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Quim. Nova, Vol. 24, No. 5, 683-688, 2001.

O RENASCIMENTO DE UM FRMACO: TALIDOMIDA

Divulgao

Ldia Moreira Lima*#, Carlos Alberto Manssour Fraga# e Eliezer J. Barreiro# Departamento de Qumica Orgnica, Instituto de Qumica, Universidade Federal do Rio de Janeiro, Cidade Universitria, CP 68006, 21944-970 Rio de Janeiro - RJ Departamento de Frmacos, Faculdade de Farmcia, Universidade Federal do Rio de Janeiro, Cidade Universitria, CP 68006, 21944-970 Rio de Janeiro - RJ Recebido em 13/9/00; aceito em 15/12/00

THE REBIRTH OF A DRUG: THALIDOMIDE. Thalidomide, first synthesized in 1953, was widely prescribed for morning sickness of pregnant women from 1957 to 1961, when it was found to be seriously teratogenic, having caused serious birth defect. Nowadays, a quarter of a century later, it appears that it may be a miracle drug for such diseases as leprosy, AIDS, cancer and tuberculosis. Keywords: thalidomide; rebirth of an old drug; leprosy.

HISTRICO A talidomida, [()2-(2,6-dioxo-3-piperidinil)-1H-isoindol1,3-(2H)-diona; ou ()-ftalimidoglutarimida (1)], foi descoberta por srie de fatores fortuitos e primeiramente relatada por Wilhelm Kunz, em 1953. Sua sntese foi realizada na indstria farmacutica alem Chemie Grnenthal, objetivando a preparao de pequenos peptdeos utis na produo de novos antibiticos. Entretanto, durante a rota sinttica proposta inicialmente, Wilhelm Kunz isolou um produto secundrio, racmico, no peptdico (1), que foi reconhecido pelo farmacologista da Chemie Grnenthal, Herbert Keller, como um anlogo estrutural da glutetimida (2). Posteriormente, o perfil sedativo-hipntico de (1) foi bem caracterizado1,2.
O N N O O H O Et O N H

Talidomida (1) Sedativo-Hipntico

Glutetimida (2) Sedativo-Hipntico

Em 1957, a talidomida (1) foi comercializada como frmaco sedativo-hipntico, amplamente vendido em pases europeus, asiticos, no Canad e Amrica do Sul, tornando-se o medicamento mais vendido na Alemanha Ocidental para o tratamento da insnia3,4. A despeito de sua ampla comercializao nos continentes Europeu e Asitico, este frmaco, em diferentes especialidades farmacuticas: Kavadon, Sedalis, Softenon, Distaral, Contergan, entre outros, no obteve licena do Food and Drug Administration (FDA) dos Estados Unidos da Amrica para uso neste pas5,6. No nicio da dcada de 60, a talidomida (1) foi prescrita mundialmente como sedativo e agente anti-naseas, indicada no alvio do mal-estar matinal comum em gestantes, sendo responsvel pelo nascimento de milhares de crianas com deformaes congnitas, que foram, posteriormente atribudas ao

