LIGAMIENTO Y RECOMBINACIN

El principio de Mendel segn el cual los genes que controlan diferentes caracteres son heredados de forma independiente uno de otro es cierto slo cuando los genes existen en cromosomas diferentes. El genetista estadounidense Thomas Hunt Morgan y sus colaboradores demostraron en una serie amplia de experimentos con moscas de la fruta (que se reproducen con gran velocidad), que los genes se disponen de forma lineal en los cromosomas y que cuando stos se encuentran en el mismo cromosoma, se heredan como una unidad aislada mientras que el cromosoma permanezca intacto. A los genes heredados de esta manera se dice que estn ligados. Sin embargo, Morgan y su grupo observaron tambin que este ligamiento rara vez es completo. Las combinaciones de los alelos de cada progenitor pueden reorganizarse. Durante la meiosis, una pareja de cromosomas homlogos puede intercambiar material durante lo que se denomina recombinacin o entrecruzamiento. El entrecruzamiento se produce generalmente al azar a lo largo de los cromosomas, de modo que la frecuencia de recombinacin entre dos genes depende de la distancia que los separe en el cromosoma. En consecuencia los cientficos pueden trazar o dibujar mediante experimentos de reproduccin apropiados, las posiciones relativas de los genes a lo largo del cromosoma o mapa gnico. Basndose en la teora cromosmica de la herencia enunciada por Sutton y cuyos aspectos escenciales son: Los genes estn ubicados en los cromosomas La ordenacin de los mismos es lineal Al fenmeno gentico de la recombinacin le corresponde un fenmeno citolgico de intercambio de segmentos cromosmicos, Morgan propuso que Existen parejas gnicas situadas sobre el mismo par de cromosomas homlogos, llamando a este fenmeno ligamiento.

SUMARIO
Temas Pgina 42

1. Ligamiento 2. Deteccin
del Ligamiento

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3. Frecuencias

51

de Recombinacin

Problemas Resueltos

54

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Ligamiento y Recombinacin
Genes ligados

Cuando dos o ms genes estn localizados en el mismo cromosoma se dice que estn ligados, y pueden estarlo en autosomas o cromosomas sexuales. Los genes que se encuentran en distintos cromosomas se distribuyen en las gametas independientemente uno del otro. Sin embargo, los genes que se encuentran en el mismo cromosoma tienden a permanecer juntos; es decir, a no sufrir separaciones ni combinaciones al azar durante la formacin de las gametas. Al analizar los resultados de una cruza de prueba a individuos dihbridos se observarn resultados diferentes, dependiendo de la ubicacin de los genes, es decir: en el mismo o en distintos cromosomas.

A) Los genes que se encuentran en distintos cromosomas se distribuyen independientemente, por lo tanto del apareamiento genes con AaBb x aabb se obtendr una proporcin esperada en la cruza de distribucin independiente prueba de 1:1:1:1. Ejemplo 8: consideremos dos pares de genes (A, a) y (B, b) aabb slo produce ubicados en distintos cromosomas: tipo gametas de tipo: ab. AaBb produce 4 Progenitores AaBb x aabb tipos de gametas con igual igual fre 100% cuencia. Gametos AB Ab aB ab Ab F1 Aabb: aaBb: aabb B1) Los genes ligados no se distribuyen independientemente sino que tienden a permanecer juntos y en la misma combinacin encontrada en los progenitores. AaBb:

completamente Ejemplo 9: consideremos dos pares de genes (A, a) y (B, b) ligados o ligamiento completo ubicados en el mismo cromosoma: Progenitores Gametos AB/ab : ab/ab AB/ab AB ab x ab/ab 100% ab F1

duce un tipo de gametas: ab. AB/ab produce 2 tipos de gametas con igual frecuencia: AB y ab .

