Analytic A

Revista Analytica
Fevereiro/Maro 2011

N 51
Analytica
A revista da instrumentao
e controle de qualidade
www.revistaanalytica.com.br
04
Em meio a tantas leis, resolues e portarias que surgem a cada instante, imprescindvel
que as indstrias mantenham a rea jurdica em dia. Assim, a partir dessa edio, traremos na
seo Analytica Legal, a palavra de especialistas da rea fornecendo orientaes jurdicas. Nessa
primeira edio, a advogada especializada em Direito Ambiental, Teodora Tavares, fala sobre o
gerenciamento de resduos slidos gerados pelos laboratrios de anlises industriais diante da
atual poltica nacional referente ao assunto. Confra.
Antiga parceira da Revista Analytica, a Tedia Brazil ocupa pela segunda vez a nossa Capa,
dessa vez para mostrar a nova fase em que se encontra, aps total reformulao.Da identidade
visual s diretrizes corporativas, a empresa conta como foi esse processo e os objetivos e aspira-
es da equipe a partir de agora. Saiba mais na matria da Capa
Nos prximos meses, a Revista Analytica estar presente em diversos eventos pertinentes s
suas reas de atuao, levando novidades aos visitantes e interagindo com o pblico especiali-
zado. Em maio, durante os dias 24 e 26, acontecer a FCE Pharma e FCE Cosmetique, em So
Paulo. Convidamos todos para uma visita em nosso estande e a aproveitar as promoes exclu-
sivas. Para anotar na agenda! Outros eventos e cursos tambm esto na Agenda da edio.
Alm da presena em diversas feiras e eventos, a Analytica tambm tem acompanhado a evo-
luo e diversifcao dos meios de comunicao. Assim, para acompanh-los e, acima de tudo,
estreitar as relaes com leitores e parceiros, a revista tambm est com seus perfs nas redes
sociais Twitter (@RevAnalytica) e Facebook(/RevistaAnalytica). Acompanhe-nos e fque por dentro
rapidamente das novidades do universo das anlises industriais, curiosidades e peculiaridades do
mundo cientfco.
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Os editores
Diretor Executivo: Sylvain Kernbaum (11) 8357-9857 (revista@revistaanalytica.com.br)
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Departamento de Assinaturas: Daniela Faria (assinatura@revistaanalytica.com.br)
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Conselho Editorial:
Carla Utescher, Pesquisadora Cientfca e Chefe da Seo de Controle Microbiolgico do Servio
de Controle de Qualidade do I.Butantan - Cheila Gonalvez Moth, Prof. Titular da Escola
de Qumica da Universidade Federal do Rio de Janeiro - Elisabeth de Oliveira, Prof. Titular
IQ-USP - Fernando Mauro Lanas, Prof. Titular da Universidade de So Paulo e Fundador do
Grupo de Cromatografa (CROMA) do Instituto de Qumica de So Carlos - Helena Godoy,
FEA/Unicamp - Joaquim de Arajo Nbrega, Depto. de Qumica da Universidade Federal de
So Carlos - Marcos Eberlin, Prof. de Qumica da Unicamp, Vice-Presidente das Sociedade
Brasileira de Espectrometria de Massas e Sociedade Internacional de Espectrometria de Massas
- Margarete Okazaki, Pesquisadora Cientfca do Centro de Cincias e Qualidade de Alimentos
do Ital - Margareth Marques, U.S.Pharmacopeia - Maria Aparecida Carvalho de Medeiros,
Prof. Depto. de Saneamento Ambiental-CESET/UNICAMP - Marina Tavares, Prof. do Instituto
de Qumica da Universidade de So Paulo - Shirley Abrantes, Pesquisadora Titular em Sade
Pblica do INCQS da Fundao Oswaldo Cruz - Ubaldino Dantas, Diretor Presidente da OSCIP
Biotema, Cincia e Tecnologia, e Secretrio Executivo da Associao Brasileira de Agribusiness
Colaboraram nesta edio:
Alda M. M. B. Otoboni, Ana Cristina Monteiro Bernardes, Antonio Rogrio Fiorucci, Claudia
Dorta, Cleidiane Samara Murari, Danilo Vidotti, Denise Bassana Dias, Edemar Benedetti Filho,
Etenaldo Felipe Santiago, Scheilla Vitorino C. de Souza, Teodora Tavares
Impresso: Prol Grfca
Editorao: Omar Salomo (11) 9501-1145
Filiada Anatec
ANO IX - N 51
(Fev/Mar 2011)
Redao e administrao:
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Ed. Horsa I - cj. 2.315
CEP: 01311-940. So Paulo. SP
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Insc. Est.: 113.931.870.114
ISSN 1677-3055
A Revista Analytica uma publicao bimes-
tral da ESKALAB, com distribuio dirigida a
laboratrios analticos e de controle de qua-
lidade dos setores farmacutico, aliment-
cio, qumico, ambiental, minerao, mdico,
cosmtico, petroqumico e tintas. Os artigos
assinados so de responsabilidade de seus
autores e no representam, necessariamen-
te, a opinio da revista.
Edi tori al
Revista Analytica

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N 51
Revista Analytica

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N 51
04
Editorial/Expediente
08
Microbiologia em Foco: Uso de Conservantes em Produtos Farmacuticos
10
Notcias
18
Capa: tedia Brazil
22
Em Foco
42
Analytica Legal: A Poltica
Nacional de Resduos Slidos e
suas Implicaes para os
Laboratrios de Anlises Industriais
ARTIGOS
44
Extrao e Deteco de Cloroflas atravs de Anlise por Injeo em Fluxo:
Edemar Benedetti Filho, Antonio Rogrio Fiorucci, Denise Bassana Dias e
Etenaldo Felipe Santiago
48
Emprego do Soro de Leite Bovino e Bubalino para Produo de Biomassa
pela Levedura Kluyveromyces marxianus 229: Cleidiane Samara Murari,
Danilo Vidotti, Claudia Dorta e Alda M. M. B. Otoboni
66
Anlise Comparativa do Guia para Validao de Mtodos Analticos
Proposto pela Anvisa (Re No 899 De 2003) com o Documento Orientativo
do Inmetro e o Protocolo Internacional Harmonizado pela AOAC
Internacional, Iso e IuPAC: Ana Cristina Monteiro Bernardes e Scheilla
Vitorino C. de Souza
78
Estudo de Caso: Determinao do ndice de Acidez em E85 Bioetanol
Baseado na AStM D1613-06
80
Livraria
81
Agenda
82
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Sumri o
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N 51 07
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microbiologia
em foco
A contaminao microbiana dos produtos farma-
cuticos causa de inmeros problemas e perdas para
o consumidor e a prpria indstria com consequncias
para a sade publica.
A contaminao pode resultar em perda de potn-
cia do produto, bem como a deteriorao com altera-
es de aspecto, sabor e odor. Produtos estreis de
uso nico ou de mltiplas doses necessitam da adio
de substncias conservantes com o objetivo de prote-
ger o produto, impedindo ou retardando a entrada de
micro-organismos contaminantes do produto.
A sua funo reduzir ou manter o nmero de mi-
cro-organismos contaminantes para um nmero con-
siderado seguro para o consumidor e estvel ate o fim
da data de validade do produto.
USO DE CONSERVANTES EM
PRODUTOS FARMACUTICOS
Com relao aos produtos que sofrem uma este-
rilizao terminal, somente estes necessitam da adi-
o de conservantes quando indicados como de uso
mltiplo.
Como se sabe, os conservantes so necessrios
para manter a integridade do produto sem alterar as
suas caractersticas, devem possuir bom espectro de
ao antimicrobiano, serem estveis quimicamente e
atxicos e solveis nos veculos que se fizerem neces-
srios, alm de no alterar o sabor do produto, caso
sejam orais, no provocar reaes de hipersensibilida-
de. Deve ser possvel tambm a inativao ou neutrali-
zao da atividade antimicrobiana; quando necessrio,
testar a sua esterilidade ou durante a realizao dos
testes de desafio microbiano dos conservantes.
Abaixo, uma tabela com os conservantes mais comumente utilizados pela indstria.
conservante vantagens desvantagens aplicaes
cidos orgnicos -
parabenos, cido srbico,
cido benzoico
Apresenta atividade contra
bactrias e fungos
pH dependente Formulaes de uso oral e tpico
Alcois etlico,
isoproplico clorobutanol
bronopol
Apresenta amplo espectro
de ao contra bactrias e
fungos
Baixa penetrabilidade em
material orgnicos, volteis
Uso em injetveis, colrios
Biguanidas clorhexidina,
biguanida
Apresenta boa atividade
contra bactrias Gram
positivas
Insolveis em gua, so
inativados por matria
orgnica, possuem
atividade antifngica
limitada
Produtos oftlmicos e para
esterilizao de lentes de contato
Halognios hipoclorito,
ovidona-iodo, clorofrmio
Apresentam amplo
espectro de atividade
contra bactrias, fungos e
vrus
So instveis, corrosivos e
so inativados por material
orgnico
Uso limitado
Mercuriais orgnicos-
mercrio, prata-
Timerosal e acetato de fenil
mercrio
Apresentam amplo
espectro de atividade
Baixa atividade em material
orgnico
Colrios e lentes de contato
Fenlicos-cresol, cloro-
cresol, bisfenol
Boa atividade contra
bactrias Gram positivas e
fungos
Pouco solvel em gua, Ph
dependente
Utilizao em cremes
Compostos quaternrios
de amnio- cloreto de
benzalcnio, cetrimida
Espectro de ao baixo,
bactrias Gram positivas
Baixa atividade em pH
cido,
Uso em colrios e cremes e
pomadas
BCQ Consultoria e Qualidade: (11) 5539-6710
www.bcq.com.br
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notcias
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Eurofarma
adquire laboratrios
chilenos Volta S.A. e
Farmindustria S.A.
A Eurofarma, indstria farma-
cutica brasileira, anunciou em
dezembro passado a compra de
mais uma empresa latino-ameri-
cana a terceira aquisio inter-
nacional em cerca de dois anos.
Desta vez a operao aconte-
ceu no Chile, com o Laboratrio
Volta S.A. e a Farmindustria S.A.
Presente no mercado h 60 anos,
o Laboratrio Volta atua com foco
nas reas de Prescrio Mdica,
Genricos e produtos hospita-
lares, enquanto a Farmindustria
atua na fabricao para terceiros.
As aquisies da Volta e da
Farmindustria representam um
avano no processo de interna-
cionalizao da Eurofarma.
O mercado chileno o sexto
mais importante mercado farma-
cutico na Amrica Latina, repre-
sentando cerca de 3% do total,
com vendas superiores a US$
1 bilho. Dentro da estratgia
da Eurofarma, de cobrir 90% do
mercado latino-americano com
operao prpria, o Chile tem um
papel importante na consolidao
desta viso, afrma a diretora da
rea de Sustentabilidade & Novos
Negcios da Eurofarma, Maria Del
Pilar Muoz.
Com a negociao, feita inte-
gralmente com capital prprio, a
Eurofarma passou a ter 60% de
participao do laboratrio chile-
no. O negcio engloba duas em-
presas que pertencem ao mesmo
grupo e que conta com moder-
na infraestrutura tecnolgica de
produo.
12 Congresso Internacional
de Tintas: inscries vo at
31 de maio
Com destaque para as mais
recentes pesquisas e inovaes
relacionadas a processos, produ-
tos, matrias-primas, aplicaes,
tecnologias, cuidados ambientais,
entre outros, o 12 Congresso
Internacional de Tintas acontecer
de 21 a 23 de novembro, dentro da
ABRAFATI 2011.
Se voc tem interesse em fazer
parte de tudo isso, o comit cient-
fco receber os resumos dos tra-
balhos at 31 de maio, por meio do
site: www.abrafati2011.com.br
O documento deve ter entre 20
e 30 linhas, em portugus, ingls ou
espanhol, contendo ttulo do traba-
lho, nome do autor (e coautores),
nome do apresentador do trabalho
e contedo bsico resumido.

A Escola de Engenharia de So Carlos
(EESC) da USP criou um mtodo efcaz de identifcao e classifcao de castanhas do Brasil, conhecida como castanha-do-par.
O mtodo utiliza um equipamento capaz de identifcar amndoas (termo botnico para a semente da castanha) quebradas e intactas,
alm de distinguir de qual regio provm a castanha. O pesquisador Raphael Gava de Andrade, autor do estudo que desenvolveu
o equipamento, oferece vantagens como: modo higinico de seleo de castanhas, faz uma anlise mais produtiva e concisa e tem
baixo custo. Neste aspecto, Andrade estima que o valor do equipamento no passe dos R$ 2.000,00 para reproduo.
Segundo o pesquisador, boa parte das empresas do ramo no pas ainda faz manualmente o processo de identifcao. Hoje
existe um processo muito arcaico de seleo e quebra de castanhas. Com isso, h perdas numricas, problemas de higiene e outros
empecilhos. Pode-se dizer que no mtodo manual h em torno de 15% de margem de erro na seleo das castanhas, comenta.
Alm disso, o pesquisador enfatiza que a margem de erro no modo manual pode ser maior, se considerar as variaes
da condio humana, como cansao, o que no acontece com as mquinas. Na pesquisa, em compensao, o seu mtodo
com o equipamento conseguiu distinguir corretamente 95,7% das amndoas (entre quebradas e intactas)
Equipamento aumenta efcincia na classifcao de castanhas
Cmera envia imagens para o software do computador
Quanto identifcao da origem das castanhas, o equipamento
teve acerto de 84%. Andrade lembra que ainda no h sistema de ras-
treamento da origem delas e explica que a identifcao valoriza o pro-
duto na hora de export-lo.
O estudo fruto da dissertao de mestrado de Andrade para a
EESC, com a orientao do professor Valentin Obac Roda. O equipa-
mento criado para o processo de identifcao composto por uma
cmera de vdeo digital ligada a uma placa de captura de vdeo e um
computador, uma esteira por onde passam as castanhas e um sistema
de iluminao ambiente.
No momento, a empresa est elaborando uma verso mais ro-
busta do equipamento para uso industrial. Informaes pelo e-mail:
raphaelgava1@gmail.com
D
i
v
u
l
g
a
o

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O Instituto de Pesquisas
Tecnolgicas (IPT) inaugurou
em 16 de dezembro seu novo
Laboratrio de Metrologia de
Vazo de leo, vinculado ao-
Centro de Metrologia de Fluidos
(CMF) do Instituto. Para a sua
construo, o laboratrio re-
cebeu investimento total de R$
6,7 milhes, provenientes da
Petrobras, por meio de proje-
to da Rede de Metrologia; da
Secretaria de Desenvolvimento
do Estado de So Paulo; e da
FINEP, ligada ao Ministrio de
Cincia e Tecnologia.
Instalado em uma edificao
de 750 m dentro do campus do
IPT na Cidade Universitria, o
laboratrio foi projetado e cons-
trudo com a finalidade principal
de atender s necessidades da
indstria nacional do petrleo e
dos rgos reguladores do se-
tor na realizao de calibraes,
testes, ensaios comparativos,
pesquisas e desenvolvimentos
em diferentes tipos e modelos
de medidores e componentes de
sistemas de medio de vazo
de leo e de derivados.
A instalao laboratorial tem
a capacidade de atingir vazes
de at 1000 m/h e, por meio da
utilizao de um padro gravim-
trico de referncia e de padres
de trabalho em linha, pode forne-
cer baixas incertezas na medio
de volumes de produtos.
O laboratrio complementa-
do por uma unidade mvel com-
posta de um provador padro,
calibrado por meio dos padres
do laboratrio, transportado em
carreta especial e que possibi-
lita realizar testes e calibraes
de medidores de vazo com os
fluidos reais de processo e nos
prprios locais de operao.
O laboratrio ser fundamen-
tal para a indstria nacional do
petrleo uma vez que as medi-
es de volumes de produtos
so a base quantitativa para a
contabilizao das receitas, cus-
tos e lucros das empresas do
setor. Ser tambm importan-
te na garantia da exatido das
medies fiscais realizadas so-
bre a produo do petrleo em
territrio nacional e utilizadas na
contabilizao dosroyaltiese das
participaes especiais, alm de
proporcionar confiabilidade nas
atividades de tributao realiza-
das em todas as etapas do pro-
cesso de produo, transporte,
refino e distribuio do petrleo
e seus derivados.
Na mesma data, o IPT tam-
bm deu incio s obras civis de
seu novo prdio de Ensaios de
Estruturas Pesadas, que ir atu-
ar no suporte tcnico, principal-
mente Petrobras, para a explo-
rao e produo de petrleo do
pr-sal. O laboratrio realizar
ensaios estticos e dinmicos
de fadiga de longa durao em
estruturas e equipamentos de
grande porte, que so aplicados
em elementos de ancoragem de
plataformas offshore, risers, um-
bilicais, dutos flexveis e rgidos,
entre outros.
O prdio de bionanomanufa-
turatambm iniciou suas obras
civis para oferecer o mais mo-
derno centro de pesquisas dessa
rea no pas. Com investimento
de R$ 46 milhes, o prdio, de
oito mil m ser destinado ao es-
tudo de biotecnologia (desenvol-
vimento com organismos vivos),
tecnologia de partculas (micro-
encapsulao de componentes
qumicos e terapia medicinal,
como em cosmticos), micro-
manufatura de equipamentos e
metrologia.
IPT em processo de
ampliao de servios
notcias

Fevereiro/Maro 2011

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FCFRP produz patente
com o antimicrobiano
alecrim pimenta
O alecrim pimenta
(Lippiasidoides) uma planta
muito usada pela medicina po-
pular como antimicrobiano e an-
tifngico e que j foi tema de di-
versas pesquisas cientfcas que
comprovaram suas propriedades
benfcas. Toda essa riqueza na-
tural acaba de ser alvo de uma
patente na Faculdade de Cincias
Farmacuticas de Ribeiro Preto
(FCFRP) da USP. Pesquisadores
do Laboratrio de Pesquisa &
Desenvolvimento em Processos
Farmacuticos (LAPROFAR) pa-
tentearam dois produtos a base
de alecrim pimenta obtidos a par-
tir do encapsulamento do leo
essencial da planta em micropar-
tculas. Um dos produtos poder
ser usado em formulaes de me-
dicamentos e cosmticos, e o ou-
tro, na conservao de alimentos
processados.
O trabalho foi realizado pela
farmacutica Luciana Pinto
Fernandes. Ela explica que os
dois produtos so apresentados
em forma de p as micropart-
culas so visveis apenas pelo mi-
croscpio eletrnico. A diferena
entre eles a maneira como foram
obtidos e o direcionamento de
uso dado a cada um, devido aos
custos dos processos de obten-
o, conta a pesquisadora, que
estudou o alecrim pimenta duran-
te seu doutorado, apresentado
em janeiro de 2009 sob a orien-
tao do professor Wanderley
Pereira de Oliveira, coordenador
do LAPROFAR.
Os dois produtos foram pro-
duzidos atravs da tcnica de
secagem por atomizao (spray
drying), experimentando-se um
processo de encapsulamento f-
sico e outro qumico, sendo que
o primeiro apresentou um custo
inferior.
A patente abrange ainda um
terceiro produto, ainda mais bara-
to que os dois anteriores, obtido
a partir do extrato hidroalcolico
das folhas da planta.
O prximo passo da pes-
quisa testar as aplicaes dos
produtos. De acordo com a far-
macutica, alguns testes j fo-
ram realizados na FCFRP, entre
eles o do estudo envolvendo a
conservao do peixe contra
a Listeriamonocytogenes. Mas h
outros que ainda esto em anda-
mento como: anlises sensoriais
de alimentos submetidos aos dois
produtos como conservantes, e o
desenvolvimento e avaliao da
efccia de cremes dentais con-
tendo formulaes a base de ale-
crim pimenta.
Para saber mais sobre a pes-
quisa, contatar a pesquisadora
Luciana Pinto Fernandes no e-mail:
lucianapinto29@hotmail.com
Agncia USP
Pesquisadora do
ITAL reeleita
presidente da SBCTA
A pesquisadora do Instituto de
Tecnologia de Alimentos (ITAL/
SAA), Jane Gonalves Menegaldo,
foi reeleita presidente para o bi-
nio 2011/2012 da Sociedade
Brasileira de Cincia e Tencologia
de Alimentos (SBCTA),tradicional
entidade do setor que tem como
uma de suas fnalidades a promo-
o e estmulo a gerao de co-
nhecimentos na rea de cincia e
tecnologia de alimentos no pas.
Com um time formado por 17
novos diretores, entre os quais
os pesquisadores do ITAL,Paulo
Eduardo da Rocha Tavares e
Valdecir Luccas, e tambm a
pesquisadora Regina Kitagawa
Grizotto, da Agncia Paulista de
Tecnologia dos Agronegcios
(APTA), a presidente explica que
essa nova gesto ir buscar maior
interao com a indstria de ali-
mentos. A gesto passada teve
um forte vis acadmico, priori-
zando o contato e os trabalhos
com as universidades e institutos
de pesquisa. Agora, queremos
resgatar um dos fundamentos da
SBCTA e consolidar o nosso tra-
balho interagindo tambm com a
indstria, explica Jane.
Ela enfatiza que a nova gesto
da SBCTA, que busca a interao
com a indstria, ser muito ben-
fca para o ITAL, j que o Instituto
presta servios e desenvolve pes-
quisas para esse setor. Ser um
momento importante para o ITAL,
que poder consolidar ainda mais
seu nome entre as indstrias e
instituies. A minha misso,
como funcionria do ITAL, tam-
bm enaltecer o nome do ITAL
e engaj-lo em todo o trabalho da
SBCTA, explica.
Um dos grandes desafos des-
sa gesto ser a realizao do XVI
Congresso Mundial de Cincia
de Alimentos, que acontecer em
Salvador (BA), em 2012. Pela pri-
meira vez o evento ser realizado
em um pas da Amrica Latina,
e ter em conjunto a realizao
do XIII Congresso Brasileiro de
Cincia e Tecnologia de Alimentos
e XVII Seminrio Latino-americano
de Cincia e Tecnologia de
Alimentos,com expectativa de p-
blico de mais de 4 mil pessoas.
A SBCTA tem grande interli-
gao com o ITAL, j que ambas
as Instituies tm como funda-
dor o pesquisador e professor
Andr Tosello, tambm criador
da Faculdade de Engenharia de
Alimentos da Unicamp. As trs
Instituies so peas importan-
tes da histria da expanso da
indstria alimentcia no Brasil.

