STERILISASI DAN DESINFEKSI
Aidiffiet Chatim dan Suharto
Penggunaan bahan-bahan kimia untuk
sterilisasi dan desinfeksi
Pengawasan terhadap mikroorganisme penye-
bab penyakit telah menjadi pemikiran para ahli
semenjak penyakit-penyakit mulai dikenal. Ber-
bagai macam substansi telah dicoba untuk me-
milih yang paling tepat guna menghilangkan
pencemaran oleh jasad renik terhadap benda-
benda baik hidup ataupun mati.
Bahan antimikroba yang ditemukan memi-
liki keefektivan yang bermacam-macam, dan
penggunaannyapun ditujukan terhadap hal-hal
yang berbeda-beda pula.
Antiseptika dan desinfektan misalnya, ber-
beda dalam cara digunakannya; antiseptika dipa-
kai terhadap jaringanhidup, sedangkan desinfek-
tan untuk bahan-bahan tak bernyawa seperti
dahak dan sebagainya.
Antisepsis : Mencegah pertumbuhan atau akti-
vitas mikroorganisme baik dengan
cara menghambat atau membunuh;
dipakai untuk zat-zat kimia terha-
dap jaringan hidup.
Antiseptik : Zatkimia yang dipakai untuk mak-
sud antisepsis
55
Desinfeksi : Membunuh organisme-organisme pa-
togen ftecuali spora kuman) dengan
cara fisik atau kimia; dilakukan ter-
hadap benda mati.
Desinfektan :Zat (biasanya kimia) yang dipakai
untuk maksud desinfeksi.
Sterilisasi : Setiap proses (kimia atau fisik) yang
membunuh semua bentuk hidup
terutama mikroorganisme.
- Cide (sid) : Akhiran untuk menunjukkan bah-
wa zat (biasanya kimia) yang di-
pakai, mampu membunuh misal-
nya bakterisid; virusid; sporosid.
-Statik : Akhiran untuk menunjukkan bah-
wa zat ftiasanya kimia) yang dipa-
kai, mampu mencegah pertumbuh-
an organisme tetapi tidak membu-
nuhnya (spora juga tidak dibunuh)
misalnya bakteriostatik; fungistatik.
Sejarah
Beberapa ratus tahun yang lalu, bangsa Arab
telah mengenal bahwa membakar luka dengan
logam yang membara dapat mencegah infeksi,
walaupun penderita akan memperoleh luka
56 Buku Ajar Mikrobiologi Kedokteran
parut untuk selama hidupnya. Pada tahtn L537
seorang ahli bedah Prancis Ambroise Pare meng-
obati luka tembak dengan pembalut yang di-
basahi dengan kuning telur, terpentin dan lain-
lain bahan. Terpentin berfungsi sebagai sema-
cam pembakar kimia, dan kuning telur akan
mensuplai enzim lisosim yang bersifat antibak-
teri. Konsep antisepsis kemudian diterapkan
oleh Ignatz Semmelweis (1816-1865) danJoseph
Lister (1827-1912).
Semmelweis melihat bahwa insiden demam
puerpuralis dalam bangsal obstetri yang dikelola
oleh dokter lebih tinggi dibandingkan dengan
yang dikelola oleh bidan. Hal ini disebabkan
karena para dokter kurang memperhatikan men-
cuci tangan mereka. Ia menganjurkanagar mem-
pergunakan chlorinated lime unt''tk mencuci
tangan. Joseph Lister mempergunakan asam kar-
bol untuk mencegah infeksi akibat pembedahan.
Penggunaan antiseptika dan desinfektan
Hingga sekarang semakin banyak zat-zat kimia
yang dipakai untuk membunuh atau untuk me-
ngurangi jumlah organisme, dan penemuan-
penemuan baru terus muncul di pasaran. Oleh
karena tidak adanya bahan kimia yangideal atau
yang dapat dipergunakan untuk segala macam
keperluan, maka pilihan jatuh pada bahan kimia
yang mampu membunuh organisme yang ada,
dalam waktu yang tprsingkat dan tanpa merusak
bahan yang didesinfeksi.
Beberapa hal yang perlu diperhatikan pada
desinfeksi secara kimia:
1. Rongga (tp*r)yang cukup di antara alat-alat
yang didesinfeksi, sehingga seluruh permu-
kaan alat-alar tersebur dapat berkontak de-
ngan desinfektan.
2. Sebaiknya desinfektan yang dipakai bersifat
membunuh (germisid).
3. \7aktu (lamanya) desinfeksi harus tepat, alat-
alat y ang desinfeksi jangan dian gkat sebelum
waktunya.
4. Solusi yang biasa dipakai untuk membunuh
spora kuman biasanya bersifat sangat mudah
menguap sehingga ventilasi ruangan perlu
diperhatikan.
5. Pengenceran desinfektan harus sesuai dengan
yang dianjurkan, dan setiap kali harus dibuat
pengenceran baru. Desinfektan yang sudah
menunjukk an tanda-tanda pengeruhan atau
pengendapan harus diganti dengan yang baru.
6. Sebaiknya menyediakan hand lotion untuk
merawat tangan setelah berkontak dengan
desinfektan.
Antiseptik kimia
Antiseptik biasanya dipergunakan dan dibiar-
kan menguap seperri halnya alkohol. lJmumnya
isopropil alkohol 70-9oo/o adalah yang rermu-
rah, namun merupakan antiseptik yang sangat
efektif. Penambahan Iodium pada alkohol akan
meningkatkan daya desinfeksinya. Dengan atau
tanpa Iodium, isopropil alkohol tidak efektif
terhadap spora. Solusi terbaik unruk membunuh
spora adalah campuran formaldehid dengan

alkohol, tetapi solusi ini terlalu toksik untuk
dipakai sebagai antiseptik.
