Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner 2013

DAYA TAHAN HIDUP SPERMATOZOA KAMBING BOER

DALAM PENGENCER TRIS KUNING TELUR YANG
DISIMPAN PADA TEMPERATUR BERBEDA
(Survive ability of Boer Spermatozoa in Egg Yolk Tris Diluent Stored on
Different Temperatures)
Fitra Aji Pamungkas, Anwar

Loka Penelitian Kambing Potong

PO Box 1 Sei Putih, Galang 20585 Sumatera Utara

ABSTRACT

The experiment was conducted to evaluate the survival of boer goat spermatozoa stored at room
temperature and 35°C in Tris egg yolk extender. The semen was collected using artificial vagina from three
male Boer goats, 2 years old with body weight of 50-55 kg. The semen was than evaluated microscopically
after diluted with Tris egg yolk extender, with a concentration of 200 x 106 /ml, and then stored at room
temperature and 35°C. The sperm motility, viability and membrane integrity were evaluated every 1.5 hours.
Result of the experiment showed that the initial quality of Boer goat spermatozoa diluted with Tris egg yolk
extender obtained percentage motility 79.09±3.75%, viable sperm was 91.70±4.41 with membrane integrity
75.13±4.34%. After 6 hours of storage, the percentage of sperm motility of liquid semen stored at room
temperature (61.62±8.52%) were higher (P<0.05) compare to stored at 35°C (17.00±6.08%). The percentage
of sperm viability and membrane integrity showed the same pattern. It is concluded that Boer goat
spermatozoa in Tris egg yolk extender and stored at room temperature up to 6 hours of storage time is better
than 35°C.
Key Words: Chilled Semen, Goats, Boer, Room Temperature

ABSTRAK

Tujuan penelitian ini adalah mengkaji daya tahan hidup spermatozoa kambing Boer dalam pengencer Tris
kuning telur yang disimpan pada suhu ruang dan 35°C. Ternak yang digunakan adalah tiga ekor kambing
pejantan Boer berumur 2 tahun dengan bobot hidup 50-55 kg. Penampungan semen menggunakan vagina
buatan, semen yang diperoleh dievaluasi secara mikroskopis selanjutnya diencerkan dengan Tris kuning telur
hingga konsentrasi 200x106 ml-1, lalu disimpan pada suhu ruang dan 35oC. Pengamatan semen cair dilakukan
terhadap persentase motilitas, viabilitas dan integritas membran spermatozoa setiap 1,5 jam. Hasil penelitian
menunjukkan bahwa kualitas awal spermatozoa kambing Boer dalam pengencer Tris kuning telur diperoleh
persentase motilitas 79,09±3,75%, viabilitas spermatozoa 91,70±4,41% dengan integritas membran
75,13±4,34%. Setelah 6 jam penyimpanan, semen cair yang disimpan pada suhu ruang (61,62±8,52%)
menunjukkan persentase motilitas yang lebih tinggi (P<0,05) dibandingkan dengan disimpan pada suhu 35°C
(17,00±6,08%), demikian juga dengan viabilitas dan integritas membran spermatozoa. Kesimpulan dari
penelitian ini adalah spermatozoa kambing Boer dalam pengencer Tris kuning telur yang disimpan pada suhu
ruang selama 6 jam lebih baik dibandingkan dengan disimpan pada suhu 35°C.
Kata Kunci: Semen Cair, Kambing Boer, Suhu Ruang

PENDAHULUAN apabila menggunakan semen beku. Berbagai

Penerapan teknologi Inseminasi Buatan
(IB) pada kambing hingga saat ini masih belum
sesuai dengan yang diharapkan, ditandai
dengan angka kebuntingan rendah terutama
hasil penelitian menunjukkan bahwa angka
kebuntingan pada kambing yang diperoleh
dengan menggunakan semen beku bervariasi
dari 30-70% (Salvador et al. 2005; Dorado et
al. 2007). Selain itu, permasalahan dalam

