FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

DEPARTAMENTO ACADMICO DE CIENCIAS BSICAS PARASITOLOGA GUA DE PRCTICA

LIMA-PER 2011-II

PROPIEDAD INTELECTUAL: Departamento Acadmico de Ciencias Bsicas-USMP RESPONSABLE DE LA ASIGNATURA: Dra. Maritza M. Caldern Snchez GUIA ELABORADA POR: Dr. Juan A. Jimnez Chunga

2011-II
LIMA - PER

CONTENIDO Pginas

PRCTICA 1 ...................................................................................................................4 NORMAS DE BIOSEGURIDAD ......................................................................................4 PRCTICA 2 ...................................................................................................................8 MTODOS DE DIAGNSTICO PARASITOLGICO ....................................................8 PRCTICA 3 .................................................................................................................. 15 CARACTERSTICAS MORFOLGICAS DE PROTOZOARIOS Y HELMINTOS....... 15 PRCTICA 4 .................................................................................................................. 19 IDENTIFICACIN DE AMEBAS INTESTINALES. ..................................................... 19 PRCTICA 5 .................................................................................................................. 25 IDENTIFICACIN DE FLAGELADOS Y CILIADOS INTESTINALES....................... 25 PRCTICA 6 .................................................................................................................. 28 IDENTIFICACIN DE ESPOROZOARIOS INTESTINALES Y TISULARES.............. 28 PRCTICA 7 .................................................................................................................. 33 IDENTIFICACIN DE FLAGELADOS HEMTICOS, TISULARES Y DEL APARATO GENITOURINARIO ....................................................................................................... 33 PRCTICA 8 .................................................................................................................. 37 IDENTIFICACIN DE ESPOROZOARIOS HEMTICOS............................................ 37 PRCTICA 9 .................................................................................................................. 40 IDENTIFICACIN DE TREMTODES ........................................................................ 40 PRCTICA 10-11 ........................................................................................................... 44 IDENTIFICACIN DE CSTODES INTESTINALES Y TISULARES.......................... 44 PRCTICA 12- 13 .......................................................................................................... 49 IDENTIFICACIN DE NEMTODOS INTESTINALES .............................................. 49 PRCTICA 14-15 ........................................................................................................... 55 IDENTIFICACIN MORFOLGICA DE ARTRPODOS ........................................... 55 APNDICE ..................................................................................................................... 62 GLOSARIO ..................................................................................................................... 82 REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS .............................................................................. 86

PRCTICA 1 NORMAS DE BIOSEGURIDAD

I. INTRODUCCIN La bioseguridad es un conjunto de medidas probadamente eficaces para evitar la adquisicin accidental de infecciones con patgenos contenidos en las muestras, as como los riesgos relacionados con la exposicin a agentes qumicos, fsicos y/o mecnicos a los que est expuesto el personal en los laboratorios. Slo si las personas que trabajan en los laboratorios conocen las normas de bioseguridad y las aplican, pueden determinar su propia seguridad, la de sus compaeros y de la colectividad. El personal de laboratorio debe cumplir con las normas de bioseguridad y los directivos de la institucin deben cumplir con brindar las facilidades para que stas sean aplicadas. Conocer las principales normas para proteger la salud de las personas que puedan estar expuestas a riesgos relacionados con la exposicin a agentes biolgicos, qumicos, fsicos, y otros en los laboratorios de ensayos, biomdicos y clnicos. II. AGENTES DE RIESGO El personal de laboratorio diariamente realiza muchas actividades que pueden causar enfermedad o dao en l o en las personas que trabajen en ambientes cercanos, e incluso en sus familiares y la comunidad. Estas enfermedades pueden ser causadas por: - Agentes biolgicos, transmitidos por ingestin, inhalacin, inoculacin y por contacto directo a travs de piel o mucosas. - Agentes fsicos y mecnicos, como las temperaturas extremas, radiaciones ionizantes, contactos elctricos o conexiones defectuosas y vidrios resquebrajados de recipientes daados o tubos rotos. - Agentes qumicos que pueden ser corrosivos, txicos, carcinognicos, inflamables, explosivos. III. PRINCIPIOS BSICOS DE BIOSEGURIDAD El trmino contencin se utiliza para describir mtodos seguros para manejar materiales infecciosos en el ambiente de laboratorio donde son manipulados o conservados. El objetivo de la contencin es reducir o eliminar la exposicin de quienes trabajan en laboratorios u otras personas y del medio ambiente externo a agentes potencialmente peligrosos. IV.NIVELES DE CONTENCIN El elemento ms importante de la contencin es el cumplimiento estricto de las prcticas y tcnicas microbiolgicas estndar de procesamiento de las muestras de laboratorio. Cuando las prcticas de laboratorios no son suficientes para controlar los riesgos asociados a un agente o a un procedimiento de laboratorio particular, es necesario aplicar medidas adicionales. Estas medidas adicionales corresponden a los equipos de seguridad diseados para la proteccin del personal y prcticas de manejo adecuadas (barrera primaria), un diseo de la instalacin y caractersticas de la infraestructura de los locales (barrera secundaria). Estos niveles estn definidos de la siguiente manera:

Contencin Primaria: Constituyen la primera lnea de defensa cuando se manipulan materiales biolgicos, qumicos y/o fsicos. Las barreras de contencin primaria son: - Equipos de proteccin personal (EPP). - Tcnicas de laboratorio estndar y normas de higiene personal. - Inmunizacin (vacunacin). - Esterilizacin y desinfeccin de instrumentales y superficies. Es la proteccin del personal y del medio ambiente inmediato contra la exposicin a agentes infecciosos y/o productos qumicos de riesgo. Es provista por una buena tcnica microbiolgica y el uso apropiado del equipo de seguridad. El uso de vacunas aumenta el nivel de proteccin personal. Contencin secundaria: Se refiere al diseo y construccin de un laboratorio, lo que en seguridad biolgica se conoce como contencin o barrera secundaria, contribuye a la proteccin del personal de laboratorio, personas que se localizan fuera del laboratorio y protege a las personas de la comunidad frente a posibles escapes accidentales de agentes infecciosos. Los modos de transmisin en el laboratorio pueden ser insidiosos y algunas veces complicados, debido a que los vehculos y rutas de transmisin difieren de los modos clsicos. El personal de Laboratorio esta frecuentemente expuesto a niveles muy altos de los agentes infectantes, por lo que los periodos de incubacin pueden ser mas cortos que los del mismo tipo de infeccin provocada por una exposicin corriente. TIPOS DE LABORATORIO CON RELACIN AL NIVEL DE BIOSEGURIDAD (NBS) NBS 1: El personal de laboratorio cuenta con una capacitacin especfica acerca de los procedimientos realizados en el laboratorio y es supervisado por una persona con capacitacin general en microbiologa o una ciencia relacionada. Adecuado para agentes biolgicos del grupo 1. NBS 2: Se aplican normas similares al NBS 1 y es adecuado para trabajos que involucran agentes biolgicos de riesgo 2 con potencial moderado para el personal y el medio ambiente. NBS 3: Es aplicable a las instalaciones clnicas, de diagnstico, enseanza, investigacin o produccin en las que se llevan a cabo trabajos con agentes biolgicos del grupo 3 que pueden producir una enfermedad grave o potencialmente como resultado de la exposicin por va de inhalacin. NBS 4: Debe aplicarse para trabajar con agentes peligrosos y exticos que poseen un riesgo individual alto de producir infecciones de laboratorio transmitidas por aerosoles y enfermedades mortales. El laboratorio de nivel de bioseguridad 4 tiene caractersticas especiales de ingeniera y diseo para evitar la diseminacin de los microorganismos en el medio ambiente. Este NBS permite manipular agentes biolgicos del grupo 4.

CLASIFICACIN DE LOS MICROORGANISMOS POR GRUPO DE RIESGO Agente biolgico del grupo 1 Es poco probable que cause una enfermedad en el hombre. Es decir, los que no producen enfermedad en el ser humano y de susceptibilidad conocida y estable a los antimicrobianos. Ejemplo: E. coli K12, Saccharomyces cerevisiae, microorganismos que se utilizan en la industria de la alimentacin para la elaboracin de quesos, embutidos, entre otros. Agente biolgico del grupo 2 Puede causar una enfermedad en el hombre y puede suponer un peligro para los trabajadores, siendo poco probable que se propague a la colectividad y existiendo generalmente profilaxis o tratamiento eficaz. Como algunos que, perteneciendo a la propia flora habitual del hombre, son capaces de originar patologa infecciosa humana de gravedad moderada o limitada. Ejemplo: Staphylococcus epidermidis, Salmonella sp, entre otros. Agente biolgico del grupo 3 Puede causar una enfermedad grave en el hombre y presenta un serio peligro para los trabajadores, con riesgo de que se propague a la colectividad y existiendo frente a l generalmente profilaxis o tratamiento eficaz. Implican patologa grave, de difcil y largo tratamiento, que pueden curar con secuelas y ocasionalmente producir la muerte. El mayor y ms frecuente peligro que entraan stos es la infeccin adquirida a travs de aerosoles y por fluidos biolgicos. Ejemplo: M. tuberculosis, Brucella sp, Coxiella burneti, Influenza A N1H1, entre otros. El laboratorio debe tener caractersticas de diseo e ingeniera especiales. Sin embargo, se reconoce que algunas instalaciones existentes pueden no presentar todas las caractersticas recomendadas para el nivel de bioseguridad 3 (por ejemplo, zona de acceso con doble puerta y penetraciones selladas). En esta circunstancia, se puede lograr un nivel de seguridad aceptable para la prctica de procedimientos de rutina. La decisin de implementar esta modificacin a las recomendaciones del nivel de bioseguridad 3 debe solamente tomarla el coordinador o jefe del laboratorio. Agente biolgico del grupo 4 Aquel que causando una enfermedad grave en el hombre supone un serio peligro para los trabajadores, con muchas probabilidades de que se propague a la colectividad y sin que exista generalmente frente a l profilaxis o tratamiento eficaz. Normalmente son microorganismos de dosis infectiva baja y altamente contagioso. Ejemplo: Arenavirus como el que produce la fiebre de Lassa, Machupo, Ebola, Hantavirus y el VIH.

PRECAUCIONES DE TRABAJO 1. Las puertas del laboratorio debern estar cerradas y el acceso al mismo deber estar restringido mientras se lleven a cabo trabajos con materiales biolgicos. La puerta deber portar emblemas que digan: "Prohibido pasar, Peligro biolgico". El laboratorio deber ser mantenido limpio, ordenado y libre de materiales extraos. No se permitir comer, beber, fumar y/o almacenar comidas as como el uso de cualquier otro tem personal (Ej. cosmticos, cigarrillos) dentro del rea de trabajo. Usar bata, chaqueta o uniforme dentro del laboratorio. Esta ropa protectora deber ser quitada inmediatamente antes de abandonar el rea de trabajo. Antes de iniciar la tarea diaria asegrese que la piel de sus manos no presente cortes, raspones y otras lastimaduras, en caso que as sea cubrir la herida de manera conveniente antes de colocarse los guantes. Usar guantes de ltex de buena calidad para todo manejo de material biolgico o donde exista aunque sea de manera potencial el riesgo de exposicin a sangre o fluidos corporales. Cambiar los guantes de ltex toda vez que hayan sido contaminados, lavarse las manos y ponerse guantes limpios. Una vez usados los guantes de ltex debern ser colocados dentro del recipiente con solucin decontaminante. No tocar los ojos, nariz o piel con las manos enguantadas. No abandonar el laboratorio o caminar fuera del lugar de trabajo con los guantes puestos. El uso de agujas, jeringas y cualquier otro instrumento similar deber ser restringido a su uso indispensable. Las agujas y otros elementos punzantes debern ser descartados en un recipiente resistente y destinado a tal fin. Todas las muestras deben ser tratadas como altamente infecciosas para evitar posibles contagios. Los procedimientos debern ser realizados de manera tal que sea nula la creacin de aerosoles, gotas, salpicaduras, etc. Bajo ninguna circunstancia se pipetear sustancia alguna con la boca, para ello se usarn pipeteadores automticos. Las superficies del rea de trabajo debern ser decontaminadas cuando se termine la tarea diaria. Usando para tal efecto una solucin de hipoclorito de sodio en concentracin adecuada. El recipiente para decontaminar especimenes deber contar con tapa de seguridad para todo traslado fuera del lugar de trabajo. En ese caso el exterior del recipiente deber ser mantenido libre de toda contaminacin con sangre usando solucin decontaminante. El desecho de los fluidos orgnicos puede efectuarse por las caeras habituales una vez que estos hayan sido convenientemente decontaminados. Lavar las manos con jabn (lquido o slido suspendido) y agua inmediatamente despus que el trabajo haya sido terminado. Si los guantes de ltex estn deteriorados, lavar las manos con agua y jabn despus de quitarlos. Informe inmediatamente a su superior de cualquier accidente ocasionado con elementos del laboratorio.

