe, dihitung mengikuti
pengobatan Odijk [143]. Analisis konformasi kitin dengan derajat deasetilasi yang berbeda
menegaskan bahwa kitin dan kitosan adalah polimer semi-kaku yang dicirikan oleh panjang
persistensi yang cukup bergantung pada derajat asetilasi molekul. Dari analisis ini, kitosan yang
bebas gugus asetil memiliki panjang persistensi intrinsikLpgaram berlebih 9 nm [144].Lp
meningkat ketika DA meningkat hingga 12,5 nm untuk DA = 0,6, tetap konstan hingga kitin
murni pada 25 °C. Prediksi ini sesuai dengan nilai eksperimen yang diperoleh SEC [142].
3.3. Pengolahan dan Sifat Utama Bahan Berbasis Chitosan
Larutan kitosan yang disiapkan dalam media asam diproses sesuai konformasi yang dibutuhkan
(dicetak untuk film, dipintal untuk serat, dikeringkan beku untuk spons,dll.), direndam dalam larutan alkali
(di mana mereka mengendap), dicuci dan dikeringkan. Pengolahan kitosan lebih mudah daripada kitin
tetapi stabilitas bahan lebih rendah karena sifat hidrofilik yang lebih besar dan terutama sensitivitas pH.
Untuk stabilitas yang lebih baik, kitosan dapat berikatan silang menggunakan reagen seperti
epiklorohidrin, diisosianat, 1,4-butanediol diglisidil eter, atau glutaraldehid [145–147]. Banyak hidrogel
kitosan diperoleh dengan perlakuan dengan anion multivalen sebagai asam oksalat [148.149] atau asam
sitrat [150-152] atau tripolifosfat [153]. Campuran dan komposit terkadang diproduksi dengan
memanfaatkan sifat polikation kitosan dalam kondisi asam.
Faktanya, kitosan sebagai polielektrolit mampu membentuk kompleks elektrostatik (hidrogel)
yang menarik dengan makromolekul yang bermuatan berlawanan. Sifat-sifat bahan kompleks ini
bergantung pada konsentrasi polimer, suhu, pH, dan konsentrasi ionik. Kompleks polielektrolit
elektrostatik (PEC) disebutkan dalam literatur yang melibatkan kompleks kitosan dengan polimer
sintetik atau alami [4]. Interaksi elektrostatik antara kitosan dan vesikel lipid juga penting dalam
bidang biologi dan farmasi karena peran bioadhesif dan permeabilisasi kitosan [154-156]. Pelapisan
liposom dengan kitosan juga meningkatkan biokompatibilitasnya, dan menstabilkan membran
komposit terhadap pH serta konsentrasi ion [155].
Saat ini, interaksi elektrostatik ini diterapkan untuk persiapan kapsul polielektrolit lapis demi lapis
atau film berdasarkan polisakarida biokompatibel bermuatan atau polielektrolit kitosan/sintetik
[157-159]. Nanopartikel fosfolipid core-shell distabilkan melalui perakitan mandiri lapis demi lapis
alginat anionik dan kitosan kationik dan diusulkan untuk pelepasan protein [157].
Kitosan dan kompleks elektrostatik alginat telah banyak digunakan sejauh ini untuk aplikasi biologis
[160-162]. Kompleks yang terbentuk antara DNA atau RNA dan kitosan (oligomer atau polimer)
sebenarnya sedang diselidiki lebih lanjut di banyak laboratorium; kerapatan muatan dan DA kitosan
sangat penting untuk stabilitas kompleks [163-167].
4. Hubungan antara Struktur Kimia dan Aktivitas Biologis
Karena kitosan dan turunannya memiliki banyak sifat menguntungkan seperti biokompatibilitas,
biodegradabilitas, keamanan dan juga aktivitas biologis yang menarik, banyak perhatian diberikan
pada aplikasinya terutama di bidang biomedis, makanan, bioteknologi dan farmasi [168,169]. Di
antara aktivitas biologisnya yang menarik, aktivitas antimikroba, antioksidan, dan antitumor akan
dibahas secara rinci di bawah ini. Sifat-sifat ini diakui secara khusus di bidang pengawetan dan
pengemasan makanan untuk menghindari penggunaan pengawet kimia dan untuk menghasilkan
film antimikroba yang dapat dimakan karena sifat pembentuk film kitosan yang baik. Kitosan,
sebagai bahan polimer dengan sifat antimikroba dan antioksidan yang baik, tidak mudah bermigrasi
keluar dari film pelindung dan memiliki sifat penghalang yang lebih baik.et al.[170], Kardaset al.[171]
dan Alishahi dan Aider [172].
Friedmanet al.[170] mempelajari aktivitas antimikroba kitosan dalam larutan, bubuk dan film yang dapat dimakan
dan lapisan terhadap patogen bawaan makanan, bakteri pembusuk, dan virus patogen dan jamur di beberapa
kategori makanan. Ini termasuk jus buah, telur dan produk susu, sereal, daging, dan makanan laut. Mereka
berpendapat bahwa kitosan dengan berat molekul rendah pada pH di bawah 6,0 menghadirkan kondisi optimal
untuk mencapai efek pengawet antimikroba dan antioksidan yang diinginkan dalam makanan cair dan padat.
Penggunaan kitosan dan turunannya dalam industri makanan juga dijelaskan dalam ulasan
Kardaset al.[171]. Mereka menunjukkan bahwa biopolimer ini menawarkan berbagai aplikasi unik
termasuk pengawetan makanan dari kerusakan mikroba dan pembentukan film biodegradable.
Alishahi dan Aider [172] melaporkan bahwa film kitosan dalam aplikasi pengemasan cenderung menunjukkan
ketahanan terhadap difusi lemak dan permeabilitas gas selektif. Namun, ketidaknyamanan berasal dari resistansi
yang rendah terhadap transmisi air dan uap air. Perilaku ini disebabkan oleh karakter hidrofilik yang kuat terutama
dari kitosan, suatu sifat yang mengarah pada interaksi yang tinggi dengan molekul air [173]. Untuk alasan ini,
pencampuran polimer atau penggunaan biokomposit dan sistem multilapisan merupakan pendekatan potensial
untuk menyiapkan pelapis bioaktif berbasis kitosan.
4.1. Aktivitas Antimikroba
Kitosan terbukti memiliki beberapa keunggulan dibandingkan disinfektan lainnya, seperti memiliki aktivitas
antimikroba yang lebih tinggi, spektrum aktivitas yang lebih luas, tingkat pembunuhan yang lebih tinggi, dan
toksisitas yang lebih rendah terhadap sel mamalia [174.175]. Banyak penelitian telah menunjukkan bahwa kitosan
memiliki aktivitas antimikroba yang penting. Namun, mekanisme penghambatan yang sebenarnya belum
sepenuhnya dipahami. Hipotesis yang paling layak adalah perubahan permeabilitas sel akibat interaksi antara
polisakarida bermuatan positif (kitosan pada pH lebih rendah dari 6,5) dan membran bermuatan negatif. Mekanisme
yang mendasari penghambatan pertumbuhan bakteri seharusnya polimer bermuatan positif bergabung dengan
komponen anionik sepertiNasam -acetylmuramic, asam sialat dan asam neuraminic, pada permukaan sel.
Pertama, mengenai aktivitas antibakteri kitosan, kemungkinan aksi kitosan dan turunannya telah diajukan.
Kitosan (terutama partikel dengan MW rendah) dapat menembus dinding sel bakteri, bergabung dengan DNA
dan menghambat sintesis transkripsi mRNA dan DNA [176]. Chitosan MW tinggi dapat berinteraksi dengan
permukaan sel dan akibatnya mengubah permeabilitas sel [177], atau membentuk
lapisan kedap di sekitar sel, sehingga menghalangi pengangkutan zat terlarut esensial ke dalam sel
[178.179]. Chunget al.[180] menegaskan bahwa mekanisme antibakteri meliputi hidrofilisitas dan muatan
negatif permukaan sel serta adsorpsi kitosan ke dalam sel bakteri. Mereka menunjukkan bahwa
hidrofilisitas dinding sel dan muatan negatif permukaan sel lebih tinggi pada bakteri gram negatif
dibandingkan dengan gram positif dan, sebagai tambahan, distribusi muatan negatif pada permukaan sel
mereka sangat berbeda dari gram positif. Kemudian, permukaan sel yang bermuatan lebih negatif
berinteraksi lebih banyak dengan kitosan yang bermuatan positif, dalam kondisi asam. Hasilnya
menunjukkan nilai koefisien korelasi yang tinggi antara kitosan teradsorpsi dan efisiensi inhibisi. Selain
itu, banyak penelitian lain menunjukkan bahwa kitosan lebih efektif untuk bakteri gram negatif daripada
bakteri gram positif [181-183].
Juga diindikasikan bahwa jumlah kitosan yang terserap berhubungan dengan nilai pH lingkungan (pH
<6,5) dan derajat asetilasi kitosan [183-185]. Kitosan lebih banyak diserap oleh sel bakteri pada pH yang
lebih rendah sehubungan dengan peningkatan muatan ion positif kitosan sehubungan dengan fraksi
gugus terdeasetilasi (1 − DA). Dari literatur jelas terlihat bahwa ada hubungan langsung antara aktivitas
antibakteri kitosan dan karakteristiknya terutama DA. Pengaruh DA pada aktivitas antimikroba kitosan
telah jelas ditunjukkan dalam penelitian kami sebelumnya [186]. Dalam data ini, terlihat jelas bahwa
semakin rendah DA, semakin rendah MW dan semakin rendah pH memberikan efisiensi yang lebih besar.
Selain itu, pengaruh MW diperkenalkan oleh Zhenget al.[187]. Mereka membedakan efek kitosan
padaStaphylococcus aureus(gram positif) dan seterusnyaEscherichia coli(gram-negatif) dan
menunjukkan bahwa, untuk gram-positifS.aureus, aktivitas antimikroba meningkat dengan
meningkatnya berat molekul kitosan. Sebaliknya, untuk gram negatifE.coli, mereka menunjukkan
bahwa aktivitas antibakteri meningkat dengan penurunan berat molekul. Penulis ini menyarankan
dua mekanisme berikut untuk aktivitas antimikroba: dalam kasusS.aureus, kitosan pada permukaan
sel membentuk membran polimer, yang menghambat nutrisi masuk ke dalam sel dan, untukE.coli,
kitosan dengan berat molekul lebih rendah masuk ke dalam sel melalui pervasi.
Pengaruh MW juga didiskusikan oleh Benhabileset al.[188] menyiapkan oligomer kitin dan kitosan. Aktivitas
antimikroba mereka terhadap empat bakteri gram positif dan tujuh gram negatif dibandingkan dengan kitosan
dan kitin awal. Mereka menyimpulkan bahwa chito-oligomer akan memiliki keuntungan sebagai agen
antimikroba baru karena aktivitasnya yang lebih tinggi dan kelarutan air yang lebih besar daripada polisakarida
asli.
Mengenai aktivitas antijamur, telah dilaporkan bahwa kitosan dapat mengurangi infeksi Fusarium
oxysporumf. sp. apii dalam seledri dan menghambat penyebaranSphaerotheca pannosavar. mawar,
Peronospora jarangdanBotrytis cinereapada mawar [189–191]. Mengobati tanaman tomat dengan
larutan kitosan mengurangi pertumbuhan miselium, produksi sporangial, pelepasan zoospora dan
perkecambahan kistaPhytophthora infestansyang menghasilkan perlindungan penyakit yang signifikan
[192]. Selain itu, perlakuan benih kitosan dapat mengurangiColletotrichumsp. infeksi dan meningkatkan
kinerja bibit cabai [193]. Mengenai mekanismenya, diduga bahwa kitosan membentuk film permeabel
pada antarmuka [194] dan memiliki dua fungsi: interferensi langsung pertumbuhan jamur dan aktivasi
beberapa proses pertahanan. Mekanisme pertahanan ini meliputi akumulasi kitinase, sintesis inhibitor
proteinase, lignifikasi dan induksi sintesis kalus [195].
Faktanya, ketergantungan aktivitas pada karakteristik kitosan dilaporkan bergantung pada spesies jamur
tertentu. Sebagai contoh, ditunjukkan bahwa pertumbuhan jamur menurun dengan meningkatnya MW
F.oxysporumdan dengan penurunan DA untukAlternaria solani, tetapi tidak ada ketergantungan MW atau DA yang
diamati denganA.niger[186].
4.2. Aktivitas Antioksidan
Stres oksidatif merupakan penyebab utama banyak penyakit, terutama kanker dan masalah kardiovaskular,
yang secara signifikan meningkatkan kematian di seluruh dunia [196-202]. Antioksidan makanan, yang
menonaktifkan spesies oksigen reaktif dan memberikan perlindungan dari kerusakan oksidatif [196-202],
dianggap sebagai molekul strategis pencegahan yang penting.