ab/ab slo pro-

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Los productos de la meiosis ( gametos AB y ab) presentan los genes ligados o unidos de la misma forma que se encuentran en el progenitor sometido a prueba. Son el resultado de no haber sufrido entrecruzamiento y se denominan gametos tipo progenitor o parental. B2) Los genes ligados no siempre permanecen juntos, debido a que las cromtides no hermanas de cromosomas homlogos pueden intercambiar entre ellos segmentos de longitud variable durante la profase meitica produciendo gametos de tipo recombinantes por virtud del entrecruzamiento. Cabe aclarar que en las meiosis que ocurre entrecruzamiento y recombinacin adems de los gametos de tipo progenitor se obtienen los gametos tipo recombinantes que constituyen nuevas combinaciones de los genes ligados en los progenitores. genes parcialmente ligados o ligamiento incompleto y recombinacin

Durante la meiosis cada cromosoma se duplica formando dos cromtides hermanas idnticas, el par de cromosomas homlogos se aparea (sinapsis) y se produce el entrecruzamiento entre cromtides no Meiosis hermanas. Este ltimo proceso requiere del rompimiento y la reunin de y slo dos de las cuatro bandas en cualquier punto del cromosoma. (Ver Recombinacin figura a continuacin)

Entrecruzamiento

Fin de

Fin de la Meiosis II A B b A b gameta tipo recombinante Ab gameta tipo recombinante aB B gameta tipo progenitor AB

la Meiosis I

A A A a a B B b b a a A

a B b a

gameta tipo progenitor ab

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Los productos de la meiosis (gametos AB y ab), presentan los genes ligados de la misma forma que se encuentran en los progenitores, resultan de las cromtides que no sufrieron entrecruzamiento y se denominan gametos tipo progenitor o parental. Los otros dos productos meitico (gametos Ab y aB), resultantes del entrecruzamiento, constituyen nuevas combinaciones de los genes ligados originalmente en los progenitores y se denominan gametos tipo recombinantes. En los dihbridos o dobles heterocigotas, para dos loci ligados, puede ocurrir que los dos alelos dominantes o tipo comn estn en un cromosoma y los dos recesivos o mutantes en el otro. En este caso se dice que las relacines de enlace es de acoplamiento o cis. Cuando el alelo dominante de un locus y el recesivo del otro ocupan el mismo cromosoma la relacin es de repulsin o trans. Los gametos recombinantes y progenitores sern diferentes en cada caso. Ab/aB fase de repulsin

AB/ab fase de acoplamiento

Productos de la recombinacin: genes ligados en fase de acoplamiento A a A B gameta tipo progenitor A b B b a B a b gameta tipo progenitor Gametos: T.P. AB ab T.R. aB Ab B)Repulsin Progenitor Gametos: T.P. a b a B gameta tipo progenitor T.R. Ab/aB Ab aB AB ab Resmen A) Acoplamiento Progenitor AB/ab

gametas de tipo recombinante

genes ligados en fase de repulsin A A A b gameta tipo progenitor A B b B

gametas de tipo recombinante

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La recombinacin, definida en relacin a la meiosis, es el proceso que genera un producto haploide cuyo genotipo difiere de los dos genotipos progenitores (haploides) que formaron la clula (2n) que inici la meiosis. El producto as generado se denomina recombinante. Hay dos tipos de recombinacin, las recombinantes por mtodo absolutamente diferentes: a) intercromosmica b) intracromosmica a) Recombinacin intercromosmica. Es la que se produce mediante la distribucin independiente de Mendel. Las dos clases recombinantes o nuevos fenotipos constituyen el 50% de los descendientes, 25% de cada tipo. Si encontramos esta frecuencia podemos inferir que las parejas gnicas segregan independientemente. b) Recombinacin intracromosmica. Se produce por entrecruzamiento. Esto ocurre entre cualquiera de dos cromtides no hermanas. Esto no sucede en todas las meiosis, pero cuando lo hace, la mitad de esos productos son recombinantes y la otra mitad sern gametos tipo progenitor. Las meiosis sin entrecruzamiento entre dos loci producirn slo genotipos parentales para esas parejas gnicas. La recombinacin intracromosmica se pone de manifiesto en la aparicin de una frecuencia de recombinacin menor al 50%. El ligamiento fsico entre las combinaciones gnicas parentales impide la libre distribucin de los genes (distribucin independiente), la que genera una frecuencia de recombinacin del 50%. Dada una descendencia, cmo podemos descifrar qu tipo de recombinacin ha ocurrido ? La respuesta est en LA FRECUENCIA DE RECOMBINANTES. que producen

