Validao de mtodos analticos na quantificao de comprimidos de Captopril - comparao de metodologias para um programa de garantia de qualidade

Sstenes Rosa Valentini1 , Willy Arno Sommer2 e Graciette Matioli1*

Departamento de Farmcia e Farmacologia, Universidade Estadual de Maring, Av. Colombo, 5790, 87020-900, Maring, 2 Paran, Brasil. Departamento de Engenharia de Produo, Universidade Federal de Santa Catarina, Trindade, Cx Postal 476, * 88040-900, Florianpolis, Santa Catarina, Brasil. Autor para correspondncia. e-mail: gmatioli@uem.br.
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RESUMO. Atualmente, quando todos os caminhos levam busca da qualidade total, torna-se indispensvel conhecer perfeitamente cada fase de um processo produtivo. Neste caso, a validao a ferramenta adequada para garantir a confiabilidade de instalao de um processo produtivo, de equipamento e, inclusive, da metodologia analtica. Dessa forma, o presente trabalho teve por objetivo analisar os principais aspectos da validao de mtodos analticos na quantificao do captopril. Foi realizada a validao e a comparao dos seguintes mtodos: titulomtrico por xido-reduo, espectrofotomtrico por Folin-Ciocalteau e cromatogrfico por cromatografia lquida de alta eficincia - CLAE. Os atributos de exatido, preciso, linearidade, especificidade e robustez foram estudados para cada metodologia. Os resultados obtidos demonstraram que o mtodo cromatogrfico foi o mais adequado para as anlises dos comprimidos de Captopril 25 mg, enquanto que os mtodos espectrofotomtrico e titulomtrico demonstraram valores que satisfazem os critrios de aceitao, porm, com maior variabilidade e menor sensibilidade.
Palavras-chaves: validao, garantia de qualidade, metodologia analtica, captopril, CLAE.

ABSTRACT. Validation of analytical methods for quantifying captopril in tablets a comparison of methodologies for a quality control program. Nowadays, when all approaches lead to the search for total quality, a thorough knowledge of every stage of a production process is vital. Validation is an appropriate tool to guarantee the reliabilities of: productive process installation, equipment and also analytical methodology. The aim of the present study was to analyze the main aspects of analytical methods validation for quantifying captopril. Validation and comparison of the following methods were carried out: titrimetric for oxide-reduction, spectrophotometry for Folin-Ciocalteau and high-efficiency liquid chromatography - HPLC. The attributes of accuracy, precision, linearity, specificity and robustness were studied for each methodology. The results show that the chromatographic method was the most suitable for Captopril 25 mg tablets evaluation, while the spectrophotometric method and the titrimetric method showed values that satisfied the acceptance criteria, although with higher variability and lower sensitivity.
Key words: validation, quality control, analytical methods, captopril, HPLC.

Introduo A qualidade dos dados analticos representa um fator chave no sucesso de um programa de desenvolvimento de uma droga, sendo que o processo e a validao do mtodo analtico apresentam impacto direto na qualidade desses dados. Assim, a metodologia analtica, que j envolvia a exatido, preciso e especificidade, expandiu-se para as atividades industriais e est agora sob o enfoque da validao (Moretto e Shib, 2000).
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O conceito do termo validao era utilizado em anlises na Qumica Analtica Inorgnica, a fim de assegurar dados confiveis de serem utilizados na descoberta, desenvolvimento e fabricao de produtos farmacuticos. Atualmente, os dados analticos tambm so usados na seleo de drogas em potencial, no desenvolvimento de sua sntese, nos estudos de formulaes, no monitoramento da estabilidade de frmacos e nos testes de produtos acabados para liberao. De acordo com Moretto e Shib (2000), o primeiro registro que se tem do uso oficial do termo validao
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encontra-se nas Good Manufacturing Products GMPs, as quais foram publicadas na Food and Drug Administration FDA (1978), porm, somente em 1980, recebeu a seguinte definio: Validao o estabelecimento da evidncia documentada de que o desenvolvimento de um processo especfico permite cumprir com o objetivo para o qual foi desenhado. Segundo a United States Pharmacopeia 24a ed USP XXIV (2000), os analistas no so obrigados a validar sua metodologia analtica, devem verificar se ela adequada s suas condies de uso. Porm, se no houver um mtodo ou srie de mtodos devidamente adequados para a avaliao da qualidade dos produtos, o programa de validao ter valor limitado (Pasteelnick, 1993). Em relao validao de mtodos, Espires (apud Garfield, 1994) relata que esta pode ser definida como o processo pelo qual atributos ou figuras de mrito so determinados e avaliados, sendo estes importantes partes de um programa de garantia de qualidade. Portanto, o objetivo principal assegurar que determinado procedimento analtico d resultados reprodutveis e confiveis, que sejam adequados aos fins para os quais tenha sido planejado.
Elementos requeridos para a validao do doseamento