331
 Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner 2013
penanganan semen beku yang sering dijumpai
di lapangan adalah keterbatasan kontainer,
kesulitan dan keterlambatan dalam memperoleh
nitrogen cair, serta mahalnya harga nitrogen
cair (Situmorang 2003).
Keuntungan utama menggunakan semen
cair yaitu proses preservasi dan distribusi yang
mudah dan murah karena tidak ada peralatan
khusus yang diperlukan (Verstegen et al. 2005;
Shahiduzzaman dan Linde-Forsberg 2007).
Penggunaan pengencer Tris pada semen cair
karena keunggulan dalam mempertahankan:
perubahan pH, tekanan osmotik, keseimbangan
elektrolit dan osmolaritas (Yoshida 2000).
Penggunaan kuning telur umumnya digunakan
sebagai agen yang efektif untuk melindungi
membran plasma dan akrosom spermatozoa
dari efek kejutan dingin karena kandungan
fosfolipid, low density lipoproteins dan
kandungan kolesterolnya (Aboagla dan Terada
2004; Amirat et al. 2004).
Aplikasi penggunaan semen cair dibatasi
oleh longivitas atau daya tahan hidup
spermatozoa. Longivitas atau daya tahan hidup
adalah kemampuan spermatozoa bertahan
dalam temperatur tertentu (Arifiantini et al.
2005). Menurut Birkhead et al. (2009),
longivitas merupakan respon adaptasi
spermatozoa yang ditentukan dengan
mengetahui kapan metabolisme spermatozoa
kembali aktif menggunakan sumber energinya.
Balai Inseminasi Buatan Lembang melakukan
uji longivitas spermatozoa pada suhu 35-37°C,
dimana selama 4 jam masih harus memiliki
motilitas spermatozoa sebanyak 10% untuk
bisa didistribusikan semen bekunya ke
peternak. Daya tahan hidup spermatozoa dari
semen beku sapi FH dengan berbagai bahan
pengencer dapat bertahan sampai dengan 9 jam
(Arifiantini 2005). Daya tahan hidup
spermatozoa dari semen cair yang disimpan
pada suhu 5oC pada sapi Simmental (Said et al.
2005), sapi Friesian Holstein (Kusumaningrum
et al. 2004) dan kambing Peranakan Ettawah
(Rizal et al. 2008) dapat dipertahankan selama
3 hari. Sedangkan penggunaan semen cair yang
disimpan pada suhu ruang masih membutuhkan
penelitian yang panjang mengingat daya hidup
dan waktu simpan yang didapat masih rendah.
Oleh karena itu, tujuan dari penelitian ini
adalah untuk mengetahui daya tahan hidup
semen cair kambing Boer yang disimpan pada
332
suhu ruang dan 35°C di dalam pengencer Tris
kuning telur.
MATERI DAN METODE
Penelitian dilakukan di Laboratorium
Reproduksi Loka Penelitian Kambing Potong
Sei Putih, Sumatera Utara. Materi ternak untuk
penelitian adalah kambing pejantan Boer
berjumlah 3 ekor yang berumur antara 2-3
tahun dengan bobot badan berkisar antara 50-
55 kg. Kambing ditempatkan dalam kandang
individu yang dilengkapi dengan tempat pakan
dan minum. Pemberian sumber bahan makanan
dalam bentuk konsentrat dan hijauan pakan
ternak. Pemberian konsentrat berkisar antara
400-500 gram per ekor per hari dilakukan pada
waktu pagi hari, sedangkan hijauan pakan
berupa rumput dengan jumlah pemberian
berkisar antara 3-4 kg segar per ekor per hari
diberikan pada waktu siang dan sore hari.
Pemberian air minum secara ad libitum.
Koleksi semen
Penampungan semen menggunakan vagina
buatan dengan inner liner pada bagian
dalamnya untuk selanjutnya diberi air bersuhu
40-42°C dan udara melalui katup, diberi
pelumas dengan kedalaman tidak lebih dari 3
cm sehingga vagina buatan menyerupai kondisi
sebenarnya, kemudian pada salah satu bagian
ujung vagina buatan dipasang tabung
penampung spermatozoa. Semen ditampung
secara reguler dengan interval 1 minggu sekali
dan 1 ejakulat per setiap periode penampungan.
Pengolahan dan preservasi semen
Semen segar hasil penampungan dibawa ke
laboratorium, lalu diencerkan menggunakan
bahan pengencer Tris kuning telur dengan
komposisi yaitu 2,96 g Tris aminomethane,
1,65 g asam sitrat, 2,16 g laktosa, 6 ml gliserol,
1.000 IU/ml penisilin, 1.000 µg/ml streptomisin,
20 ml kuning telur dan aquabidest ad 100 ml
(Kostaman et al. 2000). Konsentrasi
spermatozoa dalam bahan pengencer adalah
200 x 106 ml-1. Penyimpanan semen cair
dilakukan pada suhu ruangan dan di water bath
bersuhu 35°C. Pengamatan semen cair
