Universidad Nacional Autnoma de Mxico Facultad de Estudios Superiores Cuautitln Campo 1

Laboratorio de Bioqumica Estructural.

Carrera: Qumica. Grupo: 1601

Reporte de la practica No. 9 cidos Nucleicos.

Profesor: QFB. ESCALANTE REYNOSO GABRIELA QFB. GONZALEZ ANGELES NYDIA. Equipo 8: ANGELES CRUZ HERIBERTO ARROYO MORENO MIRIAM TREVIO JIMNEZ ENRIQUE ROMEO

REALIZACION: 8 DE NOVIEMBRE DEL 2011 ENTREGA: 16 DE NOVIEMBRE DEL 2011.

cidos Nucledos. Introduccin. Los cidos nuclecos son macromolculas, polmeros formados por la repeticin de monmeros llamados nucletidos, unidos mediante enlaces fosfodister. Se forman, as, largas cadenas o polinucletidos, lo que hace que algunas de estas molculas lleguen a alcanzar tamaos gigantes (de millones de nucletidos de largo). El descubrimiento de los cidos nucleicos se debe a Friedrich Miescher, quien en el ao 1869 aisl de los ncleos de las clulas una sustancia cida a la que llam nuclena, nombre que posteriormente se cambi a cido nucleico. Posteriormente, en 1953, James Watson y Francis Crick se encargaron de descrubrir el diseo del ADN. Existen dos tipos de cidos nucleicos: ADN (cido desoxirribonucleico) y ARN (cido ribonucleico), que se diferencian:

Por el glcido (pentosa) que contienen: la desoxirribosa en el ADN y la ribosa en el ARN; Por las bases nitrogenadas que contienen: adenina, guanina, citosina y timina, en el ADN; adenina, guanina, citosina y uracilo, en el ARN; En los organismos eucariotas, la estructura del ADN es de doble cadena, mientras que la estructura del ARN es monocatenaria, aunque puede presentarse en forma extendida, como el ARNm, o en forma plegada, como el ARNt y el ARNr. En la masa molecular: la del ADN es generalmente mayor que la del ARN.

El cido desoxirribonucleico, frecuentemente abreviado como ADN (y tambin DNA, del ingls deoxyribonucleic acid), es un tipo de cido nucleico, una macromolcula que forma parte de todas las clulas. Contiene la informacin gentica usada en el desarrollo y el funcionamiento de los organismos vivos conocidos y de algunos virus, y es responsable de su transmisin hereditaria. Desde el punto de vista qumico, el ADN es un polmero de nucletidos, es decir, un polinucletido. Un polmero es un compuesto formado por

muchas unidades simples conectadas entre s, como si fuera un largo tren formado por vagones. En el ADN, cada vagn es un nucletido, y cada nucletido, a su vez, est formado por un azcar (la desoxirribosa), una base nitrogenada (que puede ser adeninaA, timinaT, citosinaC o guaninaG) y un grupo fosfato que acta como enganche de cada vagn con el siguiente. Lo que distingue a un vagn (nucletido) de otro es, entonces, la base nitrogenada, y por ello la secuencia del ADN se especifica nombrando slo la secuencia de sus bases. La disposicin secuencial de estas cuatro bases a lo largo de la cadena (el ordenamiento de los cuatro tipos de vagones a lo largo de todo el tren) es la que codifica la informacin gentica: por ejemplo, una secuencia de ADN puede ser ATGCTAGATCGC... En los organismos vivos, el ADN se presenta como una doble cadena de nucletidos, en la que las dos hebras estn unidas entre s por unas conexiones denominadas puentes de hidrgeno. Para que la informacin que contiene el ADN pueda ser utilizada por la maquinaria celular, debe copiarse en primer lugar en unos trenes de nucletidos, ms cortos y con unas unidades diferentes, llamados ARN. Las molculas de ARN se copian exactamente del ADN mediante un proceso denominado transcripcin. Una vez procesadas en el ncleo celular, las molculas de ARN pueden salir al citoplasma para su utilizacin posterior. La informacin contenida en el ARN se interpreta usando el cdigo gentico, que especifica la secuencia de los aminocidos de las protenas, segn una correspondencia de un triplete de nucletidos (codn) para cada aminocido. Esto es, la informacin gentica (esencialmente: qu protenas se van a producir en cada momento del ciclo de vida de una clula) se halla codificada en las secuencias de nucletidos del ADN y debe traducirse para poder funcionar. Tal traduccin se realiza usando el cdigo gentico a modo de diccionario. El diccionario "secuencia de nucletido-secuencia de aminocidos" permite el ensamblado de largas cadenas de aminocidos (las protenas) en el citoplasma de la clula. Las secuencias de ADN que constituyen la unidad fundamental, fsica y funcional de la herencia se denominan genes. Cada gen contiene una parte que se transcribe a ARN y otra que se encarga de definir cundo y dnde deben expresarse. La informacin contenida en los genes (gentica) se emplea para generar ARN y protenas, que son los componentes bsicos de las clulas, los "ladrillos" que se utilizan para la construccin de los orgnulos u organelos celulares, entre otras funciones. Dentro de las clulas, el ADN est organizado en estructuras llamadas cromosomas que, durante el ciclo celular, se duplican antes de que la clula se divida. Los organismos eucariotas (por ejemplo, animales,

