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SEMINRIO DNA MITOCONDRIAL APLICAES NA MEDICINA FORENSE

Orientadora: Anna Maria Alunos: Agatha Christie Ana Cheyla Camila Arajo Carine Domingos Franciane Maximiana BIO 216 /Turma: 606

NDICE:

Introduo............................................................................. pg. 3

Principais atividades de um mdico legista....................... pg. 3

Uso forense do DNA............................................................. pg. 5

DNA mitocondrial................................................................. pg. 6

Regio hipervarivel.............................................................. pg. 8

Referncias Bibliogrficas................................................... pg. 10

Introduo:

Prtica forense a aplicao de tcnicas cientficas dentro de um processo legal. Essas prticas envolvem pesquisadores altamente especializados ou criminalistas que localizam vestgios. Mas esses vestgios s podem proporcionar provas conclusivas quando so testados em laboratrio. Alguns dos vestgios encontrados no podem ser vistos a olho nu. Hoje em dia, a cincia forense usa o teste de DNA nos julgamentos de acusaes mais complexas e srias: ex.: assassinatos. Como os criminosos desenvolveram vias cada vez mais criativas de driblar a lei. Mesmo que aparentemente eles no deixem pistas, os detetives descobriram h algum tempo que isto no verdade. A presena fsica sempre estar presente em um objeto, local ou at mesmo em outra pessoa. Hoje em dia os criminosos podem ser capturados por provas como, marcas de pegadas, balas de revlver, fibras, amostra de cabelos, sujeira de sapatos etc... Podem ser usados na investigao. De fato, quase qualquer coisa encontrada na cena do crime pode ser usada como prova, confirmando ou no a presena de um suspeito no local. reas de atuao e especialidades: Englobam diversas reas, nomeadamente a Tanatologia, a Toxicologia a Anatomia Patolgica, a Gentica e Biologia e a Psiquiatria.

Principais atividades de um mdico legista:


* Realizar o exame de corpo de delito em vtimas vivas ou mortas

* No caso de vtimas vivas, realizar a anlise dos ferimentos e elaborar laudo que auxilie na resoluo do processo que envolver o caso * No caso de vtimas mortas, o legista examina o cadver e os ferimentos, elaborando laudo que possa auxiliar na investigao do crime. A partir desse laudo possvel descobrir a arma utilizada no crime, se houve requintes de crueldade, caractersticas do criminoso etc. * Apresentar o laudo s autoridades competentes que, a partir da, podem trabalhar com esses resultados reas de atuao e especialidades

* Antropologia forense - estudo da identidade e identificao, como a datiloscopia, papiloscopia, irologia, exame de DNA, etc. * Traumatologia forense - estudo das leses e suas causas. * Asfixiologia forense - analisa as formas de asfixias, sejam acidentais ou criminosas, homicdios e autocdio (suicdio). * Sexologia forense - trata da Erotologia, Himenologia e Obstetrcia forense, analisando a sexualidade em sob trs aspectos: normalidade, patolgico e criminolgico. * Tanatologia estudo da morte e do morto.

* Toxicologia venenosas

estudo das substncias e txicas, seus

custicas, efeitos.

* Psicologia e Psiquiatria forenses - estudo da vontade e das doenas mentais. Pode-se assim vontade, as capacidades civil e penal. * Polcia cientfica - atua na investigao criminal. * Criminologia - estudo da gnese e desenvolvimento do crime. * Vitimologia - estudo da participao da vtima nos crimes. * Infortunstica - estudo das circunstncias que afetam o trabalho, como seus acidentes, doenas profissionais, etc...

Uso forense do DNA:


O DNA Forense usado hoje na esfera criminal, para a investigao criminal e na esfera civil, para investigao de paternidade. O DNA Forense aplicado na identificao de suspeito em caso de crimes sexuais (estupro, atentado violento ao pudor, ato libidinoso), identificao de cadver carbonizado, em decomposio, mutilado, abandonado; relao entre instrumento lesivo e vtima; investigao de paternidade, gravidez resultante de estupro; estudo de vnculo gentico: raptos, sequestros e trfico de menores; anulao de registro civil de nascimento.