Oleh karena solusi desinfektan atau gas tidak
perlu berkontak dengan kulit manusia atau
membran mukosa, maka toksisitas yang lebih
tinggi masih dapat diterima, sehingga mereka
dapat dipakai sebagai bahan-bahan antimikroba.
Pemilihan antiseptik terutama tergantung
pada kebutuhan daripada tujuan tertentu serta
efek yang dikehendaki. Perlu juga diperhatikan
bahwa beberapa senyawa bersifat iritatif, dan
kepekaan kulit sangat bervariasi.
Halogen
Halogen meliputi senyawa-senyawa klorin dan
Iodium, baik yang organik maupun inorganik.
Kebanyakan senyawa halogen membunuh sel
hidup. Mereka membunuh sel karena meng-
oksidasi protein, dan dengan demikian merusak
membran dan menginakti{kan enzim-enzim.
lodium
Solusi Iodium, baik dalam air maupun dalam
alkohol bersifat sangat antiseptik dan telah dipa-
kai sejak lama sebagai antiseptik kulit sebelum
proses pembedahan.
Iodium juga efektif terhadap berbagai proto-
zoa seperti misalnya amuba yang menyebabkan
otttJ"ff
konsentrasi yang tepat,Iodium tidak
mengganggu kulit, namun penggunaan tinctura
iodii mewarnai jaringan dan menyebabkan iri-
tasi lokal pada kulit, dan kadang-kadang reaksi
alergi.
Sterilisasi dan Desinfeksi 57
Klorin
Klorin bebasmemiliki warna khas (hijau) dan
bau yang ta1am. Sudah sejak lama klorin dikenal
sebagai deodoran dan desinfektan yang sangat
baik, dan dijadikan standar pengolahan air minum
di seluruh lingkungan. Sayangnya kebanyakan
senyawa klorin diinaktifkan oleh bahan-bahan
organik dan beberapa katalisator logam.
Solusi hipoklorit paling banyak dipakai untuk
maksud-maksud desinfeksi dan menghilangkan
bau, karena bersifat relatif tidak membahayakan
iarrngan manusia, mudah ditangani, tidak ber-
warna dan tidak mewarnai, meskipun memudar-
kan warna.
Di kebanyakan rumah sakit dipakai untuk
mendesinfeksi ruangan, permukaan-permukaan
serta alat-alat nonbedah.
Berbagai derivat klorin organik juga dipakai
untuk desinfeksi air. Ini terutama penting bagi
pekemah (campers) yang kadang-kadang harus
mempergunakan air yang dikhawatirkan rerce-
mar. Senyawa yang sering dipergunakan adalah
halazon atav pardsulfone dicbloramidobenzoic
acid yang pada konsentrasi 4-8 mgr/L dapat
mendesinfeksi air yang mengandung Salmonella
typbi dalam waktu 30 menit.
Alkohol
Alkohol merupakan zat y^ng paling efektif dan
dapat diandalkan untuk sterilisasi dan desinfeksi.
Alkohol mendenaturasi protein dengan jalan de-
hidrasi, dan juga merupakan pelarut lemak. Oleh
karenanya, membran sel akan dirusak, dan enzim-
enzim akan diinaktifkan oleh alkohol. Ada tiga
58 Buku Ajar Mikrobiologi Kedokteran
jenis alkohol y ang dipergunakan yaitu metanol,
.."i i".i.f, i. etanol, :. :;,1...:l-'i..1 ::, dan isopropa-
nol qt- - ; 1; I
;;r.. . ir i:.
:I :; \t[slgrut ketentuan, Sema-
kin tinggi berat molekulnya, semakin meningkat
pula daya bakterisidnya. Oleh karenanya, di an-
tara ketiga jenis alkohol tersebut, isopropil alko-
hol adalah yangterbanyak dipergunakan. Yang
dipergunakan di dalam praktik adalah solusi al-
kohol 70-80o/o dalam air. Konsentrasi di atas
90o/o atau di bawah 50o/o biasanya kurang efektif
kecuali untuk isopropil alkohol yang masih tetap
efektif sampai konsentrasi99o/o. 'S7aktu 10 menit
sudah cukup untuk membunuh sel vegetatif,
tetapi spora tidak.
Sendiri atau dalam bentuk kombinasi, alko-
hol sering dipakai sebagai desinfektan kulit. Suatu
hapusan dengan alkohol secara cepat, tidak cukup
mensterilkan, tetapi hanya mengurangi jumlah
populasi, dan dengan demikian juga mengurangi
kemungkinan timbulnya infeksi. Telah menjadi
kebiasaan kita didalam praktik untuk mencelup-
kan alat-alat seperti gunting, pisau, pinset dan
sebagainya kedalam alkohol dan kemudian mem-
bakarnya. Keefektivan cara ini masih dipertanya-
kan, dan hendaknya jangandipakai untuk meng-
gantikan cara-cara sterilisasi yang lebih baik.
Fenol
Fenol (asam karbol) untuk peftama kalinya di-
pergunakan Lister di dalam ruang bedah sebagai
germicide untuk mencegah timbulnya infeksi
pasca bedah.
Pada konsentrasi rendah, daya bunuhnya dise-
babkan karena fenol mempresipitasikan protein
secara aktif, dan selain itu juga merusak membran
sel dengan menurunkan tegangan permukaan-
nya. Fenol merupakan standar pembanding
untuk menentukan aktivitas sesuatu desinfektan.
Fenol dan kresol berbau khas dan bersifat
korosif terhadap jaringan.'Walaupun demikian
mereka tahan terhadap pemanasan dan penge-
ringan serta tidak terpengaruh oleh bahan-bahan
organik, tetapi sayangnya mereka kurang efektif
terhadap spora. Penambahan halogen seperri
klorin akan meningkatkan aktivitas fenol.
Heksaklorofen merupakan derivat fenol yang
paling berguna. Dikombinasikan dengan sabun
akan merupakan desinfektan kulit yang sangat
efektif, tetapi lambatkerjanya. Fenol dan kresol
juga bersifat menghilangkan sakit (:,::,: ,,,, ).
