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Traba lho Pr tico De Ima giolo gia

NMR

MIEB M 2008/09

Introduo terica Ressonncia Ma gntica Nuclear


A RMN pode ser observada em qualquer istopo que tenha spin total (I) superior a zero. O istopo mais usado o Hidrognio, por ter alta sensibilidade e estar em grande abundncia nos tecidos vivos, que em geral so os que queremos observar. Numa amostra qualquer cada tomo caracterizado por um spin nuclear. Na ausncia de campo magntico o alinhamento dos spins aleatrio, pelo que a magnetizao total nula. Ao aplicarmos um campo magntico externo vai haver um alinhamento dos vectores de spin nuclear. Assim, alm de o spin nuclear ter um movimento de rotao em torno do seu prprio eixo tem ainda um movimento de precesso em torno da direco do campo magntico. A sua velocidade angular () vai ser dada pela equao de Larmor:

#=

"B0 2!

Em que B0 a intensidade do campo magntico e a razo giromagntica (depende da natureza do tomo utilizado). Na RMN aplica-se um pulso de radiofrequncia (de curta durao e alta potncia), gerando assim um segundo campo magntico caracterizado por uma frequncia igual frequncia de precesso ocorre ento o fenmeno de ressonncia. Fre e In du cti o n De cay ( FID): Ao aplicar um pulso de radiofrequncia (RF) de 90 os spins nucleares vo ento absorver energia, ficando excitados. Aps este pulso os spins excitados voltam ao seu estado inicial, causando um sinal que se denomina Free Induction Decay (FID), que traduz a variao de amplitude do sinal de RMN com o tempo.

A amplitude do FID diminui com o tempo por causa do processo de relaxamento, que o mecanismo pelo qual a magnetizao vai voltar lentamente ao estado inicial de equilbrio. A rapidez com que os spins nucleares voltam ao estado de equilbrio depende do tecido a que pertencem. Spi n E co: Se em vez de um nico pulso de RF forem aplicados dois pulsos, um de 90 e um de 180, separados por um intervalo de tempo , vamos obter um FID aps o primeiro pulso e um eco aps o segundo, a um tempo igual separao entre os pulsos.

Tanto a intensidade do FID como a intensidade do eco vo ser proporcionais concentrao de Hidrognio na amostra.

Tempos de Relaxao:
No estado de equilbrio o vector de magnetizao total aponta na direco do campo magntico externo B0 e no h nenhuma componente de magnetizao transversal. No processo de relaxamento (retorno ao estado de equilbrio) podemos distinguir dois tipos de relaxamento: relaxamento longitudinal e relaxamento transversal, que so descritos pelas constantes de tempo de relaxao T1 e T2, respectivamente. O tempo de relaxao T1, tambm chamado relaxao longitudinal, relaxao trmica ou relaxao spin-rede, a taxa de recobro da magnetizao longitudinal (ML). Quando temos um T1 curto a relaxao rpida; pelo contrrio, quando T1 longo a relaxao lenta. O tempo de relaxao T2, tambm chamado relaxao transversal ou relaxao spin-spin, resulta da perda de coerncia de fase dos protes que rodam no plano transversal por repulso entre eles. O tempo de relaxao T2 sempre muito inferior ao tempo de relaxao T1, ou seja, a magnetizao transversal decresce mais rapidamente para o valor inicial do que a magnetizao longitudinal.

Experincia 1:
Espectrometria Free Induction Decay e Spin Echo 1 Parte: Obter FID off-ressonance
1. Abrir o programa Spi, localizado na directoria C:\PS 15\winner 51; 2. Definir, na barra de menus, o modo spectroscopy;

3. No menu Spectrometer, escolher lock on; neste passo o programa vai fixar a
frequncia de trabalho, o que pode demorar alguns minutos; quando o locking da frequncia estiver concluido essa informao aparece na parte inferior da pgina ;