dilakukan setiap 1,5 jam dengan parameter
 Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner 2013
yang diamati adalah persentase motilitas,
integritas membran dan viabilitas spermatozoa.
Evaluasi semen
Evaluasi dilakukan secara mikroskopis
(motilitas, viabilitas dan integritas membran).
Penilaian persentase motilitas spermatozoa
ditentukan dengan cara menempatkan satu
tetes semen yang telah diencerkan dengan
larutan 0,9% NaCl pada gelas objek dan ditutup
dengan gelas penutup. Pengamatan terhadap
spermatozoa yang bergerak progresif dilakukan
secara subjektif pada enam lapang pandang
yang berbeda di bawah mikroskop dengan
pembesaran 400x. Penilaian yang diberikan
mulai nol persen (tidak ada spermatozoa yang
bergerak ke depan) sampai 100 persen (semua
spermatozoa bergerak ke depan).
Penentuan persentase viabilitas dari
spermatozoa dilakukan dengan menggunakan
metode pewarnaan eosin-negrosin dengan
komposisi pewarna eosin-negrosin untuk 300
ml air mili-Q terdiri dari 3,3 g eosin yellow
(Wako Pure chemical Industries, 058-00062),
20 g nigrosin (Sigma-Aldrich 198285) dan 1,5
g sodium sitrat, menurut prosedur Barth dan
Oko (1989). Sebanyak 10 μl sampel semen dan
40 μl eosin-negrosin dicampur di atas gelas
obyek kemudian dibuat preparat ulas dan
dikeringkan menggunakan bunsen selama 15
detik sebelum dilakukan pengamatan di bawah
mikroskop dengan pembesaran 400x.
Spermatozoa yang dikategorikan hidup adalah
spermatozoa yang tidak menyerap zat warna
sehingga pada bagian kepala spermatozoa tidak
terwarnai (putih), sedangkan spermatozoa yang
dikategorikan mati adalah spermatozoa yang
menyerap zat warna sehingga pada bagian
kepalanya akan berwarna merah. Persentase
viabilitas spermatozoa ditentukan berdasarkan
perbandingan antara jumlah spermatozoa hidup
dengan jumlah total spermatozoa. Jumlah total
spermatozoa yang dihitung adalah 200
spermatozoa.
Penilaian persentase integritas membran
spermatozoa diperiksa menggunakan
Hypoosmotic Swelling Test (HOS-Test) dengan
komposisi larutan HOS untuk 10 ml air mili-Q
ditambah dengan 0,135 g fruktosa (Merck,
Germany) dan 0,0735 g trisodium citrate
2H2O. Sampel semen sebanyak 20 µl
diencerkan dengan 80 µl larutan HOS dan
dibiarkan selama 10 menit pada suhu kamar.
Untuk keperluan pengamatan, diteteskan 10 μl
sampel semen pada gelas objek yang ditutup
dengan gelas penutup dan evaluasi dilakukan
di bawah mikroskop dengan pembesaran 400x.
Perhitungan dilakukan pada lima lapang
pandang secara acak terhadap spermatozoa
yang mempunyai ekor melingkar (membran
plasma utuh) maupun yang mempunyai ekor
lurus (membran plasma tidak utuh). Jumlah
total spermatozoa yang dihitung adalah 200
spermatozoa.
Analisis data
Data dianalisis menggunakan rancangan
acak lengkap dengan dua perlakuan, dengan
jumlah ternak 3 ekor dan masing-masing
diulang sebanyak lima kali. Apabila terdapat
perbedaan antar perlakukan dilanjutkan dengan
Duncan’s Multiple Range Test (DMRT)
menurut Steel dan Torrie (1993). Data diolah
menggunakan program SPSS versi 19.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Karakteristik spermatozoa kambing boer
dalam pengencer tris kuning telur
Karakteristik spermatozoa kambing Boer
setelah penambahan pengencer Tris kuning
telur menunjukkan kualitas baik dengan
persentase motilitas, viabilitas dan integritas
membran spermatozoa seperti pada Tabel 1.
Hasil ini menunjukkan bahwa motilitas
spermatozoa yang progresif sebesar
79,09±3,75%. Nilai ini tidak jauh berbeda
dengan yang dilaporkan oleh Naing et al.
(2010) pada kambing Boer dengan persentase
motilitas spermatozoa 73,8±1,9%. Hal yang
kurang lebih sama juga dilaporkan
Kusumaningrum et al. (2004) bahwa
persentase motilitas spermatozoa sapi FH
setelah penambahan kuning telur sebesar
75,00±5,34%. Tambing et al. (2003)
melaporkan bahwa persentase motilitas
spermatozoa kambing Peranakan Ettawah
sebesar 71,67±2,58%. Begitu pula Said et al.
(2005) melaporkan persentase motilitas
spermatozoa sapi Simmental setelah
penambahan kuning telur sebesar 76,25%.
333
 Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner 2013