Oleh karena sangat toksik, zat ini hanya dapat
dipergunakan secara eksternal.
Peroksida
Peroksida hidrogen (i r ',: , ; merupakan anrisep-
tik yang efektif dan nontoksik. Molekulnya
tidak stabil, dan apabila dipanaskan akan terurai
menjadi at dan oksigen:
.:..a, a:, a., i.; -.i,,'.!.:.:.
Dengan adanya ion-ion logam yang umum-
nya terdapat di dalam sitoplasma sel, maka sela-
ma pembentukan oksigen, dibentuk pula radikal
superoksida (. ., ) yang akan bereaksi dengan
grup-grup bermuaran negarif di dalam protein
dan yang selanjutnya akan menginaktifkan sis-
tem enzim yang vital. Pada konsenrrasi 0,3-6,0010,
: i., .,, dipakai untuk desinfeksi, dan pada kon-

sentrasi 6,0-250/o akan dipakai untuk sterilisasi.
Pada konsentrasi 0,1olo di dalam susu pada suhu
54o C selama 30 menit, HzOzdapat mengurangi
jumlah kuman sampai 99,99o/o.
Terdapat bukti bahwa H2O2 10% bersifat
virusid dan sporosid. Larutan 3olo biasa dipakai
untuk mencuci dan mendesinfeksi luka karena
kuman-kuman anaerob terutama sangat peka
terhadap oksigen. Pasta Na2O2 dipakai untuk
mengobati akne sedangkan ZnO2 untuk meng-
obati infeksi kulit karena kuman-kuman
^nae-
rob dan mikroaerofilik.
Zat warna
Beberapa macam zatwarnamemiliki sifat meng-
hambat pertumbuhan kuman (bakteriostatik),
misalnya derivat akridin dan zat warna rosanilin.
Akriflavin (campuran derivat akridin dengan
senyawa lain) mempunyai spektrum aktivitas
yang luas, dan telah dipergunakan untuk meng-
obati infeksi traktus urinarius. Mekanisme kerja-
nya agaknya disebabkan karena akridin mampu
bereaksi dengan DNA.
Urg, kristai yang merupakan derivat metil
dan zat warna rosanilin bersifat bakteriostatik
bagi kuman-kuman positif gram. Ungu kristal
dipakai untuk mengobati kandidiasis dan vagi-
nitis karena trikomonas. Mekanisme kerja se-
nyawa ini terhadap kuman positif Gram, mirip
dengan penisilin yaitu blokade tahap terakhir
pada penyusunan dinding sel.
Deterjen
Deterjen merupakan senyawa organik, yang
karena strukturnya, dapat berkaitan dengan air
Sterilisqsi dan Desinfeksi 59
dan dengan molekul-molekul organ rk nonpolar.
Molekul deterjen memiliki satu ujung hidrofilik
yangdapat bercampur dengan air, dansatu ujung
hidrofobik yang tidak dapat. Oleh karenanya,
molekul deterjen akan menempel pada permu-
kaan bahan organik dengan ujung hidrofiliknya
mengarah ke air.
::,.r:r- Molekul_molekul
:r,.i,':'l.i,l. deterjenberikatan
dengan ai1 dan
bahan nonpolar
Deterjen mungkin bermuatan listrik (ionik),
mungkin pula tidak (nonionik). Yang nonionik
biasanya tidak merupakan desinfektan yang baik,
bahkan dalam beberapa hal dapat menyokong
pertumbuhan kuman dan jamur. Dari yang ionik,
maka yang bermuatan negatif biasanya lemah
sifat bakterisidnya, sedangkan yang bermuatan
positif sangat kuat sifat bakterisidnya terutama
terhadap Stafilokokus dan beberapa virus, mes-
kipun tidak efektif terhadap spora.
Logam-logam berat
Logam berat berperan sebagai antimikroba oleh
karena dapat mempresipitasikan enzim-enzim
atau lainlain protein esensial dalam sel. Logam-
logam berat yang umum dipergunakan adalah
Hg, Ag, As,Zndan Cu.
Daya antimikrobanya lazim pula disebut
sebagai daya oligodinamik.
60 Buku Ajar Mikrobiologi Kedokteran
Hg, HgCl2 pernah merupakan desinfektan
yang populer, tetapi kini sudah dianggap
usang dan tidak bermanfaat oleh karena
dapat diinaktifkan oleh bahan organik.
Senyawa Hg organik efektif untuk meng-
obati lukaluka kecil (ringan) dan sebagai
preservatif di dalam serum dan vaksin.
Ag, Pada konsentrasi r" -''.rr r,
pergunakan untuk mencegah kemung-
kinan terjadinya infeksi gonokokus pada
ma.'abayi yang baru lahir. Untuk selama
beberapa tahun, penggunaan
telah diganti dengan penisilin, tetapi ber-
hubung dengan meningkatnya resistensi
kuman-kuman ini terhadap penisilin, kini
telah dipakai kembali.
As: Arsen pernah terkenal sebagai obat per-
t^ma untuk sifilis, dan kini masih diper-
gunakan dalam pengobatan infeksi oieh
Protozoa.
Zn: Dalam bentuk pasta, dipakai untuk meng-
obati infeksi karena kuman atau
Adelhida
Aldehida juga membunuh sel dengan mendena-
turasi protein. Larutan formaldehid 20o/o dalam
65 -7 0o/o alkohol merup akan cair an pensteril yang
sangat baik apabila alat-alat direndam selama L8
jam. Akan tetapi oleh karena meninggalkan re-
sidu, maka alat-alat tersebut harus dibilas ter-
lebih dahulu sebelum dipakai.
Glutaraldehid merupakan solusi seefektif for-
maldehid, tenrtama apabila pH nya 7,5 atau
lebih. Stafilokokus dan lainlain sel vegetatif akan
dimatikan dalam waktu 5 menit, Mycobacterium
tuberculosis dan virus dalam waktu 10 menit,
sedangkan untuk membunuh spora diperlukan
3-12 jam.