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Deteccin del Ligamiento

Para detectar la diferencia entre la transmisin independiente y el ligamiento de los genes el mtodo ms sencillo consiste en comparar el nmero de individuos de las clases fenotpicas observadas con los esperados segn la transmisin independiente y probar la desviacin de esos dos valores mediante una prueba de chi-cuadrado. Por ejemplo: un apareamiento entre un heterocigoto AaBb y un homocigoto doble recesivo aabb dara lugar a cuatro clases de descendientes: AaBb, Aabb, aaBb y aabb. Si los dos pares de genes (A,a) y (B,b) se distribuyeran independientemente, las cuatro clases se presentaran en la misma proporcin de y con una prueba de X2 se detectaran las desviaciones de dichas proporciones. Sin embargo, el ligamiento entre los genes no es la nica causa que pueda afectar las frecuencias de determinadas clases. Las diferencias de viabilidad gamtica o cigtica pueden alterar las proporciones de los pares de genes individuales de modo que, el cruzamiento Aa x aa puede no producir la proporcin esperada: Aa : aa. Para distinguir estos efectos con X2 se debe probar que los genes individualmente segregan en forma mendeliana, como cabra esperar. Para eso deben calcularse tres valores de chi-cuadrado cuando consideramos dos genes ligados: uno para comprobar la segregacin conjunta (distribucin independiente), y dos test para comprobar la segregacin de cada uno de los pares de genes individualmente. Ejemplo10: Considere un apareamiento entre AABB x aabb, a la F 1 AaBb se le hace cruza de prueba. Supongamos que las cuatro clases fenotpicas se presentan con los siguientes valores: AaBb Aabb aaBb aabb Total Observados 140 38 32 150 360 Para comprobar si corresponde a un caso de ligamiento o a una distribucin independiente de dos genes, realizamos un X2 conjunto: Ht: Hubo distribucin independiente, por lo tanto, de la cruza de prueba a un dihbrido se espera de cada clase fenotpica.

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Obs. Esp. (O-E)2/E

AaBb 140 90 (50)2/90

Aabb 38 90 (-52)2/90

aaBb 32 90 (-58)2/90

aabb 150 90

Total 360 360

1) Chi-cuadrado conjunto Grados de libertad (gl): Clases -1 4-1=3 X2t (3, 0.05)= 7,81

(60)2/90 X2cal.= 135,19

Al comparar el valor de X2 cuadrado calculado con el valor de tabla (para tres grados de libertad y un nivel de significacin del 5%) observamos que las desviaciones son altamente significativas. Cul es la causa responsable de esta discrepancia?... Se calcula X para el locus (A,a), y se observan los siguientes resultados: Ht: Hubo segregacin normal, por lo tanto de la cruza de prueba a un heterocigota se espera de cada clase fenotpica. Obs. Esp. (O-E)2/E Aa 140+38 = 178 180 aa 32 +150=182 180 Total 360 360 X2cal.= 0.044
2

2) Chi-cuadrado para comprobar anormalidades en la segregacin en ambos locus

(178-180)2/180 (182-180)2/180 Y para el locus (B,b)

Locus A Grados de libertad (gl): Clases -1 (gl)= 2-1 =1 X2t (1, 0.05)= 3,94

Ht: Hubo segregacin normal, por lo tanto de la cruza de prueba a un heterocigota se espera de cada clase fenotpica. Aa 140+32 = 172 180 (172-180)2/180 aa 38 +150=188 180 (188-180)2/180 Total 360 360 X2cal.= 0.70

Obs. Esp. (O-E)2/E

En el primer test realizado para comprobar la segregacin conjunta se observa que las discrepancias entre lo observado y lo esperado son altamente significativas, entonces debe rechazarse la hiptesis de trabajo; es decir, los genes no se encontraban en distintos cromosomas y por lo tanto los genes no se distribuyeron independientemente. Al realizar los otros dos test para comprobar la segregacin de cada loci en forma independiente, los resultados indican concordancia entre lo esperado y lo observado, es decir, se hallan dentro de los lmites de una desviacin normalmente esperada. Al rechazar la hiptesis de la existencia de distribucin independiente y poder asegurar que no hubo distorcin en la segregacin de los alelos de los dos loci podemos atribuir los resultados observados al ligamiento. Por ende, el locus A y el locus B se encuentran en el mismo cromosoma.

