UNIVERSIDAD TCNICA DE MACHALA FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS ESCUELA DE ACUACULTURA INFORME DE PRACTICA DE LABORATORIO DE BIOQUMICA

ESTUDIANTE: William Javier Montero Snchez. CICLO: PROFESOR: Dr. Wilson Torres Ros. 3ero. GRUPO N 1

TEMA:

Machala, Lunes 8 de Agosto del 2011.

EXTRACCIN DE LPIDOS TOTALES Y TIPIFICACIN DE CIDOS GRASOS.

FUNDAMENTOS: La extraccin de lpidos totales en tejido animal se fundamenta en la absorcin del agua por funcin del Sulfato de Sodio Anhidro y la disolucin de los lpidos totales en Alcohol-ter en forma de cidos grasos libres los que se pueden ser tipificados. La liberacin de los cidos grasos libres se produce por el rompimiento de la doble ligadura que mantiene las grasas saturadas transformndolas en insaturadas por lo cual se tornan solubles en soluciones Alcohol-Agua. OBJETIVO: Reconocer el porcentaje de lpidos totales que se encuentran en tejidos animales aviar (pollo) y tipificar los cidos grasos oxidados. PROCEDIMIENTO: 1. Pesar 10g de muestra de tejido animal en una luna de reloj y disgregarla hasta obtener un residuo homogneo adicionando 1g de Sulfato de Sodio (SO4Na2) y transvasar a un Erlenmeyer seco previamente pesado, sea, desecado en la estufa a 100C por 15 minutos para eliminar cualquier vestigio orgnico. 2. Se adiciona 25ml de Alcohol absoluto (Etanol) y se somete a Bao Termodinmico (Bao Mara) a 50C por 15 minutos y luego se enfra la solucin. 3. Adicionamos 25 ml de una solucin Alcohol-ter (3 partes de alcohol y 2 de ter) y se somete a Bao Termodinmico (Bao Mara) a 50c por 30 minutos o a 75c por 15 minutos. 4. Una vez que no existen emanaciones de ter perceptibles se filtra la solucin separando el extracto solido del lquido. 5. Del extracto liquido se toma 10 ml para la tipificacin de los cidos grasos, y se adiciona 5 gotas de Fenolftalena y se valora con una solucin de Hidrxido de Potasio 0.1N (KOH) hasta cambio de coloracin. 6. En el filtrado restante contenido en el Erlenmeyer, en este caso fue en un vaso previamente pesado, se coloca en la estufa a 100C por 24 horas para eliminar el excedente de Alcohol, Agua y ter, y se obtiene la concentracin de lpidos totales por diferencia de peso entre el vaso con los residuos de muestra filtrado y el peso del vaso vacio por 100 sobre el peso de la muestra:

% Lpidos Totales
Muestra*100

Peso Vaso Muestra Filtrada-Peso Vaso VacioPeso

7. Los cidos grasos liberados se calcula con la siguiente frmula

% cidos Grasos Libres = Vol.Cons. *Const KOH*N*Factor Lipdico Peso

Muestra*100

Teniendo en cuenta los siguientes valores constantes a la cual son los factores lipdicos y la del Hidrxido de Potasio (KOH). FACTOR LIPDICO: 2.8 2.5 2.25 2.0 cido Lolico. cido Palmtico. cido Larico. cido Esterico. 0.9894. 0.1

CONSTANTE HIDRXIDO DE POTASIO (KOH) NORMAL HIDRXIDO DE POTASIO (KOH) REACTIVOS: Sulfato Sodio Na2SO4 Alcohol Absoluto (Etanol) Solucin Alcohol-ter 25ml Hidrxido Sodio 0.1N KOH Fenolftalena C20H14O4 RESULTADOS TOTALES. CLCULO DE LOS LPIDOS TOTALES Peso Vaso con Muestra Filtrada = 97.1g Peso Vaso Vacio = 96.5g Peso Muestra = 10g 1g por Muestra 25ml

15ml Alcohol (Etanol) 10ml ter Ya Preparado 4 Gotas

% Lpidos Totales
Muestra*100

Peso Vaso Muestra Filtrada-Peso Vaso VacioPeso

% Lpidos Totales = 97.1-96.510*100 % Lpidos Totales = 6%

CLCULO DE LOS CIDOS GRASOS LIBRES Vol. Consumido = 3.7ml Factor Lipdico: 2.8 cido Lolico.

Constante = 0.9894 Peso Muestra = 10g Normal = 0.1

2.5 2.25 2.0

cido Palmtico. cido Larico. cido Esterico.

% cidos Grasos Libres = Vol.Cons. *Const KOH*N*Factor Lipdico Peso

Muestra*100

1)

FACTOR LIPDICO CIDO LOLICO % cidos Grasos Libres = 3.7*0.9894*0.1*2.810 * 100 % cidos Grasos Libres = 10.25% (cido Lolico)

2)

FACTOR LIPDICO CIDO PALMTICO % cidos Grasos Libres = 3.7*0.9894*0.1*2.510 * 100 % cidos Grasos Libres = 9.15% (cido Palmtico)

3)

FACTOR LIPDICO CIDO LARICO % cidos Grasos Libres = 3.7*0.9894*0.1*2.2510 * 100 % cidos Grasos Libres = 8.24% (cido Larico)

4)

FACTOR LIPDICO CIDO ESTERICO % cidos Grasos Libres = 3.7*0.9894*0.1*2.010 * 100 % cidos Grasos Libres = 7.32% (cido Esterico)

PORCENTAJE TOTAL CIDOS GRASOS LIBRES 10.25% (Glucosa) 9.15% (Lactosa) 8.24% (Fructosa) 7.32% (Maltosa) 34.84% CIDOS GRASOS LIBRES

TOTAL CONCLUSIONES:

Logramos establecer el porcentaje total de lpidos que contiene el tejido animal aviar, mejor dicho de un pollo, y gracias ello logramos tipificarlos exactamente teniendo una buena lectura. ANEXOS: