A kromatogrfia trtnete [szerkeszts] A kromatogrfia trtnete a XIX. szzad kzeptl a XXI. szzadig vel. A kromatogrfia nevt a XX.

szzad els vtizedben kapta, hasznlata is ekkor kezddtt elssorban nvnyi pigmentek, pldul klorofill elvlasztsra. Az 1930-as s 1940-es vekben kifejlesztett j kromatogrfis mdszerek elvlasztsi folyamatok s kmiai analitikai feladatok szles krre tettk alkalmass a technikt, klnsen a biokmia terletn. Tbb hasonl eljrst fejlesztettek ki a XIX. szzad sorn (st mg korbban is), de az els igazi kromatogrfia Mihail Szemjonovics Cvet orosz botanikus nevhez kthet, aki klorofillon vgzett ksrlete kzben egy fgglegesen elhelyezett kalcium-karbonttal tlttt vegcsvet hasznlt nvnyi pigmentek elvlasztsra a XX. szzad els vtizedben. A mdszert is nevezte el. A kromatogrfia modern formja Archer John Porter Martin s Richard Laurence Millington Synge az 1940-1950-es vekben vgzett munkssgt kveten alakult ki. k fektettk le a megoszlsi kromatogrfia alapelveit s alapvet technikit s munkjuk nyomn a megindult a kromatogrfis mdszerek szmos fajtjnak (papr kromatogrfia, gz kromatogrfia, valamint a manapsg nagy teljestmny folyadk kromatogrfiaknt ismert eljrs) gyors fejldse. A megoszlsi kromatogrfia tern vgzett munkssgukrt Archer John Porter Martin s Richard Laurence Millington Synge 1952-ben Nobel-djat kaptak. Azta a technolgia gyorsan fejldtt. A kutatk megllaptottk, hogy a Cvet kromatogrfijt megalapoz elvek szmos mdon felhasznlhatk, gy alakulhatott ki a kromatogrfia albbiakban bemutatott szmos vlfaja. Ugyanakkor a kromatogrfia technikai teljestkpessge is folyamatosan javult, egyre inkbb lehetv tve nagyon hasonl molekulk elvlasztst is. Szakkifejezsek

Analitnak nevezzk a kromatogrfia sorn elvlasztand anyagot. Az analitikai kromatogrfia az analit(ok) mintban val jelenltnek bizonytst (minsgi meghatrozs) valamint lehetleg koncentrcijnak meghatrozst (mennyisgi elemzs) jelenti. Kttt vagy immobilizlt fzisnak a hordoz szemcskhez vagy az oszlop bels falhoz kovalens ktssel kttt ll fzist nevezzk. Kromatogram a kromatogrf lthatv tett kimeneti jele. Optimlis elvlaszts esetn a kromatogram klnbz cscsai vagy mintzatai az elvlasztand keverk klnbz komponenseinek felelnek meg.

Az x koordinta a retencis id, az y koordinta pedig a rendszerbl kilp analit(ok) keltette vlasz jel nagysgt. Az rzkel berendezs lehet pldul spektrofotomter, tmeg spektromter vagy szmos ms tpus detektor. Optimlis rendszer esetn a jel arnyos az elvlasztott analit koncentrcijval.

