Manual de Orientações para Coleta, Preparo e

Sistema nico de Sade Estado de Santa Catarina Secretaria de Estado da Sade Laboratrio Central de Sade Pblica LACEN/SC
Av. Rio Branco, 152 Fundos CEP 88015-201 Florianpolis SC. Tel: (0XX 48 3251 7800) - Fax: (0XX 48 3251 7900) e-mail: lacen@saude.sc.gov.br Documento
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MANUAL DE ORIENTAES PARA COLETA, PREPARO E TRANSPORTE DE MATERIAL BIOLGICO
Elaborado por Semramis Maria Duarte Dutra Verificado por Eliane Bressa Dalcin Sara Letcia Kretzer Rita de Cssia Bertoncini Darcita Buerguer Rovaris Fernanda Lautert Paiva Marlei Pickler Debiasi dos Anjos Lea Ruhland Vitrio Luiz Gandolffi Luiz Carlos Dutra Sandra Bianchini Aprovado por Igara E. Noceti e Vieira Mauro M. Lindorfer Referendado por Joo A. Daniel Filho
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Estado de Santa Catarina Secretaria de Estado da Sade Laboratrio Central de Sade Pblica LACEN/SC
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AGRADECIMENTO ESPECIAL
Aos servidores do LACEN que colaboraram com as informaes contidas neste Manual.
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SUMRIO CAPTULO I APRESENTAO 1 Objetivo 2 Campo de aplicao 3 Siglas 4 Referncias CAPTULO II CONDIES GERAIS 1 Cuidados preliminares 2 Procedimentos de biossegurana 2.1 Equipamentos de Proteo Individual - EPI 2.2 Equipamentos de Proteo Coletiva - EPC 2.3 Lavagem das mos 2.4 Limpeza da bancada de trabalho 2.5 Descarte de materiais contaminados e prfuro-cortantes 3 Requisies, Fichas de Notificao e Modelo de Laudo Mdico para Emisso do Boletim de Produo Ambulatorial (Individualizado) BPA-I 3.1 Requisies e Fichas de Notificao 3.2 Boletim de Produo Ambulatorial (Individualizado) - BPA-I 4 Coleta de amostras 4.1 Requisio 4.2 Coleta de Sangue 4.3 Demais amostras 5 Preparo da amostra 5.1 Preparo dos tubos que vo receber a amostra 5.2 Centrifugao/separao do soro ou plasma 5.3 Identificao da amostra 6 Acondicionamento para o transporte 6.1 Para transporte de curta distncia 6.2 Para transporte de longa distncia 6.3 Condies de transporte nas viaturas CAPTULO III EXAMES REALIZADOS 1 Relao de exames realizados no LACEN 1.1 Bacteriologia 1.2 Hansenase 1.3 Leptospirose 1.4 Malria, Leishmaniose, Doena de Chagas Agudo (DCA) 1.5 Tuberculose 21 21 21 23 23 23 23 11 11 11 11 12 12 13 13 14 14 15 16 16 16 17 17 17 18 18 19 19 19 19 07 08 08 08 08
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1.6 1.7 1.8 1.9 1.10 2 2.1 2.2 2.3
Micologia Virologia Biologia Molecular Imunologia Anlises Neonatais Exames encaminhados pelo LACEN para laboratrios de referncia Relao dos exames e amostras a serem coletadas Laboratrios de Referncia Orientaes especficas de coleta e transporte das amostras
24 25 25 26 26 27 27 28 28
CAPTULO IV COLETA E TRANSPORTE 1 Orientaes Gerais 2 Exames bacteriolgicos 2.1 Orientaes de coleta e transporte das amostras em relao ao exame solicitado 2.2 Orientaes especficas de coleta 2.2.1 Urina 2.2.2 Amostras de doenas transmitidas por alimentos 2.2.3 Secrees genitais 2.2.4 Lquor 2.2.5 Sangue (hemocultura) 2.2.6 Escarro 2.2.7 Secreo de orofaringe e nasofaringe para pesquisa de Corynebacterium diphteriae 2.2.8 Secreo de nasofaringe para pesquisa de Bordetella pertussis 2.2.9 Ponta de cateter 2.2.10 Secreo de ouvido 2.2.11 Pele (abcessos e exsudatos) e bipsias 2.2.12 Secreo de Orofaringe para pesquisa de Estreptococos BetaHemolticos do Grupo A de Lancefield (Streptococus pyogenes) 2.3 Modelos de kits e fichas utilizadas para exames bacteriolgicos 3 Exames para diagnstico e controle da Hansenase 3.1 Orientaes de coleta e transporte das amostras em relao ao exame solicitado 3.2 Orientaes especficas de coleta 3.3 Transporte 3.3.1 Transporte de lminas para superviso indireta 4 Exames de Leptospirose 4.1 Orientaes de coleta e transporte das amostras em relao ao exame solicitado 4.2 Orientaes especficas de coleta 5 Malria, Leishmaniose e Doena de Chagas Agudo DCA 5.1 Orientaes de coleta e transporte das amostras em relao ao exame solicitado 5.2 Orientaes especficas de coleta, preparo da amostra e transporte das 29 29 30 30 37 37 38 41 44 44 45 45 47 50 50 50 50 51 51 51 51 52 53 53 53 53 54 54 54
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5.2.1 5.2.2 6 6.1 6.2 6.3 6.4 7 7.1 7.2 7.2.1 7.2.2 7.2.3 7.2.4 7.2.5 7.2.6 7.2.7 7.2.8 7.2.9 7.2.10 7.2.11 7.2.12 7.2.13 7.2.14 7.2.15 7.2.16 7.2.17 7.2.18 7.2.19 7.2.20 7.2.21 7.3 8 8.1 8.2 9 9.1 9.2 9.2.1 9.2.2 9.2.3 10
lminas Malria Leishmaniose Tuberculose Orientaes de coleta e transporte das amostras em relao ao exame solicitado Orientaes Especficas de coleta e transporte Envio de culturas do Micobacterium tuberculosis para o LACEN Transporte de lminas para Superviso Indireta Exames micolgicos Orientaes de coleta e transporte das amostras em relao ao exame solicitado Orientaes Especficas de coleta Pele Couro cabeludo Cabelos e plos Unhas Mucosa oral e orofaringe Leso de nariz e seios paranasais Ouvido Olho Pus e material de abscesso Secreo vaginal Escarro Aspirado traqueal e secreo obtida por broncoscopia Aspirado gstrico Fludos Urina Fezes Lquor Sangue (hemocultura) Medula ssea Tecido obtido por bipsia, necropsia e peas operatrias Sorologias Transporte Imunologia Orientaes gerais de coleta e transporte das amostras em relao ao exame solicitado Orientaes especficas de coleta Virologia Orientaes gerais de coleta e transporte das amostras em relao ao exame solicitado Orientaes especficas para solicitao e coleta Hepatites Virais HIV Vrus Respiratrio Biologia Molecular
54 56 57 57 57 58 60 61 61 62 62 63 63 63 64 64 64 64 64 65 65 65 65 65 66 66 66 66 67 67 67 67 68 68 68 69 69 70 70 71 71 72
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Orientaes de coleta e transporte das amostras em relao ao exame solicitado 10.2 Orientaes especficas, processamento e transporte 10.2.1 HIV Quantitativo (Carga Viral) 10.2.2 HIV Genotipagem 10.2.3 Testes Qualitativos (Carga Viral) e Genotipagem do RNA do HCV 11 Anlises Neonatais (Teste do Pezinho) 11.1 Orientaes de coleta das amostras em relao ao exame solicitado 11.2 Orientaes especficas de coleta 11.3 Acondicionamento dos cartes com as amostras de sangue 11.4 Transporte das amostras ANEXOS A B C D E F G H J L M N P Q R Embalagem do kit de meningite com as instrues de uso (frente e verso) Kit para coqueluche Kit para difteria Kit para coprocultura Kit para SENGONO Ficha de encaminhamento de amostras clnicas Formulrio para superviso indireta de baciloscopia para hansenase Ficha de solicitao de testes para hepatites virais Normatizao para diagnstico de hantavirose Formulrio para pesquisa de hantavrus Laudo mdico para emisso do BPA-I Genotipagem de vrus da Hepatite C Laudo mdico para emisso do BPA-I Quantificao de RNA do vrus da Hepatite C Laudo mdico para emisso do BPA-I Deteco de RNA do vrus da Hepatite C (Qualitativo) Laudo mdico para emisso do BPA-I Pesquisa de anticorpos contra o vrus da Hepatite C (Anti-HCV) Kit para vrus respiratrio
72 72 72 73 74 76 74 76 77 78
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CAPTULO I APRESENTAO Este Manual tem por finalidade se adequar s exigncias do Programa de Qualidade e s Normas de Biossegurana nos Servios de Sade, procurando de forma prtica sistematizar as orientaes para coleta, preparo e transporte de material biolgico, bem como atender ao princpio do SUS de divulgao de informaes quanto ao potencial dos servios de sade e a sua utilizao pelo usurio (Lei 8080/90, cap. 2 inciso VI). Se as orientaes aqui apresentadas forem bem observadas, as circunstncias para as anlises sero mais favorveis, pois, para que o laboratrio possa oferecer resultados confiveis, no basta que as tcnicas sejam executadas de forma correta, necessrio que se receba uma boa amostra. Entende-se como boa amostra quela obtida em quantidade suficiente, em recipiente adequado, bem identificado e corretamente transportado. Este Manual prope a participao das instituies envolvidas, estimulando-as procura de melhoria contnua em relao Qualidade e s Normas de Biossegurana, criando uma integrao positiva entre as Unidades de Sade. Tal iniciativa dever criar procedimentos bsicos comuns, para que os usurios possam ter confiana, de que recebero atendimento semelhante independentemente do local em que sejam atendidos. Dessa maneira, temos o prazer de apresentar este Manual, para que todos tenham o conhecimento dos procedimentos que o LACEN utiliza, podendo, antecipadamente, ajustar sua instituio aos critrios preconizados por estes.
Direo do LACEN/SC
FLORIANPOLIS, MAIO/2008
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OBJETIVO
Padronizar e estabelecer regras e recomendaes quanto a coleta, preparo e transporte de materiais biolgicos enviados ao LACEN e para os LACEN regionais. 2 CAMPO DE APLICAO
Este documento aplica-se na coleta, preparo e transporte de material biolgico, nas Unidades de Sade do Estado de Santa Catarina. 3 SIGLAS
EPC Equipamento de Proteo Coletiva EPI Equipamento de Proteo Individual CSB Cabine de Segurana Biolgica BPA-I Boletim de Produo Ambulatorial (Individualizado) PCR Reao de Polimerase em Cadeia IFI Imunofluorescncia Indireta FOR Formulrio RT Requisito Tcnico NA No aplicvel Ex. Exemplo ml Mililitro mm Milmetro l Microlitro 4 REFERNCIAS
BRASIL. Ministrio da Sade. Secretaria Nacional de Aes Bsicas de Sade. Diviso Nacional de Laboratrios de Sade Pblica. Normas tcnicas para o diagnstico das meningites bacterianas. Braslia, DF; Centro de Documentao do Ministrio da Sade, 1986. _____. Ministrio da Sade. Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria. Manual de microbiologia clnica para o controle de infeco em servios de sade. Braslia,2004. Mdulo VII, p. 01-24. _____. Ministrio da Sade. Secretaria Nacional de Aes Bsicas de Sade. Diviso Nacional de Laboratrios de Sade Pblica. Normas, mtodos e tcnicas para o diagnstico laboratorial de febre tifide. Braslia, DF, 1986. _____. Ministrio da Sade. Secretaria Nacional de Aes Bsicas de Sade. Diviso Nacional de Laboratrios de Sade Pblica. Normas, mtodos e tcnicas para isolamento e diagnstico das enterobactrias. Braslia, DF, 1985.
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_____. Ministrio da Sade. Secretaria Nacional de Assistncia Sade. Programa Nacional de Controle de Doenas Sexualmente Transmissveis/Aids. Manual para controle das doenas sexualmente transmissveis. Braslia, DF, 1993. _____. Ministrio da Sade. Secretaria Nacional de Assistncia Sade. Programa Nacional de Controle de Doenas Sexualmente Transmissveis/Aids. Manual de procedimentos bsicos em microbiologia clnica para o controle da infeco hospitalar. Braslia, DF, 2001. _____. Ministrio da Sade. Secretaria de Polticas da Sade. Departamento de Gesto de Polticas Estratgicas. Assessoria de Cincia e Tecnologia. Fundao Oswaldo Cruz. Biossegurana em Laboratrios de Sade Pblica. Braslia, DF, 1998, captulo 2. _____. Ministrio da Sade. Secretaria de Polticas da Sade. Departamento de Ateno Bsica. Guia de baciloscopia de hansenase. Braslia, DF, 1993. _____. Ministrio da Sade. Programa Nacional de DST e Aids. Bayer. Roche. BioMeriux. Manual de Carga Viral HIV-1. [S.l.: s.n.], [200-] _____. Ministrio da Sade. Secretaria de Polticas de Sade. Coordenao Nacional de DST e Aids. Tcnica para coleta de secrees. 2. ed. Braslia, DF, 1997. _____. Ministrio da Sade. Secretaria de Vigilncia em Sade. Departamento de Vigilncia Epidemiolgica. Biossegurana em laboratrios biomdicos e de microbiologia. 3. ed. Braslia, DF, 2006. _____. Ministrio da Sade. Secretaria de Vigilncia em Sade. Coordenao Geral do Programa Nacional de Controle da Malria. Manual de treinamento em diagnstico laboratorial de malria. Braslia, DF, 2003. _____. Ministrio da Sade. Fundao Nacional de Sade. Comisso Nacional de Preveno do Clera. Manual integrado de preveno e controle da clera. Braslia, DF, 1984. _____. Ministrio da Sade. Fundao Nacional de Sade. Centro de Referncia Professor Hlio Fraga. Manual de baciloscopia da tuberculose. Rio de Janeiro, 1998, 42p, il. _____. Ministrio da Sade. Fundao Nacional de Sade. Coordenao de Controle de Zoonoses e Animais Peonhentos. Manual de Leptospirose. Braslia, DF, 1995. _____. Ministrio da Sade. Fundao Nacional de Sade. Guia de Vigilncia Epidemiolgica. 5. ed. Braslia, DF, 2002. vol I e II.
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_____. Ministrio da Sade. Fundao Oswaldo Cruz. Instituto de Pesquisa Evandro Chagas. Diagnstico parasitolgico da leishmaniose tegumentar americana. Guia Prtico. 2005. EVANS, E.C.V.; RICHARDSON, M.D. Medical Mycology: A Practical Aproach. Oxford: Press, 1989. LACAZ, C. da Silva; PORTO, E. M; COSTA, J.E. Micologia Mdica. So Paulo: Sarvier, 1991. OPLUSTIL, C. P. et al. ProcedimentosBsicos em Microbiologia Clnica. 2. ed. Ver. E ampl. So Paulo: Sarvier, 2004. PILONETTO, M., PILONETTO, D. Manual de procedimentos laboratoriais em microbiologia. Pinhais. Microscience, 1998. Portaria GM/MS n. 2.848 de 06 de Novembro de 2007. Portaria GM/MS n 719 de 28 de dezembro de 2007 PARAN. Secretaria de Estado da Sade. Laboratrio Central de Sade Pblica. Manual de coleta de amostras biolgicas. Curitiba, 1996. SO PAULO (ESTADO). Secretaria de Estado da Sade. Coordenao dos Institutos de Pesquisa. Instituto Adolfo Lutz. Centro de Vigilncia Epidemiolgica Prof. Alexandre Vranjac. Treinamento para coleta de secreo nasofaringe para cultura no diagnstico laboratorial da coqueluche. So Paulo, [2000]. SO PAULO (ESTADO). Secretaria de Estado da Sade. Coordenao dos Institutos de Pesquisa. Instituto Adolfo Lutz. Centro de Vigilncia Epidemiolgica Prof. Alexandre Vranjac. Treinamento de difteria. So Paulo, [2000].
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CAPTULO II CONDIES GERAIS 1 CUIDADOS PRELIMINARES
Ao iniciar os trabalhos, o tcnico deve organizar seu material de acordo com a amostra a ser coletada, estar portando seus Equipamentos de Proteo Individual - EPI, ter seus Equipamentos de Proteo Coletiva - EPC disposio, conferir todos os dados da requisio e preparar a identificao da amostra. 2 2.1 PROCEDIMENTOS DE BIOSSEGURANA Equipamentos de Proteo Individual EPI
So roupas ou equipamentos utilizados para proteger o trabalhador, do contato com agentes infecciosos, txicos, corrosivos, calor excessivo e outros perigos, bem como o seu experimento ou produto. Port. 32/4-NR-6-MT 08/06/78.
Figura 1: Equipamentos de Proteo Individual
a) Guarda-p (Jaleco): Uso em todos os tipos de procedimentos, e deve apresentar as seguintes caractersticas: manga longa com elstico no punho, comprimento mnimo na altura dos joelhos, abertura frontal e ser de tecido preferencialmente de algodo ou tecido no inflamvel; b) Luvas: Para coleta, manuseio e acondicionamento de materiais biolgicos; pode ser de procedimento ou cirrgica, em ltex; c) culos de Proteo: Usar em situaes de risco de formao de aerossis, salpicos de material contaminado ou quebras de vidraria;
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d) Mscara de Proteo Respiratria e Facial: Usar em situaes com risco de formao de aerossis e salpicos de material potencialmente contaminado. 2.2 Equipamentos de Proteo Coletiva EPC
So equipamentos que possibilitam a proteo do trabalhador, do meio ambiente e do produto ou pesquisa desenvolvida. a) Dispositivos de Pipetagem: Nunca usar a boca para pipetar, porque alm do risco de aspirao, torna mais fcil a inalao de aerossis. Utilizar um dos vrios tipos de bulbos, pra ou pipetadores (Figura 2);
Figura 2: Modelos de Dispositivos de Pipetagem
b) Cabines de Segurana Biolgica CSB: So usadas como barreira primria para evitar fuga de aerossis, dando proteo ao manipulador, ao meio ambiente e amostra ou procedimento; c) Kit para Limpeza: Saco para autoclave, p, escova, balde, etiquetas, protetores de sapatos - para casos de derramamentos e quebras de materiais contaminados; d) Kit de Primeiros Socorros. 2.3 Lavagem das Mos
a) deve haver uma pia exclusivamente para lavagem das mos, colocada em local estratgico; b) lavar as mos sempre antes e aps o uso de luvas; c) lavar as mos sempre ao trmino das atividades.
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Limpeza da Bancada de Trabalho
a) deve ser feita com lcool a 70% no incio e no trmino das atividades ou sempre que houver necessidade; b) quando houver derramamento de material biolgico, limpar imediatamente com soluo de hipoclorito de sdio a 2% em preparao diria. Notas: 1) se no houver lcool 70% pronto, realizar o preparo a partir do lcool 96 (lcool comercial), na proporo de 73 ml do lcool para 27 ml de gua destilada; 2) no uso de gua sanitria a 2%, observar sempre o prazo de validade e no manter a embalagem aberta ou com furo na tampa, porque o hipoclorito evapora e em diluies menores, perde sua funo desinfetante. 2.5 Descarte de Materiais Contaminados e Prfuro-cortantes
a) Agulhas, seringas, tubos quebrados, tubos contendo material biolgico devem ser desprezados em recipientes de paredes rgidas com tampa (latas de leite em p ou similares podem ser utilizadas) e sinalizadas como INFECTANTE ou em caixas coletoras prprias para material infectante, conforme Figura 3;
Figura 3: Modelo de caixa coletora de material infectante.
b) Papis contaminados, luvas, gaze, algodo e outros, devem ser recolhidos em lixeiras com tampa, de preferncia com pedal, contendo saco para lixo especfico para material infectante (cor branca leitosa). Notas: 1) se no houver no municpio coleta de lixo especial para este tipo de resduo, este dever ser autoclavado antes do descarte em lixo comum. 2) todo resduo gerado por materiais altamente contaminantes como as culturas, amostras da tuberculose e outros devem ser descontaminados em sacos prprios para autoclave, antes do descarte (Figura 4). 3) para a descontaminao, o saco deve ser preenchido somente at dois teros da sua capacidade e recomenda-se abri-lo dentro da autoclave para melhor penetrao do vapor no seu contedo.
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Figura 4: Saco de autoclave com material
3 REQUISIES, FICHAS DE NOTIFICAO E LAUDO MDICO PARA EMISSO DO BOLETIM DE PRODUO AMBULATORIAL (INDIVIDUALIZADO) BPA-I 3.1 Requisies e Fichas de Notificao
Para que o LACEN realize os seus exames, importante que as requisies, fichas de notificao (quando aplicvel) e os laudos mdicos para emisso do BPA-I estejam preenchidos corretamente, sem rasuras, com as condies e dados a seguir: a) letra bem legvel: Os dados da requisio e/ou ficha de notificao so registrados no computador ou em livros de registros. Se no forem perfeitamente legveis, podem levar a troca de nomes, exames ou envio para locais trocados; b) nome, endereo e cidade da instituio: Para que o LACEN possa enviar o resultado para o local de origem necessrio que estes dados estejam na requisio ou na ficha; c) nome do paciente completo: A quantidade de exames muito grande e o nmero de nomes iguais comum, por isso quanto mais dados mais segurana. O nome completo para todos os exames, facilita na hora de pesquisar o resultado no computador; d) data de nascimento, idade e sexo: Alm de serem mais dados relacionados com o paciente, o que diminui a margem de erros, so dados importantes para a Vigilncia Epidemiolgica; e) nome e carimbo do solicitante: O resultado enviado para quem solicitou o exame, logo necessrio que seja legvel na requisio;
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f) descrio do material coletado: Soro, sangue, lquor (Lquido Cfalo Raquidiano LCR), medula ssea, lavado brnquico, fezes, urina, secrees, raspado de pele e outros; g) exame(s) solicitado(s): A descrio do(s) exame(s) solicitado(s) deve ser bem legvel e compatvel com a quantidade. O material deve ser adequado ao exame a que se destina; h) datas: da requisio; do incio dos sintomas quando aplicvel. Este dado significativamente importante na anlise do resultado do exame (Exs: Dengue, Leptospirose); da coleta quando necessrio (Exs: CD4/CD8, PCR, Carga Viral, Dengue, Leptospirose, Meningites); i) telefone para contato; j) dados epidemiolgicos quando aplicvel: nas requisies para HIV, no deixar de citar a forma de transmisso (sexual, sangunea, perinatal, e outras); nas requisies para CD4/CD8, Carga Viral, HCV Qualitativo, HCV Quantitativo e HCV Genotipagem, preencher completamente os espaos de informaes sobre o paciente; sobre os dados laboratoriais e clnicos (motivo pelo qual o exame est sendo solicitado, n de vezes que fez os referidos exames, resultados anteriores, estgio clnico e se est em tratamento) e dados sobre o mdico solicitante; para os casos suspeitos de dengue e doenas exantemticas (sarampo e rubola), no esquecer de enviar as fichas epidemiolgicas juntamente com as requisies; nmero da notificao (Vigilncia Epidemiolgica). Notas: 1) os dados que os laboratrios fornecem para as Vigilncias Epidemiolgicas so de suma importncia na tomada de aes de Sade Pblica tanto municipais quanto estaduais e principalmente federais, portanto necessrio que os dados sejam completos, legveis e corretos. 2) as fichas de notificao necessrias para os exames no LACEN esto disponveis na INTERNET, no Sistema de Informao de Notificao de Agravos SINAN (Qualquer site de pesquisa localiza o SINAN). 3.2 Boletim de Produo Ambulatorial (Individualizado) BPA-I
O Estado s recebe por alguns exames considerados de mdia e alta complexidade, tais como Contagem de Linfcitos T CD4/CD8, Testes de Quantificao de Carga Viral, HCV Qualitativo, HCV Quantitativo, HCV/HIV Genotipagem e Anti-HCV, se os laudos mdicos para emisso do BPA-I estiverem preenchidos completamente e sem rasuras. Portanto, o exame s pode ser realizado mediante este documento corretamente preenchido.
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4 4.1
COLETA DE AMOSTRAS Requisio
a) antes de iniciar a coleta, verificar se a requisio est preenchida de forma correta e completa; b) caso no esteja, completar com os dados do paciente (nome completo e legvel, sexo, data de nascimento, idade, procedncia, nome do mdico, endereo, etc.); c) se no estiver assinada e carimbada pelo mdico, adiar a coleta at que a requisio esteja correta e completa. Nota:As orientaes sobre a requisio descritas acima servem para todos os tipos de coleta. 4.2 Coleta de Sangue
4.2.1 Condies do paciente a) o jejum necessrio para os exames de dosagens bioqumicas (Exs: glicose, colesterol, triglicerdeos e outros); b) para os demais exames, suficiente que seja coletado antes das principais refeies e principalmente antes da realizao de exerccios fsicos (se o paciente veio caminhando ou pedalando de longa distncia, esperar at que ele se sinta descansado para fazer a coleta). 4.2.2 Coleta (Puno Venosa) a) se o paciente estiver em condies de mobilidade normais, sent-lo confortavelmente em cadeira com descanso para o brao, deixando-o acessvel para a coleta. Caso no esteja, colher com o paciente deitado; b) antes de iniciar a coleta, lavar as mos, colocar luvas, identificar os tubos, encaixar a agulha na seringa com o auxlio de uma pina, inspecionar a ponta da agulha (no deve estar rombuda ou torta) e mover o mbolo da seringa. c) se a coleta for a vcuo, rosquear a agulha no suporte com o auxlio de uma pina; d) colocar o torniquete (garrote) para que as veias fiquem mais salientes; e) inspecionar as veias cuidadosamente e verificar a mais adequada para a puno; f) fazer a assepsia do local com algodo embebido em lcool 70%; g) em seguida, puncionar a veia e coletar o sangue; h) se a coleta for a vcuo, cuidar para no retirar o tubo enquanto tiver vcuo, para que a quantidade de sangue produza a quantidade de soro ou plasma necessrio; i) a presso do torniquete no deve ser mantida mais que 60 segundos, porque produz aumentos na concentrao de clulas sanguneas; j) se a coleta for com seringa, colocar o sangue, cuidadosamente nos tubos prprios, deixando escorrer suavemente pela parede interna do tubo; k) se a coleta for a vcuo, colher nos tubos prprios para os exames.
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4.3
Demais amostras
A coleta das demais amostras est descrita no Captulo IV, de acordo com as orientaes das sees e peculiaridades de cada tipo de exame. 5 PREPARO DA AMOSTRA
A maioria das amostras (escarros, lavados, aspirados, etc.) coletada diretamente no frasco que encaminhado para o laboratrio e as orientaes esto apresentadas no Captulo IV. Para a separao do soro ou plasma, proceder da seguinte maneira: 5.1 Preparo dos tubos que vo receber a amostra
a) para cada alquota de amostra, tomar um tubo (12 mm X 75 mm) com tampa, de acordo com os exames solicitados (Figura 5);
Figura 5: Modelo de tubo com tampa para armazenar a frao de soro ou plasma.
b) escrever na etiqueta os dados do paciente de acordo com o item 5.3; c) colar horizontalmente ou verticalmente a etiqueta no tubo, de maneira que aparea o nvel da amostra (Figura 6); d) a tampa de borracha deve ser fixada com fita crepe apenas na juno do tubo com a mesma. e) se o tempo de permanncia da amostra na caixa trmica for superior a 6 ou 8 horas, colar sobre a etiqueta, fita adesiva transparente para que no umedea e desaparea o que est escrito (o uso de lpis evita este transtorno).
Nvel da amostra
Figura 6: Modelo pronto do tubo com a amostra para ser transportada
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5.2
Centrifugao / separao do soro ou plasma
a) colocar luvas; b) abrir a centrfuga e colocar os tubos com o sangue nas caapas, tomando o cuidado de equilibr-los; c) fechar a tampa da centrfuga, marcar 3000 a 4000 rpm e ligar por 5 minutos; d) no abrir a tampa da centrfuga antes de parar totalmente de rodar e nem tentar parar com a mo ou instrumentos. Recomenda-se no abrir a centrfuga imediatamente aps parar, devido formao de aerossis que podem ser infectantes, por isto, deve-se esperar alguns minutos para que as partculas sedimentem; e) retirar os tubos das caapas com auxlio de uma pina e colocar em estante prpria; f) verificar o aspecto da amostra. O soro ou plasma deve estar livre de resduos de hemcias. Se o soro estiver fortemente hemolisado ou lipmico, nova coleta deve ser providenciada; g) se o aspecto do soro ou plasma estiver de acordo, passar (de preferncia com pipetador ou pipeta plstica - tambm chamada de pipeta Pasteur descartvel ou pipeta de transferncia Figura 16) para o tubo correspondente, previamente identificado; h) vedar bem, mas apenas na borda da tampa, com fita crepe (evitar o uso de esparadrapo). 5.3 Identificao da amostra
Qualquer amostra deve vir identificada com etiqueta autocolante, em letra legvel (Figura 7), contendo: nome do paciente; idade; sexo; tipo de exame; procedncia.
Figura 7: Modelo de etiqueta
Notas: 1) a etiqueta deve ser colocada de maneira que se possa visualizar a amostra. Se for amostra lquida (sangue total, soro, plasma) o nvel da amostra no pode ficar coberto (Figura 6). 2) quando for possvel coletar em tubo com gel separador, colher nos tubos prprios e no colocar etiquetas em cima do cdigo de barra, bem como fitas adesivas que podem prejudicar a leitura dos mesmos.
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6 6.1
ACONDICIONAMENTO PARA TRANSPORTE Para transporte de curta distncia
a) para transporte rpido, de curta distncia, os tubos com amostras (geralmente sangue total, soro ou plasma) podem vir em estantes e transportados em caixas trmicas. b) os demais materiais, de acordo com as orientaes para cada tipo de amostra, esto apresentados no Captulo IV, onde devem ser observados com cuidado os procedimentos para exames de Biologia Molecular como carga viral, genotipagem e outros. 6.2 Para transporte de longa distncia
a) quando as amostras de sangue total, soro, plasma e outras similares so procedentes de locais mais distantes, o LACEN sugere o seguinte procedimento: b) colocar o(s) tubos(s) com a(s) amostra(s), devidamente identificado(s) e etiquetado(s), em um saco plstico e fechar; c) colocar o saco com os tubos em p, protegido com papel, dentro de uma garrafa plstica cortada (pode ser de lcool, gua sanitria, refrigerante, etc.); d) colocar uma fita adesiva por cima para fixar o saco com tubos na embalagem plstica; e) colocar dentro de uma caixa trmica; f) colocar o gelo reciclvel dentro da caixa; g) colocar papel amassado por cima, de maneira que as amostras e o gelo no se batam; h) colocar as requisies correspondentes, devidamente preenchidas, dentro de um saco plstico; i) vedar bem o saco e fixa-lo na parte interna da tampa da caixa trmica; j) fechar e vedar bem a caixa; k) identificar com destinatrio, remetente; l) enviar ao laboratrio. Notas: 1) gelo: o gelo deve ser preferencialmente reciclvel, para no haver risco de perda da amostra; 2) caixa trmica: a caixa para transporte de amostra que deve ser de polietileno ou similares (tipo geladeira porttil). Deve ser lavvel, resistir desinfeco e portar a identificao de Infectante ou Risco Biolgico, conforme Figura 8, juntamente com o nome, telefone e endereo da pessoa que deve ser avisada em caso de acidente com a(s) amostra(s); 3) para as amostras de exames de biologia molecular (carga viral, genotipagem e outros), observar com cuidado os procedimentos de preparo e transporte em gelo seco, no captulo IV. 6.3 Condies de transporte nas viaturas
a) o material para exame deve vir separado dos pacientes quando transportados na mesma viatura; b) as caixas trmicas devem vir bem vedadas e fixadas para no virar durante o transporte e protegidas do sol e de umidade;
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c) o motorista deve ser orientado de como proceder em caso de acidente com as amostras; d) deve possuir na viatura um Kit com: EPI - guarda-p e luvas e EPC - uma p com escova (caso tenha que recolher material espalhado), pano de limpeza, um pequeno frasco com lcool 70% para limpeza do local e das mos, saco para lixo infectante e fita adesiva; e) ao final todos os materiais recolhidos e utilizados na operao devem ser colocados no saco para lixo infectante, bem fechado com a fita adesiva, para que mais tarde sejam esterilizados e descartados adequadamente; f) deve avisar para a pessoa responsvel pela remessa, cujo nome, telefone e endereo devem constar na caixa trmica.
INFECTANTE
Figura 8: Modelo de Rtulo para a caixa de transporte de Material Infectante (ou de risco biolgico).
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CAPTULO III EXAMES REALIZADOS 1 1.1 RELAO DE EXAMES REALIZADOS NO LACEN Bacteriologia OBJETIVO
Pesquisa de protozorios flagelados, leveduras, leuccitos e hemcias. Pesquisa do Treponema pallidum, para diagnstico da sfilis primria (cancro duro) Complementa o diagnstico de diarrias infecciosas Pesquisa de estruturas microbianas para auxlio de diagnstico das meningites Pesquisa de estruturas microbianas para auxlio no diagnstico Pesquisa de estruturas microbianas para auxlio no diagnstico Pesquisa de estruturas microbianas para auxlio no diagnstico
EXAME
Exame a fresco de secreo genital e 1 jato urinrio Microscopia em campo escuro de leso genital Pesquisa de leuccitos e/ou sangue nas fezes in natura Bacterioscopia pelo mtodo de Gram do lquor Bacterioscopia pelo mtodo de Gram de lquidos orgnicos estreis (lquido pleural, asctico, biliar, de articulaes e outros) Bacterioscopia pelo mtodo de Gram de secreo de ouvido, ocular, pele (abcessos e exsudatos) bipsia e esperma. Bacterioscopia pelo mtodo de Gram de escarro, lavado brnquico, broncoalveolar, escovado brnquico e aspirado transtraqueal
Bacterioscopia pelo mtodo de Gram de Pesquisa de estruturas microbianas para auxlio secreo genital (secreo vaginal, secreo no diagnstico das DST endocervical, secreo uretral) e 1 jato urinrio Bacterioscopia pelo mtodo de Gram de leso genital Bacterioscopia pelo mtodo de Fontana Tribondeau de leso genital Cultura de lquor (Lquido Cfalo Raquidiano LCR) Cultura de sangue (Hemocultura) Pesquisa de Haemophylus ducreyi para diagnstico de cancro mole Pesquisa do Treponema pallidum, para diagnstico da sfilis primria (cancro duro) Diagnstico de meningites bacterianas Diagnstico de infeces bacterianas sistmicas
Cultura de lquidos orgnicos estreis (lquido Isolamento e identificao de bactrias nos pleural, asctico, biliar, de articulaes e outros) lquidos orgnicos estreis
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EXAME
Cultura de fezes ou Coprocultura para clera Cultura de fezes ou Coprocultura para enterobactrias patognicas Cultura de fezes ou Coprocultura (para febre tifide) Cultura de urina jato mdio (Urocultura) Cultura de esperma Cultura de secreo genital (secreo vaginal, secreo endocervical, secreo uretral), secreo anal e 1 jato urinrio Cultura para Mycoplasma hominis e Ureaplasma urealyticum Imunofluorescncia Direta IFD, em raspado uretral e endocervical Imunofluorescncia Direta - IFD em secreo ocular Cultura de secreo ocular Cultura de secreo de ouvido Cultura de secreo de orofaringe p/ pesquisa de Estreptococo beta-hemoltico Cultura de secreo de nasofaringe p/ pesquisa de Bordetella pertussis Cultura de secreo de orofaringe e nasofaringe p/ pesquisa de Corynebacterium diphtheriae Cultura de escarro, lquidos orgnicos estreis (lquido pleural, asctico, biliar, de articulaes e outros) Cultura de pele (abcessos e exsudatos) e bipsias Cultura de ponta de cateter Prova de aglutinao em ltex no LCR (para H. influenzae b, S. pneumoniae e N. meningitidis) Prova de aglutinao em ltex no soro (para H. influenzae b, S. pneumoniae e N. meningitidis)
OBJETIVO
Pesquisa do Vibrio cholerae Pesquisa de Salmonella spp, Shigella spp e Escherichia coli patognicas (EPEC, EIEC e EHEC) Pesquisa de Salmonella typhi Pesquisa de microrganismos de infeces do trato urinrio Isolamento e identificao de bactrias no lquido seminal Diagnstico de Doenas Sexualmente Transmissveis DST e outras infeces Diagnstico de uretrite e cervicite - DST Pesquisa de Chlamydia trachomatis p/ diagnstico de DST Pesquisa de Chlamydia trachomatis para diagnstico do tracoma ocular. Isolamento e identificao de bactrias na secreo ocular Isolamento e identificao de bactrias no ouvido externo e mdio Diagnstico de faringite Diagnstico de coqueluche Diagnstico da difteria Isolamento e identificao de bactrias para diagnstico de infeces Isolamento e identificao de bactrias na pele Diagnstico de infeco de cateter intravenoso (cultura semiquantitativa) Pesquisa de antgenos polissacardios diretamente no lquor para auxlio no diagnstico de meningites bacterianas Pesquisa de antgenos polissacardios diretamente no soro para auxlio no diagnstico de infeces sistmicas
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1.2
Hansenase OBJETIVO
Pesquisa do Bacilo lcool cido Resistente BAAR, causador da Hansenase, tanto para diagnstico como para controle. Reviso de todas as lminas positivas e negativas provenientes dos laboratrios da rede para controle de qualidade.
EXAMES
Baciloscopia Superviso Indireta
1.3
Leptospirose OBJETIVO
Diagnstico da Leptospirose Identificar o sorovar (cepa da leptospira) e titulao da amostra
EXAMES
Teste de Elisa IgM (Humano) Teste sorolgico de Microaglutinao
1.4
Malria, Leishmaniose e Doena de Chagas Agudo - DCA OBJETIVO