Tabel 1. Kualitas awal spermatozoa kambing Boer
dalam pengencer Tris kuning telur
Karakteristik semen Rataan±SD (%)
Motilitas 79,09±3,75
Viabilitas 91,70±4,41
Integritas membran 75,13±4,34
Persentase viabilitas dan integritas
membran spermatozoa setelah penambahan
pengencer Tris kuning telur pada penelitian ini
berturut-turut sebesar 91,70±4,41% dan 75,13
±4,34%. Hasil yang diperoleh pada penelitian
ini menunjukkan persentase motilitas,
viabilitas dan integritas membran spermatozoa
masih cukup tinggi. Penggunaan pengencer
Tris kuning telur dengan kandungan Tris dan
kuning telur diduga dapat melindungi
spermatozoa selama proses penyimpanan.
Penggunaan pengencer tris pada semen cair
karena keunggulan dalam mempertahankan:
perubahan pH, tekanan osmotik, keseimbangan
elektrolit dan osmolaritas (Salamon dan
Maxwell 2000; Yoshida 2000). Begitu pula
kuning telur yang didalamnya terdapat lesitin
dapat mempertahankan motilitas spermatozoa
karena kandungan phosphatidylcholine
(Kikuchi et al. 1998). Kandungan phovitin,
ceruloplasmin, ovalbumin dan ovotransferrin
yang terdapat pada kuning telur dapat
menghilangkan ion logam bebas yang dapat
mengkatalisis produksi Reactive Oxygen
Species (ROS). Begitu pula protein yang mirip
dengan ekstraselular superoksida dismutase
dan plasma glutathione peroksidase pada
kuning telur dapat berkontribusi dalam
meningkatkan kapasitas antioksidan (Mann
dan Mann 2008).
Selain itu, keberadaan seminal plasma
merupakan media isotonis mengandung sumber
energi yang langsung dapat dipergunakan oleh
spermatozoa seperti fruktosa dan sorbitol
(Hafez 2000). Menurut Hammerstedt (1993),
spermatozoa hanya dapat hidup tergantung
pada seminal plasma sebagai sumber energi
dan tidak dapat mensintesa sendiri energi yang
diperlukan untuk proses metabolisme maupun
memperbaiki kerusakan sel.