Kromatogrf a kszlk mellyel lehetsges a megfelel szint elvlaszts kivitelezse, pldul gzkromatogrf vagy folyadk kromatogrf. A kromatogrfia fizikai elvlasztsi mdszer, ahol az elvlasztand komponensek kt fzis kztt oszlanak meg, ezek kzl az egyik helyhez kttt (ll fzis), mg a msik adott irnyba mozog (mozg fzis). A mozg fzis vagy eluens egy adott irnyban ramlik. Lehet folyadk (LC vagy CEC), gz (GC) vagy szuperkritikus folyadk (szuperkritikus folyadk kromatogrfia SFC). Alternatv definci szerint a mozg fzis az elvlasztand / vizsgland mintt s mintt a kolonnn tviv oldszert tartalmazza. A mozg fzis keresztlhalad a kromatogrfis oszlopon (az ll fzison), ahol a minta klcsnhatsba lp az llfzissal s megtrtnik az elvlaszts. Effluensnek nevezzk az oszloprl tvoz mozg fzist. A preparatv kromatogrfia clja egy adott anyag tovbbi felhasznlsra alkalmas mennyisgnek tiszttsa, nem pedig minsgi vagy mennyisgi meghatrozsa. A retencis id az adott analitnak adott krlmnyek kztt a rendszeren (a kolonna bemenettl a detektorig) val thaladshoz szksges idtartam. A minta a kromatogrfival vizsglt anyag. llhat egyetlen sszetevbl vagy tbb komponens elegye is lehet. Ahogy a mrs sorn kezeljk a mintt, a vizsglt analito(ka)t tartalmaz fzist vagy fzisokat nevezzk mintnak, mg a mrs sorn minden a vizsglt minttl elvlasztott szmunkra rdektelen rszt hulladkknt tekintnk. Oldott anyag megoszlsi kromatogrfiban a minta komponenseit jelenti 2

Oldszer brmely anyag, amely kpes ms anyagokat oldatba vinni, klnsen folyadkkromatogrfiban a folykony mozg fzis. ll fzis a kromatogrfis eljrs sorn helyben rgztett anyag, mint pldul vkonyrteg kromatogrfiban a szilika rteg.

A kromatogrfia fajti a kromatogrfis gy alakja szerint Oszlopkromatogrfia Oszlopkromatogrfis elvlasztsi technika esetn az llfzis egy csben tallhat. A szilrd llfzis szemcsi vagy a hordozra felvitt folykony llfzis a cs teljes trfogatt megtltheti (tlttt oszlop) vagy a cs fala mentn koncentrldhat nyitott, akadlymentes utat hagyva a mozg fzisnak a cs kzps rszn (nyitott cs oszlop). A kzegen val thalads sebessg klnbsgt a minta klnbz retencis ideibl szmoljuk. 1978-ban W.C. Still j mdostst vezette be, melyet flash oszlop kromatogrfinak nevezett. Az eljrs nagyon hasonlt a hagyomnyos oszlop kromatogrfihoz, az eltrs csak annyi, hogy az oldszert nyoms alkalmazsval visszk t az oszlopon. gy a legtbb elvlaszts kevesebb, mint 20 perc alatt kivitelezhet, s az elvlaszts is jobb, mint a hagyomnyos mdszernl. A modern flash kromatogrfis rendszereket elre csomagolt manyag oszlopknt ruljk s az oldszert a tlttt oszlopon vezetik keresztl. A rendszert detektorokkal vagy frakci szedkkel bvthetjk lehetv tve az automatizlst. A gradiens pumpk bevezetse gyorsabb elvlasztst s kisebb oldszer felhasznlst eredmnyezett. Lteznek olyan segdprogramok a flash kolonnk sikeres fejlesztshez, melyek megbecslik az analitok retencis trfogatt, a svok szlessgt, az egyes analitokat tartalmaz frakcik szmt s a szomszdos cscsok kztti elvlst. gy a felhasznl mg a flash kolonna hasznlatba vtele eltt kivlaszthatja a preparatv elvlasztshoz szksges optimlis paramtereket. [3] Az expanded bed adsorption (EBA) az oszlopkromatogrfia egy specilis vltozata, ahol a hagyomnyos szilrd fzis tlttt oszlop helyett, a oszlopban a szemcsk fluidizlt llapotban vannak. Ezltal lehetsges a kezdeti tiszttsi lpsek, mint pldul a centrifugls s a szrs elhagysa tenyszetek vagy roncsolt sejtek esetn. Skkromatogrfia