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PRCTICA 2 MTODOS DE DIAGNSTICO PARASITOLGICO

I. INTRODUCCIN Puesto que el diagnstico de la parasitosis intestinal depende del hallazgo de huevos o larvas de helmintos y quistes o trofozotos de protozoos en heces, la coleccin y el manejo adecuado de las muestras son indispensables para la bsqueda e identificacin de los parsitos en el laboratorio. Son factores que interfieren en el examen, la ingestin de medicamentos previa a la coleccin y las muestras viejas o conservadas en forma inadecuada. La cantidad de heces para un examen rutinario es del tamao de una nuez o de cinco a seis cucharadas. Las muestras se depositan en un recipiente de boca ancha, con tapa hermtica y limpia, no debe contaminarse con agua, orina o cualquier otro material extrao; no debe obtenerse de la taza del ba, ni del suelo. En lactantes, la muestra se obtiene mediante la cucharilla recta. Las muestras deben ser etiquetadas con el nombre del paciente, hora de coleccin y fecha. Generalmente se recomienda examinar tres muestras en serie y en das sucesivos. Las heces blandas, diarreicas y lquidas, deben examinarse dentro de las primeras horas de haber sido colectadas, si esto no es posible, las heces deben depositarse en una solucin conservadora. Ej.: Formol 10%, alcohol polivinilico (PVA), merthiolate yodo (MIF) o fenol-alcohol-formol (PAF). Las heces formadas pueden ser examinadas durante el mismo da de su coleccin. Si no es posible pueden ser refrigeradas durante 24 horas o conservadas (una parte de material fecal por tres de la solucin conservadora). DIAGNSTICO 1. Examen directo Principalmente se busca en muestras frescas, la presencia de formas evolutivas de parsitos de tamao microscpico sean estos trofozotos, quistes de protozoos: Entamoeba histolytica, Giardia duodenalis, Balantidium coli, etc.; as como larvas (Strongyloides stercoralis), o huevos de helmintos: Ascaris lumbricoides, Trichuris trichiura, Hymenolepis nana, Taenia sp., Fasciola hepatica, etc.). Elementos normales: En un examen microscpico suelen encontrarse como elementos normales estructuras reconocibles y otras no, fruto de la ingestin de alimentos. Las ms frecuentes son: Fibras vegetales, Cristales de oxalato de calcio,Granos de almidn, esporas de hongos, fosfato amnicomagnesio, granos de polen, fibras musculares lisas, fibras musculares estriadas, cristales de cidos grasos, grasa neutra, abundantes bacteria. II. MATERIALES Muestras de heces frescas/fijadas en formol 10% Lmina portaobjeto y laminilla cubreobjeto. Mondadientes Guantes y mascarillas Suero fisiolgico (SF) 0.85% Lugol Papel lente Frasco con desinfectante para descartar material (clorox, fenol, lugol) Microscopio de luz

Procedimiento 1. Recolecte la muestra de heces en un envase limpio y tpela. Asegrese de no mezclar papel higinico u orina con la muestra. 2. Transporte la muestra hasta el laboratorio a temperatura ambiente. 3. Coloque una gota de salina en una lmina portaobjeto. 4. Aada una cantidad pequea de muestra de heces utilizando un aplicador de madera y mzclela con la solucin salina. Proceda igual agregando lugol. 5. Site un cubreobjetos sobre la muestra y examine bajo el microscopio (10X 40X). 6. Evalu la muestra y determine si hay parsitos presentes. El diagnstico definitivo se logra demostrando la presencia de parsitos. En algunas ocasiones es necesario hacer exmenes repetidos en das consecutivos antes de establecer que la muestra est negativa. Esquema:

SF

Lugol

Movilidad (Trofozotos)

Tincin Vacuolas Ncleos

2. Mtodos de concentracin Este mtodo permite concentrar quistes de protozoarios, larvas y huevos de helmintos contenidos en las heces, para obtener una mayor cantidad de parsitos mediante centrifugacin, sedimentacin, o flotacin. Las ms usadas son Sedimentacin espontnea, Ritchie, Willis, Faust, entre otras. A. Mtodos de Flotacin Tcnica de Willis Este mtodo se basa en la propiedad que tiene algunos quistes de protozoarios y huevos de helmintos de flotar en la superficie de una solucin saturada de cloruro de sodio debido a su menor densidad. Material Muestra de heces fresca. Tubo de ensayo y gradillas Lmina portaobjeto y cubreobjeto. Guantes y mascarillas Solucin saturada de Cloruro de sodio (NaCl) Frasco con desinfectante para descartar material (clorox, fenol, lugol) Lugol. Microscopio de luz.

Procedimiento Colocar en un tubo de prueba uno o dos gramos de heces. Aadir 4 ml de solucin saturada de NaCl. Emulsionar con una bagueta y completar con la misma solucin el tubo hasta que en el borde se forme un menisco, djelo reposar durante 20 minutos. Se toma la muestra cubriendo el tubo con un cubreobjeto, en el se adhieren los protozoarios. Hacer una observacin microscpica de la muestra en una lmina con lugol. B. Mtodo de centrifugacin y flotacin Tcnica de Faust modificada Se basa en que los quistes y/o huevos de los parsitos flotan en la superficie por ser de menor densidad que el sulfato de zinc a 33,3%, cuya densidad es 1180. Es til para la bsqueda de quistes y/o huevos de parsitos y excepcionalmente se observan larvas. Se recomienda controlar la densidad del sulfato de zinc y usar agua filtrada para el lavado previo de la muestra. Materiales Tubo de ensayo 13 x 100 mm Gradillas Sulfato de Zinc USP 33,3 g Agua destilada tibia 100 ml Muestra de heces frescas Guantes y mascarillas Frasco con desinfectante para descartar material (clorox, fenol, lugol) Lugol Microscopio de luz Procedimiento 1. Preparar una suspensin fecal en un tubo de prueba, completar el volumen a 10 ml con agua destilada. 2. Centrifugar a 2500 RPM durante un minuto y decantar el sobrenadante; repetir el procedimiento anterior tres veces (hasta que el sobrenadante este claro). 3. Agregar la solucin de sulfato de zinc 2 ml, mezclar bien y completar con la misma solucin. 4. Centrifugar a 2500 RPM. 5. Luego con un asa de platino tomar una o dos asadas del material flotante (superficie) y colocarlo una lmina portaobjeto. 6. Agregar una gota de lugol y cubrir la preparacin con una laminilla cubreobjeto 7. Observar al microscopio.

Pelcula superficial

Sulfato de Zinc

Sedimento de parsitos

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C. Mtodo de concentracin: Ritchie Se basa en la concentracin de quistes y huevos por sedimentacin mediante la centrifugacin, con ayuda de formol (fijador) y ter (disuelve las grasas de las heces) para separar y visualizar los elementos parasitarios. Procedimiento: 1. Se mezcla 1 g de heces con 8 ml. de solucin salina en un tubo. Homogenizar. Centrifugar a 2000 RPM (revoluciones por minuto) por 2-3 minutos y decantar (repetir 2 veces, hasta que el sobrenadante este claro). 2. Decantar el sobrenadante y agregar al sedimento 6 ml. de formol al 10%. Homogenizar. Reposar 5 minutos. 3. Luego se agrega 3 ml. de ter sulfrico y se agita con cuidado (usar un tapn). 4. Centrifugar 3 min. a 3000 RPM. 5. Se rompe la capa de detritus y se decanta. 6. Se toma una gota del sedimento y se prepara el examen directo con lugol.

ter Restos Lpidos disueltos(detritus) Formalina

Sedimento Parsitos

D. Tcnica de Graham Se usa para la bsqueda de huevos de Enterobius vermicularis y consiste en aplicar el lado adhesivo de un pedazo de cinta sobre el rea peri anal, despegar el mismo y volver a pegarlo sobre la lmina portaobjeto. En el laboratorio, se desprende la cinta engomada del frotis peri anal por un extremo, se agrega solucin de tolueno, hidrxido de sodio 2% o solucin salina, aplicando 1 2 gotas de la sustancia elegida que clarificar la muestra y que permitir una mejor observacin de los huevos y/o adultos de E. vermicularis. Es necesario observar la lmina en su totalidad. Observar al microscopio, huevos de otros helmintos, principalmente huevos de Taenia sp., Ascaris lumbricoides, Trichuris trichiura entre otros.

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3. MTODOS DIAGNSTICOS DE HEMO E HISTOPARSITOS Despus de las heces, la sangre es la muestra ms estudiada. La presencia de parsitos puede no ser constante.Los mtodos estndar ms empleados son: Extensin fina y preparacin de gota gruesa. Otras posibilidades: Extensin en fresco, Movilidad (Trypanosomas).Familiarizar al estudiante con las diferentes tcnicas de deteccin directa para el diagnstico de hemo e histo-parsitos. MTODOS DE EXAMENES PARA INVESTIGACIN DE PARSITOS HEMTICOS Para estos exmenes se utiliza sangre extrada del pulpejo del dedo o de la vena en este caso se debe utilizar con anticoagulante y las preparaciones pueden ser hechas en extensin o frotis en gota gruesa. Frotis Se prepara de modo que las clulas sanguneas se dispongan planas sobre la superficie del vidrio. Se pretende que las clulas no se amontonen, que su espesor no supere una clula. Todos los elementos quedan un poco aplanados ( tamao). Las protenas sricas (incluyendo la hemoglobina) deben fijarse previamente Estas preparaciones son muy tiles para estudiar detalles de hemates y parsitos sanguneos. Principal limitacin: Escasa cantidad de sangre estudiada. Gota gruesa Contiene entre 6-20 veces ms cantidad de sangre que la extensin. Se extiende sobre un rea de aproximadamente 15 x 12 mm. No se fija antes de la tincin. Se somete a un tratamiento de deshemoglobinizacin. La rotura de los hemates y la prdida de su hemoglobina permite la observacin microscpica de otras estructuras, incluyendo parsitos. Resulta til para diagnstico rpido de parasitemias leves. No es muy adecuado para estudios morfolgicos finos.

Importante: Portaobjetos limpios y bien desengrasados. Sangre fresca. Puncin dedo. Puncin lbulo de la oreja. Puncin venosa Realizacin inmediata. Realizacin extensin. Secado al aire Eventualmente estufa 37 C. Fijacin (previa a tincin) o no.

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Coloracin de frotis con colorante Wright - Cubra el frotis con el colorante. - Djelo actuar 1 o 2 minutos (El alcohol metlico que es el disolvente del colorante acta como fijador) - Luego agregue una gota de agua taponada y sin que se derrame mezcle bien soplando suavemente, deje reposar de 5 a 7 minutos, - Lavar con chorro dbil de agua corriente y djese secar. - Observar con objetivo de inmersin y aceite de inmersin. Coloracin de gota gruesa - Para colorear con Wright, la preparacin debe ser previamente hemolizada, para lo cual a la preparacin ya seca, se le agrega agua y se deja un tiempo hasta que toda la hemoglobina de los glbulos pase al agua. - Verter el agua suavemente y dejar secar. - Colorear en la forma indicada para el frotis. - Si se usa el colorante Giemsa, se sumerge el portaobjeto en el colorante, sin hemlisis previa, luego del tiempo necesario (variable segn el colorante) se lava con cuidado y se deja secar.

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ESQUEMAS (PRCTICA 2)

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PRCTICA 3 CARACTERSTICAS MORFOLGICAS DE PROTOZOARIOS Y HELMINTOS

I. INTRODUCCIN Los parsitos intestinales se identifican rutinariamente por sus caractersticas morfolgicas en los anlisis de laboratorio de la materia fecal, conocidos como examen coprolgico, mediante observacin microscpica en montajes hmedos con solucin salina o con solucin de lugol como colorante. Tambin se pueden hacer extendidos para realizar posteriormente coloraciones permanentes, como la coloracin de hematoxilina frrica o la coloracin tricrmica de Gomori, los cuales facilitan la identificacin al revelar detalles estructurales no detectables en los montajes hmedos. En algunos casos se pueden tomar biopsias intestinales para identificar la patolgia producida por el parsito y observarlo en el tejido, en este caso se puede utilizar la coloracin de hematoxilina-eosina, que aunque no es una coloracin especifica para parsitos permite detectar algunos detalles del parsito buscado. Los protozoos intestinales se presentan generalmente bajo tres formas de vida: 1. 2. El trofozoito o forma vegetativa, que generalmente es el que produce la patologa. El quiste o forma de resistencia que desarrolla el parsito para poder sobrevivir en condiciones adversas. El prequiste que es una forma intermedia.

3.

Todos los protozoos que se transmiten por va oro-fecal presentan formas qusticas, mientras los que se transmiten por contacto ntimo o por vectores, generalmente no presentan esta forma de resistencia. En el intestino humano se pueden encontrar protozoos patgenos y protozoos comensales, la aparicin de estos ltimos puede deberse a varios factores como son las condiciones de salubridad e higiene y factores inmunolgicos; su aparicin, aunque no amerita tratamientos para su erradicacin, puede dar una idea de estas condiciones en los pacientes, por lo tanto en los anlisis de laboratorio generalmente se informa su presencia.

II. MATERIAL Heces frescas/fijadas en formol 10% Lminas coloreadas con hematoxilina frrica, tricromica de Gomori de frotis de heces Pipetas, baguetas, guantes, mascarilla Suero fisiolgico 0.85% y lugol Aceite de inmersin, lminas portaobjeto y laminillas cubreobjeto Frasco con desinfectante para descartar material (clorox, fenol, lugol) Microscopio de luz Papel lente

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III. CARACTERSTICAS DE ALGUNOS PARSITOS INTESTINALES Conocer microscpicamente las caractersticas morfolgicas de los principales parsitos del intestino humano en extendidos de materia fecal en montaje hmedo. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. Quiste de Entamoeba coli Quiste de Endolimax nana Quiste de Iodamoeba butschlii Quiste de Chilomastix mesnili Quiste de Giardia duodenalis Quiste de Blastocystis hominis Huevo de Fasciola hepatica. Huevo de Taenia sp. Huevo de Hymenolepis nana Huevo de Ascaris lumbricoides Huevo de Trichuris trichiura Huevo de Enterobius vermicularis Huevo de Ancylostoma duodenale y/o Necator americanus (uncinarias) Huevo de Diphyllobothrium sp. Larva de Strongyloides stercoralis

Observacin a 100X y 400X de aumento. 1. Entamoeba coli: en los quistes, de mayor tamao de 10 a 35 micras (m) de dimetro con ms de cinco ncleos y presencia, en ocasiones de barras cromidiales finas como astillas en el citoplasma. En las preparaciones teidas con lugol se suele apreciar vacuolas yodfilas. 2. Endolimax nana: El quiste oval o redondeado de 8-10 m de tamao, generalmente, presenta cuatro ncleos. La preparacin teida con lugol permite observar los ncleos como puntos ms brillantes. 3. Iodamoeba butschlii: El trofozoto mide de 8 a 20 micras y el quiste de 5 a 14 m. En las preparaciones teidas con hematoxilina frrica o Gomorri-Trichrome se observa una vacuola vaca en el citoplasma y el ncleo presenta una cariosoma grande que emite fibrillas hacia la membrana nuclear. En la preparacin teida con lugol, la vacuola se aprecia teida (color marrn) debido a su contenido de glicgeno (vacuola yodfila). 4. Giardia duodenalis: El quiste es ovalado y mide de 10 a 12 m en su dimetro mayor, en las preparaciones teidas con lugol, tiene una membrana qustica doble y se distinguen de dos a cuatro ncleos, el axostilo y en ocasiones los cuerpos parabasales. 5. Chilomastix mesnili: El quiste tiene forma redondeada con una prominencia que lo asemeja a un limn y mide de 6 a 10 m, presenta doble membrana y en su interior se observa los elementos descritos en el trofozoto. 6. Blastocystis hominis: Mide alrededor de 8-10 m. Presenta gran vacuola central que ocupa el 50 a 95% de las clulas y restringe el citoplasma a un espacio perifrico que contiene los ncleos en nmero de 2 a 5 (Figura 1).

