Introduccin

A lo largo de la historia el ser humano por medio de la microbiologa ha intentado conocer el mundo que lo rodea, y dentro de este punto se encuentran los microorganismos. A partir de esto se ha buscado obtener informacin sobre ellos, que enfermedades producen y con ello buscar la solucin a patologas causadas por los microorganismos. Con el fin de obtener la mayor informacin sobre estos microorganismos se desarrolla el antibiograma, el cual nos ensea la actividad de un antimicrobiano sobre un determinado patgeno, presente en un determinado sitio anatmico, es decir si nos encontramos con un microorganismo que nos est ocasionando alguna patologa, mediante un antibiograma podremos ver cul es el medicamento ideal que nos permitir eliminar a ese microorganismo patgeno y a cuales medicamentos son resistentes, los cuales por cierto no los incluiremos en nuestro tratamiento. La actividad de laboratorio consiste en realizar un antibiograma con la muestra intraoral del dorso de la lengua en la porcin ms posterior, la que ser sembrada en Agar Mueller Hinton con una serie de sensidiscos con medicamentos como la penicilina, ampicilina con y sin Sulbactam, ciprofloxacina, eritromicina, gentamicina y tetraciclina. Con esto se buscar conocer a que medicamentos, anteriormente nombrados, es resistente o sensible el microorganismo, dependiendo del tamao del halo presente alrededor del sensidisco, lo que podremos ver una vez terminado el antibiograma. Posteriormente con esto se espera averiguar que microorganismo est presente en el dorso de la lengua por medio de la realizacin de tincin Gram, la cual entregar informacin valiosa sobre las caractersticas del microorganismo para conocer ms acerca del mundo microbiolgico oral, lugar fundamental para el futuro odontlogo ya que en este campo se desarrollarn la mayor parte de las intervenciones. Es una experiencia emocionante en la cual se espera obtener resultados favorables en cuanto a la reaccin del microorganismo conociendo si ste es resistente o no a los medicamento y saber quien habita nuestra cavidad oral.

Materiales

Placas de Petri con Agar Mller Hinton Trulas estriles Asas plsticas Mechero Pinzas Caja apta para material corto punzante Plumn Permanente (vidrio). Microscopio Guantes de procedimiento Toalla de papel Portaobjetos Sensidiscos (penicilina, ampicilina, tetraciclina, Eritromicina, Gentamicina) Regla Cristal violeta Lugol Safranina Alcohol-cetona

ciprofloxacina,

Sulbactam,

Mtodo

Paso 1: El docente a cargo, mostr los elementos de uso habitual en el Laboratorio de Infectolologa y su correcta manipulacin. Paso 2: Para demostrar la presencia de microorganismos presentes en superficies de la cavidad oral tales como el dorso de la lengua en nuestro caso, se tom con una trula estril una muestra de placa bacteriana de esa zona, luego se procedi a sembrar la muestra en el Agar Mller Hinton (en forma de csped), para permitir el crecimiento de los microorganismos. Paso 3: Con la siembra lista, se procedi a colocar el disco de antibitico con pinzas estriles sobre el Agar, y se presion suavemente sobre la superficie del medio teniendo en cuenta que los discos no deben estar a menos de 15 mm de los bordes de la placa y a unos 20 mm uno de otro para que no se superpongan las zonas de inhibicin. Paso 4: Se marc las placas y dejamos que ocurra el proceso evolutivo para que difunda el antibitico hasta la semana siguiente, dejando un registro del tipo de antibitico sembrado en cada sensidisco y el orden de ellos. Paso 5: Luego, con la flora bacteriana lista para ser examinada, se midi los dimetros de las zonas de inhibicin de cada antibitico con una regla. Y de acuerdo a los resultados obtenidos, se procedi a clasificar los microorganismos investigados con los criterios de inhibicin: sensible, intermedio y resistente. Paso 6: Para una mejor observacin microscpica de las bacterias encontradas se llev a cabo la realizacin de la tincin de Gram para la identificacin especfica de la flora, de manera que se tom un poco de muestra del cultivo para fijarla mediante calor en un portaobjetos; se coloc cristal violeta(que tie todas las bacterias Gram + y -) durante un minuto; se fij con Lugol con el mismo tiempo de duracin que el anterior, posteriormente se decolor con una mezcla alcoholcetona (principalmente para las bacterias Gram-) y por ltimo se coloc safranina (colorante de contraste, que tie a los Gram -) durante un minuto. Entonces al finalizar el procedimiento se observarn de color azul-violeta las Gram + y de color rosa las Gram -.

