PRACTICA Nº 6

RECUENTO DE SALMONELLA SPP. Y LISTERIA MONOCYTOGENES.

BACTERIOLOGÍA Y LABORATORIO CLÍNICO
CONTROL Y SEGURIDAD ALIMENTARIA

Angarita Bautista Leidy Yudith Código: 02171043,

Parada Cárdenas Geisel Yelene Código: 04172026.

RESUMEN

La carne, productos cárnicos, leche, huevos son susceptibles al ataque

de microorganismos como la salmonella; del mismo modo la leche
cruda pasteurizada, carnes crudas, pollo por otro microorganismo como
es la listeria monocytogenes. Esta práctica tuvo por objeto indagar en la
contaminación dada por estos microorganismos sobre carne cruda y
avena. Estas toxiinfecciones son muy comunes si no se tienen en cuenta
las BPM. El análisis de salmonella sobre carne cruda se hizo de la
siguiente manera: 1. PRE-enriquecimiento en medio liquido no selectivo,
2. Enriquecimiento liquido no selectivo (caldo selenito), 3. Aislamiento
diferencial sobre medio sólido selectivo (agar salmonella shiguella,
siembra por agotamiento), de donde se hará la confirmación de
salmonella por medio de la bioquímica. El recuento de listeria
monocytogenes se llevo a cabo en avena; en donde el método utilizado
fue en primer lugar un PRE-enriquecimiento en medio liquido no
selectivo, siembra en medio sólido diferencial (agar palcam) a partir del
anterior, del cual se obtuvieron dos clases de colonias a las que se les
realizo gran y una de la morfología de las colonas fue cocobacilos gram
positivos que posteriormente se le realizo catalasa dando un resultado
positivo. Teniendo estas características y para confirmar la presencia de
listeria se realizó bioquímica a este tipo de colonia y los resultados
fueron determinantes para decir que no se trataba de listeria
monocytogenes.

ABSTRACT

1
The meat, meat products, milk, eggs are susceptible to the attack of
microorganisms like the salmonella; in the same way the pasteurized
raw milk, raw meats, chicken for another microorganism like it is the
listeria monocytogenes. This practice had for object to investigate in the
contamination given by these microorganisms it has more than enough
raw meat and it trenches. These toxiinfecciones is very common if they
are not kept in mind the BPM. The salmonella analysis has more than
enough raw meat it was made in the following way: 1. Pre-enrichment
between I not liquidate selective, 2. Enrichment not liquidates selective
(broth selenito), 3. differential Isolation on half accustomed to selective
(agar salmonella shiguella, siembra for exhaustion), of where the
salmonella confirmation will be made by means of the biochemistry. The
recount of listeria monocytogenes you carries out in oat; where the used
method was a pre-enrichment in the first place between I not liquidate
selective, siembra between having been accustomed to differential (agar
palcam) starting from the previous one, of which two classes of colonies
were obtained those that are carried out great and one of the
morphology of the colonas was cocobacilos positive gram that later on is
carried out catalasa giving a positive result. Having these characteristics
and to confirm the listeria presence you biochemical relized to this
colony type and the results were decisive to say that it was not listeria
monocytogenes.

Palabras Claves descendencia que proviene de

una sola bacteria (UFC: Unidad
Gram: Procedimiento de Formadora de Colonia), se
coloración de las bacterias. Las caracteriza por estar formada de
bacterias se dividen, según se un solo tipo de bacteria
tiñen con esta solución, en gram-
positivas y gram-negativas. Bacteria: son organismos
unicelulares y pueden ser benéficas o
Toxiinfección: es una patógenas. La mayoría de las bacterias
enfermedad originada en el pueden vivir y replicarse fuera de un
ambiente celular (extracelulares),
hombre al ingerir alimentos que
mientras otras requieren de otras
contienen microorganismos células para poder replicarse
viables o las toxinas que se (intracelulares).
producen cuando éstos se
multiplican en los alimentos. INTRODUCCION