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7. Ascaris lumbricoides: Huevo: forma ovalada con cubierta mamelonada. Identificar huevo: Frtil, infrtil, decorticado. 8. Trichuris trichiura: Huevo: de forma elptica, de color parduzco cuya dimensin alcanza de 40 a 50 m en su dimetro mayor. Presentan una envoltura gruesa y con tapones en ambos polos. 9. Enterobius vermicularis: Huevos: distinga la forma plana-convexa a cada lado y el tamao que alcanza de 50 a 60 m de largo por 20 a 30 m de ancho; en el interior reconozca la larva. 10. UNCINARIOSIS: Infeccin intestinal producida por los nematodos Ancylostoma duodenale y Necator americanus, conocidos como anquilostomoideos; se localizan en el intestino delgado del hombre sobre todo en el yeyuno. a. El trmino uncinaria se refiere a la curvatura del extremo anterior a manera de gancho, con cpsula bucal con dientes (Ancylostoma) o placas cortantes (Necator). b. Ancylostoma duodenale y Necator americanus: Huevo: de uncinarias de forma oval, con cscara delgada y traslcida y con blastmeros; miden de 60 a 70 m por 30 a 40 m. 11. Taenia sp: Huevo: de forma esfrica, de 35 a 40 m de tamao, con una cscara gruesa y radiada conteniendo un embrin hexacanto u oncsfera en este distinga los ganchos. 12. Diphyllobotrium sp: Huevo: de forma ovalada y distinga en ellos la cubierta gruesa y en uno de sus polos el oprculo. Los huevos de D. pacificum miden 5060 x 36-40m, ms pequeas que D. latum (59-75 x 42-45m). 13. Hymenolepis nana : Huevo: de 30 a 40 m de dimetro, que se caracteriza por presentar corteza gruesa, transparente, membranas, provista de dos mamelones polares de donde nacen tres pares de filamentos, contiene un embrin hexacanto con ganchos dispuestos en paralelo. 14. Fasciola heptica: Huevo de 120 a 150 m, de forma ovalada, con cubierta gruesa y en uno de sus polos el oprculo. 15. Strongyloides stercolaris: Larva rabditoide: OBSERVE en preparados de heces larvas de 200 m de longitud; en la parte anterior localice cpsula bucal corta y un esfago con un bulbo posterior (Figura 2).

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ESQUEMAS (PRCTICA 3)

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PRCTICA 4 IDENTIFICACIN DE AMEBAS INTESTINALES.

I. INTRODUCCIN Son seis amebas del gnero Entamoeba las que pueden parasitar el lumen intestinal del hombre: Entamoeba histolytica, Entamoeba dispar, Entamoeba mohkovskii, Entamoeba polecki, Entamoeba coli y Entamoeba hartmanni. De estas solo E. histolytica es reconocida como patgena, las otras especies son consideradas no patgenas (Figura 3). AMEBA PATGENA Entamoeba histolytica Caractersticas morfolgicas Presenta dos formas evolutivas: Trofozoto: viven en el intestino grueso del ser humano pudiendo invadir y atravesar la mucosa intestinal. Mide de 15 a 30 m El trofozoto ameboideo con membrana citoplasmtica, un citoplasma dividido en una parte externa hialina y transparente casi sin granulaciones (ectoplasma) y otra interna muy granulada con orgnulos celulares (endoplasma). El ncleo es esfrico y con cromatina muy pequea en el centro (puntiforme), llamado cariosoma. Adems presenta cromatina adherida a la cara interna de la membrana nuclear, distribuida en forma ms o menos homognea. Quiste: forma de resistencia, se eliminan al exterior con las heces. El quiste maduro tetranucleado es la forma infectante y mide de 10 a 20 m de dimetro. Los estadios de prequiste con 1-2 ncleos con las caractersticas nucleares descritas en la forma vegetativa y cuerpos cromidiales con extremos romos. Diagnstico parasitolgico Examen microscpico de muestra de heces, para demostrar la presencia de trofozotos o quistes mediante el examen directo de la muestra en solucin salina, lugol o coloracin (tricrmica de Gomori o hematoxilina frrica) o su demostracin en biopsia de la mucosa intestinal o heptica. AMEBAS NO PATGENAS Entamoeba coli Caractersticas morfolgicas Se ubica en el ciego y colon y su incidencia es muy alta. Trofozoto de 15-50 m. Rango usual 20-25 m. Coloreado con hematoxilina frrica: citoplasma granular indiferenciado. Bacterias en las vacuolas alimenticias. Diagnstico: ncleo con aglomeraciones irregulares de cromatina perifrica, con cariosoma grande y de posicin excntrica. Quiste: De 10-35 m. Rango usual de 12-15 m. Redondeados u ovales con doble envoltura. Ocho ncleos como mximo, visibles fcilmente. En los quistes inmaduros se observan los cuerpos cromidiales en forma de aguja y haces de extremos irregulares. Vacuolas de glicgeno e color caoba al teirse con lugol. Diagnstico parasitolgico Examen microscpico de muestra de heces, para demostrar la presencia de trofozotos o quistes mediante el examen directo de la muestra en solucin salina, lugol o coloracin (tricrmica de Gomori o hematoxilina frrica). Iodamoeba butschlii

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Caractersticas morfolgicas Ubicada en el intestino grueso del hombre. Quiste: mide de 5-20 m, presenta una vacuola, de bordes irregulares, de glucgeno. Posee un ncleo nico relegado a una posicin lateral por la vacuola caracterizada por carecer de cromatina perifrica con cariosoma grande central de bordes irregulares. Diagnstico parasitolgico Examen microscpico de muestra de heces, para demostrar la presencia de quistes mediante el examen directo de la muestra en solucin salina, lugol o coloracin (tricrmica de Gomori o hematoxilina frrica). Endolimax nana Caractersticas morfolgicas Es la ameba ms pequea del intestino. Quiste: Mide de 5-14 m. Presenta cuatro ncleos sin cromatina perifrica y con un gran cariosoma ubicado hacia un lado del ncleo. Diagnstico parasitolgico Examen microscpico de muestra de heces, para demostrar la presencia de quistes mediante el examen directo de la muestra en solucin salina, lugol o coloracin (tricrmica de Gomori o hematoxilina frrica). Blastocystis hominis Caractersticas morfolgicas Es un protozoario que habita el intestino del hombre y de otros animales. Asociado a sintomatologa gastrointestinal inespecfica. Posee pseudpodos de locomocin y de alimentacin; se multiplica por fisin binaria, endodiogenia, esquizogonia. Presenta tres formas morfolgicas diferentes: vacuolar, granular y ameboide. Diagnstico parasitolgico Mide alrededor de 8-10 m. Presenta gran vacuola central que ocupa el 50 a 95% de las clulas y restringe el citoplasma a un espacio perifrico que contiene los ncleos en nmero de 2 a 5. II. MATERIAL Muestras de heces fijadas en formol 10% con quistes de amebas Laminas portaobjeto Laminillas cubreobjeto Lugol Frasco con desinfectante para descartar material (clorox, fenol, lugol) Guantes y mascarillas Lminas coloreadas con hematoxilina frrica o tricrmica: Entamoeba histolytica (quiste y trofozoto), Entamoeba coli, (quiste y trofozoto), Iodamoeba butschlii, (quiste y trofozoto), Endolimax nana, (quiste y trofozoto), Blastocystis hominis (quiste). Aceite de inmersin Papel lente Microscopio de luz

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ESQUEMAS (PRCTICA 4)

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AMEBAS DE VIDA LIBRE I. INTRODUCCIN Las amebas de vida libre se encuentran ampliamente distribuidas en la naturaleza, siendo multitud las especies aisladas de la tierra, aire, aguas tratadas para consumo, agua de mar o lagos de aguas termales. Son capaces de producir enfermedades en el hombre como la meningoencefalitis amebiana aguda o primaria (Naegleria fowleri) y la meningoencefalitis amebiana crnica o granulomatosa (Acanthamoeba castellani y Balamuthia mandrilaris) (Figura 4). Acanthamoeba castellani y Balamuthia mandrilaris Caractersticas morfolgicas Acanthamoeba castellani se caracteriza por presentar dos formas morfolgicas diferentes: el trofozoto y el quiste. Los trofozotos son pleomrficos, de 15-45 m de dimetro. En el citoplasma se distinguen un ncleo central y abundantes vacuolas. El carcter distintivo de los trofozotos es la presencia de seudpodos puntiagudos llamados acantopodios. Los quistes miden 10-15 m de longitud. Se caracterizan por poseer un solo ncleo y una pared doble, en donde la capa externa es de forma irregular y la interna es poligonal. Tambin se observa la presencia de poros llamados ostiolos. Balamuthia mandrilaris se caracteriza por presentar dos formas morfolgicas diferentes: el trofozoto y el quiste. Los trofozotos son pleomrficos, de 12-60 m de dimetro. En el citoplasma se distinguen de 1-2 ncleos cada uno con 2-3 cuerpos nucleares. Los quistes son esfricos y miden 12-30 m de longitud. Se caracterizan por poseer un solo ncleo y una pared triple. Diagnstico parasitolgico La demostracin microscpica de los trofozotos o quistes es la base del diagnstico. Los exmenes histopatolgicos de biopsias de cerebro piel o crnea son recomendados. Tambin se recomienda el diagnstico por imgenes (tomografa axial computarizada, resonancia magntica). Se puede cultivar las amebas en un medio con baja concentracin de nutrientes en el cual se ha sembrado previamente bacterias coniformes (Medio xenico). Los exmenes de lquido cefalorraqudeo o los extendidos coloreados con la tincin de Wright o Giemsa no se recomiendan pues son poco sensibles. Las tcnicas serolgicas son tiles si se desea diferenciar Acanthamoeba de Balamuthia, especialmente la tcnica de inmunofluorescencia indirecta (IFI). Naegleria fowleri Caractersticas morfolgicas Naegleria se caracteriza por presentar tres formas morfolgicas diferentes: el trofozoto, la forma flagelada y el quiste. Los trofozotos son pleomrficos, de 10-25 m de longitud. En el citoplasma se distinguen un ncleo central y abundantes vacuolas. El carcter distintivo de los trofozotos es la presencia de seudpodos redondeados llamados lobopodios. Bajo ciertas condiciones del medio, principalmente por la concentracin de iones, los trofozotos pueden adoptar una forma biflagelada. Los quistes son esfricos y miden 7-14 m de dimetro. Se caracterizan por poseer un solo ncleo y una pared delgada sin la presencia de poros.

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Diagnstico parasitolgico La demostracin microscpica de los trofozotos es la base del diagnstico. Se recomienda realizar exmenes de lquido cefalorraqudeo (LCR) o extendidos coloreados con la tincin de Wright o Giemsa. Si la muestra de LCR resulta negativa, se puede recurrir a exmenes histopatolgicos de biopsias cerebrales o diagnstico por imgenes (tomografa axial computarizada). Se puede cultivar las amebas en un medio con una baja concentracin de nutrientes en el cual se ha sembrado previamente bacterias coliformes. Las tcnicas serolgicas tiene poco valor diagnostico pues la respuesta inmune demora en aparecer. Se ha probado la tcnica de inmunoensayo enzimtico (ELISA) y la inmunofluorescencia indirecta (IFI). II. MATERIAL Lminas coloreadas con hematoxilina frrica o tricrmica Acanthamoeba castellani, Balamuthia mandrilaris, Naegleria fowleri Aceite de inmersin Papel lente Microscopio de luz de Gomori:

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ESQUEMAS

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PRCTICA 5 IDENTIFICACIN DE FLAGELADOS Y CILIADOS INTESTINALES

I. INTRODUCCIN Parsitos caracterizados por poseer flagelos en su forma de trofozoto, los cuales les sirven para la locomocin. Desde el punto de vista clnico, podemos dividirlos segn la localizacin anatmica donde se suelen encontrar en flagelados intestinales, genitales, hemticos y tisulares. Entre los flagelados intestinales la especie ms importante es Giardia duodenalis, parsito que se localiza en el duodeno y que se multiplica por divisin longitudinal. En los nios provoca cuadros diarreicos, aunque a veces pueden encontrase en heces sin estar asociado a patologa alguna. Otras especies de flagelados intestinales menos frecuentes son: Trichomonas hominis, Chilomastix mesnilii (Figura 5). Los ciliados son protozoarios que se caracterizan por la forma de cilios para su locomocin, adems tienen como caracteres de valor diagnstico dos ncleos, citostoma y citopigio. La transmisin de los ciliados ocurre por ingestin de quistes en alimentos o agua contaminada con residuos fecales. Cuando se ingieren los quistes, estos pasan al tracto intestinal inferior, se desenquistan e inician su multiplicacin como trofozotos que se alimentan. El diagnstico parasitolgico se basa fundamentalmente en el hallazgo de trofozotos o quistes de heces

A. IDENTIFICACIN DE FLAGELADOS INTESTINALES Giardia duodenalis Caractersticas morfolgicas Se localiza en el duodeno, tiene un estadio de trofozoto y otro de quiste. El trofozoto mide 10-20 m. Es periforme de simetra bilateral con dos ncleos ovales y cuatro pares de flagelos, dos axstilos y dos cuerpos parabasales y un disco suctorio. El quiste mide 8-19 m (promedio 10-14 m). Son ovoides que contienen 4 ncleos pequeos, restos de flagelos y cuerpo parabasal, el citoplasma esta claramente separado de la pared qustica. Diagnstico parasitolgico Hallazgo de trofozotos o quistes en las heces. En las lminas coloreadas estudie las caractersticas del trofozoto. Chilomastix mesnilli Flagelado intestinal no patgeno. El trofozoto, periforme de 6-20 m, tiene un ncleo, citoplasma grande, forma ancha que se extiende hasta la mitad del cuerpo. El quiste, mide 6-24 m con apariencia de limn contiene un solo ncleo. Diagnstico parasitolgico En las muestras de heces formoladas observe quistes. En las lminas coloreadas estudie las caractersticas del trofozoto y quiste.

