Apa yang dimaksud dengan IC50 ?

IC50 (The Half maximal Inhibitory Concentration / Konsentrasi

penghambatan setengah maksimal) adalah ukuran potensi suatu zat
dalam menghambat fungsi biologis atau biokimia tertentu.

IC50 merupakan konsentrasi yang dapat meredam 50% radikal

bebas DPPH (1,1-diphenil-2-picrylhydrazyl) atau konsentrasi suatu zat
antioksidan yang dapat menyebabkan 50% DPPH kehilangan
karakter radikal atau konsentrasi suatu zat antioksidan yang
memberikan % penghambatan 50%
Berwarna Ungu Berwarna Kuning

Perubahan Absorbansi dapat diukur

menggunakan Spektrofotometer UV-Vis
 Jelaskan bagaimana penentuan IC50 dengan
metoda analysis probit?

Antioksidan adalah agen penghambat oksidasi dengan cara bereaksi

dengan radikal bebas kemudian membentuk molekul yang stabil.
radikal bebas yang biasa diguanakan sebagai model dalam pengukuran
daya penangkapan radikal bebas adalah DPPH (1,1-difenil-2-
pikrihidazil.
Langkah-langkah :

1. Membuat larutan DPPH

2. Membuat sampel uji dalam beberapa konsentrasi
3. Melakukan pengukuran absorbansi dengan panjang
gelombang 517 nm. Yang diukur :
a. Pelarut + DPPH (Kontrol)
b. Sampel + DPPH

Didapatkan data Absorbansi dan

konsentrasi larutan
Dihitung persen antioksidan

Keterangan :
Ac = Nilai absorbansi kontrol
A = Nilai absorbansi sampel
Dibuat kurva dengan sumbu x adalah nilai konsentrasi
sampel dan sumbu y adalah % antioksidan
Sehingga diperoleh persamaan regresi linier.
Nilai y merupakan nilai %antioksidan sehingga dapat
disubtitusikan dengan nilai 50 (karena mencari
kemampuan meredap 50% oksidan). nilai x merupakan
nilai konsentrasi yang dibutuhkan untuk meredam 50%
oksidan (IC 50)
Contoh.

y = 0.7885x + 2.7983
50 = 0.7885x + 2.7983
0.7885x = 50 - 2.7983
x = 47.2017/0.7885
x =59.86

IC50 = 59.86 μg/ml