90
80
70
60
% Motilitas

50
40 Suhu ruang
30 Suhu 35°C
20
10
0
1,5 3 4,5 6
Lama penyimpanan (jam)

(*)
Menunjukkan perbedaan yang nyata (P<0,05) pada persentase motilitas spermatozoa di antara suhu
penyimpanan
Gambar 1. Persentase motilitas spermatozoa kambing Boer selama penyimpanan. Dalam setiap lamanya
penyimpanan, bar dengan huruf yang berbeda (a,b; x,y,z) menunjukkan perbedaan yang nyata
untuk spermatozoa yang disimpan pada suhu ruang dan suhu 35°C (P<0,05)

334
 Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner 2013
Karakteristik spermatozoa kambing boer
selama proses penyimpanan pada
temperatur berbeda
Preservasi semen cair umumnya dilakukan
pada suhu 3-5°C. Pada kondisi tidak terdapat
lemari es, maka tidak ada pilihan lain selain
menyimpan semen cair pada suhu ruang. Suhu
ruang di daerah tropis berbeda dengan di
daerah sub tropis. Di daerah sub tropis suhu
ruang umumnya adalah 20°C. Suhu ruang
ditempat penelitian ini berkisar antara 27°C
(pagi hari) sampai dengan 30°C (sore hari).
Persentase motilitas merupakan gambaran
dari aktifitas spermatozoa yang progresif dan
berkorelasi sangat erat dengan fertilitas. Hasil
penelitian menunjukkan bahwa persentase
motilitas spermatozoa kambing Boer yang
disimpan pada suhu ruang menunjukkan
perbedaan yang nyata (P<0,01) dengan suhu
35°C pada lama penyimpanan 1,5-6 jam.
Penurunan persentase spermatozoa motil pada
suhu 35°C lebih cepat dibandingkan dengan
suhu ruang. Hal ini dapat dipahami mengingat
pada suhu 35°C metabolisme berlangsung
hampir optimal, sehingga fruktosa ataupun
glukosa sebagai sumber energi bagi pergerakan
spermatozoa cepat habis dan menghasilkan
hasil sampingan berupa asam laktat yang dapat
menurunkan pH bahan pengencer (Nalley
2007).
Penyimpanan dalam jangka waktu lama
menyebabkan penurunan motilitas
spermatozoa akibat adanya asam laktat sisa
metabolisme sel yang menyebabkan kondisi
medium menjadi semakin asam karena
penurunan pH dan kondisi ini dapat bersifat
racun terhadap sepermatozoa yang akhirnya
menyebabkan kematian spermatozoa (Sugiarti
et al. 2004). Apabila sumber cadangan energi
lain telah habis, spermatozoa akan
menggunakan cadangan energi yang terdapat
dalam plasmalogen yang diuraikan terlebih
dahulu oleh O2 dan asam lemak yang
dibebaskan akan di oksidasi menjadi CO 2
(Hafez 2000). Menurut Gazali dan Tambing
(2002), peroksida lipid berperan utama dalam
proses penuaan, memperpendek daya hidup
spermatozoa, menginduksi perubahan struktur
terutama pada daerah akrosom dan penurunan
motilitas secara cepat.
Persentase viabilitas dan integritas
membran spermatozoa kambing Boer dalam
pengencer Tris kuning telur yang di simpan
pada temperatur yang berbeda menunjukkan
pola yang sama dengan persentase motilitas
spermatozoa. Hasil penelitian menunjukkan
bahwa persentase viabilitas spermatozoa
kambing Boer yang disimpan pada suhu ruang
menunjukkan perbedaan yang nyata (P<0,01)
dengan suhu 35°C pada lama penyimpanan
1,5-6 jam, begitu pula pada persentase
integritas membran spermatozoa. Penurunan
persentase viabilitas dan integritas membran
spermatozoa pada suhu 35°C lebih cepat
dibandingkan dengan suhu ruang, hal ini
dikarenakan metabolisme spermatozoa berjalan
hampir optimal dibandingkan dengan suhu
ruang. Pada suhu ruang, menurut Vishwanath
dan Shannon (2000) spermatozoa mempunyai
daya tahan hidup yang sangat pendek, apalagi
jika spermatozoa disimpan melebihi suhu
ruang.
Selama proses metabolisme spermatozoa
akan dihasilkan radikal bebas dinamakan
reactive oxygen species (ROS) yang dapat
merusak ikatan rangkap pada asam lemak
sehingga dapat menyebabkan kerusakan pada
DNA dan protein (Best 2006). Hal ini selain
disebabkan sumber nutrisi yang cepat habis
dan dihasilkannya ROS, penyebab lain adalah
enzim aromatic amino acid aminase (AAAO)
yang dilepaskan dari membran plasma
spermatozoa yang mati. Semakin tinggi suhu
dan semakin lama penyimpanan spermatozoa,
jumlah enzim ini akan meningkat. Substrat
energi yang menurun, penimbunan asam laktat,
ROS dan dilepaskannya enzim AAAO oleh
membran spermatozoa yang mati,
menyebabkan spermatozoa hanya bertahan
selama 24 jam saja (Nalley 2007). Hal ini
terjadi karena adanya sisa metabolisme
spermatozoa yang bersifat asam dan
mengakibatkan pH menjadi turun, dan inilah
yang menjadi toksik bagi spermatozoa.
Situmorang et al. (2001) menyatakan
bahwa keasaman akan mempengaruhi struktur
kimia kuning telur dan kemungkinan besar
protein maupun lipid protein akan
terdenaturasi, sehingga tidak efektif lagi
berfungsi sebagai bahan yang dapat
melindungi spermatozoa dari lingkungan yang
kurang baik.
335
 Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner 2013