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B. IDENTIFICACIN DE CILIADOS Balantidium coli Caractersticas morfolgicas El nico ciliado que infecta al hombre. Parasita el intestino grueso. El trofozoto es de forma ovoide y tiene de tamao promedio de 70 x45 m, y puede alcanzar un tamao de 150-200 micras, en su extremo anterior esta el citostoma y en el posterior el citopigio. Tiene un ncleo grande reniforme que es el macro ncleo, uno ms pequeo y vacuolas contrctiles. Los cilios que son los rganos de locomocin estn implantados en la membrana celular. El quiste tiene pared qustica gruesa transparente y es casi esfrico con un dimetro promedio de 55 m (50-70 m), tiene un macro ncleo reniforme y un micro ncleo. Diagnstico parasitolgico La balantidiosis requiere de un diagnstico clnico diferencial con otros agentes infecciosos que producen colitis o disentera. Principalmente entamoebosis, disentera bacilar y colitis ulcerativa. El diagnstico de laboratorio se realiza por el examen de heces, al observarse los trofozotos mviles al examen directo, en heces diarreicas, o los quistes en heces no diarreicas. II. MATERIAL Heces frescas/formol 10% Lminas coloreadas con hematoxilina frrica o tricrmica de Gomori: Giardia duodenalis (quiste y trofozoto), Chilomastix mesnilli (quiste y trofozoto), Balantidium coli (quiste y trofozoto). Pipetas, baguetas, suero fisiolgico y lugol. Aceite de inmersin, lminas y laminillas. Frasco con desinfectante para descartar material (clorox, fenol, lugol) Microscopio de luz. Papel lente.

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ESQUEMAS (PRCTICA 5)

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PRCTICA 6 IDENTIFICACIN DE ESPOROZOARIOS INTESTINALES Y TISULARES

I. INTRODUCCIN Son protozoarios del Phylum Apicomplexa pues con microscopa electrnica se visualiza una estructura denominada complejo apical (conoide, anillo polar, rhoptrias, microtbulos). Tienen ciclos complejos (monoxenos, heteroxenos), donde intervienen diversas etapas evolutivas sexuadas y asexuadas: esporozotos, merozotos, gametos que forman el ooquiste o cigote. En su mayora son agentes oportunistas porque para ejercer su accin patgena requieren condiciones favorecedoras en el hospedero. En los coccidios intestinales (Cryptosporidium, Cyclospora, Cystoisospora) tanto la forma infectante como la forma diagnstica es el ooquiste maduro. La va de infeccin de estas parasitosis es la oral y el mecanismo de transmisin es la ingestin de alimentos contaminados con ooquistes. Toxoplasma gondii es un esporozoario intestinal del gato, siendo el hospedero definitivo, mientras que el hombre y otro animales son hospederos intermediarios. El diagnstico en humanos es bsicamente serolgico. Cryptosporidium spp Caractersticas morfolgicas Coccidio intestinal con ciclo complejo que se completa en un nico husped (monoxeno). Distintas especies y distintos genotipos: C. parvum: genotipo en 1 humanos, genotipo 2 en rumiantes y genotipo 3 en caninos. Otros: C. felis, C. meleagridis, C hominis. Se localiza en el epitelio intestinal con localizacin de las etapas reproductivas dentro de una vacuola parasitfora: intracelular pero extracitoplasmtica. La va de transmisin es por ooquistes de pared delgada (autoinfeccin) y los ooquistes de pared gruesa (heteroinfeccin). Ooquistes: Pequeos de 4 6 m de dimetro, ovoides o esfricos, altamente refringentes, con cuatro paredes exteriores lisas. Pueden observarse 4 esporozoitos inermes dentro de los ooquistes maduros (no se presenta esporoquistes). Puede infectar todo el tracto digestivo y tambin otros epitelios. Altera la arquitectura del epitelio intestinal (vacuola parasitfora). Ocasiona atrofia de las vellosidades, aumento de las criptas e infiltracin de la lmina propia. Interfiere con la absorcin de fluidos y nutrientes lo que conduce a provocar diarrea coleriforme que puede comprometer la vida por desequilibrios hidroelectrolticos. Diarrea aguda autolimitada en inmunocompetentes. Diarrea crnica severa en inmunodeprimidos Diagnstico parasitolgico La demostracin microscpica de los ooquistes es la base del diagnstico. Se recomienda realizar exmenes seriados de heces y mtodos de concentracin (tcnicas de Ritchie y Sheather). Los ooquistes se pueden observar en un extendido teido con coloracin cido-resistente (mtodo de Kinyoun o ZielhNeelsen modificado) y/o Auramina/rodamina Si la muestra fecal resulta negativa, se pueden buscar los parsitos por biopsia intestinal o utilizarse el diagnstico indirecto para detectar coproantgenos con la ayuda de las tcnicas de inmunoensayo enzimtico (ELISA) o inmunofluorescencia indirecta con anticuerpos monoclonales (IFI).

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 Cyclospora cayetanensis Caractersticas morfolgicas Los ooquistes de Cyclospora se caracterizan por presentar una forma esfrica y miden entre 8-10 m de dimetro. Cada ooquiste contiene dos esporoquistes que desarrollan dos esporozotos cada uno.

Diagnstico parasitolgico La demostracin microscpica de los ooquistes es la base del diagnstico. Se recomienda realizar exmenes seriados de heces y mtodos de concentracin (tcnicas de Ritchie y Sheather). Los ooquistes se pueden observar en un extendido teido con coloracin cidoresistente (mtodo de Kinyoun o Zielh-Neelsen modificado). Con luz ultravioleta presentan autofluorescencia. Si la muestra fecal resulta negativa, se pueden buscar los parsitos por biopsia intestinal o utilizarse el diagnstico indirecto para detectar coproantgenos con la ayuda de las tcnicas de inmunoensayo enzimtico (ELISA) o inmunofluorescencia indirecta (IFI). Cystoisospora belli Caractersticas morfolgicas Los ooquistes de Cystoisospora se caracterizan por presentar una forma ovalada y mide entre 20- 30 m de largo por 10-20 m de ancho. Cada ooquiste contiene dos esporoquistes de membrana doble que desarrollan cuatro esporozotos cada uno. Diagnstico parasitolgico La demostracin microscpica de los ooquistes es la base del diagnstico. Se recomienda realizar exmenes seriados de heces y mtodos de concentracin (tcnicas de Faust y Sheather). Es caracterstica la presencia de los cristales de Charcot Leyden, que se generan por la destruccin de los eosinfilos. Los ooquistes se pueden observar en un extendido teido con coloracin cidoresistente (mtodo de Kinyoun o Zielh-Neelsen modificado). Con luz ultravioleta presentan autofluorescencia. Si la muestra fecal resulta negativa, se pueden buscar los parsitos por biopsia intestinal o utilizarse el diagnstico indirecto para detectar coproantgenos con la ayuda de las tcnicas de inmunoensayo enzimtico (ELISA) o inmunofluorescencia indirecta (IFI).

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 Toxoplasma gondii Caractersticas morfolgicas El ooquiste tiene una forma esfrica y mide entre 10-12 m de dimetro. Cada ooquiste contiene dos esporoquistes que desarrollan cuatro esporozotos cada uno. Los taquizotos tienen aspecto semilunar o en arco y miden entre 4-6 m de largo por 2-4 m de ancho. Los quistes tisulares son redondeados y poseen una membrana propia, miden entre 20-200 m de dimetro. Diagnstico parasitolgico El criterio clnico es la base del diagnstico. La demostracin microscpica de los taquizotos es difcil y slo se da en muestras de LCR y mdula sea. Tambin se puede intentar su aislamiento mediante inoculacin experimental en ratones o en cultivos celulares (clulas HeLa) Se pueden buscar los parsitos por biopsia intestinal o utilizarse el diagnstico indirecto para detectar anticuerpos con la ayuda de la reaccin de Sabin & Feldman (RSF) o las tcnicas de inmunoensayo enzimtico (ELISA), inmunofluorescencia indirecta (IFI) o hemoaglutinacin indirecta (HAI). Actualmente se recomienda el uso de tcnicas moleculares (como la reaccin en cadena de la polimerasa PCR) para muestras de sangre, LCR, mdula sea y biopsias. Sarcocystis sp. Caractersticas morfolgicas Es un parsito unicelular que se encuentra en los msculos y otros tejidos de los mamferos, las aves y los reptiles. Posee anillos polares, anillos apicales, conoide, micronemas, roptris, pelcula, microporos, mitocondrias y grnulos de amilopectina. Un sarcoquiste mide en promedio 70 um, pero su tamao flucta entre 30 y 130um. Se le ha encontrado en todo el mundo infectando diversas especies.Es una zoonosis, entre los animales que infecta se pueden incluir ovejas, caballos, cerdos, perros, gatos, conejos, ratones, pollos, humanos, venados, patos, focas, entre otros. Existen varias especies, nombradas de acuerdo al hospedero en donde se encuentran, por ejemplo: S. rileyi (pato), S. cuniculi (conejo), S. tenella (oveja) y S. miescheriana (cerdo). Produce la enfermedad conocida como sarcocystosis. Las principales especies que infectan humanos son S. hominis y S. suishominis. Los humanos pueden infectarse por ingestin de carne infectada o bien por ooquistes excretados en las heces.

Diagnstico parasitolgico Anlisis de las heces de animales infectados donde se observan los ooquistes esporulados. Observacin de los quistes en los hospederos intermediarios por medio de biopsias de tejido. La sarcocistosis extraintestinal puede detectarse mediante anticuerpos anti-Sarcocystis a travs de las pruebas serolgicas, entre ellas la ELISA, HAI, dot-ELISA e IFI.

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Microsporidios Caractersticas morfolgicas Enterocytozoon bienusi, es el principal microsporidio patgeno del hombre. Infecta los enterocitos del intestino delgado, principalmente en pacientes inmunocomprometidos. Su desarrollo se produce directamente en el citoplasma de la clula hospedadora sin formar vacuola parasitfora. Sus esporas son elipsoidales, miden entre 1,1-1,6 m de largo por 0,7-1 m de ancho y su tbulo polar presenta de 5-7 vueltas. Encephalitozoon intestinales, infecta los enterocitos del intestino delgado, principalmente en pacientes inmunocomprometidos. Su desarrollo se produce en el interior de una vacuola parasitfora. Sus esporas son ovales, miden entre 1,11,2 m de largo por 1,9-2 m de ancho y su tbulo polar presenta de 4-7 vueltas. Encephalitozoon hellem, produce en vacuolas parasitforas en el interior de las clulas de su hospedador y forma esporas redondeadas que miden entre 2-2,5 m de largo por 1-1,5 m de ancho y su tbulo polar presenta de 6-8 vueltas. Encephalitozoon cuniculi, produce en vacuolas parasitforas en el interior de las clulas de su hospedador y forma esporas elipsoidales que miden entre 2,5-3,2 m de largo por 1,2-1,6 m de ancho y su tbulo polar presenta de 4-5 vueltas. Nosema connori, no produce vacuola parasitfora y forma esporas ovales que miden 4-4,5 m de largo por 2-2,5 m de ancho y su tbulo polar presenta de 1011 vueltas. Vittaforma corneae, no produce vacuola parasitfora y forma esporas cilndricas que miden 3,5-3,7 m de largo por 0,8-1 m de ancho y su tbulo polar presenta de 5-6 vueltas. Pleistophora sp. Forma vacuolas parasitforas y sus esporas son de aspecto oval, miden 3,2- 3,4 m por 2,6-2,8 m de ancho y su tbulo polar tiene 10-11 vueltas.

Diagnstico La demostracin microscpica de las esporas es la base del diagnstico. Las esporas se pueden detectar en material de biopsia o mediante el examen de heces, esputo, aspirado duodenal, LCR y orina. Se pueden observar utilizando extendidos teidos con la coloracin de Gram (son grampositivos), la coloracin cido-resistente (mtodo de Zielh-Neelsen), la de Giemsa o la de Schiff. La coloracin de Weber basada en cromotropos ha demostrado ser til. Se puede utilizar pruebas serolgicas como la inmunofluorescencia indirecta (IFI) o moleculares como la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR), pero an no han demostrado ser fiables para el diagnstico de rutina. Tambin se han logrado cultivar en lneas celulares como las de rin de mono (MK) o de pulmn fetal humano (FLH). II. MATERIAL Heces frescas formoladas positivas a coccidios Laminas coloreadas mtodo Kinyoun modificado: Cryptosporidium Cyclospora cayetanensis, Cystoisospora belli. Lmina coloreada con Giemsa: Toxoplasma gondii Lmina coloreada con hematoxilina- eosina: Sarcocystis sp. Lmina coloreada con Gram cromotrope: Microsporidium Pipetas, baguetas, suero fisiolgico y lugol. Aceite de inmersin, lminas y laminillas. Frasco con desinfectante para descartar material (clorox, fenol, lugol) Microscopio de luz, papel lente spp.,

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ESQUEMAS (PRCTICA 6)

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PRCTICA 7 IDENTIFICACIN DE FLAGELADOS HEMTICOS, TISULARES Y DEL APARATO GENITOURINARIO

I. INTRODUCCIN Los flagelados hemticos (Leishmania y Trypanosoma) tienen como hospedador intermediario a un vector. En el caso de Leishmania la forma infectante es el promastigote metacclico y la forma diagnstica son los amastigotes. En Trypanosoma la forma infectante es el tripomastigote metacclico (deyecciones del vector) y la forma diagnstica son los tripomastigotes sanguneos. La va de infeccin de estas parasitosis es la cutnea y el mecanismo de transmisin es la picadura del vector. Los flagelados urogenitales (Trichomonas) carecen de forma qustica. La va de infeccin de esta parasitosis es la sexual y el mecanismo de transmisin es el contacto sexual y los fomites. Leishmania spp. Caractersticas morfolgicas Los amastigotes de Leishmania son formas intracelulares. Se caracterizan por presentar una forma ovoide y miden entre 2-5 m de dimetro. Cada amastigote se caracteriza por la presencia de un ncleo posterior (con cariosoma central) adems de un cinetoplasto anterior al ncleo y restos de flagelo. El cinetoplasto tiene forma de bastoncillo y esta conformado por ADN. Es una estructura que contiene al cuerpo parabasal y un blefaroplasto puntiforme de donde se origina el flagelo. El carcter particular de los amastigotes es la ausencia de membrana ondulante y la presencia de un flagelo intracelular que no se aprecia en las observaciones microscpicas. En el vector, el parsito adopta una forma llamada promastigote, que se caracteriza por su forma alargada y medir entre 14-20 m de longitud. Cada promastigote se caracteriza por la presencia de un ncleo central, un cinetoplasto anterior al ncleo y un flagelo. Diagnstico parasitolgico La demostracin microscpica de los amastigotes es la base del diagnstico. Se debe buscar el parsito en muestras de tejidos. Se recomienda realizar exmenes directos de extendidos de las lesiones mediante raspado con bistur utilizando coloraciones de Giemsa o Leishman. Si la muestra resulta negativa, se pueden buscar los parsitos por biopsia de tejidos o se les puede cultivar en medio de Novy, McNeal y Nicolle (NNN) e inocularlos en animales de laboratorio. Las tcnicas serolgicas tiles para el diagnstico indirecto son la tcnica de intradermoreaccin (prueba de Montenegro), el inmunoensayo enzimtico (ELISA) e la inmunofluorescencia indirecta (IFI).

