Gua N 1 Mtodo Cientfico.

.Mtodo Cientfico esquema de pensamiento (lgico) Qu Permite? _ Resolver Problemas. _ Dar explicaciones a fenmenos observados. _ Establecer principios que permitan predecir relaciones entre distintos fenmenos. . Etapas: 1.- Planteamiento del problema: delimitacin clara y precisa del tema a investigar 1.1.- Se observa un fenmeno (idea) 1.2.- Se buscan antecedentes bibliogrficos 1.3.- Se formula hiptesis, la cual es una afirmacin con respecto de un fenmeno (respuesta de una pregunta). 1.4.- Se definen objetivos, que pueden ser generales o especficos y variables que pueden ser dependientes e independientes. 2.- Obtencin de datos: como relacionamos la informacin, debe definirse en funcin de los objetivos. 2.1.- Seleccin de Tcnicas 2.2.- Elaboracin y seleccin de instrumentos 2.3.- Eleccin de la muestra 2.4.- Trabajo de campo o laboratorio 3.- Procesamiento de informacin: como trabajamos la informacin recabada. 3.1.- Diseo y confeccin de tablas de registro 3.2.- Seleccin de herramientas estadsticas 3.3.- Confeccin de tablas y grficos 4.- Anlisis de datos: interpretacin de los resultados (en funcin del problema y la hiptesis) 4.1.- Anlisis y confeccin de informe 4.2.- Fin de la investigacin

Gua N 2 Material de Laboratorio.

Material de Laboratorio Frio Congelar

Equipamiento Bsico

Aplicaciones

Calor Balanza de Laboratorio Mechero Bunsen Bao Termorregulador

Balanza de Precisin

Balanza Analtica

Material Volumtrico

Probetas

Vasos Precipitados

Matraces Aforados

Pipetas

Matraces Erlenmeyer

Buretra

Sirven solo para mediciones aproximadas de volmenes

Usados para preparar soluciones o efectuar reacciones

Usados para preparar soluciones de una concentracin exacta

Empleadas para medir y entregar con precisin volmenes menores de lquidos y soluciones, pueden ser graduadas o aforadas

Usado para efectuar titulaciones, reacciones y calentar soluciones

Definida como pipeta graduada con un mecanismo para vaciarla

Gua N 3 Microscopia

. Clula: unidad bsica de todo ser vivo. . Ojo humano: tiene un poder resolutivo de 0.2 mm (200 m). . Microscopios: se utilizan para mejorar la visin o resolucin.

Clula.. Termino usado por primera vez cuando Robert Hooke observo un corcho en un microscopio de luz (1665). . Antony van Leeuwenhoek observa varios tipos de clulas (1970). . Matthias Scleiden y Theodoro Schwan proponen a partir de sus observaciones Todo los organismos estn compuestos de clulas y todas las clulas provienen de la divisin de otras preexistentes (1838). . Son pequeas y traslucidas (ojo humano al desnudo NO puede verlas).

Microscopio.. Una de las herramientas ms utilizadas en biloga. . El progreso de construccin, desarrollo y uso de nuevos mtodos han permitido una serie de descubrimientos en los campos de histologa, citologa y bacteriologa. *Partes.. Es un sistema de lentes montados en un tubo. La distancia del objeto que se requiere observar se regula por medio de botones de ajuste. 1.- Sistema Mecnico: se compone del pie en el que se sustenta y la columna que sostiene sus partes *revolver, oculares, platina, sistema de enfoque (puede ser macromtrico aproximado o micromtrico preciso)+. 2.- Sistema ptico: compuesto por dos sistemas diferentes de lentes. Los lentes oculares separados por un diafragma, tiene funcin de aumentar y los lentes objetivos son 3 o 4 ubicados en el revlver, estos se encargan de proyectar la imagen. 3.- Sistema de Iluminacin: compuesto por una fuente luminosa que es una lmpara ubicada en la base.