100
90
80
70
60
% Viabilitas

50
40 Suhu ruang
30 Suhu 35°C
20
10
0
1,5 3 4,5 6
Lama penyimpanan (jam)

90
80
% Integritas membran

70
60
50
40 Suhu ruang
30 Suhu 35°C
20
10
0
1,5 3 4,5 6
Lama penyimpanan (jam)

(*)
Menunjukkan perbedaan yang nyata (P<0,05) pada persentase viabilitas dan integritas membran
spermatozoa diantara suhu penyimpanan

Gambar 2. Persentase viabilitas dan integritas membran spermatozoa kambing Boer selama penyimpanan.
Dalam setiap lamanya penyimpanan, bar dengan huruf yang berbeda (a,b; x,y,z) menunjukkan
perbedaan yang nyata untuk spermatozoa yang disimpan pada suhu ruang dan suhu 35°C
(P<0,05)

KESIMPULAN UCAPAN TERIMA KASIH

Persentase motilitas, viabilitas dan Terima kasih diucapkan kepada Bapak

integritas membran spermatozoa kambing Boer
dalam pengencer Tris kuning telur yang
disimpan pada suhu ruang hingga lama
penyimpanan 6 jam lebih baik dibandingkan
dengan suhu 35°C.
Mikael Situmorang, Bapak Wagiman, yang
telah membantu dalam pemeliharaan kambing
Boer di Kandang Percobaan Loka Penelitian
Kambing Potong. Kepada Bapak Imaniyanto
dan Bapak Yousep, kami mengucapkan terima