Resultados

Al analizar el antibiograma realizado una semana antes, se logra apreciar que alrededor de los sensidiscos no se encontraba ninguna reaccin, es decir no hay presencia de halos por lo que en un principio se cree que la bacteria tal vez es inmune a estos medicamentos, sin embargo al observarlo con ms detalle se llega a la conclusin que ocurri un error en el modo de sembrado, en vez de ser sembrado en forma de csped, se llevo a cabo un sembrado en zig zag por lo que los sensidiscos impregnados con medicamentos no lograron ser alcanzados por la muestra extrada desde el dorso de la lengua en su plenitud, por lo que se tuvo que examinar muy minuciosamente la muestra, tomando en cuenta las reaccin de la bacteria alrededor del sensidisco en el lugar que lograba atravesar la muestra, fijndose en el crecimiento del cultivo. Teniendo como resultado la siguiente tabla:

Medicamentos Mayor grado de sensibilidad Ampicilina Ampicilina + Sulbactam Penicilina Tetraciclina Ciprofloxacina Gentamicina Menos grado de sensibilidad Eritromicina

Halo presente (cm.) 1,5 1 0,7 0,5 0,4 0,2 0

Segn lo muestra la tabla anterior la ampicilina es el medicamento que le ocasiona a la bacteria mayor sensibilidad, por lo que en el caso de presentar alguna patologa ocasionada por la bacteria presente, el medicamento ms efectivo para terminar con esto sera la Ampicilina y por otro lado el medicamento al que la bacteria en este caso es ms resistente es la Eritromicina, por lo que no se podra tratar alguna patologa con este medicamento ya que lo hara ineficaz en el tratamiento de una enfermedad que se produzca en la zona en cuestin.

Luego de analizado en el antibiograma y llegar a la deduccin que la ampicilina es el medicamento al cual la bacteria es ms sensible y ms resistente a la eritromicina se buscar averiguar por medio de la tincin Gram que bacteria(s) es la que habita en el dorso de la lengua y para as poder reconocer o visualizar las bacterias presentes en nuestro antibiograma. De este procedimiento se extrae una muestra de la colonia formada en el antibiograma y se realizo la tincin Gram, teniendo como resultado cocos inmviles Gram positivos por su color de aspecto morado, formando grupos de clulas irregulares semejantes en pares, en racimos o en cadenas cortas, por lo que se descubre que la bacteria presente en el dorso de la lengua corresponde al staphylococcus aureus debido a las caractersticas anteriormente mencionadas.

Discusin De acuerdo a las caractersticas observadas y analizadas en el laboratorio, tanto macroscpicamente como microscpicamente, se puede decir que la siembra en placa de Petri In Vitro, cultivada a partir de una muestra del dorso de la lengua, nos dice que se trata de un Staphylococcus Aureus. La decisin est basada en las caractersticas de la bacteria, as tambin como por lo contrastado con la literatura microbiolgica. El Staphylococcus Aureus es una bacteria Gram +, lo cual se evidenci microscpicamente por su color purpura. Tambin presenta un crecimiento semejante a racimos de uvas en forma de cocos, lo cual se observ tambin en el microscopio. Esta bacteria es aerobia o anaerobia facultativa, lo cual explicara por qu al ser sacada del dorso de la lengua donde tendra un comportamiento anaerobio, luego puede crecer en presencia de oxigeno comportndose de manera anaerobia facultativa. El gnero Staphylococcus Aureus puede crecer en distintos hbitats, incluso en mucosas, lo cual explicara el establecimiento en dorso de la lengua. Macroscpicamente se observ como una leve pigmentacin dorada amarilla, que es caracterstica de la bacteria. Este microorganismo posee penicilinasa, permitindole ser resistente a la penicilina, para esto es necesario utilizar en el tratamiento derivados de la misma para que la sensibilidad a este medicamento sea efectiva; es as que con la realizacin del antibiograma a la siembra de la bacteria se detect una sensibilidad a la ampicilina en primer lugar, puesto que su halo de inhibicin era el mayor, en segundo lugar sensibilidad frente a la ampicilina-sulbactam, mientras que en tercer lugar se comprob un halo de inhibicin ms pequeo para la penicilina; en ltimo lugar se encuentra la eritromicina, puesto que a sta mostrara resistencia, tanto as como a la tetraciclina, ciprofloxaxina y gentamicina.

Conclusin

Referencias