Locus B Grados de libertad (gl): Clases -1 (gl)= 2-1 =1 X2t (1, 0.05)= 3,94

Conclusin

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Si los locus A y B se encuentran en el mismo cromosoma: Cul es la relacin de enlace en el dihbrido? Para contestar esta pregunta se debe considerar lo siguiente:

1) al ser una cruza de prueba, el individuo ab/ab (el probador) slo producir gametas ab, por lo tanto las variaciones de la descencia son debidas al las diferencias en las gametas del dihibrido. 2) qu descendencia se encuentra en mayor proporcin. En nuestro ejemplo los descendientes de tipo AB/ab (140) y ab/ab (150). Esto indica que las gametas Ab y ab, que fueron aportadas por el progenitor probado, se encuentran en mayor proporcin, por lo tanto son de tipo progenitor y presentan la combinacin original del progenitor heterocigota ya que provienen de las cromtides que no sufrieron recombinacin. Utilizando la notacin para ligamiento: Progenitores: Gametas: AB/ab AB y ab Ab y aB T.P. Descendencia: T.R. AB/ab Tipo Progenitor Ab/ab Tipo Recombinante AB/ab Tipo Recombinante Ab/ab Tipo Progenitor x ab/ab ab

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Frecuencia de Recombinacin
frecuencia de recombinacin

A la proporcin en que se forman las nuevas combinaciones de dos pares de genes, en comparacin a la suma de todas las combinaciones, se la conoce como frecuencia de entrecruzamiento o de recombinacin. Volviendo a los datos del ejemplo 10: AB/ab Ab/ab aB/ab ab/ab Total Observados 140 38 32 150 360 Del total, 70 (38+32) son combinaciones nuevas, lo que representa una frecuencia de recombinacin de 0,19 o 19%. La frecuencia de recombinacin se define como: Frecuencia de recombinacin = y se expresa como:
% de recombinacion = ( frecuencia de recombinacion ) 100

Total de recombinantes Total de descendientes

La frecuencia de recombinacin entre los genes aumenta o disminuye a medida que aumenta o disminuye la distancia de los genes y puede ser utilizado para construir mapas gnicos. Es decir, existe una relacin entre la frecuencia de recombinacin entre los genes ligados y la distancia entre los mismos en el cromosoma. De acuerdo con lo anterior, por definicin, un uno por ciento de recombinacin es igual a una unidad de mapa (u.m.), tambin denominada centimorgan (cM). A 19 cM Los valores de recombinacin pueden variar desde 0 a 50 por ciento con distintos conjuntos de pares de genes. El lmite inferior representa la ausencia de recombinacin entre dos pares de genes, mientras que el lmite superior representa un grado de recombinacin igual a la transmisin independiente. 0% < frecuencia de recombinacin > 50% B

unidades de mapa o centimorgan

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Si entre dos genes existe ms del 50% de recombinacin, es necesario utilizar otro mtodo para calcular las distancias y el orden de los genes. Este mtodo se denomina cruza de tres puntos y consiste en adicionar un tercer gen obteniendo diferentes productos meiticos o gametas. La figura siguiente muestra los distintos tipos de gametas posibles a partir de un trihbrido en fase de acoplamiento: Zona I A B Zona II C

por qu el porcentaje de recombinacin nunca es del 100%?