Setelah oksidasi lipid terjadi pada produk makanan, rasa tidak enak dan senyawa kimia yang tidak diinginkan
terbentuk dan ini mungkin berbahaya bagi kesehatan. Oleh karena itu, untuk meminimalkan risiko ini, beberapa
antioksidan (seperti antioksidan sintetik butylated hydroxyanisole (BHA), butylated hydroxytoluene (BHT), t-
butylhydroquinone (TBHQ) dan propyl gallate) ditambahkan untuk menunda kerusakan yang disebabkan oleh
oksidasi lipid. Namun, antioksidan ini menimbulkan potensi bahaya kesehatan, dan penggunaannya telah dibatasi di
beberapa negara. Oleh karena itu, minat terhadap antioksidan alami semakin meningkat dibandingkan antioksidan
sintetik.
Dalam beberapa tahun terakhir, lebih banyak perhatian diberikan untuk mempelajari aktivitas antioksidan
kitosan dan turunannya [203]. Dilaporkan bahwa kitosan dan turunannya bertindak sebagai antioksidan
dengan mengais radikal oksigen seperti hidroksil, superoksida, alkil serta radikal DPPH yang sangat stabil. in
vitro[204]. Sun dan kolaborator [205] melaporkan bahwa kitosan dan turunannya bertindak sebagai donor
hidrogen untuk mencegah urutan oksidatif.
Selain itu, diamati bahwa sifat pemulungan radikal kitosan bergantung pada DA dan MW mereka.
Tamanet al.[204] menunjukkan bahwa kitosan dengan MW rendah lebih aktif dibandingkan dengan
kitosan dengan MW lebih tinggi. Sampel kitosan dengan MW rendah (1∼3 kDa) mengungkapkan
potensi yang lebih tinggi untuk mengais radikal yang berbeda. Pemeriksaan lain menunjukkan
bahwa kitosan dengan MW rendah dapat menunjukkan lebih dari 80% aktivitas pemulungan radikal
superoksida pada konsentrasi 0,5 mg/mL [206]. Pengaruh kitosan MW (30, 90, dan 120 kDa) pada
aktivitas antioksidan pada kulit Salmon juga dipelajari [207]. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa
semua kitosan memiliki aktivitas antioksidan yang dapat menurunkan oksidasi lemak ikan Salmon,
sampel kitosan 30 kDa memiliki aktivitas antioksidan yang lebih tinggi. Selain itu, kitin yang sangat
terdeasetilasi (90%) lebih disukai untuk mengais DPPH, hidroksil, superoksida, dan radikal yang
berpusat pada karbon [208]. Meskipun mekanisme yang tepat dari aktivitas pemulungan radikal
tidak jelas, ini dikaitkan dengan gugus amino dan hidroksil (melekat pada C-2,
4.3. Aktivitas Antitumor
Kitosan dan turunannya juga memiliki aktivitas antitumor yang diselidiki oleh keduanyain vitrodan in vivometode
[209]. Beberapain vivostudi melaporkan bahwa kitosan menghambat pertumbuhan sel tumor dengan mengerahkan
efek immunoenhancing. Mereka menyimpulkan bahwa aktivitas antitumor yang diamati bukan karena pembunuhan
langsung sel tumor, tetapi oleh peningkatan produksi limfokin yang mengakibatkan proliferasi.
limfosit T sitolitik [210]. Chenet al.[211] menunjukkan bahwa pemberian gel kitosan intratumoral
pada hewan mengurangi perkembangan kanker payudara metastatik. Kitosan juga merangsang
pematangan makrofag menjadi makrofag sitotoksik dan menekan pertumbuhan tumor pada tikus
[212]. Telah dikemukakan bahwa peningkatan sekresi IL-1 dan IL-2 menyebabkan efek anti tumor
melalui maturasi dan infiltrasi limfosit T sitolitik [213].
Studi lain menunjukkan bahwa kitosan juga menunjukkan efek langsung pada sel tumor; itu menghambat
proliferasi sel tumor dengan menginduksi apoptosis [214]. Misal seperti Hasegawaet al.[215] menunjukkan bahwa
kitosan dapat menyebabkan kematian apoptosis sel tumor kandung kemih melalui aktivasi caspase-3. Studi lebih
lanjut mengungkapkan bahwa nanopartikel kitosan juga dapat menginduksi kematian nekrotik, yang telah diuji pada
sel kanker hati melalui netralisasi muatan permukaan sel, diamati sebagai penurunan potensial membran
mitokondria dan induksi peroksidasi lipid [216]. Selain itu, kitosan dapat menghambat pertumbuhan tumor asites
Ehrlich dengan pengurangan glikolisis yang menyebabkan penurunan penyerapan glukosa dan tingkat ATP dalam sel
tumor [217]. Penelitian ini juga menemukan bahwa kitosan diberikan secara oral dengan dosis 1 mg kg-1−1pada tikus
mengurangi pertumbuhan tumor hingga ~62%, tanpa toksisitas pada hati. Jadi, kitosansendirimemiliki aktivitas
potensial melawan kanker, bahkan ketika diberikan secara oral. Sebuah penelitian serupa, menggunakan model
tumor yang diinduksi secara kimia, menunjukkan bahwa penambahan kitosan ke dalam makanan memungkinkan
untuk menekan lesi tumor crypt yang menyimpang di usus besar tikus [218]. Menariknya, perlindungan seperti itu
dengan aditif kitosan dalam pakan hanya bertahan hingga 6 minggu. Investigasi ini menyoroti bahwa kitosan
bertanggung jawab atas peningkatan ekspresi p21/Cip dan p27/Kip dan akibatnya penurunan ekspresi antigen nuklir
sel yang berproliferasi dalam garis sel kanker lambung manusia. Namun demikian, penelitian lebih lanjut diperlukan
untuk lebih memahami semua mekanisme yang terlibat dalam stasis tumor berbasis kitosan.
Aktivitas kitosan tidak hanya bergantung pada karakteristik struktural kitosan, seperti DA dan MW, tetapi
juga pada spesies tumor. Jeon dan Kim [219] mempelajari aktivitas antitumor oligosakarida kitosan dengan
berat molekul yang berbeda. Mereka menemukan bahwa oligosakarida kitosan dengan BM mulai dari 1,5
hingga 5,5 kDa dapat secara efektif menghambat pertumbuhan Sarcoma 180 solid (S180) atau tumor
karsinoma serviks Uterine No. 14 (U14) pada tikus BALB/c. Studi pada tikus yang memeriksa sampel kitosan
dengan MW berbeda mengungkapkan efek antimetastatik kitosan yang signifikan terhadap karsinoma paru
Lewis. Terlihat bahwa aktivitas meningkat dengan penurunan ukuran molekul yang menunjukkan efek
imunostimulasi yang mengaktifkan makrofag peritoneal dan menstimulasi resistensi inang non-spesifik. Juga
ditunjukkan bahwa sampel kitosan dengan MW yang lebih tinggi menunjukkan aktivitas antitumor yang lebih
rendah [220]. Namun, penulis lain menemukan bahwa penurunan MW kitosan dari 213 menjadi 10 kDa tidak
mempengaruhiin vitrositotoksisitas pada garis sel karsinoma paru-paru manusia A549 [221]. Selain itu, sampel
kitosan dengan MW yang berbeda mulai dari 42 hingga 135 kDa juga dievaluasi dalam hal sitotoksisitasnya
pada sel kanker kandung kemih manusia RT112 dan RT112cp dan tidak ada efek MW yang diamati [222]. Studi
yang sama berusaha untuk menguji juga pengaruh kitosan DA (kitosan homogen dengan DA mulai dari 2%
sampai 61%) pada sitotoksisitas. Hasil dari percobaan ini menunjukkan bahwa semua sampel kitosan aktif pada
sel karsinoma kandung kemih, dengan aktivitas yang lebih baik untuk sampel dengan DA yang lebih tinggi.
Telah ditunjukkan bahwa kitosan mengungkapkan aktivitas antikanker, sehingga dapat digunakan untuk
enkapsulasi agen antikanker. Namun, sebelum dimasukkan ke dalam obat baru, diperlukan pra-tes.
5. Aplikasi Farmasi dan Biomedis Kitin dan Kitosan
Sifat utama kitin dan kitosan, diterapkan untuk aplikasi spesifik, telah dijelaskan seperti:
biokompatibilitas, asal terbarukan, non-toksisitas [223], non-alergenisitas dan biodegradabilitas
dalam tubuh [224]. Selain itu, karena aktivitas biologisnya yang menarik (antijamur, antibakteri,
antitumor, imunoadjuvant, antitrombogenik, agen antikolesteremik) dan bioadhesivitas (terutama
kitosan dan turunannya [225]), mereka banyak digunakan sebagai promotor penyerapan dan agen
penghidrasi, serta seperti untuk produksi film dan penyembuhan luka [1-4,226]. Kitin dan kitosan
yang lebih mudah dapat diproses, tergantung pada aplikasi yang diinginkan, menjadi konformasi
yang berbeda seperti serat, bubuk, film, spons, manik-manik, larutan, gel, dan kapsul [171].
Akibatnya, kitosan dapat digunakan secara oral, rute hidung dan mata, untuk penghantaran obat
dalam bentuk implan dan injeksi. Kitin dan kitosan dalam keadaan serat atau film, terutama
digunakan untuk rekayasa jaringan dan perawatan luka [227-229]. Selain itu, efek promotor
penyerapan transmukosa dari kitosan sangat penting untuk pengiriman obat polar melalui hidung
dan oral untuk mengatur peptida dan protein dan untuk pengiriman vaksin [230,231]. Kitosan
kationik dapat mempengaruhi pengangkutan ion melalui interaksi dengan permukaan sel
(menginduksi gangguan lapisan ganda fosfolipid membran). Kitin juga digunakan sebagai eksipien
dan pembawa obat dalam bentuk film, gel atau bubuk untuk aplikasi yang melibatkan
mukoadhesivitas [52]. Sebenarnya, perkembangan utama yang menjanjikan ditujukan untuk bidang
farmasi dan biomedis [232–245].
Aplikasi kitin kurang berkembang dibandingkan dengan kitosan karena ketidaklarutannya yang besar dan
kesulitan dalam pemrosesan. Oleh karena itu, kitin sangat sering digabungkan dengan kitosan yang sebenarnya
memberikan aplikasi serupa.
Kitin mempercepat penyembuhan luka dalam semprotan, gel, dan kain kasa [246–249]. Ini digunakan sebagai
pendukung obat-obatan atau untuk mengontrol pelepasan obat [238] dengan mempertimbangkan biodegradabilitas,
toksisitas rendah, kelembaman fisiologis, sifat antibakteri, karakter hidrofilik, sifat pembentuk gel, afinitas terhadap
protein dan mukoadhesivitas [250].
Perhatian besar telah diberikan pada bahan komposit yang terbuat dari hidroksiapatit-kitin-kitosan yang
dapat digunakan sebagai bahan pengisi tulang untuk regenerasi jaringan terpandu (perawatan cacat tulang
periodontal). Komposit ini membentuk pasta yang mengeras sendiri [251–261]. Kitin juga digunakan untuk
enzim dan imobilisasi seluruh sel [262] serta untuk rekayasa jaringan [263.264].
Kitosan (satu-satunya zat polikationik pseudo-alami) dan kompleks elektrostatiknya yang dibentuk
dengan polimer sintetik atau alami (sebagai alginat) digunakan sebagai bahan antitrombogenik untuk:
pelepasan terkontrol, enkapsulasi obat, imobilisasi enzim dan sel dan juga sebagai pembawa gen.
Keunggulan bahan berbasis kitosan terkait dengan biodegradabilitas, aktivitas antibakteri, sifat hidrofilik,
serta adanya gugus polar yang mampu membentuk interaksi sekunder dengan polimer lain (-OH dan -NH
2kelompok yang terlibat dalam ikatan hidrogen danNgugus -asetil dalam interaksi hidrofobik).
Tabel 3.Aplikasi utama kitin dan kitosan dalam domain farmasi dan biomedis.
Formulir Aplikasi
Manik-manik Pengiriman obat [266]
Mikrosfer [265] imobilisasi enzim
Kendaraan pengiriman gen [267]
Partikelnano Enkapsulasi obat sensitif [172]
Modifikasi permukaan
Pelapis
Tekstil selesai
Serat Tekstil medis
Jahitan
Serat nano [268] Regenerasi tulang terpandu Scaffold
untuk regenerasi jaringan saraf
Serat bioaktif non-wonen [269] Penyembuhan luka
Perawatan Luka
membran dialisis
Film
Antitumor [270]
Film semi-permeabel untuk pembalut luka [271]
Adsorben untuk farmasi dan alat kesehatan
Bubuk Bedak sarung tangan bedah
imobilisasi enzim
Dressing hemostatik mukosa
Pembalut luka
Spons [272] Pengiriman obat [272]
Jebakan enzim
Kulit buatan [271]
Ortopedi
Objek berbentuk
Lensa kontak
Kosmetik
Agen bakteriostatik
Agen hemostatik
Solusi Antikoagulan
Agen antitumor
Pengiriman gen [267]
Spermisida [245]
Kendaraan pengiriman
Implan, lapisan
Gel
Rekayasa Jaringan Organ
Pembalut luka untuk perawatan basah [271]