Klorofill komponenseinek elvlasztsa vkonyrteg kromatogrfival A skkromatogrfia olyan elvlasztsi technika, ahol az llfzis skban helyezkedik el vagy sk lemezre viszik fel. Ez a sk lehet papr, melyet nmagban hasznlunk vagy melyet valamilyen anyaggal impregnlva kapjuk az llfzist (paprkromatogrfia). A msik lehetsg, hogy szilrd szemcskbl ll rteget visznk valamilyen hordozra, pldul veglemezre vagy alumnium flira (vkonyrteg kromatogrfia). A minta elegyben lev klnbz vegyletek eltr tvolsgra vndorolnak attl fggen, hogy milyen ersen ktdnek az llfzishoz a mozg fzishoz viszonytva. Az egyes vegyletekre jellemz visszatartsi tnyez (angolul retardation factor - Rf) segthet az ismeretlen anyagok azonostsban. Paprkromatogrfia Ennl az eljrsnl egy specilis kromatogrfis paprcsk egyik vgre cseppentjk fel a mintaoldatot. A paprcskot vkony rtegben oldszert tartalmaz ednybe lltjuk, melyet ezutn lefednk. Ahogy az oldszer vgighalad a papron, thalad a minta elegyen, amely az oldszerrel egytt vndorolni kezd. A kromatogrfis papr cellulzbl kszl, ami polris anyag, gy a minta kevsb polris komponensei messzebb vndorolnak. A polrisabb vegyletek gyorsabban ktdnek a cellulz paprhoz, gy kevsb vndorolnak. Vkonyrteg-kromatogrfia (VRK, angolul thin layer chromatography, TLC) A vkonyrteg kromatogrfia (VRK) a paprkromatogrfihoz hasonlt szles krben alkalmazott laboratriumi eljrs. llfzisknt papr helyett lapos, inert hordozra felvitt SiO2, Al2O3 vagy cellulz helyettesti. Elnye a paprhoz kpest a rvidebb futsi id, a jobb elvlaszts s a klnbz adszorbensek kztti vlaszts lehetsge. Mg jobb elvlaszts s mennyisgi meghatrozs rhet el nagy teljestmny VRK angolul High Performance Thin Layer Chromatography HPTLC alkalmazsval. A kromatogrfia fajti a mozgfzis halmazllapota szerint Gzkromatogrfia (GC) 4