Solusi ini bersifat nontoksik dan tidak iritatif
bagi penderita.
biasa di-
Cara-cara dengan gas
Oksida etilen (ETO) :
Oksida etilen merupakan zatpeng-alkil yang
dapat membunuh sel. Oksida etilen merupa-
kan gas yang sangat eksplosif dan larut di
dalam air. Untuk menjamin sterilitas bahan-
bahan, diperlukan pemaparan selama sema-
lam terhadap l''i:': :; ', pada suhu 60" C.
Konsentrasi maksimum ETO yang diper-
bolehkan dalam penggunaan yang lama ter-
hadap manusia adalah '.. sayangnya
'',:,r...'.r-.
ETO meninggalkan residu y angiritattf untuk
jaringan.
Prosedurnya lambat, makan waktu dan alat-
jamtr. nya mahal. Keuntungan penggunaan ETO
adalah karena mudah menembus plastik dan
mensterilkan isi bungkusan-bungkusa n (pack-
ing). Alat-alat seperti alat optik, kareter, kom-
ponen-komponen beart lung macbine, arterial
heart rsahtes dan jugabantal, kasur dan sepatu
dapat disterilkan dengan cara ini.
Uap formaldehid:
Selain dalam bentuk cairan, formaldehid juga
sangat bermanfaat dalam bentuk gas. Apa-
bila formalin (arutan formaldehid 37o/o

dalam air) dipanaskan, akan melepaskan uap
formaldehid yang merupakan desinfektan
sangat efektif bagi alat-alat dan berbagai bahan
yang tercemar dengan spora atau Mycobac-
terium tuberculosis.
Beta-propiolakton
:
Beta-propiolakion (BPL) stabil pada suhu di
bawah titik beku, tetapi apabila diuapkan
pada suhu kamar dalam lingkungan yang
lembab, menjadi bahan pensteril yang sangat
kuat. Dalam bentuk citranBPl- dipakai untuk
mensterilkan vaksin, jaringan dan sera.
Dalam bentuk uap, bersifat relatif nontoksik,
namun BPL cair bersifat karsinogenik.
Cara-cara pengujian antiseptik dan
desinfektan
Zat-zat antimikroba yar'g dipergunakan, baik
untuk antisepsis atau desinfeksi harus diuji ke-
efektivannya. Cara menentukan daya sterilisasi
zat-zat tersebut adalah dengan melakukan Tes
Koefisien Fenol.
Tes Koefisien Fenol
Tes koefisien Fenol dilakukan untuk memban-
dingkan aktivitas suatu produk dengan daya
bunuh fenol dalam kondisi tes yang sama. Berba-
gai pengenceran fenol dan produk yang dicoba,
dicampur dengan suatu volume tertentu biakan
St ap lry I o c o c c u s d.ur e u s atau S al m on ell a ty p h i.
Setelah interval selama 5, 10 dan 15 menit
suatu jumlah tertentu dari setiap pengenceran di-
ambil, dan ditanam pada perbenihan untuk se-
lanjutnya dieramkan selama sekurang-kurang-
Sterilisasi dan Desinfeksi 6l
nya duahari. Setelah pengeraman tersebur, biakan-
biakan tadi diperiksa apakah ada pertumbuhan
atau tidak. Koefisien fenol ditentukan dengan
membandingkan pengenceran tertinggi test pro-
duct y.ang membunuh kuman dalam waktu 10
menit (tetapi tidak membunuh dalam 5 menit),
dengan pengenceran fenol yang memberikan
hasil yang sama. Misalnya pengenceran rerringgi
test product yang membunuh kuman = L ; 200,
dan pengenceran fenol yang memberikan hasil
sama adalah 1 : t':1.. maka koefisein fenolnya
adalah.rij,-: I tit:: ,- : :
Pengendalian mikroba secara fisik
Cara membunuh kuman dengan panas (tbermal
kill) adalah mudah, dipercaya dan relatif tidak
mahal.
Terminologi thermal kill :
1. tbermal dearb point:
suhu dimana suatu suspensi organisme telah
disterilkan setelah pemaparan selama 10 menit.
2. thermal deatb time:
wakm yang diperlukan bagi suatu suhu rerrentu
untuk mensterilkan suatu suspensi organisme.
3. D palue:
waktu yang diperlukan untuk membunuh
90o/" dari organisme dalam suatu suspensi
pada suatu suhu tertentu. Suhu biasanya di-
nyatakansebagai:. atau
4. Z aalue:
jumlah deralat kenaikan suhu yang diperlu-
kan untuk menurunkan D ualue sampai
menjadi sepersepuluh dari nilai semula.
62 Buku Ajar Mikrobiologi Kedokteran
contoh : spora Bacillus rnega.terium mem-
punyai j ;; ::',. .'. :.".';;','1, dan r '
: :..' :: ).,',':', t maka Z valuenya adalah
5, oleh karena untuk menurunkan
D value menjadi sepersepuluh (dari
LO menit menjadi 1, menit), diperlu-
kan kenaikan suhu sebanyak 5'C
(dari 't'''r . -- ;r''r'l-i; ).
Cara kerja panas
Panas basah membunuh kuman karena men-
denaturasi protein, terutama enzim-enzim dan
membran sel. Daya bunuh panas basah ini juga
meliputi perubahan kondisi fisik daripada lemak
sel. Panas kering membunuh kuman terutama
karena oksidasi komponen-komponen sel. Daya
bunuh panas kering tidak sebaik panas basah.
Percobaan menunjukkan bahwa, apabtla biakan
kuman dalam bentuk liofil dipanasi secara
kering, akan diperlukan waktu yanglamauntuk
membunuhnya. Akan tetapi apabila biakan ter-
sebut dimasukkan ke dalam air mendidih, ia
akan cepat dimatikan.