Categoria II: mtodos analticos para a determinao de impurezas em uma grande quantidade de substncias qumicas ou compostos de degradao em produtos farmacuticos finais. Estes mtodos incluem doseamentos quantitativos e testes limites. Categoria III: mtodos analticos para a determinao de caractersticas de desempenho. Categoria IV: testes de identificao. De acordo com a categoria do doseamento, h necessidade de se realizar diferentes anlises. A Tabela 1 lista os elementos que normalmente so requeridos para cada uma das categorias dos doseamentos.
Generalidades sobre o Captopril

Na literatura oficial, para o ensaio de doseamento, podem ocorrer grandes variaes nas suas determinaes, desde determinaes analticas altamente exatas, at avaliao subjetiva de atributos. Considerando esta variedade de doseamentos, diferentes mtodos necessitam de diferentes programas de validao. A USP XXIV (2000) classifica os mtodos analticos em quatro categorias: Categoria I: mtodos analticos para a quantificao do maior componente de uma grande quantidade de substncias qumicas ou ingrediente ativo em produto farmacutico final.
Tabela 1. Elementos de dados requeridos para validao de doseamentos.
Caractersticas de desempenho analtico Acuracidade Preciso Especificidade Limite de Deteco Limite de Quantificao Linearidade Variao Doseamento Categoria I Sim Sim Sim No No Sim Sim

O Captopril um dos medicamentos antihipertensivos mais consumido no Brasil. Constitui-se em um p cristalino, branco ou levemente amarelado, com leve odor caracterstico de sulfeto, facilmente solvel em gua, etanol, clorofrmio e metanol. Apresenta um ponto de fuso entre 104 a 110C e solvel em solues alcalinas (The Pharmaceutical Codex, 1994; European Pharmacopeia, 1997). A hipertenso arterial, segundo Magalhes (1998), o agravo mais comum na populao adulta em todo o mundo e um fator de risco muito importante para as doenas cardiovasculares, destacando-se o acidente vascular cerebral (AVC). Os agentes anti-hipertensivos podem ser classificados de acordo com seus locais ou mecanismos de ao como: i) diurticos; ii) agentes simpatolticos; iii) vasodilatadores; iv) bloqueadores dos canais de clcio; v) inibidores da Enzima Conversora da Angiotensina (ECA) e antagonistas do receptor da angiotensina II.

Doseamento Categoria II Testes quantitativos Testes limites Sim * Sim No Sim Sim No Sim Sim No Sim No Sim *

Doseamento Categoria III * Sim * * * * *

Doseamento Categoria IV No No Sim No No No No

* Pode ser requerido dependendo da natureza do teste especfico. Fonte: United States Pharmacopeia XXIV (2000)

Todos os inibidores ECA, como o Captopril, bloqueiam de forma eficaz a converso de angiotensina I em angiotensina II, tambm, todos possuem a mesma indicao teraputica, perfis de efeitos adversos e contra-indicao semelhantes. Porm, o Captopril apresenta menor custo e efeito
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mais favorvel sobre a qualidade de vida. Uma vez que a hipertenso costuma exigir tratamento para toda a vida, estas caractersticas melhoram a obedincia do paciente (Jackson e Garrison, 1996). Considerando que o frmaco Captopril foi o primeiro a ser desenvolvido para o tratamento da
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hipertenso e apresenta as vantagens acima citadas, o presente trabalho foi planejado de maneira a estudar os diferentes atributos da validao de mtodos analticos na quantificao do mesmo na forma farmacutica comprimidos e comparar o doseamento deste frmaco por meio de trs mtodos: i) titulomtrico por xido-reduo; ii) espectrofotomtrico por Folin-Ciocalteau e iii) cromatogrfico por cromatografia lquida de alta eficincia (CLAE). Material e mtodos
Dados experimentais