336
 Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner 2013
kasih atas bantuannya dalam melakukan
koleksi dan evaluasi karakteristik spermatozoa
di Laboratorium Reproduksi Loka Penelitian
Kambing Potong.
DAFTAR PUSTAKA
Aboagla EM, Terada T. 2004. Effects of egg yolk
during the freezing step of cryopreservation
on the viability of goat spermatozoa.
Theriogenology. 62:1160-1172.
Amirat L, Tainturier D, Jeanneau L, Thorin C,
Gerard O, Courtens JL, Anton M. 2004. Bull
semen in vitro fertility after cryopreservation
using egg yolk LDL: a comparison with
optidyl, a commercial egg yolk extender.
Theriogenology. 61:895-907.
Arifiantini I, Yusuf TL, Graha N. 2005. Longivitas
dan recovery rate pasca thawing semen beku
sapi Fresian Holstein menggunakan bahan
pengencer yang berbeda. Buletin Peternakan.
29:53-61.
Barth AD, Oko RJ. 1989. Abnormal morphology of
bovine spermatozoa. Ames: Iowa State
University Press. p. 136-143.
Best B. 2006. Aging mechanism. http:
//www.benbest.com/cryonics/agingmechanism
.html. [(4 September 2006)].
Birkhead TR, Hosken DJ, Pitnick S. 2009. Sperm
biology. An Evolutionary Perspective,
Burlington, MA: Academic Press.
Dorado J, Rodriguez I, Hidalgo M. 2007.
Cryopreservation of goat spermatozoa:
comparison of two freezing extenders base on
post-thaw sperm quality and fertility rates
after artificial insemination. Theriogenology.
68:168-177.
England GCW. 1993. Cryopreservation of dog semen:
A review. J Reprod Fertil. 37:243-255.
Gazali M, Tambing SN. 2002. Kriopreservasi sel
spermatozoa. Hayati. 9:27-32.
Hafez ESE. 2000. Reproduction in farm animals.
Philadelphia. Lea and Febiger.
Hammerstedt RH. 1993. Maintenance of
bioenergietic balance in sperm and prevention
of lipid peroxidation: A review of the effects
on design and storage preservation system.
Reprod Fert Div. 5:675-690.
Kikuchi K, Nagai T, Kashiwazaki N, Ikeda H,
Noguchi J, Shimada A, Soloy E, Kaneko H.
1998. Cryopreservation and ensuing in vitro
fertilization ability of boar spermatozoa from
epididymides stored at 4°C. Theriogenology.
50:615-623.
Kostaman T, Sutama IK, Situmorang P, Budiarsana
IGM. 2000. Pengaruh jenis pengencer dan
waktu ekuilibrasi terhadap kualitas semen
beku kambing peranakan etawah. Dalam:
Haryanto B, Darminto, Hastiono S, Sutama
IK, Partoutomo S, Subandriyo, Sinurat AP,
Darmono, Supar, Oloan Butar butar S,
Penyunting. Teknologi Peternakan dan
Veteriner dalam Upaya Meningkatkan
Ketahanan Pangan Nasional. Prosiding
Seminar Nasional Peternakan dan Veteriner.
Bogor, 18-19 September 2000. Bogor
(Indonesia): Pusat Penelitan dan
Pengembangan Peternakan. hlm. 156-163.
Kusumaningrum DA, Triwulaningsih E, Situmorang
P, Sugiarti T, Sianturi RG. 2004. Pengaruh
seminar plasma dan konsentrasi kuning telur
terhadap kualitas semen cair yang disimpan
pada suhu ruang. Dalam: Thalib A, Sendow I,
Purwadaria T, Tarmudji, Darmono,
Triwulanningsih E, Beriajaya, Natalia L,
Nurhayati, Ketaren PP, Priyanto D, Iskandar
S, Sani Y, penyunting. Iptek Sebagai Motor
Penggerak Pembangunan Sistem dan Usaha
Agribisnis Peternakan. Prosiding Seminar
Nasional Peternakan dan Veteriner. Bogor, 4-5
Agustus 2004. Bogor (Indonesia): Pusat
Penelitan dan Pengembangan Peternakan.
hlm. 207-213.
Mann K, Mann M. 2008. The chicken egg yolk
plasma and granule proteomes. Proteomics.
8:178-191.
Naing SW, Wahida H, Mohd Azam K, Rosnin Y,
Zuki AB, Kazhal S, Bukar MM, Thein M,
Kyaw T, San MM. 2010. Effect of sugars on
characteristics of Boer goat semen after
cryopreservation. Anim Reprod Sci.
122:23-28.
Nalley WMM. 2007. Karakteristik semen rusa
Timor (Cervus timorensis). Dalam: darmono,
