Halberg tomó la dosis letal 50 (DL50) para una sustancia y la inyecta a un grupo de
ratones en distintos momentos del ciclo diario y comprobó que la dosis letal 50 no
existe como tal pues varía según el momento de aplicación, unas veces mueren muchos
y otras pocos. El valor de 100 representa el valor teórico de la DL50. Al principio probó
con la endotoxina de Escherichia coli de la noche mueren el 80%, a media noche el
20%, viendo un ciclo. Entonces comprobó si con otras toxinas coinciden los ritmos
independientemente de la naturaleza del compuesto. La Ouabaína detiene la bomba de
Na/K, para esta ocurre lo mismo, pero con distinto ciclo. La mortalidad con un ruido
blanco, un ruido de 120 dB mata al 50% de los ratones, en algunos momentos podrían
morir el 100% de los animales. Distintas sustancias varían de distinto modo en el
tiempo.
La media de la curva está en 50.
La unión del fármaco a proteínas plasmáticas presenta un ritmo circadiano y cuanto más
fármaco hay unido menor es su actividad.
• Todas las enzimas hepáticas tienen ritmos circadianos, para eliminar una
sustancia la une a conjugados, por ejemplo para eliminar la melatonina la une al
sulfato.
• También hay ritmos en el flujo hepático.