Pemanasan basah
Otoklaf
Teknik sterilisasi yang paling pasti adalah peng-
gunaan uap air disertai dengan tekanan, yang
dilakukan dalam alat yangdisebut otoklaf. Oto-
klaf memiliki suatu ruangan yang mampu mena-
han tekanan di atas I atm. Alat-alat atau bahan-
bahan yang akan disterilkan, dimasukkan ke
dalam ruangan ini. Setelah udara dalam ruangan
ini digantikan oleh uap.air, maka ruangan ini
ditutup rapat sehingga tekanannya akan mening-
kat, yang juga akan diikuti oleh kenaikan suhu-
nya. Dengan cara ini akan dapat dicapai tekanan
!rr/, atm dan suhu 1.21.o C. Dengan tekanan dan
suhu seperti ini, dalam waktu 10-12 menit, semua
makhluk hidup berikut spora akan dimatikan.
Di dalam otoklaf, yang mensterilkan adalah
panas basah, dan bukan tekanannya. Oleh karena
itu, setelah air di dalam tangki mendidih dan
mulai dibentuk uap air, maka uap air ini dialir-
kan ke nrang pensteril guna mendesak keluar
semua udara di dalamnya. Apabila masih ada
udarayangtersisa, maka udara ini akan menam-
bah tekanan di dalam ruang pensteril yang akan
mengganggu naiknya suhu dalam ruang tersebut.
Merebus (boiling)
Teknik desinfeksi termudah dan termurah ada-
lah dengan merebus. \faktu desinfeksi yang
dianjurkan adalah 15 menit dihitung setelah air
mendidih. Sel vegetatif akan dimatikan dalam
waktu 5-10 menit pemaparan, tetapi spora dan
kebanyakan virus mampu bertahan berjam-jam
dengan caraini.
Pasteurisasi
Pasteurisasi adalah suatu cara desinfeksi dengan
pemanasan yang untuk pertama kalinya dilaku-
kan oleh Pasteur dengan maksud untuk mengu-
rangi jumlah mikroorganisme pernbusuk (peru-
sak) di dalam anggur, dan dengan demikian dapat
memperpanjang shelf life anggur tersebut, dan
tanpa merusak anggur tadi. Cara ini ternyata
dapat juga dipakai terhadap susu, karena rer-

bukti bahwa kuman-kuman patogen yang mung-
kin terdapat di dalam susu seperti kuman tbc,
brusela, streptokokus, stafilokokus, salmonella,
shigella dan di{teri dapat dibunuh sedangkan susu
tidak rusak. Kuman-kuman ini dapat berasal dari
sapi itu sendiri, dari pemerah sapi atau dari pera-
latan y ang dipergunakan. Suhu yang diperguna-
kan pada pasteurisasi adalah sekitar 65oC, dan
waktu yang dipergunakan adalah 30 menit.
Pemanasan kering
Pembakar an (i nci neration)
Pembakaran merupakan cara sterilisasi yang
100o/o efektif, tetapi cara rni terbatas pengguna-
Cara ini biasa dipergunakan untuk men-
^nrrya.
sterilkan alat penanam kuman (sengkelit atau
oese), yaitu dengan membakarnyahtngga ptjar.
Dengan cara iri semua bentuk hidup akan di-
matikan. Pembakaran juga dilakukan terhadap
bangkai binatang percobaan yang mati.
Sterilisasi dengan udara panas
(hot air sterilization)
Alat-alat yang akan disterilkan dengan cara ini,
ditempatkan di dalam oven dimana suhunya dapat
mencapai 160-180'C. Caranya adalah dengan
memanaskan udara di dalam oven tersebut (de-
ngan gas atau listrik). Oleh karena daya penetrasi
panas kering tidak sebaik panas basah, maka
waktu yang diperlukan pada sterilisasi cara ini,
lebih lama yaitu selama 1-2 jam. Sterilisasi
dengan udara panas ini baik dipergunakan untuk
mensterilkan alat-alat gelas seperti piring petri,
pipet, tabung reaksi, labu dan sebagainya.
Sterilisasi dan Desinfeksi 63
Radiasi
Radiasi ungu ultra (ultraviolet)
Mikroorganisme di udara dapat dibunuh dengan
penyinaran memakai sinar ungu ultra. Panjang
gelombang yang membunuh mikroorganisme
adalah di anrara220-290 nm; radiasi paling efek-
tif adalali 253,7 nm. Faktor penghambat dari
sinar ungu ultra adalah daya penetrasinya yang
lemah. Untuk memperoleh hasil yang baik,
maka bahan-bahan yang akan disterilkan, baik
yang berupa cairan, gas atau aerosol harus dile-
watkan (dialirkan) atau ditempatkan langsung di
bawah sinar ungu ultra dalam lapisanJapisan
yang tipis.
Absorpsi radiaii ungu ultra menyebabkan
modifikasi-modifikasi kimiawi dari nukleopro-
tein serta menimbulkan hubungan srlang (cross
linkage) antara pasangan-pasangan molekul
timin. Hubungan ini dapat menyebabkan salah
baca dari genetic code, yang akan menghasilkan
mutasi yang selanjutnya akan merusak atau
memperlemah fungsi-fungsi vital organisme dan
kemudian akan mematikannya. Orang-orang yang
bekerja dengan atau dekat sumber sinar ungu
ultra harus memutkai peralann guna melindungi
kornea mereka terhadap iritasi atau kerusakan
yang mungkin bersifat permanen.