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 Trypanosoma cruzi Caractersticas morfolgicas Los tripomastigotes de Trypanosoma se caracterizan por presentar una forma fusiforme alargada y ser aplanados lateralmente. Miden entre 10-25 m de longitud (Figura 6). Cada tripomastigote se caracteriza por la presencia de un ncleo central (con cariosoma central) adems de un cinetoplasto subterminal posterior al ncleo y un flagelo (1/3 de la longitud total del parsito). El carcter particular de los tripomastigotes es la presencia de una membrana ondulante bordeada por el flagelo que se inicia en el cinetoplasto y sale por el extremo anterior. No se reproducen. Los amastigotes se caracterizan por presentar una forma redondeada y miden entre 2-4 m de dimetro. Cada amastigote se caracteriza por la presencia de un ncleo central, un cinetoplasto anterior al ncleo y un flagelo intracitoplasmtico. En el vector, el parsito adopta una forma llamada epimastigote que se caracteriza por su forma alargada y por medir entre 18-20 m de longitud. Cada epimastigote se caracteriza por la presencia de un ncleo central adems de una membrana ondulante corta (1/2 de la longitud total del parsito), un cinetoplasto anterior al ncleo y un flagelo libre.

Diagnstico parasitolgico La demostracin microscpica de los tripomastigotes es la base del diagnstico. Se debe buscar el parsito en muestras de sangre o tejidos. Se recomienda realizar exmenes directos de extendidos sanguneos y tcnicas de gota gruesa con coloraciones de Giemsa o Wright. Tambin se pueden utilizar mtodos de concentracin (tcnica de Strout) y se les puede cultivar en medio de Novy, McNeal y Nicolle (NNN) e inocularlos en animales de laboratorio. Las tcnicas como el xenodiagnstico y el hemocultivo, se utilizan con fines epidemiolgicos. Las tcnicas serolgicas tiles para el diagnstico indirecto son la tcnica de fijacin de complemento (prueba de Guerreiro-Machado), el inmunoensayo enzimtico (ELISA), la hemoaglutinacin indirecta (HAI) y la inmunofluorescencia indirecta (IFI). La determinacin de zimodemas (perfiles isoenzimticos) es til en la identificacin especfica de los parsitos.

CLASE INSECTA: ORDEN DPTERA Identificacin de insectos vectores de leishmaniosis: Lutzomyia sp. CLASE INSECTA: ORDEN HEMIPTERA. Identificacin de insectos vectores de tripanosomiasis americana: Triatominos: Rhodnius robustus, Triatoma infestans, Pastrongylus herreri (Figura 7).

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 Trichomonas vaginalis Caractersticas morfolgicas Los trofozotos se caracterizan por presentar una forma piriforme y miden entre 10-30 m de largo por 5-12 m de ancho. Cada trofozoto se caracteriza por la presencia de un ncleo (con cariosoma subcentral y cromatina uniformemente distribuida) adems de un citostoma (abertura oral), blefaroplastos, axostilo y cuerpos parabasales. El carcter particular de los trofozotos es la presencia de dos pares de flagelos anteriores libres y un quinto a lo largo de la membrana ondulante que ocupa 2/3 anteriores del cuerpo. No presenta formas qustica. Diagnstico parasitolgico La demostracin microscpica de los trofozotos es la base del diagnstico. Se recomienda realizar exmenes directos de muestras frescas de secrecin vaginal, secrecin uretral u orina. Son caractersticos los movimientos de rotacin de los parsitos. Tambin se pueden observar los trofozotos en un extendido teido con coloracin Giemsa o Papanicolau y se pueden cultivar en medio de Diamond (crecen despus de 5-7 das). Si la muestra resulta negativa, se pueden buscar los parsitos en secrecin prosttica o utilizarse el diagnstico indirecto con la ayuda de las tcnicas de inmunoensayo enzimtico (ELISA) o inmunofluorescencia indirecta (IFI).

II. MATERIAL Lminas coloreadas con Giemsa: Leishmania spp. ( amastigotes y promastigotes) Trypanosoma cruzi (amastigotes, epimastigotes y trypomastigotes metacclicos) Lmina coloreada con Giemsa: Trichomonas vaginalis Corte histolgico (H-E) con nidos de amastigotes de Trypanosoma cruzy Impronta con amastigotes de Leishmania spp.(Giemsa) Aceite de inmersin, lminas y laminillas. Microscopio de luz Papel lente

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ESQUEMAS (PRCTICA 7)

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PRCTICA 8 IDENTIFICACIN DE ESPOROZOARIOS HEMTICOS

I. INTRODUCCIN Los coccidios hemticos (Plasmodium) tienen como hospedador definitivo a un vector. La forma infectante es el esporozoto y las formas diagnsticas incluyen trofozotos y gametocitos. La va de infeccin de esta parasitosis es la cutnea y el mecanismo de transmisin es la picadura del vector. El eritrocito parasitado por P. vivax presenta granulaciones de Schffner, P. falciparum presenta granulaciones de Maurer y P. malariae presenta granulaciones de Ziemann. Plasmodium spp. Caractersticas morfolgicas generales En el hombre se pueden observar estadios de trofozoto, esquizonte y gametocito, que tienen valor diagnstico. El trofozoto es el primer estadio eritrocitario, tiene un aspecto de anillo y mide entre 20-30 m de dimetro. El esquizonte tiene un aspecto globular y da origen a los merozotos. Estos son esfricos y miden entre 2-4 m de dimetro y dan lugar a nuevos trofozotos. Los gametocitos varan en forma y tamao. En Plasmodium vivax y P.malariae son redondeados y miden 8-10 m ocupando todo el eritrocito mientras que en Plasmodium falciparum tiene forma de media luna y miden 12-14 m. Diagnstico parasitolgico La demostracin microscpica de los estadios esquizognicos (trofozotos, esquizontes y gametocitos) es la base del diagnstico. Se recomienda realizar extendidos sanguneos y mtodos de concentracin (tcnica de gota gruesa). Los estadios esquizognicos se pueden observar en un extendido teido con coloracin de Giemsa, Wright o Leishman. Tambin se puede utilizar pruebas serolgicas como el inmunoensayo enzimtico (ELISA), la inmunofluorescencia directa (IFD) o la hemoaglutinacin indirecta (HAI) o moleculares como la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR). CLASE INSECTA: ORDEN DPTERA Identificacin de insectos vectores de malaria: Anopheles pseudopunctipenis, A. albimanus. II. MATERIAL Lminas coloreadas con Giemsa para observar los diferentes estadios de: Plasmodium vivax: Trofozoto joven, Trofozoto mediano y adultos. Esquzonte joven, Esquzonte maduro, Macrogametocito, Microgametocito. Plasmodium falciparum: Trofozoto joven, Gametocitos. Aceite de inmersin Microscopio de luz Papel lente

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Diferencias morfolgicas de Plasmodium humanos en sangre perifrica (Figura 8)

ESPECIES Trofozoto joven

P. vivax

P .falciparum

P. malariae

Anular ocupa 1/3 Anular ocupa 1/6 del Anular o en banda del hemate rara hemate a menudo ocupa 1/3 del hemate vez hay 2 varios en un hemate muy raro ms de una. Forma irregular ameboidea, se ve en sangre perifrica, pigmento marrn amarillento fino. Grande amenoide cromatina fragmentada, pigmento fino Forma ameboidea Forma en banda se pequea. No se ve ve en sangre en sangre perifrica. perifrica, pigmentos en grnulos grandes. Citoplasma compacto, pigmento oscuro. Tamao medio, Pequeo cromatina cromatina fragmentada, fragmentada, no se pigmento grueso. ve en sangre perifrica

Trofozoto Adulto

Esquizonte joven

Esquizonte maduro

Grande doble hilera Pequeos, slo en Forma de roceta o de merozotos de sangre visceral 18 a margarita con 6 a 12 18 a 24. 32 merozotos merozotos. Grandes, esfricos, cromatina difusa, Abundante pigmento malrico y granulaciones (amarillo) Esfrico, cromatina compacta, Abundante pigmento malrico y granulaciones (amarillo) Media luna, Similar a P. vivax, cromatina nica laxa, pero ms pequeos. Pigmento malrico oscuro.

Microgametocito

Macrogametocito

Media luna, Similar a P. vivax pero cromatina compacta, pequeo, pigmento Pigmento malrico grueso diseminado. oscuro.

Presencia de formas Todas las formas Gametocitos y Todas las formas en sangre circulante dependiendo del Trofozotos Jvenes como suceden en P.vivax. momento en que tome la sangre en relacin en relacin con el ciclo febril.

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ESQUEMAS (PRCTICA 8)

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PRCTICA 9 IDENTIFICACIN DE TREMTODES

I. INTRODUCCIN En los tremtodos (Fasciola y Paragonimus) la forma infectante es la metacercaria mientras que la forma diagnstica es el huevecillo no embrionado. La va de infeccin de estas parasitosis es la oral y el mecanismo de transmisin es la ingestin de alimentos contaminados. Fasciola hepatica Caractersticas morfolgicas Fasciola es un gusano plano en forma de hoja de laurel y de color parduzco, que mide entre 2-4 cm. por 1-2 cm (Figura 9). Se caracterizan porque en su regin anterior se distingue la ventosa oral mientras que un tercio por detrs se encuentra la ventosa ventral o acetbulo. Los huevos son de forma elptica y color amarillento, miden 120-150 m por 60100 m; tiene cscara delgada y son operculados (Figura 10). Diagnstico parasitolgico La demostracin microscpica de los huevecillos es la base del diagnstico. Se recomienda realizar exmenes seriados de heces y utilizar mtodos de concentracin (tcnica de Faust o de Baermann). Si la muestra fecal resulta negativa, se pueden buscar los parsitos en bilis por aspirado duodenal, estudios radiolgicos o biopsias hepticas. Tambin puede utilizarse el diagnstico indirecto para detectar coproantgenos con la ayuda de las tcnicas de intradermorreaccin, doble difusin arco 2 (DD-2), inmunoensayo enzimtico (ELISA), hemoaglutinacin indirecta (HAI) e inmunofluorescencia indirecta (IFI). Las tcnicas moleculares no se han utilizado por el momento. Paragonimus peruvianus Caractersticas morfolgicas Paragonimus es un gusano plano de forma ovalada y de color rojizo, que mide entre 8-15 mm por 4-5 mm (Figura 11). Se caracterizan porque la ventosa oral es subterminal y de mayor dimetro que la ventosa ventral o acetbulo que se encuentra por debajo de ella. Los huevos son de forma ovalada y color marrn rojizo, miden 80-90 m por 5060 m; tiene cscara delgada y son operculados. Las metacercarias se caracterizan por carecer de envoltura qustica y miden 1.47 m por 0,67 m. Diagnstico parasitolgico La demostracin microscpica de los huevecillos es la base del diagnstico. Se recomienda realizar exmenes de esputo colectado por 24 horas y tratado con hidrxido de sodio. Si la muestra de esputo resulta negativa, se pueden buscar los parsitos en heces o aspirados gstricos, exmenes radiogrficos o bipsias pulmonares. Tambin puede utilizarse el diagnstico indirecto para detectar coproantgenos con la ayuda de las tcnicas de intradermorreaccin, inmunoensayo enzimtico (ELISA), inmunofluorescencia indirecta (IFI) y hemoaglutinacin indirecta (HAI). Las tcnicas moleculares no se han utilizado por el momento.