seu perfil teratognico 7-9. Aps confirmao e divulgao destes graves efeitos colaterais, este frmaco teve sua licena para comercializao cancelada, rendendo, em 1961, oficial mdica americana Frances Kelsey, responsvel pelas decises frente do FDA, a medalha e ttulo de guardi da Sade Pblica concedida pelo, ento, presidente John Kennedy, em reconhecimento aos servios prestados10,11. Quatro anos mais tarde, em 1965, o mdico israelita Jacob Sheskin prescreveu a talidomida (1) como sedativo para pacientes leprosos, observando fortuitamente acentuada reduo da dor e do processo inflamatrio associado ao leproma 12,13, identificando as propriedades antiinflamatrias de (1), at ento desconhecidas. Este intrigante perfil antiinflamatrio incentivou diversos grupos de pesquisas ao estudo do provvel mecanismo de ao relacionado s aes benficas de (1) sobre os lepromas. Em 1991, a Dra Gilla Kaplan e colaboradores, da Universidade de Rockefeller, Nova York, em trabalho pioneiro, demonstraram que pacientes leprosos apresentavam nveis sanguneos aumentados de um modulador do sistema imunolgico, identificado como uma citocina denominada fator de necrose tumoral (TNF)14. Estes mesmos pesquisadores constataram, posteriormente, a participao da talidomida (1) na inibio seletiva desta citocina, quando expressa em quantidade superior quela necessria manuteno do sistema imunolgico normal, denotando, portanto, o potencial imunorregulador de (1). SNTESE E METABOLISMO A metodologia sinttica empregada na obteno da (R,S)talidomida (1) explorou, numa primeira etapa, a condensao do (R,S)-cido glutmico com anidrido ftlico (3), seguida da etapa chave da estratgia sinttica, que consistiu na condensao do intermedirio ftalimdico (4) com amnia em temperatura elevada15 (Esquema 1). Estudos, ex vivo, sobre o destino metablico da talidomida (1) permitiram evidenciar sua instabilidade em soluo aquosa, em diferentes valores de pH. Em pH=6,0 observou-se a hidrlise espontnea do anel glutarimdico, originando os derivados -(orto-carboxi-benzamido)glutarimida (5) e (6) como principais metablitos (Figura 1) 16. Entretanto, em pH fisiolgico (pH=7,4) a talidomida sofre ca. 28% de metabolizao na primeira hora de ensaio, sendo os principais metablitos formados identificados como produtos de hidrlise do anel ftalimdico e glutarimdico, originando majoritariamente os compostos (7) e (8) (Figura 1)16.

*lidiaml@yahoo.com # Laboratrio de Avaliao e Sntese de Substncias Bioativas (LASSBio), http://www.farmcia.ufrj.br/lassbio.

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NH2 HO2C CO2H

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O O (3) O

O N (4) O [NH3]/ CO2H CO2H

Por outro lado, em pH=8,0 sua taxa de metabolizao consideravelmente aumentada, ca 66% na primeira hora, evidenciando que o metabolismo in vivo de (1) estritamente dependente do pH da biofase16. QUIRALIDADE A constatao no incio da dcada de 60 dos efeitos teratognicos provocados pela ()-talidomida em gestantes, nos trs primeiros meses de gravidez 7,8, representou um marco na conscientizao do risco da administrao de um frmaco em sua forma racmica, quando a razo eudsmica entre os dois enantimeros desconhecida (Figura 2). Posterior tentativa de resoluo cromatogrfica de (1) e administrao das espcies enantiomericamente puras, i.e., (R) e (S)-(1), demonstrou que o efeito teratognico da talidomida era proveniente do emprego do enantimero de configurao absoluta (S), enquanto seu antpoda era desprovido de ao teratognica17. Todavia, a estereoespecificidade da ao teratognica de (1) foi evidenciada como sendo dependente da espcie animal

O N N O O H O

Talidomida (1)
Esquema 1

O N N O pH=6,0 O H pH=6,0 Talidomida (1) O

O N

CO2H

O N

CONH2

CONH2 (5) pH=7,4 pH=8,0 O NH CO2H (7) (8) CONH2 CO2H O (6)

CO2H O pH=7,4 pH=8,0 O NH CO2H CO2H CONH2

Figura 1. Principais metablitos in vivo da talidomida (1).

Figura 2. Demonstrao esquemtica dos enantimeros da talidomida (1).

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estudada. Por outro lado, a atividade de (1) como inibidor da produo de TNF- foi identificada como sendo estereosseletiva, tendo-se o enantimero de configurao absoluta (S) como eutmero17,18. Eriksson e colaboradores demonstraram a rpida epimerizao de (1) em plasma humano, in vivo, aps administrao por via oral das espcies enantiomericamente puras. De fato, a inverso de configurao de frmacos enantiopuros ou racmicos ocorre em outras classes teraputicas como nos antiinflamatrios no-esterides pertencentes classe dos cidos 2-aril-propinicos20, sugerindo que o emprego da talidomida em sua forma enantiomericamente pura no evitaria a tragdia teratognica ocorrida no incio da dcada de 60 18. Em trabalho mais recente, estes autores relataram estudos comparativos sobre a inverso de quiralidade e hidrlise de (1), em pacientes tratados, administrao por via oral, com talidomida (1) 19. Os resultados obitdos a partir destes estudos denotam uma ntida diferena farmacocintica quanto aos processos de absoro e eliminao dos enantimeros de (1), e comparando-se os resultados obtidos in vitro versus in vivo sugere-se que o processo de epimerizao seja dependente da concentrao de albumina, predominando, portanto, no sangue ou em compartimentos extravasculares ricos neste tipo de protena srica 19. Em contra partida, estes estudos demonstraram que a taxa de hidrlise da talidomida (1), tanto in vitro quanto in vivo, parece ser dependente meramente do pH do meio, conforme preconizado por Schumacher e colaboradores em 1965 16,19. TERATOGENICIDADE O termo teratogenicidade provm do grego teratos, que significa monstro. O sentido original da palavra refere-se a malformaes anatmicas macroscpicas, embora atualmente tenha se expandido sua definio para englobar anomalias

mais stis como atraso intrauterino e distrbios bioqumicos e psicomotores. Embora vrias hipteses tenham sido postuladas para explicar os efeitos teratognicos da talidomida (1), o mecanismo bioqumico responsvel pela resposta embriotxica em humanos e cobaios permanece obscuro e contraditrio21,22. A dificuldade de se concluir sobre o mecanismo de induo de teratogenicidade por (1) in vitro e in vivo , entre outros fatores, reflexo da sua baixa solubilidade e instabilidade na biofase. Por outro lado, as distines interespcies quanto aos processos farmacocinticos de absoro, metabolizao, bioativao e eliminao despeito do comportamento diferenciado, dependente do modelo animal empregado, o que dificulta a extrapolao para humanos, dos processos farmacocinticos, explicam as diferenas de sensibilidade aos seus efeitos teratognicos16. Dentre as diversas hipteses relatadas na literatura para explicar o mecanismo de teratogenicidade da talidomida (1)23-27, encontra-se a hiptese descrita por Arlen & Wells, que sugere o envolvimento da enzima prostaglandina endoperxido sintase (PGHS) na bioativao do grupamento toxicofrico de (1) (Figura 3) 22. A PGHS uma enzima bifuncional com atividades cicloxigenase e hidroperoxidase, que catalisa a formao do hidroperxido de prostaglandina G 2 (PGG 2), a partir de cido araquidnico, e a subsequente biorreduo da PGG2 prostaglandina H2 (PGH2), precursora de uma famlia de icosanides com propriedades inflamatrias, hiperalgsicas e trombognicas28 . Esta hiptese fundamenta-se na atividade cataltica hidroperoxidase da PGHS. amparada em observaes experimentais, evidenciando que o tratamento de cobaias com cido acetilsaliclico (Aspirina ), um conhecido inibidor pseudoirreversvel da PGHS, capaz de prevenir, in vivo, as manifestaes dos efeitos teratognicos de (1)22.

Fosfolipdeo de Membrana
PLA2

O N O N O O H

cido Araquidnico
PGHS cicloxigenase

Talidomida (1)

PGG2 PGH2

PGHS hidroperoxidase

O N N O O

Prostaglandinas (PGs) Prostaciclina (PGI2) Tromboxana (TXA2)

Espcies radicalares

Estresse Oxidativo Ligaes Covalentes Citotoxicidade

Teratogenicidade
Figura 3. Representao ilustrativa da participao da PGHS na formao de espcies radicalares reativas de (1) (adaptado de Arlen & Wells, 1996).

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NOVAS APLICAES Com base na descoberta das propriedades antiinflamatrias e imunorreguladoras da talidomida (1), a indstria norte-americana Celgene Co. solicitou ao FDA sua aprovao para uso no tratamento da hansenase, concedida em julho de 1998. Marcava-se de forma definitiva o renascimento deste frmaco, que representa, atualmente, um dos principais agentes teraputicos disponveis para o tratamento efetivo dos lepromas29-30. Aps adquirir o direito de comercializar e estudar a talidomida (1), a Celgene Co. iniciou srie de ensaios clnicos com este frmaco, visando ao tratamento de doenas auto-imunes relacionadas ao aumento da concentrao plasmtica de TNF-, tais como artrite reumatide e doena de Crohn3,13,31-33. Trabalhos paralelos divulgados por vrios laboratrios de pesquisa, demonstram a aplicao teraputica potencial da talidomida no cncer, interferindo com o processo de angiognese patolgica, na AIDS, mais especificamente no retardamento da replicao do HIV, e no auxlio da perda de peso desordenada de portadores do vrus da imunodeficincia adquirida e do bacilo da tuberculose 34-38 . Adicionalmente, a talidomida representa a primeira terapia disponvel nos ltimos 20 anos para o tratamento de mieloma mltiplo 4,39. ANLOGOS ESTRUTURAIS DA TALIDOMIDA Objetivando aprimorar-se as propriedades farmacocinticas da talidomida (1) e reduzir seus efeitos teratognicos, inmeros esforos de pesquisa tm sido feitos na busca de anlogos otimizados, com melhor perfil farmacoteraputico, partindo-se da premissa de que se poderiam identificar e excluir os grupamentos toxicofricos presentes em (1), resguardando-se os grupamentos farmacofricos40,41. A primeira abordagem do planejamento e sntese de novos anlogos da talidomida (1) fundamentou-se em estudos prvios da relao entre a estrutura qumica e a atividade (SAR), visando identificar-se os grupamentos farmacofricos necessrios atividade farmacolgica pretendida. Com este intuito, modificaes nas subunidades glutarimida e ftalimida foram realizadas e alguns exemplos de anlogos estruturais de (1) planejados a partir destas modificaes encontram-se ilustrados a seguir. Shibata e colaboradores propuseram a sntese e a avaliao farmacolgica de derivados N-alquil-ftalimdicos (9-12), planejados por modificao estrutural da subunidade glutarimida. Os resultados obtidos por estes autores demonstraram a irrelevncia do grupamento glutarimdico na atividade antiTNF- de (1) (Tabela 1)42. O mesmo grupo de pesquisadores, em trabalhos posteriores, demonstrou que a substituio do grupamento glutarimida por um anel fenlico reduzia a atividade anti-TNF-. Entretanto, a simples funcionalizao na posio orto do anel fenila por grupos alquilas recuperava a atividade biolgica desejada (Tabela 2)43. Em trabalho semelhante, Miyachi e colaboradores sintetizaram e avaliaram farmacologicamente derivados N-fenilftalimdicos funcionalizados (23-26), demonstrando que substituies nas posio orto, meta e para do anel fenila, por grupos alquilas, contribuem, de forma similar, para o aumento da atividade anti-TNF- (Tabela 3)44. Com o objetivo de estudar a relevncia farmacofrica do grupamento ftalimdico, Miyachi e colaboradores sintetizaram e avaliaram o perfil farmacolgico dos derivados (27-31), constatando que, exceo do composto tioimdico (28), modificaes nesta subunidade so acompanhadas por decrscimo na atividade farmacolgica (Tabela 4) 44. Recentemente, os trabalhos de Muller e colaboradores demonstraram, reforando os resultados descritos por Myiachi et. al. (1997)44, a importncia da presena do anel ftalimdico na atividade anti-TNF- (Tabela 5) 45, sugerindo o carter farmacofrico desta subunidade estrutural da talidomida (1).