Diagnstico da Malria Reviso de todas as lminas positivas e negativas provenientes dos laboratrios da rede para controle de qualidade. Diagnstico da Doena de Chagas Agudo (DCA) Diagnstico da Leishmaniose Tegumentar
EXAMES
Pesquisa de Plasmodium sp Superviso indireta das lminas de Malria Pesquisa do Tripanossoma cruzy Pesquisa das Formas Amastigotas da Leishmania sp
1.5
Tuberculose OBJETIVO
Diagnstico ou controle da Tuberculose. Diagnstico ou controle da Tuberculose. Identificar a resistncia do Mycobacterium tuberculosis aos antimicrobianos utilizados no tratamento. Revisar todas as lminas positivas e negativas provenientes dos laboratrios da rede para controle de qualidade.
EXAMES
Baciloscopia Cultura Teste de Resistncia Superviso Indireta
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1.6
Micologia OBJETIVO
Diagnstico de micoses superficiais: dermatofitoses, tinhas, pitirase, candidases e outras. Detectar a presena de estruturas de fungos para diagnstico de micoses sistmicas. Diagnstico da paracoccidiodomicose (Blastomicose Sulamericana - BSA) Diagnstico da esporotricose Diagnstico da criptococose Isolamento e Identificao de fungos causadores de micoses superficiais Isolamento e Identificao de fungos causadores de micoses sistmicas Isolamento e Identificao do fungo causador da paracoccidioidomicose Isolamento e Identificao do fungo causador da esporotricose Isolamento e Identificao do fungo causador da criptococose Isolamento e Identificao de fungos causadores de micoses sistmicas ou septices Sorologia para diagnstico da paracoccidioidomicose Sorologia para diagnstico da histoplasmose Sorologia para diagnstico da aspergilose Sorologia para diagnstico da candidase Diagnstico da criptococose Diagnstico da aspergilose invasiva Para casos de leveduroses resultantes de infeco hospitalar ou resistentes a tratamento. Provas bioqumicas para identificao de leveduras
EXAMES
Exame micolgico direto (Pesquisa de fungos ou exame direto) na pele e/ou unhas, pelos e cabelo. Pesquisa de fungos no escarro, lquidos biolgicos (lavado ou aspirado brnquico, lavado gstrico, lquido pleural), lquor, sangue de medula ssea, hemocultura e outros. Pesquisa de Paracoccidioides brasiliensis no escarro, lquidos biolgicos ou raspados de leses. Pesquisa de Sporothrix schenckii em bipsias, pus, exudato e aspirado de leses. Pesquisa de Cryptococcus sp com Tinta da China no lquor ou secrees. Cultura de pele e/ou unhas, pelos e cabelo. Cultura de escarro, lquidos biolgicos (lavado ou aspirado brnquico, lavado gstrico, lquido pleural), lquor, sangue de medula ssea e outros. Cultura de amostras suspeitas com Paracoccidioides brasiliensis (escarro, lquidos biolgicos e raspados de leses). Cultura de amostras suspeitas com Sporothrix schenckii (bipsias, pus, exudato e aspirado de leses). Cultura de amostras suspeitas com Cryptococcus sp (lquor e secrees). Hemocultura Imunodifuso Dupla (IDD) para Paracoccidioides barasiliensis. IDD para Histoplasma capsulatum IDD para Aspergillus fumigatus IDD para Candida albicans Prova do Ltex para deteco do antgeno polissacardeo Cryptococcus neoformans no lquor ou soro. Prova do Ltex para deteco do antgeno polissacardeo do Aspergillus fumigatus no soro. Teste de Sensibilidade a Antifngicos (TSAF) para leveduras Identificao de levedura (auxonogrma/zimonograma)
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1.7
Virologia OBJETIVO
Marcadores para diagnstico da Hepatite B Marcador para diagnstico da Hepatite A Marcador para diagnstico da Hepatite C Detectar a presena de anticorpos antivrus HIV 1 e 2 por dois mtodos diferentes. Teste confirmatrio da presena de anticorpos antivrus HIV 1 Teste confirmatrio da presena de anticorpos antivrus HIV 1
EXAMES
Testes de Elisa: HbsAg Anti Hbs Anti Hbc Anti Hbc IgM Hbe Ag Anti Hbe Teste de Elisa Anti HAV IgM Teste de Elisa Anti HCV Teste de Elisa 1 e 2 para HIV Imunofluorescncia Indireta IFI para o HIV Western Blot
IFI para pesquisa do antgeno dos Vrus Influenza Diagnstico de infeces respiratrias, A e B; Para influenza 1, 2, 3; Adenovrus e Vrus incluindo a gripe. Sincicial Respiratrio.
1.8
Biologia Molecular OBJETIVO