*Formacin de la Imagen.. Se refleja (se devuelve por donde viene). . Se refracta (penetra el segundo medio cambiando direccin y velocidad). . Poder de resolucin del microscopio depende tambin de la apertura numrica (capacidad de un lente para aprovechar la mayor cantidad de rayos para formar la imagen). *Poderes del microscopio.1.- Poder de Aumento: razn entre el tamao de imagen que produce el microscopio y el tamao original de la observacin. Se logra a travs del ocular y de los objetivos. 2.- Poder de Definicin: capacidad del microscopio para formar imgenes ntidas 3.- Poder de Penetracin: capacidad para visualizar diferentes planos de una preparacin. Dado por ajuste de precisin que se logra con el tornillo micromtrico. 4.- Poder de Resolucin: permite distinguir como objetos separados dos puntos que se encuentran muy cercanos entre s. *Uso del Microscopio.Pasos y procedimientos de cmo ocuparlo. *Preparacin del material a ser observado.. Preparacin Permanente: son los que se someten a un proceso largo de preparacin para un periodo prolongado de observacin. Tiene etapas de fijacin, deshidratacin, inclusin en parafina, cortes de la muestra, tincin, etc. . Preparacin Temporal: cortes frescos de material a observar, se realizan en el momento y tienen corta duracin. . Citoqumica: corresponde a los mtodos qumicos y fsicos por los cuales se logra la visualizacin directa de diferentes substancias celulares a travs del microscopio. Generalmente se usan diferentes colorantes que tien lpidos, protenas, carbohidratos o ADN, o sustratos de enzimas especificas que permiten localizarlas en un sitio celular especifico. Algunos ejemplos son: 1.- Reaccin de Millon: permite reconocer protenas. 2.- Reaccin de Diazonio: permite reconocer protenas. 3.- Reaccin de Schiff: deteccin de cidos nucledos, carbohidratos y lpidos que contienen grupos aldehdos. 4.- Reaccin de Feulgen Nuclear: es la versin especfica para ADN en la que se usa el reactivo de Schiff.

5.- Tincin con Lugol: tie granos de almidn de color azul-morado. 6.- Tincin con Floroglucina: tie paredes celulares lignificadas de color rojo violeta 7.- Tincin con Azul de Metileno: tie protoplasmas y paredes celulares celulsicas.

* Tipos de Microscopios.1.- Microscopio de contraste de fase: permite examinar objetos vivos as como el seguimiento en ellos de procesos celulares como la mitosis. 2.- Microscopio de fluorescencia: la luz usada es de corta longitud de onda y se logra por uso de lmparas de mercurio. 3.- Microscopio Electrnico: sus imgenes son en blanco y negro, permite lograr aumentar de hasta 1.000.000 de veces.

Gua N 4: Componentes Qumicos De La Clula .Clula -------> estructura compleja y diversa, se autorreplica y realiza amplia variedad de funciones. *Principales tipos de molculas orgnicas en la clula: 1.- Hidratos de Carbono o Glcidos (dulces) .compuestos de C, H y O .contienen grupos hidroxilo . se polimerizan (forman molculas mas complejas): - Oligosacaridos (2 6 molculas de monosacridos), se unen a protenas o lpidos formando glicoprotenas y glicolipidos - Polisacridos (cientos o miles de molculas de monosacridos), almacenamiento de energa .Se unen por enlace glucosidico (carbono hidroxilo y carbono aldehdo o aceto de otra unidad) .Intervienen en procesos qumicos celulares . Constituyen macromolculas (celulosa, almidn y ARN) 2.- Protenas . Contienen C, O, H y N . Formadas por monmeros llamados aminocidos . Se unen por enlace peptidico (entre grupo carboxilo de un aminocido (COO) y el grupo amino (NH+3) del siguiente por la eliminacin de una molcula de agua). .Funciones: a) Proveen rigidez estructural (colgeno, queratina) b) Controla Permeabilidad de membrana (protenas transmembranales) c) Regulan concentracin de metabolitos (insulina, glucagn) d) Reconocen y se unen a otras biomoleculas en forma covalente (protenas de reconocimiento) e) Participa en transporte y movimiento celular (hemoglobina, miosina y actina) . Existe un grupo especializado: Enzimas . Protenas con funcin catalizadora . Regulan velocidad de reacciones qumicas Grandes molculas de protenas formadas por una o varias cadenas polipeptidicas 3.- Lpidos . Molculas insolubles o escasamente solubles en agua (gran parte hidrofobica) . Contienen solo C e H . Proveen importante forma de almacenamiento de energa . Principales constituyentes de la membrana . Importantes en procesos de sealizacin celular