DNA mitocondrial Sua utilizao na medicina forense

A identificao humana por meio do DNA constitui um dos produtos mais revolucionrios da Gentica Moderna. Em menos de 20 anos tornou-se uma ferramenta indispensvel na investigao criminal, sendo aceita rotineiramente em processos judiciais em todo o mundo. Sua importncia no est apenas na possibilidade de provar a culpabilidade de uma pessoa ou inocent- la, mas em estabelecer uma conexo irrefutvel entre a pessoa e sua presena na cena do crime. O perfil gentico de um indivduo, comumente utilizado na identificao humana, baseado na combinao de diversos marcadores que so herdados de seus progenitores. Esses marcadores so geralmente diferenas nas seqncias de DNA nuclear entre os indivduos (polimorfismos). Em alguns casos, entretanto, a anlise do DNA nuclear no pode ser aplicada. Isso ocorre quando o DNA da amostra apresenta-se degradado ou em situaes onde o material biolgico no apresenta o DNA nuclear, como em fragmentos de cabelo, por exemplo (SALAS; LAREU; CARRACEDO, 2001). Nestes casos, a nica alternativa, ou pelo menos a alternativa de maior sucesso, a anlise do DNA mitocondrial (DNA mt). No contexto da anlise forense, o interesse pelo DNA mt surgiu por vrios motivos: primeiro esse DNA tambm contm regies polimrficas que permitem sua individualizao; segundo, os descendentes recebem esse DNA apenas da me, o que permite traar a linhagem materna de uma pessoa; e, terceiro, mais resistente

degradao que o DNA nuclear, alm de estar presente em vrias cpias por clula. Assim, em grandes desastres (incndios, exploses, queda de avio, etc.), quando mais difcil identificar os corpos, analisa-se o DNA mt (ANJOS et al., 2004), que extrado dos restos mortais e a seqncia de interesse comparada com seqncias obtidas de irmos ou ascendentes maternos. Por causa do genoma mitocondrial ser haplide, ou seja, possui apenas a contribuio maternal, os diferentes DNA mts so ditos hapltipos. A seqncia completa do genoma mitocondrial (mt) humano foi determinada em 1981 por Anderson e colaboradores. Essa sequncia foi reanalisada e revisada por Andrews e colaboradores em 1999, sendo modificada e denominada Cambridge Reference Sequence (CRS). O genoma mt composto por 16.569 nucleotdeos e apresenta-se como uma dupla fita circular (Fig. 1). Uma fita rica em purinas (chamada fita-pesada) e a outra fita rica em pirimidinas (chamada fita- leve). Contm 37 genes, todos envolvidos na produo de energia e no estoque de ATP na clula. Treze desses genes codificam protenas envolvidas na fosforilao oxidativa. O restante dos genes codificam RNAs transportadores (22 genes) e RNAs ribossomais (2 genes).

FIG.1

A maior parte do genoma mt formado por genes. Entretanto, uma regio no codificadora de aproximadamente 1.200 nucleotdeos flanqueia a posio 0 do genoma e conhecida como regio controle, D-loop ou regio hipervarivel. A denominao de regio controle refere-se ao fato desta regio conter o sinal que controla a sntese de RNA e DNA. Dloop se refere fase inicial de replicao, quando a nova fita recm sintetizada se desprende da fita molde formando uma bolha ou loop. A seqncia da regio controle chamada hipervarivel porque acumula mutaes pontuais aproximadamente dez vezes mais comuns do que o DNA nuclear (BUDOWLE et al., 2003). Isso se deve baixa fidelidade da DNA 21 polimerase mitocondrial (um erro a cada 440.000 nucleotdeos) e perda do mecanismo dereparo no DNA mt (LEE; JOHNSON, 2006).

Regio hipervarivel
A regio hipervarivel do DNA mt de interesse para a identificao humana por causa do alto grau de polimorfismo na seqncia de nucleotdeos, e compreende trs segmentos da regio controle: HV1 (da posio 16024 a 16365), HV2 (da posio 73 a 340) e HV3 (da posio 438 a 574) (LUTZ et al. 2000) (Fig. 1). As duas primeiras regies so utilizadas na rotina forense, a terceira regio, entretanto, vem sendo explorada nos ltimos anos (BINI et al., 2003; VANECEK; VOREL; SIP, 2004; HOONG; LEK, 2005; ZHANG et al., 2005; LEE et al., 2006). A maioria dos laboratrios que utiliza a tipagem do DNA mt se baseia nos polimorfismos presentes na sequncia de nucleotdeos nas regies HV1 e HV2 comparando a amostra questionada com a sequncia referncia (CRS) para a anotao das diferenas (polimorfismos). A

sequncia da amostra questionada ento comparada com a da amostra referncia (do indivduo em questo ou de parentes com vnculo materno). Se essas sequncias diferirem em dois ou mais polimorfismos, uma excluso inequvoca pode ser feita. Se as sequncias corresponderem uma outra, existe a possibilidade da amostra questionada pertencer ao indivduo em questo ou demonstrar vnculo materno.

REFERNCIAS BIBLIOGRAFICAS:
www.seguranca.mt.gov.br/politec/3c/artigos/dna_mitocondrial.doc http://www.infoescola.com/genetica/dna-mitocondrial ANJOS, M. J. et al. Individual genetic identification of biological samples: a case of an aircraft accident. Forensic Sci. Int., v. 146S, p. S115S117, 2004. BINI, C.; PAPALARDO, D. mtDNA HVI length heteroplasmic profile in different tissues of maternally related members. Forensic Sci. Int., v. 152, n. 1, p. 35-8, 2005.