Diagnstico da Hepatite C Monitoramento de pacientes HIV positivos Monitoramento de pacientes HCV positivos Resistncia s drogas antirretrovirais Indicao para tratamento
EXAMES
Pesquisa qualitativa do RNA do HCV (Vrus da Hepatite C) Teste de Quantificao de Carga Viral para HIV 1 Teste de Quantificao de Carga Viral para HCV Genotipagem para HIV * Genotipagem para HCV * * Exames agendados no LACEN
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1.9
Imunologia OBJETIVO
Diagnstico da Sfilis Diagnstico confirmatrio da sfilis Exame confirmatrio de diagnostico da Sfilis Diagnstico da brucelose Diagnstico de Toxoplasmose na fase aguda Diagnstico e pesquisa de imunidade Diagnstico da Rubola na fase aguda Diagnstico e pesquisa de imunidade Diagnstico da Citomegalovirose na fase aguda Diagnstico e pesquisa de imunidade Diagnstico do Sarampo na fase aguda Diagnstico da Dengue na fase aguda Diagnstico de eritema infeccioso Diagnstico da Doena de Chagas Deteco de Antgeno de Rotavrus do Grupo A Pesquisa de anticorpos IgM e IgG anti Tripanossoma cruzi Monitoramento de pacientes HIV positivos Exame confirmatrio de Toxoplasmose Permite estimar o perodo aproximado em que ocorreu a infeco toxoplsmica
EXAMES
Sorologia para Lues ou VDRL Teste de Elisa para sfilis FTA-Abs Sorologia para Brucelose Teste de Elisa para Toxoplasmose IgM Teste de Elisa para Toxoplasmose IgG Teste de Elisa para Rubola IgM Teste de Elisa para Rubola IgG Teste de Elisa para Citomegalovirus IgM Teste de Elisa para Citomegalovirus IgG Teste de Elisa para Sarampo IgM Teste de Elisa para Dengue IgM Teste de Elisa para Parvovrus Teste de Elisa para Chagas IgG Teste de Elisa para Rotavrus Imunofluorescncia Indireta (IFI) para Chagas confirmatrio para Doenas Chagas Contagem de Linfcitos T - CD4 / CD8 / CD45 Pesquisa de Anticorpos anti-toxoplasma IgM (ELFA) Teste de Avidez de anticorpos
1.10
Anlises Neonatais OBJETIVO

Diagnstico da Fenilcetonria Diagnstico do Hipotireoidismo Congnito Diagnstico da Hiperplasia Adrenal Congnita Diagnstico da Fibrose Cstica Diagnstico da Anemia Falciforme e outras Hemoglobinopatias
EXAMES
Dosagem da Fenilalanina Dosagem do Hormnio Estimulante da Tireide TSH Dosagem do hormnio 17-OH Progesterona Dosagem da Tripsina Imuno Reativa - IRT Identificao de Hemoglobinas
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2 EXAMES REFERNCIA
ENCAMINHADOS
PELO
LACEN
PARA
LABORATRIOS
DE
Estes exames que so encaminhados para laboratrios de referncia ou de apoio, na sua maioria no so realizados no LACEN, porque no h demanda suficiente no Estado para que sejam implantadas as tcnicas ou ainda esto em fase de pesquisa. Da a importncia epidemiolgica dos casos e a necessidade de virem acompanhados da ficha de notificao ou formulrio de pesquisa, devidamente preenchida, sem os quais no sero aceitos pelos laboratrios de referncia. 2.1 Relao dos exames e das amostras a serem coletadas MATERIAL BIOLGICO
Soro ou lquor Soro Soro Soro ou sangue do corao em caso de bito Ver item 2.2.4 Fezes in natura congelada Soro Sangue total Soro Soro Soro Ver item 2.3.3 abaixo Soro Soro Soro Bipsia em formol Bipsia em lcool 70%
EXAMES
Teste de Elisa e Imunofluorescncia Indireta - IFI Pesquisa de IgM Cultura de clula Elisa IgG e IgM Cultura e Pesquisa Qualitativa do RNA do Vrus Pesquisa de Rickettsia grupo febre maculosa Pesquisa da microfilria no sangue perifrico Teste de Elisa - Pesquisa de anticorpos IgG/IgM anti-Vrus da Varicela zoster Munofluorescncia Indireta para Raiva Teste de Inibio de hemaglutinao para o vrus da caxumba Teste de Elisa IMMUNOBLOT (Western Blot) Imunofluorescncia Indireta - IgG Exame histopatolgico para pesquisa de Leishmania sp PCR para pesquisa do antgeno da Leishmania sp
OBJETIVO
Diagnstico da Cisticercose Diagnstico da Febre Amarela Pesquisa do subtipo da Dengue Diagnstico da Hantavirose Diagnstico da Paralisia Flcida Aguda Diagnstico da Febre Maculosa Diagnstico da Filariose Diagnstico da Varicela zoster Avaliao sorolgica exposio ao Vrus da Raiva Diagnstico da Parotidite (caxumba) Doena de Lyme Diagnstico da Hidatidose Diagnstico da Toxocarase Diagnstico da Leishmaniose Tegumentar Americana LTA Diagnstico da Leishmaniose Tegumentar Americana LTA
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2.2
Laboratrios de Referncia Nacional
a) Instituto Adolfo Lutz (IAL) b) Fundao Osvaldo Cruz (FIOCRUZ) c) Instituto Evandro Chagas (IEC) d) Instituto Pasteur 2.3 Orientaes especficas para a coleta e transporte das amostras
2.3.1 Febre Maculosa a) so duas amostras. A primeira coleta deve ser realizada logo aps os primeiros sintomas. A segunda coleta, 14 a 21 dias aps a 1 coleta; b) o sangue deve ser coletado em tubo seco e separado o soro para o transporte. c) o soro no pode estar hemolisado. 2.3.2 Filariose a) a coleta do sangue deve ser realizada no perodo noturno, preferencialmente das 23:00 a 1:00h, sendo trs coletas, dois tubos de cada vez; b) coletar o sangue e conservar em formol a 2% (que a formalina) na proporo 1/10 (9ml de sangue e 1ml de formalina); c) manter e transportar em temperatura ambiente (sem gelo). d) o transporte deve ser realizado em estantes para que os tubos permaneam em p. e) programar a coleta para que no chegue no IAL nas sextas-feiras. 2.3.3 Parotidite (Caxumba) a) o teste sorolgico realizado somente com amostras pareadas, isto , a primeira amostra colhida na fase aguda da doena e a segunda colhida 15 a 20 dias aps a primeira. b) o resultado somente com a 1 amostra no tem valor diagnstico, por isso o IAL no realiza o teste s com a 1 amostra. 2.3.4 Hantavirose Todas as especificaes para coleta encontram-se descritos nos ANEXO J e o Formulrio para a pesquisa do Hantavrus no ANEXO L.
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CAPTULO IV COLETA E TRANSPORTE 1 ORIENTAES GERAIS
Neste captulo apresentamos as instrues de coleta e envio de material biolgico ao LACEN, observando o tempo, condies de refrigerao, bem como, a quantidade necessria. O LACEN, por ser um laboratrio de sade pblica, trabalha dividido em setores ou sees de acordo com os tipos de microorganismos ou programas, geralmente ministeriais. Portanto, as amostras que chegam no LACEN, para no serem novamente manuseadas, devem vir com requisio e alquotas individualizadas para cada seo a que se destina o exame. Isto significa mais segurana no caso de trocas e menor risco de contaminao da amostra. Exs: a) paciente 1 - Solicitao de Sorologia (Toxoplasmose, Rubola, Hepatite e HIV) Enviar uma requisio com um tubo de soro para Toxo-Rub, uma requisio com um tubo com soro para HIV e uma requisio com um tubo com soro para Hepatite. b) paciente 2 Solicitao de Pesquisa e cultura para germes comuns, fungos e BAAR em lquor ou escarro Enviar uma requisio e uma alquota da amostra para cada seo envolvida (Seo de Bacteriologia, Seo de Micologia e Seo de Tuberculose total de trs frascos com amostra e trs requisies). Nota: do conhecimento de todos que amostras de todos os tipos so transportadas por ambulncias, empresas de nibus, carros das Regionais e outros, que muitas vezes no sabem o que fazer com as mesmas, em caso de acidente. Por isto, muito importante que no deixem de orientar os motoristas (Captulo II, item 6.3) e colocar o nome, telefone e endereo do responsvel pela remessa da amostra na parte externa da caixa trmica, para que essa pessoa possa fornecer informaes sobre o material contido nas caixas.
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2 2.1
EXAMES BACTERIOLGICOS Orientaes de coleta e transporte das amostras em relao ao exame solicitado MATERIAL BIOLGICO TEMPO CRTICO ONDE / COM QUE COLHER P/ CHEGADA NO / TRANSPORTE LACEN
com swab estril; transportar em tubo com 1,0 ml de salina estril. ver item 2.2.3.1 e 2.2.3.6 em frasco estril de boca larga, transparente, com tampa de rosca ver item 2.2.1.2 com swab estril; confeccionar esfregao em 2 lminas, no momento da coleta. ver item 2.2.3.2 e 2.2.3.7 com swab estril; confeccionar esfregao em 2 lminas, no momento da coleta (feminina) ver item 2.2.3.13 em frasco estril de boca larga, transparente, com tampa de rosca ver item 2.2.1 em frasco estril de boca larga, transparente, com tampa de rosca
EXAMES
Secreo genital (uretral e vaginal) EXAME A FRESCO 1 jato urinrio
Imediatamente
Imediatamente
Secreo genital (uretral, vaginal, endocervical).
At 2 horas aps a coleta
Leso genital
BACTERIOSCOPIA pelo mtodo de Gram
Urina (jato mdio)
At 2 horas aps a coleta em temperatura ambiente Imediatamente temperatura ambiente At 2 horas aps a coleta, temperatura ambiente; p/ perodos maiores, refrigerar a amostra.
Lquidos orgnicos estreis
Escarro
em frasco estril de boca larga ou confeccionar 1 lmina no momento da coleta.
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EXAMES
MATERIAL BIOLGICO
TEMPO CRTICO ONDE / COM QUE COLHER / P/ CHEGADA NO TRANSPORTE LACEN

com swab estril ou ala bacteriolgica, no LACEN; confeccionar esfregao em 2 lminas no momento da coleta; ver item 2.2.3.12 com swab estril, no LACEN; ver item 2.2.3.12. em frasco estril de boca larga, transparente, com tampa de rosca. coleta no LACEN; ver item 2.2.1.1 em frasco estril de boca larga, transparente, com tampa de rosca; coleta no LACEN; Ver 2.2.1.2 com swab estril fino alginatado; coleta no LACEN; com swab estril alginatado; introduzir o swab no meio de transporte de Amies com carvo ver item 2.2.3.2 e 2.2.3.8
BACTERIOSCOPIA pelo mtodo de Fontana Tribondeau
Leso genital
MICROSCOPIA EM CAMPO ESCURO
Leso genital
imediatamente
Cultura de URINA, com contagem de colnias.
Urina jato mdio
At 2 horas aps a coleta, refrigerada.
Cultura de URINA
Urina 1 jato
Imediatamente
Cultura de SECREO URETRAL e ANAL MASCULINA,
Secreo uretral e anal p/ pesquisa de Neisseria gonorrhoeae e germes comuns Secreo uretral p/ pesquisa de Mycoplasma hominis e Ureaplasma urealyticum
Imediatamente At 8 horas, se em meio de transporte de Amies com carvo, em temperatura ambiente. At 5 horas, se em caldo nutritivo em temperatura ambiente
com swab de rayon ou dracon; inocular o swab no frasco com caldo nutritivo. Ver item 2.2.3.4
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MATERIAL BIOLGICO
Secreo vaginal Secreo endocervical, uretral, anal p/ pesquisa de Neisseria gonorrhoeae Secreo endocervical e uretral p/ pesquisa de Mycoplasma hominis e Ureaplasma urealyticum
TEMPO CRTICO P/ CHEGADA NO LACEN

At 1 hora aps a coleta At 8 horas, se em meio de transporte de Amies temperatura ambiente.
ONDE / COM QUE COLHER / TRANSPORTE

com swab estril; transportar em tubo com 1,0 ml de salina estril; ver item 2.2.3.11 com swab estril alginatado; introduzir o swab no meio de transporte de Amies com carvo ver item 2.2.3.7 e 2.2.3.8
Cultura de SECREO VAGINAL, ENDOCERVICAL, URETRAL e ANAL FEMININA,
At 5 horas, se em caldo nutritivo em temperatura ambiente
com swab de rayon ou dracon; inocular o swab no frasco com caldo nutritivo . ver item 2.2.3.10
Imunofluorescncia direta para Chlamydia trachomatis,
Raspado uretral e endocervical
com swab estril ultrafino de dracon ou rayon; confeccionar esfregao em 1 lmina prpria p/ pesquisa de Clamidia, no momento da coleta; ver itens 2.2.3.3, 2.2.3.5 e 2.2.3.9 o LACEN fornece um kit para coleta, conservao e transporte com todas as instrues de uso (Anexo A) ver item 2.2.4
Cultura de LQUOR,
Lquido cfaloRaquidiano (LCR, lquor)
Imediatamente (no refrigerar)
Cultura de SANGUE, (HEMOCULTURA)
Sangue
At 30 minutos (no refrigerar) ou incubar 24 horas a 35C e encaminhar em seguida ao LACEN em temperatura ambiente.
em frasco prprio, com meio de TSB (Trypticase Soy Broth) ver item 2.2.5
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EXAME
MATERIAL BIOLGICO
Lquido espermtico, lquido seminal, fludo seminal. Fezes in natura ou swab retal ou swab fecal Fezes in natura diarricas
TEMPO CRTICO ONDE / COM QUE COLHER / P/ CHEGADA NO TRANSPORTE LACEN

Imediatamente ou no mximo dentro de 1 hora, temperatura ambiente. At 1 hora aps a coleta em temperatura ambiente At 24 horas em meio de transporte de Cary-Blair, temperatura ambiente. At 1 hora em temperatura ambiente ou 24 horas em caixa trmica com gelo De 24 a 72 horas em meio de transporte Cary-Blair, a temperatura ambiente. At 24 horas em caixa trmica com gelo. Imediatamente ou at 30 minutos em temperatura ambiente ou incubar 24 horas 36C e encaminhar em seguida ao laboratrio temperatura ambiente em frasco estril coleta no LACEN (pelo menos com 48 horas sem relao sexual)
Cultura de ESPERMA, (Espermocultura) Cultura de FEZES ou Coprocultura para pesquisa de Enterobactrias patognicas
em frasco opaco de boca larga, com tampa de rosca. Ver item 2.2.2.1 em meio de transporte Cary-Blair, com auxlio de um swab ver item 2.2.2.1 em frasco limpo, seco, de boca larga, com tampa de rosca. ver item 2.2.2.1 em meio de transporte Cary-Blair, com auxlio de um swab. ver item 2.2.2.2 em frasco limpo,seco,de boca larga, com tampa de rosca. Ver item 2.2.2.2 em frasco prprio p/ hemocultura, meio de TSB (Trypticase Soy Broth); poca da coleta: desde os 1s sintomas at o final da 2 semana da doena; coletar o volume de sangue que corresponde a 10% do volume do meio de cultura.
Pesquisa de leuccitos e hemcias Cultura de fezes (Coprocultura) para Pesquisa de Vbrio Cholerae (clera) Pesquisa de leuccitos e hemcias
swab fecal ou swab retal
Fezes in natura diarricas
Cultura de sangue (Hemocultura) para Pesquisa de Salmonella typhi (Febre tifide)
Sangue
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EXAMES
MATERIAL BIOLGICO
Fezes in natura diarricas para Pesquisa de leuccitos e hemcias Fezes in natura ou swab retal ou swab fecal

At 1 hora aps a coleta em temperatura ambiente ou 24 horas em caixa trmica com gelo. At 1 hora aps a coleta em temperatura ambiente At 24 horas em meio de transporte de Cary-Blair, em temperatura ambiente. At 24 horas aps a coleta se em meio de transporte de ReganLowe com antibitico, na temperatura ambiente. Na impossibilidade de encaminhar imediatamente, incubar 36C por um perodo de 24 horas e encaminhar em temperatura ambiente. At 24 horas aps a coleta se em meio de transporte de Amies com carvo, em ambiente. At 2 horas aps a coleta se em meio de transporte de Amies com carvo, em temperatura ambiente.
em frasco limpo, seco, de boca larga, com tampa de rosca. ver item 2.2.2.3 em frasco limpo, seco, de boca larga, com tampa de rosca data da coleta e nmero de amostras, ver em orientaes especficas de coleta, item 2.2.2.3

Cultura de fezes (Coprocultura) para Pesquisa de Salmonella typhi (Febre tifide)
em meio de transporte de CaryBlair, com auxlio de um swab. ver item 2.2.2.3
com 1 swab estril ultrafino alginatado, com ala flexvel. coletar material de 1 narina utilizando 1 swab introduzir o swab em tubo c/ meio de transporte Regan-Lowe com antibitico (Meio de Agar Carvo com antibitico). ver item 2.2.8 com swab estril fino alginatado introduzir o swab no meio de transporte de Amies com carvo; ver item 2.2.7
Cultura para Bordetella pertussis, (coqueluche)
Secreo de nasofaringe
Cultura para Corynebacterium diphtheriae (difteria)
Secreo de orofaringe e nasofaringe
Cultura para ESTREPTOCOCO BETA-HEMOLTICO - GRUPO A DE LANCEFIELD,
Secreo de orofaringe
com swab estril alginatado; introduzir o swab no meio de transporte de Amies com carvo . ver item 2.2.12
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Aspirado transtraqueal

At 2 horas aps a coleta em temperatura ambiente. Para perodos maiores, refrigerar a amostra. At 30 minutos, sendo o mximo aceitvel de 1-2 horas em temperatura ambiente. Imediatamente em temperatura ambiente
Cultura de ASPIRADO TRANSTRAQUEAL,
em tubo estril seco, sem meio de cultura
Cultura de LAVADO BRONCOALVEOLAR
Lavado broncoalveolar
em frasco estril seco;
Escovado brnquico Lquidos: pleural, asctico, biliar, de articulao, outros
prpria escova colocar em tubo contendo 1ml de soluo fisiolgica estril
Cultura de FLUDOS ORGNICOS ESTREIS,
Imediatamente, em temperatura ambiente. (no refrigerar) At 2 horas aps a coleta, em temperatura ambiente. ou at 12 horas se colhido com swab em meio de transporte de Amies. At 12 horas se em meio de transporte de Amies.
encaminhar o lquido coletado em tubo seco e estril
Cultura de SECREO DE OUVIDO
Secreo de ouvido mdio
obtida por aspirao atravs do tmpano em caso de rompimento da membrana do tmpano, o fludo pode ser colhido com swab fino ver item 2.2.10 com swab estril ver item 2.2.10
Secreo de ouvido externo
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Imediatamente ou at 2 horas aps a coleta em temperatura ambiente. Para perodos maiores, refrigerar a amostra. Imediatamente, no gelo (refrigerado) ou congelado por at 48 horas. Em temperatura ambiente, at 2 horas aps a coleta Swab: Imediatamente. Se em meio de transporte, at 24 horas em temperatura ambiente imediatamente Imediatamente. Se em meio de transporte, at 24 horas.

em frasco estril de boca larga, transparente, com tampa de rosca; ver item 2.2.6
Cultura de ESCARRO (para germes comuns)
Escarro
Pesquisa de ANTGENOS BACTERIANOS, (N. meningitidis A, B, C, S. pneumoniae e H. influenzae b).
Lquor e soro
colocar 1 a 2 ml do LCR ou soro no frasco estril seco; transportar refrigerado. em frasco estril. No devem ser aceitas amostras em formol; coletar o material purulento localizado na parte profunda da leso; utilizar seringa e agulha (ou swab c/ meio de transporte); ver item 2.2.11.1 aspirar o exsudato com agulha e seringa; ver item 2.2.11.2 fragmento de tecido (ou swab estril c/ meio de transporte); ver item 2.2.11.3
Bipsia
Leso aberta Cultura de PELE (abcessos e exsudatos) e BIPSIAS
Abscesso fechado
Ferida de queimadura
Pstula e vescula
Imediatamente
aspirar com agulha e seringa ou com swab estril sobre a leso ver item 2.2.11.4
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Ponta de cateter