A a

B b

C c

A a

B b

C c

A a

B b

C c

A a

B b

C c

Sin Recombinacin Gametas Tipo Progenitor ABC abc

Con Recombinacin Gametas Recombinantes en: Zona I Zona II Zona I y II Abc aBC Abc aBC AbC aBc

Resumiendo: A partir de un individuo trihbrido con genes ligados se obtienen los siguientes tipos de gametas:

1) 2 Gametas tipo progenitor: con la combinacin original de los

genes del progenitor.

Zona I y Zona II surgen de trazar una lnea imaginaria a partir del marcador o gen central. Asi: A la izquierda : Zona I, a la derecha Zona II.

2) 2 Gametas tipo recombinantes en Zona I: son las resultantes de

un entrecruzamiento a la izquierda del marcador o gen central.

3) 2 Gametas tipo recombinantes en Zona II: como producto de un

entrecruzamiento a la derecha del marcador o gen central.

4) 2 Gametas tipo doble recombinantes: son las que resultan del

entrecuzamiento simultneo en Zona I y Zona II.

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Ejemplo 11: Utilizando los datos siguientes calcule: Genotipos Observados ABC/abc 390 abc/abc 374 Abc/abc 27 aBC/abc 30 ABc/abc 81 abC/abc 85 AbC/abc 5 aBc/abc 8 Total 1000 a) la frecuencia de recombinacin de los genes. b) el orden en el mapa entre los tres genes. c) Cules son las distintas clases de las descendencia?

Anlisis de un ligamiento de tres puntos

Primero se debe determinar cul es el genotipo de los Paso 1 progenitores. Para esto se tiene como dato que es una cruza de prueba, Determinar el genotipo de por lo tanto el genotipo de el progenitor probador es abc/abc. Para los padres determinar el genotipo del otro progenitor debemos considerar las clases ms numerosas de la descendencia llamadas de tipo progenitor y que se corresponden con las gametas de tipo progenitor que siempre se encuentran en mayor proporcin. Descendencia ABC/abc T.P. abc/abc Observados 390 374 Gametas del dihbrido de las que provienen ABC T.P. abc

En consecuencia las gametas ABC y abc son copia de los cromosomas del dihbrido cuyo genotipo sera: ABC/abc. Una vez determinado el genotipo de los progenitores, es necesario saber el orden real de los genes en el cromosoma, o sea, cul Paso 2 es el gen central. Para ello se debe recurrir a las clases doble Determinar el oden de los recombinantes que provienen de las gametas que son producto de una genes doble recombinacin (tanto en zona I como en zona II). Estas gametas pueden identificarse pues son las que aparecen en menor proporcin en el conjunto de gametas. Descendencia AbC/abc T.R aBc/abc Observados 5 8 Gametas del dihbrido de las que provienen AbC T.R aBc

Si se considera que al realizarse un doble entrecruzamiento, se intercambian el alelo central las cromtides no hermanas, al reconstruirlo debemos obtener la combinacin original, lo que confirma el alelo central y por lo tanto el orden real de los alelos en el cromosoma.

51

A a

b B

C c

A a

B b

C c

Una vez determinado el orden se puede calcular la frecuencia Paso3 de recombinacin entre los tres alelos, o sea, la proporcin de los Clculo de la frecuencia recombinantes observados para cada par de genes respecto al nmero de recombinacin total de individuos de la descendencia: Genotipos Observados recombinantes Abc/abc R. Zona I 27 (27+30)/1000= aBC/abc 30 5,7% ABc/abc R. Zona II 81 (81+85)/1000= abC/abc 85 16,7% AbC/abc D.R. 5 (5+8)/1000= aBc/abc 8 1,3% Total 1000 Clculo de la frecuencia de recombinacin entre a y b. Este valor se obtiene de considerar el porcentaje de recombinantes en zona I ms los dobles recombinantes, ya que estos incluyen entrecruzamientos en esta zona. % recombinacin entre a y b= % de recombinacin en zona I + % D.R. % recombinacin entre a y b= 5,7 + 1,3 % recombinacin entre a y b= 7% Clculo de la frecuencia de recombinacin entre b y c.