Pengencer terkompresi
Tablet Agen disintegrasi

Eksipien [273]
Kapsul Kendaraan pengiriman
Bahan untuk pembalut luka dan rekayasa jaringan penting tetapi masih dalam pengembangan
[274-282]. Perekat baru juga diusulkan [283.284]. Turunan Az-chitosan tidak beracun, cytokompatibel
dan secara mekanis cocok untuk operasi perifer [285]. Film Chitosan, seperti
banyak film berbasis polisakarida lainnya, menunjukkan ketahanan terhadap difusi lemak dan
permeabilitas gas selektif tetapi relatif buruk dalam hal ketahanan terhadap transmisi air dan uap air.
Perilaku ini diamati karena karakter hidrofiliknya yang menyebabkan interaksi yang tinggi dengan
molekul air [173]. Untuk mengatasi masalah ini, pencampuran polimer atau biokomposit dan sistem
multilayer digunakan untuk pembuatan pelapis bioaktif dan stabil berbasis kitosan.
Mukoadhesivitas kitosan dan turunan kationiknya diketahui dan terbukti meningkatkan adsorpsi obat
terutama pada pH netral.N-trimetil kitosan klorida berinteraksi dengan membran sel bermuatan negatif
[286].N-lauryl-carboxymethylchitosan menjadi polimer amfifilik membentuk taksol pelarut misel yang
menjadi lebih efisien. Jenis turunan kitosan ini aman dalam hal toksisitas membran dan dapat berguna
sebagai pembawa obat kanker hidrofobik [287,288]. Kitosan atau turunannya digunakan untuk transfeksi
gen. Itu ditunjukkan untukNkitosan teralkilasi bahwa efisiensi transfeksi meningkat pada pemanjangan
rantai samping alkil hingga delapan karbon dalam rantai samping [289]. Kitosan kuaterner juga
digunakan untuk tujuan yang sama [290]. Mikrosfer kitosan (dan turunannya) berpori disiapkan untuk
mengirimkan antigen dengan cara yang terkontrol [291]. Jenis partikel ini dimuat dengan vaksin virus
penyakit Newcastle dan diujiin vitrodanin vivo[291.292].
Aplikasi yang menarik dari semen kitosan-kalsium fosfat ditemukan. Kitosan atau kitosan
gliserofosfat dicampur dengan kalsium fosfat dan asam sitrat dan sistem self-hardening injeksi
yang menarik untuk indikasi perbaikan atau pengisian tulang terbentuk [253-255].
Pada akhirnya, beberapa contoh aplikasi untuk pengiriman obat disebutkan [265,293-296]. Kitosan
dapat diproses lebih mudah daripada kitin dalam berbagai bentuk: dalam spons, kapsul atau partikel
nano tergantung pada sistem yang diuji dan tujuan pemberiannya.
6. Kesimpulan
Dalam ulasan ini dijelaskan karakteristik kitin dan kitosan. Ini diikuti dengan diskusi tentang
solubilisasi yang diperlukan untuk memproses polisakarida untuk mendapatkan bahan baru.
Kemampuan pembentukan serat dan filmnya diakui berdasarkan pembentukan jaringan ikatan-H dalam
keadaan padat yang mungkin berguna untuk aplikasi potensial baru.
Namun, aplikasi yang paling penting berasal dari sifat hidrofilik dan sifat antimikrobanya,
terutama yang diinginkan untuk produksi biomaterial baru.
Kitosan dibandingkan dengan kitin larut dalam media asam, yang diterapkan untuk perbaikan metode
pengolahan. Faktanya, kitosan dapat dengan mudah diproses sebagai serat, film, spons, bead, gel atau larutan.
Selain itu, muatan kationiknya memberikan kemungkinan untuk membentuk kompleks elektrostatik dan/atau
struktur berlapis banyak. Kehadiran -NH bebas2kelompok di sepanjang rantai kitin dan kitosan memungkinkan
untuk melakukan modifikasi spesifik (dilakukan pada posisi C-2 unit D-glukosamin) dalam kondisi yang cukup
ringan (bahkan dalam kondisi berair dengan kitosan). Selanjutnya, kitin dan kitosan dapat dicampur dengan
polimer sintetik atau alami (protein, DNA, alginat, hyaluronan,dll.).
Terima kasih
Para penulis ingin berterima kasih kepada Anna Wolnik atas kontribusinya yang berharga untuk
memperbaiki bahasa Inggris naskah ini.
Kontribusi Penulis
Pekerjaan ini dilakukan dengan kerja sama yang kuat antara kedua rekan penulis.
Konflik kepentingan
Para penulis menyatakan tidak ada konflik kepentingan.
Referensi
1. Rinaudo, M. Kitin dan kitosan: Sifat dan aplikasinya.Prog. Polim. Sains.2006,31, 603–632.
2. Rinaudo, M. Sifat utama dan aplikasi terkini beberapa polisakarida sebagai biomaterial, Polim.
Int.2008,57, 397–430.
3. Rinaudo, M. Sifat fisik kitosan dan turunannya dalam keadaan sol dan gel. DiSistem Berbasis
Kitosan untuk Biofarmasi: Pengiriman, Penargetan, dan Terapi Polimer; Sarmento, B., das
Neves, J., Eds.; John Wiley & Sons: Chichester, Inggris, 2012; hlm. 23–44.
4. Rinaudo, M. Bahan berbahan dasar kitin dan kitosan. DiPlastik Berbasis Bio: Bahan dan
Aplikasi; Kabasci, S., Ed.; John Wiley & Sons: Chichester, Inggris, 2014; hlm. 63–80.
5. Rudal, KM; Kenchington, W. Sistem kitin.Biol. Putaran.1973,40, 597–636.
6. Blackwell, J.Chitin. DiBiopolimer; Walton, AG, Blackwell, J., Eds.; Pers Akademik: New York,
NY, AS, 1973; hlm. 474–489.
7. Persson, JE; Domard, A.; Chanzy, H. Kristal tunggal a-kitin.Int. J.Biol. Makromol.1990, 13,
221–224.
8. Helmbert, W.; Sugiyama, J. Mikroskop elektron beresolusi tinggi pada kristal tunggal selulosa II dan α-
kitin.Selulosa1998,5, 113–122.
9. Ruiz-Herrera, J.; Bernyanyilah, VO; van der Woude, WJ; Bartnicki-Garcia, S. perakitan mikrofibril oleh butiran
kitin sintetase.Proses Natl. Acad. Sains. Amerika Serikat1975,72, 2706–2710.
10. Bartnicki-Garcia, S.; Persson, J.; Chanzy, H. Mikroskop elektron dan studi difraksi elektron
tentang efek calcofluor dan congo red pada biosintesis kitinin vitro.Lengkungan. Biokimia.
Biofisika.1994,310, 6–15.
11. Sakamoto, J.; Sugiyama, J.; Kimura, S.; Imai, T.; Itoh, T.; Watanabe, T.; Kobayashi, S.
Sferulit kitin buatan terdiri dari pita kristal tunggal α-kitin melalui polimerisasi
enzimatik.Makromolekul2000,33, 4155–4160.
12. Rudall, KM Kitin dan hubungannya dengan molekul lain. J. Polim. Sains. Bagian C1969,28, 83–
102.
13. Blackwell, J.; Parker, KD; Rudall, KM Chitin dalam tabung pogonophore.J.Mar.Biol. Asosiasi Inggris 1965
,45, 659–661.
14. Gaill, F.; Persson, J.; Sugiyama, P.; Vuong, R.; Chanzy, H. Sistem kitin dalam tabung cacing lubang
hidrotermal laut dalam. J. Struktur. Biol.1992,109, 116–128.
15. Kurita, K.; Tomita, K.; Ishi, S.; Nishimura, SI.; Shimoda, K. β-kitin sebagai bahan awal yang nyaman
untuk asetolisis untuk persiapan yang efisienN-acetylchitooligosaccharides.J. Polim. Sains. Sebuah
Polim. kimia1993,31, 2393–2395.
16. Horst, MN; Pejalan, AN; Klar, E. Jalur sintesis kitin krustasea. DiIntegumen Crustacea:
Morfologi dan Biokimia; Horst, MN, Freeman, JA, Eds.; CRC: Boca Raton, FL, AS, 1993;
hlm. 113–149.
17. Tidak, HK; Hur, EY Kontrol pembentukan buih dengan antibusa selama demineralisasi cangkang
krustasea dalam pembuatan kitin.J.Agri. Makanan. kimia1998,46, 3844–3846.
18. Percot, A.; Viton, C.; Domard, A. Karakterisasi deproteinisasi kulit udang.
Biomakromolekul2003,4, 1380–1385.
19. Johnson, EL; Peniston, QP Pemanfaatan limbah kerang untuk pembuatan kitin dan
kitosan. DiKimia & Biokimia Produk Pangan Laut; Martin, RE, Flick, GJ, Hebard, CE,
Ward, DR, Eds.; AVI Publishing Co.: Westport, CT, USA, 1982; Bab 19, hal. 415.
20. Shahidi, F.; Synowiecki, J. Isolasi dan karakterisasi nutrisi dan produk bernilai tambah dari
kepiting salju(Chifroeleceles opilio)dan udang(Panda- 111sb orealis)buangan pengolahan.
J.Agri. Makanan Kimia.1991,39, 1527–1532.
21. Tolaimate, A.; Desbrieres, J.; Rhazi, M.; Alagui, A. Kontribusi dalam pembuatan kitin dan
kitosan dengan sifat fisika-kimia yang terkontrol. Polimer2003,44, 7939–7952.
22. Muzzarelli, RAA; Tanfani, F.; Emanuelli, M.; Gentile, S. Khelasi ion tembaga oleh membran
kitosan [Callinectes sapidus, cangkang kepiting biru].J.Appl. Biokimia.1980,2, 380–389.
23. Hackman, RH Studi tentang kitin. I. Degradasi enzimatik kitin dan ester kitin.Aust. J.Biol.
Sains.1954,7, 168–178.
24. Hakman, RH; Goldberg, M. Studi hamburan cahaya dan spektrofotometri inframerah dari
turunan kitin dan kitin.Karbohidrat. Res.1974,38, 35–45.
25. Anderson, GG; de Pablo, N.; Romo, C. Krill Antartika (Euphausia superba) sebagai sumber kitin
dan kitosan. DiProsiding Konferensi Internasional Pertama tentang Chitin dan Chitosan;
Muzzarelli, RAA, Priser, ER, Eds.; Program Mit Sea Grant: Cambridge, MA, AS, 1978; hlm.54–63.
26. Horowitz, ST; Roseman, S.; Blumental, HJ Persiapan oligosakarida glukosamin. 1.

Pemisahan.Selai. kimia Soc.1957,79, 5046–5049.
27. Synowiecki, J.; Sikorski, ZE; Naczk, M. Imobilisasi invertase pada kitin krill.Bioteknologi.
Bioeng.1981,23, 231–233.
28. Asuh, AB; Webber, JM Kitin.Lanjut Karbohidrat. kimia1960,15, 371–393.
29. Austin, Humas; Air garam, CJ; Puri, JE; Zikakis, JP Chitin: Aspek baru penelitian.Sains1981, 212,
749–753.
30. Air Garam, CJ; Austin, PR Variabilitas kitin dengan spesies dan metode preparasi.Komp.
Biokimia. Fisik.1981,69B, 283–286.
31. Peniston, QP; Lohnson, Proses EL untuk Demineralisasi Cangkang Crustacea.Paten AS
4.066.735, 3 Januari 1978.
32. Shimahara, K.; Ohkouchi, K.; Ikeda, M.InKimia Kitin; Roberts, GAF, Ed.; Macmillan Press:
London, Inggris, 1992; p. 56.
33. Okafor, N. Isolasi kitin dari cangkang sotong, Sepia oficirralis L. Biochim. Biofisika. Acta
1965,101, 193–200.
34. Truong, T.; Hausler, R.; Monette, F.; Niquette, P. Valorisasi limbah industri perikanan untuk
transformasi kitosan dengan metode hidrotermokimia.Pendeta Sci. Eau2007,20, 253–262.
35. Marquis-Duval, FO Isolation and Valorisation des constituants de la carapace de la crevette