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 Schistosoma mansoni Caractersticas morfolgicas El gnero Schistosoma posee gran cantidad de especies, parsitas de mamferos silvestres y domsticos, incluido el hombre. Al menos tres especies parasitan al hombre: Schistosoma mansoni, Schistosoma japonicum y Schistosoma haematobium (Figura 12). S. mansoni (trematodo sanguneo de Manson) se localiza en la mayor parte de frica; tambin se encuentra en el continente americano, introducido con los esclavos africanos infectados. Los adultos viven en las venas mesentricas del intestino grueso de muchos mamferos, tanto silvestres como domsticos, incluido el hombre (hospedador definitivo). S. japonicum (trematodo sanguneo oriental) se encuentra en el continente asitico. El adulto vive en las venas mesentricas del intestino delgado y a veces en las venas del sistema porta del hombre y otros mamferos (hospedador definitivo). S. haematobium (trematodo sanguneo de la vejiga) se distribuye por gran parte de frica y por ciertas zonas de Asia. Los adultos viven en las venas que rodean la vejiga urinaria (venas vesicales) del hombre y otros primates (hospedador definitivo). El ciclo vital es similar en todas las especies. Los huevos, ya embrionados, eclosionan en el agua; surge un miracidio que penetra activamente en un caracol acutico (hospedador intermediario) (Biomphalaria spp. para S. mansoni, Oncomelania spp. para S. japonicum y Bulinus spp. para S. haematobium), donde se transforma en esporoquiste, que origina esporoquistes hijos, de donde surgen cercarias (no se producen redias). Las cercarias salen del caracol y penetran activamente, a travs de la piel, en su hospedador definitivo cuando se sumerge en aguas con caracoles infectados. Durante la entrada en el hospedador definitivo, la cercaria pierde la cola y se transforma en esquistosmula, que se dirigir al sistema heptico, donde evolucionar hasta adulto, para posteriormente dirigirse a su hbitat especfico. Una de las caractersticas de las esquistosomiasis es la produccin de granulomas alrededor de los huevos que quedan entre los tejidos del hospedador cuando se desplazan tratando de salir a la luz intestinal o a la vejiga urinaria. Diagnstico parasitolgico La hembra, larga y delgada, se encuentra parcialmente introducida en el canal ginecforo del macho. Los machos son gruesos de 615 mm de longitud y 1,5 mm de dimetro; poseen 37 testculos y el tegumento puede estar ornamentado con tubrculos espinosos. Las hembras son delgadas, de tegumento liso y poseen un slo ovario, situado en el tercio anterior del cuerpo; el tero es corto. Huevo de S. mansoni es grande (120170x4050 m), sin oprculo y con una espina lateral. Sale con las heces del hospedador ya embrionado (contiene un miracidio). II. MATERIAL Muestras de heces fromoladas con huevos de Fasciola y Paragonimus Metacercaria de Fasciola hepatica Miracidium de Fasciola hepatica Adultos de Fasciola hepatica (material preservado) Adulto de Fasciola hepatica coloreado con carmn Hospedero intermediario: Lymnaea columella caracol Metacercaria de Pargonimus peruvianus 1er H.I.: Aroapyrgus sp. caracol 2do. H.I. Hypolobocera chilensis - cangrejo Adulto de Paragonimus peruvianus coloreado con carmn

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Adultos de Schistosoma mansoni Huevo de Schistosoma mansoni Corte histolgico con huevo de Schistosoma mansoni Microscopio de luz Papel lente

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ESQUEMAS (PRCTICA 9)

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PRCTICA 10-11 IDENTIFICACIN DE CSTODES INTESTINALES Y TISULARES

I. INTRODUCCIN Los cestodos tienen un ciclo biolgico complejo. Estos helmintos son gusanos planos, segmentados. Constan de escolex, destinado a la fijacin, cuello o zona de crecimiento, y estrbila, constituido por una cadena de progltidos o segmentos. Carecen de aparato digestivo, se nutren por difusin desde el exterior. Los gusanos adultos ocupan el tubo digestivo de los vertebrados y sus larvas se encuentran en los tejidos de vertebrados e invertebrados. La mayora de los cestodos parsitos del hombre requieren uno o ms hospedadores intermediarios, que ingieren los huevos con el agua de bebida o alimentos y desarrollan las larvas en sus tejidos. El hospedador definitivo desarrolla la forma adulta del parsito en su tubo digestivo tras ingerir carne que contiene larvas enquistadas. El hombre acta o puede actuar como hospedador definitivo (Ej.: Taenia solium- teniasis) o como hospedador intermediario (Ej.: larva de T. solium- cisticercosis). Taenia solium Forma infectante: la ingesta de la larva cisticerco en msculo porcino (Cysticercus cellulosae), en el hombre ocasiona teniasis intestinal. La ingesta de huevos de T. solium ocasiona cisticercosis. Huevos: 31 x 43 m, esfricos o sub-esfricos, con cscara gruesa y estras radiales prominentes. Oncsfera embrionada con tres pares de ganchos dentro del embriforo es diagnstico del gnero Taenia. Progltido: Mas largos que anchos. Los segmentos grvidos tienen un tallo uterino central con 7 10 ramas laterales a diferencia de los de T. saginata que tiene 15-20 ramas uterinas. Esclex: Cuatro ventosas caractersticas del gnero, con un rostelo armado de doble corona de ganchos quitinoso (Figura 13). Taenia saginata Forma infectante: Larva cisticerco en msculo de vacuno (Cysticercus bovis). Huevos: Idnticos a T. solium. Progltido: Mas largos que anchos. Los segmentos grvidos tienen un tallo uterino central con 15 20 ramas laterales a cada lado. Son mviles cuando estn recin eliminados. Esclex: Cuatro ventosas caractersticas del gnero, con una corona inerme, desprovista de rostelo sin ganchos. Mide 2 mm de dimetro (Figura 14).. Echinococcus granulosus El hospedero definitivo es el Perro (se infecta al ingerir vsceras), el Hospedero intermediario es el Humano, bovinos, vacunos, porcinos (se infectan al ingerir huevos) Huevo: Hexacantos semejantes a los de Taenia spp. Gusano adulto: 3 6 mm. Cuello corto y delgado de 1 mm. Estrbilo consta de 3 4 progltidos, con poros genitales regularmente alternos; el ltimo segmento

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mide aproximadamente la mitad del largo total del parsito. Anatoma interna semejante a la de las tenias (Figura 15). Esclex: Pequeo, globular, 300 m de dimetro, Posee cuatro ventosas y un rostelo armado con doble corona de ganchos de 25 30.

Quiste hidatdico o hidtide: Hidtide: Tiene forma mas o menos esfrica, pudiendo alcanzar hasta 10 cm. de dimetro. Esta constituida por una membrana que consta de dos capas: Externa o cutcula (1 mm de espesor) e interna, germinativa o prolifera (25 mm de espesor); esta ultima da lugar a la formacin de esclices, vesculas proliferas e hijas; presenta un contenido formado por un liquido estril incoloro o amarillo claro y un sedimento denominado arenilla hidatdica constituido por ganchillos, esclices y vesculas que se desprenden de la capa germinativa.

Diphyllobothrium pacificum Forma infectante: Larva plerocercoide en la carne de pescado de agua salada. Huevos: 50-60 x 36-40 m, ovales o elpticos. Se observa un oprculo en uno de los extremos con un pequeo botn terminal en el otro. La cscara es delgada y lisa. Progltido: Mas largos que anchos. Poro genital y poro uterino. Un tero en la parte media o central del progltido, con aspecto de roseta. Testculos y glndulas vitelgenas. Esclex: Forma de esptula redondeada, con una hendidura longitudinal poco profunda (botrias), rodeada en ambos lados por pliegues semejantes o labios. Hymenolepis nana Forma infectante: Huevo Huevo: 40 x 60 m, ovales o subesfricas. La cscara se compone de dos membranas, la externa es relativamente delgada y tiene una superficie lisa; la interna tiene dos polos opuesto de los que nacen 4 8 filamentos polares, que se extienden entre las dos membranas (caractersticas diferenciales de H. diminuta que carece de filamentos). Dentro de la membrana interna se encuentra la oncsfera con tres pares de ganchos (huevo hexacanto) Gusano adulto: Rara vez se encuentra en muestras fecales, donde puede confundirse con hilos delgados de moco. Mide menos de 40 mm de largo y tiene progltidos imprecisos. Mas anchos que largos, y un pequeo esclex con cuatro ventosas y un rostelo saliente con un anillo de 20 30 ganchos. Hymenolepis diminuta (accidental en el hombre) Forma infectante: Larva cisticercoide en varias especies de pulgas, cucarachas y gorgojos, que son inadvertidamente ingeridas por el hombre (ciclo indirecto). Huevo: 70 - 85 m de longitud, 60 80 m de ancho, redondos o vales. Tiene apariencia semejante a los huevos de H. nana. No posee filamentos polares. Gusano adulto: Rara vez se encuentra en muestras fecales. Los progltidos no son precisos. El escolex es pequeo y esfrico y tiene cuatro ventosas esfricas profundas y un rostelo redondeado sin ganchos.

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 Dipylidium caninum (accidental en el hombre) Forma infectante: Larva cisticercoide que desarrollan en la cavidad corporal de las pulgas del perro o el gato y de piojos, que son inadvertidamente ingeridas por el hombre. Huevo: En general se observa paquetes de huevos, que son sacos que contienen 5 15 huevos esfricos (Cpsula ovgera). Cada huevo mide 35 x 40 m, son esfricos y encierran una oncosfera interna con seis ganchos delicados. Progltido: Mas largos que anchos, con forma de barril, con un doble juego de estructuras reproductoras que tienen dos poros genitales para cada segmento, uno a cada lado (otras especies de Taenia sp. tienen solo un poro genital). Esclex: Rostelo cnico u ovoide con 30 150 ganchos pequeos, semejantes a espinas, dispuestas en varias hileras. El rostro puede retraerse en una depresin en la porcin superior del esclex (Figura 14).

II. MATERIAL Heces formoladas con huevos de Taenia sp., Diphyllobothrium sp, Hymenolepis nana. Lminas y laminillas. Esclex coloreado con carmn de: Taenia solium, Taenia saginata, Diphyllobothrium pacificum, Hymenolepis nana, Hymenolepis diminuta, Dipylidium caninum. Progltidos grvidos de Taenia solium, Taenia saginata, Diphyllobothrium pacificum, Hymenolepis nana, Hymenolepis diminuta, Dipylidium caninum, coloreados con carmn. Adulto de Echinococcus granulosus, coloreado con carmn Arenilla hidatdica coloreado con H-E Cpsula ovgera de Dipylidium caninum coloreado con carmn Corte histolgico de Cisticercus celullosae (H-E) y quiste hidatdico Material preservado en formol 10% de especmenes adultos de: Taenia solium, Taenia saginata, Diphyllobothrium pacificum, Hymenolepis nana, Hymenolepis diminuta, Dipylidium caninum, quiste hidatdico. Pipetas, baguetas, lugol. Frasco con desinfectante para descartar material (clorox, fenol, lugol) Aceite de inmersin Microscopio de luz.

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ESQUEMAS (PRCTICA 10-11)

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ESQUEMAS (PRCTICA 10-11)

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PRCTICA 12- 13 IDENTIFICACIN DE NEMTODOS INTESTINALES

I. INTRODUCCIN Los nemtodos son gusanos cilndricos, alargados, de metabolismo fundamentalmente anaerobio. Su ciclo vital es variable. En general existe un nico hospedador, el definitivo, y las larvas pasan de un hospedador a otro directamente o despus de un periodo de vida libre (larvas infectivas), o mediante la ingestin de huevos (Figura 16). Su ciclo vital es directo, sin embargo la mayor parte de ellos requiere un estadio fuera del husped humano para desarrollar una forma infectante. En los nemtodos intestinales (scaris, Trichuris y Enterobius) la forma infectante y la forma diagnstica es el huevecillo embrionado. En otro grupo de nematodos (Ancylostoma, Necator y Strongyloides) la forma infectante es la larva filariforme mientras que la forma diagnstica es la larva rabditiforme (Strongyloides) y Huevos (Uncinarias). La va de infeccin de la mayora de los Nemtodos es la oral y el mecanismo de transmisin es la ingestin de agua o alimentos contaminados. Ascaris lumbricoides Caractersticas morfolgicas Son nemtodos que se caracterizan por presentar una boca con tres labios provistos de papilas sensoriales. Presentan una longevidad aproximada de 1-2 aos. Huevos: a. Tamao: Alrededor de 45 a 75 m de longitud por 35 a 50 m de dimetro. b. Forma: Redondos u ovoides, color amarillo oscuro. c. Membrana envolvente: Una externa festoneada, una media y otra interna lisa. Cuando los huevos son infecundos estn deformados y tienen un aspecto vacuolar. Especmenes a. Tamao: las hembras miden 20 a 35 cm. de largo y los machos 10 a 15 cm. De longitud, rara vez sobrepasan los 30 cm. y se caracterizan por la presencia de un par de espculas copulatorias. b. Cuerpo: De color rosado al ser expulsado, Las caractersticas de identificacin tiles son rayas longitudinales blancas sobre ambos lados del cuerpo y la falta de segmentos musculares. c. Extremidad anterior: La boca presenta 3 labios (uno dorsal y dos ventral laterales) d. Extremidad posterior: En la hembra es recto y cnico con ano sub-terminal. En el macho enrollada, cloaca ano genital con 2 espculas copulatorias. e. Vulva: en el cinturn genital, estrechez que es transversal al cuerpo (localizacin: tercio anterior). Diagnstico parasitolgico La demostracin microscpica de los huevos es la base del diagnstico. Se recomienda realizar exmenes seriados de heces y utilizar mtodos de concentracin (tcnica de Faust o de Ritchie). Se puede estimar la intensidad de la infeccin (nmero de huevos por gramo de heces) utilizando las tcnicas de Stoll o Kato-Katz. Si la muestra fecal resulta negativa, se pueden buscar los parsitos por aspirado duodenal o se pueden realizar estudios radiolgicos.