A gzkromatogrfia (GC), amelyet gz-folyadk kromatogrfiaknt (GLC) is emlegetnek, olyan elvlasztsi technika, melynl a mozg fzis gz. A gzkromatogrfia tetszleges halmazllapot, de az esetek tbbsgben gz- vagy folyadkmintk sszettelnek meghatrozsra hasznlt analitikai mdszer. A mrs kt rszbl ll: mrs-elksztsbl (ami esetnkben a gzelegy alkotinak a sztvlogatsa) s magbl a mrsbl az rzkel rendszeren. A mrs elksztse sorn elszr elkeverik a gznemv alaktott (vagy mr gznem) mrend mintt egy msik, semleges gzban, az gynevezett vivgzban, mely folyamatosan ramlik egy csvn t. A csbl a keverk olyan akadlycsbe, kolonnba kerl, amelyben nagy fellet anyagot tartalmaz szilrd szemcsk helyezkednek el. Ezek a szilrd szemcsk ketts akadlyt kpeznek. Egyrszt mozgsukban is, msrszt felleti aktivitsukkal is akadlyozzk a beraml gzelegyet. Az ismeretlen gz sszetevire klnbzkppen hatnak az akadlyok, ezrt az ismeretlen gzelegy sszetevi ms s ms mrtkben lassulnak le a hossz akadlycsvn val thalads sorn. Az thalads vgre gy klnbz sorrendben rkeznek meg, s egymst kvetve jutnak az rzkel rendszerbe. A sztvlasztott gzokat ezutn tbbfle detektor (hvezet-kpessgi, lngionizcis) rzkelheti. A lngionizcis (FID) detektorban a gzt hidrogn s oxign elegyvel tpllt lngba vezetik, mely a szerves komponenseket ionizlja, a detektor elektrdi kztt foly ram arnyos az adott komponens koncentrcijval. A detektor jele egy feldolgoz egysgbe kerl, mely sszekttetsben ll egy kijelzvel. A kijelzn ezutn megjelenik egy grbe, melynek retencis ideje az anyag minsgre, amplitdja az anyag mennyisgre jellemz. A mintabeviteltl (injektlstl) a grbe cscspontjig eltelt idt retencis idnek hvjuk. A pontos mennyisg a grbe alatti terlet kiszmtsval (integrlsval) hatrozhat meg meg. Rgebbi tpus gzkromatogrfoknl a grbt egy toll rajzolta le egy elre megvonalazott paprlapra. Az jabb tpusok mr szmtgppel vannak sszektve, gy a grbe a monitoron is megjelenik. Nhny kolonna-tltet a 90-es vekbl: SP (szilikon-polimer) 3 s 20%-os, Porapak Q. A kirtkelshez gyakran hasznlnak tmegspektromtert is. Folyadkkromatogrfia (LC) A folyadkkromatogrfia (LC) olyan elvlasztsi technika, melyben a mozgfzis folyadk. Folyadkkromatogrfit akr kolonnn, akr skban lehet elvgezni. Napjainkban a folyadkkromatogrfis alkalmazsokban ltalban kis mret rszecskkbl ll tlteteket s viszonylag nagy nyomst hasznlnak, ezrt a technikt nagy teljestmny (vagy nagynyoms)folyadkkromatogrfinak nevezik. A HPLC avagy nagy teljestmny folyadkkromatogrfia (angulul High Performance Liquid Chromatography, vagy High Pressure Liquid Chromatography) a biokmiban s analitikai kmiban vegyletek elvlasztsra, azonostsra s mennyisgi meghatrozsra gyakran hasznlt kromatogrfis eljrs. Az els ilyen jelleg kromatogrfot Horvth Csaba magyar professzor ptette meg.

A HPLC rendszer a kvetkez alkotrszekbl ll: a kromatogrfis tltetet (llfzist) tartalmaz oszlopbl (kolonnbl), a mobil fzist (mozg fzist, eluenst) az oszlopon tnyom pumpbl valamint a molekulk retencis (visszatartsi) idejt jelz detektorbl. A retencis id az ll fzis, a vizsglt molekula s a mozg fzis kztti klcsnhatsoktl fgg. A HPLC-s technikban a mintt a szablytalan vagy gmb alak szemcskkel tlttt vagy potrzus monolit rtegbl kszlt kolonnn (ll fzis) nyomjk keresztl nagy nyomson valamilyen folyadkkal (mozg fzis). A mozg s ll polaritsa alapjn a HPLC-s alvlasztsokat kt csoportba sorolhatjuk. Norml fzis folyadkkromatogrfirl (angolul normal phase liquid chromatography - NPLC) beszlnk, ha ha az llfzis polrisabb mint a mozg fzis, mg az ellenkezjt fordtott fzis folyadk kromatogrfinak (angolul reversed phase liquid chromatography - RPLC) nevezzk.