nordique. Ph.D. Disertasi, Universitas Laval, Quebec, Kanada, 2008.
36. Madhavan, P.; Nair, KGR Pemanfaatan limbah udang-isolasi kitin dan konversinya menjadi
kitosan.Ikan. Technol.1974,11, 50–53.
37. Moorjani, MN; Achutha, V.; Khasim, DI Parameter yang mempengaruhi viskositas kitosan dari limbah
udang.J. Ilmu Pangan. Technol.1975,12, 187–189.
38. Mima, S.; Miya, M.; Iwamoto, R.; Yoshikawa, S. Kitosan yang sangat terdeasetilasi dan sifat-sifatnya.
J.Appl. Polim. Sains.1983,28, 1909–1917.
39. Broussignac, P. Un haut polymère naturel peu connu dans l'industrie, Le chitosane.Chim. Ind.
Genie Chim.1968,99, 1241–1247.
40. BeMiller, JN; Whistler, RL Alkaline degradasi gula amino.J.Org. kimia1963,27, 1161–1164.
41. Kurita, K.; Tomita, K.; Tada, T.; Ishii, S.; Nishimura, SI; Shimoda, K. Squid kitin sebagai sumber
kitin alternatif potensial: Perilaku deasetilasi dan sifat karakteristik.J. Polim. Sains. Pol. kimia
1993,31, 485–491.
42. Brzeski, MM Konsep isolasi kitin kitosan dari Krill Antartika(Euphausia superba) kerang
menyalasebuahskala teknis. DiProsiding Konferensi Internasional Kedua Chitin dan
Chitosan; Hirano, S., Tokura, S., Eds.; Masyarakat Chitin dan Chitosan Jepang: Sapporo,
Jepang, 1982; hlm. 15–29.
43. Blumberg, R.; Southall, CL; van Rensburg, NJ; Volckman, OB produk ikan Afrika Selatan. XXXII
—Lobster karang: Kajian produksi kitin dari limbah pengolahan.J.Sci. Pertanian Pangan.
1951,2, 571–576.
44. Tidak, HK; Meyers, SP; Lee, KS Isolasi dan karakterisasi kitin dari limbah cangkang udang karang.
J.Agri. Makanan Kimia.1989,37, 575–579.
45. Wu, ACM; Bough, WA Studi variabel dalam proses pembuatan kitosan dalam kaitannya
dengan distribusi berat molekul, karakteristik kimia dan efektivitas pengolahan limbah.
Dalam Prosiding Konferensi Internasional Pertama Chitin/Chitosan, Boston, AS, 11–13 April
1977; Muzzarelli, RAA, Pariser, ER, Eds.; Program Hibah Laut MIT, Institut Teknologi
Massachusetts: Cambridge, MA, AS, 1978; hlm.88–102.
46. Bough, WA; Salter, WL; Wu, ACM; Perkins, BE Pengaruh variabel manufaktur terhadap
karakteristik dan efektivitas produk kitosan 1. Komposisi kimia, viskositas, dan
distribusi berat molekul produk kitosan.Bioteknologi. Bioeng.1978,20, 1931–1943.
47. Sluyanarayana Rao, SV; Yashodha, KP; Mahendrakar, NS Puttarajappa. Deasetilasi kitin
pada suhu rendah dengan teknik impregnasi alkali baru.India J. Technol.1987,25, 194–
196.
48. Tolaimate, A. Exploration des gisements chitineux de la faune marine marocaine. Prosedur
ekstraksi chitines fortement acétylées. Persiapan chitosanes à caractéristiques contrôlées.
Ph.D. Disertasi, Cadi Ayyad University, Marrakech, Maroc, 2000.
49. Khanafari, A.; Marandi, R.; Sanatei, S. Pemulihan kitin dan kitosan dari limbah udang dengan metode
kimia dan mikroba.Iran. J.Lingkungan. Ilmu Kesehatan. Eng.2008,5, 1–24.
50. Bustos, RO; Healy, MG Mikroba deproteinasi limbah cangkang udang. DiProsiding
Simposium Internasional Kedua tentang Bioteknologi Lingkungan; Bioteknologi' 94:
Brighton, Inggris, 1994; hlm. 15–25.
51. Arbia, W.; Arbia, L.; Adour, L.; Amrane, A. Ekstraksi kitin dari cangkang krustasea menggunakan metode
biologis—Sebuah tinjauan.Teknologi Pangan. Biotek.2013,51, 12–25.
52. Gortari, MC; Jam, Proses bioteknologi RA untuk pemulihan kitin dari limbah krustasea:
Tinjauan mini.Elektron. J. Bioteknologi.2013,16, 14–14.
53. Guerrero Legarreta, I.; Zakaria, Z.; Hall, GM Fermentasi laktat limbah udang: Perbandingan kultur
starter komersial dan terisolasi. DiKemajuan dalam Ilmu Kitin; Domard, A., Jeuniaux, C.,
Muzzarelli, R., Roberts, G., Eds.; Jacques Andre penerbit: Lyon, Prancis, 1996; Volume I, hlm.
399–406.
54. Cira, LA; Huerta, S.; Guerrero, I.; Rosas, R.; Shirai, K. Peningkatan fermentasi asam laktat limbah
udang dalam reaktor kolom packed-bed untuk pemulihan kitin. DiKemajuan dalam Ilmu Kitin;
Peter, MG, Domard, A., Muzzarelli, RAA, Eds.; Universitas Potsdam: Postdam, Jerman, 2000;
Volume IV, hlm. 2–27.
55. Rao, MB; Tanksale, AM; Ghatge, MS; Deshpande, VV Aspek molekuler dan bioteknologi
protease mikroba.Mikrobiol. Mol. Biol. Putaran.1998,62, 597–635.
56. Synowiecki, J.; Al-Khateeb, NAAQ Pemulihan hidrolisat protein selama isolasi enzimatik
kitin dari limbah pengolahan crangon udang Crangon.Makanan Kimia.2000,68, 147–
152.
57. Gildberg, A.; Stenberg, E. Sebuah proses baru untuk pemanfaatan lanjutan limbah udang.Proses
Biokimia.2001,36, 809–812.
58. Manni, L.; Ghorbel-Bellaaj, O.; Jellouli, K.; Younes, saya.; Nasri, M. Ekstraksi dan karakterisasi
hidrolisat kitin, kitosan, dan protein dari limbah udang dengan perlakuan protease kasar dari
Bacillus cereus SV1.Aplikasi Biokimia. Bioteknologi.2010,162, 345–357.
59. Younes, I.; Ghorbel-Bellaaj, O.; Nasri, R.; Chaabouni, M.; Rinaudo, M.; Nasri, M. Preparasi kitin dan
kitosan dari kulit udang menggunakan deproteinisasi enzimatik yang dioptimalkan.Proses Biokimia.
2012,47, 2032–2039.
60. Mukhin, VA; Novikov, VY Hidrolisis enzimatik protein dari krustasea Laut Barents.Aplikasi
Biokimia. Mikro+2001,37, 538–542.
61. Younes, I.; Nasri, R.; Bkahiria, I.; Jellouli, K.; Nasri, M. Protease baru yang diekstraksi dari ikan
kalajengking merah (Scorpaena skrofa) jeroan: Karakterisasi dan aplikasi sebagai aditif deterjen
dan untuk deproteinisasi limbah udang.Makanan Bioprod. Proses.2014, doi:10.1016/
j.fbp.2014.06.003.
62. Kaur, S.; Dhillon, GS Kecenderungan terbaru dalam ekstraksi biologis kitin dari limbah cangkang laut:
Tinjauan.Kritik. Pendeta Biotechnol.2015,35, 44–61.
63. Prameela, K.; Murali Mohan, C.; Smitha, PV; Hemablatha, KPJ Bioremediasi biowaste udang dengan
menggunakan probiotik alami untuk produksi kitin dan karotenoid merupakan metode alternatif dari
metode bahan kimia berbahaya.Int. J.Appl. Biol. Farmasi. Technol.2010,1, 903–910.
64.Rao, MS; Munoz, J.; Stevens, WF Faktor kritis dalam produksi kitin melalui fermentasi biowaste
udang.Aplikasi Mikrobiol. Bioteknologi.2000,54, 808–813.
65. Oh, KT; Kim, YJ; Nguyen, VN; Jung, WJ; Park, RD Demineralisasi limbah cangkang rajungan oleh
Pseudomonas aeruginosa F722.Proses Biokimia.2007,42, 1069–1074.
66. Choorit, W.; Patthanamanee, W.; Manurakchinakorn, S. Penggunaan metode permukaan respon untuk
penentuan efisiensi demineralisasi pada cangkang udang fermentasi.Bioresour. Technol. 2008,99,
6168–6173.
67. Yang, JK; Shih, IL; Tzeng, YM; Wang, SL Produksi dan pemurnian protease dari a Bacillus
subtilisyang dapat mendeproteinisasi limbah krustasea.Mikroba Enzim. Technol.2000,26,
406–413.
68. Sini, TK; Santhosh, S.; Mathew, PT Kajian pembuatan kitin dan kitosan dari kulit udang dengan
menggunakan fermentasi Bacillus subtilis.Karbohidrat. Res.2007,342, 2423–2429.
69. Ghorbel-Bellaaj, O.; Younes, saya.; Maalej, H.; Haji, S.; Nasri, M. Ekstraksi kitin dari limbah kulit udang
menggunakan bakteri Bacillus.Int. J.Biol. Makromol.2012,51, 1196–1201.
70. Ghorbel-Bellaaj, O.; Jellouli, K.; Younes, saya.; Manni, L.; Ouled Salem, M.; Nasri, M. Metalloprotease stabil
pelarut yang diproduksi oleh Pseudomonas aeruginosa A2 yang ditanam pada limbah kulit udang dan
aplikasinya dalam ekstraksi kitin.Aplikasi Biokimia. Bioteknologi.2011,164, 410–425.
71. Wang, SL; Chio, SH Deproteinasi kulit udang dan kepiting dengan protease
Pseudomonas aeruginosa K-1enzim. Mikroba. Technol.1998,22, 629–633.
72. Mahmud, NS; Ghaly, AE; Arab, F. Pendekatan tidak konvensional untuk demineralisasi cangkang
krustasea yang dideproteinisasi untuk produksi kitin.Saya. J. Biochem. Bioteknologi.2007,3, 1–9.
73. Jung, WJ; Kuk, JH; Kim, KY; Park, RD Demineralisasi limbah cangkang rajungan dengan fermentasi
asam laktat.Aplikasi Mikrobiol. Bioteknologi.2005,67, 851–854.
74. Teng, WL; Khor, E.; Tan, TK; Lim, LY; Tan, SC Produksi kitin bersamaan dari kulit udang
dan jamur.Karbohidrat. Res.2001,332, 305–316.
75. Atkins, EDT Konformasi dalam polisakarida dan karbohidrat kompleks.J. Biosci.1985,8, 375–
387.
76. Gonell, HW Roëtgenographische mempelajari kitin.Z. Physiol. kimia1926,152, 18–30.
77. Clark, GL; Smith, studi rontgen AF kitin, kitosan, dan turunannya.J.Fis. kimia1936, 40,
863–879.
78. Gardner, KH; Blackwell, J. Penyempurnaan struktur --kitin.Biopolimer1975,14, 1581–
1595.
79. Minke, R.; Blackwell, J. Struktur --kitin.J.Mol. Biol.1978,120, 167–181.
80. Darmon, SE; Rudall, KM Infra-merah dan X-ray studi kitin.Cakram. Faraday. Soc.1950,9, 251–
260.
81. Pearson, FG; Marchessault, kanan; Liang, CY Spektrum inframerah polisakarida kristal. V.kitin
. J. Polim. Sains.1960,13, 101–116.
82. Falk, M.; Smith, Dirjen; McLachlan, J.; McInnes, AG Studi tentang kitin (b-(1–4)-linked 2-
acetamido-2-deoxy-D-glukan) dari diatom Thalassiosira fluviatilis Hustedt. II. Studi
resonansi magnetik proton, inframerah dan sinar-X.Bisa. J.Chem.1966,44, 2269–2281.
83. Galat, A.; Koput, J.; Popowicz, J. Analisis pita amida inframerah kitin.Acta Biochim. Pol. 1979,
26, 303–308.
84. Iwamoto, R.; Miya, M.; Mima, S. Spektrum polarisasi getaran kitin tipe-α. DiChitin dan Kitosan
, Prosiding Konferensi Internasional Kedua Chitin dan Chitosan, Sapporo, Jepang, 12–14 Juli
1982; Hirano, S., Tokura, S., Eds.; Masyarakat Chitin dan Chitosan Jepang: Tottori, Jepang,
1982; hlm. 82–86.
85. Focher, B.; Naggi, A.; Torri, G.; Cosani, A.; Terbojevich, M. Perbedaan struktural antara
polimorf kitin dan endapannya dari bukti solusi dari spektroskopi CP-MAS 13CNMR, FT-
IR dan FT-Raman.Karbohidrat. Polim.1992,17, 97–102.
86. Brugnerotto, J.; Lizardi, J.; Goycolea, FM; Arguelles-Monal, W.; Desbrieres, J.; Rinaudo, M.
Investigasi inframerah dalam kaitannya dengan karakterisasi kitin dan kitosan.Polimer2001,42,
3569–3580.
87. Saito, H.; Tabeta, R.; Hirano, S. Konformasi kitin danN-asil kitosan dalam keadaan padat seperti yang
diungkapkan oleh spektroskopi NMR polarisasi silang/magic angle spinning (CP/MAS) 13C.kimia
Lett.1981,10, 1479–1482.
88. Penyamak, SF; Chanzy, H.; Vincendon, M.; Roux, JC; Gaill, F. Studi resonansi magnetik nuklir solid-state
karbon-13 resolusi tinggi tentang kitin.Makromolekul1990,23, 3576–3583.
89. Kono, H. Investigasi NMR pemintalan sudut ajaib dua dimensi dari kitin alami: Precise1
Tangan13Penugasan resonansi C dari -- dan --kitin.Biopolimer2004,75, 255–263.
90. Heux, L.; Brugnerotto, J.; Desbrieres, J.; Versali, MF; Rinaudo, M. NMR keadaan padat
untuk penentuan derajat asetilasi kitin dan kitosan.Biomakromolekul2000,1, 746–751.
91. Poirier, M.; Charlet, fraksinasi dan karakterisasi G. Kitin dalam N,N-dimethylacetamide/
sistem pelarut litium klorida.Karbohidrat. Polim.2002,50, 363–370.