Fevereiro/Maro 2011

N 51
Abiquim tem nova gerente na rea de comrcio exterior
A engenheira Denise Mazzaro Naranjo passou a coordenar, a partir de 3
de janeiro, a rea de Assuntos de Comrcio Exterior da entidade. Ela forma-
da em engenharia qumica pela Fundao Armando lvares Penteado, com
ps-graduao em Economia Internacional e em Gesto Empresarial para a
Indstria Qumica. Denise trabalha na Abiquim h 24 anos como assessora
de Comrcio Exterior.
Denise suceder o economista Renato Endres, que ingressou na Abiquim
em 1969 e coordenou a rea de Comrcio Exterior da entidade por 22 anos.
Endres continuar colaborando com a Abiquim como consultor.
Uma rea de 80 mil m abrigar uma
planta-piloto que desenvolver a tecno-
logia de gaseifcao do bagao de cana-de-acar com diferentes mat-
rias-primas, como a palha de milho e o carvo.
A Secretaria de Desenvolvimento Econmico, Cincia e Tecnologia do
Estado de So Paulo anunciou a aprovao da primeira fase do projeto do
Centro de Desenvolvimento de Gaseifcao de Biomassa (CDGB) no futuro
Parque Tecnolgico de Piracicaba, localizado a 162 km da capital.
A gaseifcao vista como uma ferramenta de mitigao de emisso de
gases de efeito estufa. O gs de sntese do bagao de cana ser avaliado
em trs aplicaes: para a gerao de energia eltrica, produo de biocom-
bustvel lquido e como precursor de biopolmeros, os chamados monmeros
do plstico.
A atual fase do projeto est voltada para a produo do gs. Para os
primeiros cinco anos est prevista a produo de 500 kg/hora de gs de
biomassa. Alm do bagao, outras matrias-primas de biomassa sero pes-
quisadas. E, durante os trs anos de operao da planta, devero ser pro-
cessadas trs mil toneladas de biomassa.
Atualmente, o bagao usado para a produo de energia, mas seu
rendimento energtico de 20%. No novo processo, o rendimento poder
dobrar, chegando a 40%.
O grupo que apoia o projeto composto por quatro empresas - Oxiteno,
Petrobras, Brasken e Cosan - e quatro instituies - Laboratrio Nacional de
Cincia e Tecnologia do Bioetanol (CTBE), Centro de Tecnologia Canavieira
(CTC), Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz (ESALQ-USP) e IPT.
Cada empresa parceira dever contribuir com R$ 2 milhes durante a exe-
cuo do projeto.
O IPT, junto com o CTC e o CTBE, est articulando um consrcio com
empresas pblicas e privadas,
alm de institutos e universidades
do Brasil e do exterior.
A Esalq e a cidade de
Piracicaba, uma das maiores pro-
dutoras de cana-de-acar no
Brasil, contribuem com a infraes-
trutura necessria para a instala-
o da planta piloto.
Do IPT
Piracicaba ter Centro de
Gaseifcao de biomassa
notcias

Fevereiro/Maro 2011

N 51
Novozymes cresce no
mercado de produtos
agrobiollogicos
A dinamarquesa Novozymes
anunciou a aquisio da EMD/
Merck CropBioscience, da Merck
KGaA em negcio que comple-
menta os seus mercados e produ-
tos agrobiolgicos.
O portflio de produtos da EMD/
Merck concentra os potencializado-
res de crescimento biolgico e ino-
culantes de nitrognio basicamente
usados na produo de soja e legu-
mes, complementando assim o ne-
gcio existente de inoculantes de fos-
fato e de nitrognio da Novozymes.
Os inoculantes, tambm conhecidos
como biofertilizantes, so micro-
Os laborat-
rios Laborqumica
e Bioagri iniciaram
2011 unidos, atendendo demandas em todos os tipos
de matrizes com anlises de parmetros inorgnicos,
orgnicos, metais e
resduos com qua-
lidade e tecnologia
avanada.
A mais re-
cente conquista
dos Laboratrios
Bioagri, o laborat-
rio de anlises qu-
micas de Canoas
(RS) se junta es-
trutura tecnolgica
de ltima gerao do
grupo agregando qualidade, equipe especializada e
atendimento personalizado. O resultado dessa unio
a total agilidade na entrega dos resultados, segu-
rana e minimizao de erros no processo. Juntos,
os laboratrios oferecem um escopo completo aten-
dendo s legislaes estaduais e federais.
O investimento dos Laboratrios Bioagri na regio
sul faz parte dos recursos de dez milhes de reais
que sero destinados compra de equipamentos,
softwares e contratao e treinamento de profssio-
nais especializados, nos prximos cinco anos.
Laborqumica passa a
integrar Laboratrios
Bioagri no sul do pas
Grupo investe R$ 10 milhes
na regio sul nos prximos
cinco anos
Divulgao
organismos que podem aperfeioar
signifcativamente a capacidade das
plantas de fxar nitrognio e utilizar
fosfato, que so essenciais para seu
crescimento e, dessa forma, melho-
rar a efcincia dos fertilizantes qu-
micos. O mercado global de biofer-
tilizantes atualmente estimado em
cerca de US$ 250 milhes.
A Novozymes est no merca-
do de biofertilizantes em 2007,
com a aquisio da PhilomBios,
no Canad, e aumentou gradu-
almente suas atividades, mais
recentemente com a aquisio
da Turfal, no Brasil, em agosto
deste ano. As atividades da EMD/
Merck CropBioScience sero in-
tegradas pela empresa BioAg da
Novozymes, que mantm uma f-
brica no Paran.
quantiQ implementa
estratgia para expandir
participaoo mercado
No ano em que completa duas
dcadas, a quantiQ apresenta
uma srie de novidades, entre
elas a incorporao da distribui-
dora Unipar, e uma reviso de sua
estrutura, alm de alinhar-se com
o objetivo da Braskem de contri-
buir para a melhoria de competi-
tividade de toda cadeia produtiva
do setor qumico e petroqumico.
Ao agregar a Unipar, a quan-
tiQ tem como objetivo criar uma
empresa diversifcada que, alm
de maior em propores fsicas,
est ainda mais preparada para
atender ao mercado global. Agora
a empresa soma cinco Centros de
Distribuio, incluindo a aquisio
do CD de Simes Filho (BA), feita
em dezembro de 2010. Aumentam
tambm a sua cartela de clientes,
agora com cerca de 6.500 ativos,
alm de um portflio com mais 30
novos produtos (solventes hidro-
carbnicos, isoparafnas, resinas
hidrocarbnicas, poli-isobutenos
e especialidades), sendo alguns
exclusivos, o que representa um
aumento mdio de vendas de
7.000 toneladas/ms.
Essas novidades serviro para
impulsionar o plano de cresci-
mento estabelecido pela empresa
para os prximos cinco anos, que
inclui ainda atingir um crescimen-
to de 24% ao ano.
Twitter Dnica
Com a internet, o acesso s
informaes cada vez maior.
Nesse contexto, as redes sociais
tm papel cada vez mais im-
portante nas estratgias de co-
municao corporativa. Para se
aproximar dos consumidores, fun-
cionrios e pblico de interesse, a
Dnica est usando o Twitter para
analisar o comportamento dos
internautas e saber mais sobre o
mercado que atua.
Para Adriana B. Helmann, res-
ponsvel pelo departamento de
marketing A comunicao feita
para o Twitter muito importante,
pois diz respeito tanto quanto o que
a empresa quer passar para o mer-
cado e consumidores, e mensura o
que os consumidores falam dela.
A base da estratgia para o
Twitter Dnica ser o monitoramen-
to e a agilidade em fornecer respos-
tas aos internautas em tempo real.
A ideia aproximar clientes e pros-
pects, se relacionar. O canal ser
atualizado com notcias da empre-
sa, produtos, lanamento de produ-
tos, dicas, vagas de emprego, entre
outras informaes.
As informaes que alimentam
a rede so feitas de forma trans-
parente e a empresa conta com a
ajuda de colaboradores e depar-
tamentos chave que fornecem
informaes condizentes com o
propsito do Twitter.
Para seguir a Dnica no
twitter: @grupodanica

Fevereiro/Maro 2011

N 51
A Messe Mnchen International e a
Nrnberg Messe Group, duas grandes orga-
nizadoras de feiras de negcios do mundo,
assinaram em janeiro uma parceria indita para criao de uma equipe
de vendas conjunta que ser administrada pela subsidiria brasileira da
NrnbergMesse. O acordo envolve a transferncia de representao in-
ternacional da Messe Mnchen para a NrnbergMesse Brasil que ser co-
mandada pelo departamento internacional da empresa criado em 2009.
Empresas expositoras e visitantes sero os grandes beneficiados da
parceria que fomentar o intercmbio de negcios entre o Brasil e de-
mais pases
O departamento internacional da NrnrbergMesse Brasil ser res-
ponsvel pela divulgao e intercmbio das feiras de negcios da Messe
Mnchen no Pas, facilitando a visitao das empresas brasileiras aos
locais de atuao da Messe Mnchen e vice-versa. Esta a segunda
parceria entre as empresas que, em novembro do ano passado, fir-
maram um acordo para participar do segmento de embalagens Pet,
pela primeira vez, durante a BrauBreviale que acontecer de 9 a 11
de novembro de 2011 e que agora inclui matrias-primas, tecnologias,
logstica e marketing.
Nova parceria agita
setor de feiras e
negcios no Brasil
gua na Oca
Entender melhor da relao entre a gua e o planeta, enfatizando a
sua representao e importncia para o Brasil e seu povo por meio de
obras de arte, aqurios reais e virtuais, fotografias e instalaes audiovi-
suais. Essa a proposta da exposio gua na Oca que acontece desde
novembro em So Paulo, realizada pelo Instituto Sangari em parceria
com o Museu de Histria Natural de Nova York.
A mostra exibe os estados e o ciclo da gua, bem como os pro-
blemas relacionados qualidade e disponibilidade desse recurso na
sociedade e nos ecossistemas. Aes para seu uso sustentvel so
sugeridas pela exposio, que pretende chamar a ateno para o modo
como o pblico utiliza os recursos hdricos. Leia mais sobre o assunto
no Especial dessa edio.
Servio gua na Oca:
De: 26/11/2010 a 08/05/2011
Pavilho Lucas Nogueira Garcez (Oca)
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assunto para e-mail: consultant@prosearch.com.br
notcias

Fevereiro/Maro 2011

N 51

Fevereiro/Maro 2011

N 51
capa

Fevereiro/Maro 2011

N 51
Tedia Brazil: Remodelada,
Investe na Excelncia em Servios
istribuidora autorizada e ex-
clusiva de produtos para la-
boratrios, a Tedia Brazil acaba
de passar pela maior transfor-
mao de sua histria. Da iden-
tidade visual s diretrizes cor-
porativas, a empresa redefiniu
o modo de conduzir o negcio
como um todo, utilizando toda
a expertise adquirida nesses 12
anos de mercado e aps um in-
tenso exerccio de autoconheci-
mento. A Tedia Brazil define-se
agora como uma empresa foca-
da na excelncia em servio.
Compreender as necessida-
des de cada cliente, criando va-
lor para o servio oferecido de
acordo com o que ele realmente
deseja a nova proposta da em-
presa: Para alguns o tempo de
entrega ou o preo. Para outros
o suporte tcnico disponvel, a
marca do fabricante, a varieda-
de de produtos ou os servios
de consultoria que oferecemos
etc. O nico quesito invarivel
a qualidade de nossos produtos.
Para todos os clientes, em todos
os casos, a nossa qualidade
exmia, pois sabemos da sua im-
portncia vital nos processos la-
boratoriais de nossos clientes,
assegura Marcos Viana, Gerente
de Marketing da Tedia Brazil.
Para tornar essa ideia poss-
vel, Marcos explica que a Tedia
Brazil definiu os principais pro-
cessos responsveis pela satis-
fao do cliente na execuo da
compra, focou os esforos no
aperfeioamento deles e desen-
volveu outros complementares.
Como exemplo, cita alguns:
Conhecimento Aplicado
Atravs de uma pesquisa com
seus clientes, a Tedia Brazil perce-
beu uma necessidade latente por
um suporte tcnico mais acess-
vel, o que at ento s era forne-
cido por grandes marcas de equi-
pamentos laboratoriais. Todos os
demais insumos necessrios (con-
sumveis para cromatografa, ma-
teriais para fltrao e separao,
liquid handling, equipamentos de
bancada, entre muitos outros) no
dispunham de um suporte que
auxiliasse seu uso, manuteno e
consultas tcnicas. Aumentando
ainda mais o nvel de seus servi-
os, a empresa criou o departa-
mento de Conhecimento Aplicado,
com o intuito de fornecer informa-
es, dicas e auxlios necessrios
para o uso correto e otimizado
de cada um dos produtos Tedia
Brazil, alm de cuidar de outros
projetos, sempre relacionados s
melhores prticas utilizadas em
anlises laboratoriais. At agora
tivemos uma excelente recepo
a este novo servio, provando que
a Tedia Brazil, mais uma vez, to-
mou a iniciativa e satisfez as ne-
cessidades de seus clientes, co-
memora Priscila Tavares, Gerente
de Conhecimento Aplicado.
Logstica
Um processo logstico impec-
vel vital para uma empresa que
tem o sonho de encantar seu
cliente. Para isso, a Tedia Brazil
est colocando em prtica um
plano ambicioso para 2011: a ex-
panso de sua Industrializao e
Equipe de Conhecimento Aplicado oferece suporte a todas as necessidades do
consumidor de insumos
D
Fotos: Divulgao

Fevereiro/Maro 2011

N 51
Logstica. O Centro de Distribui-
o est sendo praticamente
triplicado em relao ao seu ta-
manho atual, com um aumento
de mais de 50% na equipe. As
Boas Prticas de Manufatura j
aplicadas atualmente com todos
os controles previstos (expedi-
o, validade, vetores, altura,
endereamento, rastreabilidade,
asseio, EPI, armazenamento, en-
tre outros) tero ateno especial
na expanso, com treinamentos
assertivos e controle rigoroso
de todos os processos. Em ter-
mos de estrutura, foi realizada
a migrao para a verso mais
atualizada do WMS, que corrige
muitos bugs das verses passa-
das, e tambm foi aprimorado o
Departamento de Planejamento
e Controle de Produo, visan-
do aperfeioar cada vez mais os
processos logsticos.
Atendimento
Desde o incio de seu trabalho,
em 1999, a Tedia Brazil focou
o atendimento como uma das
principais ferramentas para
conquistar seus clientes, rece-
bendo o devido reconhecimen-
to por tal servio. Nesse novo
momento fcou claro que este
diferencial no poderia ser dei-
xado de lado. Foram realizados
investimentos massivos em trei-
namentos, tanto para a rea de
vendas quanto para as demais,
visto que todas trabalham em
sinergia para atingir um nico
objetivo: encantar o cliente.
Na Tedia Brazil, acredita-se
que o lucro seja proveniente de
pessoas e no de nmeros. Por
isso, a empresa considera-se uma
extenso de seus clientes, geran-
do sempre a melhor soluo para
suas necessidades, na certeza de
que o sucesso sinnimo de uma
parceria slida e consistente. A Te-
dia Brazil prope aos clientes uma
experincia superior e de elevada
qualidade em atendimento, pois
muito mais que compradores, a
empresa quer parceiros e investiu
nestes diferenciais, pois entendeu
que afetam diretamente a experi-
ncia de atendimento que se com-
promete a entregar.
Equipe feliz, cliente satisfeito
A empresa no se sustenta
sem o apoio integral de uma equi-
pe qualifcada, comprometida e,
acima de tudo, feliz. Sabemos que
esta felicidade no conquistada
somente com salrios e benef-
Espao triplicado e foco s Boas Prticas da Manufatura marcaram
a expanso da Logstica Tedia Brazil
Equipe de Vendas bem treinada: essencial para a realizao dos
objetivos estratgicos da nova fase
capa

Fevereiro/Maro 2011

N 51
cios, embora estes itens tenham
suma importncia; acima de tudo,
a empresa deve oferecer respeito
ao colaborador, comenta Helena
Simon, responsvel pela rea de
Comunicao, sobre o posicio-
namento da empresa em relao
aos seus colaboradores, tratados
como um bem precioso. A par-
tir dessa premissa, o processo
de transio teve como um dos
principais focos o profssional da
Tedia Brazil, que foi encorajado a
participar ativamente da constru-
o da nova identidade, sugerin-
do melhorias, a partir do momento
em que compreendeu seu papel
na empresa.
Uma das primeiras aes inter-
nas foi a campanha Misso, Viso,
Valores. Idealizada para facilitar a
transio interna, a campanha
serviu para esclarecer aos colabo-
radores os conceitos relacionados
mudana e difundir a reformula-
o das Diretrizes Corporativas.
Dividida em fases, a campanha
mostrou de forma ldica e diver-
tida, esses trs conceitos. A em-
presa estabeleceu uma relao de
total liberdade com seus colabo-
radores para que propusessem
projetos de melhoria, a partir das
necessidades das suas respecti-
vas reas, visando a adequao
s novas diretrizes. Alm disso,
cada colaborador avaliou seu pr-
prio papel na empresa, revendo
sua descrio de cargo e propon-
do mudanas pertinentes. E, para
fechar, o grupo com as melhores
ideias foi premiado. Aps essas
intensas campanhas internas,
houve um grande aumento na
energia dos colaboradores e me-
lhora signifcativa no nvel de aten-
dimento. Com todos conhecendo
a direo para a qual a empresa
se encaminha - e, principalmente,
sentindo que fzeram parte desta
defnio -, cada colaborador tem
se empenhado a entregar o que
for preciso para que a Tedia Brazil
alcance seus objetivos, completa
Helena Simon.
Multisservios
O comprometimento dos profs-
sionais da empresa j tem gerado
aes positivas, a exemplo do es-
treitamento das relaes com seus
parceiros de negcios, que tem
resultado em relaes comerciais
estratgicas e extremamente be-
nfcas para os clientes Tedia Bra-
zil, como nos casos da Tedia Co,
Kromasil e TCI America. A empresa
tambm tem investido nas marcas
prprias GO-Lab, focada em pro-
dutos para liquid handling e equi-
pamentos de bancada plug&play; e
Tedia Vials&Caps, que traz uma li-
Algumas das aes de comunicao interna que aconteceram durante
todo o ano de 2009 e 2010
GO-Lab, Tedia Vials&Caps, Tedia
Ambiental e Comit de Apoio Social:
atendendo necessidades de clientes e
colaboradores

Fevereiro/Maro 2011

N 51
Conhea mais
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nha completa de vials, caps e sep-
tos para laboratrios.
Em 2011, a Tedia Brazil plane-
ja estar presente nos clientes com
o atendimento global dos insumos
necessrios para a qumica anal-
tica. J conhecida pela excelncia
de suas marcas e por oferecer uma
das melhores relaes custo-bene-
fcio, a empresa ir focar em suas
nove linhas (Cromatografa, Padres
Analticos, Vials & Caps, Filtrao
& Separao, RMN, Reagentes &
Solventes, Liquid Handling, Equipa-
mentos e Vidrarias) e desenvolv-las
em cada um de nossos clientes.
Responsabilidades sociais e am-
bientais tambm fazem parte do
cotidiano da equipe, cujas aes
se tornam possveis em funo do
corpo de colaboradores motivado
e bem treinado. Uma diviso espe-
cializada na gesto completa dos
resduos laboratoriais, a Tedia Am-
biental, oferece como benefcios a
simplifcao do descarte, a redu-
o da burocracia do processo, o
cumprimento legal e a otimizao
do negcio. Na rea social, a em-
presa oferece apoio a instituies de
caridade. Os colaboradores contam
com programa de bolsas de estudos
para aperfeioamento profssional,
alm de poderem utilizar o Comit
de Apoio Social CAS, criado para
servir como um canal de comunica-
o com a diretoria da empresa.
Nova imagem, nova
personalidade
A marca a imagem e a perso-
nalidade da corporao, ao mes-
mo tempo. Deve ser transparen-
te, pois por meio dela que uma
empresa reconhecida onde quer
que esteja. Sabendo da importn-
cia sobre essa questo, a Tedia
Brazil optou pela reformulao
total, seguindo o velho e verda-
deiro ditado, uma imagem vale
mais que mil palavras. Tal premis-
sa perfeita para defnir a nova e
melhor fase da empresa que, aps
a campanha junto aos colabora-
dores, fnalizou o processo apre-
sentando o novo logotipo da mar-
ca, minuciosamente estudado e
desenvolvido para expressar todo
o conceito da empresa.
O amadurecimento que a Tedia
Brazil transparece nessa sua atual
fase um refexo dos esforos re-
alizados anteriormente. Sua parti-
cipao no mercado laboratorial e
a taxa de crescimento anual acima
do esperado durante todos esses
12 anos de atuao s tendem
a aumentar. Metas como reali-
zar um atendimento inigualvel
permearam a vida corporativa da
empresa durante todo o ano de
2010 e continuaro a fazer parte
do nosso dia a dia. O objetivo
manter viva a chama de nossa Vi-
so: Tornar realidade os sonhos
de nossos clientes, entregando
sempre uma experincia inigua-
lvel de atendimento, fnaliza
Khalil Duna, Diretor da Tedia Bra-
zil, em demonstrao explcita de
que no s ele, mas todos os co-
laboradores vestiram a camisa da
Tedia Brazil.
Cuidadosamente pensada, nova logo possui explicao
detalhada para cada um de seus elementos
em foco

Fevereiro/Maro 2011

N 51
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Sistema dinmico de controle de temperatura Presto
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Os sistemas Presto

PLUS

para controle dinmico de temperatura oferecem a soluo
ideal para aplicaes de temperatura externa, principalmente para o controle de tempe-
ratura de biorreatores, apresentando tempos reduzidos de aquecimento e resfriamento,
ampla faixa de temperatura de trabalho sem a necessidade de troca de fuidos, com-
pensao rpida de reaes exotrmicas e endotrmicas, e um desempenho inigualvel
com economia de espao em laboratrio. Possuem bomba de circulao de alta perfor-
mance com estgios ajustados eletronicamente.
As unidades tm controle inteligente por cascata autoajustvel (ICC), oferecendo am-
pla faixa de medio (faixa de acordo com o modelo; para o modelo LH85: 80C a +250C), com
estabilidade de 0,01C, luz de fundo, tela LCD com quatro linhas e tela VFD fuorescente de informaes
com indicao simultnea de trs valores, funes de alerta, limite mximo de temperatura e estgios da
bomba. Possuem programador integrado (para 6 x 60 etapas) com relgio. A operao amigvel com en-
chimento automtico e desgaseifcao. Os modelos disponveis so por resfriamento por ar, gua ou ambos,
e as interfaces digitais e analgicas permitem automao posterior. Aplicaes
tpicas: sistemas biorreatores, autoclaves, plantas-piloto/destilao, calibrao,
indstria de semicondutores, calormetros de reao, blocos de reao, sntese
orgnica, entre outros.
Representante no Brasil: Alem Mar Comercial e Industrial S.A
Controle
inteligente
oferece
ampla faixa
de medio
Polimate inaugura nova sede em So Paulo
Todos os setores de servios da empresa pas-
saram por melhoras; o investimento nas novas ins-
talaes eleva o grau de excelncia dos servios
prestados pela Polimate, tanto na venda quanto no
ps-venda.
A rea de assistncia tcnica foi ampliada, ga-
rantindo efcincia no diagnstico do problema e
agilidade no reparo tcnico. J a rea comercial
tambm foi reestruturada e agora conta com um
parque tecnolgico instalado que permitir uma
comunicao mais gil entre a equipe de vendas e
consumidores. No setor de estoque, uma amplia-
o estratgica garantir excelentes condies de
armazenamento dos equipamentos.
No mercado brasileiro h mais de 40 anos, a
Polimate representa e distribui com exclusividade
as principais marcas mundiais de equipamentos de
alta tecnologia para controle de qualidade, pesqui-
sa e desenvolvimento.
Em dezembro passado a Polimate inaugurou sua
nova sede no bairro da Aclimao, zona sul de So
Paulo, em um prdio de 2.100 m, com modernos la-
boratrios de calibrao e medio totalmente equipa-
dos e com padro internacional de qualidade. No local
tambm h laboratrios showroom para apresentao
dos instrumentos analticos.
Em nova sede, Polimate reestruturou todas as reas
Revista Analytica