Este valor se obtiene de considerar el porcentaje de recombinantes en zona II ms los dobles recombinantes, ya que estos incluyen entrecruzamientos en esta zona. % recombinacin entre b y c= % de recombinacin en zona II + % D.R. % recombinacin entre b y c= 16,7 + 1,3 % recombinacin entre b y c= 18% Clculo de la frecuencia de recombinacin entre a y c. 5,7 + 16,7 + 2(1,3)= 25% % recombinacin entre a y c= 25 % Ntese que para calcular la recombinacin entre los genes extremos a la suma de los porcentajes de recombinacin en zona I y en zona II se agrega el doble de la frecuencia de los doble recombinantes (2,6%). Al aadirlo al 22,4 por ciento resulta un total de 25% para a-c, que es la suma exacta de las distancias a-b (7) y b-c (18).

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Las distancias gnicas se obtienen a partir del porcentaje de Paso 4 recombinacin, siendo un uno por ciento de recombinacin igual a un Determinar las distancia centiMorgan (cM) o una unidad de mapa (u.m.) gnicas Clculo de la distancia entre a y b= % de recombinacin entre a y b= 7% 7 u.m. Clculo de la distancia entre b y c= % de recombinacin entre b y c = 18% 18 u.m. Clculo de la distancia entre a y c= % de recombinacin entre a y c= 25% 25 u.m.

a 7 u.m.

b 18 u.m.

Paso 5 Dibujar el mapa

COINCIDENCIA E INTERFERENCIA
La baja frecuencia de los dobles entrecruzamientos indica la dificultad que se presenta para separar en un entrecruzamiento el gen central de los genes que se hallan a ambos lados del mismo. Esta dificultad aumenta ya que los dobles entrecruzamientos se producen por lo general con una frecuencia incluso menor a la esperada. Si el entrecruzamiento de una pareja de loci no afectase al entrecruzamiento de una pareja vecina, se espera que los dobles entrecruzamientos se presenten con una frecuencia igual al producto de ambas frecuencias (probabilidad combinada de dos sucesos independientes). Sin embargo la frecuencia observada siempre es menor que la esperada. Aparentemente el entrecruzamiento en una regin interfiere con el entrecruzamiento en una regin vecina. Este fenmeno se designa como interferencia (I). La medida de la interferencia se calcula a partir del coeficiente de coincidencia (c.c.) que es la relacin entre los dobles entrecruzamientos observados y los dobles entrecruzamientos esperados. I = 1 c.c. = 1 Dobles recombinantes observados Dobles recombinantes esperados coincidencia interferencia

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PROBLEMAS RESUELTOS:
No hay problemas resueltos, hay problemas ms o menos resueltos

1) En la meiosis femenina de Drosophila melanogaster la fraccin de recombinacin entre los loci

ligados A y B es 0,4. Se cruza un heterocigoto Ab/aB con un homocigoto recesivo ab/ab. Indique la descendencia posible de este apareamiento. Solucin: El problema indica la existencia de ligamiento entre los dos loci. Adems, al indicar que la recombinacin es de 0,4 tambin nos dice un porcentaje de recombinacin del 40 % y, por lo tanto, antre A y B hay 40 u.m. Al realizar el apareamiento: P) Ab/aB A a b B x ab/ab a a b b En que proporcin se encuentran las gametas del progenitor dihbido? El porcentaje de recombinacin es la relacin que hay entre los recombinantes y el total de la descendencia. Al tener ese dato se sabe que el 40% de las gametas producidas son de tipo recombinantes, 20% de cada tipo. El progenitor dihbrido se encuentra en fase de repulsin

G)

Tipo Progenitor 30% Ab 30% aB Tipo recombinantes 20% AB 20% ab

Todas ab

Las gametas de tipo progenitor, por lo tanto, constituyen el 60%, 30% de cada una. Por qu mitad de cada tipo? Porque la separacin de los homlogos en la meiosis se realiza y por lo tanto las cromtides migran con su carga gnica ecuacionalmente; ms cuando consideramos genes ligados la frecuencia depender de la distancia de los mismos. De la unin de las gametas de ambos progenitores obtenemos la descendencia: Respuesta: descendencia de tipo progenitor: 30% Ab/ab y 30% aB/ab y descendencia de tipo recombinante: 20% AB/ab y 20% ab/ab. Los trminos tipo progenitor y tipo recombinante se utilizan en fase haploide (gametas) y en fases diploides (genotipo y fenotipos).