At 1 hora aps a coleta em temperatura ambiente, ou 12 horas se refrigerado.
Cultura de PONTA DE CATETER
Secreo ou raspado da conjuntiva
Raspado de crnea Cultura de SECREO OCULAR
Margem da plpebra
Fluido vtreo
tubo estril seco, sem meio de cultura colocar o pedao de cateter dentro do frasco estril ver item 2.2.9 coletar 2 swab (fino, alginatado ou c/ carvo): um p/ confeccionar os esfregaos At 12 horas em e outro p/ cultura; temperatura introduzir o swab no meio de ambiente em meio de transporte de Amies. transporte. confeccionar esfregao em 2 lminas, no momento da coleta. raspar a rea da leso da crnea c/ auxlio de uma cureta oftalmolgica (procedimento realizado pelo Imediatamente clnico); (enviar os meios inoculados e os inocular diretamente nos esfregaos) meios de cultura em forma de C; confeccionar esfregao em 2 lminas, no momento da coleta. coletar 2 swabs (finos), um pars confeccionar os At 12 horas em esfregaos e outro para temperatura cultura, contendo meio de ambiente em meio de transporte de Amies. transporte. Umedecer o swab em soluo fisiolgica estril para facilitar a coleta da amostra Aspirado de fludo vtreo (0,5 ml) ou paracentese de cmara anterior (procedimento realizado pelo clnico). Imediatamente Transportar na prpria seringa ou inocular nos meios de agar sangue e agar chocolate fornecidos pelo LACEN (1 a 2 gotas em cada meio).
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2.2
Orientaes especficas de coleta
As orientaes a seguir complementam as citadas no item 2.1, portanto, informaes de tempo e transporte que no forem citadas, devem ser observadas no quadro acima. 2.2.1 Urina 2.2.1.1 Amostra de urina de jato mdio Sempre que possvel, as amostras de urina devem ser colhidas pela manh. a) como orientar pacientes do sexo feminino: a paciente deve lavar bem as mos com gua e sabo neutro e sec-las com toalha de papel limpa e descartvel; deve despir-se, afastar os lbios vaginais e lavar bem a vulva e os lbios vaginais, usando chumaos de algodo e gazes estreis em gua morna com sabo, esfregando de frente para trs; deve enxaguar bem com gua morna e secar com gazes esterilizadas; durante todo este processo a paciente deve manter os lbios vaginais separados, e no tocar a rea limpa com os dedos; urinar, desprezando a primeira parte do jato urinrio; colher cerca de 30ml (aproximadamente a metade do frasco) de urina em um recipiente estril, fechando assim que a urina for colhida; em seguida, a amostra colhida contida no recipiente fechado, deve ser entregue a pessoa responsvel para ser encaminhada ao laboratrio. b) como orientar pacientes do sexo masculino: o paciente deve lavar bem as mos; afastar o prepcio e desprezar no vaso uma pequena quantidade de urina; sempre segurando para trs o prepcio colher cerca de 30ml de urina no frasco estril; em seguida, a amostra colhida contida no recipiente fechado, deve ser entregue a pessoa responsvel para ser encaminhado ao laboratrio. c) crianas: dar gua para a criana beber; limpar a genitlia externa; aplicar o coletor, junto genitlia o qual dever ser trocado a cada trinta minutos para evitar contaminao no momento da coleta; a criana pode sentar-se no colo da me ou da atendente que deve encorajar a criana a urinar colhendo todo o material possvel. 2.2.1.2 Amostra de urina de 1 jato colher a primeira urina da manh ou reter a urina por pelo menos 2 horas antes de realizar o exame; realizar higiene prvia da regio genital; coletar os primeiros 10 ml de urina em frasco estril de boca larga com tampa de rosca.
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2.2.2 Amostras para doenas transmitidas por alimentos 2.2.2.1 Fezes para pesquisa de Enterobactrias Patognicas A amostra deve ser coletada de preferncia no incio do quadro diarrico e antes da antibioticoterapia. a) fezes in natura para cultura: coletar de 1 a 2 gramas de fezes (equivalente a 1 colher de sobremesa) em frasco limpo, seco, de boca larga e com tampa de rosca; enviar ao LACEN at 1 hora aps a coleta temperatura ambiente; b) swab fecal em Cary-Blair: coletar de 1 a 2g de fezes em frasco limpo, seco, de boca larga, fornecido pelo LACEN. Mergulhar o swab no frasco contendo as fezes, dando preferncia s partes mucopurulentas e com sangue e a seguir introduzir no meio de Cary-Blair. Fechar firmemente o frasco; enviar ao LACEN em temperatura ambiente, at 24 horas aps a coleta; c) swab retal em Cary-Blair; introduzir o swab no nus, fazendo movimentos rotatrios suaves por alguns segundos. Retirar o swab e introduzir no meio de Cary-Blair. Fechar firmemente o frasco; enviar ao LACEN em temperatura ambiente, at 24 horas aps a coleta. d) fezes in natura diarrica para pesquisa de leuccitos e hemcias: coletar 1 a 2 gramas de fezes em frasco limpo, seco, de boca larga, com tampa de rosca. Enviar ao LACEN em temperatura ambiente, no prazo mximo de 1 hora; no sendo possvel o cumprimento desta recomendao, as fezes devero ser mantidas em refrigerador e transportadas em gelo em at 24 horas aps a coleta. Nota: As amostras devero ser encaminhadas ao LACEN acompanhadas da Ficha de Encaminhamento de Amostras Clnicas, devidamente preenchida. 2.2.2.2 Fezes para pesquisa de Vbrio cholerae a) fezes in natura diarrica para pesquisa de leuccitos e hemcias: coletar de 1 a 2 gramas de fezes em frasco limpo, seco, de boca larga, com tampa de rosca; enviar ao LACEN at 24 horas aps a coleta, em isopor com gelo. b) swab fecal em Cary-Blair: coletar de 1 a 2g de fezes em frasco limpo, seco, de boca larga, fornecido pelo LACEN. mergulhar o swab no frasco contendo as fezes. introduzir o swab no meio de transporte Cary-Blair e transportar em temperatura ambiente at 72 horas aps a coleta.
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c) swab retal em Cary-Blair: introduzir o swab no nus fazendo movimentos rotatrios suaves por alguns segundos. Retirar o swab e introduzir no meio de transporte Cary-blair. Fechar firmemente o frasco. enviar ao LACEN em temperatura ambiente entre at 72 horas aps a coleta. Nota: As amostras devero ser encaminhadas ao LACEN acompanhadas da Ficha de Encaminhamento de Amostras Clnicas (Anexo F), devidamente preenchida. 2.2.2.3 Amostras para pesquisa de Salmonella typhi (febre tifide) a) sangue para hemocultura Apresenta maior positividade nas duas semanas iniciais da doena, devendo o sangue ser colhido de preferncia antes que o paciente tenha tomado antibitico. Recomenda-se a coleta de 2 a 3 hemoculturas, no havendo necessidade de intervalos maiores que 30 minutos entre as mesmas. tcnica de coleta - lavar as mos com gua e sabo, enxaguar bem, enxugar com papel toalha e calar as luvas; - fazer a anti-sepsia da rea com PVPI, por no mnimo 30 segundos. Deixar secar; - passar lcool 70%. volume de sangue para cada amostra - deve ser respeitada a quantidade de sangue de 1/10 em relao ao meio de cultura. Exemplo: 5ml de sangue para 45ml de meio de TSB Trypticase Soy Broth - (adulto) e 1ml de sangue para 9ml de TSB (peditrico). inoculao e incubao - romper o lacre central dos frascos e fazer assepsia da tampa de borracha dos meios com TSB com lcool 70%; - inocular 5ml de sangue direto da seringa de coleta no frasco de hemocultura adulto (45ml) ou 1ml de sangue em frasco de hemocultura peditrico (9ml) e misturar bem (sem agitar) para evitar coagulao; - se a coleta for prxima do LACEN, encaminhar imediatamente ou at 30 minutos aps a coleta, em temperatura ambiente; - para distncias maiores, incubar a 35C por 24 horas antes de enviar para o LACEN. transporte - aps decorrido o tempo de incubao de 24 horas, o TSB dever ser encaminhado ao LACEN em temperatura ambiente, juntamente com a Ficha de Encaminhamento de Amostras Clnicas, devidamente preenchida.
b) fezes para coprocultura A amostra deve ser coletada de preferncia no incio do quadro diarrico e antes da antibiticoterapia.
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A pesquisa de Salmonella typhi nas fezes indicada a partir da segunda semana da doena, no estgio de convalescena e na pesquisa de portadores. No estado de convalescena, indicada a coleta de 2 (duas) amostras do material com intervalo de 24 horas. No caso de portadores assintomticos, particularmente aqueles envolvidos na manipulao de alimentos, recomenda-se a coleta de 7 amostras seqenciadas. Sete dias aps o trmino do tratamento com antimicrobiano, realizar 3 (trs) coproculturas com intervalos de 30 dias. Caso uma delas seja positiva, essa srie pode ser suspensa e o indivduo deve ser novamente tratado. fezes in natura para cultura: - coletar 1 a 2 gramas de fezes (equivalente colher de sobremesa) em frasco limpo, seco, de boca larga e com tampa de rosca. - enviar ao LACEN em temperatura ambiente, at 1 hora aps a coleta. swab fecal em Cary-Blair: - coletar 1 a 2g de fezes em frasco limpo, seco, de boca larga, fornecido pelo LACEN. - mergulhar o swab no frasco contendo as fezes, dando preferncia s partes mucopurulentas e com sangue e a seguir introduzir no meio de Cary-Blair. - fechar firmemente o frasco e enviar ao LACEN em temperatura ambiente, at 24 horas aps a coleta. swab retal em Cary-Blair: - introduzir o swab no nus, fazendo movimentos rotatrios suaves por alguns segundos. - retirar o swab e introduzir no meio de Cary-Blair. - fechar firmemente o frasco e enviar ao LACEN em temperatura ambiente, at 24 horas aps a coleta. fezes in natura diarrica para pesquisa de leuccitos e hemcias: - coletar 1 a 2 gramas de fezes em frasco limpo, seco, de boca larga, com tampa de rosca. - enviar ao LACEN em temperatura ambiente, no prazo mximo de 1 hora. - em no sendo possvel o cumprimento desta recomendao, as fezes devero ser mantidas em refrigerador e transportadas em gelo em at 24 horas, aps a coleta.
Nota: As amostras devero ser encaminhadas ao LACEN acompanhadas da Ficha de Encaminhamento de Amostras Clnicas, devidamente preenchida. 2.2.3 Secrees Genitais 2.2.3.1 Coleta da secreo uretral masculina para exame fresco a) solicitar ao paciente para retrair o prepcio; b) limpar a secreo emergente com gaze estril; c) certificar-se de que a uretra esteja reta;
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d) introduzir o swab cerca de 2 centmetros no canal uretral; e) gire o swab delicadamente de 8 a 10 vezes para absorver a secreo; f) retirar o swab, introduzir em um tubo com 1,0 ml de salina estril e encaminhar para o LACEN imediatamente. 2.2.3.2 Coleta da secreo uretral masculina para diagnstico de Neisseria gonorrhoeae a) solicitar ao paciente para retrair o prepcio; b) limpar a secreo emergente com gaze; c) introduzir o swab alginatado 2 centmetros no canal uretral; d) girar o swab delicadamente de 8 a 10 vezes para absorver a secreo; e) retirar o swab, fazer um esfregao fino e homogneo em uma lmina identificada com o nome e idade do paciente; f) proceder a nova coleta para cultura: introduzir o swab alginatado 2 centmetros no canal uretral; g) girar o swab delicadamente de 8 a 10 vezes para absorver a secreo e inocular a amostra em meio de transporte Amies com carvo. h) encaminhar ao LACEN no mximo at 8 horas em temperatura ambiente. No refrigerar. 2.2.3.3 Coleta da secreo uretral masculina para diagnstico de Clamdia a) solicitar ao paciente para retrair o prepcio; b) limpar a secreo emergente com gaze estril; c) introduzir o swab, com haste de alumnio, cerca de 4 centmetros no canal uretral; d) girar o swab delicadamente de 8 a 10 vezes para obter o maior nmero de clulas epiteliais possveis; e) fazer um esfregao fino e homogneo na lmina prpria de Clamdia; f) encaminhar diariamente ao LACEN em porta lminas. 2.2.3.4 Coleta da secreo uretral masculina para diagnstico de Micoplasma e Ureaplasma urogenitais a) solicitar ao paciente para retrair o prepcio; b) limpar a secreo emergente com gaze estril; c) introduzir o swab de rayon ou dracon, cerca de 4 centmetros no canal uretral; d) girar o swab delicadamente de 8 a 10 vezes para obter o maior nmero de clulas epiteliais possveis; e) inocular o swab imediatamente no frasco com caldo nutritivo; f) encaminhar ao LACEN at 5 horas em temperatura ambiente. 2.2.3.5 Coleta da secreo uretral feminina para diagnstico da Clamdia, Micoplasma e Ureaplasma e Neisseria gonorrhoeae a) fazer a expresso da secreo das glndulas parauretrais pressionando a parede vaginal com o dedo mdio; b) introduzir o swab de dracon ou rayon cerca de 2 cm na uretra; c) coletar a secreo girando delicadamente o swab de 8 a 10 vezes; d) fazer um esfregao fino e homogneo em lmina prpria de Clamdia; e) encaminhar ao LACEN diariamente em porta lmina.
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2.2.3.6 Coleta da secreo vaginal para o exame a fresco a) introduzir o espculo; b) coletar a amostra do saco vaginal com auxlio de um swab; c) retirar o swab e introduzir em tubo de ensaio contendo 1,0 ml de salina estril, previamente identificado; d) encaminhar ao LACEN imediatamente. 2.2.3.7 Coleta da secreo endocervical para diagnstico da Neisseria gonorrhoeae a) introduzir o espculo; b) limpar com gaze a secreo do fundo do saco vaginal e a que recobre o colo do tero; c) introduzir o swab alginatado cerca de 1cm no canal endocervical, girando-o delicadamente de 8 a 10 vezes, para absorver a secreo. Retirar o swab sem tocar as paredes vaginais; d) inocular a amostra imediatamente no meio de transporte de Amies com carvo, identificando o mesmo; e) encaminhar ao LACEN no mximo at 8 horas em temperatura ambiente. 2.2.3.8 Coleta de secreo anal para diagnstico de Neisseria gonorrhoeae a) introduzir o swab alginatado ou com carvo no reto, cerca de 2 centmetros; b) fazer movimentos circulares junto parede retal raspando o material das criptas por 30 segundos, para absorver a secreo; c) repetir o procedimento com novo swab, caso o swab toque as fezes. 2.2.3.9 Coleta de secreo endocervical para diagnstico da clamdia. a) introduzir o espculo; b) limpar com gaze a secreo do fundo do saco vaginal e a que recobre o colo do tero; c) introduzir o swab de rayon ou dracon cerca de 1cm no canal endocervical, girando-o delicadamente de 8 a 10 vezes, para absorver a secreo. d) retirar o swab sem tocar as paredes vaginais; e) fazer um esfregao fino e homogneo em lmina prpria de Clamdia para imunofluorecncia direta, previamente identificada; 2.2.3.10 Coleta da secreo endocervical para diagnstico de Micoplasma e Ureaplasma urogenitais a) introduzir o espculo; b) limpar com gaze a secreo do fundo do saco vaginal e a que recobre o colo do tero; c) introduzir o swab de rayon ou dracon cerca de 1cm no canal endocervical, girando-o delicadamente de 8 a 10 vezes, para absorver a secreo. Retirar o swab sem tocar as paredes vaginais; d) inocular o swab imediatamente no frasco com caldo nutritivo; e) encaminhar ao LACEN at 5 horas em temperatura ambiente. 2.2.3.11 Coleta da secreo vaginal para cultura de germes comuns a) introduzir o espculo; b) coletar a amostra do saco vaginal com um auxlio de um swab; c) introduzir o swab em tubo de 1ml de salina estril, identificando o mesmo.
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2.2.3.12 Coleta de material de leso (cancro duro - Treponema pallidum) a) limpar a rea em volta da leso com gaze estril embebida em soluo salina estril; b) friccionar a borda da leso com uma lmina de bisturi suavemente at obter uma linfa; c) colocar parte desta linfa sobre uma lmina com uma gota de salina e observar imediatamente no microscpio de campo escuro (lmina e lamnula); d) Colocar o restante da linfa em 2 lminas e confeccionar o esfregao. 2.2.3.13 Coleta de material de leso (cancro mole/cancride Haemophilus ducreyi) a) as amostras so colhidas com swab estril, das bordas e centros das leses das regies genitais, obtendo-se maior quantidade possvel de secrees ou pus; b) com o prprio swab da coleta, preparar dois esfregaos em 2 lminas e identifica-las; c) deixar secar a temperatura ambiente; d) encaminhar ao LACEN em porta-lmina, at 8 horas aps a coleta. OBSERVAES GERAIS: a) a coleta de amostra de secreo uretral para diagnstico laboratorial de Neisseria gonorrhoeae e de Clamdia deve ser feita de preferncia pela manh, antes do paciente urinar. Caso isso no seja possvel, espere pelo menos trs horas aps a ltima mico; b) para diagnostico laboratorial de Clamdia, Neisseria gonorrhoeae e cultura de germes comuns, assegure-se de que o paciente no esteja em tratamento com antibitico; c) para coleta de Gonococo e Clamdia jamais colete a secreo emergente; d) em crianas e em mulheres histerectomizadas, a secreo do fundo do saco vaginal utilizada para exame a fresco, cultura de Gonococo e diagnstico de Clamdia e Micoplasma/Ureaplasma urogenitais. 2.2.4 Lquor a) coleta realizada pelo mdico; b) o LACEN fornece um kit (Figura 9), em embalagem com todas as instrues (Anexo A); c) o transporte da amostra semeada no agar chocolate realizado em temperatura ambiente. Em hiptese alguma pode vir sob refrigerao.
Fig. 9 - Kit de coleta de amostras para meningite
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2.2.5 Sangue (Hemocultura) a) tcnica de coleta lavar as mos com gua e sabo, enxaguar bem, enxugar com papel toalha e calar as luvas; fazer a anti-sepsia da rea com PVPI, por no mnimo 30 segundos. Deixar secar; passar lcool 70%; coletar assepticamente no mnimo 5ml de sangue de indivduos adultos e 1ml de crianas, cuidar para que no haja bolhas de ar na seringa; no trocar de agulha antes de injetar o sangue no frasco. b) volume de sangue para cada amostra recomendado de duas a trs amostras de cada paciente, com intervalos de 30 minutos. deve ser respeitada a quantidade de sangue de 1:10 em relao ao meio de cultura, isto : 5ml de sangue para 45ml de meio de TSB -Trypticase Soy Broth (hemocultura adulto) e 1ml de sangue para 9ml de TSB (hemocultura peditrica). c) inoculao e incubao romper o lacre central dos frascos e fazer assepsia na tampa de borracha dos frascos de meio com TSB (frasco de hemocultura) com lcool 70%; inocular 5ml de sangue direto da seringa de coleta no frasco de hemocultura adulto (45ml) ou 1ml de sangue em frasco de hemocultura peditrico (9ml). Misturar bem (sem agitar) para evitar coagulao; se a coleta for prxima do LACEN, encaminhar imediatamente em temperatura ambiente; para distncias maiores, proceder como o descrito abaixo: - em caso de mais de um frasco, em um deles dever ser introduzindo na tampa de borracha uma agulha estril com uma pequena poro de algodo na parte posterior, para aerao; - incubar a 35C por 24 horas antes de enviar para o LACEN. d) transporte aps decorrido o tempo de incubao de 24 horas, o TSB dever ser encaminhado ao LACEN em temperatura ambiente, juntamente com a Ficha de Encaminhamento de Amostras Clnicas (Anexo F) devidamente preenchida. 2.2.6 Escarro a) tcnica de coleta colher, de preferncia, a primeira amostra da manh; orientar o paciente para enxaguar previamente vrias vezes a boca com gua para remover a flora bacteriana superficial dessa regio e colher a amostra obtida aps tosse profunda, diretamente em um frasco de boca larga; explicar ao paciente a diferena entre uma amostra obtida aps tosse profunda e a saliva, a fim de se obter um material de melhor qualidade;
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Paciente incapaz de expectorar colher escarro induzido aps nebulizao com soluo fisiolgica estril de 3 a 10%. 2.2.7 Secreo de orofaringe e nasofaringe para Pesquisa de Corynebacterium diphtheriae a) material necessrio para coleta de 1 (um) paciente: swabs descartveis (1 para nariz e 1 para garganta) tubos com meio de cultura Amies com carvo (1 para nariz e 1 para garganta) abaixador de lngua descartvel etiqueta para identificao dos tubos com meio de cultura b) armazenamento do meio de transporte de AMIES com carvo o meio de transporte de Amies com carvo dever ser armazenado em geladeira, observando-se sempre a data de vencimento antes de sua utilizao; o meio tem validade de 6 meses partir da data de fabricao; os meios de cultura em condies de uso devem apresentar as seguintes caractersticas: - cor preta - consistncia semi-slida - sem reas de ressecamento Nota: os swabs devem ser armazenados em temperatura ambiente, em local seco. c) coleta de naso e orofaringe (NARIZ/GARGANTA) no momento de uso os meios de cultura devero estar temperatura ambiente, sendo necessrio retir-los do refrigerador pelo menos 30 minutos antes; antes de iniciar a coleta, lavar as mos, explicar ao doente e/ou comunicante o que ir ser feito; identificar os tubos com N (nariz) e G (garganta) para facilitar o manuseio e evitar trocas; colocar a mscara, calar as luvas e iniciar a coleta; nariz (N) utilizar o mesmo swab para ambas as narinas. Introduzir o swab ultrafino flexvel e estril na narina do paciente at encontrar resistncia na parede posterior da nasofaringe. Realizar movimentos rotatrios; imediatamente aps a coleta, introduzir o swab no meio de transporte de Amies com carvo; ateno para que os swab fiquem submersos no meio de cultura; garganta (G) com auxlio de um abaixador de lngua, pressionar a lngua para baixo e com swab estril, fazer a coleta no redor da superfcie da garganta, passando o swab pelas amdalas, vula e toda a parede da garganta. Na coleta em doentes, o swab deve ser passado cuidadosamente apenas ao redor das leses, para que no haja descolamento da placa; imediatamente aps a coleta, introduzir o swab no meio de transporte de Amies com carvo; ateno para que os swab fiquem submersos no meio de cultura; fechar firmemente o tubo.
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d) identificao dos tubos aps a semeadura, identificar os tubos com os seguintes dados: - nome do doente ou comunicante; - idade; - data e hora da coleta. anexar a ficha de encaminhamento de Amostras Clnicas, especfica do LACEN devidamente preenchida, com: - dados pessoais de identificao; - dados da amostra; - especificar se doente ou comunicante de doente com difteria; - nas requisies de comunicantes, acrescentar o nome do doente ao qual est vinculado. e) acondicionamento das amostras para transporte: os meios devidamente semeados e identificados devem ser encaminhados ao LACEN, em temperatura ambiente, no mesmo dia ou no prazo mximo de 24 horas acompanhados da Ficha de Encaminhamento de Amostras Clnicas; no retornar os meios semeados geladeira; colocar os tubos com as amostras devidamente identificadas e etiquetadas, em um saco plstico e vedar; colocar dentro da embalagem para transporte, fixando na parte interna com fita adesiva; colocar as requisies correspondentes devidamente preenchidas, dentro de um saco plstico bem vedado; fechar e vedar bem a embalagem de transporte; identificar com destinatrio e remetente; enviar ao LACEN. g) recomendaes adicionais: por ser doena de transmisso respiratria, o uso de mscara e luvas essencial para a proteo do profissional que realiza a coleta e devem ser utilizadas tanto para caso suspeito como para os comunicantes sadios; todo material descartvel utilizado na coleta dever ser acondicionado em saco plstico, vedado com fita crepe, identificado como contaminado, recolhido no lixo infectante; no dever ser feita qualquer improvisao do material. imprescindvel que o meio de cultura e o swab estejam obedecendo rigorosamente s condies de uso no momento da coleta. 2.2.8 Secreo de nasofaringe para Pesquisa de Bordetella pertussis a) material necessrio para coleta de 1 (um) paciente: swab descartvel (swab ultrafino com haste flexvel, estril e alginatado); tubo contendo meio de transporte para coqueluche Meio de Regan-Lowe com antibitico (Agar carvo com antibitico); mscara descartvel; luvas descartveis;
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etiquetas para identificao dos tubos. b) armazenamento do meio de trasporte antes da utilizao o meio de transporte para coqueluche (Meio de Regan-Lowe RL) dever ser armazenado em geladeira, observando-se sempre a data de vencimento antes de sua utilizao; o meio tem validade de 2 meses partir da data de fabricao. os meios de cultura em condies de uso devem apresentar as seguintes caractersticas: - cor preta; - consistncia semi-slida; - sem reas de ressecamento. Notas: 1) como o meio de cultura contm sangue e antibitico, o prazo de validade dever ser seguido rigorosamente. 2) os swabs devem ser armazenados em temperatura ambiente em local seco. c) condies para coleta a coleta dever ser realizada antes do tratamento ou no mximo com 3 dias de antibiticoterapia. d) coleta de nasofaringe no incio da coleta o meio de transporte de Regan-Lowe dever estar em temperatura ambiente, sendo necessrio retir-los do refrigerador com pelo menos 30 minutos de antecedncia; antes de iniciar a coleta, calar as luvas e iniciar a coleta; a secreo nasofaringea dever ser coletada introduzindo o swab ultrafino na narina do paciente at encontrar resistncia na parede posterior da nasofaringe e realizando movimentos rotatrios; coletar material de uma narina, utilizando 1 (um) swab; aps a coleta, o swab dever ser introduzido no tubo contendo o meio de transporte para coqueluche com antibitico; ateno para que o swab fique submerso no meio de cultura; fechar firmemente o tubo. e) identificao dos tubos aps a semeadura, identificar o tubo com os seguintes dados: nome do paciente; idade; data e hora da coleta; anexar a ficha de encaminhamento de Amostras clnicas, especfica do LACEN, devidamente preenchida, ou seja: - preencher os dados pessoais de identificao; - preencher os dados da amostra; - especificar se doente ou contato de doente com coqueluche;
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- nas requisies de contatos, acrescentar o nome do doente ao qual est vinculado. f) acondicionamento das amostras para transporte o material coletado, devidamente semeado em meio de Regan-Lowe (RL) e identificado deve ser encaminhado ao LACEN em TEMPERATURA AMBIENTE, imediatamente aps a coleta; na impossibilidade de um encaminhamento imediato aps a coleta, o material deve ser incubado em estufa a 36C por um perodo mximo de 24 horas e encaminhado a seguir em temperatura ambiente; no retornar os meios semeados geladeira; o material dever ser encaminhado ao LACEN acompanhado da Ficha de Encaminhamento de Amostras Clnicas devidamente preenchida; colocar o tubo com a amostra devidamente identificada e etiquetada, em um saco plstico e vedar; colocar dentro da embalagem de transporte, fixando na parte interna com fita adesiva; colocar a requisio correspondente devidamente preenchida, dentro de um saco plstico bem vedado; fechar bem a embalagem de transporte; identificar com destinatrio e remetente; enviar ao LACEN. g) Recomendaes adicionais por ser doena de transmisso respiratria, o uso de mscara e luvas essencial para a proteo do profissional que realiza a coleta e devem ser utilizadas tanto para caso suspeito como para os comunicantes sadios; todo material descartvel utilizado na coleta dever ser acondicionado em saco plstico, vedado com fita crepe, identificado como contaminado, recolhido no lixo infectante; no deve ser feita qualquer improvisao do material. imprescindvel que o meio de cultura e o swab estejam obedecendo rigorosamente a condio de uso no momento da coleta. 2.2.9 Ponta de cateter Procedimento de retirada do cateter os mesmos cuidados de anti-sepsia da pele utilizados no momento da insero do cateter devem ser adotados, com o propsito de evitar a contaminao com a microbiota da pele. fazer anti-sepsia da pele que circunda o local da insero do cateter; remover assepticamente o cateter; cortar 5 cm da ponta distal (a que estava inserida na veia do paciente) e colocar diretamente em tubo ou frasco estril seco; enviar ao laboratrio temperatura ambiente dentro de 1 hora aps a coleta ou at 12 horas se refrigerado.
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Nota: Para melhor correlao clnica infeco relacionada ao cateter recomenda-se a coleta de hemocultura associada cultura do cateter. 2.2.10 Secreo de Ouvido 2.2.10.1 Secreo de Ouvido mdio a) coleta realizada pelo mdico b) antes do procedimento de coleta, limpar o ouvido externo com anti-sptico seguido de lavagem com soluo fisiolgica estril; c) quando a membrana timpnica estiver ntegra, usar seringa para puncionar a membrana ou sistema apropriado para aspirao; d) quando a membrana timpnica estiver rompida, usar espculo ou cone de otoscpio e coletar o material com swab. Introduzir o swab no meio de transporte de Amies. Com outro swab, fazer esfregao para colorao de Gram. Nota: amostras colhidas por aspirao no devem ser enviadas ao laboratrio como secreo de ouvido e sim como secreo obtida por timpanocentese. 2.2.10.2 Secreo de Ouvido externo a) limpar o canal do ouvido com anti-sptico seguido de lavagem com soluo fisiolgica estril; b) com outro swab obter material fazendo rotao no canal; c) inserir em seguida, em meio de transporte de Amies e encaminhar ao LACEN dentro de 12 horas. 2.2.11 Pele (abscessos e exsudatos) e Bipsias 2.2.11.1Leso aberta a) no recomendada cultura de leses secas ou crostas; b) descontaminar as margens e a superfcie da leso com soluo fisiolgica, lcool a 70%, soluo de povidona-iodo ou clorexidina a 0,2% soluo aquosa, dependendo do tipo de leso; c) proceder nova limpeza com soluo fisiolgica estril; d) coletar o material purulento na parte mais profunda da leso utilizando seringa e agulha. Se no for possvel a coleta por puno, utilizar swab com meio de transporte. 2.2.11.2 Abscesso fechado a) um abscesso fechado o local ideal para a coleta; b) no usar swab; c) fazer anti-sepsia com produto adequado; d) aspirar o exsudato com agulha e seringa. 2.2.11.3 Ferida de queimadura a) a coleta deve ser realizada aps debridamento e descontaminao da leso. A coleta de fragmento de tecido (bipsia) a tcnica mais indicada para a cultura. Caso no seja possvel, coletar com swab estril com meio de transporte;
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b) a mostra da superfcie da leso normalmente representa colonizao. 2.2.11.4 Pstula e vescula a) selecionar uma pstula intacta. Fazer anti-sepsia com produto adequado e puncionar. Se a leso for seca, com crosta, sem vescula ou pstula evidente, remover o material superficial aps anti-sepsia e passar firmemente o swab estril sobre a leso. 2.2.12 Secreo de Orofaringe para pesquisa de Estreptococos Beta-Hemolticos do Grupo A de Lancefield (Streptococus pyogenes) a) usar um abaixador de lngua, pressionar e rolar o swab sobre as amdalas e faringe posterior, evitando tocar na lngua e na mucosa bucal. b) procurar material nas reas com hiperemia prximas dos pontos com pus ou placas. 2.3 Modelos de kits e fichas utilizados para os exames bacteriolgicos
KIT para Meningite ANEXO A Kit para Coqueluche ANEXO B Kit para Difteria ANEXO C Kit para Coprocultura ANEXO D Kit para a SENGONO ANEXO E Ficha de encaminhamento de Amostras Clnicas ANEXO F 3 3.1 EXAMES PARA DIAGNSTICO E CONTROLE DA HANSENASE Orientaes de coleta e transporte das amostras em relao ao exame solicitado
EXAME
HANSEN, Pesquisa de bacilo.
MATERIAL BIOLGICO
Linfa cutnea
COMO QUE COLHER