92. Terbojevich, M.; Carraro, C.; Cosani, A. Studi solusi kitin-lithium klorida-N, Nsistem
-dimetilasetamida.Karbohidrat. Res.1988,180, 73–86.
93. Pillai, CKS; Paul, W.; Sharma, CP Kitin dan polimer kitosan: Kimia, kelarutan dan
pembentukan serat.Prog. Polim. Sains.2009,34, 641–678.
94. Roberts, GAF Struktur kitin dan kitosan. DiKimia Kitin; Roberts, GAE, Ed.; Palgrave
Macmillan: London, Inggris, 1992; hlm.85–91.
95. Kafetzopoulos, D.; Martinou, A.; Bouriotis, V. Biokonversi kitin menjadi kitosan: Pemurnian dan
karakterisasi kitin deasetilase dari Mucor rouxii.Proses Natl. Acad. Sains. Amerika Serikat1993, 90,
2564–2568.
96. Aiba, SI PenyusunanN-acetylchitooligosaccharides dengan hidrolisis kitosan dengan kitinase
diikuti olehN-asetilasi.Karbohidrat. Res.1994,265, 323–328.
97. Ilyina, AV; Tatarinova, NY; Varlamov, VP Pembuatan kitosan dengan berat molekul rendah
menggunakan kompleks kitinolitik dari Streptomyces kurssanovii.Proses Biokimia.1999,34,
875–878.
98. Tokuyasu, K.; Mitsutomi, M.; Yamaguchi, I.; Hayashi, K.; Mori, Y. Pengakuan
chitooligosaccharides dan merekaNgugus -asetil oleh subsitus diduga kitin deasetilase dari
deuteromycete, Colletotrichum lindemuthianum.Biokimia2000,39, 8837–8843.
99. Kurita, K.; Sannan, T.; Iwakura, Y. Studi tentang kitin, 4: Bukti pembentukan blok dan
kopolimer acakN-asetil-D-glukosamin danD-glukosamin dengan hidrolisis hetero dan
homogen.Makromol. kimia.1977,178, 3197–3202.
100. Tidak, HK; Meyers, SP Persiapan dan karakterisasi kitin dan kitosan—Sebuah tinjauan.
J.Aquat. Produk Makanan Technol.1995,2, 27–52.
101. Haji, S.; Younes, saya.; Ghorbel-Bellaaj, O.; Haji, R.; Rinaudo, M.; Nasri, M.; Jellouli, K. Perbedaan
struktural antara kitin dan kitosan yang diekstraksi dari tiga sumber laut yang berbeda.
Int. J.Biol. Makromol.2014,65, 298–306.
102. Chang, KLB; Tsai, G.; Lee, J.; Fu, WR HeterogenN-deasetilasi kitin dalam larutan basa.
Karbohidrat. Res.1997,303, 327–332.
103. Sannan, T.; Kurita, K.; Iwakura, Y. Studi tentang kitin, 2. Pengaruh deasetilasi pada kelarutan.
Makromol. kimia.1976,177, 3589–3600.
104. Rinaudo M.; Domard, A. Sifat larutan kitosan. DiChitin dan Kitosan; Skjak-Bræk,
G., Anthonsen, T., Stanford, P., Eds.; Penerbit Akademik Kluwer: Dordrecht, Belanda, 1989;
hlm. 71–86.
105. Aiba, SI Kajian tentang kitosan: 3. bukti adanya struktur kopolimer acak dan blok secara
parsialN-kitosan asetat.Int. J.Biol. Makromol.1991,13, 40–44.
106. Berger, J.; Reist, M.; Chenit, A.; Felt-Baeyens, O.; Mayer, JM; Gurny, R. Erratum ke
hidrogel kitosan Pseudo-thermosetting untuk aplikasi biomedis.Int. J. Farmasi.2005,28,
197–206.
107. Rong, HC; Hwa, HD Pengaruh berat molekul kitosan dengan derajat deasetilasi yang
sama terhadap sifat termal, mekanik, dan permeabilitas membran yang dibuat.
Karbohidrat. Polim.1996,29, 353–358.
108. Li, Q.; Dunn, ET; Nenek, EW; Goosen, MFA Aplikasi dan sifat kitosan.
J. Bioact. Kompat. Pol.1992,7, 370–397.
109. Rege, Humas; Block, LH Pemrosesan kitosan: Pengaruh parameter proses selama hidrolisis
asam dan basa dan pengaruh urutan pemrosesan pada sifat kitosan yang dihasilkan.
Karbohidrat. Res.1999,321, 235–245.
110. Tolaimate, A.; Desbrieres, J.; Rhazi, M.; Alagui, A.; Vincendon, M.; Vottero, P. Tentang
pengaruh proses deasetilasi terhadap sifat fisikokimia kitosan dari kitin cumi-cumi.
Polimer2000,41, 2463–2469.
111. Tsaih, ML; Chen, RH Pengaruh waktu dan suhu reaksi selama deasetilasi alkali heterogen
terhadap derajat deasetilasi dan berat molekul kitosan yang dihasilkan.J.Appl. Polim. Sains.
2003,88, 2917–2923.
112. Sannan, T.; Kurita, K.; Iwakura, Y. Studi tentang kitin. V. Kinetika reaksi deasetilasi.
Polim. J.1977,9, 649–651.
113.Weska, RF; Moura, JM; Batista, LM; Rizzi, J.; Pinto, LAA Optimalisasi deasetilasi dalam produksi
kitosan dari limbah udang: Penggunaan metodologi permukaan respon.J. Makanan Eng.2007,
80, 749–753.
114. Hwang, KT; Jung, ST; Lee, GD; Chinnan, MS; Taman, YS; Park, HJ Mengontrol berat molekul dan
derajat deasetilasi kitosan dengan metodologi permukaan respon.J.Agr. Makanan Kimia.2002,
50, 1876–1882.
115. Younes, I.; Ghorbel-Bellaaj, O.; Chaabouni, M.; Rinaudo, M.; Souard, F.; Vanhaverbeke, C.; Nasri, M.
Penggunaan desain faktorial fraksional untuk mempelajari pengaruh faktor eksperimental pada
deasetilasi kitin.Int. J.Biol. Makromol.2014,70, 385–390.
116. Le Dung, P.; Milas, M.; Rinaudo, M.; Desbrières, J. Turunan yang larut dalam air diperoleh
dengan modifikasi kimia terkontrol dari kitosan.Karbohidrat. Polim.1994,24, 209–214.
117. Tsigos, I.; Martinou, A.; Kafetzopoulos, D.; Bouriotis, V. Chitin deacetylases: Alat baru dan serbaguna
dalam bioteknologi.Tren Bioteknol.2000,18, 305–312.
118. Araki, Y.; itu. E. Jalur pembentukan kitosan di Mucor rouxii: Deasetilasi enzimatik kitin.
eur. J. Biochem.1975,189, 249–253.
119. Martinou, A.; Kafetzopoulos, D.; Bouriotis, V. Isolasi chitin deacetylase dari Mucor rouxii dengan
kromatografi immunoaffinity.J. Kromatografi.1993,644, 35–41.
120.Gao, XD; Katsumoto, T.; Onodera, K. Pemurnian dan karakterisasi chitin deacetylase dari
Absidia coerulea.J. Biochem.1995,117, 257–263.
121. Alfonso, C.; Nuero, OM; Santamaria, F.; Reyes, F. Pemurnian chitin deacetylase yang tahan panas
dari Aspergillus nidulans dan perannya dalam degradasi dinding sel.Kur. Mikrobiol. 1995,30,
49–54.
122. Tsigos, I.; Bouriotis, V. Pemurnian dan karakterisasi chitin deacetylase dari
Colletotrichum lindemuthianum.J.Biol. kimia1995,270, 26286–26291.
123. Tokuyasu, K.; Kameyama, MO; Hiyashi, K. Pemurnian dan karakterisasi kitin deasetilase
ekstraseluler dari Colletotrichum lindemuthianum.Biosci. Bioteknologi. Biokimia.1996,60, 1598–
1603.
124. Sundara, R.G.;Aruchami, M.; Gowri, N. Deasetilasi alami kitin menjadi kitosan di kutikula
perut ratu physogastrik Macrotermes estherae. Dalam Prosiding Konferensi Internasional
Kedua Chitin/Chitosan, Sapporo, Jepang, 12–14 Juli 1982; Tokura S., Hirano,
S., Eds.; Soc. Jepang Kitin: Tottori, Jepang, 1982.
125. Martinou, A.; Kafetzopoulos, D.; Bouriotis, V. Deasetilasi kitin dengan cara enzimatik:
Pemantauan proses deasetilasi.Karbohidrat. Res.1995,273, 235–242.
126. Martinou, A.; Bouriotis, V.; Stokke, BT; Vårum, KM Cara kerja chitin deacetylase dari M.
rouxii secara parsialN-kitosan asetat.Karbohidrat. Res.1998,311, 71–78.
127. Filippova, OE; Volkov, EV; Sitnikova, NL; Khokhlov, A.; Desbrières, J.; Rinaudo, M. Dua
jenis agregat hidrofobik dalam larutan encer kitosan dan turunan hidrofobiknya.
128. Filippova, OE; Korchagina, EV; Volkov, EV; Smirnov, VA; Khokhlov, AR; Rinaudo, M. Agregasi
beberapa turunan kitin yang larut dalam air dalam larutan berair: Peran derajat asetilasi
dan efek pemutus ikatan hidrogen.Karbohidrat. Polim.2012,87, 687–694.
129. Maghami, GG; Roberts, GAF Evaluasi konstanta viskometri untuk kitosan.Makromol. kimia.
1988,189, 195–200.
130. Auzely, R.; Rinaudo, M. Modifikasi kimia terkontrol karakterisasi kitosan dan investigasi
sifat asli.Makromol. Biosci.2003,3, 562–565.
131. Rinaudo, M.; le Dung. P.; Milas, M. Metode sintesis karboksimetil kitosan yang baru dan
sederhana, InKemajuan dalam Chitin dan Chitosan; Brine, CJ, Sanford, PA, Zitakis, JP, Eds.;
Elsevier: London, Inggris, 1992; hlm.516–525.
132. Desbrieres, J.; Martinez, C.; Rinaudo, M. Turunan hidrofobik kitosan: Karakterisasi dan
perilaku reologi.Int. J.Biol. Makromol.1996,19, 21–28.
133. Rinaudo, M.; Auzely, R.; Vallin, C.; Mullagaliev, I. Interaksi spesifik dalam sistem kitosan yang
dimodifikasi.Biomakromolekul2005,6, 2396–2407.
134. Auzely-Velty, R.; Rinaudo, M. Rakitan supramolekul baru dari kitosan yang dicangkokkan
siklodekstrin melalui kompleksasi spesifik.Makromolekul2002,35, 7955–7962.
135. Recillas, M.; Silva, LL; Peniche, C.; Goycolea, FM; Rinaudo, M.; Argelles-Monal, WM
Perilaku termoresponsif kitosan-g-N- larutan kopolimer isopropilakrilamida.
136. Rinaudo, M. Cara baru untuk mengikat silang kitosan dalam larutan air.eur. Polim. J.2010,46,
1537–1544.
137. Saito, H.; Tabeta, R.; Ogawa, K. Solid-state beresolusi tinggi13Studi C-NMR kitosan dan
garamnya dengan asam: Karakterisasi konformasi polimorf dan struktur heliks dilihat dari
ketergantungan konformasi13C.pergeseran kimiaMakromolekul1987,20, 2424–2430.
138. Raymond, L.; Morin, FG; Marchessault, RH Derajat deasetilasi kitosan menggunakan titrasi
konduktometri dan NMR keadaan padat.Karbohidrat. Res.1993,246, 331–336.
139. Varum, KM; Anthonsen, MW; Grasdalen, H.; Smisrød, O. Penentuan derajat N-asetilasi
dan distribusiNGugus -asetil dalam sebagian kitin N-deasetilasi (kitosan) dengan
spektroskopi nmr medan tinggi.Karbohidrat. Res.1991,211, 17–23.
140. Varum, KM; Anthonsen, MW; Grasdalen, H.; Smisrød, O. 13 studi C-NMR dari urutan
asetilasi pada sebagian kitin N-deasetilasi (kitosan).Karbohidrat. Res.1991,217, 19–27.
141. Rinaudo, M.; Milas, M.; le Dung, P. Karakterisasi kitosan. Pengaruh kekuatan ionik dan
derajat asetilasi pada ekspansi rantai.Int. J.Biol. Makromol.1993,15, 281–285.
142. Brugnerotto, J.; Desbrieres, J.; Roberts, G.; Rinaudo, M. Karakterisasi kitosan dengan
kromatografi eksklusi sterik.Polimer2001,42, 9921–9927.
143. Odijk, T. Tentang ketergantungan kekuatan ionik dari viskositas intrinsik DNA.Biopolimer1979, 18,
3111–3113.
144. Mazeau, K.; Perez, S.; Rinaudo, M. Prediksi pengaruhNKandungan gugus -asetil pada
perpanjangan konformasi rantai kitin dan kitosan.J. Karbohidrat. kimia.2000,19, 1269–1284.
145. Wei, YC; Hudson, SM; Mayer, JM; Kaplan, DL Ikatan silang serat kitosan.
J. Polim. Sains. Bagian A Polim. kimia1992,30, 2187–2193.
146. Wales, ER; Harga, RR Chitosan cross-linking dengan diisosianat yang larut dalam air. 2.
Solvat dan hidrogel.Biomakromolekul2003,4, 1357–1361.
147. Arguelles-Monal, W.; Goycolea, FM; Peniche, C.; Higuera-Ciapara, I. Kajian reologi
sistem gel kimia kitosan/glutaraldehid.Polim. Jaring Gel.1998,6, 429–440.
148. Hirano, S.; Yamaguchi, R.; Fukui, N.; Iwata, M. Gel kitosan oksalat: Konversinya menjadi an Ngel
-asetilkitosan melalui gel kitosan.Karbohidrat. Res.1990,201, 145–149.
149. Yamaguchi, R.; Hirano, S.; Arai, Y.; Ito, T. Garam kitosan gel gelasi kitosan yang dapat dibalik secara
termal.Pertanian. Biol. kimia.1978,42, 1981–1982.
150. Yokoyama, A.; Yamamoto, S.; Kawasaki, T.; Kohgo, T.; Nakasu, M. Pengembangan semen kalsium
fosfat menggunakan kitosan dan asam sitrat untuk bahan pengganti tulang.Biomaterial2002, 23,
1091–1101.
151. Shen, X.; Tong, H.; Jiang, T.; Zhu, Z.; Wan, P.; Hu, J. Homogen kitosan/karbonat apatit/