2) En una especie animal hay tres caracteres recesivos respecto al normal: albino (a), sin cola (s) y
enano (e). Los tres loci que los determinan estn situados en el mismo cromosoma. Se realizaron cruces de prueba a individuos heterocigotos para estos tres genes y la progenie (1000 individuos) fue clasificada como : 5 enanos; 6 albinos, sin cola; 69 normales; 67 albinos, enanos,sin cola; 382 enanos, sin cola; 379 albinos; 48 sin cola; y 44 albinos enanos. Explique estos resultados. Solucin: Para explicar los resultados se debe, al saber que estn ligados; determinar la frecuencia de recombinacin de los genes, el orden que presentan los genes en el cromosoma y cules son 54

las distintas clases de las descendencia. Para ello se siguen los pasos indicados en la parte terica basados en la descendencia. Paso 1: Determinar los genotipos de los progenitores Los fenotipos ms abundantes corresponden a los tipo progenitor: los 382 enanos, sin cola y los 379 albinos. Al saber que es una cruza de prueba (el progenitor probador, triple recesivo, slo aportar gametas de tipo ase ) y teniendo en cuenta los smbolos indicados se puede escribir los genotipos de estos individuos: Fenotipos Observados Genotipos 382 enanos, sin cola Ase/ase 379 albinos aSE/ase De esto se desprende que las gametas, aportadas por el progenitor trihbrido, de tipo progenitor fueron Ase y aSE. El genotipo del progenitor, por lo tanto, es Ase/aSE, ya que esas gametas estn indicando qu alelos se encuentran en cada uno de los homlogos del progenitor sometido a la cruza de prueba. Recordar que este paso no nos indica cul es el locus central. Para ello debemos pasar al segundo paso. Paso 2: Determinar el orden de los genes Para determinar el orden de los genes es necesario conocer los genotipos de los progenitores y los genotipos de los doble recombinantes, que como ya fue mencionado son los que se encuentran en menor proporcin en el conjunto de la descendencia. Fenotipos Observados Genotipos 5 enanos ASe/ase 6 albinos sin cola asE/ase En el doble entrecruzamiento se intercambia el alelo central entre las cromtides no hermanas, al reconstruirlo se debe obtener la combinacin original, lo que confirma el alelo central y por lo tanto el orden real de los cromosomas. A a S s e E A a s S e E

Si hubiese considerado como central al locus e, por ejemplo, la situacin hubiera sido: A a e E S s A a E e S s

Observamos que al intentar reconstruir el genotipo del progenitor, se obtiene otro que no se corresponde con el que considerablemente deba ser, de acuerdo a la descendencia que est en mayor proporcin. Por lo tanto el orden correcto es el que establece al locus s como central.

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Paso 3: Determinar las frecuencias gnicas: Fenotipos Normal Albino, enano,sin cola Sin cola Albino, enano Enano Albino, sin cola Genotipos Observados recombinantes ASE/ase 69 R. Zona I ase/ase 67 AsE/ase aSe/ase Ase/ase asE/ase R. Zona II D.R. 48 44 5 6

(69+67)/1000= 13,6% (48+44)/1000= 9,2% (5+6)/1000= 1,1%

% de recombinacin entre a y s: 13,6 + 1,1= 14,7% % de recombinacin entre s y e: 9,2 + 1,1 = 10,3% % de recombinacin entre a y : 13,6 + 9,2 + 2(1,1)= 25% Paso 4: Determinar las distancias gnicas Clculo de la distancia entre a y s= % de recombinacin entre a y s=14,7% 14,7 u.m. Clculo de la distancia entre s y e= % de recombinacin entre s y e = 10,3% 10,3 u.m. Clculo de la distancia entre a y e= % de recombinacin entre a y e= 25% 25 u.m. Paso 5: Dibujar el mapa a 7 u.m. s 18 u.m. e

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