Penya ri ng an (fi ltrati o n)
Penyaringan dilakukan dengan mengalirkan cair-
arl atav gas melalui suatu bahan penyaring yang
memiliki pori cukup kecil untuk menahan mikro-
organisme dengan ukuran tertentu. Saringan
akan tercemar, sedangkan cairan atau gas yang
64 Buku Ajar Mikrobiologi Kedokteran
melaluinya akan steril. Alat saring tertentu juga
mempergunakan bahan yang dapat meng-
absorpsi mikroorganisme. Saring an yangumum
dipakai tidak dapat menahan virus. Penyaringan
dilakukan untuk mensterilkan substansi yang
peka terhadap panas seperti serum, solusi enzim,
toksin kuman, ekstrak sel dan sebagainya.
Menyaring cairan
Hal ini dapat dilakukan dengan berbagai filter
seperti: Saringan Seitz, yang mempergunakan
bahan asbestos sebagai alat penyaringnya; saring-
an Berkefeld, yang mempergunakan filter ter-
buat dari tanah diatomae; saringan Chamber-
land, yang mempergunakan filter terbuat dari
porselen; dan fritted glass filter, yang memper-
gunakan filter terbuat dari serbuk gelas.
Menyaring udara
Untuk menjaga agar suatu alat (labu, tabung)
yang sudah steril tidak tercemar oleh kuman,
atau untuk menjaga agar suatu biakan kuman
tidak tercemar oleh kuman lain, maka alat-alat
tersebut harus ditutup dengan kapas oleh karena
kapas mudah ditembus udara tetapi dapat mena-
han mikroorganisme. Flarus drjaga agar kapas
tidak menjadi basah, oleh karena kapas basah
memungkinkan kuman menembus ke dalam.
Untuk mencegah pencemaran oleh kuman-
kuman udara pada waktu menuang perbenihan,
dapat dipergunakan suatu alat yang disebut
laminarflora bench di mana udara yang masuk ke
dalamnya disaring terlebih dahulu dengan suatu
saringan khusus. Saringan ini ada batas pema-
kaiannya dan harus diganti dengan yang baru
apabila sudah tidak berfungsi lagi.
Zat-zat kem ote ra peuti k
Salah satu keberhasila n y^ngpenting dalam ilmu
kedokteran adalah eradikasi berbagai penyakit
infeksi dengan mempergunakan zat kemotera-
peutik. Dua penemuan penting telah merombak
cara terapi penyakit infeksi. Yang pertama ada-
lah penemuan Prontosil pada tahun 1935 yang
mempunyai efek kuratif terhadap infeksi strep
tokokus. Prontosil ini merupakan pendahulu
dartpada sulfonamida. In pitro prontosil tidak
bersifat antibakteri, sedangkan in ai,l)o sifat anti-
bakterinya disebabkan karena pembebasan
p-aminobensensulfonamida (sulfonamida). Pene-
muan kedua adalah ditemukannya antibiotik
penisilin oleh Fleming pada tahun 1929, dan
kemudian pada tahun 1940, Florey dkk, men-
demonstrasikan keampuhan penisilin yang tak
tertandingkan serta kemungkinan diekstraksi-
kannya antibiotika tersebut dari cairan biakan.
Penemuan ini diikuti oleh penemuan strepto-
misin pada tahun 1944, dan hingga kini penca-
rian antibiotika baru terus berjalan.
Antibiotika
Antibiotika adalah suatu substansi kimia yang
diperoleh dari, arau dibentuk oleh berbagai spe-
sies mikroorganisme, yang dalam konsentrasi
rendah mampu menghambat pertumbuhan
mikroorganisme lainnya. Antibiotika tersebar
di dalam alam, dan memegang peranan penting
dalam mengatur populasi mikroba dalam tanah,
 Sterilisasi dan Desinfeksi 65

air, limbah dan kompos. Antibiotika ini berbeda Antibiotika yang mempengaruhi
dalam susunan kimia dan cara kerjanya. Dari dinding sel
sekian banyak antibiotika yang telah berhasil Sel kuman dikelilingi oleh suatu strukrur kaku
ditemukan, hanya beberapa saja yang cukup yang disebut dinding sel, yang melindungi mem-
tidak toksik untuk dapat dipakai dalam pengo- bran protoplasma di bawahnya terhadap rrauma,
batan. Antibiotika yang kini banyak diperguna- baik osmotik maupun mekanik. Karena iru,
kan, kebanyakan diperoleh dari genus Bacillus, setiap zat yang mampu merusak dinding sel atau
Peni c il lium dan Strept o my c e s. mencegah sintesisnya, akan menyebabkan ter-
Sifat-sifat antibiotika sebaiknya adalah: bentuknya sel-sel yang peka terhadap tekanan
osmotik. Di antara antibiotika yang mempe-
menghambat atau membunuh patogen tanpa
- ngaruhi dinding sel adalah penisilin, fosfomisin,
merusak host
sikloserin, ristosetin, vankomisin dan basitra-
bersifat bakterisid dan bukan bakteriostatik
- sin.
tidak menyebabkan resistensi pada kuman
- Penisilin dan sefalosporin
berspektrum luas
- Hingga kini penisilin masih banyak dipakai di
- tidak bersifat alergenik atau menimbulkan
efek samping bila dipergunakan dalam jangka dalam pengobatan. Produk pertama penisilin
waktu lama. yang diperoleh dari jamur Penicillium notdturn,
tetap aktif dalam plasma, cairan badan atau kini digantikan oleh suaru mutan yaitu Peni-
- cillium cbrysogenum yang mampu menghasilkan
eksudat
larut di dalam air serta stabil penisilin dalam jumlah yang berlip at ganda.