Fevereiro/Maro 2011

N 51
em foco

Fevereiro/Maro 2011

N 51
Saiba MaiS
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web@biosystems.com.br
Saiba MaiS
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vendas.analitica@perkinelmer.com
Poderosa ferramenta para a produo de amostras
analticas: Janus
A determinao elementar em leos e lubrifcantes a chave para a di-

minuio de custos de empresas de grande porte tais como indstrias de
explorao de gs e leo, grandes equipamentos, mineradoras, plantas de
produo de biodiesel e leos lubrifcantes dentre outros segmentos. A determinao de elementos em amostras de leos
tem basicamente trs objetivos principais:
Elementos de desgaste: anlise que monitora os metais que podem indicar a deteriorao em peas de mquinas onde 1.
o leo est inserido;
Elementos aditivos: anlise que determina os elementos presentes no leo a fm de monitorar os aditivos presentes nos 2.
lubrifcantes;
Elementos de contaminao: tipo de anlise que monitora a presena de elementos indesejveis oriundos de sujeira ou 3.
do processo de produo;
Quando corretamente aplicada, a anlise de leo serve como um importante diagnstico que pode gerar muitos benef-
cios, tais como aumentar a vida til de motores e realizar a troca de leo no momento exato, prevenindo danos s peas e
eliminando a troca desnecessria de leo o que reduz custos e gerao de resduos.
Para a determinao elementar, a PerkinElmer j oferece solues como Optima (ICP OES) e o NexION (ICP MS), ambas as
tcnicas permitem determinar a maior parte dos elementos da tabela peridica numa faixa de trabalho que vai de ng/Kg (partes por
trilho) at porcentagem num curto espao de tempo (cerca de 1 min). Entretanto, o grande desafo para suportar o aumento da
demanda produtiva de um laboratrio de anlise de leo no o sistema de deteco e sim o preparo das amostras, neste caso espe-
cfco, o preparo de leos para anlise por ICP demanda a diluio destas amostras em solvente adequado, como xileno e querosene
de aviao, a fm de minimizar problemas oriundos da formao de resduos carbonceos no plasma, perda de reprodutibilidade
devido s diferenas de propriedades fsico-qumicas entre as amostras.
Para aumentar a produtividade na anlise de leos, a PerkinElmer oferece uma nova soluo, o Janus Oil Prep, que pos-
sibilita automatizar todo o processo do preparo de amostras, soluo esta que j aplicada em empresas como a Caterpillar,
alm de ser compatvel com normas como ASTM e ABNT.
Com a possibilidade de trabalhar com quatro ou oito dispensadores e com deck cuja capacidade de 1536 tubos, o Janus Oil
Prep capaz de preparar mais de 96 amostras em 20 min, e mais de 2 mil amostras em 8 horas. Alm de oferecer a robustez neces-
sria para o processamento de um grande nmero de amostras e, dessa forma, suportar o incremento de demanda, o equipamento
apresenta faculdades nicas cujas funes so a padronizao dos ensaios e a manuteno de sua qualidade, reduo nos TATs
(Turn Around Time) e da interao do usurio com o processo. A engenharia robtica de de-
teco de lquido ultrassnica independente e seu sistema interno constitudo de lquido cuja
densidade semelhante a dos compostos com os quais interage, garantindo a preciso nas
diluies e preparo das amostras possibilitando uma anlise mais confvel e consistente.
Janus
possibilita automatizar todo

o processo do preparo de amostras
Nova linha de vidrarias no mercado
A Biosystems coloca no mercado uma nova li-
nha de vidrarias de excelente qualidade: a TWA, que
foi toda produzida em vidro borosilicato de classe
A, com certifcado de qualidade, graduao e com-
ponentes plsticos em polietileno ou polipropileno
(que garante maior resistncia trmica e qumica).
As vidrarias so utilizadas diariamente nas mais
diversas rotinas laboratoriais, incluindo laboratrios
farmacuticos, qumicos e biolgicos.
A linha da TWA inclui:
Bales volumtricos
Buretas
Copos de Becker frma baixa (tipo Griffn)
Dessecador a vcuo
Erlenmeyers
Frascos reagente
Provetas
Pipeta sorolgicas
Pipeta volumtricas
Tubos de ensaio com tampa baquelite
Tubos de ensaio sem orla
Revista Analytica

Fevereiro/Maro 2011

N 51
em foco

Fevereiro/Maro 2011

N 51
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Fernando@Labwin.com.br
Amostrador automtico de ar ambiental sobre placas
de Petri ou RODAC
Labwin-Profcincia
A Labwin tem trabalhado h mais de 10 anos com desenvolvimento de softwares para laboratrios mais
a consultoria na implantao dos mesmos e em qumica analtica. Atender bem a Clientes em diversas partes
do pas um desafo em um pas de dimenses continentais como o Brasil. Principalmente quando o servio
envolve tecnologia avanada e necessidade de oferecer consultoria por pessoal especializado e experiente
em laboratrios e informtica ao mesmo tempo.
O software LABWIN Profcincia
foi desenvolvido para facilitar, organizar, tornar econmico, confvel e

vivel o gerenciamento de Programas de Ensaios de Profcincias (Interlaboratoriais). Seguindo a norma ISO
17043:2010. Este software conta com:
Entrada de resultados via web, facilitando rodadas internacionais
Relatrio Anual, para clientes que participam mais de uma vez ao ano e
desejam saber seu desempenho anual em apenas um relatrio.
Tratamento estatstico, demonstrao em
grfco, clculos de homogeneidade e estabi-
lidade.
um software dinmico e bem intuitivo,
auxilia os melhores Programas Intralaborato-
riais do Brasil.
O SAS Super ISSO - parte da
consagrada linha de amostradores
de ar da PBI International - re-
ferncia mundial em amostragem
microbiolgica porttil de ar nas
reas farmacutica, alimentcia,
hospitalar, de qualidade de ar de
interiores, microeletrnica, reas
industriais protegidas, salas lim-
pas, capelas biolgicas e outras.
Entre as suas inmeras vantagens,
destacam-se: conformidade com
os requisitos da USP <1116> e
das normas ISO 14698-1 e 21 CFR
11 do FDA; projeto que evita a
turbulncia no fuxo de ar uni-
direcional e aspirao de amos-
tra j testada de acordo com as
especifcaes ISO; fexibilidade
de escolha de placas (RODAC ou
Petri); autonomia de operao
superior a 70.000 litros de ar / 8
horas; funcionamento com bate-
rias recarregveis; excelente tem-
po de amostragem ajustvel de 6
a 10 minutos para 1000 l de ar;
possibilidade de amostragem em
intervalos com parmetros total-
mente programveis para monito-
ramento em processo; operao
e limpeza simples; cabeas de
aspirao com perfuraes, auto-
clavveis, com opo de escolha
de material em alumnio ou ao
inoxidvel e cabea descartvel;
total rastreabilidade; armazena-
mento de at 300 ciclos de amos-
tragem; seleo de idioma, entre
muitas outras caractersticas. O
SAS Super ISO est disponvel em
quatro modelos, para fuxo de ar
de 100 ou 180 l/min para placa de
contato (RODAC) ou placa de Pe-
tri de diferentes dimetros. Ampla
disponibilidade de acessrios, em
funo da aplicao.
Representante no Brasil: Alem
Mar Comercial e Industrial S.A
SAS Super
ISSO da PBI
International:
ideal para fns
microbiolgicos
Software torna confvel e vivel o gerenciamento de
Programas Interlaboratoriais
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Fevereiro/Maro 2011

N 51
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Saiba MaiS
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vendas@scpscience.com.br
SCP Science oferece produtos com certifcao ISO 9000, ISO 17025 e ISO G 34
A SCP Science uma empresa canadense fundada em 1980, que desenvolve e manufatura produtos para Es-
pectroscopia Atmica. Com certifcao ISO 9000, ISO 17025, hoje a SCP Science tambm est acreditada com ISO
Guide 34, o que a diferencia de muitas outras empresas fornecedoras de produtos similares.
A linha de produtos bem completa desde padres aquosos para ICP-OES&MS, AA e IC, materiais certifcados,
tochas, injetores e nebulizadores para ICP-OES/MS, cones para ICP-MS, tubos para bombas peristlticas, consum-
veis para Fluorescncia de Raios X, tubos calibrados para coleta e fltrao de amostras de guas, kit para DQO e
sistemas de digesto de amostras como o DigiPrep e o NOVAWAVE.
O DigiPrep um sistema de digesto de amostras por bloco aquecido de carbono revestido com tefon, com
total resistncia a agentes qumicos, e com controle de temperatura de digesto. Os sistemas HT para altas tempe-
raturas so ideais para anlise de Nitrognio pelo mtodo Kjeldahl.
O NOVAWAVE e um digestor de micro-ondas cuja inovao est no processamento simultneo de at 12
amostras, onde cada amostra pode ter um programa de digesto totalmente independente das demais. O sistema
pode ser automatizado processando at 168 amostras de forma totalmente contnua sem interferncia do operador,
respeitando a interindependncia de programao.
A SCP Science adquiriu em 2007 a Conostan, empresa de renome internacional na fabricao de padres de
metais em leo, padres de S e Cl em combustveis e Biodiesel, padres de viscosidade, padres de leos usados
para FTIR e padres para determinao de tamanho de partculas.
Para conhecer melhor a linha de produtos da empresa visite: www.scpscience.com.br & www.conostan.com.br
Reagentes, DigiPrep, Tocha, Conostan, NOVAWAVE, respectivamente
Uma bomba compacta para fltrao e extrao em fase slida
A fltrao a vcuo uma das aplicaes mais comuns, utilizada para a preparao de amostras em qumi-
ca, microbiologia, controles de guas residuais entre outros processos analticos. De fcil manejo, compacta e
de excelente rendimento, as novas bombas ME 1 e ME 1C so o aliado perfeito para fltraes e dispositivos
mltiplos de aspiraes de lquidos. Novo design baseado nas efcientes bombas de membranas de trs fases
MD 1 e MD 1C, estas bombas so livres de leo e se caracterizam por uma longa vida til de suas membranas.
O desenho ergonmico e o interruptor ON/OFF localizado sobre a bomba permitem uma fcil operao e
seu desenho compacto faz com que ocupe pouco espao na bancada do laboratrio. As membranas e vlvu-
las em PTFE possuem excelente resistncia qumica e robustez mecnica.
Como opcional, uma vlvula de controle manual com manmetro de
presso oferece ajuste gradual da capacidade de aspirao efetiva.
Quanto ao seu desempenho, a bomba:
fcil de operar, possui um interruptor central,
Silenciosa e de baixa vibrao
Necessita de pouco espao na bancada do laboratrio,
Oferece vida longa membrana, praticamente livrando-a
de manuteno,
Possui alta resistncia qumica: PTFE e alumnio (ME 1C)
ME1 e ME 1C: bombas so fceis
de operar e ocupam reduzido espao
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(11) 2198-7198
altmann@altmann.com.br
Q-Sun cmara de ensaio de xennio
A Q-Sun cmara de ensaio de xennio reproduz os
comprimentos de onda de luz nocivos encontrados tanto
em ambiente interno como externo. Funes como nvoa
mida, controle de umidade relativa e refrigerador (para
aplicaes de temperatura ambiente) expandem signif-
cativamente a amplitude das condies ambientais que
podem ser simuladas.
As lmpadas de xennio emitem luz ultravioleta, vi-
svel e infravermelho. As lmpadas de arco de xennio
fltrado so a melhor forma de realizar ensaios em pro-
dutos como pigmentos, corantes e tintas, que podem ser
sensveis a comprimento de onda ultravioleta maiores e
comprimentos de onda visveis da luz solar.
A Q-Sun foi desenvolvida para que seu uso seja in-
tuitivo. fcil de instalar, utilizar e calibrar. A montagem
e a avaliao de espcimes so rpidas, com a exclusiva
bandeja deslizante de espcimes que acomoda facilmente
peas tridimensionais. A substituio de lmpadas tam-
bm segura, rpida e fcil. Os fltros pticos do Q-Sun
mantm o espectro necessrio durante toda a vida til,
sem a necessidade de substituio.
Destaques para: espectrofotmetros, granulmetro a
laser, medidor de potencial zeta, cabines de luz, moinhos
para laboratrios, colormetros, turbidmetros e compara-
dores colorimtricos para leos vegetais, minerais e pe-
trleo, alm da nova linha de instrumentos Bruker, como
o AFM Microscpio de Fora Atmica.
Linha de banhos Huber
A Analtica apresenta a sua mais nova linha de
equipamentos: banhos de aquecimento, refrigerao
e chillers, fabricados pela empresa alem Huber, l-
der no mercado de termostatizao desde 1968.
Cmara foi desenvolvida
para uso intuitivo
Seus termostatos possuem bomba de presso e
suco tanto para aplicaes internas ou externas,
que variam de -125
o
C a +425
o
C, alm de controla-
dores com interface de fcil manuseio e tecnologia
Plug&Play.
Todos os equipamentos esto isentos de CFC e
so confeccionados com materiais de alta qualidade
e robustez, o que garante longa vida til.
Informaes adicionais: www.analiticaweb.com.br
Equipamentos Huber:
qualidade e tradio de
mais de 40 anos
Saiba MaiS
(11) 2162-8080
analitica@novanalitica.com.br
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vendas@tediabrazil.com.br
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Tedia Brazil lana a marca Tedia Vials&Caps
A Tedia Brazil, pensando em oferecer sempre excelncia
em qualidade e atendimento a seus clientes, lanou sua mar-
ca prpria de vials, caps e septos: a Tedia Vials&Caps.
Apoiando-se na certeza de qualidade que sua tetracerti-
fcao confere e com o seu servio de alto nvel que j
referncia no mercado, a Tedia Vials&Caps oferece um ex-
tenso portflio que abrange as mais variadas especifcidades
em termos de equipamentos e anlises, e ainda permite a
customizao de itens.
Com a Tedia Vials&Caps possvel obter produtos in-
dividuais ou combos personalizados de acordo com as ne-
cessidades do laboratrio. A Tedia Brazil oferece tambm o
servio de compra programada que garante a entrega dos
produtos solicitados nas datas previamente defnidas, pelo
perodo que o cliente desejar.
Dentre os produtos Tedia Vials&Caps, encontram-se:
Vials de amostrador automtico
Vials com inserts
Vials EPA
Vials de pequeno volume
Vials de amostra
Vials tipo Shell
Vials para anlises de headspace e de micro-ondas
Ampolas 15x45mm
Tubos de ensaio
Caps com septos em formato de presso e de rosca
Septos em diferentes materiais para as mais variadas
necessidades, entre outros
UNITY 2: Novo
sistema de
dessoro trmica
da MARKES
para GC e GC-MS
A Analtica, represen-
tante da MARKES no Bra-
sil, apresenta o dessorve-
dor trmico UNITY 2,
um sistema sem criogenia
que permite a repetio
da anlise e compatvel
com qualquer instrumento
de GC (MS). A MARKES In-
ternacional reconhecida
como sendo especialista
no desenvolvimento e fa-
bricao de dessorvedores
trmicos e o sistema UNITY 2 incorpora todas as ino-
vaes tecnolgicas da empresa nos ltimos 10 anos.
Compatvel com todos os requisitos dos mtodos
ofciais padronizados, o UNITY 2 opera com tubos pa-
dro de 3,5 x (6,4 mm) ou com tubos DAAMS
de 4,5. A refrigerao no UNITY 2 eltrica, sem
criogenia, e atinge a temperatura de -30C na etapa
de concentrao no trap preenchido com adsorvente.
A transferncia da amostra para a coluna feita pelo
aquecimento rpido do trap com taxas de at 100C/s.
A dessoro do trap to efciente que a anlise feita
no modo splitless no apresenta alargamento signifca-
tivo dos picos, garantindo tima detectabilidade.
Todas as aplicaes da dessoro trmica podem
ser executadas no UNITY 2, como a anlise de esp-
cies lbeis, semivolteis (at n-C40), ultravolteis (in-
cluindo acetileno e CFCs), em nveis de trao (ppt) e
altas concentraes (ppm, %). As principais reas de
aplicao da tcnica de dessoro trmica so o moni-
toramento de compostos orgnicos no ar atmosfrico
e de ambientes internos, anlises forenses, controle da
emisso de volteis por materiais e caracterizao de
aromas e fragrncias.
As especifcaes tcnicas do dessorvedor trmico
UNITY 2 esto disponveis em analiticaweb.com.br/revista
UNITY 2: Dessorvedor
Trmico sem Criogenia
Alguns dos produtos
disponveis pela
marca Tedia
Vials&Caps
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contato@charistech.com.br
Saiba MaiS
(11) 3868-6599
metrohm@metrohm.com.br
Metrohm Pensalab: qualidade assegurada em anlise de guas
A Metrohm, lder global em anlise de ons, possui
uma completa linha de equipamentos para anlise de
guas e efuentes, atendendo plenamente as normas
nacionais e internacionais, como ASTM, EPA, MS 518
e CONAMA 357. Possui mais de 1.300 aplicaes j
desenvolvidas para este segmento e as disponibiliza
gratuitamente para seus clientes. a nica empresa
a oferecer uma soluo completa em equipamentos
para anlise de ons, como titulao potenciomtrica,
voltametria e cromatografa de ons.
Para anlise de guas, a Metrohm Pensalab oferece:
Medidores: pH, condutividade e on seletivo.
Titulao potenciomtrica: Dureza total (Ca e Mg); alcalinidade como CaCO
3.
Cromatografa de ons: nions: fuoreto, cloreto, brometo, nitrito, nitrato, fosfato e sulfato; Ctions:
ltio, sdio, potssio, amnia, magnsio, clcio; Oxyhaletos: bromato, brometo, clorito e clorato.
E ainda, glifosato, AMPA, cianeto, sulfeto e fenol.
Sistemas dedicados para preparo de amostra, como ultrafltrao, dilise, loop parcial, neutralizao e
diluio, totalmente integrados aos amostradores automticos.
Voltametria: Zinco, cdmio, chumbo, cobre, nquel, cobalto, ferro (II e III), urnio e cromo
Todas as tcnicas acima podem ser combinadas com sistemas de automa-
o, otimizando a rotina analtica. Alm disso, todos os equipamentos possuem
trs anos de garantia.
Visite o site da empresa e saiba mais sobre as solues para anlise de
guas: www.metrohm.com.br
Soluo completa em equipamentos para anlise de ons
Este espectrmetro Raman in-
corpora o que h de melhor em
termos de microscopia ptica
disponvel no mercado mundial;
com capacidade de efetuar an-
lises em modo confocal, o equi-
pamento tem resoluo espacial
submcron, resoluo de profun-
didade de 2 mcrons e pode ope-
rar em modo totalmente automa-
tizado efetuando mapeamentos
de superfcie, bem como mapea-
mentos qumicos.
O espectrmetro pode ser con-
fgurado de forma rpida e fcil,
para operar com trs diferentes
comprimentos de onda (lasers),
532nm, 633nm e 780nm. A in-
corporao de novos lasers pode
ser feita a qualquer momento
aps a aquisio do equipamen-
to, no havendo necessidade de
mo-de-obra tcnica para faz-lo,
o prprio operador executa essa
operao. Tambm os fltros e as
grades de difrao so otimizadas
para cada comprimento de onda e
podem, juntamente com os lasers,
serem intercambiadas entre os di-
ferentes espectrmetros da srie.
Nicolet DXR Raman
Microscope
O uso da tecnologia Raman tem
crescido muito e um dos principais
motivos para isso o desenvolvi-
mento dos equipamentos e a con-
sequente reduo no valor dos mes-
mos. A Charis Technologies, como
representante exclusiva da Thermo
Scientifc para a linha de FT-IR, FT-
NIR e Raman, apresenta o Nicolet
DXR Raman Microscope.
A novidade em tecnologia
Raman da Thermo Scientifc
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(11) 4023-5438 - ramal 4
agrozootec@agrozootec.com.br
Saiba MaiS
(16) 3441-7200
lucadema@lucadema.com.br
Nova srie de espectrofotmetros UV/Vis Evolution 200
A Analtica apresenta a srie Evolution 200 da Ther-
mo Scientifc, composta por espectrofotmetros UV/Vis
com inovaes tecnolgicas reais que proporcionam
excelente desempenho sem complexidade adicional na
sua utilizao. A srie Evolution 200 UV/Vis se distin-
gue no mercado pela sua versatilidade de confguraes
possveis atravs de uma ampla linha de acessrios. Sua
eletrnica de ltima gerao favorece signifcativamente
a produtividade do laboratrio.
A Srie Evolution 200 composta pelos sistemas
Evolution 201 e 220 UV-Vis, para laboratrios de rotina
e pesquisa, e pelo Evolution 260 Bio UV-Vis, para as
aplicaes relacionadas s cincias da vida. Com ptica
de duplo-feixe e banda espectral de 1nm estes sistema
garantem a preciso e confabilidade das medies. Sua
lmpada de xennio fash no requer aquecimento e
permite incio imediato das medidas. A tela colorida touch screen pode ser personalizada, para facilitar a
navegao. O software INSIGHT, da Thermo Scientifc, oferece ferramentas completas para atender as exi-
gncias da norma 21 CFR Parte 11.
O sistema Evolution 260 Bio UV-Vis dispe de mtodos pr-programados para aplicaes especfcas em Bioci-
ncias e mdulos dedicados para medidas da concentrao e pureza de cidos nuclicos, incluindo DNA, ssDNA,
RNA e siRNA, anlise de protenas e os mtodos mais comuns de anlise colorim-
trica, incluindo os ensaios Pierce 660nm, Bradford, BCA e Lowry.
As especifcaes tcnicas da Srie Evolution 200 UV/Vis esto disponveis
em: analiticaweb.com.br/revista
Lucadema: completa
Sempre inovando em solues para a rotina laboratorial, a
Lucadema Cientfca uma empresa brasileira que oferece equi-
pamentos para ensaios gerais na rea de qumica analtica e
controle de qualidade.
Em sua cartela de produtos constam capelas de exausto de
gases fabricadas em fbra de vidro e disponveis em diversos tama-
nhos, barriletes, cmaras asspticas, deionizadores, jarras anaerbi-
cas, mantas aquecedoras, chuveiros lava-olhos, agitadores magn-
ticos e muito mais.
Em seu site, a empresa fornece informaes sobre todos esses
produtos, alm das novidades como a estufa BOD, utilizada para in-
cubar frascos com demanda biolgica de oxignio, cmaras clim-
ticas com capacidade de manterem e controlarem os nveis de umi-
dade e temperatura e destiladores de gua construdos totalmente
em ao inox, todos fabricados com rigoroso padro de qualidade.
A Lucadema possui preos e
condies de pagamento altamente
competitivos, logstica diferenciada
e excelncia no atendimento tcni-
co e comercial.
Novo Evolution 200 UV-Vis
Amostras biolgicas
bem conservadas
A Agrozootec est presente no mercado h
seis anos comercializando botijes criognicos
para armazenamento e conservao de amostras
biolgicas, bem como produtos e equipamentos
para manuseio desses botijes.
Os produtos fornecidos pela Agrozootec so
importados da Cryofarm, renomada empresa na
Itlia que distribui botijes criognicos pela Eu-
ropa e Brasil.
Localizada em Itu, a 120 km da capital paulis-
ta, a empresa entrega em todo territrio nacional.
Mais informaes esto disponibilizadas no site:
www.agrozootec.com.br/prodotti2.asp?id=79
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valmig@valmig.com.br
Saiba MaiS
(11) 3043-7879
marketing@danica.com.br
Portas SL EC Dnica
A Dnica est sempre divulgando as tendn-
cias de mercado, oferecendo solues inovadoras
para arquitetura de Salas Limpas. Todos os pro-
dutos e processos se destacam pela tecnologia e
materiais utilizados em sua produo, baseados
em alta tecnologia europia atendendo as normas
e procedimentos de GMP (Good Manufacturing
Practice), exigidos pelo FDA (Food and Drug Ad-
ministration) e Anvisa (Associao Nacional de
Vigilncia Sanitria), satisfazendo assim necessi-
dades especfcas de cada cliente.
Lder na Amrica Latina na engenharia, fabrica-
o e montagem de sistemas termoisolantes para
os segmentos de salas limpas, cmaras frigorf-
cas, construo civil e interiores navais, a empresa
apresenta suas novas portas SL EC Dnica que in-
corpora o que h de mais moderno em tecnologia
de materiais e sistemas eletrnicos a um design
sofsticado, totalmente inovador. A nova linha de
portas para Salas Limpas Dnica chega ao mer-
cado aliando beleza, efcincia e funcionalidade,
enquadrando-se nas mais rgidas normas e boas
prticas de Fabricao (GMP). So 100% planas,
isentas de arestas e reentrncias e dispensam a
utilizao de silicone como vedante.
Linha de portas alinha beleza, efcincia e funcionalidade
Algumas das caractersticas:
Isolamento interno em PUR, PIR;
Folha na espessura padro 54mm ou 34mm
fabricado em uma nica chapa de ao, sem
junes com perfs evitando arestas e redu-
zindo pontos de contaminao;
Revestimento em chapa de ao liso, galva-
lume e pr-pintado 0,65 na cor branca RAL
9003 ou ao inoxidvel 0,80mm (outras cores
sob consulta);
Batente com perfl especial em alumnio e
pintura eletrosttica na cor branca RAL 9003,
soldados nos cantos, eliminando a possibili-
dade de reentrncias;
Folha e batente possuem cantos arredonda-
dos facilitando a higienizao;
Dobradias e maanetas em ao inoxidvel;
Sistema de travamento por eletro-im, ou me-
cnico (com cilindro de mestragem ou no),
com comando de acesso por botoeira de
presso touch-less ou leitor de carto ou sen-
sor de acesso com led indicativo de abertura
no puxador ou maaneta;
Visor com vidro duplo pressurizado com gs
inerte. Visor embutido sem perfs de acaba-
mento externo, possibilitando perfeito alinha-
mento entre folha e o visor
Novo design do perfl batente facilitando a
montagem em obra.
Regulador para cilindro de amostragem VMG 100 VC Valmig
Regulador
VMG 1000 VC
em um cilindro
descartvel
Para quem trabalha no merca-
do de segurana e meio ambiente
chegou o novo regulador VMG
1000 VC fornecido pela Valmig.
Ideal na calibrao de detectores
portteis e fxos, o equipamento
apresenta um fcil manuseio e
economia vantajosa no consumo
de gs com vazo constante, sen-
do as mais utilizadas: 0,3 L/min e
0,5 L/min. destinado especial-
mente para trabalhos com cilin-
dros descartveis com gs inerte
ou corrosivo, pois apresenta cor-
po e capa em inox.
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Geradores de gases Peak Scientifc: mais economia e segurana
para o laboratrio
A Katlysis Instrumentao Cientfca - empresa na rea de servios, trei-
namentos de instrumentos da HP/Agilent, automao laboratorial (LIMS etc.),
fornecedora de espectrmetros de massas e equipamentos para cromatografa
gasosa multidimensional (GCxGC) a partir de sua mais nova representada, a
empresa Peak Scientifc, fornece geradores de gases para laboratrios.
Gases gerados:
Nitrognio (Sistemas GC, LC/MS, NMR, ELSD);
Ar Sinttico (Sistemas GC, LC/MS, Secadores);
Calibrao (Analisadores CO2);
Hidrognio (Sistemas GC);
TOC.
Os geradores so equipamentos robustos, que necessitam de pouca manu-
teno e que promovem mais segurana ao laboratrio e economia, tendo em
vista a no necessidade de cilindros, tubulaes adequadas para o manuseio
de gases de laboratrios. Alm dessas van-
tagens, os geradores da Peak Scientifc so
extremamente silenciosos e contam com uma
tecnologia que permite o aumento da vida
til dos seus equipamentos.

