Gliclise

1. Processo global
Em termos do processo global, verifica-se que o processo de gliclise envolve duas fases. A primeira inclui reaces que formam duas molculas com 3 carbonos a partir da glicose: a dihidroxiacetonafosfato e o gliceraldedo-3-fosfato. A segunda integra reaces muito importantes, que transformam gliceraldedo-3-fosfato em piruvato. O gliceraldedo entra na segunda fase mais o outro produto, dihidroxiacetonafosfato, por isomerizao, pode originar o gliceraldedo. Assim, a segunda parte da gliclise pode ser representada uma ou duas vezes.

2. Anlise das reaces

2.1. Primeira fase da gliclise A primeira fase integra cinco reaces importantes. Inicia-se com a glucose, a molcula que vai ser catabolizada, que fosforilada numa reaco de fosforilao, originando glucose-6-fosfato. Esta isomerizada (isomerizao), originando frutose6-fosfato. Depois desta isomerizao origina-se frutose-1,6-fosfato por uma nova fosforilao. Esta molcula ainda tem 6 carbonos, mas vai ser clivada na ltima reaco, originando-se as duas molculas com 3 carbonos referidas, a dihidroxiacetona e o gliceraldedo. Assim, uma hexose, a glucose, origina duas trioses, as duas molculas referidas. O gliceraldedo segue para a segunda fase, e a dihidroxiacetona tambm convertida neste produto por isomerizao, podendo tambm seguir na segunda fase. a) Fosforilao da glicose a glicose-6-fosfato A primeira coisa que acontece, neste metabolismo, aps a entrada da glucose nas clulas, vinda da corrente sangunea, a sua fosforilao a glucose-6-fosfato. As enzimas que catalizam este processo so cinases e neste caso participa a hexocinase, uma cinase muito importante nas clulas. Aqui j h uma grande regulao, pois a enzima regulada halostericamente pelo produto, que a inibe quando est muito concentrado. Num tipo de clulas mais particular, as clulas do fgado, a fosforilao da glucose catalizada pela glucocinase, que ocorre apenas nas clulas daquele orgo. Tem muita importncia na catlise da fosforilao da glucose nessas clulas. A sua afinidade por este acar menor que a da outra enzima (o Km maior), pelo que requer mais glucose para ser sensvel. Isto ocorre no fgado pois, se houver excesso de acar, este rgo detecta-o e vai fosforilar a glicose (em condies de excesso deste acar). a glucocinase que fosforila a glucose em glucose-6-fosfato, que pode depois ser usada na sntese de glicognio e ser armazenada nessa forma. Uma vantagem da fosforilao reside no facto de, assim que a glucose atravessa a membrana e fosforilada, deixa de ser capaz de atravessas aquela estrutura. Esta reaco d-se no citoplasma e, quando a glucose passa a glucose-6-fosfato, a