Tabela 1. Atividade de derivados N-alquil-ftalimdicos no bioensaio de produo de TNF- por clulas HL-60, induzida por 12-O-tetradecanoilforbol-13-acetato (TPA)

O N (9) O O N (12) O CH3 (10)

O CH3 N CH3 O O N N (1) O O H O (11)

O N O

subunidade glutarimida

Composto (dose=100 ?M) 9 10 11 12 1

Quantidade de TNF- (%)a) 102 225 182 521 155

a) A quantidade de TNF- produzida na presena de 3 nM de TPA foi definida como 100%

Tabela 2. Atividade de derivados N-fenil-ftalimdicos no bioensaio de produo de TNF- por clulas HL-60, induzida por 12-O-tetradecanoilforbol-13-acetato (TPA)
O N (13-22) O R

Composto (dose=100 M) 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22
a)

Substituinte (R) H CH3 C2H5 (CH2)2CH3 (CH2)3CH3 (CH2)4CH3 (CH2)5CH3 (CH2)6CH3 (CH2)2Ph CH(CH3)2

Quantidade de TNF- (%)a) 95 102 116 143 164 159 141 152 151 168

A quantidade de TNF- produzida na presena de 3 nM de TPA foi definida como 100% CONCLUSO Quarenta anos aps o incidente teratognico da dcada de 60, a talidomida (1) ressurge como frmaco promissor para o tratamento da hansenase, AIDS e tuberculose, levando esperana a pacientes desesperanosos. Entretanto, despeito das novas aplicaes teraputicas da talidomida (1) seu emprego como frmaco requer avaliao da relao risco-benefcio, exigindo em alguns casos monitoramento mdico adequado. Os relatos de SAR da talidomida e anlogos revelam o potencial farmacofrico do anel ftalimdico ao mesmo tempo que denotam a irrelevncia do grupamento glutarimida na atividade antiTNF- mecanismo evidenciado como responsvel pelos novos efeitos teraputicos de (1). Estes dados, juntamente com hiptese que relaciona a teratogenicidade de (1) ao enzimtica da

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Tabela 3. Atividade de derivados N-fenil-ftalimdicos no bioensaio de produo de TNF- por clulas HL-60, induzida por 12-O-tetradecanoilforbol-13-acetato (TPA)
O N O R

(23-26)

Composto (dose=30 M) 23 24 25 26
a)

Substituinte (R) H 2-CH(CH3)2 3-CH(CH3)2 4-CH(CH3)2

Quantidade de TNF- (%)a) 100 158 158 139

PGHS, denotam o perfil toxicofrico do grupamento glutarimida, viabilizando o planejamento e sntese de novos candidatos a frmacos, anlogos talidomida (1), com maior eficcia teraputica e desprovidos de seu efeito teratognico. Vimos desenvolvendo no Laboratrio de Avaliao e Sntese de Substncias Bioativas (LASSBio) da Faculdade de Farmcia da Universidade Federal do Rio de Janeiro uma linha de pesquisa que visa obteno de novos anlogos da talidomida, estruturalmente planejados de maneira a apresentar atividade antiinflamatria, modulando-se o perfil toxicofrico. Neste contexto, resultados recentes permitiram a obteno de um composto ftalimdico com atividade antiinflamatria superior talidomida (1), apresentando ED50=2,5 mgKg-1, e com expressiva atividade anti-TNF- in vitro46,47,48. AGRADECIMENTOS Os autores agradecem as bolsas de doutorado e de produtividade do CNPq (Br) e aos assessores pelas sugestes que permitiram aprimorar a forma final deste manuscrito. Agradecemos a FUJB o pagamento de "page charges". GLOSSRIO Angiognese: Crescimento de novos vasos sanguneos. Artrite reumatide: Inflamao crnica de etiologia desconhecida associada a destruio progressiva de ossos e cartilagem. Citocina: Glicopeptdeos biossintetizadas por vrios tipos celulares possuindo mltiplas funes imunomoduladoras. Grupamento farmacofrico: Grupo funcional ou grupos funcionais caracterizando subunidade estrutural responsvel pela atividade farmacolgica do frmaco. Grupamento toxicofrico: Grupo funcional ou grupos funcionais caracterizando subunidade estrutural responsvel pela toxicidade do frmaco. Hansenase: Doena infecciosa devida ao desenvolvimento no organismo do bacilo de Hansen, ie., Mycobacterium leprae, que penetra provavelmente pela pele ou pela mucosa nasal, e se propaga ao longo dos nervos perifricos. Lepromas: Leses caractersticas da hansenase. Lipopolisacardeo (LPS): Componente da parede celular bacteriana capaz de estimular resposta inflamatria in vitro e in vivo por meio de mecanismos envolvendo clulas do sistema imunolgico. Mieloma mltiplo: Tipo raro de cncer nos ossos. PBMC (peripheral blood mononuclear cells): Mistura de clulas sanguneas brancas, constituda primariamente de linfcitos e moncitos. Razo eudsmica: Potncia do eutmero (enantimero com maior afinidade) relativa do distmero (enantimero de menor afinidade). REFERNCIAS 1. Sneader, W.; Drug Discovery: The evolution of modern medicines 1985 John Wiley & Sons, Inc., New York, pp.1. 2. Randall, T.; JAMA 1990, 263,1474. 3. Powell, R. J.; Brit. Med. J. 1996, 313, 377. 4. Raje, N.; Anderson, K.; N. Engl. J. Med. 1999, 341, 1606. 5. Mellin, G.W.; Katzenstein, M.; N. Engl. J. Med. 1962, 267, 1184. 6. Stirling, D.; Ann. Rept. Med. Chem. 1995, 30, 319. 7. McBride, W. G.; Lancet 1961, 1, 1358. 8. Lenz, W. Lancet 1962, 2, 45. 9. Cheymol, J.; Rev. Assoc. Med. Bra. 1965, 11, 123. 10. Kelsey, F. O.; Am. J.Public. Health 1965, 55, 703. 11. Koehler, C. S. W.; MDD 2000, 69.