Equipamentos dispensam uso de
cilindros, tubulaes adequadas para
o manuseio de gases de laboratrios
alphaCenter lana no mercado brasileiro as colunas C18 da Fortis Technologies
Saiba MaiS
(11) 2122-0206
vendas@alphacenter.com.br
STEQ 10 Anos...
...e muitas razes para comemorar. Dedicao, tica e iniciativa. Qualidades consolidadas com as quais a STEQ chega aos
10 anos de atividade em 2011. Com solidez, a empresa representa os lderes no mercado mundial de esterilizao, desconta-
minao, enchimento e embalagem. Por tudo isso uma referncia na categoria.
A Steq comemora principalmente a preferncia dos clientes, oferecendo linhas de sucesso formadas por equipamentos de
tecnologia avanada e inovadora, investindo cada dia mais em um ps-venda dedicado, porque este sempre foi seu compro-
metimento integral em 10 anos de histria. Prova disso o reconhecimento de novas marcas que aderem ao servio.
Como parte desta celebrao, a empresa anuncia o incio de mais trs novas parcerias. Juntam-se ao portflio STEQ as
empresas DPERTHAL, KBW e o grupo HEINKEL.
A DPERTHAL oferece equipamentos de proteo ambiental e segurana no trabalho, como armrios e invlucros para
estocagem de material.
O grupo alemo HEINKEL especializou-se no desenvolvimento de reatores cnicos para mistura e secagem de lquidos,
slidos e semisslidos; alm de centrfugas industriais.
J os equipamentos da empresa KBW atendem a grande maioria das aplicaes de enchimento e
dosagem de lquidos, e de contagem de cpsulas e comprimidos.
Mais sobre a histria de sucesso da Steq no endereo: www.steq.com.br
Saiba MaiS
(11) 5181-5570
vendas@steq.com.br
A alphaCenter, empresa bra-
sileira representante das marcas
Cronus, LabHut e ZirChrom com
diversas solues multimarcas,
traz para o pas as colunas C18 da
Fortis-Technologies, que operam
com pHs moderados, baixos e pH
altos. Alm dessa versatilidade, as
colunas apresentam tima repro-
dutibilidade, resoluo e so ide-
ais para aplicaes com espectro-
metria de massas.
Saiba MaiS
(11) 2122-0206
sac@katalisyscientifca.com.br
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AnAlyticA legAl

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A POLTICA NACIONAL DE RESDUOS
SLIDOS E SUAS IMPLICAES PARA OS
LABORATRIOS DE ANLISES INDUSTRIAIS
Os estabelecimentos geradores de resduos dos
servios industriais e de sade agora esto sujeitos a
maiores penalidades, caso no cuidem adequadamen-
te de seu lixo. A primeira delas a obrigatoriedade da
elaborao de um plano de gerenciamento dos resdu-
os gerados e sua implantao.
Em agosto de 2010 foi instituda a Poltica Nacio-
nal de Resduos Slidos (Lei 12.305) que, entre outros
termos, dispe sobre o gerenciamento ambientalmente
correto dos resduos slidos e sobre as responsabilida-
des de seus geradores, cuja regulamentao aconte-
ceu em dezembro, tambm de 2010.
Logo que foi sancionada pelo ento presidente Lula,
perguntava-se se essa lei pegaria ou no. Mas com
todas essas catstrofes resultantes do aquecimento glo-
bal, com milhares de vtimas em todo o planeta, mais a
presso dos ambientalistas somadas ao custo de recu-
perao dessas reas, alocao de desabrigados, entre
outros, fzeram com que a lei pegasse, ou seja, ela est
vigendo e no h mais como fugir de suas exigncias
sem sofrer as cominaes legais que ela impe.
Obviamente, haver um perodo para que pessoas
jurdicas que, direta ou indiretamente, geram resduos
slidos, sujeitas s observncias dessa lei, se adequem
a ela. Mas tratar-se- apenas de uma tolerncia porque
a lei j est em vigor e todas as suas penalidades j
podem ser aplicadas.
Tanto as pessoas jurdicas de direito pblico, quan-
to de direito privado esto obrigadas a se adequar a
essa nova legislao e, com isso, obrigadas a elaborar
um plano de gerenciamento de resduos slidos. Es-
pecialmente aquelas que geram resduos qualifcados
como resduos especiais, assim defnidos os gerados
em indstrias ou em servios de sade, como hospi-
tais, ambulatrios, farmcias, clnicas que, pelo perigo
que representam sade pblica e ao meio ambiente
e exigem maiores cuidados no seu acondicionamento,
transporte, tratamento e destino fnal. Sendo essa exi-
gncia tanto da Poltica Nacional de Resduos Slidos e
seu decreto regulador, quanto da Resoluo CONAMA
358/2005 e RDC n 306/04 da ANVISA.
A nova lei defne as obrigaes dos geradores que j
estavam em Resolues do CONAMA e da ANVISA. Isso
quer dizer que no h obrigaes adicionais, mas as j
exitentes agora passam a ser respaldas por lei federal.
Essa Resoluo CONAMA, em seu artigo 6., exi-
ge que os geradores de resduos de servios de sade
devem apresentar at 31 de maro de cada ano, de-
clarao, referente ao ano civil anterior, subscrita pelo
administrador principal da empresa e pelo responsvel
tcnico devidamente habilitado, acompanhada da res-
pectiva ART, relatando o cumprimento das exigncias
previstas nesta Resoluo. Entendemos que seria esse
o prazo ideal para as empresas de servios de sade
apresentarem seu plano de gerenciamento de resduos
slidos, porque a partir dessa data a fscalizao pas-
sar a agir com mais rigor em relao a apresentao
desse plano de gerenciamento de resduos, uma vez
que cidades como So Paulo, por exemplo, j esto
exigindo legalmente essa responsabilidade dos gran-
des geradores, com aplicao de duras penalidades
para quem descumpri-las.
Assim, para se prevenirem de notifcaes de co-
branas de adequao ou de pesadas multas pela falta
de adequao, faz-se necessrio que as empresas de
servios de sade e indstrias, em geral, tenham seus
PGRSS, tendo em conta que o servio de consultoria
especializado englobe a proposio de tratamento dos
seus resduos, considerando seus volumes e caractersti-
cas; as possibilidades e convenincia de reuso de alguns
dos materiais; a convenincia de separao para recicla-
gem; as ofertas do mercado para a coleta, transporte e
processamentos; a estruturao organizacional do gera-
dor para cuidar do manejo dos resduos; a proposio de
normas e procedimentos internos; plano de investimen-
tos em equipamentos, tecnologias e instalaes para seu
manejo interno, antes do seu descarte externo e o geren-
ciamento, incluindo o projeto interno e procurement dos
equipamentos e instalaes, se for o caso.
Teodora Tavares
Teodora Tavares advogada especializada em
Direito Ambiental Destinao de Resduos
Slidos: teodoratavares@gmail.com

Fevereiro/Maro 2011

N 51
A r t i g o

Fevereiro/Maro 2011

N 51
RESUMO
Um mtodo foi proposto para a extrao e deteco de cloroflas a e b atravs de anlise
por injeo em fuxo. O mtodo forneceu uma velocidade analtica de 12 amostras por hora
com um limite de deteco de 0,01mg.gmf
1
para o teor de clorofla a e b. Os resultados
obtidos com o mtodo proposto apresentaram boa concordncia com aqueles obtidos por
um mtodo convencional para determinao do teor de cloroflas a e b em uma amostra de
Cecropia pachystachya.
Palavras-chave: FIA. Clorofla. Extrao em Linha.
SUMMARY
This method has been proposed for the extraction and detection of chlorophylls a and b
through in fow injection analysis. The analytical method provided a speed of 12 samples
per hour with a limit of detection of 0,01mg.gmf
1
for the content of chlorophyll a and b. The
results obtained by proposed method are in good agree with those obtained by conventional
method for determination of chorophyllsa and b in a sample of Cecropia pachystachya.
Keywords: FIA.Chlorophyll.Extraction On-line.
Edemar Benedetti Filho
*
,
Antonio Rogrio Fiorucci,
Denise Bassana Dias
e
Etenaldo Felipe Santiago
Curso de Licenciatura em
Qumica, Universidade Estadual
de Mato Grosso do Sul.
Curso de Licenciatura em
Cincias Biolgicas, Universidade
Estadual de Mato Grosso do Sul.
*Correspondncia
edemar@uems.br
A r t i g o
EXTRAO E DETECO DE CLOROFILAS ATRAVS
DE ANLISE POR INJEO EM FLUXO
IntROdUO
As cloroflas so os pigmentos naturais mais abundantes
presentes nas plantas e ocorrem nos cloroplastos das folhas
e em outros tecidos vegetais. O nome clorofla foi proposto
por Pelletier e Caventou, em 1818, para designar a substncia
verde que s podia ser extrada das folhas com o auxlio do
lcool. Atualmente os pigmentos cloroflianos so de gran-
de importncia comercial, podendo ser utilizados tanto como
pigmentos quanto como antioxidantes. Existem diversos tipos
de cloroflas que diferem ligeiramente entre si em pequenas
variaes estruturais em suas molculas e so classifcadas
em clorofla a, b, c e d.
Ambas as cloroflas (a e b) (1) so componentes das mem-
branas dos cloroplastos e ocorrem na razo clorofla a/b de
aproximadamente 3 para 1. Plantas expostas a elevados fu-
xos de ftons fotossintticos (FFF) apresentam razes clo-
rofla a/b em torno de 3,2 a 4,0 e plantas crescendo em am-
bientes com reduzidos FFF possuem razes a/b em torno de
2,5 a 2,9.
O comportamento das molculas de clorofla a em res-
posta induo pelo fuxo de ftons pode se manifestar
como respostas de fuorescncia passveis de serem mensu-
radas com fuormetros. Os parmetros de fuorescncia da
clorofla a bem como das razes a/b, podem se constituir em
importantes ferramentas para avaliar as respostas de plantas
a fatores geradores de estresse.
O teor de clorofila na folha utilizado para predizer o
nvel nutricional de nitrognio (N) em plantas, devido ao
fato da quantidade deste pigmento correlacionar-se pro-
porcionalmente com o teor de N na planta (2). Essa cor-
relao atribuda, principalmente, ao fato de que 50% a
70% do N total das folhas serem integrantes de enzimas
que esto associadas aos cloroplastos (3). A atividade fo-
tossinttica, o contedo de protenas solveis, de N, ma-
cronutrientes e micronutrientes existentes nas folhas so
variveis e podem ser correlacionadas com o contedo de
clorofila no tecido foliar (4).
A determinao da clorofila tradicionalmente reali-
zada pela extrao dos solutos foliares e posterior deter-
minao espectrofotomtrica, utilizando comprimentos
de onda na regio do vermelho do espectro de luz visvel.
Este procedimento lento, sendo realizado geralmente
em torno de duas horas apresentando baixa reprodutibi-
lidade (5-6).
Na atualidade existem diversas tcnicas analticas que
propiciam obtenes de melhores resultados em termos
de seletividade e sensibilidade nas anlises. A necessi-
dade de realizao de algumas operaes preliminares
deteco e quantificao das espcies de interesse em
diferentes matrizes, como separao e pr-concentrao,
constituem-se ainda na etapa limitante das determinaes

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analticas. Neste contexto, as anlises por injeo em flu-
xo so capazes de substituir com vantagens os proces-
sos manuais de separao, reduzindo custos, tempo de
anlise e manipulao de amostras, levando a um menor
risco de contaminao e perdas de reagentes (7-8). Uma
outra caracterstica importante na anlise por injeo em
fluxo a obteno de resultados rpidos e reprodutveis,
possibilitando o desenvolvimento de procedimentos anal-
ticos com alta frequncia analtica. Em contrapartida com
a preocupao da preservao ambiental, o uso de menor
quantidade de reagentes como solventes orgnicos no la-
boratrio se torna cada vez mais uma necessidade em vis-
ta da rigidez atual das leis ambientais e presso da prpria
sociedade.
Diversos laboratrios utilizam metodologia proposta
por Arnon (9) para as determinaes de cloroflas a e b, que
apresenta pouca velocidade analtica e baixa preciso, na
qual necessrio retirar discos de 0,5cm de dimetro do
material vegetal, lavar, extrair moendo a amostra com so-
luo de acetona 80% (v/v), centrifugar por 10 minutos e
posteriormente medir a absorbncia no espectrofotmetro.
Neste trabalho, objetivou-se desenvolver uma meto-
dologia de anlise em injeo em fluxo para determinar
o contedo de clorofilas a e b em amostras de tecidos
vegetais, propondo uma automao de um mtodo con-
vencional de extrao e determinao de clorofilas a e b
por espectrofotometria.
MAtERIAIS E MtOdOS
Limpeza da vidraria
Toda vidraria e recipientes para armazenagem de so-
lues foram previamente lavados com detergentes, gua
destilada, cido ntrico 10% v/v e enxaguados com gua
deionizada e bidestilada.
Equipamento
Um espectrofotmetro Femto 700Plus com uma clula
de fluxo de quartzo de 8l foi usado. O sistema de propul-
so consistiu de uma bomba peristltica Ismatec IPC-8.
Para o sistema FIA foram utilizados tubos de polietileno de
0,8mm de i.d.
Preparao da minicoluna
A minicoluna foi preparada utilizando um tudo de vidro
boro silicato (comprimento: 8,0cm, i.d.: 4,0mm) o qual foi pre-
enchido com o material a ser analisado.
Reagentes
Todos os reagentes foram de grau analtico, acetona
PA (Dinmica, 99,8% de pureza). gua deionizada e bi-
destilada foi usada no preparo de todas as solues. As
solues de extrao (acetona-gua, 80% v/v) foram pre-
paradas diariamente pela dissoluo de acetona em gua
deionizada e bidestilada.
Preparao da amostra
Foram coletadas folhas de Cecropia pachystachya, pico-
tadas a cada 1,0 mm e lavadas com gua bidestilada. Foi
pesado cerca de 0,50g de folhas picotadas e colocadas em
placa de petri contendo gua bidestilada. A amostra de 0,50g
foi empacotada dentro da minicoluna e adicionada fbra de
vidro em ambas as extremidades da coluna.
PARtE EXPERIMEntAL
Sistema FIA
O sistema de injeo em fuxo esquematizado na Figura
1. Foram utilizados cabos TygonIsmatec com a especifcao
MHLL resistente a acetona, semelhante ao Viton
.
A extrao foi executada utilizando uma minicoluna empa-
cotada com amostra picotada e inserida em linha. O sinal foi
medido em 645 e 663nm.
Sistema convencional
Acetona
80%
PP
C
D W
Na determinao do contedo de cloroflas a e b, amos-
tras de 0,50g de tecido foliar fresco foram postas em tubos
com tampa contendo 5,0mL de acetona 80% (v/v) em gua
onde permaneceram por 24 horas em cmara fria, protegidas
da luz. Aps 24 horas os extratos foram fltrados e a leitura
efetuada em 663 e 645nm para clorofla a e b, respectivamen-
te (9). As determinaes da clorofla (mg gmf
-1
) basearam-se
nas equaes abaixo relacionadas:
Clorofla a =
Clorofla b =
nas quais A a absorbncia no comprimento de onda indi-
cado, V o volume fnal do extrato clorofla-acetona em mL,
e MMF a massa da matria fresca em gramas do material
vegetal utilizado.
Figura 1. PP: bomba peristltica; C: minicoluna; D: detector; W:
descarte
00)
9 [$ [$
1000
) 69 , 2 7 , 12 (
645 663

00)
9 [$ [$
1000
) 68 , 4 9 , 22 (
663 645

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Relao entre massa da amostra e absorbncia
Para avaliar possveis correlaes entre a massa das
amostras e a absorbncia foram analisadas cinco amostras
com massa crescente (0,1g) com deteco em 645 e 663nm,
respectivamente.
RESULtAdOS E dIScUSSO
A correlao entre a massa da amostra presente na mini-
coluna e a respectiva absorbncia descrita na Figura 2.
Atravs da pouca variao entre as massas e os respecti-
vos desviospadres, o restante dos experimentos foram rea-
lizados padronizando a utilizao de 0,50g para as amostras
para uma melhor extrao de clorofla. O volume do tubo de
vidro (minicoluna) foi padronizado para acomodar a massa
utilizada para a extrao da clorofla.
Composio e volume da soluo
extratora acetona/gua
Observou-se que com a composio de 80% de acetona
em gua h a maior extrao de clorofla, conforme demons-
tra a Figura 3.
A Figura 4 apresenta os valores de absorbncia medidos
com soluo extratora de acetona 80% (v/v) em gua para
amostras de 0,50g em funo do volume de soluo extratora
utilizado. O volume de 5,0mL da soluo extratora apresentou
uma absorbncia prxima ao mtodo convencional, e sendo
adotado por utilizar uma melhor quantidade de reagente com
uma signifcativa medida de absorbncia.
Comparao entre as metodologias
O mtodo proposto para a extrao e determinao do
teor de clorofla a e b foi aplicado para uma amostra de Cecro-
pia pachystachya Trec. (Urticaceae), e mostrou-se efciente.
Para validar os resultados obtidos atravs do desenvolvimen-
to do sistema em fuxo, a amostra foi analisada por extrao e
deteco convencional da clorofla (10-12). Os valores deter-
minados por ambos os mtodos so mostrados na Tabela 1
para um conjunto de 10 rplicas. Como pode ser observado,
o mtodo proposto possui boa preciso sendo que os valores
encontrados empregando-se ambos os mtodos esto em
boa concordncia a um nvel de confana menor que 4%.
O mtodo proposto forneceu uma velocidade analtica
de 12 amostras por hora, com um limite de deteco de 0,01
mggmf
-1
e um desvio padro de 0,05 entre as amostras.
Estudos similares foram executados em comprimento
de onda de 645nm e estes apresentaram as mesmas ca-
ractersticas de estudo que o comprimento de 663nm.
0,10 0,20 0,30 0,40 0,50 0,60
0,58
0,60
0,62
0,64
0,66
0,68
0,70
0,72
0,74
0,76
A
massa / g
60 65 70 75 80 85 90
0,64
0,66
0,68
0,70
0,72
0,74
0,76
0,78
0,80
A
%(v/v) de acetona em gua
Figura 2. Valores mdios e desvio padro para absorbncia
( = 663nm, n=5) em funo da massa de amostra de folhas de
Cecropia pachystachya extrada com acetona 80% (v/v) em gua
( = 663nm, n=5) em funo da composio percentual de acetona
da mistura extratora acetona/gua
2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22
0,68
0,69
0,70
0,71
0,72
0,73
0,74
0,75
0,76
0,77
A
voIume / mL
( = 663nm, n=5) em funo do volume de soluo extratora de
acetona 80% (v/v) em gua
Tabela 1. Valores mdios e seus desvios padro (n=10) para os valores determinados de clorofla a e b pelo mtodo convencional e proposto para
uma amostra de Cecropia pachystachya
Mtodo Absorbncia ( 645) / nm Absorbncia ( 663) / nm clorofla a / mg gmf-1 clorofla b / mg gmf-1
Proposto 0,432 ( 0,015 ) 0,723 ( 0,024 ) 0,0802 ( 0,0012) 0,0651 ( 0,0013)
Convencional 0,440 ( 0,064 ) 0,740 ( 0,084 ) 0,0821 ( 0,0020) 0,0661 ( 0,0022)