4.- cidos Nucleicos . Formados por polmeros de nucletidos . Unidos por enlace fosfodiester . Se diferencian en azcar (ribosa en ARN y desoxiribosa en ADN) . ARN molcula con una sola hebra, ADN doble hebra . Permiten el flujo de informacin gentica contenida por una clula a otra clula hija . ADN (acido desoxirribonucleico), molcula de herencia y almacena informacin gentica . ARN (acido ribonucleico), participa en transformar la informacin contenida por el ADN . Existen 3 tipos de ARN: a) ARN mensajero: transporta informacin contenida en un gen al citoplasma b) ARN ribosomal: forma parte estructural y cataltica de los ribosomas c) ARN transferencia: molcula adaptadora para transformar la informacin desde el ARNm a protena 5.- Sales Minerales . Dependen de estado fsico (disuelto o precipitada) . Molculas inorgnicas que se encuentran formando parte de los seres vivos . Tienen funciones muy importantes en las reacciones metablicas . Mas abundantes en los seres vivos: cloruros, fosfatos, carbonatos de calcio, Na, K y Mg. Reconocimiento de Hidratos de carbono 1.- Identificacin de monosacridos: . Reaccin de Fehling: La reaccin de Fehling permite el anlisis rpido de azcares basada en la capacidad de los monosacridos para reducir algunas molculas, entre ellas los hidrxidos metlicos. Calentando el reactivo de Fehling en presencia de un hidrato de carbono reductor como la glucosa, aparece un precipitado rojo ladrillo correspondiente a xido cuproso (Cu2O) . Reaccin de Somogyi: permite el anlisis rpido de azcares basado en la capacidad de los monosacridos para reducir algunas molculas, entre ellas los hidrxidos metlicos. 2.- Identificacin de polisacridos: . Prueba de Lugol: Permite la identificacin de polisacridos como el almidn en muestras de distinto origen: soluciones, slidos y muestras de origen vegetal como semillas y tubrculos. Al interactuar el I2 con el almidn se produce una coloracin azul-violeta caracterstica que se explica por qu el yodo queda atrapado entre los dos tipos distintos de cadenas que conforman la estructura qumica del almidn: las cadenas de amilosa, sin ramificaciones, que producen el color azul intenso y las cadenas ramificadas de amilopectina, que al unirse al yodo produce la coloracin violeta.

Reconocimiento de Protenas . Reaccin de Biuret: Este se utiliza para realizar anlisis cuantitativo mediante mediciones de espectrofotometra. El reactivo de Biuret est formado por sulfato de cobre (CuSO4) y tartrato doble de sodio y potasio (C4H4KNaO64H2O) en medio alcalino. El Cu+2 reacciona con los grupos amino (>NH) del enlace peptdico de las protenas, formando un enlace coordinado con 4 tomos de nitrgeno. Este enlace coordinado es responsable de la coloracin azul-violeta caracterstica del mtodo al reaccionar las protenas con el reactivo. Reconocimiento de Lpidos . Solubilidad: Las grasas son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se forman pequesimas gotas formando una emulsin de aspecto lechoso, que es transitoria, pues desaparece en reposo, por reagrupacin de las gotitas de grasa en una capa que por su menor densidad se sita sobre la capa de agua. Por el contrario, las grasas son solubles en los llamados disolventes orgnicos, como el ter, benceno, xilol, cloroformo, etc. Reconocimiento de Enzimas . Determinacin de la presencia de Catalasa: La catalasa es una enzima que se encuentra en las clulas de los tejidos animales y vegetales. La funcin de esta enzima en los tejidos es necesaria porque durante el metabolismo celular, se forma una molcula txica que es el perxido de hidrgeno, H2O2 (agua oxigenada). Esta enzima lo descompone en agua y oxgeno, por lo que se soluciona el problema. La reaccin de la catalasa sobre el H2O2, es la siguiente: 2H2O2 -------> 2H2O + O2 Extraccin de ADN . Tcnica de extraccin de ADN desde tejido animal El ADN (cido desoxirribonucleico) contiene la informacin gentica que determina el desarrollo del individuo y sus caractersticas. Es la huella digital de la vida ya que determina las caractersticas de todos los organismos vivos. Cada clula en el cuerpo humano contiene ms de 3 billones de nucletidos (cerca de 3 metros de ADN) y la nica diferencia entre los organismos vivos es la cantidad y el orden del abecedario de ADN. El proceso de extraccin de ADN desde una clula es el primer paso para muchos procedimientos (protocolos) de los laboratorios de biotecnologa. Los cientficos deben ser capaces de separar suavemente el ADN de sustancias no deseadas que se encuentran en las clulas, evitando que el ADN se desnature (que se rompa).