Catalasa: es una enzima que se Las toxiinfecciones alimentarías

encuentra en organismos vivos y provocadas por los
cataliza la descomposición del microorganismos patógenos del
peróxido de hidrógeno (H202) en genero salmonella y listeria tiene
oxígeno y agua. gran importancia por el gran
Colonia: Una colonia de número de personas infectadas y
bacterias se define como toda la por la industrialización de

1
 alimentos que favorecen la partir de los cuales se pueden
diseminación de estos agentes. contaminar los alimentos y el
agua. Este microorganismo es el
Debemos tener en cuenta que la agente causal de varias
listeriosis humana afecta enfermedades infecciosas entre
principalmente a personas de la las que se encuentran las fiebres
tercera edad, mujeres entéricas, gastroenteritis,
embarazadas y niños recién toxiinfecciones alimentarias y la
nacidos y personas que tienen fiebre tifoidea.
comprometido su sistema
inmunitario. La bacteria causa MATERIALES
con mucha frecuencia una
infección sanguínea generalizada 1 Pipetas estériles 1ml y 10 ml
(septicemia) o una inflamación 1 Asa redonda
de las membranas que cubren el 1 Tubo con caldo Selenito de
cerebro (meningitis). 10ml
2 agua Peptona por 225ml c/d
Salmonella sp. es un género de Agar Salmonella- Shigella
la familia Enterobacteriaceae. Su Agar sangre
amplia distribución en el 1 sacarosa
ambiente se debe a la existencia 1
de numerosos reservorios a

METODO

* Tipo de muestra: 200 gr.

Carne Cruda
Fecha de recolección:
15/09/08 Procedimiento Salmonella
Hora: 2:00 p. m spp.
Temperatura conservación: 4º
C 1. Fase PRE- enriquecimiento
En parte baja del botellero en ½ líquido no selectivo

Pesar 25 gr. De la carne cruda

* Tipo de muestra: Avena asépticamente
casera Adicionar y Homogenizar
Fecha de preparación:
15/09/08
Hora: 2:00 p. m.
Temperatura conservación: 8º
C 25 gr. de carne
En el botellero cruda
Sabor: dulce
255 ml Agua
peptona

1
 Gram Negativos realizar
bioquímica
Dilución 10-1

Incubar a 37ºC por 18-24 horas

2. Fase Enriquecimiento no Procedimiento Listeria

selectivo monocytogenes:
Adicionar 1. Fase PRE- enriquecimiento
1ml en ½ líquido no selectivo

Tomar 25 ml. De la avena en

Dilución 10-1 leche casera, Adicionar agua
caldo Selenito peptona y Homogenizar
Cist
eína
Diluc
ión 10-2
25 ml. de avena en
Incubar a 42ºC en Baño María, leche casera
por 18 horas
255 ml Agua
3. Fase Aislamiento diferencial peptona
en ½ selectivos
Dilución 10-1

Sembrar por Incubar a 37ºC por 18-24 horas

Aislamiento en la incubadora
Dilución 10-2 Agar
S-S 2 Fase siembra en medios
Caldo Selenito Cisteína diferenciales:
salmonella-shigella

Incubar a 37ºC, por 24 horas a

48 horas

Observar la presencia de Dilución 10-1 Sembrar por

colonias negras con un alo Agar Sangre
rosado, realizar Gram a las Aislamiento
colonias típicas, Si hay bacilos
Incubar a 37ºC, por 24 horas

1
 Glucosa Sacarosa VP-RM TSI
3. Fase Identificación Movilidad

Realizar coloración de Gram. a

las colonias típicas

BIBLIOGRAFÍA

Oxidasa a las colonias típicas

Catalasa a las colonias típicas

A partir de las colonias del

Gram. Que sean bacilos cortos
gram positivos, catalasa
positiva oxidasa negativa
Se les realiza identificación:

Agar Sangre