A quantidade de TNF- produzida na presena de 10 nM de TPA foi definida como 100%

Tabela 4. Perfil farmacolgico de anlogos da talidomida (1), apresentando variaes na subunidade succinimida no bioensaio de produo de TNF- por clulas HL-60, induzida por 12-Otetradecanoilforbol-13-acetato (TPA)

O N (27) O (28)

S N O (29) O N

H3C

N N

O N O

(30)

(31)

Composto (dose=30 M) 27 28 29 30 31

Quantidade de TNF- (%)a) 602 1252 214 134 268

a) A quantidade de TNF- produzida na presena de 10 nM de TPA foi definida como 100%

Tabela 5. Inibio da biossntese de TNF- estimulada por LPS em PBMC.


O N R (32a-b) O N O H R (33-34) O O O N N H O

Composto

Substituinte (R)

Inibio da produo de TNF- 100 M 99% 85% 74% 15%

Anti-TNF- IC50 3.9nM 93nM 100nM ND

32a 32b 33 34

(S)-4-NH2 (R)-4-NH2 4-NH 2 5-NH 2

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12. Sheskin, J.; Clin. Pharm. Ther. 1965, 6, 303. 13. Bessis, D.; Guillot, B.; Monpoint, S.; Dandurand, M.; Guilhou, J. J.; Lancet 1992, 339, 549. 14. Kaplan, G.; Sampaio, E. P.; Sarno, E. N.; Galily, R.; Cohn, Z. A.; J. Exp. Med. 1991, 173, 699. 15. Donnison, G. H.; U. S. Patent 1959, 2,876,225. 16. Schumacher, H.; Smith, R. L.; Williams, R. T.; Brit. J. Pharmacol. 1965, 25, 324. 17. Wnendt, S.; Zwingenberger, K.; Nature 1997, 385, 303. 18. Eriksson, T.; Bjrkman, S.; Roth, B.; Fyge, A.; Hglund, P.; Chirality 1995, 7, 44. 19. Eriksson, T.; Bjrkman, S.; Roth, B.; Fyge, A.; Hglund, P.; Chirality 1998, 10, 223. 20. Testa,B.; Carrupt, P. A.; Gal, J.; Chirality 1993, 5, 105. 21. Gordon, G. B.; Spielberg, S. P.; Blake, D. A.; Balasubramanian, V.; Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1981, 78, 2545. 22. Arlen, R. R.; Wells, P. G.; J. Pharmacol. Exp. Ther. 1996, 277, 1649. 23. Tabin, C. J.; Nature 1998, 396, 322. 24. Neubert, R.; Merker, H -J.; Neubert, D.; Nature 1999, 400, 419. 25. Stephens, T. D.; Teratology 1988, 38, 229. 26. Neubert, R.; Hinz, N.; Thiel, R.; Neubert, D.; Life Sci. 1996, 58, 295. 27. Stephens, T. D.; Bunde, C. J. W.; Fuillmore, B. J.; Biochem. Pharmacol. 2000, 1489. 28. Mannett, L. J.; Environ. Health Perspect. 1990, 88, 5. 29. Calderon, P.; Anzilotti, M.; Phelps, R.; Int. J. Dermatol. 1997, 36, 881. 30. Aarestrup, F. M.; Sampaio, E. P.; de Moraes, M. O.; Albuquerque, E. C. A.; Castro, A. P. V.; Sarno, E. N.; Int. J. Leprosy. 2000, 68, 156. 31. Badger, A. M.; Adams, J. L.; Ann. Rept. Med. Chem. 1998, 33, 203. 32. Hart, T.; Lamont, A.; Williams, D.; DDT 1998, 3, 516. 33. Sartor, R. B.; New Engl. J. Med. 2000, 1664.