concentrao de glucose diminui. Assim, pode permitir o transporte de glucose para o interior da clula, facilitando este processo. O grupo fosfato adicionado na fosforilao provm de ATP, pelo que esta reaco implica consumo de ATP e, portanto, energia. b) Isomerizao da glucose-6-fosfato a frutose-6-fosfato A segunda reaco converte glucose-6-fosfato em frutose-6-fosfato. A primeira uma aldose, mas, quando isomerizada, passa de aldose a cetose, a frutose-6-fosfato. Estes acares podem ser representados em forma linear ou em anel. A glucose-6fosfato pode formar um anel de piranose e a frutose-6-fosfato pode formar um anel de furanose. Esta reaco de isomerizao catalizada por uma isomerase. A vantagem desta isomerizao que facilita a reaco seguinte de fosforilao e a clivagem (as duas reaces seguintes). Depois da isomerizao, fica livre um grupo hidroxilo, facilmente fosforilado. Alm disso, na fase de clivagem da hexose em duas trioses, a isomerizao facilita o processo, pois o carbono C2 vai activar o carbono C3, facilitando a clivagem. A isomerizao facilita, assim, as reaces seguintes. c) Fosforilao da frutose-6-fosfato a frutose-1,6-bifosfato A frutose-6-fosfato vai ser fosforilada, formando frutose-1,6-bifosfato, com mais um grupo fosfato, que foi adicionado ao grupo OH referido. Mais uma vez, aquele grupo provm do ATP, pelo que h, mais uma vez, gasto de energia. A reaco catalizada pela fosfofrutocinase e um importante ponto de regulao, pois a enzima regulado por vrias substncias. A enzima que cataliza a reaco inibida por ATP, ficando com afinidade baixa para o substrato; sem ATP, a reaco apresenta uma velocidade maior, sendo a afinidade para o substrato maior. O ATP, ao ligar-se enzima, como agente de regulao halostrica, vai diminuir a afinidade da enzima pelo substrato. O ATP um regulado halostrico negativo. O efeito inibitrio do ATP contrabalanado pelo AMP. O ATP, o ADP e o AMP esto sempre em equilbrio na clula, pois h enzimas que os interconvertem. Se houver muito ATP, ele convertido em ADP e AMP; se o ATP for menos concentrado, formase com gasto daquelas substncias. Sendo a enzima dependente das concentraos de ATP e AMP, ela sensvel carga energtica. A enzima ainda regulada por uma substncia semelhante ao produto, a frutose-2,6-bifosfato, que um regulador halostrico positivo da enzima. Na ausncia desta substncia, a afinidade da enzima baixa, e alta na sua presena. A substncia estimula a reaco, pois aumenta a afinidade. Se houvesse simultaneamente os dois reguladores, o halostrico positivo (frutose-2,6-bifosfato), e o halostrico negativo (ATP), os efeitos anulam-se. Estas substncias tm uma aco que se neutraliza, de certo modo. Na interaco entre o ATP e a frutose-2,6-fosfato, h uma menor ou maior inibio ao estmulo, de acordo com os nveis. O efeito inibitrio do ATP menor. A enzima em causa muito importante, sendo regulada halostericamente por duas substncias e constituindo, portanto, o segundo ponto de regulao. H ainda um terceiro. a frutose-2,6-bifosfato que vai, ento, estimular a gliclise. Este composto tambm originado pela frutose-6-fosfato, mas ocorrendo antes a fosforilao na posio 2. A enzima que promove a fosforilao tem dupla funo: tem funo de cinase, provocando a fosforilao, e, funo de fosfatase, removendo o grupo fosfato. Quando h muita frutose-6-fosfato, deve ocorrer gliclise rapidamente. Se houver muita, h estimulao da formao de frutose-2,6-fosfato, que estimula a gliclise. A