- Istilah penisilin adalah generlA untuk semua grup
bactericidal leztel didalam tubuh cepat dicapai
- penisilin, baik yang natural araupun semisin-
dan bertahan untuk waktu lama.
tetik. Dari penisilin natural yang dihasilkan,
Mekanisme kerja antibiotika ternyata bensil penisilin atau penisilin G adalah
Antibiotika mengganggu (inrerfere) bagian-bagian yang paling bermalfaat dalam klinik. Penisilin
yang peka di dalam sel, yaitu: G ini efektif terhadap kebanyakan kokus positif
1. sintesis dinding sel dan negatif Gram. Yang resisten terhadap anti-
2. fungsi membran biotik ini adalah enrerokokus dan srrain Staplry-
3. sintesis protein lo co cc us aurezzs penghasil penisilinasa. Kekurang-
4. metabolisme asam nukleat an penisilin G adalah:
5. metabolisme intermedier 1. diinaktifkan oleh pH asam cairanlambung
Ada antibiotika yang memiliki lebih dari 2. dirusak oleh penisilinasa
salah satu sifat ini. 3. kadang-kadang menyebabkan reaksi alergi
66 Buku Ajar Mikrobiologi Kedokteran
Penisilin semisintetik
Dari penisilin semisintetik ini, yang paling ber-
gana, adalah kelompok yang resisten terhadap
penisilinasa seperti metisilin, kloksasilin, oksasi-
lin dan nafsilin. Dari senyawa-senyawa berspek-
trum luas yang bermanfaat dalam klinik adalah
ampisilin yangtahan asam retapi peka terhadap
penisilinasa dan karbenisilin yang rerurama ber-
guna terhadap infeksi oleh Pseudotnonal
Sefalosporin
Antibiotika golongan ini dihasilkan oleh jamur
Cepbalosporium. Salah satu dari senyawa yang
natwral yaitu sefalosporin C, memiliki struktur
dan mekanisme kerja yang mirip dengan peni-
silin. Dari sefalosporin yang kini banyak diper-
gunakan adalah sefalotin dan sefazolin, sefalori-
din dan sefaleksin. Antibiotika ini bersifat bakte-
risid bagi kebanyakan kokus positif Gram dan
kuman-kuman batang negarif Gram. Mereka
relatif tidak toksik rerapi mungkin menyebab-
kan reaksi hipersensitivitas.
Mekanisme kerja
Penisilin mengganggu (interfere) pembentukan
dinding sel terutama pada tahap terakhir. Peng-
gunaan penisilin ini dapat menyebabkan rerben-
tuknya sferoplas yaitu kuman-kuman tanpa din-
ding sel atau kuman bentuk L.
Antibiotika yang mengganggu/merusak
membran sel
Membran sel memegang peranan vital dalam sel.
Ia merupakan pembatas osmorik bagi bebasnya
difusi antara lingkungan luar dan dalam sel. Itu
mempengaruhi konsentrasi metabolit dan bahan
gtzi di dalam sel dan merupakan rempat berlang-
sungnya pernapasan dan aktivitas biosintetik
tertentu. Beberapa antibiotika diketahui mampu
merusak atau memperlemah satu atau lebih dari
fungsi-fungsi ini, yang akan menyebabkan gang-
guan-gangguan terhadap kehidupan sel. Hanya
beberapa saja dari antibiotika golongan ini yang
dapat dipakai di klinik, karena kebanyakan dari-
padany a bersifat toksik.
Polimiksin
Merupakan kelompok polipeptida sederhana
yang sukar berdifusi, dan sangar toksik. Antibio-
tik ini dihasilkan oleh Bacillus polymyxa. Ang-
gota kelompok ini dikenal dengan huruf-huruf
A, B, C, D dan E, dimana hanya polimiksin B
dan E (kolistin) salayangdipakai dalam klinik.
Antibiotika ini terutama dipakai terhadap in-
feksi oleh Pseudomonas aeruginosa yang sering-
kali resisten terhadap kebanyakan antibiotika.
Poliena
Merupakan antibiotika makrolid yang secara
selektif menghambat organisme yang membran-
nya mengandung sterol. Mereka aktif terhadap
ragr, jamur dan lainlain sel eukariotik, tetapi
tidak berpengaruh terhadap kuman-kuman pro-
kariotik yang tidak memiliki sterol di dalam
membrannya. Aktivitas anri jamur daripada
poliena disebabkan karena perubahan permea-
biiitas membran sebagai akibat interaksi anti-
biotik sterol. Tergolong di dalam antibiotika

poliena ini adalah amfoterisin B yang aktif ter-
hadap jamur, akan tetapi bersifat nefrotoksik.
Lainnya adalah nistatin, tetapi karena bersifat
toksik apabila diberikan secara parenteral, maka
penggunaannya adalah untuk mengobati infeksi
yang bersifat topikal atau superfisial, terutama
yang disebabkan oleh Candida.
Antibiotika yang mengganggu fungsi DNA.
Sejumlah obat-obat anti mikroba berfungsi ter-
utama mengganggu/merusak struktur dan fungsi
DNA, akan tetapi karena toksik, maka hanya
beberapa salayangdapat dipakai di klinik. Meski-
pun demikian, obat-obat ini sangat bermanfaat
sebagai alat biokimia, dan memberikan sum-
bangan yang penting pada biologi molekuler.
Struktur molekul DNA erat kaitannya dergan
dua peran utamanya yaitu duplikasi dan tran-
skripsi. Oleh karenanya, setiap z ty^ngmampu
mengganggu struktur double Dellx DNA terse-
but, akan mampu pula mempengaruhi seluruh
fase pertumbuhan dan metabolisme kuman.
Tergolong di dalam kelompok antibiotika ini
adalah mitosin dan asam nalidiksat. Pemberian
mitomisin ke dalam biakan kuman yang sedang
tumbuh, akan mengakibatkan hambatan pada
pembelahan sel. Asam nalidiksat dipergunakan
dalam pengobatan infeksi saluran kemih yang
disebabkan oleh kuman-kuman negatif Gram.
Antibiotika yang menghambat sintesis
protein
Sintesis protein merupakan hasil akhir dari dua
proses utama, yaitu:
Sterilisasi dan Desinfeksi 67
1. transkripsi atau sintesis asam ribonukleat
yang DNA-dependent dan
2. translasi atau sintesis protein yang RNA-
dependent.