Lmina de bisturi n. 15
3.2
a) dar ao paciente uma breve explicao sobre o exame a ser realizado; b) fazer anti-sepsia do local a ser coletado com lcool 70 %; c) com auxlio de uma pina de Kelli curva fazer uma boa isquemia para impedir o fluxo de sangue; d) com o auxlio de um bisturi, cortar a pele em mais ou menos 5 mm de comprimento por 2 mm de profundidade; e) com o lado no cortante da lmina, raspar o bordo interno do corte 2 a 3 vezes at obter boa quantidade de linfa;
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Figura 10: Isquemia e Inciso
f) transferi-la para uma lmina de vidro com borda fosca, bem limpa e nova previamente identificada com lpis de vdea ou com ponta de diamante, sempre do mesmo lado que sero colocados os esfregaos; g) espalhar o material com a parte plana da lmina do bisturi em movimentos circulares a fim de obter um esfregao uniforme abrangendo uma nova rea de cerca de 5 a 7 mm de dimetro;
I D E N T I F I C A O
LO
CE
Figura 11: Distribuio padro dos esfregaos na lmina
h) os 4 esfregaos sero colocados um ao lado do outro com a distncia de 1 cm na seqncia da coleta do material. Cada lmina dever ter no mximo 4 esfregaos. Obedecer seqncia da coleta, conforme a figura 11: lbulo de orelha direta (LOD), lbulo da orelha esquerda (LOE), cotovelo direito (CD) e cotovelo esquerdo (CE) ou critrio mdico, quando necessrio, joelho direito e esquerdo e leso; i) os esfregaos no devem conter sangue, pois esse poder interferir no exame microscpio; j) para o mesmo paciente usa-se a mesma lmina de bisturi aps limp-la com lcool 70% e flamb-la em chama; k) deixar os esfregaos secarem a temperatura ambiente e a seguir passar na chama de lamparina a lcool, por 3 vezes rapidamente. Observar que a face onde se encontra o esfregao fique para cima; l) usar sempre lmina de bisturi e de vidro novos para cada paciente; m) a inciso feita no paciente deve ser coberta com um curativo estril.
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3.3
Transporte
a) as lminas ainda no coradas (para diagnstico ou controle de tratamento) devero ser encaminhadas ao laboratrio o mais breve possvel, acondicionadas em portaslmina, acompanhadas da requisio mdica; b) as lminas coradas para superviso devero ser encaminhadas em portas-lmina, mensalmente, acompanhadas do Formulrio para superviso indireta de baciloscopia para hansenase (ver Anexo G). 3.3.1 Transporte de lminas para superviso indireta a) todas as lminas positivas e todas as negativas devem ser encaminhadas Seo de Hansenase do LACEN para superviso indireta; b) devem ser transportadas em caixas ou frascos (Figura 15) com paredes rgidas e com ranhuras prprias para a fixao das lminas; c) o formulrio (ANEXO G) que acompanham as lminas para a superviso indireta no devem ser colocados junto com as lminas para evitar possveis contaminaes; d) importante colocar no formulrio o nome do laboratrio e o municpio de procedncia; e) colocar os formulrios junto caixa ou frasco, embrulhar e enviar ao LACEN, devidamente identificados com o endereo do remetente e destinatrio, corretos. 4 4.1 EXAMES DE LEPTOSPIROSE Orientaes de coleta e transporte das amostras em relao ao exame solicitado. MATERIAL BIOLGICO
Sangue (soro)
EXAMES
LEPTOSPIROSE, IgM por ELISA LEPTOSPIROSE, microcoagulante/titulao.
ONDE COLHER E QUANDO