parte bifuncional, de fosfatase, inibe a gliclise. Para alm da regulao por halosterismo, a enzima que cataliza a formao de frutose-2,6-bifosfato regulada por ligao covalente (so estes os dois tipos de regulao): no estado fosforilado, a enzima funciona como fosfatase, enquanto no estado desfosforilado funciona como cinase. Uma enzima, uma protena, quando fosforilada, altera a sua forma, ficando inibida, ou activada. A enzima em causa funciona como fosfatase quando est fosforilada, ou como cinase, quanto est defosforilada. Estando desfosforilada, aumenta-se a velocidade da reaco. A regulao por ligao covalente depende tambm da glucose: se a quantidade de glucose baixa, a enzima est no estado fosforilado, pois deixa de haver frutose-2,6-bifosfato. O estado fosforilado depende da glucose; quando h pouca glicose no sangue, fica fosforilada, ficando a actuar como fosfatase, levando ao desaparecimento da frutose-2,6-bifosfatase, que estimula a gliclise. d) Clivagem da frutose-1,6-bifosfato em dihidroxiacetona e gliceraldedo-3fosfato A reaco seguinte da gliclise a clivagem da frutose-1,6-bifosfato. Continuando o processo glicoltico, h a clivagem desta molcula, uma hexose, nas duas trioses referidas: a dihidrociaxetona-fosfato, uma cetona, e o gliceraldedo-3fosfato, uma aldose. A enzima que cataliza esta reaco uma aldolase. A reaco, a clivagem, o inverso da condensao alcolica, a condensao entre uma cetona e um aldol. O gliceraldedo-fosfato que se forma entra directamente na segunda faz, mas a dihidroxiacetona no perdida. H uma isomerizao, em que a __________, converte a dihidroxiacetona em gliceraldedo-3-fosfato. 2.2. Segunda fase da gliclise Em termos gerais, a segunda fase da gliclise tem cinco reaces importantes. Inicialmente h oxidao e fosforilao: o gliceraldedo-3-fosfato oxidado e forma cido-1,3-bifosfoglicrido. Depois h transferncia de um fosfato para ADP, para formar ATP, e de seguida h um deslocamento do grupo fosfato, e o cido-3fosfoglicrido passa para cido-2-fosfoglicrido. H depois uma desidratao que forma um enol e, depois da transferncia do grupo fosfato, forma-se piruvato. Esta segunda fase da glicose inicia-se no gliceraldedo-3-fosfato, mas a dihidroxiacetona tambm pode ser convertida naquela molcula, pelo que cada molcula de glicose forma 2 moles de piruvato. Energeticamente, a segunda fase da glicose muito importante, pois nesta fase que se forma ATP (conservao de energia). H tambm formao de equivalentes de reduo, NADH, por oxidao do gliceraldedo. Este composto perde electres que tm de ser captados e, desta feita, o so para o NAD+, que reduzido a NADH. O gliceraldedo oxidado, os electres so ____ para NAD+, que reduzido, formando NADH. Os electres vm sobre a forma de ies hidreto, so captados nessa forma. A formao destes NADH muito importante. Os lpidos tm um estado de reduo superior ao dos hidratos de carbono, estes maior que o carbonil, estes maior que o carboxilo e estes maior do que o CO2. Quanto maior o potencial de reduo, mais so os electres que se podem fornecer, podendo formar mais energia. Tendo os lpidos um estado de reduo maior (muito

grande), maior a capacidade de fornecer energia. Os lpidos, quando metabolizados, podem fornecer mais energia do que at os hidratos de carbono. e) Oxidao e fosforilao do gliceraldedo-3-fosfato a 1,3-bifosfoglicerato O NAD+ a nicotinamida ____ e o NADP+, muito importante, nomeadamente em vias anablicas (catablicas), tem mais um grupo fosfato. Os dois electres so captados em H+, formando-se um io H-, hidreto. No anabolismo participa ____ o NAPH, enquanto o NAD+ participa mais no catabolismo. No catabolismo h recepo de ies por NADP+ que passa para NADPH; no anabolismo, o NADPH oxidado a NADP+. Logo na glicolise, o NAD+ importante. A reaco em que se forma NADH duplamente importante, pois, para alm disso, h uma fosforilao, que implica uma grande conservao de energia. O gliceraldedo-3-fosfato (G3P) oxidado, mas tambm fosforilado, formando-se um acilfosfato, o 1,3-bifosfoglicerato. A enzima que cataliza esta reaco muito importante, pois provoca uma oxidao e uma fosforilao simultneas, formando-se o acetilfosfato, onde se conserva a energia. A enzima uma protena e tem um grupo SH, muito importante. O gliceraldedo-3-fosfato um aldedo e h tambm NAD+. O gliceraldedo vai ser oxidado, e, para haver catlise, vai-se ligar enzima, ao grupo SH, o grupo reactivo. A ligao forma um tioster, e estas ligaes conseguem preservar muita energia. O NAD+ passa a NADH. Nesta primeira fase, a desidrogenase muito importante. Na segunda fase entra o fosfato. A energia conservada na ligao tioster provm da oxidao. A fosforilao forma o acilfosfato, com um alto potencial energtico, onde a energia fica conservada. f) Formao do 3-fosfoglicerato a partir do 1,3-bifosfoglicerato e sntese de ATP Na segunda fase, o cido-1,3-bifosfoglicrido, vai permitir sintetizar ATP a partir de ADP. Este composto vai passar a ATP e o cido forma cido-3-fosfoglicrido (3PG). H uma conservao de energia, feita por um modo designado de fosforilao ao nvel do substrato. Este fenmeno corresponde fosforilao de gliceraldedo-3fosfato a cido-3-fosfoglicrido, sendo NAD+ reduzido a NADH e ATP formado a partir de ADP e Pi. Pode haver um desacoplamento. O arsnio um veneno e o arsenato um desacoplador da gliclise. Pode formar-se 1-arsnio-3-fosfoglicerato, em vez de cido1,3-fosfoglicrido, isto , em vez de fosfato fica l o grupo arsnio. O primeiro composto semelhante ao segundo, mas um acilarcenato, instvel, pelo que a sua energia perde-se logo e, por este motivo, o arseneto um desacoplador da gliclise. Ele permite a oxidao, mas impede a fosforilao e, portanto, mais tarde, a sntese de ATP. A energia no conservada, mas libertada. um desacoplador, no havendo conservao de energia. g) Converso de cido-3-fosfoglicrido em cido-2-fosfoglicrido Depois, o 3-fosfoglicerato forma 2-fosfoglicerato (2GP). O grupo fosforil passa de C3 para C2, e esta converso realizada pela mutase.