Antibiotika yang mampu menghambat salah
satu proses ini, akan menghambat sintesis pro-
tein. Tergolong di dalam antibiotika jenis ini
adalah
aktinomisin:
-
aktif terhadap banyak kuman-kuman positif
dan negatif Gram.
rifampisin:
-
rifampisin memiliki spekrrum dari bakteri
yang luas dan terutama efektif terhadap kuman-
kuman positif Gram dan mikobakteria. Dalam
klinik, rifampisin terurama efektif untuk
pengobatan tuberkulosis secara oral.
streptomisin:
-
bersifat bakterisid terhadap sejumlah besar
kuman-kuman positif dan negatif Gram, dan
terhadap Mycobacterium tubercwlosis.
- tetrasiklin:
spektrum kelompok tetrasiklin sangar luas,
dan mencakup spektrum penisilin, strepro-
misin serta kloramfenikol.
kloramfenikol:
-
bersifat bakteriostatik, aktif terhadap sejum-
lah kuman positif dan negatif Gram, riketsia
dan klamidia. Kini terutama dipakai untuk
infeksi-infeksi anaerobik, meningitis karena
Haemophilus influenzae dan infeksi karena
Salmonella typbi.
68 Buku Ajar Mikrobiologi Kedokteran
- eritromisin:
tergolong antibiotik makrolid. Dapat bersifat
bakteriostatik atav bakterisid. Merupakan
obat pilihan terhadap Alycoplasma dan penya-
kit legioner. J.rg" bermanfaat untuk infeksi-
infeksi karena stafilokokus, streptokokus grup
A dan pneumokokus, terutama apabila pen-
deritanya peka terhadap penisilin.
klindamisin:
- tetapi di dalam badan, ia dipecah menjadi p-ami-
penggunaannya tenrrama untuk infeksi-infeksi
oleh kuman anaerob seperti ;1,..1 . 1.1 . 1. :','.. ;,:,:..,.,.,.1,'.,,
Antagonisme metabolik
Enzim- enzim serin gkali dihamb at oleh senyawa-
senyawa yang mempunyai struktur mirip de-
ngan substr at asalnya. Penghambat-penghambat
seperti ini menyatu
(bergabung) dengan enzim
sedemikian rupa sehingga mencegah kombinasi
substrat-enzim dan reaksireaksi katalitik. Ham-
batan reaksi enzimatik oleh zat-zat tertenru ini
merupakan dasar pemikiran dari kemoterapi.
Banyak dari penghambat seperti ini bersifat ana-
log dengan faktor-faktor pertumbuhan kuman
yaitu faktor-faktor organik yang diperlukan
oleh semua kuman untuk pertumbuh annya.
Faktor-faktor pertumbuhan ini misalnya vita-
min, asam amino, purin dan pirimidin. Enzim-
enzlm esensial yang diperlukan dalam sintesis
dan pemanfaaran faktor-faktor tadi, dapat
dihambat oleh substansi-substansi yang secara
struktural mirip dengan metabolit-metabolit
tersebut. Penghambat-penghambat seperri ini
disebut anti metabolit.
Sulfonamida
Istilah sulfonamida merupakan nama generic
untuk derivat-derivat daripada p-aminobensen-
sulfonmida atau sulfanilamida. Zat inj (pron,
tosil) untuk perrama kalinya dipergunakan oleh
Domagk pada tahun 1935 dan merupakan zat
kemoterapeutik penama yang dipakai untuk men-
cegah dan mengobati infeksi bakterial pada ma-
nusia. In vitro, prontosil inaktif terhadap kuman,
nobensensulfonamida yang merupakan bagian
molekul yang bersifat kemoterapeutik. Sulfona-
mida mempunyai aktiviras anti bakteri yang luas
terhadap kuman-kuman positif dan negatif Gram,
tetapi oleh karena hanya bersifat bakteriostatik,
maka diperlukan adanya fagositos untuk mem-
bunuh kuman-kuman di dalam bost.
Di antar a kuman-kum an y angpeka terhadap
sulfonamida adalah Streptococcus pyogenes, Strep-
tococcus pneumoniae, Haemophilws influenzae,
Vibrio cbolerae, Yersinia pestis, Neisseria menigi-
tidis dan Chlamydia. Secara struktural, sulfona-
mida analog dengan p-aminobenzoic acld (pABA),
yaitu suatu metabolit esensial di dalam sel yang
berfungsi dalam penyusunan asam folat. PABA
dan sulfonamida saling bersaing dalam reaksi.
Sulfon
Derivat daripada 4,4 -draminodifenilsulfon (dap-
son) merupakan kelompok zat yang bersifat
khusus, rerurama terhadap genus l|ycobacte-
rium. Mereka telah dipakai dalam pengobatan
tuberkulosis, tetapi kini penggu naanny adibatasi
hanyauntuk lepra.

p-Am i nosal icyl ic acid (PAS)
Aktivitas antimikroba darrpadaPAS adalah sangar
khas untuk fuIycobaaeriwm tuberculoszs. PAS
bersifat bakteriostatik, dan mempunyai struktur
mirip dengan PABA. Kini PAS merupakan second
line drug pada kemoterapi terhadap tuberkulosis.
lsoniasid
Isonicotinic acid lrydrazrd (INH) atau isoniasid
bersifat sangat khas terhadap Mycobacterium
tuberculosis. Dalam konsentrasi rendah sangar
Sterilisasi dan Desinfeksi 69
efektif, dan hanya bersifat bakterisid terhadap
kuman-kum an yangsedang tumbuh aktif. Kuman
tuberkulosis yang berkontak dengan obat ini
akan kehilangan sifat tahan asamnya. Pada saat
ini, isoniasid merupakan obat paling poten dan
berguna dalam pengobatan tuberkulosis. Meski
pun demikian, resistensi terhadap obat ini cepat
terjadi. Masalah ini dapat dihindari dengan jalan
memberikan isoniasid secara simultan dengan
streptomisin atau ethambutol.