Tubo seco (5 ml) Tubo seco (5 ml), a partir do 15 dia dos primeiros sintomas.
Sangue (soro)
4.2
a) as normas recomendam que a primeira coleta para diagnstico por Elisa seja realizada a partir do 7 dia aps o incio dos sintomas; b) a cultura da Leptospira somente para fins epidemiolgicos; c) em caso de Elisa Reagente, deve ser solicitada uma segunda amostra a partir do 15 dia dos primeiros sintomas da doena para realizao de Microaglutinao que tem por objetivo determinar a espcie da Leptospira;
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d) em caso de Elisa No-Reagente, mas com quadro clnico suspeito, nova amostra dever ser encaminhada para confirmao laboratorial aps o 15 dia do incio dos sintomas. 5 5.1 MALRIA, LEISHMANIOSE E DOENA DE CHAGAS AGUDO - DCA Orientaes de coleta e transporte das amostras em relao ao exame solicitado MATERIAL BIOLGICO
Sangue Sangue
EXAME
Malria (Pesquisa de Plasmodium) Malria (Pesquisa de Plasmodium) Pesquisa de Trypanosoma cruzi para DCA Leishmaniose (Parasitolgico)
ONDE COLHER
Em lmina como gota espessa e esfregao Em tubo com EDTA (ver item 4.1 no Captulo II, sobre Coleta de sangue) Em lmina como gota espessa e esfregao Em lmina nova limpa com lcool-ter
Sangue Raspado de Leso In print Aspirado
5.2 Orientaes especficas de coleta, preparo da amostra e transporte das lminas. 5.2.1 Malria a) coletar sempre uma lmina com duas gotas espessas e uma lmina com esfregao; b) encaminhar sempre, junto com as lminas, um tubo com 3mL de sangue com EDTA; c) aps secagem das lminas, transportar em caixas ou frascos (Figura 15), com paredes rgidas e com ranhuras prprias para fixao das lminas; d) a solicitao do exame deve acompanhar os frascos de transporte. 5.2.1.1 Tcnica de Coleta e Preparao da Gota Espessa
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a) trabalhar sobre superfcie plana horizontal; b) preencher completamente os dados do paciente; c) usar duas lminas, colocar uma lmina sobre a superfcie plana ou sobre o padro, sendo o manuseio pelas extremidades sem tocar as superfcies. De preferncia, a lmina deve estar com etiqueta auto-adesiva para o registro da identificao ou usar lmina com extremidade esmerilhada; d) limpar vigorosamente a pele do local de puno (parte lateral do segundo ou terceiro dedo esquerdo, lbulo da orelha ou em lactentes o dedo grande do p ou o calcanhar) com gaze ou algodo embebido em lcool e enxugar com gaze ou algodo; e) retirar o estilete do envoltrio estril, segurando-o com a mo direita. Mantendo firmemente o dedo a ser puncionado entre o polegar e o indicador da mo esquerda, puncionar o local de maneira firme e leve; f) remover a primeira gota de sangue com gaze ou algodo seco; g) comprimir o dedo suavemente (como uma ordenha) para obter outra gota de sangue esfrica sobre a pele seca. No tocar o ponto de sada do sangue; h) segurando a lmina firmemente pelas bordas numa das extremidades contra o indicador (que est comprimindo o dedo do paciente) baixa-se lentamente a lmina at tocar o alto da gota de sangue (sem entrar em contato com a pele do paciente). Se a quantidade de sangue for insuficiente, pode-se colocar outra gota ao lado; i) colocar a lmina com a face para cima na superfcie de trabalho. Com o canto e os primeiros 5mm da borda longa da segunda lmina, espalhar o sangue formando um retngulo de tamanho e espessura adequados. Tomar outra amostra, colocar ao lado da primeira e espalhar da mesma maneira. As gotas espessas devem ser localizadas na parte central da lmina; j) em lugar da segunda gota espessa pode-se colocar uma gota de sangue e fazer um esfregao (distendido ou extenso); l) limpar o local puncionado com gaze ou algodo seco, se necessrio pressionar; secar abanando com um pedao de carto, ar morno, caixa com lmpada, estufa, ou sobre o prprio quebra-luz com suporte para secagem de lminas recm-colhidas ou coradas; m) no recomendvel o registro do nmero da lmina na prpria amostra de sangue; n) a melhor preparao para o diagnstico de malria obtida com amostra de sangue colhida diretamente por puno digital ou venosa sem anticoagulante. Sangue com anticoagulante fixa menos na lmina de vidro, podendo ocorrer o desprendimento do sangue no ato da colorao pelo mtodo de Walker/Giemsa e no ato da lavagem. A amostra de sangue com anticoagulante deve ser submetida secagem pelo calor brando antes da colorao; o) a maneira prtica para verificao da secagem adequada da gota espessa, consiste em colocar a lmina sob a fonte de calor at o desaparecimento do brilho da amostra mida. A secagem natural aps a coleta, no confere uma boa fixao da amostra para a imediata colorao pelo mtodo de Walker sem o risco de desprendimento do sangue. A amostra de sangue positiva, com anticoagulante, conservada por vrios dias em geladeira, no apresenta boas condies para observao das caractersticas morfolgicas dos plasmdios. De modo que a melhor preparao aquela obtida com sangue fresco, sem anticoagulante, espalhada imediatamente, secagem rpida e colorao, no mximo at o 3 dia aps a coleta.
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5.2.1.2 Tcnica de Preparao de Esfregao (Distendido)
a) trabalhar sobre superfcie plana e horizontal; b) colocar uma pequena gota de sangue na parte central da lmina de vidro a 1,5 cm da extremidade fosca ou da etiqueta; c) colocar a Lmina com a face para cima sobre a superfcie plana; d) com a borda estreita da lmina em contato com a gota de sangue, formando um ngulo de 50, espalhar o sangue com um movimento rpido, para formar uma camada delgada de sangue sem atingir a extremidade da lmina; e) deixar secar na mesma posio horizontal; f) usar etiqueta adesiva para identificao; g) o sangue pode ser espalhado tambm da seguinte maneira: retirar com a extremidade da prpria lmina espalhadora a gota de sangue; colocar a extremidade que contm o sangue em contato com a parte central da lmina em posio horizontal e antes que o sangue, por capilaridade, atinja as bordas laterais da lmina espalhadora formando um ngulo de 50, faz-se o deslocamento rpido para formar a camada fina de sangue sem atingir a extremidade da lmina. 5.2.1.3 Transporte de lminas para Superviso Indireta a) todas as lminas positivas e todas as negativas devem ser encaminhadas Seo de Malria do LACEN para superviso indireta; b) devem ser transportadas em caixas ou frascos (Figura 15) com paredes rgidas e com ranhuras prprias para a fixao das lminas; c) os formulrios que acompanham as lminas para a superviso indireta no devem ser colocados junto com as lminas para evitar possveis contaminaes; d) importante colocar no formulrio o nome do laboratrio e o municpio de procedncia; e) colocar os formulrios junto caixa ou frasco, embrulhar e enviar ao LACEN, devidamente identificados com o endereo do remetente e destinatrio, corretos. 5.2.2 Leishmaniose 5.2.2.1 Orientaes especficas de coleta e transporte. a) as coletas sero realizadas nas unidades de sade de referncia para coleta de parasitolgico para Leishmaniose e Hospital Nereu Ramos; b) coletar se possvel sempre duas lminas; c) aps secagem das lminas, transportar em caixas ou frascos (Figura 15) com paredes rgidas e com ranhuras prprias para fixao das lminas; d) a solicitao do exame deve acompanhar os frascos de transporte.
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6 6.1
EXAMES PARA DIAGNSTICO E CONTROLE DA TUBERCULOSE Orientaes de coleta e transporte das amostras em relao ao exame solicitado MATERIAL BIOLGICO
Escarro Lquidos asspticos (lquor, lquidos pleurais, asctico, sinovial, pericrdico, peritoneal).
EXAMES
ONDE COLHER
Em pote, transparente, de boca larga, com tampa de rosca e descartvel (Figura 12). Em frasco estril, (mnimo de 1,5 ml). Em pote, de boca larga, com tampa de rosca e descartvel. Em seringa, atravs de puno. Com swab imerso em gua destilada ou salina Em tubo com anticoagulante Polianetol Sulfonato de Sdio (SPS ou heparina ) em volume de at 5 ml. Em frasco estril Em frasco estril, com gua destilada ou salina estril. No utilizar formol.
Pesquisa de BAAR Cultura para BAAR Teste de Sensibilidade
Lavado gstrico, aspirado brnquico, urina. Pus (cavidade fechada) Pus (cavidade aberta)
Sangue Medula ssea Bipsia
6.2
Orientaes especficas de coleta e transporte
a) uma boa amostra de escarro a que provm da rvore brnquica, obtida aps esforo de tosse, e no a que se obtm da faringe ou por aspirao de secrees nasais nem tampouco, a que contm somente saliva. O volume de 5 a 10 ml o ideal; b) ao despertar pela manh, o paciente deve lavar bem a boca, inspirar profundamente, deter por um instante o ar nos pulmes e lan-lo fora pelo esforo da tosse. Deve repetir a operao at obter trs eliminaes de escarro, evitando que se escorra pela parede externa do pote; c) as amostras devem ser colhidas em local aberto, de preferncia ao ar livre ou em sala bem ventilada;
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Figura 12: Modelos de potes para coleta de escarro
d) o lavado gstrico indicado para crianas, pois essas deglutem o escarro. Deve-se colher assim que o paciente acorda, antes de se levantar e comer. Pelo menos duas amostras em dias consecutivos; e) para o exame na urina, colhe-se toda a urina da primeira mico da manh em frasco limpo, aps higiene ntima com gua. Utiliza-se um nmero mnimo de trs e no mximo de seis amostras colhidas em dias consecutivos; f) para os lquidos asspticos recomenda-se que o material seja enviado imediatamente ao laboratrio para que a semeadura seja feita para se obter maior positividade; g) o pus coletado assepticamente de abscessos no drenados com uma agulha estril em seringa. Aps a coleta, retirar a agulha com uma pina e passar o material para um frasco estril; h) todas as vezes que a coleta for com swab, este deve ser umedecido em salina ou gua estril antes da coleta. Aps a coleta, deve permanecer em um frasco estril com salina suficiente para mant-lo mido at o procedimento do exame; i) para o transporte das amostras deve-se considerar trs condies importantes: manter sob refrigerao, proteger da luz solar, e acondicionar de forma adequada para que no haja risco de derramamento; j) no so mais utilizadas as fezes para diagnstico da tuberculose intestinal. Neste caso indicada a bipsia. 6.3 Envio de culturas do Mycobacterium tuberculosis para o LACEN
a) os tubos com a cultura do M. tuberculosis devem ser com tampa de rosca, a prova de vazamento; b) para o transporte, este tubo deve ser envolvido com papel absorvente, em quantidade suficiente para absorver o material e protege-lo em caso de acidente; c) o tubo embalado deve ser colocado dentro de um recipiente de paredes rgidas, a prova de vazamentos e inquebrvel (pode ser uma lata de leite em p com tampa) contendo etiqueta com as caractersticas da amostra (Figuras 13 e 14); d) este recipiente deve ser colocado dentro de outra embalagem, podendo ser uma caixa de papelo, madeira, isopor ou polietileno, que deve conter o rtulo de material infectante ou de risco biolgico (Figura 8) juntamente com o nome, telefone e endereo da pessoa que deve ser avisada em caso de acidente com a(s) cultura(s);
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e) completar o espao da caixa com papel amassado ou polibolha, para evitar o movimento do recipiente contendo a cultura; f) colocar as requisies correspondentes, devidamente preenchidas, dentro de um saco plstico; g) vedar bem o saco e fix-lo na parte interna da tampa da caixa; h) fechar e vedar bem a caixa; i) identificar com destinatrio, remetente; j) enviar ao laboratrio. Notas: 1) este transporte realizado em temperatura ambiente. 2) as orientaes acima servem para qualquer tipo de cultura que deva ser encaminhada ao LACEN.
Figura 13: Modelo do frasco com parede rgida
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SUBSTNCIA INFECCIOSA
EM CASO DE DANO OU VAZAMENTO, INFORME. IMEDIATAMENTE A UNIDADE REMETENTE
Figura 14: Rtulo indicando substancia infecciosa
6.4
Transporte de lminas para Superviso Indireta
a) todas as lminas positivas e todas as negativas devem ser encaminhadas ao laboratrio de Tuberculose do LACEN para superviso indireta; b) devem ser transportadas em caixas ou frascos (Figura 15) com paredes rgidas e com ranhuras prprias para a fixao das lminas; c) os formulrios que acompanham as lminas para a superviso indireta no devem ser colocados junto com as lminas para evitar possveis contaminaes; d) importante colocar no formulrio o nome do laboratrio e o municpio de procedncia; e) colocar os formulrios junto caixa ou frasco, embrulhar e enviar ao LACEN, devidamente identificados com o endereo do remetente e destinatrio, corretos.
Figura 15: Modelo de frasco para transporte de lminas
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EXAMES MICOLGICOS
7.1 Orientaes de coleta e transporte das amostras em relao ao exame solicitado EXAMES MATERIAL BIOLGICO
Pele, couro cabeludo, unha, cabelo. Exame micolgico direto (ou Exame direto ou Pesquisa de fungos) Secrees Escarro Lquido pleural Aspirado ou lavado brnquico Sangue Medula ssea Pele, couro cabeludo, unha, cabelo. Secrees Cultura para fungos Escarro Lquido pleural Aspirado ou lavado brnquico Sangue Medula ssea Pesquisa direta (ou exame micolgico direto ou exame direto) para Candidiase ou Candida albicans, Cultura para Candidase ou Candida albicans,
ONDE COLHER
em placa de Petri estril ou em sacos plsticos pequenos e nunca utilizados. em seringas, ou swab. em pote ou frasco com boca larga estril; em frasco estril; em frasco prprio de hemocultura; em frasco contendo 0,5 ml de heparina diluda 1:1000 em placa de Petri estril ou em sacos impermeveis (de plstico) pequenos e nunca utilizados. em seringas, ou swab. em pote ou frasco estril, transparente e com boca larga; em frasco estril; em frasco prprio de hemocultura; em frasco contendo 0,5 ml de heparina diluda 1:1000 prprio para cada tipo. Ver os itens acima nesta tabela. prprio para cada tipo. Ver os itens acima nesta tabela.
Qualquer material biolgico
Qualquer material biolgico
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EXAMES
Pesquisa de Paracoccidioides brasiliensis (ou de BLASTOMICOSE)
MATERIAL BIOLGICO
Raspado das leses escarro Lavado ou aspirado brnquico Raspado das leses escarro Lavado ou aspirado brnquico Sangue (soro)
ONDE COLHER
em placa de Petri estril; em pote descartvel prprio; em frasco estril em placa de Petri estril; em pote descartvel prprio; em frasco estril em tubo seco - 5 ml
Cultura para Paracoccidioides brasiliensis (ou para BLASTOMICOSE) Imunodifuso dupla (IDD) para Paracoccidioides brasiliensis (ou para BLASTOMICOSE) Imunodifuso dupla (IDD) para Histoplasmose ou Histoplasma capsulatum Imunodifuso dupla (IDD) para Aspergilose ou Aspergillus fumigatus, Imunodifuso dupla para Candidase ou Candida albicans Pesquisa de Cryptococcus neoformans, pelo mtodo da tinta da China. Cultura para Cryptococcus neoformans, Prova do Ltex para Cryptococcus neoformans, Prova do Ltex para Aspergillus fumigatus Teste de Sensibilidade a Antifngicos para leveduras TSAF Identificao de leveduras (Auxanograma/Zimograma)
Sangue (soro)
em tubo seco - 5 ml
Sangue (soro) Sangue (soro) LCR (lquor) LCR (lquor) ou qualquer outro material biolgico a critrio mdico LCR (lquor) Sangue (soro) Sangue (soro)
em tubo seco - 5 ml em tubo seco - 5 ml em frasco estril
em frasco estril em frasco estril em tubo seco. em tubo seco 5 ml
Culturas em meio Sabouraud Dextrose Culturas em meio Sabouraud Dextrose
7.2
Orientaes especficas de coleta das amostras
7.2.1. Pele a) se possvel descontaminar a pele com lcool 70% e esperar total evaporao, antes da coleta;
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b) as amostras de leses de pele como escamas, crostas, ou cascas, devem ser colhidas em placa, preferencialmente com uma lmina de bisturi descartvel ou com a borda da lmina de vidro de microscopia, muito limpa; c) deve-se colher, raspando em vrios pontos da leso, procurando as bordas das leses mais recentes; d) nos casos em que no h escamas aparentes, procura-se raspar bem o local e retirar o material que for possvel.
Figura 16 Coleta de amostra para exame micolgico
7.2.2 Couro Cabeludo a) se possvel descontaminar o local da leso com lcool 70% e esperar total evaporao, antes da coleta; b) as amostras de leses no couro cabeludo devem ser obtidas atravs da raspagem do local; c) a amostra deve conter tocos de cabelo, o contedo dos folculos tapados e as escamas de pele; d) os cabelos da rea tambm podem ser puxados com pina (os cabelos infectados so facilmente removveis). 7.2.3 Cabelos e Plos a) se possvel descontaminar a pele ou o couro cabeludo com lcool 70% e esperar total evaporao, antes da coleta; b) se a leso for ao longo do cabelo ou pelo, como ndulos, por exemplo, esses devem ser cortados com tesoura. 7.2.4 Unhas a) os fragmentos de unhas alteradas podem ser colhidos, raspando-os com o bisturi ou com o auxlio de uma tesoura limpa; b) material que se deposita embaixo da unha pode ser retirado cuidadosamente com o bisturi, com um palito (tipo de manicure), previamente esterilizado, ou outro objeto pontiagudo estril;
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c) em casos de paronquia (leses na regio da cutcula), colhem-se as escamas e, se possvel, o pus, com um swab em salina estril; d) se a leso uma mancha esbranquiada em baixo da unha, raspar por cima da unha com o bisturi at chegar na parte com a leso; desprezar este material e raspar todo o contedo da mancha. Nota: quando o material da leso seco, reduz a contaminao bacteriana e as amostras descritas acima podem ser estocadas, em placas de petri estreis ou em saquinhos plsticos, por meses, sem perder a viabilidade do fungo dermatfito. O transporte sem refrigerao. 7.2.5 Mucosa oral e orofaringe a) para as infeces de boca, o raspado com lmina de bisturi ou esptula, nas partes afetadas (reas com eritema e/ou placas brancas), melhor do que o swab, se o material for processado imediatamente; b) para o material de leso de mucosa jugal, papilas linguais ou regio tonsilar, mergulhar o swab estril umedecido em salina estril e enviar o tubo ao laboratrio. 7.2.6 Leso de nariz e seios paranasais a) as leses podem ser raspadas e colocadas em recipiente estril; b) material necrtico e tecidos so obtidos por bipsia; c) para as secrees, utilizar swab umedecido em salina estril, fazendo rotao no local. 7.2.7 Ouvido a) as infeces fngicas de ouvido so geralmente secas, exceto quanto associadas a infeces bacterianas; b) a raspagem do material sempre melhor para o diagnstico laboratorial, embora o swab em salina estril tambm possa ser usado. 7.2.8 Olho a) deve ser solicitado meio de cultura ao laboratrio e o material retirado das reas de ulceraes e supuraes, coletado pelo oftalmologista deve ser inoculado imediatamente no meio; b) lgrima e fludos podem ser coletados com pipeta plstica estril - chamada de pipeta Pasteur descartvel ou pipeta de transferncia (Figura 17). O swab no adequado para este tipo de material.
Figura 17: Modelos de pipeta plstica. As estreis vm embaladas individualmente ou em mais unidades.
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7.2.9 Pus e material de abscesso a) se houver escamas ou crostas na parte superficial da leso, estas podem ser raspadas e colocadas em placas de petri ou frascos estreis; b) aspirado do pus e/ou biopsia, so mais apropriados para o exame; o pus coletado assepticamente de abscessos no drenados com uma agulha estril em seringa. Aps a coleta, retirar a agulha com uma pina e passar o material para um frasco estril; c) nas leses ulceradas, caso o material tenha que ser colhido com swab (o que no recomendado), o local deve ser limpo com gaze embebida em salina estril para eliminar os exsudatos superficiais que so altamente contaminados com bactrias para ento inserir o swab at a parte mais profunda da leso, evitando encosta-lo na periferia e na pele adjacente; d) se algum gro for visvel no pus, este deve ser includo na amostra. Ver nota abaixo. 7.2.10 Secreo Vaginal a) com auxlio de espculo, coletar o material da leso ou do fundo do saco vaginal com swab estril; b) enviar o swab umedecido em salina estril ao laboratrio. Ver nota abaixo. Notas: 1) para todas as coletas descritas acima, colher todo o material disponvel na leso. Quanto mais material mais viabilidade na visualizao e no crescimento em cultura. 2) todas as vezes que a coleta for com swab, este deve ser umedecido em salina ou gua estril antes da coleta. Aps a coleta, deve permanecer em um frasco estril com salina suficiente para mant-lo mido at o procedimento do exame. 7.2.11 Escarro a) preferencialmente deve ser colhido por broncoscopia: lavado ou aspirado brnquico; b) quando no for possvel, o escarro deve ser colhido da mesma maneira como colhido para o exame de tuberculose, no esquecendo da higiene da boca antes da coleta, para diminuir a contaminao pelos saprfitas da cavidade bucal e da faringe; c) o exame de escarro, tanto o direto como a cultura, na maioria das vezes no satisfatrio, porque no confivel, por ser uma amostra muito contaminada, portanto, quando houver a possibilidade do exame sorolgico, deve-se optar pelo ltimo. 7.2.12 Aspirado traqueal e secreo obtida por broncoscopia Procedimento realizado por mdico treinado. O material colhido colocado em recipiente estril. 7.2.13 Aspirado gstrico a) obtido atravs de sonda nasogstrica pela manh, em jejum; b) aspirar cerca de 5 a 10 mL de suco gstrico.
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7.2.14 Fluidos a) pleural, abdominal e sinovial: aspirados ou drenados, so coletados assepticamente em frasco estril contendo heparina estril 1:1000; b) a quantidade de heparina usada varia de acordo com o volume da amostra (aproximadamente 1 ml por 10 ml de fludo); c) em casos de fludo abdominal de pacientes de dilise peritoneal, colher sem heparina ou em frasco de hemocultura; d) O ideal que chegue no laboratrio no mximo at 24 horas em temperatura ambiente. 7.2.15 Urina A amostra biolgica mais apropriada para o diagnstico de micose do trato urinrio obtida por sondagem ou citoscopia. Quando no for possvel, e para evitar contaminao com microrganismos presentes nas reas vizinhas, proceder da seguinte maneira: a) realizar limpeza prvia da regio perineal com gua e sabo; b) desprezar o primeiro jato de urina da manh e colher 3 a 5 mL de urina em frasco estril. Colees de 24 horas, no tm valor para diagnstico micolgico. 7.2.16 Fezes a) fazer lavagem prvia da regio anal com gua e sabo; b) coletar pores de fezes em recipiente estril com tampa de rosca ou c) swab anal umedecido em salina estril e transportado tambm em salina suficiente para manter o material mido. 7.2.17 Lquor (LCR Lquido Cfalo Raquidiano) a) colhido pelo mdico. No recomendvel que a mesma amostra seja utilizada para os exames bacteriolgicos, micolgicos ou de tuberculose, porque pode haver contaminao; b) o ideal uma alquota da amostra para cada setor; c) para um bom exame direto com cultura e prova do ltex, so necessrios de 2 a 3ml de lquor. 7.2.18 Sangue (Hemocultura) a) tcnica de coleta lavar as mos com gua e sabo, enxaguar bem, enxugar com papel toalha e calar as luvas; fazer a anti-sepsia da rea com PVPI, por no mnimo 30 segundos. Deixar secar; passar lcool 70%; coletar assepticamente no mnimo 5ml de sangue de indivduos adultos e 1ml de crianas, cuidar para que no haja bolhas de ar na seringa; no trocar de agulha antes de injetar o sangue no frasco. b) volume de sangue para cada amostra recomendado de duas a trs amostras de cada paciente, com intervalos de 30 minutos. Deve ser respeitada a quantidade de sangue de 1:10 em relao ao meio de
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cultura, isto : 5ml de sangue para 45ml de meio de TSB -Trypticase Soy Broth (hemocultura adulto) e 1ml de sangue para 9ml de TSB (hemocultura peditrica). c) inoculao e Incubao romper o lacre central dos frascos e fazer assepsia na tampa de borracha dos frascos de meio com TSB (frasco de hemocultura) com lcool 70%; inocular 5ml de sangue direto da seringa de coleta no frasco de hemocultura adulto (45ml) ou 1ml de sangue em frasco de hemocultura peditrico (9ml). Misturar bem (sem agitar) para evitar coagulao; se a coleta for prxima do LACEN, encaminhar imediatamente em temperatura ambiente; para distncias maiores, proceder como o descrito abaixo: - em caso de mais de um frasco, em um deles dever ser introduzindo na tampa de borracha uma agulha estril com uma pequena poro de algodo na parte posterior, para aerao; - incubar a 35C por 24 horas antes de enviar para o LACEN. d) transporte Aps decorrido o tempo de incubao de 24 horas, o TSB dever ser encaminhado ao LACEN em temperatura ambiente, juntamente com a Ficha de Encaminhamento de Amostras Clnicas devidamente preenchida. 7.2.19 Medula ssea a) coletar de 3 a 5 ml de sangue e colocar em um frasco estril contendo 0,5 ml de heparina diluda 1:1000; b) encaminhar ao LACEN, o mais rpido possvel em temperatura ambiente. 7.2.20 Tecido obtido por bipsia, necropsia e peas operatrias a) colher assepticamente, utilizando instrumentos estreis; b) colocar em recipiente estril com salina; c) no colocar nenhum lquido fixador (por exemplo, formalina); a) encaminhar ao LACEN em temperatura ambiente. 7.2.21 Sorologias a) para as sorologias, as amostras de sangue so coletadas em tubo seco. 5 a 10 ml so suficientes. b) O soro deve ser separado, congelado e encaminhado sob refrigerao. Observao: para todos os exames, necessrio constar na requisio a suspeita clnica para que o laboratrio possa fazer uso dos meios e condies de cultivos mais adequados. 7.3 Transporte
a) para os lquidos asspticos recomenda-se que o material seja enviado imediatamente ao laboratrio para que a semeadura seja feita o mais rpido possvel, para maiores chances de viabilidade do fungo;
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b) portanto, ressalvando as emergncias, necessrio observar o horrio da coleta para que chegue no laboratrio em horrio conveniente para semeadura imediata (preferencialmente pela manh); c) no transporte das amostras deve-se considerar trs condies importantes: manter sob refrigerao, quando aplicado, proteger da luz solar e acondicionar de forma adequada para que no haja risco de derramamento. 8 SEO DE IMUNOLOGIA
8.1 Orientaes gerais de coleta e transporte das amostras em relao ao exame solicitado EXAMES
Reao de aglutinao (Ltex) para BRUCELOSE Sorologia (ELISA) para CHAGAS Imunofluorescncia indireta - IFI para CHAGAS Sorologia (ELISA), anticorpos IgM e IgG para CITOMEGALOVRUS FTA-Abs, Ig Total - para SFILIS (Imunofluorescncia indireta - IFI) Sorologia (ELISA), anticorpos IgM e IgG para RUBOLA Sorologia (ELISA), anticorpos IgM para SARAMPO Sorologia (ELISA), anticorpos IgM e IgG para TOXOPLASMOSE, Confirmao, TOXOPLASMOSE IgM (Metodologia ELFA) Toxo Avidez VDRL/RPR (inclusive quantitativo) SOROLOGIA para LUES e ELISA para SFILIS Sorologia (ELISA), anticorpos IgM para DENGUE Contagem de linfcitos T CD4 / CD8 e CD45 ROTAVRUS (ELISA)
MATERIAL BIOLGICO
Sangue (soro) Sangue (soro) Sangue (soro) Sangue (soro) Sangue (soro) Sangue (soro) Sangue (soro) Sangue (soro) Sangue (soro) Sangue (soro) Sangue (soro) Sangue (soro) Sangue Fezes lquidas
ONDE COLHER
em tubo seco (5 ml) em tubo seco (5 ml) em tubo seco (5 ml) em tubo seco (5 ml) em tubo seco (5 ml) em tubo seco (5 ml). Ver item c nas orientaes especficas. em tubo seco (5 ml). Ver item c nas orientaes especficas. em tubo seco (5 ml) em tubo seco (5 ml) em tubo seco (5 ml) em tubo seco (5 ml) em tubo seco (5 ml). Ver item b nas orientaes especficas. colhido em tubo com EDTA (5 ml). Ver item d nas orientaes especficas. em frasco com tampa rosquevel Ver item e nas orientaes especficas.
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a) no necessrio jejum para os exames imunolgicos; b) a coleta de sangue para diagnstico da Dengue deve ser realizada a partir do 5 dia do incio dos sintomas (febre). Se for colhido antes do 5 dia, ser necessria uma segunda amostra; c) para Sarampo e Rubola, colher sempre que o paciente for procurar o servio de sade, independentemente do incio dos sintomas; d) o teste de Toxo Avidez realizado em gestante que apresenta IgM reagente para toxoplasmose, mediante solicitao mdica; e) aps a coleta, a amostra para o exame de CD4/CD8 e CD45 mantida em temperatura ambiente e deve chegar no laboratrio antes de 18 horas da coleta, acondicionada sem gelo (temperatura entre 18 a 20 C); f) as fezes lquidas para rotavrus devem ser mantidas sob refrigerao e encaminhadas ao LACEN at 48 horas da coleta. Notas: a) para a realizao dos exames de imunologia que utilizam o mesmo material biolgico pode ser enviado somente 1 tubo com soro; b) o soro resultante de 5 ml de sangue suficiente para todos os exames imunolgicos. 9 9.1 VIROLOGIA Orientaes gerais de coleta e transporte das amostras em relao ao exame solicitado MATERIAL BIOLGICO ONDE COLHER
EXAMES
HEPATITES VIRAIS, tipos A, B e C. Marcadores sorolgicos: HBs Ag (Antgeno austrlia) Anti-Hbs Anti-Hbc IgM Hbe Ag Anti-Hbe Anti-Hav IgM Anti-HCV Anti Hbc Total Anti HIV, deteco de anticorpos. Mtodos: Elisa, Imunofluorescncia Indireta IFI e Western Blot
Sangue (soro)
Tubo seco (5 ml)
Sangue (soro)
Tubo seco (5 ml)
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VRUS RESPIRATRIO, Pesquisa do antgeno dos Vrus Influenza A e B; Para influenza 1, 2, 3; Adenovrus e Vrus Sincicial Respiratrio.
Aspirado de secreo nasofaringe (uma amostra de cada narina) em crianas. Secreo com clulas da parede posterior nasal das 2 narinas e orofoaringe
Em sistema prprio de coleta fornecido pelo LACEN (as duas amostras coletadas so colocadas em um nico tubo de meio de transporte viral); Com swab para coleta de aspirado nasofaringeano e transportado em meio de transporte viral, fornecidos pelo LACEN. As trs amostras so colocadas em um nico tubo de meio de transporte.
9.2
Orientaes especficas para solicitao e coleta
9.2.1 Hepatites Virais Para a realizao do diagnstico laboratorial das hepatites virais solicita-se o preenchimento completo da ficha que consta no ANEXO H. a) preenchimento da Ficha de Solicitao de Testes Sorolgicos para Hepatites Virais reproduzir a ficha original do ANEXO H; preencher com letra legvel os dados referentes instituio e pacientes; assinalar os dados referentes s condies da amostra epidemiolgica e clnica do paciente; identificar o solicitante. Nota: as requisies das amostras com as condies clinicas em desacordo com as preconizadas sero devolvidas e o soro armazenado por 15 dias. Aps este perodo as amostras sero desprezadas. b) abordagem sindrmica das hepatites virais: as seguintes situaes clnicas devem ser consideradas como suspeita de Hepatite Viral: aminotransferase (transaminases) 3 vezes o limite superior da normalidade; ictercia aguda e colria; ictercia aguda, colria e aminotransferase 3 vezes o limite superior da normalidade; histria de exposio percutnea ou de mucosa a sangue e/ou secrees de pessoas portadoras ou com suspeita de infeco pelo Vrus da Hepatite B - HBV ou Vrus da Hepatite C - HCV; c) histria de contato sexual ou domiciliar com indivduo sabidamente HbsAg reator e/ou anti HBc reator; exames sorolgicos de triagem reatores para hepatites (doadores de sangue e/ou rgos, usurio de hemodilise e ambulatrios de DST); recm nascidos (RN) de mes HBsAg reatoras;
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para Outros deve ser bem especificado, como por ex: Suscetibilidade ao vrus da Hepatite A. d) Procedimentos Laboratoriais para Hepatites Virais CASO
Diagnstico (Triagem sorolgica (ictercia, colria e aminostransferase 3 vezes o limite superior da normalidade) Monitoramento do HBV (definir cura ou infeco crnica) Confirmatrio do HCV (confirmar positividade sorolgica) Contato Sexual e/ou Domiciliar de Hepatite B Paciente Anti-HBc Reator (Banco de Sangue) Gestante Filhos de Me Hbs-Ag Reator Acidente percutneo, hemodilise. Doador de Orgos Pacientes de DST/Aids/HIV Contato Sexual com Portador de Hepatite C Receptor de Sangue
MARCADORES
Hbs Ag, Anti-HBc IgM, Anti-HAV IgM, Anti-HCV HBs-Ag, Anti-HBs, Anti-Hbe, Hbe-Ag Anti-HCV Anti-HBc Total Anti-Hbs Hbs-Ag Hbs-Ag e Anti-Hbs aos 9 meses e 15 meses de idade Hbs-Ag, Anti-HBs, Anti-HCV Hbs-Ag, Anti-HBc Total, Anti-HCV Hbs-Ag, Anti-HCV Anti-HCV Anti-HBc Total, Anti- HCV
Notas: 1) os testes para verificar eficcia da vacina (anti HBs), ou seja, em indivduos j vacinados no so realizados. 2) os contatos de Hepatite A devem seguir os mesmos procedimentos para diagnstico, pois no existe forma crnica, exige clinica compatvel. 9.2.2 HIV a) somente sero realizados exames de HIV de pacientes que tiverem consultado com mdicos credenciados junto ao programa DST/Aids, nos Centros de Sade, Hospital Infantil Joana de Gusmo, Hospital Nereu Ramos, Hospital Regional Homero de Miranda Gomes Hospital Regional, e possurem requisio prpria de sorologia do SUS, para HIV.
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9.2.3 Vrus Respiratrio a) a coleta deve ser realizada na fase aguda, at 5 dias do incio dos sintomas clnicos. Quanto mais cedo, maior a chance de detectar o vrus. Ver Anexo R; b) o material coletado tem que ser processado at 24 horas aps a coleta e transportado em temperatura de 2 a 8 C; c) atualmente esta coleta realizada no Hospital Infantil Joana de Gusmo, no atendimento de crianas e no Centro de Sade do Estreito - Florianpolis, para atendimento de adultos. 10 BIOLOGIA MOLECULAR
10.1 Orientaes gerais de coleta e transporte das amostras em relao ao exame solicitado EXAMES
Pesquisa qualitativa do vrus da Hepatite C (PCR) Teste de Quantificao de Carga Viral do HIV Teste de Quantificao de Carga Viral do HCV Genotipagem do HIV Genotipagem do HCV
MATERIAL BIOLGICO
Sangue Sangue (plasma) Sangue Sangue (plasma) Sangue
ONDE E QUANTO COLHER