plantas, y hongos) almacenan la mayor parte de su ADN dentro del ncleo celular y una mnima parte en elementos celulares llamados mitocondrias, y en los plastos y los centros organizadores de microtbulos o centrolos, en caso de tenerlos; los organismos procariotas (bacterias y arqueas) lo almacenan en el citoplasma de la clula, y, por ltimo, los virus ADN lo hacen en el interior de la cpsida de naturaleza proteica. Existen multitud de protenas, como por ejemplo las histonas y los factores de transcripcin, que se unen al ADN dotndolo de una estructura tridimensional determinada y regulando su expresin. Los factores de transcripcin reconocen secuencias reguladoras del ADN y especifican la pauta de transcripcin de los genes. El material gentico completo de una dotacin cromosmica se denomina genoma y, con pequeas variaciones, es caracterstico de cada especie. Objetivos. Realizar la extraccin de ADN de Cebolla y Kiwi utilizando una solucin de sal y jabn para degradar la membrana nuclear. Metodologa. Se sigui la metodologa indicada en el manual de prcticas de laboratorio de bioqumica estructural para la carrera de qumica correspondiente a la practica 8 pagina 64. Observaciones y resultados. A. Extraccin de ADN de Cebolla. Aqu pegar la foto Aca tambien La cebolla presento dos fases, en la fase inferior se mostraba un precipitado color anaranjado, este color se debe al jugo de la papaya que se adicion en la extraccin, y en la fase superior era incoloro y se encontraba en suspensin el ADN de la Cebolla. B. Extraccin de ADN del Kiwi. Aca la del kiwi Aca la otra En la extraccin de ADN del kiwi la solucin presento dos fases, la fase del fondo era de color verde que es el color que mostraba el pur de kiwi, la fase superior era incolora esta era de etanol frio y tena en suspensin el ADN de kiwi. Discusin de resultados.

Para la extraccin de ADN de cebolla primero hubo que preparar una solucin de NaCl, detergente y agua destilada, esta en conjunto con la accin del Virtis, son capases de romper la pared celular y las membranas plasmticas y nucleares, por consecuente permiti el homogenizar el contenido celular. Posteriormente se filtr para separar los slidos de mayor tamao del homognado y poder trabajar con el sobrenadante el cual contiene a los cidos nuclecos. A este se le adiciono zumo de papaya el cual contiene una enzima llamada papana la cual hidroliza las protenas contenidas en la muestra, que pueden contaminar el ADN. A continuacin se le agrego, alcohol frio se utilizo para precipitar el ADN que es soluble en agua pero, cuando se encuentra en alcohol se desenrolla y precipita en la interface entre el alcohol y agua. Se puede apreciar en las imgenes de resultados que existe en suspensin una sustancia de tonalidad blanca, esta sustancia es el ADN de cebolla. Para la extraccin de ADN de kiwi,se preparo una solucin de NaCl, detergente y agua destilada, esta se adicion al pur de kiwi previamente preparado. El Detergente as como la solucin de NaCl sirvieron para romper la membrana celular y liberar el contenido de esta, con ayuda de calor se propicio la desnaturalizacin del contenido celular y la solubilizacin del ADN, rompiendose los puentes de hidrogeno de la estructura de ADN del kiwi, para despus al enfriar. Despues se le agregara, alcohol frio,el cual se utiliza para precipitar el ADN del kiwi el cual es soluble en agua pero en alcohol se desenrolla y precipita en la interface entre el alcohol y agua. Se puede apreciar en las imgenes de los resultados que existe en la fase superior una suspensin de tonalidad blanca, esta sustancia es el ADN del kiwi. Conclusiones. Se realiz la extraccin de ADN de Cebolla y Kiwi utilizando una solucin de sal y jabn para romper la membrana nuclear y el ncleo celular. La practica gnero al estudiante un inters mayor con respecto a la estructura de ADN en vegetales y frutas. Asimismo la practica ayudo a completar los conocimientos relacionados a cidos nucleicos, adems de retomar los conceptos adquiridos anteriormente con el aprendizaje de desnaturalizacin y purificacin, as mismo aporto los conocimientos

para realizar extraccin de ADN de manera sencilla y practica. En la extraccin del ADN de la cebolla se sigui un mtodo distinto a la extraccin del ADN del kiwi puesto que dentro de la cebolla se encuentra la clula vegetal que contiene una membrana plasmtica que posee una bicapa lipdica, por ello se utilizo el virtis para ayudar a romper esta membrana, y la papana se utilizo como enzima para proteger al ADN de las protenas en la solucin. En la extraccin de ADN del kiwi, simplemente se filtra para separar los componentes de mayor tamao como son clulas enteras, membranas, y grandes organelos que quedaran en el papel filtro, mientras que en el filtrado contiene protenas, pequeos organelos, ADN y ARN, que tienden a subir en la solucin. La metodologa se llevo a cabo sin errores puesto que final mente se extrajo de manera adecuada el ADN de cebolla y kiwi y se guardo en recipientes de alcohol para su conservacin. Bibliografa. BERG M. JEREMY, TYMOCZKO L. JOHN, STRYER LUBERT, Bioqumica, Revert, Espaa, 2003. CANTAROW ABRAHAM, SCHEPARTZ BERNARD, Bioqumica 4a edicin, editorial Interamericana, S. A., Mxico, 1970. GARRIDO PERTIERRA ARMANDO, MENDOZA OLTRAS CARLOS, VILLAREAL GUTIERREZ CARMEN, Fundamentos de bioqumica estructural, Alfa omega, Mxico, 2005.

NELSON L. DAVID, COX M. MICHAEL, Lehninger, Principios de bioqumica, 3 edicin, Ediciones Omega, Espaa, 2000. VILLEE, C.A., Biologa , 8a ed. Mc Graw-Hill, Mxico, 1996.

WILLIAMS, B., Principios y tcnicas de bioqumica experimental , ed. Omega, Barcelona, 1991.