Padres As substncias qumicas de referncia primria Captopril e dissulfeto de Captopril, identificadas, respectivamente, com nmero de lotes 09120 e 09122 USP, apresentou um grau de pureza de 99,99% e 99,99%, enquanto que a substncia qumica de referncia secundria identificada com nmero de lote 249/00 apresentou grau de pureza igual a 98,90%. Amostras A amostra da matria-prima Captopril, identificada com nmero de lote 00141 B apresentou grau de pureza 99,64%. A partir desta amostra e das substncias de grau farmacutico utilizadas na manipulao da formulao da matriz, preparou-se uma amostra padronizada de comprimidos, simulando formulaes encontradas no comrcio, composta pelos seguintes constituintes (miligramas): captopril 25; celulose microcristalina MC 101 42,5; lactose 45,73; amido de milho 10,0; dixido de silcio 1,3; estearato de magnsio 3,9 e talco 2,6, totalizando um peso mdio de 132,33. Foi preparado tambm um placebo da amostra padronizada de comprimidos nas mesmas quantidades estabelecidas na frmula descrita acima, com exceo do Captopril. As amostras de comprimidos contendo 25 mg de Captopril foram manipuladas no Laboratrio de Ensino, Pesquisa e Extenso em Medicamentos e Cosmticos LEPEMC, com diferentes concentraes as quais variaram de 40% a 120%. Mtodo Analtico Titulomtrico O procedimento analtico utilizado para as anlises das amostras foi adaptado da monografia oficial descrito na USP XXIV (2000), referente matria-prima do Captopril. Foi preparada uma soluo de iodato de potssio 0,1N em gua destilada e padronizada com soluo de permanganato de potssio 0,1N S.V. Procedeu-se
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determinao do peso mdio de cada comprimido e 3 alquotas do p desta amostra, equivalente a 300 mg de Captopril, foram pesadas. Cada tomada de ensaio foi transferida para um erlenmeyer de 250, no qual foram adicionados 1 g de iodeto de potssio, 100 de gua destilada, 10 de cido sulfrico 3,6 N e 2 mL de goma de amido 1%. Realizou-se a titulao utilizando iodato de potssio 0,1 N S.V., at colorao azul persistente por 30 segundos. Um branco foi preparado nas mesmas condies que a amostra, com exceo do Captopril, sendo tambm este titulado. Para avaliao do placebo (formulao sem o ativo - Captopril), foram pesadas 3 alquotas do p, com peso equivalente s tomadas de ensaio do p dos comprimidos da amostra padronizada, descontandose as 300 mg de Captopril, as quais foram submetidas s mesmas condies da anlise anterior. O clculo foi efetuado considerando que cada mL de iodato de potssio 0,1N equivale a 21,73 mg de Captopril, segundo a USP XXIV (2000). Mtodo Espectrofotomtrico Segundo o trabalho de Raghuveer (1991), o mtodo se baseia na reao do Captopril com o reagente de Folin-Ciocalteau (reagente FC). O frmaco interage com o reagente na presena da soluo de carbonato de sdio, formando um cromgeno de colorao azul, o qual medido absoro mxima de 670 nm. O cromgeno estvel por uma hora e a lei de Beers obedecida na concentrao mdia de 10-100 mcg/mL. Utilizou-se, para a determinao espectrofotomtrica do Captopril, um espectrofotmetro UV-Vis Cary 50 conc. O reagente FC foi diludo 1:2 e a soluo contendo carbonato de sdio a 10% foi preparada usando como diluente gua destilada. Uma soluo padro USP de Captopril foi preparada dissolvendo 50 mg deste em 50 mL de gua destilada em frasco calibrado. Vinte comprimidos de Captopril foram pesados e triturados, sendo que 50 mg deste p foram transferidos para balo volumtrico de 50, dissolvidos em gua destilada e, aps completado o volume do balo, a soluo foi filtrada. O procedimento do mtodo foi realizado utilizando um volume de 2,5 mL da soluo do frmaco em frasco volumtrico de 25 e adicionandose 6 mL da soluo de carbonato de sdio 10%. A mistura foi agitada por dois minutos, sendo posteriormente adicionados 4 de reagente FC sobre a mesma. O tempo de reao permitido foi de quinze minutos e, em seguida, completou-se o volume do frasco de 25 com gua destilada. A soluo foi medida em 670 nm frente a um branco, o qual foi preparado com todos os reagentes, porm sem o princpio ativo Captopril.
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Mtodo Cromatogrfico A metodologia utilizada segue a descrita na USP XXIV (2000). Para a fase mvel, preparou-se uma mistura de 550 mL de metanol e 450 mL de gua contendo 0.50 mL de cido fosfrico, fazendo ajustes quando necessrio. O padro foi preparado utilizando 10,7 mg de padro primrio de Captopril e 0,05 mg de disulfeto de Captopril em fase mvel, obtendo uma soluo com concentrao conhecida de 1,07 mg/mL e 0,05 mg/mL, respectivamente, conforme demonstra o cromatograma da Figura 1.