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cOncLUSO
Devido necessidade de serem executadas anlises cada
vez mais rpidas e com menores interferncias externas, o sis-
tema de anlise por injeo em fuxo apresentou-se como uma
excelente alternativa analtica. O mtodo automatizado em FIA
R E f E R n c I A S
VALLADARES, F.; DOBARRO, I; SNCHEZ-GMEZ, D. & PEARCY, R. W. Photoinhibition and drought in Mediterranean wood saplings: scaling effects
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vadas in vitro sob diferentes nveis de nitrognio. Pesq. Agropec. Bras., 39(11): 1087-1093, 2004.
proposto apresentou bons resultados comparados com o mto-
do tradicional de anlise para clorofla em tecido vegetal, com um
limite de deteco e desvio padro melhor que o convencional,
o que sugere a possibilidade de aplicao desta tcnica para os
estudos do contedo de cloroflas a e b em amostras de tecidos
vegetais, inclusive com aumento da velocidade analtica.
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EMPREGO DO SORO DE LEITE BOVINO E
BUBALINO PARA PRODUO DE BIOMASSA PELA
LEVEDURA Kluyveromyces marxianus 229
RESUMO
O soro de leite considerado um subproduto de elevado valor nutricional, sendo
composto por aproximadamente de 4,6% lactose, 0,8% de protena, 0,5% de gordu-
ra, 0,5 - 0,8% de matria mineral e 0,2 - 0,8% de cido ltico. Quando este descar-
tado em corpos receptores de gua pode causar danos ambientais. Desta maneira,
o objetivo do trabalho foi produzir protena microbiana por Kluyveromyces marxianus
229 com o intuito de avaliar a reduo do potencial poluidor de tal subproduto. Neste
trabalho foram testadas a infuncia de diferentes diluies dos soros de leite cido e
doce de origem bovina e do soro doce de origem bubalina no crescimento celular e
concentrao proteica. Para tanto, se fez anlises de carboidratos, protenas, cinzas,
acidez ltica e pH do sobrenadante, alm de verifcar o crescimento microbiano e sua
adaptao nos meios; na biomassa produzida pela levedura analisou-se a protena
intracelular e massa seca. A maior obteno de biomassa do soro cido bovino foi no
M1 (meio sem diluio), no entanto, considerando que no M2 (diluio 1:1) a concen-
trao do soro foi diluda em duas vezes, em termos de rendimento fnal, este ltimo
aumentou em 37% a concentrao celular. Aps o cultivo da levedura em soro de
leite doce bovino a maior concentrao celular foi no M3 (diluio 1:2), o qual mos-
trou rendimento fnal de 2.200 e 644% maior que M1 e M2, respectivamente. O meio
formulado com o soro doce bubalino que mais estimulou a formao de biomassa foi
o mais diludo (M3). O meio de cultivo formulado com soro de leite doce bovino foi o
que resultou numa maior produo de biomassa quando comparada com os outros
soros. O M3 formulado com o mesmo mostrou 4569% maior produo celular do
que o M3 bubalino. A produo de protena intracelular por K. marxianus 229 foi se-
melhante em todos os meios de cultivo. Entretanto, os meios M3 formulados com os
soros de leite mostraram maior rendimento em biomassa, obtendo maior produo
protica da mesma por litro. Sendo assim, nos meios formulados com o soro diludo,
alm de mostrarem maior rendimento celular, resultaram numa menor concentrao
de slidos residuais, o que diminui a demanda bioqumica de oxignio, causando
menos impacto ambiental.
Palavras-chave: Soro de Leite Bovino e Bubalino. Biomassa. Protena. Kluyve-
romyces marxianus.
SUMMARY
The milk whey is considered a byproduct of high nutritional value, comprising
approximately 4,6% lactose, 0,8% protein, 0,5% lipids, 0,5-0,8% of minerals and
0,2-0,8% of latic acid, when it is discarded in water can cause environmental da-
mage. Thus, the intention of this study is to produce microbial protein by Kluyve-
romyces marxianus 229 to evaluate the reduction of the pollution potential of such
byproduct. This study tested the infuence of different dilutions from bovine sweet
milk whey, bovine acid milk whey and whey from buffalo milk at the cell growth
and protein concentration. For this was made analysis of carbohydrates, protein,
Cleidiane Samara Murari*,
Danilo Vidotti,
Claudia Dorta,
Alda M. M. B. Otoboni
Faculdade de Tecnologia de
Marlia
*Correspondncia:
samaramurari@hotmail.com
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INTRODUO

O interesse por subprodutos industriais vem au-
mentando devido capacidade dos mesmos em serem
utilizados como substrato para produo de protena
microbiana, um produto com elevado valor nutricional.
Dentre os diversos subprodutos descartados pelas in-
dstrias pode-se citar o soro de queijo ou tambm cha-
mado soro de leite (CAZETTA e CELLIGOI, 2005).
Por muito tempo o soro de leite foi considerado um
produto de baixo valor comercial residual, hoje em dia
felizmente esta abordagem vem sendo abandonada
devido s suas protenas apresentarem excelentes pro-
priedades biolgicas, tecnolgicas e funcionais, sendo
o mesmo tratado cada vez mais como um subproduto
de alto valor agregado (TULLIO, 2007).
Bonato et al., (2006) defne o soro de leite como um
lquido opaco de colorao amarelo-esverdeado obtido
da precipitao e remoo das casenas do leite du-
rante a produo de queijo podendo ser esta por via
cida ou enzimtica. Este subproduto representa cerca
85% a 95% do volume de leite utilizado na produo
de queijo, retendo 55% dos seus nutrientes (ALMEIDA,
2004), sendo constitudo por aproximadamente 6,5%
de slidos totais, onde dentre os mesmos, cerca de
4,6% lactose, 0,8% de protena, 0,5% de gordura,
0,5% - 0,8% de matria mineral e 0,2% - 0,8% de cido
ltico (ANTUNES, 2003).
O soro um constituinte de grande importncia,
tanto pelo volume gerado nos laticnios, como pela sua
carga poluidora, que quando lanada em corpos recep-
tores dgua pode causar um grave problema ambien-
tal, sendo que aproximadamente 80% do volume do
leite destinado fabricao de queijos se transformam
em soro (SOUZA et al., 2005).
Dentre as difculdades encontradas para o aprovei-
tamento do soro pode-se citar que grande parte das
queijarias de pequeno porte, no dispondo de meios
econmicos e tecnolgicos para a implantao de um
sistema de tratamento do soro gerado, alm da falta de
recursos humanos qualifcados nas unidades produti-
vas (MENDES e ARAJO, 2003).
Segundo Ponsano et. al. (1992), o descarte do
soro de leite diretamente no solo conduz a srios
problemas como comprometimento da estrutura fsi-
co-qumica e diminuio do rendimento na colheita.
De acordo com Costa (2008), grande parte do soro
de queijo produzido em diversas partes do mundo
ainda incorporado s guas residuais dos latic-
nios, sendo assim uma das principais fontes polui-
doras gerada por esse setor.
O soro por apresentar alta Demanda Bioqumica
de Oxignio (DBO), torna-se altamente poluente (FA-
RIA et al., 2004).
minerals, lactic acidosis and pH of the supernatant checking the microbial growth
and adaptation in the substratum, the biomass produced by the yeast, analyzing
the intracellular protein and dry mass. The greatest achievement of the biomass
from acid milk whey was at the M1 (substratum undiluted), whereas in M2 (dilution
1:1) the concentration of whey was diluted twice, in fnal income, M2 increased by
37% cell concentration. After growing the yeast in bovine sweet whey, the cell con-
centration was higher in M3 (dilution 1:2) which showed a fnal income of 2.200 and
664% higher than M1 and M2, respectively. The substratum formulated with buffalo
sweet whey what resulted in increased biomass production was at the M3 (dilution
1:2). The substratum formulated with bovine sweet whey was what resulted in in-
creased biomass production when compared with other whey. The M3 formulated
with the same showed 4569% higher cellular production than the M3 of buffalo. The
production of intracellular protein by K. Marxianus 229 was similar in all substra-
tums. However, the M3 had higher biomass income, were the better production of
the same protein per liter was expressed. Thus, in substratum formulated with the
diluted whey showed increased cellular income and resulted in a lower concentra-
tion of solid waste, which reduced the biochemical oxygen demand, causing less
environmental impact.
Keywords: Bovine and Buffalo Milk Whey. Biomass. Protein. Kluyveromyces mar-
xianus.
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Segundo Domingues e Teixeira (1999) para cada li-
tro de soro so desperdiados cerca de 50g de lactose
que so fonte de material energtico para diversos pro-
cessos biotecnolgicos e 10g de protena com elevado
valor nutricional e funcional, que contm aminocidos
essenciais, portanto desta forma cria-se condies que
para se pensar num processo de valorizao do soro
com simultnea reduo.
Dentre as tecnologias disponveis para aproveitar o
soro de queijo, de acordo com Minas Ambiente (1998)
pode-se utiliz-lo na alimentao animal, como subs-
trato para a fermentao e pode-se empreg-lo tam-
bm em diversos produtos como iogurtes, sorvetes,
bebidas carbonatadas e alimentao infantil, no entan-
to mesmo com vrias alternativas de uso nas indstrias
de alimentos, vem se buscando solues mais simples
com baixo custo de melhor compatibilidade com a pre-
servao do meio ambiente para o tratamento do soro
descartado pelas indstrias (COSTA, 2008).
Outra aplicao vivel para aproveitamento deste
subproduto est voltada na produo de biomassa pro-
teica por microrganismos, a qual se refere ao crescimen-
to primrio destes com posterior recolhimento das clu-
las, sendo que estas so caracterizadas principalmente
pelo seu alto teor de protena (REFFATTI et al. 2007).
No caso do soro, esta pode ser uma das alterna-
tivas para diminuir seu potencial poluidor, utilizando
microrganismos que se adaptem ao mesmo, conver-
tendo assim a lactose em biomassa ou etanol atravs
da fermentao (CARMINATTI, 2001; RVILLION, et
al., 2000). Um dos microrganismos que pode ser em-
pregado pode ser a levedura Kluyveromyces marxianus
que de grande importncia industrial no s por cau-
sa das suas aplicaes tradicionais como produo de
biomassa e enzimas (PINHEIRO, 2004), mas tambm
por apresentar grandes vantagens por ser um produtor
ativo de galactosidase quando a lactose usada como
substrato. Ainda essa possui padro GRAS (Generally
Recognized as Safe), ou seja, trata-se de um microrga-
nismo seguro do ponto de vista da segurana alimentar
e sade pblica, (OGRODOWSKI, 2006).
Estudos realizados por Silveira (2006) mostram que a
Kluyveromyces marxianus alm de sintetizar bioprodu-
tos como enzimas hidrolticas, produzir biomassa para
indstria alimentcia, ribonucleotdeos e oligossacarde-
os, tambm oferecem vantagens no processo industrial
quanto velocidade de crescimento e alta atividade da
enzima -galactosidase.
Dessa forma, neste trabalho os soros de leite ci-
do e doce bovino e o doce bubalino foram usados em
diferentes concentraes para a produo de protena
microbiana por Kluyveromyces marxianus 229, alm de
avaliar a reduo do seu potencial poluidor.
MATERIAL E MTODOS
Material biolgico
Soro de leite cido bovino
Para a obteno do soro cido do leite bovino, o
pH do leite foi abaixado para 3,5 com cido sulfrico
(1 M) a uma temperatura de 35
o
C. Para garantir maior
padronizao dos experimentos o leite usado foi em p
integral (Batavo).
Soro de leite doce bovino
O soro doce foi obtido a partir da coagulao das
casenas do leite em p integral (Batavo) com coalho
vendido comercialmente (Estrella: quimosina) a 35
o
C.
Soro de leite doce bubalino
O soro doce bubalino foi obtido atravs da produo
do queijo tipo frescal no laboratrio de processamento
desta instituio. Para tanto, a coagulao do leite foi
feita com adio de coalho Estrella a 35
o
C.
Linhagem dos microrganismos
Foi utilizada a linhagem de levedura Kluyveromyces
marxianus 229 adquirida junto ao Departamento de Bio-
qumica e Microbiologia da UNESP de Rio Claro (SP).
Mtodos analticos: soro de leite bruto e soro de
leite fermentado
Anlise de protenas
A concentrao de protena do soro de leite foi feita
pelo mtodo de Lowry (HARTRE, 1972). A leitura foi fei-
ta em espectrofotmetro (FEMTO MOD 700S) a 650nm,
onde simultaneamente foi feita uma curva de calibrao
com diferentes concentraes de albumina bovina.
Anlise de carboidratos
Foi realizado atravs da tcnica de ADNS (cido 3,5-
dinitrossaliclico, (MILLER, 1959), a qual mede o teor de
acares redutores. Foi feita a curva de calibrao com
diferentes concentraes de lactose e a leitura em es-
pectrofotmetro (FEMTO MOD 700S) a 540nm.
Anlise de cinzas
A metodologia empregada foi a descrita no Manual
de Mtodos Fsico - Qumicos para Anlise de Alimentos
(Instituto Adolf Lutz 2005), que se fundamenta na perda

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A r t i g o

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que ocorre quando o produto incinerado em mufa a
500 - 550
com destruio da matria orgnica.

Anlise da demanda bioqumica de oxignio (DBO)
A anlise da DBO foi realizada pelo LACI labora-
trio de Anlises Qumicas, Microbiolgicas e Controle
Industrial, seguindo Standart Methods 21th Edition:
2005. Tal anlise foi realizada apenas nos experimentos
realizados com o soro doce de leite bovino.
Obteno de biomassa de levedura
Cultivo da levedura
Aps a obteno dos soros com posterior fltrao
dos mesmos, correo do pH para 3,5 e preparao
dos meios de cultivo em diferentes diluies (1, 2 e 3
vezes), foi feita a esterilizao destes em autoclave a
121C por 10 minutos, seguida de inoculao das leve-
duras. De acordo com Ogrodowski (2006), o pH do soro
numa faixa de 3,5 necessrio para evitar-se a reao
de Maillard que pode ocorrer durante a esterilizao.
Assim, no atual trabalho os soros obtidos tiveram o pH
ajustado para 3,5. Exceto, nos meios formulados com
soro de leite doce bubalino os quais passaram por tra-
tamento trmico em banho-maria a 72C por 10 minu-
tos obtendo-se melhor resultado.
A levedura Kluyveromyces marxianus 229 foi cultiva-
da em 500 mL de soro de leite nas seguintes concentra-
es: sem diluio (Meio 1), diluio 1:1 (Meio 2) e 1:2
(Meio 3), a 28C por 24h. Aps o trmino da fermenta-
o a biomassa formada foi separada do sobrenadante
por centrifugao (1000g por 20 minutos). Nos meios
formulados com soro cido de leite bovino, foram usa-
das apenas duas diluies (1 e 2 vezes).
Contagem de microrganismos
A contagem do inculo inicial foi realizada atravs
de plaqueamento em superfcie em meio PCA.
A contagem das clulas aps o cultivo em soro de
leite foi realizada atravs da tcnica de cmara de Neu-
bauer.
Protena intracelular biomassa
Kjeldahl Modifcado. Metodologia de ANFAR (Mto-
dos Analticos de Controle de Alimentos para uso Ani-
mal, 1992), adaptada pelo mtodo de Kjeldahl modif-
cado (Instituto Adolf Lutz, 2005).
Biomassa seca
A metodologia empregada foi a descrita AOAC
(Association of Analytical Chemistry, Offcial Methods
of Analysis), na qual aps a centrifugao a 1000 g e
lavagem do fermento, este foi colocado em placas de
Petri e levado at a estufa, a 105C, at atingir massa
constante.
Anlise estatstica
Os experimentos foram realizados em triplicata. Os
dados amostrais foram submetidos anlise de varincia
(ANOVA) e as mdias comparadas pelo teste de Tukey
e Kramer atravs do programa GRAPHPAD INSTAT (Ru-
tgers University, Camden, New Jersey). Os tratamentos
foram considerados signifcativos para p < 0,05.
RESULTADOS E DISCUSSO
Anlises fsico-qumicas dos soros de leite
A Tabela 1 mostra que o pH para obteno do soro
cido foi abaixo do encontrado pela literatura, a qual
indica em torno de 4,6. Isto pode ter ocorrido por cau-
sa do processo trmico que o leite em p sofre (spray
drying), o que pode ter levado a desnaturao parcial
de algumas de suas protenas, sobretudo as k- case-
nas que se apresentam na poro externa das micelas
(estrutura quaternria das protenas do leite) ligadas por
fosfato de clcio e gua, sendo a mesma muito impor-
tante para a produo de queijo, e consequentemente
criando a necessidade de uma maior adio de cido
para a coagulao do leite (Antunes, 2003). J o pH dos
soros doce bovino e bubalino, apresentaram-se igual a
6, 0, que o encontrado para tal tipo de soro.
O teor de cinzas no soro cido foi 30% maior (Tukey,
p<0,05) que a encontrada no soro doce bovino, isto
provavelmente ocorreu, pois seu mtodo de obteno
proporcionou uma menor reteno dos minerais no
cogulo de casena formado e, como consequncia,
maior teor de minerais no soro. Resultado semelhante
foi discutido por Rvillion et al. (2000).
Parmetros
Soro cido
Bovino
Soro Doce
Bovino
Soro Doce
Bubalino
pH inicial 3,5 0,10 6,0 0,10 6,0 0,10
Protena 1,70% 1,00 5,00% 1,00 1,50% 1,00
Carboidrato 3,10% 0,55 4,60% 0,34 3,10% 0,57
Cinzas 1,10% 0,30 0,77% 0,02 1,60% 0,20
Tabela 1. Caracterizao da composio mdia dos diferentes
tipos de soro obtidos antes da fermentao

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O soro doce bovino apresentou um teor de cinzas
que condiz com a literatura, pois esta afrma que o mes-
mo fca em torno de 0,5% a 0,8%. No soro doce buba-
lino, a concentrao de cinzas apresentada foi 100%
maior do que no bovino. Segundo Rocha (2008), o leite
de bfala possui teor de minerais como clcio e mag-
nsio maior do que o leite bovino, o que pode interferir
no teor de cinzas do soro.
Em relao concentrao de carboidratos mdia, to-
dos os soros estudados apresentaram-se de acordo com
literatura, na qual cita o teor de carboidratos de aproxima-
damente 4,6% (CARMINATTI, 2001). No houve diferena
signifcativa entre os mesmos (Tukey, p>0,05).
A concentrao proteica do soro de leite doce bu-
balino mostrou-se prxima a encontrada pela litera-
tura. De acordo com os estudos de Rocha (2008), ao
caracterizar o soro de leite bubalino este obteve uma
concentrao de 2,01% de protenas. Lira (2007) en-
controu 1,19% de protenas no soro doce bubalino. J
enquanto a concentrao de protenas caracterizadas
nos soros de leite bovino, Teixeira e Fonseca (2008) em
seu trabalho caracterizaram o mesmo com 0,8% de
protenas. Esta concentrao proteica foi 84% menor
que a encontrada no atual trabalho (Tukey, p<0,05). Tal
diferena pode ser devido ao soro ter sido obtido de um
leite em p, o qual j processado, e pode haver maior
perda de protenas no soro.
Cultivo de Kluyveromyces marxianus 229 em
meios formulados com soro cido de leite bovino
A Figura 1 mostra o consumo mdio de protena por
Kluyveromyces marxianus 229 aps a fermentao em dois
tipos de meios de cultivo. A levedura consumiu 84,94% e
52,44% de protena do M1 e M2, respectivamente.
A Figura 2 mostra o consumo mdio de carboidra-
tos realizado pela levedura Kluyveromyces marxianus
229, na qual aps a fermentao, a mesma consumiu
98,53% de substrato do meio de cultivo denominado
M1 e 97,66% do M2, o que no representou uma dife-
rena signifcativa entre os meios (Tukey, p>0,05).
O teor de mdio de cinzas nos meios de cultivo es-
tudados, onde aps a fermentao, o M1 reduziu sua
concentrao de minerais em 27,27%, j o M2 reduziu
em 5,45%, representando uma diferena signifcativa
para ambos os resultados (Tukey, p<0,05) (Figura 3).
Figura 1. Concentrao mdia de protenas do sobrenadante de meios formulados com soro cido de leite bovino. M1to = sobrenadante do meio
no diludo no tempo zero de fermentao. M1= sobrenadante do meio no diludo aps 24h de fermentao. M2to
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M1 to M1 M2 to M2
0
0,25
0,5
0,75
1
1,25
1,5
1,75
2
2,25
2,5
2,75
3
3,25
Meios de Cultivo
C
o
n
c
e
n
t
r
a
o

d
e

C
a
r
b
o
i
d
r
a
t
o
s

(
%
)
Figura 2. Concentrao mdia de carboidratos do sobrenadante de meios formulados com soro cido de leite bovino. M1to = sobrenadante do
meio no diludo no tempo zero de fermentao. M1= sobrenadante do meio no diludo aps 24h de fermentao. M2to= sobrenadante do meio
diludo no tempo zero de fermentao. M2 = sobrenadante do meio diludo aps 24h de fermentao
Figura 3. Teor de cinzas do sobrenadante dos meios formulados com soro cido de leite bovino. M1to = sobrenadante do meio no diludo no
tempo zero de fermentao. M1= sobrenadante do meio no diludo aps 24h de fermentao. M2to = sobrenadante do meio diludo no tempo
zero de fermentao. M2 = sobrenadante do meio diludo aps 24h de fermentao

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O crescimento celular da levedura em ambos meios
de cultivo resultou em aumento de 2,19 e 2,16 ciclos
logartmicos para o M1 e o M2, respectivamente (Figura
4), o que no representou uma diferena signifcativa
para o crescimento da levedura em ambos meios de
cultivo (Tukey, p>0,05) em diferentes diluies.
O cultivo de K. marxianus 229 nos meios M1 e M2
no resultou em diferenas signifcativas no nmero de
clulas por mL (Tukey, p>0,05), protena intracelular e
biomassa seca (Figura 4 e Tabela 2). Entretanto, no M1
houve maior consumo de carboidrato e protena. Este
resultado pode ser resultante da maior presso osm-
tica e acidez desse meio, o que gerou maiores gastos
energticos com manutenes fsiolgicas e metab-
licas da levedura, desviando parte do carboidrato e
protena que seriam convertidos em biomassa para a
produo de ATP.
Tais meios de cultivo tambm no apresentaram dife-
renas signifcativas (Tukey, p>0,05) em termos de produ-
tividade de biomassa e produtividade protica, no entanto,
o meio M2 foi duas vezes diludo, ou seja, o mesmo havia
a metade da concentrao de nutrientes do soro de leite
presente no meio M1, mostrando maior rendimento.
Cultivo de Kluyveromyces marxianus 229 em Meios
Formulados com Soro Doce de Leite Bovino
A Figura 5 mostra o consumo mdio de protena por
Kluyveromyces marxianus 229 aps a fermentao em trs
tipos de meios de cultivo. A levedura consumiu 79,66%,
93,06% e 91,33% de protena do M1, M2 e M3, respecti-
vamente. O consumo de protena em M2 e M3 foi signif-
cativamente maior (Tukey, p<0,05) do que no M1.
Tabela 2. Produtividade de biomassa e de protena obtida de K.
marxianus 229 aps o cultivo em soro cido de leite bovino
Biomassa M1 M2
Produtividade de
Biomassa (g/L)
31,1 1,10 32 0,95
Produtividade
Protena (g/L)
8,93 1,00 9,17 0,95
Protena
Intracelular (%)
28,44 1,00 28,66 0,89
Massa Seca (%) 25,65 1,00 25,45 0,97
Figura 4. Mdia do nmero de clulas microbianas dos meios formulados com soro cido de leite bovino