nanokomposit asam sitrat disiapkan melalui sebuah noveldi tempatpengendapan.Komposisi.
Sains. Technol.2007,67, 2238–2245.
152. Hsieh, SH; Chen, WH; Wei, LL Analisis spektroskopi mekanisme reaksi pengikatan silang
asam polikarboksilat dengan kitosan dan kain katun.Selul. kimia Technol.2003, 37, 359–
369.
153. Desai, KGH; Park, HJ Enkapsulasi vitamin C dalam mikrosfer kitosan ikatan silang tripolifosfat dengan
pengeringan semprot,J. Mikroenkapsulasi.2005,22, 179–192.
154. Quemeneur, F.; Rinaudo, M.; Maret, G.; Pepin-Donat, B. Dekorasi vesikel lipid oleh
polielektrolit: Mekanisme dan struktur. Materi Lembut2010,6, 4471–4481.
155. Rinaudo, M.; Quemeneur, F.; Pepin-Donat, B. Stabilisasi liposom terhadap stres menggunakan
polielektrolit: Mekanisme interaksi, pengaruh pH, berat molekul, dan struktur polielektrolit.Int.
J. Polim. Anal. Karakter.2009,14, 667–677.
156. Bordi, F.; Sennato, S.; Truzzolillo, D. Agregasi liposom yang diinduksi polielektrolit: Fase kluster baru
dengan aplikasi yang menarik.J.Fis. Mengembun. Urusan2009,21, 203102:1–203102:26.
157. Haidar, ZS; Hamdy, RC; Tabrizian, M. Protein melepaskan kinetika untuk nanopartikel
hibrida core-shell berdasarkan perakitan alginat dan kitosan lapis demi lapis pada liposom.
Biomaterial2008,29, 1207–1215.
158. Boddohi, S.; Killingsworth, CE; Kipper, MJ Polyelectrolyte perakitan multilayer sebagai fungsi pH
dan kekuatan ion menggunakan kitosan polisakarida dan heparin.Biomakromolekul 2008,9,
2021–2028.
159. Hillberg, AL; Tabrizian, M. Biorecognition melalui perakitan polielektrolit lapis demi lapis: Di situ
hibridisasi pada sel hidup.Biomakromolekul2006,7, 2742–2750.
160. Majima, T.; Funakosi, T.; Iwasaki, N.; Yamane, ST; Harada, K.; Nonaka, S.; Minami, A.; Nishimura,
SI Alginat dan serat hibrida kompleks kitosan poliion untuk perancah dalam rekayasa jaringan
ligamen dan tendon.J. Ortopedi. Sains.2005,10, 302–307.
161. Iwasaki, N.; Yamane, ST; Majima, T.; Kasahara, Y.; Minami, A.; Harada, K.; Nanaka, S.; Maekawa,
N.; Tamura, H.; Tokura, S.;et al. Kelayakan bahan hibrida polisakarida untuk perancah dalam
rekayasa jaringan tulang rawan: Evaluasi adhesi kondrosit ke serat kompleks poliion yang
dibuat dari alginat dan kitosan.Biomakromolekul2004,5, 828–823.
162. Chung, TW; Yang, J.; Akaike, T.; Cho, KY; Nah, JW; Kim, SI; Cho, CS Persiapan perancah
kitosan alginat / galaktosilasi untuk perlekatan hepatosit.Biomaterial2002,23, 282–283.
163.Lavertu, M.; Methot, S.; Tran-Khanh, N.; Buschmann, MD Transfer gen dengan efisiensi tinggi
menggunakan nanopartikel kitosan/DNA dengan kombinasi spesifik berat molekul dan derajat
deasetilasi.Biomaterial2006,27, 4815–4824.
164. Jean, M.; Smaoui, F.; Lavertu, M.; Methot, S.; Bouhdoud, L.; Buschmann, MD; Merzouki, A.
Formulasi nanopartikel kitosan-plasmid untuk pengiriman IM dan SC dari rekombinan FGF-2
dan PDGF-BB atau pembentukan antibodi.Gen Ada.2009,16, 1097–1110.
165. Alameh, MZ; Jean, M.; Dejesus, D.; Buschmann, MD; Merzouki, A. Metode berbasis kitosanase
untuk isolasi RNA dari sel yang ditransfeksi dengan nanokompleks kitosan/siRNA untuk RT-PCR
real-time dalam pengiriman gen.Int. J. Obat nano2010,5, 473–481.
166. Thibault, M.; Nimesh, S.; Lavertu, M.; Buschmann, M. Perdagangan intraseluler dan kinetika
dekondensasi polipleks kitosan-pDNA.Mol. Ada.2010,18, 1787–1795.
167. Strand, SP; Danielsen, S.; Christensen, MENJADI; Varum, KM Pengaruh struktur kitosan terhadap
pembentukan dan kestabilan kompleks polielektrolit DNA-kitosan.Biomakromolekul 2005,6,
3357–3366.
168. Farkas, V. Dinding sel jamur: Struktur, biosintesis, dan aspek bioteknologinya.Acta
Biotechnol.1990,10, 225–238.
169. Armada, GH; Phaff, HJ Struktur dan metabolisme glukan jamur.Ensiklo. Fisik Tumbuhan. NS 1981
,13B, 416–440.
170. Friedman, M.; Juneja, VK Kajian Aktivitas Antimikroba dan Antioksidatif Kitosan dalam Pangan.J.
Makanan Melindungi.2010,73, 1737–1761.
171. Kardas, I.; Struszczyk, MH; Kucharska, M.; van den Broek, LAM; van Dam, JEG;
Ciechańska, D. Kitin dan kitosan sebagai biopolimer fungsional untuk aplikasi industri.
DiJaringan Keunggulan Polisakarida Eropa (EPNOE). Inisiatif dan Hasil Penelitian;
Narvard. P., Ed.; Springer-Verlag: Wien, Austria, 2012; hlm. 329–374.
172. Alishahi, A.; Aïder, M. Aplikasi kitosan dalam industri makanan laut dan akuakultur: Tinjauan.
Teknologi Bioproses Pangan.2012,5, 817–830.
173. Bordenave, N.; Grelier, S.; Cama, V. Kerentanan air dan kelembaban kitosan dan bahan berbasis
kertas: Hubungan struktur-properti.J.Agri. Makanan Kimia.2007,55, 9479–9488.
174. Franklin, TJ; Salju, GABiokimia Tindakan Antimikroba;edisi ke-3.; Chapman dan Hall: London,
Inggris, 1981; p. 217.
175. Synowiecki, J.; Al-khatteb, Produksi NAA, khasiat dan beberapa aplikasi baru kitin dan
turunannya.Kritik. Pendeta Sci Makanan. Kacang.2003,43, 144-171.
176. Sudarshan, NR; Hoover, Dirjen; Knorr, D. Tindakan antibakteri kitosan.Bioteknologi Pangan.
1992,6, 257–272.
177. Leuba, S.; Stossel, P. Chitosan dan poliamina lainnya: Aktivitas antijamur dan interaksi
dengan membran biologis. DiChitin di Alam dan Teknologi; Muzzarelli, RAA, Jeuniaux, C.,
Gooday, C., Eds.; Pleno Press: New York, NY, AS, 1985; p. 217.
178. Choi, BK; Kim, KY; Yoo, YJ; Oh, SJ; Choi, JH; Kim. CYIn vitroaktivitas antimikroba dari campuran
kitoligosakarida terhadapActinobacillus actinomycetemcomitansdanStreptococcus mutans. Int.
J. Antimikroba. Agen2001,18, 553–557.
179. Eaton, P.; Fernandes, JC; Pereira, E.; Pintado, SAYA; Malaka. FX Atomic force microscopy
mempelajari efek antibakteri kitosan padaEscherichia colidanStaphylococcus aureus.
Ultramikroskopi2008,108, 1128–1134.
180. Chung, YC; Su, YP; Chen, CC; Jia, G.; Wang, HL; Wu, JG; Lin, JG Hubungan antara aktivitas
antibakteri kitosan dan karakteristik permukaan dinding sel.Akta Farmasi. Dosa.2004,
25, 932–936.
181. Jeon, YJ; Taman, PJ; Kim, SK Efek antimikroba chitooligosaccharides yang dihasilkan oleh
bioreaktor.Karbohidrat. Polim.2001,44, 71–76.
182. Muzzarelli, R.; Tarsi, R.; Filipina, O.; Giovanetti, E.; Biagini, G.; Varaldo, PEAntimikroba. Agen
Kemoterapi.1990,34, 2019–2023.
183. Rhodes, J.; Roller, S. Tindakan antimikroba kitosan terdegradasi dan asli terhadap organisme pembusuk di
media laboratorium dan makanan.Aplikasi Mengepung. Mikrobiol.2000,66, 80–86.
184. Helander, IM; Nurmiaho-Lassila, EL; Ahvenainen, R.; Rhodes, J.; Rol. S. Chitosan
mengganggu sifat penghalang membran luar bakteri Gram-negatif.Int. J. Makanan
Mikrobiol.2001,71, 235–244.
185. Tidak, HK; Taman Muda, N.; ho Lee, S.; Meyers. SP Aktivitas antibakteri kitosan dan
oligomer kitosan dengan berat molekul berbeda.Int. J. Makanan Mikrobiol.2002,74, 65–72.
186. Younes, aku.; Sellimi, S.; Rinaudo, M.; Jellouli, K.; Nasri, M. Pengaruh derajat asetilasi dan
berat molekul kitosan homogen terhadap aktivitas antibakteri dan antijamur.Int. J.
Makanan Mikrobiol.2014,185, 57–63.
187.Zheng, LY; Zhu. Kajian JF terhadap aktivitas antimikroba kitosan dengan bobot molekul yang
berbeda.Karbohidrat. Polim.2003,54, 527–530.
188. Benhabiles, MS; Salah, R.; Lounici, H.; Drouiche, N.; Goosen, MFA; Mameri, N. Aktivitas
antibakteri kitin, kitosan dan oligomernya yang dibuat dari limbah cangkang udang.
Makanan Hidrokoloid.2012,29, 48–56.
189. Bel, AA; Hubbard, JC; Liu, L.; Davis, RM; Subbarao, KV Pengaruh kitin dan kitosan terhadap kejadian
dan tingkat keparahanFusariumkuning seledri.Menanam Dis.1998,82, 322–328.
190. Ben-Shalom, N.; Ardi, R.; Pinto, R.; Aki, C.; Fallik. E. Mengontrol cetakan abu-abu yang disebabkan oleh
Botrytis cinereapada tanaman mentimun dengan cara kitosan.Tanaman. Prot.2003,22, 285–290.
191. Wojdyła. AT Chitosan (Biochikol 020 PC) dalam pengendalian beberapa penyakit daun hias. Komunal.
Pertanian. Aplikasi Biol. Sains.2004,69, 705–715.
192. Atia, MMM; Buchenauer, H.; Aly, AZ; Abou-Zaid, MI Aktivitas antijamur kitosan terhadapPhytophthora
infestans dan aktivasi mekanisme pertahanan pada tomat terhadap penyakit busuk daun. Biol.
Pertanian. Hortik.2005,23, 175–197.
193. Photchanachai, S.; Singkaew, J.; Thamthong, J. Pengaruh perlakuan benih kitosan pada
Colletotrichumsp. dan pertumbuhan bibit cabai cv. “jinda”. DiISHS Acta Hortikultura 712,
Prosiding Konferensi Internasional IV tentang Mengelola Kualitas dalam Rantai-Pandangan
Terpadu tentang Kualitas Buah dan Sayuran, Bangkok, Thailand, 30 Juni 2006; Purvis, AC,
McGlasson, WB, Kanlayanarat, S., Eds.; Masyarakat Internasional untuk Ilmu Hortikultura:
Leuven, Belgia, 2006; hlm.585–590.
194. Bai, RK; Huang, SAYA; Jiang, YY Permeabilitas selektif dari membran kompleks kitosan-asam asetat
dan membran kompleks polimer-kitosan untuk oksigen dan karbon dioksida.Polim. Banteng.1988,
20, 83–88.
195. El-Ghaouth, A.; Arul, J.; Asselin, A.; Benhamou, N. Aktivitas antijamur kitosan pada dua
patogen pascapanen buah stroberi.Fitopatologi1992,82, 398–402.
196. Ames, BN; Emas, LS; Willet, WC Penyebab dan pencegahan kanker.Proses Nat. Acad. Sains. Amerika Serikat
1995,92, 5258–5265.
197. Pincernail, J. Radikal bebas dan antioksidan pada penyakit manusia. DiAnalisis Radikal Bebas
dalam Sistem Biologi; Favier, AE, Cadet, J., Kalyanaraman, B., Fontecave, M., Pierre, JL, Eds.;
Birkhauser: Basel, Swiss, 1995; hlm. 83–98.
198. Stadtman, ER Oksidasi dan penuaan protein.Sains1992,257, 1220–1224.
199. Witztum, JL Hipotesis oksidasi aterosklerosis.Lanset1994,344, 793–795.
200. Ames, BN; Shigenaga, MK; Hagan, TM Oksidan, antioksidan dan penyakit degeneratif penuaan.
Proses Natl. Acad. Sains. Amerika Serikat1993,90, 7915–7922.
201. Halliwell, B.; Murcia, MA; Chirico, S.; Aruoma, OI Radikal bebas dan antioksidan dalam makanan dan in vivo: Apa yang
mereka lakukan dan bagaimana mereka bekerja.Kritik. Pendeta Sci Makanan. Nutr.1995,35, 7–20.
202. Halliwell, B. Radikal bebas, antioksidan dan penyakit manusia: Keingintahuan, sebab atau akibat.
Lanset1994,344, 721–724.
203. Chiang, MT; Yao, HT; Chen, HC Efek kitosan diet dengan viskositas berbeda pada lipid plasma
dan peroksidasi lipid pada tikus yang diberi diet yang diperkaya dengan kolesterolBiosci.
Biotek. Bioch.2000,5, 965–971.
204. Taman, PJ; Saya, JY; Kim SK Aktivitas pemulungan radikal bebas chitooligosaccharides dengan
spektrometri resonansi putaran elektronJ.Agri. Makanan Kimia.2003,51, 4624–4627.
205. Matahari, T.; Xie, W.; Xu, P. Aktivitas antioksidan turunan kitosan cangkok.Makromol. Biosci.
2003,3, 320–323.
206. Yin, XQ; Lin, Q.; Zhang, Q.; Yang. LC O− 2aktivitas pemulungan kitosan dan logamnya
kompleks.Dagu. J.Appl. kimia2002,19, 325–328.