Fonte: Cass e Degani (2001).

Atributos dos Programas de Validao

Figura 1. Cromatograma da CLAE dos padres primrios de Captopril e Disulfeto de Captopril com concentrao conhecida de 1,07 mg/mL e 0,05 mg/mL, respectivamente.

O doseamento foi realizado transferindo um mnimo de 20 comprimidos para um balo volumtrico com capacidade de 25 mL, no qual foi adicionado a fase mvel at a sua metade e agitado por cerca de 15 minutos. Em seguida, foi completado o volume do frasco volumtrico com fase mvel, sendo o material, posteriormente, centrifugado. Quando necessrio, diluiu-se quantitativamente o material com a fase mvel, obtendo-se uma soluo com concentrao de cerca de 1 mg/mL de Captopril.
Validao de Mtodos Analticos

a) Teste de Exatido (Acuracidade) Foi verificada a exatido adicionando-se quantidades conhecidas do princpio ativo formulao placebo em trs concentraes diferentes: 80%, 100% e 120%, cobrindo a faixa especificada do produto que varia de 90% a 110%. Tambm a exatido foi avaliada para o placebo e para o padro. As anlises foram realizadas em 3 replicatas para as concentraes de 80% e 120%, bem como para o placebo e padro. Para a concentrao de 100%, foram realizadas 6 replicatas. A reportagem dos resultados de exatido se deu atravs da equao que segue (Cass e Degani, 2001), considerando uma quantidade conhecida do Captopril adicionada amostra. Exatido = concentra o obtida x 100% concentra o terica

Considerando que este trabalho encontra-se classificado na Categoria I da Tabela 1, os atributos da validao de metodologia descritos nesta Categoria foram analisados pelos trs mtodos analticos aqui estudados. O esquema que segue demonstra as etapas envolvidas no processo de desenvolvimento, validao e utilizao de um mtodo analtico, com base nos atributos da Categoria I (Tabela 1).