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A Figura 6 mostra o consumo de carboidratos m-
dio realizado pela levedura Kluyveromyces marxianus
229. Aps a fermentao, a mesma consumiu 87,7% de
substrato do meio de cultivo M1, 93,8% no M2 e 96,8%
no M3. Dessa forma, houve maior consumo do substrato
(lactose) no meio M3, ou seja, o meio que foi mais dilu-
do, sendo esta diferena signifcativa (Tukey, p< 0,05).
O teor mdio de cinzas nos meios de cultivo estu-
dados, onde aps a fermentao, o M1 aumentou sua
concentrao de minerais em 68,8%, j o M2 aumentou
em 129% na concentrao de teor de cinzas, e o M3
apresentou um aumento em 98%, com uma diferena
signifcativa (Tukey, p<0,05) entre os trs meios quando
comparados entre os mesmos (Figura 7).
A Figura 8 mostra a mdia do crescimento do nme-
ro de clulas microbianas pela levedura Kluyveromyces
marxianus 229. De acordo com a fgura, o meio que
apresentou maior crescimento foi o M3 chegando a
3,52 ciclos logartmicos, resultando em uma diferena
estatstica signifcativa (Tukey, p<0,05) quando compa-
rado com os outros soros testados. Entretanto, a maior
produtividade de protenas e de biomassa pela levedu-
Tabela 3. Produtividade de biomassa seca e de protena obtida de K.
marxianus 229 aps o cultivo em soro doce de leite bovino
Figura 5. Concentrao mdia de protenas do sobrenadante de meios formulados com soro doce de leite bovino. M1to = sobrenadante do meio
no diludo no tempo zero de fermentao. M1= sobrenadante do meio no diludo aps 24h de fermentao. M2to = sobrenadante do meio
diludo no tempo zero de fermentao. M2 = sobrenadante do meio diludo aps 24h de fermentao. M3to= sobrenadante do meio diludo no
tempo zero de fermentao. M3= sobrenadante do meio diludo aps 24h de fermentao
ra foi o apresentado pelo meio de cultivo M2 (Tabela
3), representando aumento signifcativo de 146,6% e
138,4%, respectivamente (Tukey, p<0,05), quando
comparado com o M3. Esta diferena pde ser justif-
cada pelo menor inculo inicial ocorrido no M3 (Figura
8). Ainda assim, este meio resultou em um crescimento
celular de 2200 e 644% maior que M1 e M2, respecti-
vamente. Considerando que M3 foi o meio mais diludo,
o aumento celular corresponde a 6817% quando com-
parado com o M1.
Biomassa M1 M2 M3
Produtividade de
Biomassa (g/L)
32 1,52 37 1,00 15 1,05
Produtividade
Protena (g/L)
7,36 0,99 10,73 1,29 4,5 1,00
Protena
Intracelular (%)
23 1,00 29 1,00 30 1,05
Massa Seca (%) 23,86 1,02 23,36 1,01 24,34 0,99
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Figura 6. Concentrao mdia de carboidratos do sobrenadante de meios formulados com soro doce de leite bovino. M1to = sobrenadante do
meio no diludo no tempo zero de fermentao. M1= sobrenadante do meio no diludo aps 24h de fermentao. M2to = sobrenadante do meio
Figura 7. Teor mdio de cinzas do sobrenadante dos meios formulados com soro doce de leite bovino. M1to = sobrenadante do meio no diludo
no tempo zero de fermentao. M1= sobrenadante do meio no diludo aps 24h de fermentao. M2to= sobrenadante do meio diludo no tempo
zero de fermentao. M2 = sobrenadante do meio diludo aps 24h de fermentao. M3to= sobrenadante do meio diludo no tempo zero de
fermentao. M3= sobrenadante do meio diludo aps 24h de fermentao

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Cultivo de Kluyveromyces marxianus 229 em
meios formulados com soro doce de leite
bubalino
A Figura 9 mostra o aumento mdio de protena que
ocorreu nos meios de cultivo na presena da levedura
Kluyveromyces marxianus 229 aps a fermentao dos
trs tipos de meios de cultivo de soro bubalino. A leve-
dura aumentou a concentrao de protenas em 268%
no M1, em 100% no M2 e 75,5% no M3.
Existiu aumento de 22,5% da concentrao mdia
de acares redutores aps o cultivo da levedura no
M1 e de 10,2% no M3 (Figura 10), podendo ser ind-
cio de que a levedura tenha sofrido estresse osmtico,
levando a perda de acar citoplasmtico com a sa-
da de gua da clula, onde o metabolismo da mesma
fca diminudo como resultado desta perda. Por outro
lado tambm pode ter ocorrido danos na membrana ci-
toplasmtica havendo perda de nutrientes (PELCZAR
et al., 1997). Alguns microrganismos excretam substn-
cias para evitar a sada de gua do citoplasma, o que
pode ter ocorrido tambm em tal situao.
A Figura 11 representa o teor mdio de cinzas nos
meios de cultivo estudados. O cultivo do microrganis-
mo no M1 reduziu deste a concentrao de minerais
em 37,5% e no M3 em 43,3%, sendo estas diminuies
signifcativas (Tukey, p<0,05).
A Figura 12 mostra o crescimento microbiano dos trs
meios de cultivos estudados no soro doce bubalino. Assim
como no soro doce de leite bovino, os meios de cultivo
formulados com o soro bubalino tambm apresentaram
maior crescimento no M3, com um aumento de 1,85 ciclos
logartmicos, sendo este signifcativo (Tukey p<0,05) quan-
do comparado com os meios M1 e M2.
Figura 8. Mdia do nmero de clulas microbianas dos meios formulados com soro doce bovino
Tabela 4. Produtividade de biomassa seca e de protena obtida de K. marxianus 229 aps o cultivo em soro doce de leite bubalino
Biomassa M1 M2 M3
Produtividade de Biomassa (g/L) 0,9 0,10 2,9 1,00 5,8 1,00
Produtividade Protica (g/L) 0,29 0,02 0,93 0,03 1,78 0,60
Protena Intracelular (%) 32,34 0,93 32,17 1,10 30,7 1,05
Massa Seca (%) 19,47 1,10 19,87 1,10 25,28 0,98

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Figura 9. Concentrao mdia de protenas do sobrenadante de meios formulados com soro doce de leite bubalino. M1to = sobrenadante do
Figura 10. Concentrao mdia de carboidratos do sobrenadante de meios formulados com soro doce de leite bubalino. M1to = sobrenadante do
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Em termos de produtividade proteica, de biomassa
e crescimento microbiano (Figura 12 e Tabela 4), o meio
de cultivo M3 foi o que apresentou melhores resulta-
dos (Tukey, p<0,05) quando comparado com os outros.
Como citado anteriormente o soro doce de leite buba-
lino exerceu presso osmtica sobre a levedura, assim
num meio mais diludo era esperado maior crescimento
e produtividade de biomassa.
Comparao da produtividade protica
e de biomassa pela levedura Kluyveromyces
marxianus 229
Dentre os trs tipos de soros estudados em diferen-
tes diluies, observou-se que em termos de produti-
vidade proteica, de biomassa e de crescimento celular,
o soro doce de leite bovino foi o que apresentou re-
sultados mais satisfatrios quando comparado com os
demais (Tukey p<0,05), j que o mesmo obteve produti-
vidade de biomassa de 37 g/L e produtividade proteica
de at 10,73 g/L (Tabela 3).
O meio de cultivo do soro doce bovino quando com-
parado com o do soro doce bubalino resultou na maior
produo celular da levedura K. Marxianus 229 de at
4.569%. J em termos de produtividade proteica e de
biomassa, o meio com soro doce bovino apresentou
83,41% e 84,32%, respectivamente, maior que o bu-
balino nos meios mais diludos. Esta diferena pode
ser justifcada pela maior presso osmtica ocorrida no
soro doce bubalino como comentada anteriormente.
Pinheiros (2004) em seu trabalho sobre o efeito da
presso osmtica na fsiologia de leveduras, ao testar
o crescimento da levedura Kluyveromyces marxianus
ATCC 10022 sobre microarejamento, em soro de leite
que continha 4 g de lactose por litro, obteve um rendi-
mento de biomassa de aproximadamente 31,6 g/L. Tal
resultado no diferenciou muito dos encontrados nos
soros cido e doce de leite bovino do presente trabalho
em termos de rendimento.
Ogrodowski (2006) ao avaliar a produo de biomas-
sa em soro de queijo para obteno de ribonucleotdeos,
por Candida utilis CCT3469, Bacillus subtilis CCT0534,
Kluyveromyces marxianus CCT4294 e Saccharomyces
cerevisiae, obteve menor produo de biomassa: 3,0
g.L
-1
, 4,23g.L
-1
, 8,6g.L
-1
e 7,9g.L
-1
, respectivamente,
para cada microrganismo estudado. Entretanto, o pes-
Figura 11. Teor mdio de cinzas do sobrenadante dos meios formulados com soro doce de leite bubalino M1to = sobrenadante do meio no
diludo no tempo zero de fermentao. M1= sobrenadante do meio no diludo aps 24h de fermentao. M2to = sobrenadante do meio diludo no
tempo zero de fermentao. M2 = sobrenadante do meio diludo aps 24h de fermentao. M3to= sobrenadante do meio diludo no tempo zero de
fermentao. M3= sobrenadante do meio diludo aps 24h de fermentao

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quisador utilizou 15% (p/v) de soro de queijo desidrata-
do para realizao dos testes, sendo estas condies
diferentes do apresentado no atual trabalho (soro a 33 a
100% p/v). J Sabra et al. (2003) em seu trabalho sobre
produo de biomassa por Kluyveromyces marxianus
com soro de leite sem diluio e suplementado com
alguns nutrientes obteve um rendimento mximo de
biomassa aps 12 horas de cultivo de 9,6 g/L.
Em relao produtividade proteica da biomassa,
Terra et al., (1974) em seu trabalho realizado sobre a
caracterizao da composio da biomassa formada
por Kluyveromyces fragilis em soro de leite in natura
sem tratamento, obteve um valor de 53,06 g/100g de
protena da biomassa produzida por tal levedura. No
atual trabalho, a converso proteica foi 43% menor do
que a citada chegando a 30g/100g de biomassa seca
(M3) (Tabela 3).
De acordo com os testes realizados nos meios for-
mulados com o soro diludo, esses, alm de mostrarem
maior rendimento celular, resultaram numa menor con-
centrao de slidos residuais pela levedura Kluyve-
romyces marxianus 229, o que consequentemente
diminui a demanda bioqumica de oxignio, podendo
levar a menor impacto ambiental por este subproduto.
Para confrmar esta tendncia realizou-se a anlise de
DBO dos sobrenadantes dos meios de cultivo elabora-
dos com soro de leite bovino (Tabela 5).
Tabela 5. Anlise da demando bioqumica de oxignio do soro doce
de leite bovino
Amostra DBO (mg/L
Soro Bruto 38632,4
M1 21816,0
M2 19712,0
M3 18494,5
A DBO diminuiu de acordo com a diluio dos meios,
chegando no M3 a uma reduo de at 52,12% quando
comparado com o soro bruto.
CONCLUSO
A levedura Kluyveromyces marxianus 229 em meios
de cultivo formulados com os diferentes tipos de soro
de leite apresentou crescimento celular satisfatrio,
sendo que conforme foram sendo diludos, os meios
apresentaram melhor rendimento protico e de biomas-
sa, assemelhando-se com os resultados apresentados
pela literatura.
O melhor meio de cultivo para obteno da biomas-
sa de K. marxianus 229 testado, foi o M3 (diluio 1:2)
formulado com soro de leite doce bovino, mostrando
maior consumo de carboidratos e protenas, alm de
apresentar menor DBO aps o crescimento.
Figura 12. Mdia do nmero de clulas microbianas dos meios formulados com soro doce bubalino
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R E f E R N C I A S
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Estadual de Campinas, 2004.
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W e PREGNOLATTO, N. P., Normas Analticas do Insttuto Adolfo Lutz, So Paulo, 1995.
ANTUNES, A. J. Funcionalidade de Protenas do soro de leite Bovino, Editora Manole, pag. 22, 2003.
AOAC - Association of Offcial Analytical Chemistry. offcial methods of analysis of the association of analytical chemists. 15. ed.
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A r t i g o

Fevereiro/Maro 2011

N 51
RESUMO
Estudos de validao de mtodos constituem uma ferramenta fundamental na implantao
e manuteno de Boas Prticas de Fabricao em indstrias farmacuticas, bem como em
sistemas de gesto da qualidade de laboratrios de diversas reas analticas. Tais estudos
so estruturados tendo como referncias guias e documentos orientadores publicados na-
cional e internacionalmente. Considerando a existncia de divergncias entre as recomen-
daes, este trabalho apresenta uma anlise comparativa do guia da ANVISA com o guia
harmonizado pela AOAC Internacional/ISO/IUPAC e o documento do INMETRO. Os aspec-
tos considerados foram os principais guias existentes, quando validar, quais parmetros
estudar, abrangncia da validao, terminologia e defnies, delineamento experimental,
anlise estatstica dos dados e critrios de aceitabilidade.
Palavras-chave: Validao de Mtodos. Guias. ANVISA. INMETRO. AOAC Internacional/
ISO/IUPAC.
SUMMARY
Validation studies are a fundamental tool to the Good Manufacturing Practices in the phar-
maceutical manufacturing, such as to the systems of quality assurance of the laboratories
from all areas of analysis. These studies are structured using guidelines published national
and internationally as references. Considering the divergences between the recommenda-
tions, this paper presents a comparison between the ANVISA guideline with the AOAC Inter-
national/ISO/IUPAC and the INMETRO protocols. The considered aspects were the existing
guidelines, when the validation is necessary, what parameters need to be studied, the extent
of validation studies, terminology and defnitions, experimental design, statistical analysis of
the data and acceptability criteria.
Keywords: Method Validation. Guidelines. ANVISA. INMETRO. AOAC International/ISO/
IUPAC.
Ana Cristina Monteiro Bernardes
1

e Scheilla Vitorino C. de Souza
2*
Centro Universitrio Newton
Paiva, Belo Horizonte. MG
2
Faculdade de Farmcia da
UFMG
*Correspondncia:
scheilla@bromatologiaufmg.com.br
A r t i g o
ANLISE COMPARATIVA DO GUIA PARA VALIDAO DE
MTODOS ANALTICOS PROPOSTO PELA ANVISA (RE N
O
899
DE 2003) COM O DOCUMENTO ORIENTATIVO DO INMETRO
E O PROTOCOLO INTERNACIONAL HARMONIZADO PELA
AOAC INTERNACIONAL, ISO E IUPAC
INTRODUO
As Boas Prticas de Fabricao (BPF) constituem parte da
Gesto da Qualidade que assegura que os produtos so consis-
tentemente produzidos e controlados, com padres de qualida-
de apropriados para o uso pretendido e requerido pelo registro.
Os estudos de validao constituem uma ferramenta essencial
das BPF, ressaltando-se a validao dos processos, dos mto-
dos analticos de controle e dos procedimentos de limpeza (1).
A validao a comprovao, pelo fornecimento de evi-
dncia objetiva de que os requisitos para uma aplicao ou
uso especfco pretendido so atendidos (2). A validao de
mtodos analticos tem por fnalidade garantir, por meio de
estudos experimentais, que a metodologia atenda s exign-
cias das aplicaes analticas, assegurando a confabilidade
dos resultados (3).
A validao de mtodos por procedimentos interlaborato-
riais, organizada na forma de estudos colaborativos, confor-
me preconizado no protocolo harmonizado pela Association
of Offcial Analytical Chemists (AOAC Internacional) (4,5), In-
ternational Standards Organization (ISO) e International Union
of Pureand Applied Chemistry (IUPAC) (6) considerada por

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N 51
muitos como um padro ouro de validao ou como a vali-
dao completa (7,8). Entretanto, muitas vezes estes estudos
podem no ser praticveis ou mesmo necessrios, alm de
nem sempre serem sufcientes para demonstrar adequao
ao propsito de uso (ftness for purpose) de um mtodo (8,9).
Procedimentos de validao intralaboratoriais tm sido in-
ternacionalmente aceitos, uma vez que diferentes organismos
ofciais tm proposto protocolos para este tipo de validao,
por exemplo, United States Foodand Drug Administration
(FDA), United States Pharmacopeia (USP), International Con-
ferenceon Harmonization (ICH) (10); EURACHEM (11); AOAC
Internacional, ISO e IUPAC (9); Agncia Nacional de Vigilncia
Sanitria (ANVISA) (3) e Instituto Nacional de Metrologia, Nor-
malizao e Qualidade Industrial (INMETRO) (12).
O guia harmonizado pela AOAC Internacional, ISO e IU-
PAC (9) para validao intralaboratorial de mtodos constitui
a referncia que representa o consenso internacional neste
assunto. A Resoluo - RE N 899 Guia para Validao de
Mtodos Analticos e Bioanalticos da ANVISA (3), publicada
em 29 de maio de 2003, representa uma referncia signifca-
tiva, pois regulamenta os estudos de validao de metodolo-
gia analtica nos laboratrios das indstrias farmacuticas do
Brasil. Outro relevante documento nacional que trata sobre
este assunto a Orientao sobre Validao de Mtodos de
Ensaios Qumicos publicada pelo INMETRO (12).
Como a implantao e manuteno de sistemas de gesto
da qualidade em laboratrios da rea farmacutica, bem como
de outros segmentos, requer procedimentos para validao de
mtodos adequadamente estruturados, uma anlise crtica das
referncias disponveis de extrema relevncia, principalmente
porque, em muitos aspectos, os apontamentos feitos nos dife-
rentes guias no esto harmonizados ou so discordantes.
O objetivo do presente trabalho foi realizar uma anlise
comparativa do guia da ANVISA (3) com o guia harmoniza-
do pela AOAC Internacional, ISO e IUPAC (9) e documento
do INMETRO (12), com apontamentos dos impactos destas
diferenas sobre os processos de validao, incluindo aspec-
tos sobre quando validar, quais parmetros de desempenho
estudar, abrangncia dos processos de validao, como deli-
near os experimentos e analisar os resultados.
PRINCIPAIS PROTOCOLOS
As principais referncias, nacionais e internacionais, rela-
cionadas validao de mtodos analticos esto apresenta-
das na Tabela 1.
QUANDO VALIDAR
Na ISO/IEC 17025 est estabelecido que mtodos normali-
zados utilizados fora dos escopos para os quais foram conce-
bidos, ampliados ou modifcados; mtodos no normalizados; e
mtodos criados ou desenvolvidos pelos laboratrios devem ser
validados. Apesar da necessidade de uma validao completa
para mtodos normalizados no ser tratada, nesta norma existe
o requisito que os laboratrios devem confrmar que tm condi-
es de operar adequadamente os mtodos normalizados antes
da implantao dos ensaios na rotina (14).
Considera-se mtodos normalizados aqueles desenvolvi-
dos por um organismo de normalizao ou outras organizaes,
Tabela 1. Panorama dos principais guias relacionadas a processos de validao de mtodos intra e interlaboratoriais e respectivos rgos emitentes
s
Assunto rgo emitente Ttulo Referncia
V
a
l
i
d
a
o

i
n
t
r
a
l
a
b
o
r
a
t
o
r
i
a
l
United States Food and Drug Administration (FDA), United
States Pharmacopeia (USP), International Conference on
Harmonization (ICH)
Validation of analytical procedures: methodology 10
EURACHEM Working Group. A Focus for
Analytical Chemistry in Europe
The ftness for purpose of analytical methods, a
laboratory guide to method validation and related topics
11
Association of Offcial Analytical Chemists (AOAC
Internacional), International Standards Organization (ISO) e
International Union of Pure and Applied Chemistry (IUPAC)
Harmonized guidelines for single-laboratory validation
of methods of analysis
9
Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria (ANVISA)
Resoluo RE N 899 Guia para Validao de
Mtodos Analticos e Bioanalticos
3
Instituto Nacional de Metrologia, Normalizao e Qualidade
Industrial - Brasil (INMETRO)
DOQ-CGCRE-008. Orientaes sobre
validao de mtodos analticos
12
V
a
l
i
d
a
o

i
n
t
e
r
l
a
b
o
r
a
t
o
r
i
a
l Association of Offcial Analytical Chemists
(AOAC International)
Statistical manual of the AOAC. Statistical techniques
for collaborative tests
4
International Standards Organization (ISO)
ISO 5725. Accuracy (trueness and precision) of
measurement methods and results
13
Association of Offcial Analytical Chemists (AOAC
International), International Standards Organization (ISO) e
International Union of Pure and Applied Chemistry (IUPAC)
Protocol for the design, conduct and interpretation of
method-performance studies
6
Association of Offcial Analytical Chemists
(AOAC International)
AOAC Offcial methods of analysis. Appendix D:
guideline for collaborative study procedures to
validate characteristics of a method of analysis
5
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cujos mtodos sejam aceitos pelo setor tcnico em questo. M-
todos no normalizados so aqueles desenvolvidos pelo prprio
laboratrio ou outras partes ou adaptados a partir de mtodos
normalizados e validados (15). Neste contexto, assume-se que
os mtodos designados como normalizados tenham sido sub-
metidos a validaes prvias por estudos colaborativos (16). Fre-
quentemente, isto procede, visto que a escolha de um mtodo
como ofcial baseada em resultados obtidos de estudos cola-
borativos (17).
Segundo o guia AOAC Internacional, ISO e IUPAC (9), quando
o laboratrio utiliza um mtodo totalmente validado, ou seja, um
mtodo que tenha sido validado em procedimentos interlaborato-
riais, o laboratrio deve verifcar que capaz de alcanar as carac-
tersticas de performance publicadas no mtodo, com estudos de
linearidade, exatido (com variao de matriz) e preciso.
No documento orientador do INMETRO (12) tambm tra-
tada a necessidade de validao quando um mtodo existente
for modifcado para atender a requisitos especfcos ou quando
um mtodo totalmente novo for desenvolvido, alm da necessi-
dade de demonstrao de que o laboratrio tem condies de
operar de maneira adequada mtodos normalizados, dentro das
condies especfcas existentes em suas instalaes antes de
implant-los. No caso de mtodos normalizados, o estudo de al-
guns parmetros fca dispensado desde que estejam declarados
nos mtodos em questo.
Contudo, na RE N
o
899 da ANVISA (3), considerado que
no caso de metodologia analtica descrita em farmacopeias ou
formulrios ofciais, devidamente reconhecidos pela ANVISA, a
metodologia considerada validada. Tal apontamento pode dar
margem interpretao equivocada de que nenhum estudo de
implantao necessrio nestes casos.
QUAIS PARMETROS ESTUDAR
O processo de validao demanda uma deciso sobre
quais parmetros de desempenho precisam ser avaliados (11).
JENKE (18) avaliou a frequncia dos parmetros de desempe-
nho relacionados a processos de validao em publicaes de
mtodos das reas governamental, industrial e acadmica. Os
parmetros mais frequentes foram exatido e preciso, segui-
dos de seletividade, linearidade, limite de quantifcao, limite de
deteco, robustez e sensibilidade. Este autor argumentou que
a excluso dos parmetros mais frequentemente aplicados nos
protocolos de validao, como exatido e preciso, implicaria na
necessidade de justifcativas pertinentes, enquanto a excluso
de parmetros menos frequentes, como sensibilidade, seria me-
nos controversa.
Na Tabela 2 est apresentada a variabilidade dos parme-
tros de desempenho recomendados para processos de valida-
o intralaboratoriais nos guias da AOAC Internacional, ISO e
IUPAC (9), INMETRO (12) e ANVISA (3).
Os parmetros comuns aos documentos analisados so line-
aridade, faixa ou intervalo, seletividade, exatido, preciso, limite
de deteco, limite de quantifcao e robustez.
Tabela 2. Parmetros de desempenho previstos no guia harmonizado pela AOAC Internacional, ISO e IUPAC
9
, no documento orientativo do
INMETRO
12
e no guia da ANVISA
3
Parmetro de
desempenho
Guia harmonizado pela AOAC
Internacional, ISO e IUPAC (2002)
Documento orientativo do
INMETRO (2007)
Guia da ANVISA
(2003)
Aplicabilidade Sim No No
Seletividade
1
Sim Sim Sim
Linearidade
2
Sim Sim Sim
Exatido
3
Sim Sim Sim
Preciso Sim Sim Sim
Faixa ou Intervalo
4
Sim Sim Sim
Limite de deteco Sim Sim Sim
Limite de quantifcao
5
Sim Sim Sim
Sensibilidade
6
Sim Sim Sim
Robustez Sim Sim Sim
Adequao ao propsito Sim No No
Variao de matriz Sim No No
Incerteza de medio Sim No No
1
No guia da ANVISA, os termos seletividade e especifcidade so tratados de forma inapropriada como sinnimos. Neste documento o termo
especifcidade utilizado erroneamente no contexto da validao.
2
No guia internacional, este parmetro tratado como linearidade e calibrao.
3
No documento do INMETRO, os termos utilizados so tendncia/recuperao com a nota que a exatido avaliada numericamente pela tendncia.Os trs
documentos tratam recuperao em conjunto com a estimativa da exatido, embora o guia internacional destaque este parmetro.
4
No guia da ANVISA, o termo adotado intervalo, enquanto no do INMETRO so apresentados faixa de trabalho e faixa linear, devidamente distinguidos.
5
No guia internacional, este parmetro tambm tratado como limite de determinao.
6
No guia da ANVISA, o termo sensibilidade tratado como sinnimo de limite de deteco e no como um parmetro independente. No
documento do INMETRO, este parmetro adequadamente associado ao parmetro linearidade.