A mrs kivitelezse A vizsgland mintt feloldjuk s az oldat kis trfogatt az raml mozg fzisba vezetjk (injektljuk). A minta, mikzben keresztlhalad a kolonnn, az ll fzissal val specifikus kmiai vagy fizikai klcsnhatsok rvn visszamarad a folyadkramhoz kpest (retardldik). A visszatarts mrtke a vizsgland anyag s az llfzis tulajdonsgaitl valamint a mozg fzis sszetteltl fgg. Azt az idtartamot, mely alatt egy adott anyag eluldik (megjelenik a kolonna vgn) retencis idnek nevezzk. Egy adott rendszerben a retencis id az egyes vizsglt vegyletek viszonylag egyedi jellemzje. Nagyobb nyomst alkalmazva megnvelhet a lineris ramlsi sebessg, gy a komponenseknek kevesebb idejk marad a kolonnn belli diffzira, ami javtja az egyes anyagok kztti elvlst. Mozg fzisknt ltalban vizet s klnbz szerves folyadkokat, leggyakrabban metanolt ill. acetonitrilt hasznlnak. A minta komponenseinek jobb elvlasztst segthetik a vzhez adott pufferek vagy sk, vagy egyb anyagok, mint pldul az ionpr kpzknt alkalmazott trifluorecetsav. Tovbbi lehetsget jelent a HPLC techniknl a mozg fzis sszettelnek mrs kzbeni vltoztatsa, amit gradiens elcinak neveznk. Pldul fordtott fzis kromatogrfiban a vizsglt anyagok hidrofobicitsnak fggvnyben a mrst kezdhetjk 5% metanolt tartalmaz mozg fzissal, majd 25 perc alatt a metanol arnyt linerisan 50%-ra nveljk. Gradiens elcinl a vizsgland keverk komponenseinek elvlsa fgg a komponensnek az aktulis mozg fzis sszettelhez valamint az ll fzishoz val affinitstl. Ez a megoszlsi folyamat hasonl a folyadk-folyadk extrakcit jellemz megoszlshoz, azzal az eltrssel, hogy nem lpcszetes, hanem folyamatos. A fenti pldban, ahol vz/metanol gradienst hasznltunk, az ersebb hidrofb tulajdonsgot mutat komponensek viszonylag magasabb metanol tartalomnl eluldnak (a metanol a hidrofbabb komponens), mg a hidrofil komponensek alacsony metanol/magas vz arnynl eluldnak. Az oldszerek, adalkanyagok s a gradiens megvlasztsa az llfzis s a vizsgland anyag tulajdonsgaitl fgg. A HPLC tpusai 6

Norml fzis kromatogrfia A norml fzis HPLC (NP-HPLC) polarits alapjn vlasztja el a vizsglt minta komponenseit, ez volt az elsknt alkalmazott HPLC-s eljrs. Az NP-HPLC polris ll fzist s apolris mozg fzist alkalmaz, viszonylag polris anyagok elvlasztsra alkalmazhat hatkonyan. A vizsglni kvnt polris anyag kapcsolatba lp a polris ll fzissal s gy visszamarad. Az adszorpci erssge n a vizsglt anyag polaritsnak nvekedsvel. A polris komponens s a (mozg fzishoz kpest) polris ll fzis klcsnhatsnak ersdsvel n a retencis id. A klcsnhats erssge nemcsak a vizsglt molekula funkcis csoportjaitl fgg, hanem sztrikus tnyezktl is, ezrt ezzel a mdszerrel szerkezeti izomerek elvlasztsa is lehetsges. Ha a mozg fzisban polrisabb oldszereket hasznlunk, cskken a vizsgland anyagok retencis ideje, mg hidrofb oldszerek inkbb nvelik a retencis idt. Nagyon polris oldszerek megktdhetnek az llfzis felsznn, gy hasznlatuk deaktivlhatja a kolonnt. Az NP-HPLC jelentsge az 1970-es vekben jelents mrtkben lecskkent a fordtott fzis HPLC fejldsvel prhuzamosan. NP-HPLC esetn jval kevsb stabil a retencis id, mivel vz vagy ms protikus szerves oldszerek megvltoztatjk a szilika vagy alumnium-oxid kromatogrfis llfzis hidratltsgi llapott. jabban a HILIC llfzisok kifejlesztsvel javult a retencis id reproduklhatsga. Fordtott fzis kromatogrfia A fordtott fzis HPLC (Reversed phase HPLC, RP-HPLC vagy RPC) esetn az llfzis fellete apolris, mg a mozg fzis polris, jellemzen vz s valamely szerves oldszer elegye. Gyakran hasznlt ll fzis az RMe2SiCl-dal kezelt szilika, ahol R valamilyen egyenes sznlnc alkil csoport, pl. C18H37 vagy C8H17. Ilyen ll fzisokat alkalmazva az apolrosabb molekulk retencis ideje hosszabb, mg a polros molekulk gyorsabban eluldnak. Apolros oldszert adva a mozg fzishoz cskkenthetjk, mg hidrofilebb oldszer hozzadsval pedig nvelhetjk a retencis idt. Az RP-HPLC hasznlata annyira elterjedt, hogy gyakran tvesen HPLC-knt emlegetik, minden tovbbi pontosts nlkl. A gygyszeripar rendszeresen alkalmazza az RP-HPLC-t a gygyszerek minsgellenrzse sorn. Az RP-HPLC a hidrofb klcsnhatsok elvn mkdik, mely a polris mozg fzis, a viszonylag apolris vizsgland anyag s az apolris llfzis kztt mkd repulzv erk eredmnye. A vizsgland anyag ktdse az llfzishoz arnyos a vizsglt molekula apolris szegmense krl a vizes mozg fzisban a ligandummal val klcsnhatsban kialakul rintkez fellet terletvel. A retenci cskkenthet, ha kevsb polros oldszert (metanolt, acetonitrilt) adva a mozg fzishoz cskkentjk a vz felleti feszltsgt. A vizsglt molekula szerkezeti tulajdonsgai fontos szerepet tltenek be a retencis tulajdonsgok meghatrozsban. ltalnossgban elmondhatjuk, hogy a nagyobb, a vzzel kapcsolatba nem lp, hidrofb fellettel rendelkez vizsgland anyagok (C-H, C-C, ill. ltalban az apolros ktsek, mint pl. az S-S) retencis ideje