207. Kim, KW; Thomas, RL Aktivitas antioksidan kitosan dengan berat molekul bervariasi. Makanan
Kimia.2007,101, 308–313.
208. Saya, JY; Taman, PJ; Kim, SK Sifat pemulungan radikal bebas dari hetero-chitooligosaccharides
menggunakan spektroskopi ESR.Makanan Kimia. Toksikol.2004,42, 381–387.
209. Qi, L.; Xu, Z.In vivoaktivitas antitumor nanopartikel kitosan.Bioorg. Kedokteran kimia Lett. 2006,
16, 4243–4245.
210. Dass, CR; Choong, PF Penggunaan formulasi kitosan dalam terapi kanker.J. Mikroenkapsulasi. 2008,
25, 275–279.
211. Chen, WR; Adams, RL; Carubelli, R.; Nordquist, RE Laser-photosensitizer dibantu imunoterapi:
Sebuah modalitas baru untuk pengobatan kanker.Surat Kanker.1997,115, 25–30.
212. Nishimura, K.; Nishimura, S.; Nishi, N.; Saiki, saya.; Tokura, S.; Azuma, I. Aktivitas imunologi
kitin dan turunannya.Vaksin1984,2, 93–99.
213. Tokoro, A.; Tatewaki, N.; Suzuki, K.; Mikami, T.; Suzuki, S.; Suzuki, M. Efek penghambatan
pertumbuhan heksa-N-acetylchitohexaose dan chitohexaos dan tumor padat Meth-A.kimia Farmasi.
Banteng. (Tokyo)1998,36, 784–790.
214. Murata, J.; Saiki, saya.; Nishimura, S.; Nishi, N.; Tokura, S.; Azuma, I. Efek penghambatan kitin
heparinoid pada metastasis paru melanoma B16-BL6.Jpn. J. Kanker Res.1989,80, 866–872.
215. Hasegawa, M.; Yagi, K.; Iwakawa, S.; Hirai, M. Chitosan menginduksi apoptosis melalui aktivasi caspase-3
pada sel tumor kandung kemih.Jpn. J. Kanker Res.2001,92, 459–466.
216. Qi, L.; Xu, Z.; Chen, M.In vitrodanin vivopenekanan pertumbuhan karsinoma hepatoseluler oleh
nanopartikel kitosan.eur. J. Kanker2007,43, 184–193.
217. Guminska, M.; Ignacak, J.; Wojcik, E.In vitroefek penghambatan kitosan dan produk
degradasinya pada metabolisme energi di sel tumor asites Ehrlich (EAT).Polandia J. Pharmacol.
1996,48, 495–501.
218. Lin, SY; Chan, HY; Shen, FH; Chen, MH; Wang, YJ; Yu, CK Chitosan mencegah perkembangan
fokus crypt menyimpang yang diinduksi AOM pada tikus dan menekan proliferasi sel AGS
dengan menghambat sintesis DNA.J. Sel Biokimia.2007,100, 1573–1580.
219. Jeon, YJ; Kim. SK Aktivitas antitumor oligosakarida kitosan diproduksi dalam sistem reaktor
membran ultra filtrasi.J. Mikrobiol. Bioteknologi.2002,12, 503–507.
220. Suzuki, K.; Mikami, T.; Okawa, Y.; Tokoro, A.; Suzuki, S.; Suzuki, M. Efek antitumor dari heksa-N
-acetylchitohexaose dan chitohexaose.Karbohidrat. Res.1986,151, 403–408.
221. Huang, M.; Khor, E.; Lim, LY Serapan dan sitotoksisitas molekul kitosan dan
nanopartikel: Pengaruh berat molekul dan tingkat deasetilasi.Farmasi. Res.2004,21,
344–353.
222. Younes, aku.; Frachet, V.; Rinaudo, M.; Jellouli, K.; Nasri, Universitas M. Sfax, Sfax, Tunisia.
Sitotoksisitas kitosan homogen dengan derajat asetilasi dan berat molekul berbeda pada sel
karsinoma kandung kemih. 2015, Karya yang tidak dipublikasikan.
223. Ravi Kumar, MNV; Muzzarelli, RAA; Muzzarelli, C.; Sashiwa, H.; Domb, AJ Chitosan Kimia
dan Perspektif Farmasi.Reaksi. Fungsi. Polim.2000,46, 1–27.
224. Patil, RS; Ghormade, V.; Deshpande, Enzim kitinolitik MV: Eksplorasi.Enzim. Mikroba.
Technol.2000,26, 473–483.
225. Venter, JP; Kotze, AF; Auzely-Velty, R.; Rinaudo, M. Sintesis dan evaluasi
mukoadhesivitas turunan CD-kitosan.Int. J. Farmasi.2006,313, 36–42.
226. Khor, E. Chitin: Biomaterial sedang menunggu.Kur. Opin. Bahan Solid State. Sains.2002,6, 313–317.
227. Maeda, Y.; Jayakumar, R.; Nagahama, H.; Furuike, T.; Tamura, H. Sintesis, studi karakterisasi
dan bioaktivitas perancah b-chitin baru untuk aplikasi rekayasa jaringan,Int. J.Biol.
Makromol.2008,42, 463–467.
228. Nagahama, H.; Nwe, N.; Jayakumar, R.; Koiwa, S.; Furuike, T.; Tamura, H. Novel membran
chitin biodegradable untuk aplikasi rekayasa jaringan.Karbohidrat. Polim.2008, 73, 295–
302.
229. Yang, TL Chitin-based materials in tissue engineering: Applications in soft tissue and epithelial organ.
Int. J.Mol. Sains.2011,12, 1936–1963.
230. Mi, FL; Lin, YM; Wu, YB; Shyu, SS; Tsai, YH Chitin/PLGA memadukan mikrosfer sebagai sistem
pengiriman obat yang dapat terurai secara hayati: Fase-pemisahan, degradasi, dan perilaku
pelepasan. Biomaterial2002,23, 3257–3267.
231. Illum, L.; Davis, S. Chitosan sebagai sistem pengiriman obat transmucosal. DiPolisakarida.
Keanekaragaman Struktural dan Keserbagunaan Fungsional, edisi ke-2.; Dumitriu, S., Ed.;
Marcel Dekker Penerbit: New York, NY, USA, 2005; hlm. 643–660.
232. Kumirska, J.; Weinhold, MX; Thöming, J.; Stepnowski, P. Aktivitas Biomedis Bahan
Berbasis Kitin/Kitosan—Pengaruh Sifat Fisikokimia Selain Berat Molekul dan DerajatN
-Asetilasi.Polimer2011,3, 1875–1901.
233. Jayakumar, R.; Menon, D.; Manzoor, K.; Nair, SV; Tamura, H. Aplikasi biomedis bahan nano
berbasis kitin dan kitosan-Sebuah tinjauan singkat.Karbohidrat. Polim.2011,82, 227–232.
234.Aranaz, saya.; Mengibar, M.; Haris, R.; Paños, I.; Miralles, B.; Acosta, N.; Galed, G.; Heras, A.
Karakterisasi Fungsional Kitin dan Kitosan.Kur. kimia Biol.2009,3, 203–230.
235. Dutta, PK; Dutta, J.; Tripathi, VS Kitin dan kitosan: Kimia, sifat dan aplikasi.
J.Sci. Ind.Res. India2004,63, 20–31.
236. Taman, BK; Kim, MM. Aplikasi kitin dan turunannya dalam kedokteran biologi.Int. J.Mol.
Sains.2010,11, 5152–5164.
237. Cheba, BA Kitin dan Kitosan: Biopolimer Laut dengan Properti Unik dan Aplikasi Serba
Guna.Gumpal. J. Bioteknologi. Biokimia.2011,6, 149–153.
238. De Alvarenga, ES Karakterisasi dan sifat kitosan. DiBioteknologi Biopolimer; Elnashar,
M., Ed.; Dalam Teknologi: Rijeka, Kroasia, 2011; hlm. 91–108.
239. Kim, SKTurunan Chitin dan Chitosan: Kemajuan dalam Penemuan dan Pengembangan Obat; Kim,
SK, Ed.; CRC Press: Boca Raton, FL, AS, 2013.
240. Sarmento, B.; Das Neves,J.Sistem Berbasis Kitosan untuk Biofarmasi: Pengiriman,
Penargetan, dan Terapi Polimer. Wiley & Sons: Hoboken, NJ, AS, 2012.
241. Taman, BK; Kim, MM Aplikasi Kitin dan Derivatifnya dalam Kedokteran Biologi.Int. J.Mol.
Sains.2010,11, 5152–5164.
242. Dash, M.; Chiellini, F.; Otenbrite, RM; Chiellini, E. Chitosan—Polimer semi-sintetik serbaguna
dalam aplikasi biomedis.Prog. Polim. Sains.2011,36, 981–1014.
243. Kanke, M.; Katayama, H.; Tsuzuki, S.; Kuramoto, H. Penerapan kitin dan kitosan pada
sediaan farmasi.kimia Farmasi. Banteng.1989,37, 523–525.
244. Kato, Y.; Onishi, H.; Machida, Y. Penerapan turunan kitin dan kitosan dalam bidang
farmasi.Kur. Farmasi. Bioteknologi.2003,4, 303–309.
245. Merasa, PA; Panda, T. Studi aplikasi kitin dan turunannya.Bioproses Eng.1999, 20, 505–
512.
246. Yusof, NL; Wee, A.; Lim, LY; Khor, E. Film kitin fleksibel sebagai bahan pembalut luka yang
potensial: Studi model luka.J.Biomed. Mater. Res. Bagian A2003,66A, 224–232.
247. Liu, J.; Zhu, L. Metode pembuatan kulit tiruan komposit kitin yang dapat digunakan sebagai plester
luka.Terkenal Zhuanli Shenqing CN 101411897 A 20090422, 2009.
248. Wongpanit, P.; Sanchavanakit, N.; Pavasant, P.; Supaphol, P.; Tokura, S.; Rujiravanit, R. Persiapan dan
karakterisasi film carboxymethylchitin dan carboxymethylchitosan yang diolah dengan microwave untuk
penggunaan potensial dalam aplikasi perawatan luka.Makromol. Biosci.2005,5, 1001–1012.
249. Muzzarelli, RAA; Morganti, G.; Palombo, P.; Biagini, G.; Mattioli Belmonte, M.; Giantomassi, F.;
Orlandoi, F.; Muzzarelli, C. Kitin nanofibrils/komposit glikolat kitosan sebagai obat luka.
Karbohidrat. Polim.2007,70, 274–284.
250. Bernkop-Schnurch, A. polimer mukoadhesif. Dalam Biomaterial Polimer; Dumitriu, S., Ed.,
Marcel Dekker: New York, NY, USA, 2002; hlm. 147–165.
251. Ito, M.In vitrosifat pasta pengisi tulang hidroksiapatit berikatan kitosan.Biomaterial 1991,12
, 41-45.
252. Swetha, M.; Sahiti, K.; Moorthi, A.; Srinivasan, N.; Ramasamy, K.; Selvamurugan, N.
Biocomposites mengandung polimer alami dan hidroksiapatit untuk rekayasa jaringan tulang.
Int. J.Biol. Makromol.2010,47, 1–4.
253. Khor, E.; Lim, LY Aplikasi implan kitin dan kitosan. Biomaterial2003,24, 2339–2349.
254. Vankatesan, J.; Kim, komposit SK Chitosan untuk rekayasa jaringan tulang—ikhtisar. Maret
Narkoba2010,8, 2252–2266.
255. El Zein, AR; Dabbarh, F.; Chaput, C. Semen kalsium fosfat yang dapat disuntikkan sendiri. Di
Kitosan dalam Farmasi dan Kimia; Muzzarelli, RAA, Muzzarelli, C., Eds.; ATEC: Grottammare,
Italia, 2002; hlm. 365–370.
256. Yi, H.; Wu, LQ; Bentley, KAMI; Ghadssi, R.; Rubloff, GW; Gorong-gorong, JN; Payne, GF
Biofabrikasi dengan kitosan.Biomakromolekul2005,6, 2881–2894.
257. Saravanan, S.; Nethala, S.; Pattnaik, S.; Tripati, A.; Moorthi, A.; Selvamurugan, N. Persiapan,
karakterisasi dan aktivitas antimikroba dari scaffold bio-komposit yang mengandung kitosan/
nano-hidroksiapatit/nano-perak untuk rekayasa jaringan tulang.Int. J.Biol. Makromol.2011,49,
188–193.
258. Venkatesan, J.; Kim, SK Chitosan Composites untuk Rekayasa Jaringan Tulang—Sebuah Tinjauan.
Maret Narkoba2010,8, 2252–2266.
259. Teng, S.; Lee, E.; Yoon, B.; Shin, D.; Kim, H.; Oh, membran komposit J. Chitosan/nanohidroksiapatit
melalui filtrasi dinamis untuk regenerasi tulang terpandu.J.Biomed. Mater. Res. Bagian A 2009,88,
569–580.
260. Bin, J.; Feng, Y.; Zhi-kun, L. Faktor pertumbuhan fibroblast dasar dikombinasikan dengan
komposit nano-hidroksiapatit/kitosan untuk perbaikan cacat tulang radial pada kelinci.Dagu. J.
Jaringan Eng. Res.2012,16, 6343–6348.
261. Costa-Pinto, AR; Reis, RL; Neves, NM Scaffolds berbasis rekayasa jaringan tulang: Peran kitosan.
Jaringan Eng. Bagian B Pdt.2011,17, 331–347.
262. Krajewska, B. Penerapan bahan berbasis kitin dan kitosan untuk imobilisasi enzim:
Tinjauan.Enzim. Mikroba. Technol.2004,35, 126–139.
263. Freier, T.; Montenegro, R.; Koh, S.; Shoichet, MS tabung Chitin untuk rekayasa jaringan pada
sistem saraf.Biomaterial2005,26, 4624–4632.
264. Yang, Bahan Berbasis Kitin TL dalam Rekayasa Jaringan: Aplikasi pada Jaringan Lunak dan Organ
Epitel.Int. J.Mol. Sains.2011,12, 1936–1963.
265. Kuo, SM; Niu, GC; Chang, SJ; Kuo, CH; Bair, MS Metode satu langkah untuk membuat
mikrosfer kitosan.J.Appl. Polim. Sains.2004,94, 2150–2157.
266. Honarkar, H.; Barikani, M. Aplikasi Biopolimer I: Chitosan.Monatsh. kimia.2009,140, 1403–
1420.
267. Özbas-Turan, S.; Aral, C.; Kabasakal, L.; Keyer-Uysal, M.; Akbuga, J. Co-enkapsulasi dua plasmid dalam
mikrosfer kitosan sebagai kendaraan pengiriman gen non-virus.J. Farmasi. Farmasi. Sains.2003,6,
27–32.
268. Ohkawa, K.; Minato, KI; Kumagai, G.; Hayashi, S.; Yamamoto, H. Chitosan nanofiber.
269. Kucharska, M.; Niekraszewicz, A.; Lebioda, J.; Malczewska-Brzoza, K.; Wesołowska, E.
Bahan Komposit Bioaktif DalamKemajuan Kimia dan Penerapan Kitin dan Derivatifnya;
Jaworska, MM, Ed.; Masyarakat Kitin Polandia: Lodz, Polandia, 2007; Volume 12, hlm.
131–138.
270. Dhanikula, AB; Panchagnula, R. Pengembangan dan karakterisasi film kitosan biodegradable
untuk pengiriman lokal paclitaxel.AAPS J.2004,6, 88–89.
271. Kucharska, M.; Struszczyk, MH; Cicheckka, M.; Brzoza, K. Studi pendahuluan tentang sifat yang dapat
digunakan dari pembalut luka yang inovatif. DiKemajuan Kimia dan Penerapan Kitin dan
Derivatifnya; Jaworska, MM, Ed.; Masyarakat kitin Polandia: Lotz, Polandia, 2011; Volume 16, hlm.
131–137.
272. Pereira, AO; Cartucho, DJ; Duarte, AS; Gil, MH; Cabrita, A.; Patricio, JA; Barros, MM Imobilisasi
cardosin A dalam spons kitosan sebagai implan baru untuk penghantaran obat. Kur. Penemuan
Narkoba. Technol.2005,2, 231–238.
273. Illum, L. Chitosan dan Penggunaannya sebagai Eksipien Farmasi.Farmasi. Res.1998,15, 1326–1331.
274. Dai, T.; Tanaka, M.; Huang, YY; Hamblin, MR Sediaan kitosan untuk luka dan luka bakar: Efek
antimikroba dan penyembuhan luka.Pakar Pdt. Anti. Menulari. Ada.2011,9, 857–879.
275. Jayakumar, R.; Prabaharan, M.; Sudheesh Kumar, PT; Nair, SV; Tamura, H. Biomaterial berbahan
dasar kitin dan kitosan pada aplikasi pembalut luka.Bioteknologi. Lanjut2011,29, 322–337.
276. Loke, WK; Lau, SK; Yong, LL; Khor, E.; Sum, CK Pembalut luka dengan kemampuan anti-mikroba
yang berkelanjutan.J.Biomed. Mater. Res.2000,53, 8–17.
277. Kumari, R.; Dutta, PK Studi aktivitas fisikokimia dan biologi scaffold kitosan berikatan silang
genipin yang dibuat dengan menggunakan karbon dioksida superkritis untuk aplikasi rekayasa
jaringan.Int. J.Biol. Makromol.2010,46, 261–266.
278. Luna-barcenas, G.; Prokhorov, E.; Elizalde-pena, E.; Nuno-licona, A.; Sanchez, ICHidrogel Berbasis
Kitosan untuk Aplikasi Rekayasa Jaringan,Bioteknologi dalam Seri Pertanian, Industri dan
Kedokteran; Penerbit Nova Science: New York, NY, USA, 2011.
279. Croisier, F.; Jérôme, C. biomaterial berbasis Chitosan untuk rekayasa jaringan.eur. Polim. J.2013, 49,
780–792.
280. Riva, R.; Ragelle, H.; des Rieux, A.; Duhem, N.; Jérôme, C.; Préat, V. Kitosan dan turunan kitosan dalam
pemberian obat dan rekayasa jaringan. DiKitosan untuk Biomaterial II; Jayakumar, R., Prabaharan,
M., Muzzarelli, RAA, Eds.; Springer: Berlin-Heidelberg, Jerman, 2011, hlm. 19–44.
281. Suh, JKF; Matthew, HWT Penerapan biomaterial polisakarida berbasis kitosan dalam rekayasa
jaringan tulang rawan: Sebuah tinjauan.Biomaterial2000,21, 2589–2598.
282. Shi, C.; Zhu, Y.; Berlari, X.; Wang, M.; Su, Y.; Cheng, T. Potensi terapi kitosan dan turunannya
dalam pengobatan regeneratif.J. Surg. Res.2006,133, 185–192.
283. Farzaneh, NH; Soheila, SK; Faramarz, AT; Zahra, A. Perekat Jaringan Biokompatibel Topikal Baru
Berdasarkan polimer Urethane Pra-S yang dimodifikasi Chitosan.Polim Iran. J.2011,20, 671–680.
284. Kotzé, AF; Hamman, JH; Snyman, D.; Jonker, C.; Stander, M. Mucoadhesive dan
meningkatkan sifat penyerapanN-trimetil kitosan klorida. DiKitosan dalam Farmasi dan
Kimia; Muzzarelli, RAA, Muzzarelli, C., Eds.; ATEC: Grottammare, Italia, 2002; hlm. 31–40.
285. Rickett, TA; Amoozgar, Z.; Tuchek, CA; Taman, J.; Yeo, Y.; Shi, R. Hidrogel kitosan yang dapat dihubungkan
dengan foto dengan cepat untuk bedah saraf perifer.Biomakromolekul2011,12, 57–65.
286. Hamman, JH; Kotzé, AF Peningkatan penyerapan paraseluler di seluruh epitel usus oleh N
-trimetil kitosan klorida. DiKitosan dalam Farmasi dan Kimia; Muzzarelli, RAA, Muzzarelli, C.,
Eds.; ATEC: Grottammare, Italia, 2002; hlm. 41–50.
287. Miwa, A.; Ishibe, A.; Nakano, M.; Yamahaira, T.; Itai, S.; Jinno, S.; Kawahara, H. Pengembangan
turunan kitosan baru sebagai pembawa misel taksol.Farmasi. Res.1998,15, 1844–1850.
288. Liu, W.; Matahari, SJ; Zhang, X.; de Yao, K. Perilaku agregasi diri kitosan teralkilasi dan pengaruhnya
terhadap pelepasan obat hidrofobik.J. Biomater. Sains. Polim. Edisi.2003,14, 851–859.
289. Liu, W.; Zang, X.; Matahari, SJ; Matahari, GJ; Yao, KD; Liang, DC; Guo, G.; Zhang, JYNkitosan teralkilasi
sebagai vektor potensial nonviral untuk transfeksi gen.Biokonjug. kimia.2003,14, 782–789.
290. Ouchi, T.; Murata, JI; Ohya, Y. Pengiriman gen oleh kitosan kuartener dengan residu
galaktosa antena. DiAplikasi Polisakarida: Kosmetik dan Farmasi; El-Nokaly, MA, Soini, HA,
Eds.; American Chemical Society: Washington, DC, USA, 1999; hlm. 15–23.
291. Mi, FL; Shyu, SS; Chen, CT; Schoung, JY Mikrosfer kitosan berpori cocok untuk mengontrol
pelepasan antigen vaksin penyakit Newcastle: Persiapan mikrosfer teradsorpsi antigen dan
in vitromelepaskan.Biomaterial1999,20, 1603–1612.
292. Taman, IK; Jiang, HL; Yun, CH; Choi, YJ; Kim, SJ; Akaike, T.; Kim, SI; Cho, CS Pelepasan vaksin
virus penyakit Newcastle dari mikrosfer kitosanin vitrodanin vivo.Asia-Aust. J. Anim. Sains.
2004,17, 543–547.
293. Foda, NH; El-Iaithy, M.; Tadros, I. Spons biodegradable implan: Efek pembentukan kompleks
interpolimer kitosan dengan gelatin pada perilaku pelepasan tramadol hidroklorida.
Pengembang Narkoba. Ind. Farmasi.2007,33, 7–17.
294. Dhanaraj, SA; Selvadurai, M.; Santhi, K.; Hui, ALS; Wen, CJ; Teng, HC Sistem penghantaran obat yang
ditargetkan: -formulasi dan evaluasi nanosfer kitosan yang mengandung doksorubisin hidroklorida.
Int. J. Pengiriman Obat.2014,6, 186–193.
295. Makhlof, A.; Tozuka, Y.; Takeuchi, H. Desain dan evaluasi nanopartikel kitosan sensitif pH baru
untuk pengiriman insulin oral.eur. J. Farmasi. Sains.2011,42, 445–451.
296. Cheng, SY; Yuen, MC; Lam, PL; Gambari, R.; Wong, RS; Cheng, GY; Lai, PB; Tong, SW;
Chan, KW; Lau, TA;et al. Sintesis, karakterisasi dan analisis pendahuluanin vivo aktivitas
biologis mikrokapsul kitosan/celecoxib.Bioorg. Kedokteran kimia Lett.2010,20, 4147–
4151.
© 2015 oleh penulis; pemegang lisensi MDPI, Basel, Swiss. Artikel ini adalah artikel akses terbuka
yang didistribusikan di bawah syarat dan ketentuan lisensi Creative Commons Attribution (http://
creativecommons.org/licenses/by/4.0/).