4. Colocar a amostra (neste caso coloque o tubo de glicerina); 5. Seleccionar o mtodo 1p_x (Programmer -> Method); este define um nico pulso de radiofrequncia (RF) direco positiva do eixo dos xx; 6. Seleccione um dos canais, I (real) ou Q (imaginrio); 7. Altere os valores iniciais de modo a obter um sinal forte e com bastantes oscilaes visveis, tendo em conta que: DC Level : Compensa o valor offset do sinal de MRN; Gain: Ganho do amplificador de RF; deve ser tal que se obtenha uma Time Constant: varia consoante a amostra; para a Glicerina usa-se 5

amplitude mxima visvel do FID s, enquanto para amostras slidas devemos usar 1s; Acc: Nmero de acumulaes; quanto maior este nmero melhor a NOP: nmero de pontos adquiridos; Dwell Time: Tempo entre os pontos amostrados; razo sinal / rudo;

8. Grave a configurao mais favorvel (File -> Save Setup as); 9. Altere o comprimento do pulso de radiofrequncia e determine o comprimento que corresponde amplitude mxima de FID; altere esse comprimento e verifique o que acontece amplitude do FID, em particular quando o aumenta para o dobro e para o triplo; tire concluses.

10. Voltando ao mtodo 1p_x,

adquira o sinal na pagina de

Acquisition, premindo F6 ou o icon no canto superior direito; A obtenha o sinal com pelo menos 16 acumulaes, de modo a diminuir a componente de rudo no sinal; 11. Grave o sinal obtido; 12. Premindo F7 ou o icon que se encontra no canto superior direito da pgina de aquisio aparece a zona de processamento do sinal. A obtenha o sinal na primeira imagem (File -> Acq Data -> Load Data); 13. Obtenha a transformada de Fourier do sinal; 14. Faa a correco de fase de modo a obter um pico perfeito; 15. Obtenha e registe os valores da largura a meia altura e do amplitude pico a pico da transformada de Fourier; 16. Repita este procedimento (a partir do ponto nove) para as outras amostras (gua destilada, gua dopada com CuSO4, borracha, etanol, madeira e delrin), sem esquecer de alterar as constantes na pagina inicial. Compare estes resultados com base no nmero de protes de cada amostra

2 Parte: Obter FID on-ressonance 1. Altere o valor da frequncia do pulso de RF (Magnet Stabilizer -> f0) de modo a obter um decaimento exponencial puro; ressonncia dos ncleos; 2. Grave o setup; 3. Altere o mtodo escolhido anteriormente: Mtodo 1p_-x; Mtodo 1p_y Mtodo 1p_-y Isto ocorre quando a frequncia do pulso de RF exactamente igual frequncia de

Verifique de que modo a forma do FID alterada; conclua o motivo, baseando-se na direco do campo magntico B

3 Parte: Obter Spin-Eco


1. Obtenha a configurao que determinou na 1 parte do trabalho (File -> Open Setup); 2. Registe o comprimento do pulso de RF; 3. Altere o mtodo para 2p_x_D; aparecem ento dois pulsos de RF: o primeiro /2 e o segundo ; o comprimento do primeiro pulso deve ser o determinado anteriormente, e o do segundo deve ser o dobro deste; 4. Altere as condies de configurao de modo a conseguir visualizar o FID e o eco e ainda uma linha de base longa; 5. Altere a frequncia de modo a obter um spin eco em ressonncia 6. Grave a configurao mais favorvel

Explique a forma do sinal obtido.

Experincia 2:
Tempos de relaxao T1, T2* e T2 1 Parte: Obter T1 1.1 Obter T1 por IR (Inversion Recovery)
1. Abra o setup do FID em ressonncia da glicerina; 2. Registe o valor do comprimento do pulso de RF (corresponde a um pulso /2); 3. Seleccione o mtodo 2P_X_VD (Programmer -> Method); 4. Altere os parmetros do pulso: Comprimento do primeiro pulso: Corresponde a um pulso , logo deve ser o

dobro do registado no ponto 2; pulso; 6. Na pgina de aquisio adquira o sinal com pelo menos 8 acumulaes e insira um ficheiro VTD (variable time delay); este depende da amostra em uso: Glicerina: T1_16g.ttb gua destilada e etanol: T1_16e.ttb gua dopada com CuSO4: T1_water and Cu.ttb Borracha: T1_16r.ttb Comprimento do segundo pulso: Corresponde a um pulso /2; Atraso (delay time): 5 ms; Tempo de repetio (TR): 1 s