34. James, J. S.; AIDS Treat News 1995, 3, 1. 35. Muller, G. W.; Chemtech 1997, 27, 21. 36. Rojas, M.; Olivier, M.; Gros, P.; Barrera, L. F.; Garca, L. F.; J. Immunol. 1999, 162, 6122. 37. Peuckmann, V.; Fisch, M.; Bruera, E.; Drugs 2000, 60, 273. 38. Kling, J.; MDD 2000, 35. 39. Singhal, S.; Mehta, J.; Desikan, R.; Ayers, D.; Roberson, P.; Eddlemon, P.; Munshi, N.; Anaissie, E.; Wilson, C.; Dhodapkar, M.; Zeldis, J.; Barlogie, B.; N. Engl. J. Med. 1999, 341, 1565. 40. Corral, L. G.; Haslett, P. A. J.; Muller, G. W.; Chen, R.; Wong, L. -M.; Ocampo, C. J.; Patterson, R. T.; Stirling, D. A.; Kaplan, G.; J. Immunol. 1999, 163, 380. 41. Marriot, J. B.; Westby, M.; Cookson, S.; Guckian, M.; Goodbourn, S.; Muller, G.; Shire, M. G.; Stirling, D.; Dalgleish, A. G.; J. Immunol. 1998, 161, 4236. 42. Shibata, Y.; Shichita, M.; Sasaki, K.; Nishimura, K.; Hashimoto,Y.; Iwasaki, S.; Chem. Pharm. Bull. 1995 , 43, 177. 43. Shibata, Y.; Sasaki, K.; Hashimoto, Y.; Iwasaki, S.; Chem. Pharm. Bull. 1996, 44, 156. 44. Miyachi, H.; Azuma, A.; Ogasawara, A; Uchimura, E.; Watanable, N.; Kobayashi, Y.; Kato, F.; Kato, M.; Hashimoto, Y.; J. Med. Chem. 1997, 40, 2858. 45. Muller, G. W.; Chen, R.; Huang, S. -Y; Corral, L. G.; Wong, L. M.; Patterson, R. T.; Chen, Y.; Kaplan, G.; Stirling, D. I.; Bioorg. Med. Chem. 1999, 9, 1625. 46. Lima, L. M.; Castro, P.; Fraga, C. A. M.; Gonalves de Moraes, V. L.; Barreiro, E. J.; 23a Reunio Anual da SBQ, Poos de Caldas, MG, 2000. 47. Lima, L. M.; Castro, P.; Fraga, C. A. M.; Claire, L.; Gonalves de Moraes, V. L; Barreiro, E. J.; resultados no publicados. 48. Lima, L. M.; de Souza, S. D.; Menezes, C. M. S.; Castro, P.; Verli, H.; Fraga, C. A. M.; Rodrigues, C. R.; de Moraes, V. L. G.; Barreiro, E. J.; 24 Reunio Anual da SBQ, Poos de Caldas, MG, 2001.