hosszabb. Msrszt a polros csoportok, mint pldul az -OH, -NH2, COO- vagy -NH+3 visszatartsa kisebb, mivel ezek jl elegyednek vzzel. Ugyanakkor a nagyon nagy molekulk esetn a ligandumok alkil lncai s a vizsglt anyag nagy fellete kztti kapcsolat hinyos lehet, valamint a molekulnak gondot jelenthet az llfzis prusaiba val belps. A hidrofb (apolris) fellettel arnyosan n a retencis id. Az elgaz sznlnc vegyletek gyorsabban eluldnak, mint egyenes lnc izomerjk, mivel kisebb a felletk. Hasonlan az egyszeres C-C kts vegyletek ksbb eluldnak, mint a ketts vagy hrmas ktsek, mivel a ketts vagy hrmas kts rvidebb, mint az egyszeres. A mobil fzis felleti feszltsge (az eluens struktrjnak f rendez ereje) mellett, ms mobil fzist mdost anyagok is befolysoljk a vizsglt komponensek retencijt. Pldul szervetlen sk hozzadsa lineris sszefggs szerint mrskelten nveli a vizes oldatok felleti feszltsgt (kb. 1,510 7 J/cm per mol NaCl esetn, 2,510 J/cm per mol (NH4)2SO4 esetn), s mivel a vizsglt molekula s az oldszer kztti kapcsolat entrpijt a felleti feszltsg szablyozza, sk hozzadsa nvelheti a retencis idt. Ezt az eljrst alkalmazzk pl. fehrjk gyenge elvlasztsra, regenerlsra s biolgiai aktivitsnak megrzsre fehrje analzis sorn (hidrofb klcsnhats kromatogrfia hydrophobic interaction chromatography, HIC). Tovbbi fontos tnyez az elvlaszts szempontjbl a pH hatsa, mivel megvltoztathatja a vizsglt anyag hidrofobicitst. Ezrt a legtbb mdszer valamilyen puffert alkalmaz, pldul ntrium-foszftot, a pH szablyozsra. A pufferek tbb szerepet is betltenek: szablyozzk a pH-t, semlegestik az ll fzis felsznn esetleg hozzfrhet maradk szilikt tltst valamint ionpr kpz reagensknt semlegestik a vizsglt anyag tltst. Az ammnium-formitot gyakran hasznljk tmegspektrometris detektls esetn a bizonyos vizsglt molekulk detektlhatsgnak nvelsre ammnium komplex kpzdse miatt. Tmegspektrometris vizsglatoknl az eluenshez gyakran adnak illkony szerves savakat, pldul ecetsavat vagy mg gyakrabban hangyasavat. Tmegspektrometris vizsglatoknl ritkn alkalmaznak trifluor-ecetsavat, mivel felhalmozdik a detektorban s az oldszer szllt rendszerben, de msfle detektlssal dolgoz alkalmazsoknl hasznos lehet karbonsav vegyletek retencijnak nvelsben, mivel ez az egyik legersebb szerves sav. A savak s pufferek hatsa az alkalmazstl fgg, de ltalban javtjk a kromatogrfis meghatrozs minsgt. A fordtott fzis kolonnk sokkal kevsb srlkenyek, mint a norml fzis szilika oszlopok, br szmos fordtott fzis kolonna alkil-derivatizlt szilika szemcsket tartalmaz, melyeket soha nem szabad vzben oldott bzisokkal hasznlni, mivel ezek lebontjk a szilika szemcsket. Vzben oldott savakat hasznlhatunk, de lehetleg ne tegyk ki a kolonnt tl sokig savaknak, mivel ezek korrodlhatjk a HPLC kszlk fm alkatrszeit. Hasznlat utn az RP-HPLC kolonnkon tiszta oldszert kell ramoltatni, hogy eltvoltsuk a maradk savakat vagy puffereket, majd a megfelel oldszer alatt kell ket trolni. Hasznlat utn a fordtott fzis kolonnkon tiszta oldszert kell tramoltatni a savak vagy sk maradknak eltvoltsra, majd megfelel oldszerelegyben kell trolni. Ha meg akarjuk rizni a kolonna elvlaszt kpessgt az oszlop