5. Em Programmer -> Trig seleccione P2; isto permite visualizar o sinal aps o segundo

7. Grave os dados adquiridos; 8. Obtenha os dados anteriores na pagina de processamento; 9. Prima o boto e coloque um marcador no inicio do FID; ;

10. Obtenha os dados anteriores carregando no boto 11. Com estes dados obtenha T1 por IR (

); o que o programa faz neste passo

fazer a regresso linear da curva obtida possvel determinar T1 atravs do tempo de atraso que provoca um FID nulo aps o segundo pulso;

12. Repita os passos anteriores para gua destilada, etanol, gua dopada com CuSO4
e borracha, tendo em ateno que pode ser necessrio alterar alguns parmetros na pgina de setup

1.2 Obter T1 por Saturao


1. Abra o setup do FID em ressonncia da glicerina; 2. Substitua a amostra d glicerina pela amostra da gua destilada; 3. Altere o mtodo (Programmer -> Method -> Sat); 4. Ajuste o parmetro de atraso para 100 ms; observa-se ento um linha recta, que se deve saturao do spin; 5. Ajuste o valor DC para que a recta esteja sobre o eixo; 6. Na pgina de aquisio adquira o sinal com pelo menos 4 acumulaes e com o ficheiro VTD T1_dist water.ttb; 7. Na pgina de processamento extraia os pontos, e calcule T1 por saturao ( );

8. Compare o resultado com o obtido por IR

2 Parte: Obter T2*


1. Abra o setup do FID fora de ressonncia da glicerina; 2. Seleccione os dois canais, I e Q; 3. Na pgina de Aquisio adquira o sinal com pelos menos 16 acumulaes; 4. Na pgina de processamento obtenha os dados anteriores e faa a transformada de Fourier do sinal; 5. Obtenha a largura a meia altura (l); 6. Calcule o tempo de relaxao T2* atravs da expresso:

T2 =

1 !l

3 Parte: Obter T2 3.1 Manualmente


1. Abra o setup do spin-eco em ressonncia da glicerina; 2. Altere o tempo de atraso para o mnimo, de modo a obter um eco sem distoro; 3. Altere as condies de modo a observar apenas o eco (Programmer -> Trig -> P2); 4. Registe o tempo de atraso e a amplitude do eco; 5. Aumente o tempo de atraso e observe a diminuio da amplitude do eco, registando ambos os valores; 6. Calcule o valor de T2 atravs da expresso:

A(t D ) = A0 * e

2t D T2

(A amplitude do eco decai exponencialmente com o aumento do tempo de atraso)

3.2 Pelo mtodo de Carr-Purcell


1. Abra o setup do FID em ressonncia da glicerina; 2. Altere o mtodo: Programmer -> Method -> CP_25; 3. Ajuste os diferentes parmetros para conseguir visualizar um nmero razovel de ecos; 4. Na pagina de Aquisio obtenha o sinal com pelo menos 16 acumulaes; 5. Na pgina de Processamento marque o ultimo eco observvel ( prima o boto todos os pontos; 6. Verifique se os marcadores aparecem sobre os ecos; 7. Obtenha o valor de T2 pelo mtodo Carr-Purcell carregando no boto ) e depois

, dizendo depois o nmero de ecos visveis, de modo a extrair

3.3 Pelo mtodo de Carr-Purcell-Meiboom_Gil


1. Abra o setup do FID em ressonncia da glicerina; 2. Altere o mtodo: Programmer -> Method -> CPMG_25; 3. Ajuste os diferentes parmetros para conseguir visualizar os 25 ecos produzidos; 4. Na pagina de Aquisio obtenha o sinal com pelo menos 16 acumulaes; 5. Na pgina de Processamento extraia os pontos ;

6. Obtenha o valor de T2 pelo mtodo Carr-Purcell-Meiboom_Gil carregando no


boto