Wina E, Nurhayati, Sani Y, Prasetyo LH,
Triwulanningsih E, Sendow I, Natalia L,
Priyanto D, Indraningsih, Herawati T,
penyunting. Akselerasi Agribisnis Peternakan
Nasional Melelui Pengembangan dan
Penerapan IPTEK. Prosiding Seminar
Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner.
Bogor, 21-22 Agustus 2007. Bogor
(Indonesia): Pusat Penelitan dan
Pengembangan Peternakan. hlm. 829-836.
Rizal M, Herdis, Surachman M, Nalley WMM.
2008. Pengaruh plasma semen domba
priangan terhadap daya hidup spermatozoa
kambing peranakan etawah yang disimpan
pada suhu 3-5oC. JITV. 13:23-29.
337
 Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner 2013
Said S, Gunawan M, Kaiin EM, Tappa B. 2005.
Daya tahan hidup sperma cair sapi Simmental
yang disimpan dalam straw pada temperature
5°C. Dalam: Mathius IW, Bahri S, Tarmudji,
Prasetyo LH, Triwulanningsih E, Tiesnamurti
B, Sendow I, Suhardono, penyunting. Inovasi
Teknologi Peternakan untuk Meningkatkan
Kesejahteraan Masyarakat dalam Mewujudkan
Kemandirian dan Ketahanan Pangan Nasional.
Prosiding Seminar Nasional Teknologi
Peternakan dan Veteriner. Bogor, 12-13
September 2005. Bogor (Indonesia): Pusat
Penelitan dan Pengembangan Peternakan.
hlm. 87-90.
Salomon S, Maxwell WMC. 2000. Storage of ram
semen. Anim Reprod Sci. 62:77-111.
Salvador I, Viudes de Castro MP, Bernacer J,
Gomez EA, Silvestre MA. 2005. Factors
affecting pregnancy rate in artificial
insemination with frozen semen during non-
breeding season in Murciano-Granadina goats:
a field assay. Reprod Domest Anim. 40:526-
529.
Situmorang P, Triwulaningsih E, Lubis A, Caroline
W, Sugiarti T. 2001. Pengaruh proline,
carnitine terhadap daya hidup spermatozoa
yang disimpan dalam suhu 5°C (chilling
semen). JITV. 6:1-6.
Situmorang P. 2003. The effects of inclusion of
exogenous phospholipid in Tris diluents
containing different level of egg yolk on the
viability of bull spermatozoa. JITV.
7:181-187.
338
Steel RGD, Torrie JH. 1993. Prinsip dan prosedur
statistika: suatu pendekatan biometrik. Alih
Bahasa: B. Sumantri. Jakarta (Indonesia):
Gramedia Pustaka Utama.
Sugiarti T, Triwulaningsih E, Situmorang P, R.G.
Sianturi RG, Kusumaningrum DA. 2004.
Penggunaan katalase dalam produksi semen
dingin sapi. Dalam: Thalib A, Sendow I,
Purwadaria T, Tarmudji, Darmono,
Triwulanningsih E, Beriajaya, Natalia L,
Nurhayati, Ketaren PP, Priyanto D, Iskandar
S, Sani Y, penyunting. Iptek Sebagai Motor
Penggerak Pembangunan Sistem dan Usaha
Agribisnis Peternakan. Prosiding Seminar
Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner.
Bogor, 4-5 Agustus 2004. Bogor (Indonesia):
Pusat Penelitan dan Pengembangan
Peternakan. hlm. 215-220.
Tambing SN, Toelihere MR, Yusuf TL, Purwantara
B, Sutama IK, Situmorang P. 2003. Kualitas
semen beku kambing saanen pada berbagai
jenis pengencer semen. Hayati. 10:146-150.
Verstegen EJK, Kloosterboer JG, Lub J. 2005
Synthesis and photopolymerization of
oxetanes derived from bisphenol A. J Appl
Polymer Sci. 98:1697-1707.
Vishwanath R, Shannon P. 2000. Storage of bovine
semen in liquid and frozen state. Anim Reprod
Sci. 62:23-53.
Yoshida M. 2000. Conservation of sperms: current
status and new trends. Anim Reprod Sci.
60/61:349-355.
 Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner 2013

DISKUSI
Pertanyaan:
Penggunaan tris pada penyimpanan suhu 35°C. Konsentrasi menurun setelah 6 jam. Apakah
masih efektif penggunaan semen cair untuk IB.

Jawaban:
Penggunaan tris pada penyimpanan suhu 35 masih efektif tetapi dengan jumlah dinaikkan.
Dengan jumlah pejantan yang terbatas, maka penggunaan semen cair akan dapat mengawini
jumlah betina lebih banyak.

339