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 Trichuris trichiura Caractersticas morfolgicas Son nemtodos que se caracterizan por presentar una boca sin labios provista de un estilete bucal. Presentan una longevidad aproximada de 6-8 aos. Presentan forma de ltigo, con el tercio anterior ms delgado. Las hembras miden entre 3-5 cm. mientras que los machos miden entre 3- 4,5 cm. y se caracterizan por la presencia de una espcula copulatoria. Los huevos tienen forma de barril en cuyos extremos se distinguen un par de tapones polares (albuminoides), miden 50-55 m por 22-23 m y tienen cscara gruesa. Necesitan de 10-14 das a 20-30 C para completar su desarrollo. Cada hembra llega a ovipositar un promedio de 3-7 mil huevos diarios. Presentan una viabilidad aproximada de 1 ao. Diagnstico parasitolgico La demostracin microscpica de los huevos es la base del diagnstico. Se recomienda realizar exmenes seriados de heces y utilizar mtodos de concentracin (tcnica de Faust o de Ritchie). Se puede estimar la intensidad de la infeccin (nmero de huevos por gramo de heces) utilizando las tcnicas de Stoll o Kato-Katz. Si la muestra fecal resulta negativa, se pueden buscar los parsitos por aspirado duodenal o se pueden realizar estudios radiolgicos. Las tcnicas serolgicas y moleculares no son de mucha utilidad. Enterobius vermicularis Caractersticas morfolgicas Son nemtodos que se caracterizan por presentar una boca con tres labios provistos de papilas sensoriales y una par de aletas cervicales. Presentan una longevidad aproximada de 2-3 meses. Las hembras miden entre 8-12 mm mientras que los machos miden entre 3-5 mm y se caracterizan por la presencia de un par de espculas copulatorias. Los huevos son de forma oval, miden 50-60 m por 20-30 m y tienen cscara delgada. Necesitan de 4-6 horas a 20-30 C para completar su desarrollo. Cada hembra llega a ovipositar un promedio de 10 mil huevos durante su vida. Presentan una viabilidad aproximada de 30-50 das. Diagnstico parasitolgico La demostracin microscpica de los huevos es la base del diagnstico. Los exmenes seriados de heces y los mtodos de concentracin son de poca utilidad. Se deben buscar los parsitos utilizando la tcnica de Graham (cinta engomada) por cinco das sucesivos. Tambin se puede recurrir al uso de hisopados anales. Las tcnicas serolgicas y moleculares no son de mucha utilidad. Toxocara canis/ Toxocara felis Caractersticas morfolgicas Son nemtodos, su hbitat es el intestino delgado, Husped definitivo es el perro y gato, husped accidental el hombre. El adulto macho puede medir hasta 10 cm. y la hembra hasta 12 cm. Producen la larva migrans visceral, sndrome clnico que resulta de la invasin de vsceras humanas por larvas de nemtodos, cuyos adultos son por lo general parsitos de animales inferiores Forma infectante huevos embrionados

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Diagnstico parasitolgico La demostracin microscpica de los huevos es la base del diagnstico en el hospedero definitivo. En el humano se puede diagnosticar por tcnicas serolgicas: ELISA, Western Blot

Ancylostoma duodenale y Necator americanus Caractersticas morfolgicas Ancylostoma es un nemtodo que se caracteriza por presentar una cpsula bucal con dos pares de dientes. Presentan una longevidad aproximada de 6-8 aos. Las hembras miden entre 10-13 mm mientras que los machos miden entre 8-11 mm y se caracterizan por la presencia de un par de espculas copulatorias y una bolsa copulatriz. Los huevos son de forma ovoide, miden 56-60 m y tienen cscara delgada. Necesitan de 1-2 das a 20-30 C para completar su desarrollo. Cada hembra llega a ovipositar un promedio de 20-30 mil huevos diarios. No se conocen datos acerca de su viabilidad. Necator es un nemtodo que se caracteriza por presentar una cpsula bucal con un par de placas cortantes. Presentan una longevidad aproximada de 4-5 aos. Las hembras miden entre 9-11 mm mientras que los machos miden entre 7-9 mm y se caracterizan por la presencia de un par de espculas copulatorias y una bolsa copulatriz. Los huevos son de forma ovoide, miden 64-76 m y tienen cscara delgada. Necesitan de 1-2 das a 20-30 C para completar su desarrollo. Cada hembra llega a ovipositar un promedio de 6-11 mil huevos diarios. No se conocen datos acerca de su viabilidad. Las larvas rabditiformes son de forma alargada y miden 250-350 m de longitud. Se caracterizan por la presencia de un bulbo esofgico. Las larvas filariformes son de forma alargada y miden 600-700 m de longitud. Se caracterizan por la ausencia del bulbo esofgico. Tienen una viabilidad de 6-9 semanas. Diagnstico parasitolgico La demostracin microscpica de los huevos es la base del diagnstico. Se recomienda realizar exmenes seriados de heces y utilizar mtodos de concentracin (tcnica de Faust o de Ritchie). Se puede estimar la intensidad de la infeccin (nmero de huevos por gramo de heces) utilizando las tcnicas de Stoll o Kato-Katz. Para identificar y diferenciar las larvas rabditiformes se requiere de su cultivo a travs de la tcnica de Harada-Mori. Si la muestra fecal resulta negativa, se pueden buscar los parsitos por aspirado duodenal o se pueden realizar estudios radiolgicos. Las tcnicas serolgicas y moleculares no son de mucha utilidad. Strongyloides stercoralis Caractersticas morfolgicas Son nematodos que se caracterizan por presentar una boca con tres labios provistos de papilas sensoriales. No se conocen datos acerca de su longevidad. Las hembras miden entre 2,1-2,7 mm. No se ha logrado hallar a los machos, por lo que se considera que la hembra se reproduce por partenognesis.

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Los huevos son de forma oval, miden 55-60 m por 28-32 m y tienen cscara delgada (normalmente NO se eliminan con las heces). Necesitan de 12 horas a 20-30 C para completar su desarrollo. Cada hembra llega a ovipositar un promedio de 15-50 huevecillos diarios. No se conocen datos acerca de su viabilidad. Las larvas rabditiformes (Forma diagnstica) son alargadas y miden 180-380 m de longitud. Se caracterizan por la presencia de un bulbo esofgico. Las larvas filariformes (Forma infectante) son alargadas y miden 500-700 m de longitud. Se caracterizan por la ausencia del bulbo esofgico. Tienen una viabilidad de 45-50 das. Diagnstico parasitolgico La demostracin microscpica de larvas rabditiformes es la base del diagnstico. Se recomienda realizar exmenes seriados de heces y utilizar mtodos de concentracin (tcnica de Ritchie o de Baermann). Para identificar y diferenciar las larvas rabditiformes se requiere de su cultivo a travs de la tcnica de Harada-Mori. Tambin puede utilizarse el diagnstico indirecto para detectar coproantgenos con la ayuda de la tcnica de inmunoensayo enzimtico (ELISA). Las tcnicas moleculares no son de mucha utilidad. Trichinella spiralis Caractersticas morfolgicas: El hbitat del adulto es el msculo esqueltico. Husped definitivo cerdo, oso, perro y gato, husped accidental es el Hombre. La forma infectante son las larvas contenidas en carnes mal cocidas Los machos miden hasta 1.5 mm y las hembras hasta 3 mm Diagnstico parasitolgico Clnicamente es necesario hacer el diagnstico diferencial con otros sndromes Infecciosos que produzcan sntomas generales y mialgias. Las pruebas de mayor sensibilidad y especificidad son ELISA y hemaglutinacin indirecta. II. MATERIAL Heces formoladas con huevos de Ascaris lumbricoides, Trichuris trichiura, Uncinarias, Enterobius vermicularis Adultos de Ascaris lumbricoides, Trichuris trichiura, Uncinarias, Enterobius vermicularis. Cpsula bucal Ancylostoma duodenalis y Necator americanus Bursa copulatriz de ejemplar macho de Uncinarias Heces formoladas con larvas rabditoides de Strongyloides stercoralis Heces formoladas con huevos de Toxocara canis Lmina coloreada con Trichinella spiralis Corte histolgico de Ascaris lumbricoides y Enterobius vermicularis (H-E) Lminas y laminillas, Pipetas, baguetas, suero fisiolgico y lugol. Frasco con desinfectante para descartar material (clorox, fenol) Aceite de inmersin. Microscopio de luz.

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ESQUEMAS (PRCTICA 12-13)

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ESQUEMAS (PRCTICA 12-13)

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PRCTICA 14-15 IDENTIFICACIN MORFOLGICA DE ARTRPODOS

I. INTRODUCCIN El Phylum Artrpodo comprende el mayor nmero de especies del Reino Animal, caracterizadas por tener bsicamente un exoesqueleto quitinoso, cuerpo y apndices segmentados. A este Phylum pertenecen los ectoparsitos. Los artrpodos son animales segmentados presentando una cabeza, trax y abdomen. La anatoma interna de los artrpodos es un espacio lleno de hemolinfa, llamado hemocele. Los artrpodos juegan el papel de vectores en la transmisin de enfermedades. El vector es el portador viviente, por diseminacin o inoculacin o ambas a la vez del agente causal de la enfermedad. II. CLASE INSECTA Comprende a todos los insectos. Cuerpo dividido en tres regiones: cabeza, trax y abdomen. Cabeza: sus apndices principales son un par de antenas, los ojos compuestos y los ojos simples u ocelos, las piezas bucales. Trax: formado por tres segmentos, cada uno con un par de patas y dos pares de alas. Abdomen: se compone por un nmero variable de segmentos, el 8vo y 9no. Llevan los rganos sexuales externos usados para la copula en el macho el oviscato o pieza para poner huevos en las hembras.

Los insectos respiran por traqueas que llevan aire a los tejidos por medio de unas traqueolas finamente ramificadas. A. ORDEN SIPHONAPTERA Caractersticas morfolgicas Las pulgas son insectos hematfagos que presentan el cuerpo aplanados lateralmente, carecen de alas, un cuerpo recubierto de una gruesa capa de quitina, con un color marrn oscuro. Son holometbolos. Mide de 1 a 7 mm de largo. Tunga penetrans es la ms pequea (1 mm). Los machos son ms pequeos que las hembras. Son transmisores de enfermedades infecciosas. Otras especies; Xenopsylla cheopis (ratas), Ctenocephalides canis (perro), Pulex irritans (humano) (Figura 17) (Figura 18). Cabeza: estrecha y cuneiforme. Las antenas son cortas y gruesas. Los ojos ausentes con frecuencia presentan 2 ocelos. Aparato bucal picador-chupador. Con un peine o ctenidios (peine genal o pronotal). Algunas especies no presentan. Trax: presenta tres segmentos, cada uno con un estigma y un par de patas. Abdomen: presenta 10 segmentos, 8 con un par de espirculos. En un espcimen hembra vea la espermateca situada en el 7mo esternito de forma variable, segn las especies. Observe en la parte

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posterior, una placa prosa con numerosas cerda llamada Pygidium, es una estructura sensorial. La genitalia del macho es ms compleja. Diagnstico parasitolgico Para remover pulgas es utilizando pinzas para desprenderla del hospedador. Preservarlo en alcohol de 96 para su identificacin. B. ORDEN ANOPLURA Caractersticas morfolgicas Los piojos son insectos que miden 2 y 4 mm de longitud, siendo las hembras de mayor tamao que los machos. Tienen el cuerpo achatado en sentido dorsoventral, el color grisceo, son hemimetabolos, eminentemente hematfagos especficos. Son transmisores de enfermedades infecciosas. Cabeza: Ojos simples laterales. Piezas bucales retrctales tipo sucto picador. Trax: Pro, meso y metatrax. Phthirus pubis no presenta la caracterstica constriccin torcica-abdominal que si esta presente en Pediculus. Estigma respiratorio torcico. Tres pares de patas: coxa, trocnter, fmur, tibia, la cual presenta un apndice terminal, el tarso de un solo segmento que termina en una garra opuesta a la tibia, funcionando como una pinza que facilita su adherencia a pelos y ropa. Abdomen: Con 8 segmentos visibles y 6 pares de estigmas respiratorios. Diferencie hembra y machos con extremidad abdominal bilocada, en el macho redondeada y se observa la espcula. Los huevos llamados liendres son blancos, ovoides, de 0.8 mm y presentan en el polo libre un oprculo mamelonado. Especies representativas: Pediculus humanus capitis, Pediculus humanus corporis, Phthirus pubis (piojo cangrejo) (Figura 19). Diagnstico parasitolgico Para remover piojos es utilizando peines especiales para desprenderlos del hospedador. Preservarlo en alcohol de 96 para su identificacin. III. CLASE ARACNIDA Formado por artrpodos que poseen 4 pares de patas, cabeza y trax estn unidos formando el cefalotrax, carecen de alas y antenas. La taxonoma de los acarina es compleja y no esta aun resuelta. De manera tradicional, los acarina han sido considerados un orden de la clase arcnidos, orden Acarina o Acari, pero en la mayora de estudios recientes, los acarina se consideran una subclase que puede dividirse en 3 superrdenes que incluyen diversos rdenes. ORDEN Familia ASTIGMATA
Acaridae Pyroglyphidae Sarcoptidae

Gneros implicados (o especie)

Tyropahgus Dermatophagoides Sarcoptes scabiei Boophilus Rhipicephalus Argas, Otobius

Causa patognica
Causas directas Inhalacin alrgenos Inhalacin alrgenos Alimentacin Causas directas

Enfermedad

Distribucin

Alergia Alergia Escabiosis

Mundial Mundial Mundial Mundial

IXODIDA
Ixodidae Argasidae

Saliva txica Saliva txica

Transmisor de protozoos

Parlisis por garrapatas

IXODIDA Ixodidae MESOSTIGMATA

Babesiosis Dermatitis

Mundial Norteamrica Mundial

Boophilus, Ixodes Dermanyssus

Babesia sp.
Causas directas

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Alimentacin

Sarcoptes scabiei Caractersticas morfolgicas Presenta cefalotrax y abdomen unido, sin segmentacin externa. De forma oval, aplanado dorsoventralmente, no tiene ojos y en su tegumento blando y delgado se dibujan lneas ondulantes paralelas y presentan cerdas o pelos salientes. En su parte anterior sobresale el captulo o aparato bucal semejando una falsa cabeza. En su cara dorsal presenta espinas y pelos dirigidos hacia atrs que determinan que el parasito no pueda retroceder en su caminar. La cara ventral soporta cuatro pares de patas. Tanto en hembras como en machos los dos pares anteriores presentan ventosa y uas, las dos posteriores terminas en cerdas, salvo el cuarto par del macho que tambin presenta ventosas. La hembra mide de 330 a 450 m de largo y el macho de 200 a 240 m. Es un organismo aerobio, intercambia gases a travs del exoesqueleto. Su aparto bucal posee fuertes queliceros que le permiten masticar el estrato crneo y alimentarse de estas clulas (Figura 20). Diagnstico parasitolgico Debe sospecharse ante una dermatosis muy pruriginosa. La visualizacin de surcos de 5 a 20 mm de longitud, es diagnostica, pero a menudo la dificultan las polimorfas lesiones superpuestas. Puede facilitarse mediante su tincin con azul de metileno. En caso de duda, el examen microscpico del material obtenido por raspado de surcos intactos es confirmatorio. Demodex Caractersticas morfolgicas Los Demodex son acaros microscpicos implicados en el desarrollo de varias enfermedades oculares y drmicas. Atendiendo a su localizacin Demodex folliculorum se localiza en el folculo piloso y Demodex brevis en las glndulas sebceas. Es un caro de la familia Demodicidae. Presenta un cuerpo fusionado, pudindose diferenciar dos partes, el gnatosoma o parte anterior donde se localizan las piezas bucales, y el idiosoma que se corresponde con la porcin posterior del cuerpo. Esta se divide en podosoma (4 pares de patas cortas) y opistosoma la cual presenta una estriacin transversal caracterstica. El tamao es de 250-300 m, siendo la hembra de mayor tamao que el macho (Figura 21). Los huevos de Demodex poseen una morfologa en punta de flecha. Diagnstico parasitolgico Para su diagnstico se han de arrancar unas 8-10 pestaas del parpado afecto, o extraer la materia grasa de los folculos por compresin del borde palpebral y sebceo de la piel, colocarlos sobre un portaobjeto, con una gota de xilol en el segundo caso y observarlos al microscopio, 100 X, 400 X. Garrapatas Caractersticas morfolgicas Ectoparsitos que se alimentan de sangre de sus hospederos. Son las formas gigantes de los caros, en ayunas pueden ser pequeas sin embrago cuando se encuentran repletas de sangre succionada, alcanza un mayor tamao. Las garrapatas se diferencian de los dems Acari por poseer en el dorso de la primera pata un visible poro sensorial, conocido como rganos de Halle, y la mayora