fmtartalmt a lehet legalacsonyabban kell tartani. A kolonna fmtartalmnak ellenrzsre alkalmas a kvetkez mdszer: injektljunk 2,2'- s 4,4'- bipiridin elegyt tartalmaz mintt az oszlopra. Mivel a 2,2'-bipiridin keltot kpezhet fmionokkal, ezrt a 2,2'-bipiridin cscsa torzul, ha fm ionok vannak jelen a szilika felsznn. Apolris kts ltalban kt azonos atom kztt van. Mivel a ktsben mindkt atom azonos, mindegyik egyformn hzza maga fel a ktsben rsztvev elektronprt. - Polris kts klnbz atomok kztt van ltalban. Annl polrisabb a kts, minl nagyobb a kt atom kztti elektronvonz kpessg (elektronegativits) klnbsg. Ha az egyik atom jobban vonzza a ktsben rsztvev elektronprt, az felli rsze kicsit elektronban dsabb (rszleges negatv tlts), a msik atom felli rsze szegnyebb (rszleges pozitv tlts) lesz. Szimmetrikus (apolris) dolgok: benzol, hossz sznlnccal rendelkez dolgok: pl PE palack:D Asszimetrikus (polris) dolgok: szappan, vz. A ktsek ltalban tbbsgben polrisak, igen. De a vegylet sszpolaritst a ktsek helyzete is befolysolja. Ha szimmetrikusan helyezkednek el a polris ktsek egy molekuln bell, akkor kiegyenltik egyms hatst, teht a molekula sszessgben apolris lesz. Apolris vegyletek pldul a metn, vagy a szndioxid. (Igaz, hogy klnbz atomok kztt van bennk kts, ami kis mrtkben polris is, de szimmetrikus molekulk, ezrt a ktsek polaritsa kiegyenltdik.) A molekula polaritst a ktsek polaritsnak irny s nagysg szerinti sszege hatrozza meg. Egy molekula akkor polris, ha benne polris ktsek vannak, s a molekula tralakja olyan, hogy a tltsek nem szimmetrikusan oszlanak el. A molekula egyik rsze viszonylag negatv, a msik rsze viszonylag pozitv lesz