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O parmetro robustez frequentemente considerado fora do
processo de validao, como parte de estudos de desenvolvi-
mento do mtodo (10,11). Assim, o estudo da robustez em pro-
cessos de validao somente considerado necessrio quando
os limites para os parmetros experimentais e seus respectivos
desvios permitidos no forem previamente estabelecidos (9). De
qualquer forma, a robustez importante para fornecer informa-
es sobre o efeito de parmetros experimentais signifcativos
para a estimativa da incerteza (19).
No guia harmonizado pela AOAC Internacional, ISO e IU-
PAC (9)so recomendadas ainda a estimativa da sensibilidade e
da incerteza da medio. O documento do INMETRO (12) trata
sensibilidade. Estes parmetros no so considerados no guia
da ANVISA (3).
Apesar do parmetro sensibilidade ser citado no guia harmo-
nizado (9), este no considerado por seus autores como fun-
damental para a validao, visto que se trata de um parmetro
arbitrrio que depende de ajustes no instrumento de medio.
Na ISO/IEC 17025 (14),a necessidade da estimativa da
incerteza apresentada no contexto de mtodos de ensaio,
mas no como um parmetro de desempenho em processos
de validao. Nesta norma considerado que uma estima-
tiva razovel da incerteza deve estar baseada no conheci-
mento do desempenho do mtodo e no escopo da medio,
com uso, por exemplo, de experincia e dados de validao
anteriores. Segundo TAVERNIERS, DE LOOSE & VAN BO-
CKSTAELE (20) a estimativa da incerteza um indicador
chave tanto da adequao para uso de um mtodo quanto
da confabilidade dos resultados analticos obtidos em um
laboratrio. Este parmetro cobre todas as fontes de erros
do processo analtico, alm daquelas obtidas nos proces-
sos de validao de mtodos. Na prtica, embora os dados
provenientes de validaes intralaboratoriais de mtodos e
de estudos colaborativos constituam a base da estimativa
da incerteza, estes dados representam somente uma parte
desta, sugerindo que a estimativa da incerteza seja consi-
derada como mais do que simplesmente um parmetro de
desempenho de validao de mtodo.
No protocolo internacional (9) esto previstos ainda par-
metros de desempenho no considerados pelo INMETRO (12),
nem pela ANVISA (3), como variao de matriz, aplicabilidade e
adequao ao propsito de uso. Embora neste documento a re-
cuperao tenha sido tratada como um parmetro separado, o
detalhamento dos estudos de recuperao feito no contexto da
avaliao da exatido, como nos demais documentos.
O parmetro aplicabilidade citado da seguinte forma no guia
harmonizado: Aps a validao, a documentao deve fornecer
alm da especifcao dos parmetros de desempenho, informa-
es sobre a identidade do analito, faixa de concentrao, tipos
de matrizes, o protocolo do mtodo (descrevendo equipamentos,
reagentes, o procedimento e variaes permissveis), o propsito
de uso e requisitos de incerteza crticos (9). J a adequao para
o propsito de uso a propriedade dos dados produzidos por um
processo de medio habilitar seus usurios a tomarem decises
tecnicamente corretas para o propsito estabelecido (20,21), o
que envolve resultados da validao, da estimativa da incerte-
za, entre outros requisitos. No passado, a validao de mtodos
tendia a se concentrar somente no processo de avaliao dos
parmetros de desempenho (11). Atualmente, sabe-se que este
processo culmina na avaliao da adequao dos parmetros
estudados para o propsito de uso do mtodo.
Os testes de efeitos de matriz so tratados no documento
do INMETRO (12)e no guia internacional (9). Contudo, a reviso
atual do primeiro somente faz referncia possibilidade da ma-
triz conter componentes que podem interferir no desempenho da
medio, quando o parmetro seletividade tratado. No segun-
do, os testes de efeito de matriz so descritos junto ao parmetro
calibrao e linearidade. No documento da ANVISA (3), nenhuma
abordagem feita sobre este importante teste, que determina
a necessidade ou no de uso de curvas de calibrao externas
matrizadas ou calibraes internas (mtodo de adio) para com-
pensar eventuais efeitos de matriz signifcativos.
ABRANGNCIA DA VALIDAO
A seleo de parmetros de desempenho para um deter-
minado processo de validao est fortemente relacionada
com a forma de validao adotada (direta ou comparativa) e
com o tipo de mtodo (quantitativo ou qualitativo).
Na RE N
o
899 da ANVISA (3) e no documento do INME-
TRO (12), os parmetros para a validao de mtodos analti-
cos so considerados em funo de categorias, defnidas de
acordo com a fnalidade dos testes. Isto facilita o entendimen-
to de que nem todos os parmetros so aplicveis em todos
os processos de validao e de que isto depende do tipo de
mtodo que est sendo validado (Tabela 3).
Tabela 3. Correspondncia entre as classifcaes dos tipos de mtodo segundo os guias propostos pela ANVISA (3) e pelo INMETRO (12)
Categoria
ANVISA INMETRO
Finalidade do teste Tipo de ensaio
I
Testes quantitativos para a determinao do princpio ativo em
produtos farmacuticos ou matrias-primas
Determinao do componente (ou analito) em maior teor
II
Testes quantitativos ou ensaio limite para a determinao de
impurezas e produtos de degradao em produtos farmacuticos e
matrias-primas
Anlise de elementos menores e traos
III Testes de performance (por exemplo: dissoluo, liberao do ativo) Propriedades fsicas
IV Testes de identifcao Qualitativo
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No guia harmonizado pela AOAC Internacional, ISO e IU-
PAC (9), este tipo de distino no feito, os parmetros so
apresentados independentemente de sua aplicao. Por isto,
o documento da ANVISA (3) foi comparado somente com o
documento orientador do INMETRO (12) (Tabela 4).
Os parmetros que devem ser estudados para mtodos
quantitativos, cujo objetivo determinar o princpio ativo ou prin-
cipal componente, esto concordantes nos dois documentos. O
mesmo no acontece para mtodos quantitativos, cujo objetivo
determinar impurezas e produtos de degradao ou anlise de
traos. Neste caso, o INMETRO (12) considera o parmetro limite
de deteco, o qual no apontado no guia da ANVISA (3). Os
limites so indicados em ensaios de traos, podendo ser dispen-
sados somente em ensaios de analitos que correspondem ao
principal componente da matriz (22).
Nos mtodos para determinao de propriedades fsicas,
a discordncia acontece, pois a ANVISA (3) dispensa estudos
de robustez, enquanto o INMETRO (12) recomenda.
Quanto aos parmetros necessrios anlise qualitativa
ou teste de identifcao, os guias so concordantes em rela-
o seletividade, ou seja, a capacidade do mtodo selecio-
nar o analito de interesse dentre compostos com estruturas
relacionadas, as quais podem estar presentes. Porm, a AN-
VISA (3)no trata dois outros parmetros imprescindveis para
este tipo de mtodo, recomendados pelo INMETRO (12), que
so robustez e limite de deteco.
TERMOS E DEFINIES DOS PARMETROS
Significativos progressos so reconhecidos no sentido
de construir um esquema conceitual nico e consistente
para os termos relacionados validao. Alguns termos
e definies foram esclarecidos e refinados, enquanto
outros, vagos ou ambguos, esto sendo eliminados ou
redefinidos (23,24). No entanto, divergncias ainda so
observadas com relao aos termos e definies dos pa-
rmetros de desempenho avaliados em processos de vali-
dao, como pode ser observado nas Tabelas 5 e 6. Vale
ressaltar que nesta ltima reviso do documento do INME-
TRO (12) as definies dos termos foram retiradas, sendo
referenciados documentos normativos, o que permitiu a
comparao somente entre os documentos da ANVISA (3)
e AOAC Internacional, ISO e IUPAC (9).
No caso da sensibilidade, o termo e definio adotados
esto adequados no guia internacional (9). Contudo, a AN-
VISA (3) no apresenta uma definio para este parmetro
e o cita junto ao termo limite de deteco, o que sugere
que estes termos so tratados como sinnimos na referi-
da resoluo. Apesar de relacionados, sensibilidade e li-
mite de deteco so parmetros distintos. TAVERNIERS,
DE LOOSE & VAN BOCKSTAELE (20)advertem para que os
parmetros limite de deteco e sensibilidade no sejam
confundidos.
Tabela 4. Variao das extenses de processos de validao em funo do tipo de mtodo, conforme guias da ANVISA (3) e do INMETRO (12)
Parmetro de
desempenho
Categoria I Categoria II Categoria III Categoria IV
ANVISA INMETRO ANVISA INMETRO ANVISA INMETRO ANVISA INMETRO
Seletividade
1
Sim Sim Sim Sim * Sim Sim Sim
Linearidade Sim Sim Sim Sim * Sim No No
Exatido
2
Sim Sim Sim Sim * Sim No No
Faixa ou Intervalo
3
Sim Sim Sim Sim * Sim No No
Preciso (repetitividade)
4
Sim Sim Sim Sim Sim Sim No No
Preciso (intermediria)
5
** Sim ** Sim ** Sim No No
Limite de deteco No No No Sim * No No Sim
Limite de quantifcao No No Sim Sim * No No No
Robustez Sim Sim Sim Sim No Sim No Sim
1
No guia da ANVISA, os termos seletividade e especifcidade so tratados de forma inapropriada como sinnimos. Neste documento o termo
especifcidade utilizado erroneamente no contexto da validao.
2
No documento do INMETRO, os termosutilizados so tendncia/recuperao.Os trs documentos tratam recuperao em conjunto com a
estimativa da exatido, embora o guia internacional destaque este parmetro.
3
No guia da ANVISA, o termo adotado intervalo, enquanto no do INMETRO so apresentados faixa de trabalho e faixa linear, devidamente distinguidos.
4
No guia da ANVISA o termo repetibilidade utilizado, enquanto no documento do INMETRO o termo utilizado repetitividade.
5
No guia da ANVISA este parmetro tambm denominado preciso inter-corridas, enquanto no documento do INMETRO reprodutibilidade interna.
* pode ser necessrio, dependendo da natureza do teste especfco, ** se houver comprovao da reprodutibilidade no necessria a
comprovao da preciso intermediria.

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Tabela 5. Parmetros de desempenho e respectivas defnies apresentados no guia da ANVISA (3)
Parmetro de desempenho Defnio
Linearidade
Capacidade de uma metodologia analtica de demonstrar que os resultados obtidos so diretamente
proporcionais concentrao do analito na amostra, dentro de um intervalo especifcado.
Intervalo
Faixa entre os limites de quantifcao superior e inferior de um mtodo analtico. Normalmente
derivado do estudo de linearidade e depende da aplicao pretendida do mtodo. estabelecido
pela confrmao de que o mtodo apresenta exatido, preciso e linearidade adequados quando
aplicados a amostras contendo quantidades de substncias dentro do intervalo especifcado.
Especifcidade/
Seletividade
1
Capacidade que o mtodo possui de medir exatamente um composto em presena de outros
componentes tais como impurezas, produtos de degradao e componentes da matriz.
Exatido Proximidade dos resultados obtidos pelo mtodo em estudo em relao ao valor verdadeiro.
Preciso (repetibilidade
ou intracorrida)
Avaliao da proximidade dos resultados obtidos em uma srie de medidas de uma amostragem
mltipla de uma mesma amostra. Concordncia entre os resultados dentro de um curto perodo de
tempo com o mesmo analista e mesma instrumentao.
Preciso (intermediria
ou intercorridas)
Avaliao da proximidade dos resultados obtidos em uma srie de medidas de uma amostragem
mltipla de uma mesma amostra. Concordncia entre os resultados do mesmo laboratrio, mas obtidos
em dias diferentes, com analistas diferentes e/ou equipamentos diferentes.
Limite de deteco /
Sensibilidade
Menor quantidade do analito presente em uma amostra que pode ser detectado, porm no
necessariamente quantifcado, sob as condies experimentais estabelecidas.
Menor quantidade do analito em uma amostra que pode ser determinada com preciso e exatido
aceitveis sob as condies experimentais estabelecidas.
Robustez
A medida da capacidade de um mtodo em resistir a pequenas e deliberadas variaes dos
parmetros analticos. Indica sua confana durante o uso normal.
1
Os termos seletividade e especifcidade so tratados, equivocadamente, como sinnimos.
2
O termo sensibilidade tratado, equivocadamente, como sinnimo de limite de deteco.
Segundo o INMETRO (12), a faixa de trabalho geralmen-
te limitada no extremo inferior pelos valores dos limites de
deteco ou de quantifcao, enquanto no limite superior as
restries so impostas por efeitos dependentes do sistema
de deteco do equipamento. Dentro da faixa de trabalho
deve existir uma faixa de resposta linear. O guia da ANVISA (3)
refere-se ao parmetro intervalo e necessidade de adequa-
o dos parmetros de linearidade, exatido e preciso nesta
faixa. No guia harmonizado pela AOAC Internacional, ISO e
IUPAC (9), o parmetro citado faixa validada, considerado
como o intervalo de concentrao do analito dentro da qual
o mtodo pode ser considerado validado, no sendo neces-
sariamente idntica faixa de calibrao. Os autores deste
documento destacam que dentro da faixa linear existe uma
faixa validada, ou seja, enquanto a calibrao pode cobrir um
intervalo mais amplo de concentrao, a validao pode co-
brir uma faixa mais restrita.
A capacidade de discriminar o analito de outros compos-
tos interferentes tem sido, por muitos anos, expressa como
seletividade de um mtodo ou de um sistema de medio.
Entretanto, no documento da ANVISA (3) o mesmo signifca-
do atribudo ao termo especifcidade, pois os dois termos
so tratados de forma intercambivel. Desde 1983, a IUPAC
tenta esclarecer esta sobreposio com a afrmativa de que
especifcidade o ultimato da seletividade (25). Em 2001,
foi apresentada, tambm pela IUPAC, uma discusso para
diferenciao no uso destes termos, seguida pela recomen-
dao de promoo do emprego do termo seletividade em
qumica analtica para expressar a extenso na qual um m-
todo, em particular, pode ser utilizado para determinar anali-
tos na presena de outros componentes de comportamento
semelhante. O uso do termo especifcidade neste contexto
foi desencorajado (26). No guia internacional harmonizado (9)
somente o termo seletividade adotado, em conformidade
com as recomendaes da IUPAC.
O termo acurcia (accuracy) tem sido relacionado a tantos
signifcados que algumas organizaes preferiram substitu-
lo por temos com interpretaes especfcas como exati-
do (trueness ou exactness), tendncia ou tendenciosidade
(bias) e recuperao (recovery) (27). A recomendao feita
na ISO 3534-1 (28) que o termo acurcia no seja utilizado
para tratar exatido (19). A acurcia, proximidade de concor-
dncia entre um resultado de ensaio e o valor de referncia
aceito (23,28), est relacionada a uma combinao de erros
sistemticos e aleatrios, e no somente a erros sistemticos.
Se por um lado a exatido trata da concordncia entre o valor
mdio obtido de uma grande srie de resultados de ensaios
e um valor de referncia aceito, sendo expressa em termos
de tendncia (bias) ou erro sistemtico total, por outro lado, a
preciso faz referncia proximidade de concordncia entre
resultados de ensaios independentes obtidos sob condies
estipuladas, dependendo somente da distribuio aleatria
dos erros, sem possuir relao com o valor verdadeiro ou
especifcado (24,28). Pode-se concluir que a acurcia est
relacionada a uma combinao dos parmetros exatido e
preciso, e no somente exatido (11,24).
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Apesar da concordncia em relao ao termo e defnio
de preciso, diferentes nomenclaturas so apresentadas nos
documentos avaliados para expressar as diversas condies
de estimativa da preciso. Condies de repetitividade (9,12)
ou repetibilidade (3) so tambm denominadas preciso intra-
ensaio (single run) (9) ou preciso intracorrida (3). Condies
de preciso intermediria (3,12) so tratadas como preciso
interensaios (run-torun ou between-run) (9), reprodutibilidade
interna (12) ou intercorridas (3).
Em funo do quadro ainda heterogneo sobre os termos
e defnies dos parmetros de desempenho, grandes difcul-
dades podem ser observadas tanto na apresentao quanto
na interpretao de resultados de processos de validao.
Enquanto o processo de padronizao avana, anlise crtica
extremamente vlida na busca por clareza, objetividade e
entendimento do assunto.
PRINCPIOS BSICOS PARA VALIDAO DE MTODOS
No protocolo harmonizado internacional (9) existe uma
considerao fundamental acerca dos princpios bsicos
para validao de mtodos: especifcao do escopo, repre-
sentatividade, verifcao das premissas e fontes de erros. Os
documentos nacionais publicados pela ANVISA (3) e INME-
TRO (12) no fazem este tipo de apontamento.
Especifcao e escopo
Validaes se aplicam a protocolos defnidos para deter-
minao de analitos em determinadas faixas de concentrao
e tipos de matrizes. Considerando que sistemas analticos
compreendem o protocolo do mtodo de ensaio a ser vali-
dado, os analitos e suas faixas de concentrao e os tipos
de matrizes especifcados, com rigor, pode-se dizer que os
sistemas analticos so validados e no os mtodos de en-
saio (9). Dai a grande importncia de que, antes de qualquer
processo de validao ser iniciado, o escopo seja defnido,
incluindo ambos sistema analtico (protocolo do mtodo,
analito, faixa de concentrao e tipo de matriz) e requisitos
analticos (considerados para avaliao da adequao para
uso) (20).
Representatividade
essencial que os estudos de validao intralaboratorial
sejam representativos, fornecendo um levantamento realsti-
co do nmero e faixa de efeitos operacionais, alm dos ana-
litos, faixas de concentrao e matrizes possveis de ocorre-
Tabela 6. Parmetros de desempenho e respectivas defnies apresentados no guia harmonizado pela AOAC Internacional, ISO e IUPAC (9)
Parmetro de desempenho Defnio
Calibrao e Linearidade Defnio no apresentada.
Faixa
A faixa validada o intervalo de concentrao do analito dentro
do qual o mtodo pode ser considerado como validado.
Sensibilidade Gradiente da funo de calibrao.
Seletividade Grau no qual um mtodo pode quantifcar o analito acuradamente na presena de interferentes.
Exatido (trueness)
Proximidade de concordncia entre um resultado de ensaio com o valor de referncia
aceito para a propriedade sendo medida. Estabelecida quantitativamente em termos de
tendncia (bias), com menor tendncia indicando maior exatido.
Preciso
Proximidade de concordncia entre resultados de ensaios independentes
obtidos sob condies estipuladas. Usualmente especifcado em termos de
desvio padro ou desvio padro relativo.
Repetitividade/Preciso
intra-ensaio (single run)
Defnio no apresentada.
Preciso entre ensaios
(between-run ou run-to-run)
Defnio no apresentada.
Limite de deteco
Menor quantidade ou concentrao de analito em uma amostra teste
que pode ser confavelmente distinguida de zero.
Limite de determinao/
Concentrao abaixo da qual o mtodo analtico no pode operar com preciso
aceitvel. Algumas vezes esta preciso arbitrariamente defnida como desvio
padro relativo de 10%, outras vezes o limite tambm arbitrariamente tido
como um mltiplo fxo (tipicamente 2) do limite de deteco.
Robustez (ruggedness)
Resistncia a mudar os resultados produzidos por um mtodo analtico quando
pequenos desvios so feitos nas condies experimentais descritas no procedimento.
Incerteza de medio Defnio no apresentada.
Variao de matriz Defnio no apresentada.
Aplicabilidade Defnio no apresentada.
Adequao ao propsito
Extenso na qual a performance do mtodo se equipara aos critrios
acordados entre o analista e o usurio fnal dos dados.