b) Teste de Preciso O teste de preciso pode avaliar os critrios de repetibilidade, de preciso intermediria e de reprodutibilidade. Neste trabalho, ser avaliado o critrio repetibilidade, considerado o mais importante pela USP XXIV (2000). Para tal, utilizou-se de uma formulao a 100% de Captopril como amostra. Segundo a metodologia de Pecora (2000), foram efetuadas anlises por dois operadores: A e B. O operador A realizou, por quatro dias consecutivos, 6 replicatas da amostra 100%, enquanto que o operador B realizou anlises de 6 replicatas da mesma amostra por um perodo de 6 dias consecutivos, sendo que este iniciou suas anlises na mesma data que o operador A.
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Considerando que a preciso avaliada atravs do desvio-padro e/ou coeficiente de variao das medidas obtidas, no qual o coeficiente de variao no deve ultrapassar 15%, as medidas estatsticas de tendncia central (mdia), de variabilidade (desviopadro, coeficiente de variao) e as medidas de posio (mximo e mnimo) foram calculadas atravs do programa Excel da Microsoft. c) Teste de Especificidade Uma vez que a especificidade a habilidade de um mtodo de separar do composto de interesse componentes que esto presentes na amostra (Cass e Degani, 2001), para este atributo, foi realizada uma anlise geral dos mtodos de doseamento. No caso dos mtodos volumtrico e espectrofotomtrico, realizou-se uma anlise de um placebo que foi comparado com uma amostra de Captopril 25 mg, enquanto que, no cromatogrfico, foi realizada uma anlise de um padro que se comparou com uma amostra, referente a um produto de degradao do comprimido de Captopril 25 mg, demonstrando, assim, se houve ou no interferncia com o princpio ativo em questo. d)Teste de Linearidade e Variao No critrio de linearidade, foram utilizadas cinco concentraes diferentes que variaram de 80% a 120% da concentrao do teste, ou seja, dentro e nos extremos da faixa de aceitao do produto, tanto para o padro quanto para amostra. Foram utilizadas para a realizao do teste 3 replicatas das concentraes 40%, 60%, 80% e 120% e 6 replicatas da concentrao 100% do teor declarado para o padro. Tambm foram realizadas 3 replicatas das concentraes 80%, 90%, 110% e 120% e 6 replicatas da concentrao de 100% do teor declarado para a amostra. A avaliao estatstica dos resultados se baseou no trabalho de Pecora (2000), ou seja, atravs da regresso linear, utilizou-se o mtodo dos mnimos quadrados e verificou-se o quanto a reta descreve os pontos, por intermdio de seu coeficiente de correlao (r). Valores de r > 0,99 so aceitveis na maioria dos mtodos analticos. e) Robustez Considerando que o atributo robustez verifica a capacidade que um mtodo analtico apresenta em fornecer resultados inalterados quando sujeito a mudanas pequenas, como diferentes analistas, dias alternados, temperatura do ambiente, entre outros, neste trabalho, para avaliao desse teste, foram analisadas as condies de diferentes analistas, bem como, diferentes dias.

Resultados
Anlise Comparativa dos Mtodos Estudados

Para o atributo Exatido Na Figura 2, observa-se que as amostras de concentrao 100% foram melhores medidas em relao a outras concentraes, independente do mtodo, uma vez que os valores encontrados so os que mais se aproximam do valor terico. O mtodo titulomtrico forneceu melhores resultados com relao medio de amostras com diferentes concentraes, sendo que apresentou uma maior exatido para as concentraes de 80 mg e 100 mg. O mtodo espectrofotomtrico foi o que demonstrou valores mais distantes da concentrao terica, com grande variao, e, o mtodo cromatogrfico, por sua vez, apresentou resultados prximos ao valor terico para a concentrao de 100 mg, contudo, para as demais concentraes no teve a mesma exatido.

Figura 2. Comparao dos mtodos titulomtrico, espectrofotomtrico e cromatogrfico para o atributo exatido.

Para o Atributo Preciso O mtodo titulomtrico teve uma baixa variabilidade nos valores encontrados, porm com uma menor preciso, dado que a mdia ficou afastada do valor terico de 100%. O mtodo espectrofotomtrico apresentou uma mdia mais prxima do valor terico, porm com uma alta variabilidade dos valores encontrados. De acordo com a Figura 3, o melhor mtodo em relao ao atributo da preciso foi o mtodo cromatogrfico, que obteve uma mdia bem prxima do valor terico, com a vantagem da menor variabilidade entre os trs mtodos.

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r = 0,9999, y = -1,298 + 1,0118*x

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101,50 101,00 100,50 100,00 99,50

120 115 Concentrao obtida (mg) 110 105 100 95 90 85 80

Titulomtrico: r = 0,9994, Y = -0,05 + 0,9927X Espectrofotomtrico: r = 0,9989, Y = 1,486 + 0,9883X Cromatogrfico: r = 0,9999, Y = - 1,298 + 1,0118X

Figura 3. Comparao do atributo preciso entre os mtodos titulomtrico, espectrofotomtrico e cromatogrfico.