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presenta un prominente hipostoma dentado. Las garrapatas estn en dos familias: los argsidos (Argasidae, garrapatas blandas, hipostoma cubierto) y los ixdidos (Ixodidae, garrapatas duras, hipostoma libre). Los adultos miden entre 2 y 30 mm de largo, dependiendo de la especie, y del grado de ingesta de sangre en su alimentacin (Figura 22). Garrapatas blandas: Argas persicus, Otobuis megnini Garrapatas duras: Ixodes ricinus, Boophilus microplus, Rhipicephalus sanguimeus

Diagnstico parasitolgico Para remover garrapatas es utilizando pinzas finas de acero y tirar firmemente para desprenderla del hospedador. Preservarlo en alcohol de 96 para su identificacin. El diagnostico de las especies de garrapatas depender de varios factores, como lugar de colecta, hospedador, nombre vulgar del parsito, por lo que se recomienda solicitar asesoramiento de expertos en el tema para estos casos. Araas Caractersticas morfolgicas Loxoceles laeta: Araa casera. Tamao: 8-15 mm Cefalotrax: Ligeramente aplanado dorso ventralmente, con un surco longitudinal. De color marrn claro. Quelcero, formados por dos segmentos: uno basal y otro distal en forma de garra encorvada, con un orificio subterminal, para la salida del veneno. Pedipalpos, de la misma estructura que una pata, en los machos se modifican y constituyen rganos de copula. Seis ojos y su disposicin en tres filas. Cuatro pares de patas: coxa, trocnter, fmur, patella, tibia y tarso. Abdomen: De forma ovoide, de color grisceo, con pelos. En la parte posterior y ventral, observe una hilera de seis estructuras por donde salen los hilos secretados por las glndulas de seda. Accidente por loxocelismo El veneno de L. laeta posee un fuerte poder citotxico y proteoltico, causa severa alteracin de los endotelios vasculares, hemolisis y puede matar a un ser humano. Caractersticas morfolgicas Latrodectus mactans: Viuda negra o Lucacha. Tamao: Adultos 1.5 cm. Todo el cuerpo aterciopelado. Cefalotrax: Quelcero, Pedipalpos, Ocho ojos y su disposicin en dos hileras horizontales. Cuatro pares de patas: coxa, trocnter, fmur, patella, tibia y tarso. Abdomen En especmenes vivos, se observa, en la parte ventral una mancha de color rojizo, reloj de arena. Accidente latrodctico El veneno de Latrodectus posee potente accin neurotxica, no causa lesin local cutnea y, clsicamente, hay dolor intenso, contracturas musculares, sudoracin, salivacin y puede llevar a la parlisis respiratoria y la muerte. II. MATERIAL DE PRCTICA Lminas montadas de Xenopsylla cheopis, Pulex irritans, Ctenocephalides canis/felis, Tunga penetrans. Lminas montadas de Pediculus humanus, Phthirus pubis, Huevos o liendres de piojos. Lminas montadas de Sarcoptes scabiei, Garrapatas. Adulto de Loxoceles laeta

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Miasis

Adulto Latrodectus mactans Papel lente. Microscopio de luz.

Caractersticas Es la infestacin de animales vertebrados y humanos por larvas de dpteros (moscas). Las larvas se alimentan de los tejidos vivos o muertos del hospedero. Especficas: Larvas biontfagas Cochliomya hominivorax Dermatobia hominis Oestrus ovis Semiespecficas: Larvas necrobiontfaga Sarcophaga haemorrhoidalis No especifica: Accidentales Musca domestica. Diagnstico parasitolgico Ante la sospecha de la infestacin por larvas de mosca (personas o animales) observar con una lupa, que la larva ingresa y sale parcialmente de las lesiones de la piel o de algn rgano afectado. Las larvas pueden ser extradas en forma mecnica o quirrgica para que no continen daando los tejidos. Larvas de moscas extradas de pacientes conservadas en alcohol de 70% para su posterior identificacin. MATERIAL DE PRCTICA Larvas de moscas: Cochliomyia hominivorax y Dermatobia hominis. Estereoscopio.

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ESQUEMAS (PRCTICA 14-15)

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ESQUEMAS (PRCTICA 14-15)

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APNDICE

Figura 1. Morfologa de protozoarios parsitos

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Figura 2. Morfologa huevos de helmintos

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Figura 3. Amebas intestinales

http://www.cdc.gov/ncidod/dpd/

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Figura 4. Amebas de vida libre

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Figura 5. Flagelados intestinales

http://www.cdc.gov/ncidod/dpd/

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Figura 6. Trypanosoma

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Figura 7. Cabezas de Panstrongylus, Triatoma y Rhodnius

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Figura 8. Diferencias morfolgicas de Plasmodium en sangre perifrica

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Figura 9. Esquema de Fasciola hepatica

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Figura 10. Huevo de Trematodos

http://www.cdc.gov/ncidod/dpd/

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Figura 11. Esquema de Paragonimus sp

Figura 12. Esquema de Schistosoma sp.

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Figura 13. Esquema de Taenia sp.

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Figura 14. Esquema de Dipylidium caninum. A. Esclex B. Progltido C. Cpsula ovgera D. Huevo E. larva Cisticercoide

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Figura 15. Esquema de Echinococcus granulosus

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Figura 16. Huevos de helmintos

http://www.cdc.gov/ncidod/dpd/

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Figura 17. Esquema de Pulgas: 3. Tunga 4. Xenopsilla A. Pulex irritans B. Tunga penetrans

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Figura 18. Ctenocephalides felis. Vista lateral de la cabeza

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Figura 19. Esquema de Piojos A. Pediculus humanus B. Phthirus pubis

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Queliceros Palpos Gnatosoma

Estigma Cerdas Idiosoma Patas

Figura 20. Esquema de Sarcoptes scabiei

Figura 21. Esquema de Demodex

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Figura 22. Esquema de Garrapata

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GLOSARIO
AGENTE INFECCIOSO: Organismo (bacteriano, rickettsioso, viral, mictico, protozoario o helmntico) capaz de producir una infeccin o una enfermedad infecciosa. ARTROPODOS: Invertebrado con patas articuladas y esqueleto quitinoso. AXOSTILO: Estructura rgida de posicin axial que constituye el sostn de algunos protozoos flagelados. BOTRIUM: Surco longitudinal que sirve como elemento de fijacin en el esclex de cestodos pseudofilideos. Plural: botria. COMENSALISMO: Relacin simbitica en la cual una especie, el comensal, vive a expensas de otra especie, el hospedero, sin ocasionarle ningn dao. CRUSTCEO: Artrpodo con 5 pares de patas. CTENIDIO: Peine caracterstico de la cabeza y porcin anterior del trax en las pulgas. CONTACTO: Individuo (humano o animal) que ha estado en asociacin con un individuo infectado, teniendo la oportunidad de adquirir la infeccin. CONTAGIO: Transferencia directa del agente infeccioso desde la fuente de infeccin al nuevo husped. ECTOPARSITO: Parsito que vive en la superficie externa del hospedero. EMBRIOFORO: Cubierta que rodea a la oncsfera de los platelmintos. ENDOPARSITO: Parsito que vive en el interior del hospedero. ENFERMEDAD: Conjunto de fenmenos que se producen en un organismo a consecuencia de la accin de una causa patgena, reaccionando contra ella. ESCLEX: rgano de fijacin o "cabeza" de un cestodo. ESTRBILA: Conjunto de progltidos de un cestodo. EXUVIA: Muda resultante de las ecdisis. ENDEMIA: Prevalencia elevada y mantenida de una enfermedad humana determinada dentro de un rea geogrfica. EPIDEMIA: Produccin, en una comunidad o regin, de casos similares en un determinado perodo, en nmero claramente superior a la frecuencia habitual y derivados de una fuente comn o por diseminacin. EPIZOOTIA: Lo mismo que epidemia, pero referido a animales. INESPECIFICIDAD. Porcentaje de casos en que la reaccin resulta falsamente positiva.

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ESPOROZOO: Protozoo parsito que se reproduce por esporogonia. ESPOROZOTO: Elemento resultante de la esporogonia de los esporozoos. ESQUIZOGONIA: Ciclo de reproduccin asexuada de los esporozoos. ESQUIZONTE: Elemento resultante del ciclo esquizognico. ESTROBILA: Conjunto total de progltidos que constituyen el cuerpo de un cestodo.

FOMITE: Objeto (agua, aire, toalla, etc.) que contiene elementos infectantes y pasivamente puede ser vehculo mecnico en su transmisin indirecta.

FORMA INFECTANTE: Fase del parsito capaz de infectar el husped. GAMETOGONIA: proceso de reproduccin sexuada de los esporozoos. HBITAT: Lugar donde en forma natural vive un ser biolgico. HUSPED DEFINITIVO: Hospedero en el cual el parsito alcanza su madurez sexual.

HUSPED INTERMEDIARIO: Hospedero en el cual el parsito desarrolla parte de su ciclo evolutivo, sin alcanzar su madurez sexual.

IMAGO: Artrpodo adulto. Se usa especialmente en el caso de insectos. INFECCIN: Entrada y desarrollo o multiplicacin de un agente infeccioso en el organismo de una persona o animal.

INFESTACIN: Alojamiento, desarrollo y reproduccin de artrpodos en la superficie del cuerpo, pelos, ropas objetos e incluso ambientes. Se emplea tambin en el caso de roedores.

INSECTO: Artrpodo con 3 pares de patas. INCIDENCIA: Nmero de casos nuevos de una enfermedad que se presentan durante un perodo determinado, en relacin con la poblacin donde ocurren. Generalmente se expresa en forma de tasa.

INSECTICIDA: Sustancia qumica, natural o sinttica, utilizada en el exterminio de artrpodos. Se puede aplicar en forma de polvo, lquido, pulverizado, o aerosol.

LARVA: Forma inmadura en el ciclo evolutivo de helmintos y artrpodos. MEROZOITO: Clula resultante del proceso de esquizogonia o divisin mltiple que presentan algunos protozoos.

METAZOO: Animal Pluricelular. MORBILIDAD: Relacin entre el nmero de afectados de una enfermedad determinada y la poblacin total de una zona.

MORTALIDAD: Relacin entre el nmero de muertos por todas las causas y la poblacin total de una zona.

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MUDA: (ECDISIS): Vaina o tegumento que envuelve a artrpodos y a algunos gusanos (nematodos) y que en las etapas juveniles, de crecimiento, se desprende dando lugar a una nueva envoltura que puede desprenderse a su vez o ser definitiva.

MUTUALISMO: Tipo de simbiosis en la cual se benefician recprocamente hospedero y simbionte.

MIASIS: Parasitacin de rganos o tejidos humanos o animales por larvas de mosca.

NINFA: Estadios juveniles tanto de insectos con metamorfosis incompleta como de caros y garrapatas.

ONCSFERA: Larva con seis ganchitos que emerge de los huevos de los eucestodos. Tambin se llama hexacanto.

OOQUISTE: Forma qustica que contiene el cigoto resultante de la esporogonia en los Apicomplexa y los cuales pueden estar cubiertos por una envoltura translcida (Cystoisospora) o estar desnudos (Plasmodium).

PARSITO ACCIDENTAL: Parsito que se encuentra en un husped no habitual. PARSITO FACULTATIVO: Es aquel que desarrolla algunos protozoarios y hongos que viven sobre materias orgnicas en descomposicin, pero en ocasiones parasitan sobre heridas, ulceraciones, etc.

PARSITO OBLIGADO: Es aquel que necesariamente en alguna etapa o permanentemente ejerce su accin parasitaria.

PARSITO PERIODICO: Parsito que cumple parte de su ciclo en el ambiente y en el husped.

PARSITO PERMANENTE: Parsito que vive toda su existencia en o sobre su hospedero.

PARSITO TEMPORAL: Parsito que intermitentemente depende de un hospedero para subsistir y luego lo abandona.

PERIODO PREPATENTE: Etapa de la infeccin parasitaria comprendida desde el momento de la infeccin hasta la aparicin de la sintomatologa o la presencia del parsito.

PROGLTIDO: Segmento de la estrbilo de los cestodos, la cual contiene los rganos reproductores masculinos y femeninos.

PERIODO DE INCUBACIN: Intervalo que transcurre entre la infeccin de un sujeto susceptible (persona o animal) y el momento que presenta las primeras manifestaciones de la respectiva enfermedad.

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PUPA: Etapa en la metamorfosis de los dpteros, caracterizada por la existencia de un pupario en cuyo interior se producen importantes cambios que culminan con la formacin del imago o insecto adulto.

QUISTE: Forma inmvil de resistencia y de multiplicacin, envuelta por una doble membrana formada por los protozoos.

SP: Trmino usado cuando se diagnstica el gnero de un parsito y no se puede identificar la especie.

SUSCEPTIBLE: Persona o animal que carece de resistencia contra un agente patgeno y que en consecuencia puede contraer la enfermedad si se expone a la infeccin por dicho agente.

TROFOZOITO: Forma vegetativa activa y que se alimenta, entre los protozoos. VECTOR: organismo animal, generalmente artrpodo, que puede transportar activamente un agente desde la fuente infectante hasta un susceptible.

VECTOR MECNICO: Es el vector que lleva en el exterior de su cuerpo o en interior agentes patgenos.

VIA DE INFECCIN: Sitio (s) a travs de los cuales se introduce el agente etiolgico en el organismo del husped.

XENO: Husped. ZOONOSIS: Infeccin que se transmite en forma natural entre el hombre y animales vertebrados y viceversa.

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REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
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REVISTAS American Journal of Tropical Medicine and Hygiene. USA. Atlas de la Sociedad de Biologia de Rio de Janeiro. Rio de Janeiro. Brazil Boletin Chileno de Pa.rasitologia. Santiago. Chile Revista Peruana da Biologa. Lima, Per. Revista Peruana de Medicina Tropical de la UNMSM. Lima. Per

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