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N 51
rem nas condies de uso do mtodo (9). Os experimentos
envolvendo replicatas devem ser delineados, sempre que
possvel, considerando-se a importncia de que as replica-
tas sejam verdadeiras e no somente replicatas de leituras,
pois o objetivo dos procedimentos de validao conhecer
a variabilidade real e no a variabilidade mnima dos resul-
tados (11,29). Para mtodos que envolvem multi-analitos ou
multi-matrizes, a validao impraticvel para todas as com-
binaes de analitos, concentraes e matrizes que podem
ser encontradas. Desta forma, recomenda-se que sejam vali-
dados analitos e matrizes representativos, para que o tempo e
os custos da validao sejam viveis antes da implantao do
mtodo nas atividades de rotina do laboratrio. Subseqente-
mente, os parmetros de desempenho podem ser avaliados
em todas as condies possveis para defnir a performance
do mtodo (30).
Verifcao de premissas
Alm do fornecimento dos parmetros de desempenho,
que indicam a adequao para uso e tm dominado a realida-
de prtica de processos de validao intralaboratorial, estes
estudos tambm devem incluir uma verifcao das premis-
sas nas quais os mtodos de ensaio so baseados. Como
os estudos de validao so baseados em hipteses esta-
tsticas, uma verifcao bsica das premissas relacionadas
aos testes estatsticos fundamental para garantia de que
os princpios destes testes no sejam afetados e para que os
resultados obtidos sejam sustentados (9). Assim, previamen-
te realizao de qualquer inferncia, necessrio examinar
as premissas para determinar se os dados so apropriados
aplicao dos testes (31).
H uma importante implicao prtica neste princpio
aparentemente abstruso. mais fcil verifcar aspectos glo-
bais de uma premissa do que provar que uma suposio par-
ticular est correta. Portanto, quando houver grande prtica
e uso prspero de uma tcnica analtica em particular, para
uma gama bem estabelecida de analitos, concentraes e
matrizes, as verifcaes da validao tm carter preventi-
vo. Reciprocamente, quando a experincia for pequena, os
processos de validao precisam prover fortes evidncias de
que as premissas feitas so apropriadas nos casos particula-
res sob estudo (9).
Fontes de erros
Os erros das medidas analticas provm de diferentes fon-
tes e de diferentes nveis de organizao do processo anal-
tico, devendo ser considerados no contexto de validao de
mtodos e, posteriormente, para estimativa da incerteza da
medio e verifcao da adequao para uso.
O erro de uma medio corresponde ao resultado da me-
dio menos o valor verdadeiro do mensurando. O erro total
pode ser decomposto em erro aleatrio e erro sistemtico.
Erro aleatrio o resultado de uma medio menos a m-
dia resultante de um infnito nmero de medies do mesmo
mensurando, efetuadas sob condies de repetitividade. En-
quanto o erro sistemtico a mdia resultante de um infni-
to nmero de medies do mesmo mensurando, efetuadas
sob condies de repetitividade, menos o valor verdadeiro do
mensurando (23,28).
Apesar das diferentes fontes de erros no serem necessa-
riamente independentes, uma forma til de representar estas
fontes inclui: erros aleatrios, tendncias do ensaio, tendn-
cias do laboratrio, tendncias do mtodo e efeitos de varia-
o de matriz (9).
FORMAS DE AVALIAO DOS PARMETROS
Linearidade e sensibilidade
Os experimentos descritos para avaliao deste parme-
tro envolvem preparo de curvas de calibrao. No documento
do INMETRO (12) so sugeridos experimentos em vrios n-
veis de concentrao, no mnimo cinco, para construo de
uma curva analtica, com um nmero de replicatas prximo
daquele empregado na rotina do laboratrio. A ANVISA (3)
recomenda um mnimo de cinco nveis de concentrao. No
protocolo harmonizado (9), por sua vez, relevantes conside-
raes so feitas a respeito do delineamento experimental
da linearidade e de sua importncia, como: a necessidade
de seis ou mais padres de calibrao, igualmente espaa-
dos na faixa de interesse, com a concentrao esperada de
ser encontrada no centro da faixa; os padres analisados em
duplicatas, preferencialmente triplicatas independentes, em
ordem aleatria.
O mtodo dos mnimos quadrados ordinrios ou regres-
so linear simples consenso como ferramenta estatstica
para anlise dos dados. As trs das referncias recomendam
a estimativa dos parmetros inclinao, interseo e dos re-
sduos (erros) da regresso. ANVISA (3) e INMETRO (12) indi-
cam a inspeo visual do grfco x-y, enquanto no protocolo
internacional (9) e INMETRO (12) citam o grfco dos resduos
da regresso. No guia proposto pela ANVISA (3) sugere-se
o clculo e um critrio de aceitabilidade de 0,99 para coef-
ciente de correlao. O INMETRO (12) trata sobre a aplica-
o desta estatstica para indicar o quanto a reta pode ser
considerada adequada como modelo matemtico. No pro-
tocolo internacional (9) e enfatizado que, apesar do amplo
uso como indicador da qualidade do ajuste, esta estatstica
equivocada e inapropriada como teste de linearidade. O coe-
fciente no mede a adequao de um modelo, pois pode ser
infado pela adio de termos ao modelo, indicando somente
o grau de ajuste dos dados curva, independentemente do
modelo (32,33,34). Se os pontos de uma calibrao so bem
ajustados curva, o valor experimental do coefciente ser
prximo de um. Contudo, valores prximos da unidade no
pertencem necessariamente a uma relao linear, podendo
resultar de pontos bem ajustados a um modelo no linear (35).
Alm de indicar, de forma equivocada, o uso do coefciente
para avaliao da linearidade, o guia da ANVISA (3) estabe-
lece um valor aceitvel. importante observar que a signif-
cncia do coefciente dependente do nmero de observa-
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es da regresso (36).Nos documentos do INMETRO (12) e
no guia internacional (9) so destacadas ainda as premissas
relativas ao mtodo dos mnimos quadrados ordinrios, como
homoscedasticidade dos resduos e adequao ao modelo
linear, bem como testes estatsticos aplicveis. Referncias
especfcas sobre avaliao da linearidade complementam as
premissas da regresso, incluindo normalidade e indepen-
dncia dos resduos (37,38).
No documento do INMETRO (12) e guia internacional (9) a
estimativa da sensibilidade tratada junto aos experimentos
da linearidade, sendo expressa como a inclinao da reta ou
o gradiente da funo de calibrao.
Seletividade e efeitos de matriz
Apesar de extremamente relevantes, a ANVISA (3) no
discorre sobre experimentos para avaliao dos efeitos de
matriz. O INMETRO (12) tratava os estudos destes efeitos na
reviso anterior do documento. Contudo, na reviso atual, o
detalhamento dos experimentos e clculos para avaliao dos
efeitos de matriz de matriz foram retirados, com a justifcativa
de que h bastante bibliografa para este fm. No protocolo
harmonizado (9) so sugeridos estudos de efeitos de matriz
com o preparo de curvas de calibrao usual e em matriz,
nas mesmas concentraes. Uma observao importante
feita acerca deste experimento, com recomendao de que
o mtodo de adio seja feito a uma soluo teste derivada
de amostra, em nveis que cubram a mesma faixa dos experi-
mentos de linearidade. Esta recomendao sinaliza o cuidado
para que, sempre que possvel, experimentos de efeitos de
matriz no sejam infuenciados pela recuperao. Para an-
lise de dados sugerida a comparao das inclinaes por
diferenas signifcativas (sem indicao de um teste espec-
fco), desde que as calibraes sejam lineares. No caso de
modelos no lineares, h indicao de testes mais complexos
ou uma comparao visual dos grfcos.
Experimentos para avaliao da seletividade envolvem a dis-
tino entre amostras brancas e adicionadas do analito, alm da
avaliao da capacidade de identifcao do analito de interes-
se na presena de interferentes, deliberadamente adicionados
amostra, como previsto pelos documentos da ANVISA (3) e
internacional (9). Neste ltimo recomendado checar os piores
casos, visto que pode ser impraticvel considerar todo interfe-
rente em potencial. Apesar da determinao da seletividade ser
essencialmente qualitativa, uma forma de medida quantitativa
deste parmetro, o ndice de seletividade, sugerida. A ANVI-
SA (3) trata a possibilidade de comparar os resultados obtidos
para amostras contendo impurezas ou produtos de degradao
com aqueles obtidos por mtodos bem caracterizados, incluin-
do amostras armazenadas sob condies de estresse. Testes
de pureza de picos em mtodos cromatogrfcos so tambm
considerados. No documento do INMETRO (12) so abordados
ensaios com amostras e materiais de referncia pelo mtodo em
estudo e outros mtodos validados, alm de ensaios com amos-
tras com e sem o analito e contendo vrios interferentes suspei-
tos na presena do analito de interesse.
Exatido e preciso
Para avaliao da exatido e preciso, as referncias fre-
quentemente sugerem experimentos com materiais de con-
centrao conhecida do analito, em replicatas, sob condies
pr-determinadas.
Segundo o INMETRO (12), os experimentos podem ser
conduzidos com materiais de referncia certifcados (MRC)
ou por ensaios de recuperao com amostras adicionadas de
quantidades conhecidas do analito. Detalhamentos sobre a
parte experimental no so feitos, embora exista a recomen-
dao do estudo de pelo menos trs diferentes concentra-
es para amostras adicionadas, sendo baixa, mdia e alta,
na faixa de uso do mtodo. No caso de MRC, estatsticas so
indicadas para comparao entre os resultados obtidos com
os valores certifcados, como erro relativo, ndice z escore e
erro normalizado.
No guia internacional (9) considerado o uso de MRC,
materiais de referncia (MR), amostras formuladas, fortifca-
das ou adicionadas (spiking/recovery) e uso de um mtodo
de referncia. Neste documento, so apresentadas as ca-
ractersticas, vantagens e desvantagens de cada tipo de ma-
terial. considerada, ainda, a importncia de se analisar um
nmero adequado de materiais, incluindo as matrizes e con-
centraes de analitos, alm da possibilidade de combina-
o dos diferentes tipos de materiais para que o estudo de
exatido seja completado, embora no haja um delineamen-
to experimental predeterminado. Para MRC, teste de t ou
regresso linear simples so indicados. A difculdade de uso
de testes de signifcncia para MR, por no haver incerteza
declarada, tambm considerada. No caso de mtodos de
referncia, testes estatsticos adequados e respectivas pre-
missas so sugeridos, como o teste de t emparelhado, aps
demonstrao de homogeneidade das varincias e norma-
lidade. Para adio de padro, a porcentagem de recupera-
o recomendada.
A ANVISA (3) recomenda anlise de amostras de frmacos
de pureza conhecida ou de formas farmacuticas com adi-
o de quantidades conhecidas do frmaco ou de impurezas.
So sugeridos experimentos com nove amostras, sendo trs
concentraes (baixa, mdia e alta) no intervalo linear, com
trsreplicatas de cada, seguido do clculo da porcentagem
de recuperao. Este guia considera tambm a possibilidade
de uso de um segundo mtodo bem caracterizado, mas no
apresenta detalhes sobre experimento e formas de anlise dos
resultados para este caso. Neste documento no tratada a
possibilidade de uso de material de referncia certifcado.
A avaliao da recuperao depende do confrontamen-
to dos resultados obtidos com valores crticos estabelecidos
como requisitos analticos do mtodo, os quais variam em
funo da concentrao do analito na amostra. Nenhum dos
documentos analisados apresenta critrios de aceitabilidade
para a porcentagem de recuperao. HORWITZ (39) apresen-
ta valores aceitveis para recuperao em um documento da
AOAC Internacional, sendo previstas recuperaes de 98% a
101% para concentraes de analito de 100% 95% a 102%

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para 10%, 92% a 105% para 1%, 90% a 108% para 0,1%,
85% a 110% para 0,01%, 80% a 115% para 10 g/g, 75%
a 120% para 1 g/g e 70% a125% para 1 g/kg. A EC (40)
determina faixas de mdias de recuperao em anlises de
resduos em alimentos, sendo 50% a 120%, 70% a 110% e
de 80% a 110%, respectivamente, para nveis de concentra-
o 1 g/kg, > 1 g/kg a 10 g/kg e 10 g/kg.
As trs referncias (3,9,12) consideram estudos de preci-
so sob condies de repetitividade e preciso intermediria
em validaes intralaboratoriais. O guia da ANVISA (3) pre-
v, para repetitividade, estudos com nove amostras, sendo
trs concentraes (baixa, mdia e alta) no intervalo linear,
com trsreplicatas de cada trs concentraes. Para preci-
so intermediria recomendada a anlise destas amostras
em pelo menos dois dias diferentes, com diferentes analis-
tas. O clculo do desvio padro relativo indicado, mas a
necessidade de anlise de varincia para estimativa das va-
riabilidades dos diferentes componentes no considerada.
Segundo a ANVISA (3), o valor mximo aceitvel para desvios
padro relativos deve ser defnido de acordo com a metodo-
logia, concentrao do analito, tipo de matriz e fnalidade do
mtodo, no se admitindo valores superiores a 5%. Contudo,
considerando-se que a preciso varia com a concentrao do
analito, seria equivocado adotar um mesmo critrio para pre-
ciso em amostras contendo concentraes de, por exemplo,
90%, 1% e 1 g/kg. Os valores de desvios padro relativos
de preciso intermediria podem ser comparados com aque-
les estimados pelas equaes de HORWITZ (41) e THOMP-
SON (42). O trompete de HORWITZ, proposto com base em
inmeros resultados de ensaios interlaboratoriais, demonstra
que conforme a concentrao do analito decresce em duas
ordens de grandeza, o desvio padro de reprodutibilidade
aumenta com um fator de dois (43,44). Esta funo constitui
uma generalizao til e amplamente reconhecida do desvio
padro sob condies de reprodutibilidade na faixa de con-
centrao de 120 g/kg a 13,8%. Os modelos propostos por
THOMPSON (42) so sugeridos para concentraes de anali-
to menores que 120 g/kg e maiores que 13,8%. Como crit-
rio para avaliao dos valores de desvios-padro relativos de
repetitividade, o critrio de metade a dois teros o valor crtico
do desvio padro de reprodutibilidade recomendado (41).
No guia internacional (9) recomendado muito cuidado
para o delineamento experimental da preciso. A forma mais
simples de estimar as duas condies de preciso descrita
por meio da anlise do material teste em duplicata, em um n-
mero sucessivo de ensaios. Neste documento feita a ressal-
va de que cada replicata de anlise deve ser uma execuo
independente do procedimento, aplicada a uma poro sepa-
rada do material. Como a preciso varia com a concentrao
do analito, para casos em que a concentrao do analito varia
mais que 30% do seu valor central, um experimento mais eco-
nmico recomendado, com estudo da preciso em concen-
traes prximas ou nos extremos da faixa de operao do
mtodo. Outro apontamento apresentado a importncia de
no usar MRC em estudos e preciso, pois pode haver uma
subestimao da variabilidade dos resultados em relao
quela que seria obtida com amostras de aplicao na roti-
na. Variaes representativas de lotes e marcas de reagentes,
analistas e equipamentos so consideradas no delineamento
dos parmetros repetitividade e preciso intermediria. Este
documento trata a anlise de dados, por anlise de varincia,
para estimativa das varincias dos componentes.
Para estimativa da repetitividade, no documento do INME-
TRO (12) so sugeridos experimentos com padres, MR ou
adio do analitoa branco da amostra, em vrias concentra-
es na faixa de trabalho, com um nmero de replicatas que
expresse a rotina do laboratrio. Recomenda-se que t(n-1)
seja pelo menos igual a 15, sendo t o total de amostras en-
saiadas e n o nmero de ensaios ou um mtodo simplifcado
com a execuo de n medies, sendo n 15. Para preciso
intermediria recomendada a anlise destas amostras no
mesmo laboratrio por analistas e equipamentos diferentes,
em diferentes tempos. Este documento orientativo cita a ISO
5725 (13) para aprofundamento nas formas de clculo e con-
trole da preciso.
Vale ressaltar que a anlise de varincia, indicada para es-
timativa dos desvios padro relativos sob condies de repe-
titividade e preciso intermediria, assume premissas como
normalidade, homoscedasticidade, independncia dos res-
duos e aditividade, embora, a verifcao de tais premissas
no tenha sido tratada na literatura consultada (45).
Limites
A habilidade em detectar um composto presente na
amostra, mesmo em concentraes extremamente baixas,
relacionada aos limites de deteco e quantifcao. Em-
bora estes parmetros sejam essenciais para aplicao em
pesquisas, comrcio internacional, sade e segurana (46),
ainda existe uma grande variedade de terminologias e fr-
mulas (20).
A ANVISA (3) prev a estimativa do limite de deteco e de
quantifcao para mtodos quantitativos como sendo trs e
dez desvios padro do intercepto da curva de calibrao, ou
obtido de trs curvas construdas prximas ao limite de quan-
tifcao, dividido pela inclinao da curva, respectivamente.
Para mtodos qualitativos o limite de deteco determina-
do visualmente pela menor concentrao capaz de produzir
o efeito esperado.
O INMETRO (12) sugere ensaios com sete ou mais replica-
tas de amostras brancas ou com a menor concentrao acei-
tvel do analito, sendo o limite de deteco igual a mdia do
branco mais t desvios padro do branco para o primeiro caso e
como t desvios padro do branco para o segundo caso, ou seja,
quando no houver branco, sendo t a distribuio de Student
dependente do tamanho da amostra e do grau de confana. O
limite de quantifcao considerado a concentrao do ana-
lito correspondente ao valor da mdia do branco mais 5, 6 ou
10 desvios padro. Outra opo a anlise de amostras adi-
cionadas do analito em concentraes variadas, prximas ao
limite de deteco, com defnio do limite por inspeo visual
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de um grfco da concentrao versus desvio padro. Neste
documento determinado ainda que, aps ter sido determina-
do, o limite de quantifcao deve ser testado para averiguar se
a exatido e a preciso conseguidas so satisfatrias.
O limite de deteco defnido no guia internacional (9)
por, pelo menos, seis determinaes completas e indepen-
dentes da concentrao do analito em uma matriz tpica bran-
ca ou de baixa concentrao do analito, sem supresso de
resultados zero ou negativos. Esta observao fundamen-
tal, pois assegura uma real estimativa da variabilidade dos
resultados. O clculo do limite dado por trs desvios padro
destes resultados. O limite de quantifcao determinado,
arbitrariamente, como desvio padro relativo de 10% ou como
um mltiplo do limite de deteco (tipicamente dois). Neste
guia, os autores argumentam que, enquanto operar acima de
um limite fornece alguma segurana, devemos reconhecer
que h uma dicotomia artifcial na escala de concentrao,
uma vez que medidas abaixo deste limite no so privadas
de informaes de contedo e podem ser adequadas para o
propsito de uso. Assim, eles no recomendam o uso deste
tipo de limite, sendo prefervel tentar expressar a incerteza da
medio em funo da concentrao, comparando com os
critrios acordados entre o laboratrio e o cliente ou o usurio
fnal dos resultados.
CONCLUSO
Procedimentos de validao estruturados de forma inade-
quada podem gerar uma avaliao equivocada sobre a ade-
quao ao propsito de uso de um determinado mtodo, com
impactos negativos sobre a confabilidade de resultados, que
subsidiam decises na rea de sade pblica. A anlise com-
parativa feita aponta para a necessidade de reformulao do
documento da ANVISA, visando harmonizao e adequao
em relao aos conceitos, delineamentos experimentais e cri-
trios de aceitabilidade preconizados internacionalmente.
R E F E R N C I A S
BRASIL. Ministrio da Sade. Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria (ANVISA). Resoluo RDC N210 de 04.08.2003, Regulamento tcnico
de boas prticas de fabricao de medicamentos.
ISO (International Standard Organization).ISO 9000.Quality management systems - Fundamentals and vocabulary, 2005.
BRASIL. Ministrio da Sade. Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria (ANVISA). Resoluo RE N899 de 29.05.2003, Guia para validao de
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Fevereiro/Maro 2011

N 51
R E F E R N C I A S
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SOUZA, S. V. C. Procedimento para validao intralaboratorial de mtodos de ensaio: delineamento e aplicabilidade em anlises de alimentos.
Belo Horizonte, 2007 (Tese de doutorado). Universidade Federal de Minas Gerais, Faculdade de Farmcia.
CURRIE, L. A. Pure Appl. Chem., 67, 1699, 1995.
estudo de caso

Fevereiro/Maro 2011

N 51
RESUMO
Este trabalho tem por objetivo apresentar um mtodo confvel, rpido e totalmente auto-
matizado para determinao do ndice de acidez em misturas bioetanol: gasolina utilizando
a tcnica de titulao potenciomtrica.
Utilizando este mtodo possvel obter resultados em ndice de acidez (mgKOH/g) ou ainda
a acidez, expressa em % (m/m) de acido actico.
Observou-se que devido ao meio titulante ser majoritariamente no aquoso, o eletrodo que apre-
sentou a melhor performance foi um eletrodo de pH com eletrolito de LiCl 1mol/L em etanol, ge-
rando curvas de titulao adequadas determinao de interesse. Este fato pode ser observado
pela repetibilidade abaixo de 1% mesmo com resultados extremamente baixos da ordem de
0,001% (m/m) em cido actico.
Palavras-chave: Bioetanol E85. Titulao. ndice de Acidez.
SUMMARY
This work present a fast and very accurate method to assay acid number in ethanol and ethanol/
gasoline mixtures by automatic potentiometric titration based in ASTM 1613-06 standard.
The acid number is a quality indicator for ethanol fuel and their mixtures with gasoline. If an ethanol
has high acid number, it could cause corrosion in engines and motors. Beside this, ethanol with
high acid number could pollute more, causing acid discharges raising the acid content in the air
helping to cause acid raining.
Keywords: Bioethanol E85. Titration. Acid Number.
Fabio Ferreira Batista*
e Cosimo A. De Caro
Toledo Brasil
Mettler Toledo Swiss
*Correspondncia:
fabio.ferreira@mt.com
DETERMINAO DO NDICE DE ACIDEZ EM E85
BIOETANOL BASEADO NA ASTM D1613-06
INTRODUO
A determinao do ndice de acidez em bicombustveis
uma necessidade tanto no controle de produo do etanol
quanto no monitoramento para utilizao como combustvel.
O combustvel E85 uma composio de 85% de bioeta-
nol e 15% de gasolina. Esta composio bastante utilizada
em pases como EUA.
No primeiro caso, pode ser utilizado como parmetro de
controle para o tempo de fermentao, dado que um tempo
maior desse processo pode ocasionar a formao de altos
teores de cidos orgnicos (principalmente o cido actico).
No segundo caso, as presenas de altos teores de cidos
orgnicos podem ocasionar corroso nos motores dos carros
e em outras partes como pistes.
O objetivo deste trabalho apresentar um mtodo rpido,
confvel, repetitivo e totalmente automatizado, baseado na
tcnica de titulao potenciomtrica, para determinao do
ndice de acidez em bicombustveis.
MATERIAL E MTODOS
Tituladorpotenciomtrico com 20mil passos de resoluo
no drive de bureta
Drive de titulao adicional
Bureta de 10mL
Bureta de 20mL
Autoamostrador
KOH 0,005mol/L em etanol (obtido por diluio sucessiva)
Hidrogeno ftalato de potssio suprapur
Balana analtica com resoluo de 0,01mg
Impressora
Eletrodo combinado de vidro com eletrolito de LiCl em
etanol 1mol/L e com junta mvel
Bioetanol E85 (85% de etanol + 15% gasolina),
densidade 0,7634g/cm
3
MTODO
Pipetou-se, com preciso de 0,01mL, 80mL do bioetanol
E85 para o frasco de titulao, utilizando-se uma bureta auto-
mtica de 20mL. Em seguida, fez-se o acondicionamento do
eletrodo em gua por 30s.
Titulou-se at ponto de equivalncia, fazendo-se o mo-
nitoramento da mV da soluo a cada adio do titulante.
Ajustou-se para 100mV/mL o valor de reconhecimento auto-
mtico do fm da titulao.

Fevereiro/Maro 2011

N 51
Aps a titulao, o eletrodo foi lavado com gua ultrapura
antes do inicio da prxima titulao, e o frasco de titulao foi
esvaziado com auxilio de bomba peristltica.
RESULTADOS E DISCUSSES
A titulao potenciomtrica baseada na medio do po-
tencial da soluo amostra, contra um eletrodo de referencia
a cada adio do titulante.
Neste trabalho utilizou-se um eletrodo combinado de vidro
com junta mvel para medio do potencial da soluo, cujo
eletrodo de referncia o Ag/AgCl com eletrolito de LiCl em
etanol 1mol/L. O eletrodo de junta mvel permite uma leitura
mais rpida e estvel, pois esse sistema possui grande rea
superfcial. O eletrolitoLiCl 1mol/L em etanol simula as mes-
mas condies da amostra diminuindo o potencial de juno
do eletrodo e, consequentemente, diminuindo o tempo de
resposta e aumentando a estabilidade da leitura.
Um exemplo da curva de titulao mostrado abaixo:
Finalmente observando os resultados obtidos, podemos
inferir que o mtodo desenvolvido confvel e repetitivo den-
tro das condies defnidas. A automao dos processos de
pipetagemda amostra claramente auxilia a obteno das bai-
xas variaes observadas.
CONCLUSO
Com base nos dados apresentados podemos inferir que
o mtodo desenvolvido um mtodo confvel, dado que re-
produz os resultados com RSD baixo.
A automao aumenta a velocidade de processamento de
amostras, bem como aumenta a preciso em procedimentos
que interferem diretamente no resultado das amostras com
pipetagem e determinao da densidade de amostras.
AGRADECIMENTOS
Agradecemos Mettler Toledo AG, Analytical e ao Sr. Co-
simo de Caro que nos auxiliou com a execuo das anlises
e fomento de informaes relevantes.
Figura 1. Curvas de titulao: Potencial (E) contra volume (V)
adicionado de titulante (curva acima) e Curva da primeira derivada
(curva abaixo)
O ponto fnal da titulao facilmente observado a partir
da curva abaixo da Figura 1, exatamente no ponto mnimo da
curva da primeira derivada, dado que a tendncia do poten-
cial da soluo diminuir com a adio do titulante.
Foi realizada uma srie de cinco titulaes consecutivas a
fm de avaliar-se a repetibilidade do mtodo desenvolvido.
Obtiveram-se os resultados apresentados na Tabela 1.
A partir dos resultados da tabela 1, podemos calcular a
mdia, desvio padro e desvio padro relativo (RSD).
Para expresso dos resultados em unidade de m/m foi
determinada a densidade da amostra. Este processo foi rea-
lizado um auxlio de densmetro de bancada com preciso de
0,00001g/cm
3
. Neste trabalho no foi automatizada a deter-
minao da densidade, entretanto esta automao passvel
de ser executada acoplando-se o densmetro digital ao titula-
dor automtico.
Tabela 1. Resultados do ndice de acidez e teor de acido actico em
amostra de E85
Amostra
mgKOH/g de
amostra
Acidez em
%(m/m)*
Bioetanol E85
replicata1
0,0074 0,000788
Bioetanol E85
replicata2
0,0074 0,000788
Bioetanol E85
replicata3
0,0073 0,000779
Bioetanol E85
replicata4
0,0073 0,000784
Bioetanol E85
replicata5
0,0073 0,000785
* Resultado expresso em cido actico
Tabela 2. Mdia, desvio padro e desvio padro relativo dos
resultados apresentados na Tabela 1
mgKOH/g de
amostra
Acidez em
%(m/m)*
Mdia 0,0073 0,000785
Desvio Padro 0,000004 0,000004
RSD (%) 0,746 0,472
* Resultado expresso em cido actico
R E f E R N C I A S
CARO, C.Selected Mettler Toledo Methods for Biofuel Analsys,p. 46-47;
mL 0.00
-223.30
-23.80
2.44
m
V
E - V Titration (EQP)
dE/dV - V Titration (EQP)
-102.28
0.10
m
V
/
m
L
mL 0.00 2.44

Fevereiro/Maro 2011

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Alem Mar
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Fevereiro/Maro 2011

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