Para o Atributo Especificidade Para a observao da especificidade, verificou-se, nos trs mtodos estudados, que pode no haver interferncia dos excipientes da formulao com o princpio ativo da mesma, independentemente da sua concentrao, de acordo com os dados apresentados na Tabela 2. Para o Atributo Linearidade: Em relao a este atributo, no se percebem diferenas notveis entre os mtodos. Todos apresentaram uma forte correlao linear entre a concentrao obtida e a concentrao terica, porm, ao considerar o coeficiente r, verifica-se que o mtodo cromatogrfico foi o que apresentou maior correlao linear. Pode-se, ainda, destacar que, dentro dos limites, foi possvel se fazer uma interpolao, no justificando uma extrapolao das anlises, conforme demonstrado na Figura 4.

Tabela 2. Resultados obtidos para as anlises do placebo, das amostras e do produto de degradao em relao a especificidade dos mtodos titulomtrico, espectrofotomtrico e cromatogrfico.
Concentrao (mg) 80 80 80 100 100 100 120 120 120
Fonte: LEPEMC

Toda e qualquer mudana na frmula, no processo de fabricao ou na troca de reagentes para as anlises quantitativas do medicamento fator determinante para a revalidao do mtodo. Assim, a amostra padronizada e preparada para este trabalho provavelmente diferente daquela utilizada para a validao da metodologia oficial, necessitando, desta forma, nova validao. Como demonstrado, uma
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Valor obtido (%)

99,00 98,50 98,00 97,50

Titulomtrico Espectrofotomtrico Cromatogrfico

Titulomtrico

Titulomtrico

Cromatogrfico Espectrofotomtrico

Espectrofotomtrico
Mtodo

Cromatogrfico

Mdia EP DP

75 75

80

85

90

95

100

105

110

115

120

125

Concentrao terica (mg)

Figura 4. Comparativo entre os mtodos titulomtrico, espectrofotomtrico e cromatogrfico referente ao atributo linearidade.

Para o Atributo Robustez Quando os trs mtodos estudados foram submetidos aplicao do atributo robustez, verificouse que, com a insero de pequenas e deliberadas mudanas, estes mtodos sofreram algum tipo de alterao, como, por exemplo, variao na quantificao do princpio ativo do comprimido quando executado por analistas diferentes. Discusso Para a apresentao de uma metodologia analtica por cdigos oficiais, necessrio que esta tenha sido devidamente validada a partir de uma amostra preparada especificamente para este fim. Este trabalho, uma vez selecionada a substncia, Captopril, que serviria de suporte para o estudo da validao, preocupou-se em analisar trs mtodos com caractersticas de qualidade e custos diferentes para os laboratrios farmacuticos.

Placebo (%) 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Mtodo Titulomtrico Amostra de Captopril (%) 78,06 78,02 78,09 99,62 100,69 100,94 118,53 119,75 117,49

Mtodo Espectrofotomtrico Amostra de Captopril (%) 81,94 81,15 81,42 101,10 103,77 100,81 120,30 120,97 116,94

Mtodo Cromatogrfico Amostra de Captopril (%) 79,37 83,61 75,97 100,72 100,01 100,20 119,75 120,09 121,42

Mtodo Cromatogrfico Amostra de Disulfeto de Captopril (%) 0,1315 0,1226 0,1065 0,1868 0,1708 0,1476 0,2152 0,1674 0,2118