h) Desidratao do cido-2-fosfoglicrido a fosfoenolpiruvato De seguida, h uma desidratao que aumenta o potencial de transferncia do grupo fosforil. O 2-fosfoglicerato um ster de fosfato e de um lcool, e isto no facilitada o processo de sntese de ATP, havendo necessidade de o transformar numa substncia capaz de transferir o grupo. O 2-fosfoglicerato forma fosfoenolpiruvato, que tem um alto potencial de transferncia, por desidratao. Esta reaco, de formao de enol, catalizada pela enolase. i) Transferncia do grupo fosforil do fosfoenolpiruvato para ADP, com sntese de ATP e piruvato Por fim h transferncia do grupo fosforil do fosfoenolpiruvato (PEP) para ADP, formando-se ATP (com participao de Pi) e piruvato. Nesta fase h o terceiro ponto de regulao da gliclise. A enzima que cataliza o processo a piruvato cinase, tambm regulada por dois mecanismos. Normalmente, como foi referido, as enzimas so correguladas de dois modos: halosterismo o regulao por ligao covalente, por ligao do grupo fosfato. A enzima em causa regulada halostericamente, no que respeita regulao alostrica positiva, por AMP e frutose1,6-fosfato. A regulao halostrica negativa feita por ATP e analina. O metabolismo um processo muito regulado e as coisas s ocorrem quando necessrio. Por isso h uma grande economia, graas aos mecanismos reguladores. No h ____ dispendiosos. Quando no h glicose, a piruvato cinase no actua, pois no h frutose-1,6-bifosfato. Quando a piruvato cinase esta fosforilada ela sofreu a aco de uma cinase; quando est desfosforilada h aco de fosfatases. O estado fosforilado depende da quantidade de glucose no sangue. Se houver baixa concentrao de glucose no sangue, activa-se o estado de cinase, para ela estar inactiva, pois ela fica menos activa no restado fosforilado.

3. Balano e rendimento energtico

No fim desta sequncia de reaces, a glicose, com 2 Pi, 2 ADP e 2 NAD+, origina 2 molculas de piruvato, 2 ATP, 2 NADH, 2 H+ e 2 H2O. Em termos energticos, os produtos da gliclise (aquilo que importante em termos da conservao de energia, em termos energticos) so ATP, NADH e piruvato. Os electres do NADH, ao serem postos na corrente respiratria, vo permitir a formao de energia por outro processo. O piruvato, se houver oxignio, pode continuar a poder contribuir para a formao de energia. Relativamente ao rendimento energtico, de 2 ATPs. Na passagem de glucose a glucose-6-fosfato, perde-se 1 ATP, e na passagem de frutose-6-fosfato a frutose-1,6-bifosfato perde-se outro. 2 1,3-fosfogliceratos formam 2 ATPs ao passarem a 3-fosfoglicerato, e formam-se mais 2 ATPs na passagem de fosfoenolpiruvato a piruvato. Tendo sido consumidas 2 molculas de ATP e tendo-se formado 4, o rendimento energtico 2 ATPs. A energia no se fica na sntese de ATP, pois formouse tambm NADH.