Gua N 5: Organizacin Subcelular . Clula -------> Procarionte -------> Eucarionte -------> Eucarionte animal -------> Eucarionte vegetal *Organelos -------> Se encuentran en citoplasma celular. . Ncleo: organelo mas grande, compuesto por 2 membranas, ADN cromosomal. . Membrana plasmtica: envoltura externa de la clula, bicapa continua de fosfolpidos . Mitocondrias: contienen su propio DNA (ADN mitocondrial), responsable de los procesos de respiracin celular y produccin de energa . Cloroplasto: solo en organismos capaces de realizar fotosntesis, contienen clorofila, compuestos por envoltura, estromas y tilacoides . Retculo Endoplasmatico: sacos, tubos y capas de membrana que se extienden a travs del citoplasma, sntesis de lpidos y protenas de la membrana, existen 2: a) Retculo Endoplasmatico rugoso (RER): asociado a los ribosomas que se unen a su parte externa y se encargan de la sntesis de protenas Retculo Endoplasmatico liso (REL): compuesto por sistema laberintico de tbulos irregulares, se encarga del metabolismo de lpidos

b)

. Golgi: modificacin, destinacin y empaquetamiento de macromolculas de secrecin . Lisosomas: vesculas membranosas que contienen enzimas hidroliticas requeridas para la digestin de molculas al interior de la clula . Peroxisoma: corresponde a vesculas, producen perxido de hidrogeno (H2O2) . Ribosoma: grandes complejos de RNA y protenas, traduccin en la sntesis de protenas . Citoesqueleto: formado por microtbulos, filamentos de actina y filamentos intermedios, le da forma a la clula y provee la base de sus movimientos

*Fraccionamiento Subcelular . Permite obtener componentes celulares aislados . Consiste en la separacin de los componentes de la clula . Pasos: a) Homogenizacin: En esta etapa se rompe muchas de las membranas de la clula. Se logra a travs de diferentes procedimientos sonificacion, shock osmtico y homogenizadores mecnicos. Centrifugacin: los componentes de la clula se separan en un campo gravitatorio, el cuerpo de mayor masa sedimentara (se ir al fondo) a mayor velocidad debido a su mayor peso

b)

Gua N 6: Mitosis, Meiosis y Fecundacin Ciclo Celular -------> comprende 2 etapas fundamentales, la interfase y la divisin propiamente tal, que ocurre por los procesos de mitosis o meiosis segn corresponda. . Interfase: periodo ms largo del ciclo celular, corresponde al tiempo que toma una clula entre una divisin mittica y la siguiente (periodo en el cual la clula se prepara para dividirse) Divisin Celular: Mitosis -------> una clula se divide y da origen a dos clulas hijas genticamente iguales entre s, la mitosis completa de una clula puede durar aproximadamente una hora. . Se agrupa en 4 etapas: a) Profase: cromatina se condensa para formar cromosomas (dentro del ncleo) b) Metafase: cromosomas condensados se ubican en el centro o ecuador de la clula gracias al huso mittico c) Anafase: movimiento de cromosomas hacia los polos de la clula d) Telofase: se forma envoltura nuclear sobre cromosomas que estn en los polos de la clula Citodiresis: Clulas Animales -------> ocurre por estrangulamiento del sector del citoplasma que se encuentra entre los dos ncleos nuevos Clulas Vegetales -------> existe pared celular, ocurre por formacin de un tabique entre los dos ncleos nuevos Meiosis -------> ocurre solo en las clulas germinales de las gnadas y da como resultado gametos, ya sean vulos o espermios, segn el sexo del organismo. . Implica una etapa de duplicacin del DNA y dos divisiones celulares sucesivas para formar clulas haploides . Tambin se agrupa en etapas, las cuales se dividen en dos divisiones, se diferencian con los nmeros I y II correspondiente a cada divisin a) Profase I: la de mayor duracin, en ella ocurre el proceso de crossing-over, en el que los cromosomas homlogos intercambian parte de su DNA. b) Metafase I: desaparecen quiasmas, cromosomas se ubican por pares homlogos en el centro de la clula c) Anafase I: cromosomas migran hacia polos opuestos de la clula d) Telofase I: se reconstituye la envoltura nuclear e) Profase II: la cromatina se condensa nuevamente y desaparece la envoltura nuclear

f) g) h)

Metafase II: cada cromatida hermana se orienta hacia un polo distinto de la clula Anafase II: cada cromatida hermana migra hacia un polo distinto de la clula Telofase II: se reconstituye la envoltura nuclear y ocurre la divisin del citoplasma

Fecundacin -------> gametos haploides se fusionan para dar origen a un nuevo organismo. Cuando esto ocurre, el ovulo se activa para comenzar el desarrollo del nuevo individuo y los ncleos de ambos gametos se fusionan para formar el genoma del nuevo organismo. . Fertilizacin: comienza cuando la cabeza de un espermio contacta la cubierta gelatinosa de un vulo *Cuando las 2 membranas plasmticas entran en contacto se fusionan y as se produce la entrada del ncleo del espermio hacia el interior del vulo. Una vez fertilizado el vulo pasa a llamarse cigoto.