em tubo de coleta com gel separador com ou sem EDTA (5ml) em 2 tubos de coleta a vcuo com EDTA (2 x 5 ml) em tubo de coleta com gel separador com ou sem EDTA (5ml) em 2 tubos de coleta a vcuo com EDTA (2 x 5 ml) em 2 tubos de coleta a vcuo com EDTA (2 x 5 ml)
10.2
Orientaes especficas de coleta, processamento e transporte.
10.2.1 HIV Quantitativo (Carga Viral) a) coleta da amostra no necessrio jejum ou qualquer preparo especial do paciente. Entretanto, deve-se evitar a coleta aps ingesto de alimentos gordurosos nas ltimas 3 horas; a amostra clnica o plasma. O manuseio correto das amostras imprescindvel para proteger o RNA viral do HIV-1 de degradao; identificar 2 (dois) tubos com nome, data e hora da coleta; coletar 5 ml de sangue total em tubos estreis, a vcuo, com EDTA; no utilizar tubos de EDTA com GEL; nunca utilizar tubos de coleta reciclados. b) preparo da amostra a amostra no pode ser refrigerada at a separao do plasma;
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para a obteno do plasma, centrifugar o sangue total a 2500 rpm durante 15 minutos. O plasma no pode ser separado aps repouso espontneo, obrigatria a centrifugao. o plasma no pode estar hemolisado; no pode haver vestgios de sangue; no submeter o plasma a processos de filtrao ou centrifugao adicionais com o intuito de diminuir a turbidez; volume de plasma necessrio para o teste: 1 ml no mnimo; o tempo de viabilidade da amostra at 4 horas aps a coleta do sangue total em temperatura ambiente (18 A 25 C). Durante este perodo a amostra deve ser centrifugada o mais rpido possvel para evitar que o plasma fique em contato com as clulas sanguneas e degrade o RNA viral do HIV; colocar o plasma em microtubos, estreis, livres de RNAse e DNAse, de preferncia com tampa de rosca, prprios para o congelamento; para cada paciente so 2 microtubos com 1 ml de plasma em cada um. c) conservao e transporte da amostra o plasma pode ser armazenado a -20C por no mximo 72 horas em congelador no frost free; aps este perodo, deve ser mantido em freezer 80C por tempo indeterminado; para as amostras que podem chegar no LACEN antes das 4 horas, o transporte do sangue total deve ser realizado em temperatura ambiente (18 a 25C); tem que ser observado o tempo de coleta de cada amostra. Portanto, quando houver vrias coletas, o tempo para o transporte deve ser calculado a partir da primeira amostra coletada; para os locais distantes, a amostra deve ser separada de acordo com as recomendaes acima e o plasma tem que ser congelado pelo menos a -20C e transportado em gelo seco em quantidade suficiente para manter o plasma congelado at chegar no LACEN; nunca enviar amostras nas sextas-feiras, sbados e domingos ou vsperas de feriado sem autorizao do LACEN. Nota: por no ser confivel o resultado de amostra no processada at 4 horas aps a coleta, com volume insuficiente para obteno de 1ml de plasma ou hemolisada, no ser realizado o exame em amostra nestas condies. 10.2.2 HIV Genotipagem a) coleta da amostra no necessrio jejum ou qualquer preparo especial do paciente. Entretanto, deve-se evitar a coleta aps ingesto de alimentos gordurosos nas ltimas 3 horas; a amostra clnica utilizada o plasma; coletar o sangue total em tubos a vcuo com EDTA 2 amostras de 5ml de sangue total; b) preparo da amostra a amostra no pode ser refrigerada at a separao do plasma;
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para a obteno do plasma, centrifugar o sangue total a 1500 rpm durante 10 minutos. No usar plasma no centrifugado (separado aps repouso espontneo) ou hemolisado e no usar plasma com vestgios de sangue. utilizar microtubos, estreis, livres de RNAse e DNAse, de preferncia com tampa de rosca, prprios para o congelamento; identificar 4 (quatro) microtubos com o nome do paciente, data e hora da coleta; utilizar luvas novas e limpas para manipular os tubos e a amostra; transferir o plasma para os microtubos utilizando micropipetas automticas com ponteiras com barreira, descartveis, livres de RNAse e DNAse; distribuir o total de plasma obtido em alquotas de 1 ml por microtubo; c) conservao e transporte da Amostra o plasma pode ser armazenado a -20C por no mximo 72 horas em congelador no frost free; aps este perodo, deve ser mantido em freezer 80C por tempo indeterminado; para as amostras que podem chegar no LACEN antes de completar 5 horas aps a coleta, o transporte do sangue total deve ser realizado em temperatura ambiente (18 A 25C). tem que ser observado o tempo de coleta de cada amostra. Portanto, quando houver vrias coletas, o tempo para o transporte deve ser calculado a partir da primeira amostra coletada. para os locais distantes, a amostra deve ser separada de acordo com as recomendaes acima e o plasma tem que ser congelado pelo menos a -20C e transportado em gelo seco em quantidade suficiente para manter o plasma congelado at chegar no LACEN. nunca enviar amostras nas sextas-feiras, sbados e domingos ou vsperas de feriado sem autorizao do LACEN. 10.2.3 Testes Qualitativos, Quantitativos (Carga Viral) e Genotipagem do RNA do HCV. a) coleta e preparo da amostra no necessrio jejum ou qualquer preparo especial do paciente. Entretanto, deve-se evitar a coleta, aps ingesto de alimentos gordurosos nas ltimas 3 horas; coletar 5 ml de sangue total, especfico para os exames de biologia molecular, em tubo a vcuo com EDTA e gel separador. Centrifugar e encaminhar diretamente ao laboratrio; no usar HEPARINA como anticoagulante; para a obteno do plasma, centrifugar o sangue total a 1500 rpm por 20 minutos. No usar plasma no centrifugado (separado aps repouso espontneo) ou hemolisado; no usar plasma com vestgios de sangue; identificar o tubo com nome, tipo do exame, origem e data da coleta. Notas: 1) importante que a amostra seja especfica para os testes quantitativos, qualitativos e genotipagem do HCV para que no haja manuseio e conseqentemente contaminao da amostra e o resultado sejam confiveis;
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2) nunca utilizar tubos de coleta, microtubos ou ponteiras reciclados. b) armazenamento da amostra amostras de plasma podem ser armazenadas em geladeira (2 a 8C) durante at 72 horas, ou congelada a 70C; Nota: Se no existir freezer 70C, o sangue no pode ser congelado a 20C, devendo ser enviado ao LACEN, o mais rpido possvel dentro do prazo de 72 horas. c) transporte da amostra o sangue total deve ser transportado ao laboratrio entre 2 e 25C, para separar o soro ou plasma at 4 horas aps a coleta; o plasma deve ser transportado entre 2 e 8C. d) critrios de aceitao da amostra as amostras de plasma que chegarem ao LACEN/SC com pacotes de gelo reciclvel temperatura ambiente sero descartadas como inadequadas; amostras hemolisadas, lipmicas ou contaminadas so desprezadas; as amostras somente sero aceitas no LACEN at 5 feira de cada semana; as amostras enviadas fora de qualquer um dos critrios descritos nos itens acima sero desprezadas. d) condies para solicitao de Testes Bio-moleculares para Hepatite C CASO
Diagnstico (PCR-HCV Qualitativo)
CONDIES
Nmero da notificao Resultado de Anti-HCV Requisio: Laudo mdico para emisso do BPA-I (Ver item e a seguir) Resultado do Teste PCR-Qualitativo Resultado da Bipsia ou Avaliao Mdica Requisio: Laudo mdico para emisso do BPA-I (Ver item e a seguir) Resultado da bipsia Requisio: Laudo mdico para emisso do BPA-I (Ver item e a seguir) Requisio: Laudo mdico para emisso do BPA-I (Ver item e a seguir) Requisio: Laudo mdico para emisso do BPA-I (Ver item e a seguir)
Genotipagem
PCR-Quantitativo (Indicao de tratamento) se Gentipo 1 PCR-Quantitativo para monitorar tratamento PCR-Qualitativo para monitorar tratamento
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e) Laudos mdicos especficos para Hepatite C Laudo mdico para emisso do BPA-I para genotipagem de vrus da Hepatite C ANEXO M Laudo mdico para emisso do BPA-I para teste de quantificao de RNA do vrus da Hepatite C ANEXO N Laudo mdico para emisso do BPA-I para teste de deteco de RNA do vrus da hepatite C (Qualitativo) ANEXO P Laudo mdico para emisso do BPA-I para Pesquisa de anticorpos contra o vrus da hepatite C (Anti-HCV) ANEXO Q 11 11.1 ANLISES NEONATAIS (TESTE DO PEZINHO) Orientaes de coleta das amostras em relao ao exame solicitado MATERIAL BIOLGICO
Sangue do recm-nascido (coletado do calcanhar) Sangue do recm-nascido (coletado do calcanhar) Sangue do recm-nascido (coletado do calcanhar) Sangue do recm-nascido (coletado do calcanhar) Sangue do recm-nascido (coletado do calcanhar)
EXAMES
Dosagem da Fenilalanina Dosagem do Hormnio Estimulante da Tireide TSH Dosagem do hormnio 17-OH Progesterona Dosagem da Tripsina Imuno Reativa - IRT Identificao de Hemoglobina
ONDE COLHER
no carto prprio, fornecido pelo LACEN, no carto prprio, fornecido pelo LACEN no carto prprio, fornecido pelo LACEN no carto prprio, fornecido pelo LACEN no carto prprio, fornecido pelo LACEN
11.2
Orientaes especficas para a coleta
a) a coleta realizada por tcnico orientado pelo LACEN; b) o perodo ideal de coleta de 3 a 5 dias do nascimento; c) caso ultrapasse este perodo, os exames sero realizados da mesma maneira, mas se der positivo, a criana perde dias preciosos de tratamento. 11.3 Acondicionamento dos cartes com amostras de sangue Aps a coleta, secar os cartes em temperatura ambiente, na posio horizontal, por no mnimo 2 horas evitando-se o contato das amostras com quaisquer superfcies. No utilizar nenhuma forma artificial de secagem, tais como: estufa, ventilador ar condicionado, nem expor ao vento ou a raios solares. Estando completamente seco, o carto deve ser colocado dentro do envelope do Teste do Pezinho devidamente preenchido. Embalar os envelopes em papel alumnio, coloca-los
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em saco plstico bem vedado e mant-los sob refrigerao at o momento da remessa ao LACEN. A remessa das coletas ao laboratrio deve ser feita dentro de um envelope grande comum. No h necessidade do papel alumnio e do saco plstico para o envio das amostras. 11.4 Transporte das amostras O transporte das amostras deve ser feito evitando o calor excessivo e incidncia de luz solar direta e em local seco. Quando transportado em caixa de isopor, nunca colocar gelo (inclusive gelo reciclvel).
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ANEXO A EMBALAGEM DO KIT DE MENINGITE COM AS INSTRUES DE USO (FRENTE) KIT DE MENINGITE Este Kit composto de: a) 01 frasco com meio de gar chocolate (frasco com tarja verde); b) 01 frasco para hemocultura coleta peditrica (frasco com tarja vermelha); c) 01 frasco vazio estril para lquor recm puncionado (frasco com tarja azul); d) 01 frasco vazio estril para soro (frasco com tarja laranja); e) 01 porta-lminas com 01 lmina; f) 01 embalagem para transporte de LCR e soro; g) 01 embalagem para transporte de meios de cultura; Conservao na geladeira temperatura 4 a 8C. ORIENTAO PARA O USO DE KIT DE MENINGITE 1) No momento do uso, os meios de cultura devem estar a 35C 2) Romper o lacre central dos frascos e fazer assepsia das tampas de borracha com lcool 70%.
1) Semeie o lquor (LCR) imediatamente no frasco com meio de agar chocolate (verde). Incubar em estufa a 35C por 24 a 48 horas e enviar ao LACEN. Transportar em temperatura ambiente 2) Colocar 1 a 2 ml de LCR no frasco estril (azul). Transportar em Isopor com gelo. 3) Colocar 1 a 2 ml de soro no frasco estril (Laranja). Transportar em isopor com gelo. 4) Adicionar 1 ml de sangue direto no frasco para hemocultura (vermelho). Incubar em estufa a 35C por 24 a 48 horas e enviar ao LACEN. Transportar em temperatura ambiente. Observao: para adulto, utilizar frasco de meio de cultura com 45 ml e adicionar 5 ml de sangue. 5) Fazer um esfregao em lmina do lquor centrifugado e fixar em temperatura ambiente ou em estufa a 35C. No corar. Transportar no porta-lmina a temperatura ambiente
Importante: o LCR e o soro devero ser colocados no freezer ou congelador at a hora de serem enviados ao LACEN
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EMBALAGEM DO KIT DE MENINGITE COM AS INSTRUES DE USO (VERSO)
TRANSPORTE DE MEIOS DE CULTURA

a) Aproveitar esta embalagem para acondicionar a lmina e os frascos de agar chocolate e de hemocultura aps incubao prvia por 24-48 horas a 35C. b) Enviar ao LACEN em temperatura ambiente.
LABORATRIO CENTRAL DE SADE PBLICA - LACEN Avenida Rio Branco 152 Fundos - Centro Fone: PABX (48) 32517800 FAX (48) 32517900 CEP 88015-201- Florianpolis Santa Catarina
lacen@saude.sc.gov.br
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ANEXO B
COQUELUCHE
KIT PARA COLETA DE SECREO NASOFARINGE PARA CULTURA NO DIAGNSTICO LABORATORIAL DA COQUELUCHE
Kit para 1 (um) paciente 1 tubo com meio de transporte para coqueluche (Meio de Regan Lowe) com antibitico; 1 swab ultrafino com haste flexvel, estril e alginatado; Ficha de encaminhamento de Amostras Clnicas.
OBS.: Transporte e armazenamento do meio de cultura (antes da semeadura) em geladeira; Validade do meio de transporte para coqueluche: 2 meses; O swab deve ser armazenado em temperatura ambiente e em local seco.
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ANEXO C
DIFTERIA
KIT PARA COLETA DE SECREO NASO E OROFARINGE PARA CULTURA NO DIAGNSTICO LABORATORIAL DA DIFTERIA
Kit para 1 (um) paciente 2 tubos com meio de Amies (1 para o nariz e 1 para a garganta); 2 swabs descartveis, 1 ultrafino com haste flexvel, estril e alginatado para o nariz e 1 swab alginatado para a garganta); Ficha de encaminhamento de Amostras Clnicas.
OBS.: Transporte e armazenamento do meio de cultura (antes da semeadura) em geladeira; O swab deve ser armazenado em temperatura ambiente e em local seco. Validade do meio de transporte para difteria: 6 meses.
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ANEXO D
COPROCULTURA
(DOENAS DIARREICAS: CLERA E DOENAS TRANSMITIDAS POR ALIMENTOS)
KIT PARA COLETA DE FEZES PARA CULTURA NO DIAGNSTICO DE INFECES INTESTINAIS
Kit para 1 (um) paciente
1 tubo com meio de transporte de Cary-Blair 1 pote plstico para coleta de fezes in natura 1 swab 1 Ficha de encaminhamento de Amostras Clnicas.
OBS.: Transporte e armazenamento do meio de cultura (antes da semeadura) em geladeira; O swab deve ser armazenado em temperatura ambiente e em local seco. Validade do meio de Cary-Blair: 2 meses
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ANEXO E
SENGONO
KIT PARA COLETA DE SECREES URETRAL E ENDOCERVICAL PARA PESQUISA DE Neisseria gonorrhoeae
Kit para 1 (um) paciente