amostra de placebo tambm foi analisada pelos trs mtodos, para a observao de possveis interferncias dos excipientes. A quantificao do placebo foi praticamente nula, valor este suficiente para inferir que no a necessidade de um estudo mais detalhado dos mtodos. Dispondo de uma amostra adequada, o analista deve escolher a tcnica (ou tcnicas) mais apropriada
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s determinaes de seu produto. Pode acontecer que o mtodo mais exato para a anlise seja demorado ou necessite de reagentes e equipamentos caros, como, por exemplo, a CLAE. Em alguns casos, pode ser indicada a escolha de outro mtodo que, embora menos exato, produza resultados satisfatrios num intervalo de tempo razovel e sendo ainda econmico, como o caso da titulometria e da espectrofotometria. O mtodo analtico titulomtrico de simples execuo, com utilizao de reagentes fceis de serem obtidos, sem necessidade de tratamento da amostra. Porm, no pode ser considerado um mtodo sensvel, uma vez que no permitiu a quantificao do Disulfeto de Captoril, um produto txico proveniente da degradao do Captopril. Com relao ao mtodo espectrofotomtrico, sua grande e fcil utilizao envolvendo a tcnica selecionada e o uso do equipamento pode justificar seu emprego, mas, tambm, este mtodo no permite a determinao do Disulfeto de Captopril. O mtodo cromatogrfico, alm de apresentar execuo de tcnica relativamente simples e ter o diferencial de ser o mtodo de melhor sensibilidade, permite a quantificao do Disulfeto de Captopril. O problema encontra-se no seu custo elevado. Em relao exatido dos mtodos titulomtrico, espectrofotomtrico e cromatogrfico os resultados foram aceitos, pois o atributo correspondeu em todos os casos, ficando somente para quatro amostras valores acima de 105%, que mesmo assim, esto dentro da faixa de especificao determinada pela metodologia seguida USP XXIV (90% a 110%). Contudo, quando analisados estatisticamente, os mtodos em relao aos valores que mais se aproximaram de 100%, o espectrofotomtrico e o cromatogrfico apresentaram maior variabilidade. Pode-se inferir que tal acontecimento deve-se, justamente, por estes mtodos apresentarem maior sensibilidade, necessitando, assim, que o analista tenha maior critrio na execuo das anlises. Os valores encontrados para a preciso nos trs mtodos foram considerados aceitveis, pois todos apresentaram um coeficiente de variao menor que 15%, ressaltando o mtodo cromatogrfico que apresentou melhores resultados. Neste atributo, tambm pode-se observar que medida que o mtodo tornou-se mais sensvel, maior a necessidade do operador em realizar a tcnica com afinco, de trabalhar com reagentes puros, de se controlar a temperatura e a umidade da sala e do equipamento, evitando todo e qualquer tipo de interferente na anlise. Com os dados da linearidade foi possvel observar que os trs mtodos quantificaram concentraes diferentes, apresentando coeficiente de
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correlao (r) maior que 0,99, significando, assim, que os mtodos podem ser considerados lineares. Em relao especificidade, o mtodo que melhor expressou tal atributo foi o cromatogrfico, pois se conseguiu identificar e quantificar mnimas quantidades do produto de degradao (Disulfeto de Captopril) presente no comprimido de Captopril, enquanto que, nos mtodos titulomtrico e espectrofotomtrico, somente foi possvel verificar a presena ou no de Captopril atravs da anlise de placebo. No atributo da robustez, pde-se verificar que, independente do mtodo, ocorreram pequenas variaes quando se mudou de analista ou de reagentes, porm essas alteraes no comprometeram a qualidade do mtodo. Na constante busca pela satisfao dos clientes internos e externos, destacam-se as empresas voltadas para o programa de Qualidade Total, cuja qualidade do processo uma das caractersticas de destaque. Para que o processo possa resultar em produto ou servio que corresponda a uma necessidade, utilizao ou aplicao que satisfaa o cliente, este deve atender as especificaes, estar disponvel e proporcionar lucro. Dessa forma, a validao um dos principais instrumentos da garantia de qualidade, tornando-se ultrapassada a idia de apenas control-la. Com este intuito, este trabalho proporcionou condies para se ter uma viso mais ampla da validao, em particular da validao de metodologia analtica. De uma maneira geral, os trs mtodos analticos poderiam ser adotados para a quantificao do Captopril, pois todos os atributos da validao analisados proporcionaram bons resultados. Porm, o mtodo cromatogrfico por CLAE pode ser considerado o melhor, tendo em vista que foi o nico capaz de identificar e quantificar o produto de degradao Disulfeto de Captopril presente nos comprimidos de Captopril, conforme especificao da USP XXIV (2000). Referncias
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Received on August 03, 2004. Accepted on November 29, 2004.

Acta Scientiarum. Health Sciences

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