Marinedrugs 13 01133.en - Id

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Marinedrugs 13 01133.en - Id

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

Maret Narkoba2015,13, 1133-1174; doi:10.3390/md13031133

Persiapan Chitin dan Chitosan dari Sumber Laut.

* Penulis kepada siapa korespondensi harus ditujukan; Email: marguerite.rinaudo@sfr.fr ;

Editor Akademik: David Harding dan Hitoshi Sashiwa

Diterima: 26 Desember 2014 / Diterima: 16 Februari 2015 / Diterbitkan: 2 Maret 2015

Kata kunci:kitin; kitosan; deproteinisasi kimia dan enzimatik; demineralisasi;

Gambar 1.Struktur kimia kitin dan kitosan

2. Persiapan dan Karakterisasi Kitin

2.1. Morfologi Kitin

pengembangan pengolahan dan aplikasi kitin.

2.2. Ekstraksi Kitin

2.2.1. Ekstraksi Kimia

2.2.1.1. Deproteinisasi Kimia

2.2.1.2. Demineralisasi Kimia

2 HCl + CaCO3 CaCl2+ H2O + CO2-

pencucian menggunakan air deionisasi.

Tabel 1.Perbandingan kondisi produksi kitin menurut literatur.

2.2.1.3. Proses Pengawetan Struktur Chitin

Udang merah muda 3 3 100

2.2.2. Ekstraksi Biologi Kitin

2.2.2.1. Deproteinasi enzimatik

(a) Fermentasi Asam Laktat

Fermentasi cangkang krustasea dapat dilakukan dengan cara diseleksiLactobacillussp. saring

(b) Fermentasi Non Asam Laktat

Ghorbel-Bellaajet al. [69] mengevaluasi enam proteolitikBasilstrain pada fermentasi

2.3. Karakterisasi dan Kelarutan Kitin

[η] (mL/g) = KMsebuah (1)

3. Preparasi dan Karakterisasi Kitosan

3.1. Persiapan Kitosan

3.1.1. Deasetilasi Kimia

3.1.2. Deasetilasi enzimatik

3.2. Karakterisasi dan Kelarutan Kitosan

memungkinkan untuk mendapatkan DA.

3.3. Pengolahan dan Sifat Utama Bahan Berbasis Chitosan

4. Hubungan antara Struktur Kimia dan Aktivitas Biologis

4.1. Aktivitas Antimikroba

4.2. Aktivitas Antioksidan

4.3. Aktivitas Antitumor

5. Aplikasi Farmasi dan Biomedis Kitin dan Kitosan

Pembalut luka untuk perawatan basah [271]

Tablet Agen disintegrasi

Para penulis menyatakan tidak ada konflik kepentingan.

26. Horowitz, ST; Roseman, S.; Blumental, HJ Persiapan oligosakarida glukosamin. 1.

35. Marquis-Duval, FO Isolation and Valorisation des constituants de la carapace de la crevette

kompleks.Dagu. J.Appl. kimia2002,19, 325–328.

Anda mungkin juga menyukai