01 swab alginatado (para coleta endocervical); 01 swab comum (para a bacterioscopia); 01 swab ultrafino tratado (alginatado/Dracon) para coleta uretral; 01 lmina nova no porta lmina; 01 tubo de meio de cultura de Amies com carvo (meio de transporte); Etiquetas autocolantes (1 para lmina e outra para o tubo) Ficha de encaminhamento de Amostras Clnicas.
OBS.:
Armazenar o Meio de Amies na geladeira, antes da semeadura (validade: 6 meses); Transportar a amostra no meio de Amies em temperatura ambiente; O tempo entre a coleta e o processamento no LACEN no pode ultrapassar 08 horas.
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ANEXO F DADOS PESSOAIS

Nome: ____________________________________________________________Idade _______ Sexo: _______ Municpio de Residncia:___________________________________________N da notificao:_____________ Procedncia: __________________________________________________(Hospital, creche, restaurante, evento) Municpio de Atendimento: ______________________________________ Regional: _________________
DADOS DA AMOSTRA
DIFTERIA Amostra: ( ) orofaringe ( )nasofaringe ( ) leso cutnea) Data e hora da Coleta:___________________________ Fez uso de antibitico? Sim ( ) No ( ) Data: ___/___/___ ( ) Doente ( ) Contato
CLERA Amostra: ( ) fezes in natura ( ) swab fecal em Cary-Blair ( ) swab retal em Cary-Blair) Perodo de incubao (horas): _________________ Data e hora da Coleta: _____________________ Fez uso de antibitico? Sim ( ) No ( ) Data: ___/___/___ DOENAS TRANSMITIDAS POR ALIMENTOS (DTA) Amostra: ( ) fezes in natura ( ) swab fecal em Cary-Blair ( ) swab retal em Cary-Blair N da amostra: ( )1 ( ) 2 3( ) ( ) Manipulador ( ) Doente Perodo de incubao (horas): _________________ Data e hora da Coleta: ___________________ Fez uso de antibitico? Sim ( ) No ( ) Data: ___/___/___ FEBRE TIFIDE Hemocultura: entre a 1 e 2 semana da doena N da amostra: ( ) 1 ( ) 2 ( ) 3 Data da Coleta: __________________ Hora da Coleta: 1 amostra: ___________ 2 amostra: ___________ 3 amostra:___________ Amostra: ( ) fezes in natura N de amostras: ( )1 ( ) 2 Aps tratamento: ( ) 30 dias ( ) swab fecal, em Cary-Blair ) 3 ( ) 4 ( ) 5 ( )6 ( ) 60 dias ( ) 90 dias ( ( ( )swab retal em Cary-Blair ) 7 Data e hora da Coleta:____________
MENINGITE: Amostra: ( ) Lquor puro ( ) lquor em gar chocolate ( )lmina Data e hora da Coleta: ______________________________________ Dados dos exames de lquor j realizados: leuccitos: ____________ neutrfilos: _____ linfcitos: ________ glicose: _________ protena: _______ Gram: ______________Cultura: _______________________________ Fez uso de antibitico? Sim ( ) No ( ) Data: ___/___/___ MENINGOCOCCEMIA Amostra: ______________ N da amostra: _________- 1, 2 ou 3 (1 dia) Data e hora da Coleta: _____________________________ Fez uso de antibitico? Sim ( ) No ( ) Data: ___/___/___ _________1, 2 ou 3 (2 dia)
COQUELUCHE Amostra: ( ) Secreo de Nasofaringe Data e hora de coleta: _________________________ ( ) Doente Fez uso de antibitico? Sim ( ) No ( ) Data: ___/___/___ ( ) Contato (Nome do doente:_________________________) OUTRAS AMOSTRAS/ CEPA BACTERIANA Amostra: ______________________________ Origem : _________________________________________ Fez uso de antibitico? Sim ( ) No ( ) Data: ___/___/___ Exame Solicitado___________________________________________________________________________ Data e hora da remessa do material: _______________________________ Responsvel: _________________________________________ Fone p/ contato:______________________ PARA USO DO LACEN Recebimento do material (data e hora): _________________________________________________________ Tipo de material: __________________________________________________________________________ Forma de acondicionamento da amostra: ( ) adequada ( ) inadequada: Se inadequada especificar: ________________________________________________ N do Registro no Setor de Bacteriologia: ___________________________________
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ANEXO G
FORMULRIO PARA SUPERVISO INDIRETA DE BACILOSCOPIA PARA HANSENASE LABORATRIO DA UNIDADE SANITRIA DE: __________________________________________ MS: __________________ ANO: ___________________ 1. Lminas POSITIVAS para diagnstico (enviar todas as positivas): Nmero ndice baciloscpico por esfregao No. LOD LOE CD CE Nome: No. Nome: No. Nome: No. Nome: No. Nome: 2. Lminas POSITIVAS para controle de tratamento (enviar todas as lminas): Nmero ndice baciloscpico por esfregao No. LOD LOE CD CE No. No. No. No. No. LOD LOD LOD LOD LOD LOE LOE LOE LOE LOE CD CD CD CD CD CE CE CE CE CE LOD LOE CD CE LOD LOE CD CE LOD LOE CD CE LOD LOE CD CE
LESO Idade: LESO Idade: LESO Idade: LESO Idade: LESO Idade:
LESO LESO LESO LESO LESO LESO
3. Lminas NEGATIVAS (enviar todas as lminas): 3.1. Para DIAGNSTICO 3.2. Para CONTROLE DE TRATAMENTO
4. Total de baciloscopias do ms DIAGNSTICO Positivo :__________________________ Negativo:_______________________________________ CONTROLE Positivo:____________________________ Negativo:_______________________________________ TOTAL: Data: ____/____/____ Assinatura Bioqumico:
5. Observaes
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ANEXO H FICHA PARA SOLICITAO DOS TESTES SOROLGICOS PARA HEPATITES VIRAIS 1 INSTITUIO Nome: Endereo: Municpio: Estado: Responsvel: Telefone: FAX: 2 PACIENTE Nome: Endereo: Municpio: 3 AMOSTRA Sangue Conservao: Data coleta: Idade: Estado: Soro Plasma Refrigerador Freezer a -20 C Data do envio: contato sexual com portador de hepatite b contato domiciliar com portador de hepatite b Contato sexual com portador de hepatite c Sexo:
4 CONDIO EPIDEMIOLGICA histria de transfuso doadores sangue/rgo sangunea usurio de drogas monitoramento da infeco injetveis/inalveis pelo HBV
5 CONDIO CLNICA Aminotransferase alterada valores: Ictercia/colria Hemodilise RN de me portadora hepatite B Susceptibilidade hepatite A Outros: Obs:
ALT =
AST= Acidente c/ perfuro cortante Ambulatrio DST/AIDS/HIV Receptor de sangue/ rgo Monitorar tratamento pelo HBV
6 SOLICITANTE Nome: Assinatura:
Data:
ESTADO DE SANTA CATARINA SECRETARIA DE ESTADO DA SADE SISTEMA NICO DE SADE DIRETORIA DE VIGILNCIA EPIDEMIOLGICA
ANEXO J NORMATIZAO PARA DIAGNSTICO DE HANTAVIROSE Laboratrio de Referncia Nacional para SC: Instituto Adolfo Lutz / SP a) Quanto ao envio das amostras: - Todas as amostras biolgicas devem ser encaminhadas seguindo normas de biossegurana e acompanhadas de cpia da ficha de notificao devidamente preenchida e de formulrio de pesquisa de hantavrus (anexo) onde deve estar registrada a data do incio dos sintomas, a data da coleta da amostra e municpio de residncia do paciente. OBS: No formulrio de pesquisa de hantavrus, deve constar a assinatura e carimbo (com CRM) do mdico solicitante. No sero aceitas solicitaes assinadas por outros profissionais. b) Quanto ao teste e material a ser enviado: 1. SOROLOGIA Mtodo: Elisa IgG e Elisa IgM Material: - Sangue venoso (soro) mdia de 5 ml - Sangue do corao em caso de bito Recipiente: em frasco sem anti-coagulante Conservao: congelado a -20C, ou em geladeira por 24 horas no mximo. Transporte: refrigerado com gelo reciclvel em caixa de isopor. 2. RT-PCR Material: - Soro, plasma, sangue ou cogulo: mdia de 5 ml (at 7 dias aps o incio dos sintomas) 2 - Fragmentos de pulmo, rim, bao e fgado (caso de bito); 1,5cm (at 8 horas aps o bito) - Conservao: -70C ou em nitrognio lquido. - Transporte: caixa apropriada para transporte de materiais infectantes, contendo gelo seco. 3. IMUNOHISTOQUMICA Material: Fragmentos de pulmo, rim, bao, linfonodo, corao, pncreas, glndula pituitria, crebro e 2 fgado: 1,5 a 2 cm ( at 8 horas aps o bito) Conservao: soluo de formalina tamponada a 10% ou em blocos de parafina. Transporte: em temperatura ambiente. NO REFRIGERAR. c) Prazo para emisso dos resultados: Contado a partir do recebimento das amostras no laboratrio de referncia (IAL-SP). Quando positivos, os resultados sero informados imediatamente, via fax ou telefone no prazo de: - Sorologia: 3 a 5 dias teis - Imunohistoqumica: mximo de 3 meses. - RT-PCR: no utilizado na rotina. um exame complementar. OBSERVAES: 1. O Laboratrio Adolfo Lutz SP, no mais aceitar amostras que no sejam devidamente encaminhadas (com todas as informaes necessrias, bom estado de conservao e procedncia). Caso contrrio, as amostras no sero processadas e ficaro disposio para retirada pelo Servio de Sade que as enviou. 2. importante que as remessas de material para o LACEN no sejam feitas em datas prximas de finais de semana e feriados, para evitar o risco de haver atrasos na entrega, com perda de material e conseqentemente atraso no diagnstico.
As orientaes aqui descritas entram em vigor a partir de 10/07/2006.
Rua: Felipe Schmidt, 774 Centro Florianpils (SC) 88.010-002 Edificio Montreal
ESTADO DE SANTA CATARINA SECRETARIA DE ESTADO DA SADE SISTEMA NICO DE SADE DIRETORIA DE VIGILNCIA EPIDEMIOLGICA
ANEXO L FORMULRIO PARA PESQUISA DE HANTAVRUS *Data da coleta: _____/_____/_____ Nome do paciente:
Endereo: ______________________________________________n: ____________ *Municpio: ______________________________Estado: _______________________ Desenvolveu atividades de risco nos ltimos 45 dias? Sim ( ) No ( )
Se sim, qual? __________________________________________________________ ______________________________________________________________________ Data do incio dos sintomas: _____/_____/_____
Assinatura e carimbo do mdico
* Campos obrigatrios
SUS
Ministrio da Sade
Estado de Santa Catarina Secretaria de Estado da Sade Superintendncia de Vigilncia em Sade
LAUDO MDICO PARA EMISSO DO BPA-I

Genotipagem de vrus da Hepatite C IDENTIFICAO DO ESTABELECIMENTO DE SADE (SOLICITANTE)
UNIDADE SOLICITANTE CNES
| DADOS DO PACIENTE
NOME DO PACIENTE
N DO PRONTURIO
CARTO NACIONAL DE SADE (CNS)
DATA DO NASCIMENTO
SEXO DDD TELEFONE
RAA/COR
/ | | | | | | | | | | | | | | |
DDD TELEFONE
NOME DA ME NOME DO RESPONSVEL ENDEREO (Rua, N, Bairro)
MUNICPIO DE RESIDNCIA CDIGO IBGE MUNICPIO N DE NOTIFICAO
UF
CEP
DADOS DA SOLICITAO
CDIGO DO PROCEDIMENTO PROCEDIMENTO
020203021-0
HIPTESE DIAGNSTICA
GENOTIPAGEM DE VRUS DA HEPATITE C JUSTIFICATIVA DO PROCEDIMENTO

CID 10
Motivo pelo qual o exame est sendo solicitado
Indicao de Tratamento SOLICITAO

NOME DO PROFISSIONAL SOLICITANTE DOCUMENTO N DO CNS/CPF ASSINATURA E CARIMBO
( ) CNS ( ) CPF
DATA DA COLETA
ASSINATURA E CARIMBO
AUTORIZAO
(campo reservado ao LACEN)
BPA-I = Boletim de Produo Ambulatorial (Individualizado) LABORATRIO CENTRAL DE SADE PBLICA CNES 3157237 Av. Felipe Schmidt, 788 - Centro - CEP 88010-002 Florianpolis - SC Fone: (48) 3251-7800 FAX: (48) 325 17915 E-mail: virologialacen@saude.sc.gov.br Site: http://lacen.saude.sc.gov.br
SUS
Ministrio da Sade

Quantificao de RNA do vrus da Hepatite C IDENTIFICAO DO ESTABELECIMENTO DE SADE (SOLICITANTE)
| DADOS DO PACIENTE
NOME DO PACIENTE
N DO PRONTURIO
DATA DO NASCIMENTO
SEXO DDD TELEFONE
RAA/COR
/ | | | | | | | | | | | | | | |
DDD TELEFONE
UF
CEP
DADOS DA SOLICITAO
020203108-0
HIPTESE DIAGNSTICA
Quantificao de RNA do vrus da Hepatite C JUSTIFICATIVA DO PROCEDIMENTO

CID 10
Motivo pelo qual o exame est sendo solicitado Indicao de tratamento (gentipo 1 e co-infectado HIV) Monitorar tratamento 12 semana (IF- peguilado) Retratamento gentipo 2 e 3 (IF- peguilado) inicio Monitorar retratamento (IF- peguilado) 12 semana
SOLICITAO
( ) CNS ( ) CPF
DATA DA COLETA
AUTORIZAO
SUS
Ministrio da Sade

Deteco de RNA do vrus da Hepatite C (Qualitativo) IDENTIFICAO DO ESTABELECIMENTO DE SADE (SOLICITANTE)
| DADOS DO PACIENTE
NOME DO PACIENTE
N DO PRONTURIO
DATA DO NASCIMENTO
SEXO DDD TELEFONE
RAA/COR
/ | | |
CEP
NOME DA ME NOME DO RESPONSVEL ENDEREO (Rua, N, Bairro) MUNICPIO DE RESIDNCIA CDIGO IBGE MUNICPIO N DE NOTIFICAO
| |
| |
| |
| |
| |
| |
DDD
TELEFONE
|
UF
DADOS DA SOLICITAO
020203005-9
HIPTESE DIAGNSTICA
Deteco de RNA do vrus da Hepatite C (Qualitativo) JUSTIFICATIVA DO PROCEDIMENTO

CID 10
Motivo pelo qual o exame est sendo solicitado Definir infeco (diagnostico pr-tratamento) Monitorar tratamento 4 semana (gentipo 1, 2 e 3) Monitorar tratamento 24 semana (final TTO-gentipo 2 ou 3) Monitorar tratamento 48 semana- final de TTO Avaliao 6 meses aps encerrado tratamento
SOLICITAO
NOME DO PROFISSIONAL SOLICITANTE DOCUMENTO N DO CNS/CPF DATA DE SOLICITAO ASSINATURA E CARIMBO
/ | | | | | | | |
/ | |
( ) CNS ( ) CPF
DATA DA COLETA
AUTORIZAO
SUS
Ministrio da Sade

Pesquisa de anticorpos contra o Vrus da Hepatite C (anti-HCV) IDENTIFICAO DO ESTABELECIMENTO DE SADE (SOLICITANTE)
| DADOS DO PACIENTE
NOME DO PACIENTE
N DO PRONTURIO
DATA DO NASCIMENTO
SEXO DDD TELEFONE
RAA/COR
/ | | | | | | | | | | | | | | |
DDD TELEFONE
UF
CEP
DADOS DA SOLICITAO
020203067-9
HIPTESE DIAGNSTICA
Pesquisa de anticorpos contra o Vrus da Hepatite C (anti-HCV) JUSTIFICATIVA DO PROCEDIMENTO

CID 10
Motivo (condio clnica)
Contato sexual Usurio de drogas injetveis (UDI) Exposio percutnea ou Mucosa Contato sexual
Transmisso vertical Doador de rgos Pacientes em hemodilise
SOLICITAO
( ) CNS ( ) CPF
DATA DA COLETA
ASSINATURA E CARIMBO (campo reservado ao LACEN)
AUTORIZAO
ANEXO R Estado de Santa Catarina Secretaria de Estado da Sade Laboratrio Central de Sade Pblica LACEN/SC
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KIT PARA VIRUS RESPIRATRIO
Kit para coleta de secrees nasofaringe para realizao de tcnica de Imunofluorescncia indireta
Kit para um paciente 01 tubo falcon com MTV (Meio de transporte); 01 Equipo para coleta nasofaringe; 01 par de luvas de procedimento, descartvel; 01 culos de proteo; 01 avental descartvel; 01 mscara descartvel.
OBS.: A amostra deve ser encaminhada ao LACEN no mximo em 24 horas aps a coleta, mantendo-a sob refrigerao, 53C. Durante o transporte a amostra tambm deve ser mantida sob refrigerao de 53C.

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Sistema nico de Sade Estado de Santa Catarina Secretaria de Estado da Sade Laboratrio Central de Sade Pblica LACEN/SC

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MANUAL DE ORIENTAES PARA COLETA, PREPARO E TRANSPORTE DE MATERIAL BIOLGICO

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1.6 1.7 1.8 1.9 1.10 2 2.1 2.2 2.3

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CAPTULO II CONDIES GERAIS 1 CUIDADOS PRELIMINARES

Figura 1: Equipamentos de Proteo Individual

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Figura 2: Modelos de Dispositivos de Pipetagem

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Limpeza da Bancada de Trabalho

Figura 3: Modelo de caixa coletora de material infectante.

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Figura 4: Saco de autoclave com material

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COLETA DE AMOSTRAS Requisio

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Figura 6: Modelo pronto do tubo com a amostra para ser transportada

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Centrifugao / separao do soro ou plasma

Figura 7: Modelo de etiqueta

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ACONDICIONAMENTO PARA TRANSPORTE Para transporte de curta distncia

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Malria, Leishmaniose e Doena de Chagas Agudo - DCA OBJETIVO

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